结直肠癌组织中Tip60蛋白的表达变化及意义

ｍ ｉ ｎ 。蒸馏水冲洗 ， 再将切 片放入 Ｔ Ｂ Ｓ或 Ｐ Ｂ Ｓ缓 冲
液中， 浸泡 ５ ｍ ｉ ｎ ， ３次 ， 取 出切 片 滴 加 ５ ０—１ ０ ０ ｍＬ 的一 抗 （ 兔抗 人 Ｔ ｉ ｐ ６ ０多 克 隆抗 体 １ ： １ ５ ０） 工 作 液 于 组织 上 ， 室 温下孵 育 ３ ０ ｍｉ ｎ ， 滴加 ５ ０～１ ０ ０ ｍＬ Ａ工 作液 （ Ｃ ｈ ｅ ｍ Ｍａ ｔ ｅ Ｅ ｎ ｖ ｉ ｓ ｉ ｏ ｎ＋／ ｎ ｒ ｕ ， ） 于 组织 上 ， 室温 下 孵育 ３ ０ Ｉ ｎ ｉ ｎ 。滴 加 预备 好 的显 色 剂 Ｄ Ａ Ｂ工作 液 ５ ０
采用免疫组化 法检测结直肠癌组织 、 癌旁正 常组 织中 Ｔ ｉ ｐ ６ ０蛋 白表达 ， 经Ｍ ＴＩ ＂ 药 敏试验 检测结 直肠 癌癌 细胞对 阿 糖胞苷 、 氟尿嘧啶 、 丝裂霉 素 、 伊 利替康和奥沙 利铂五种 化疗药物 的敏感性 。结 果 癌旁 正常组织 、 结直肠癌 组织 中Ｔ ｉ ｐ ６ ０蛋 白阳性 表达率分别为 ７ ５ ％、 ２ ５ ％， 两者 比较 ， Ｐ＜０ ． ０ ５ 。Ｔ ｉ ｐ ６ ０蛋 白表达 与结直肠 癌患 者肿瘤 大小 、 临床 分期及分化程 度有关 （ Ｐ均 ＜Ｏ ． ０ ５ ） 。Ｔ ｉ ｐ ６ ０表 达下调使结 直肠癌 对化 疗药物 丝裂 霉素 、 伊立 替康 和奥沙 利铂 的敏
１ ． １ 临床资料 结直肠癌患者 ８ ０例 ， 均 经病理检 查确 诊 。均 行结 直 肠 癌 根 治 术 切 除 标 本 ， 取 癌 组 织 ８ ０例份 ， 相应癌旁 （ 距离癌组织 ５ ｅ ｍ） 组织 ８ ０ 例份。 患者 中男 ４ ５例 、 女３ ５例 ， 年龄 ３ ８— ８ ２ （ ５ ９ ． ８±６ ． ５ ）
岁 。 临床病 理 分 期 （ 国际 抗 癌 联 盟 Ｕ Ｉ Ｃ Ｃ和 美 国肿 瘤联 合 会 Ａ Ｊ Ｃ Ｃ联 合 改 良版 Ｄ ｕ ｋ ｅ Ｓ 分期） ： Ａ期 ８
位于细胞核 ， 免疫组化阳性呈棕黄色信号 ， 阳性细胞 计 分标 准参 照 文献 Ｊ 。分 级 计 分 标１ ２例 ， ｃ期 １ ８例 ， Ｄ期 ４ ２例 ； 淋 巴结转移 ４ ２例 ， 无转移 ３ ８ 例； 高分化腺癌 １ ８ 例， 中分化腺癌 ３ ８ 例， 低分化腺癌 ２ ４例 ； 原发病灶 部位 ： 升结肠 １ ８ 例， 横结肠 １ ２例 ， 降结肠 １ ０例 ， 乙状结肠 ２ ７例 ， 直
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术筛选出的能辅助 Ｔ ａ ｔ 蛋 白对 Ｈ Ｉ Ｖ基因进行调节 的 物质 ， 其相对分子质量为 ６ ０× １ ０ Ｄ ａ ， 在细胞凋亡 、 Ｄ Ｎ Ａ修复及 细胞 信号传 导 中均发 挥重 要作用 Ｊ 。
目前 ， 恶 性肿 瘤 与 Ｔ ｉ ｐ ６ ０基 因突 变 、 转 录及 翻译 改 变 的关 系 已有 大 量 研 究 ， 但结直肠癌组织 中 Ｔ ｉ ｐ ６ ０表 达 与 肿 瘤 化 疗 的 关 系 鲜 见 报 道 。２ ０ １ ２年 ６月 ～ ２ ０ １ ５年 ６月 ， 我 们 观 察 了结 直肠 癌 组 织 中 Ｔ ｉ ｐ ６ ０蛋 白表达 变化 ， 并 探讨 其 意义 。
中图分 类号 ： Ｒ ７ ３ ５ ． ３
文献标志码 ： Ｂ
文章编号 ： １ ０ ０ ２ ． ２ ６ ６ Ｘ（ ２ ０ １ ７ ） ２ ５ － ０ ０ ５ ６ － ０ ３
我 国结 直肠 癌 发 病 率 逐 年 升 高 ， 现 居 恶 性 肿 瘤 发病 率 的 第 四位 ¨ 。Ｔ ｉ ｐ ６ ０蛋 白是 酵 母 双 杂 交 技
肠１ ３例 。
的理论最高药物浓度 ； 经配制各类药物最终的浓度 ： 阿糖胞 苷 ２ ２ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ ， 氟尿 嘧 啶 ３ ２ ０ ｇ ／ Ｌ ， 丝裂 霉 素
２ ． ８ ｍ ｇ ／ Ｌ ， 伊利 替 康 ５ ８ ｍｇ ／ Ｌ ， 奥 沙利 铂 ８ ５ ｍｇ ／ Ｌ ； 均 使 用生 理盐 水 稀 释 为工 作 液 。 Ｍ Ｔ Ｉ ＂ 药敏试验 ： 使 用 ９ ６孔 细胞 培养 板 ， 设 置 实 验孔 、 对 照孔 和空 白孔 ， 每
山东 医药 ２ ０ １ ７年第 ５ ７卷第 ２ ５期
结 直肠癌组织 中 Ｔ ｉ ｐ ６ ０蛋 白 的表 达 变 化 及 意 义
亓 飞
（ 新汶矿业集团有限责任公 司莱芜 中心 医院， 山东莱芜 ２ ７ １ １ ０ ３ ）
摘要 ： 目的 观察结直肠癌 组织 中 Ｔ ｉ ｐ ６ ０蛋 白的表 达变化 ， 并探 讨其意 义。方法 选取 结直肠 癌患者 ８ ０例 ，
１ 资 料 与方 法
１ ０ ０ ｍＬ ， 室温 孵 育 ５—１ ０ ｍｉ ｎ ， 或光 镜下 控制 显 色 。
显 色完 全后 ， 用蒸 馏 水 冲洗终 止显 色 。 苏木精 复 染 。 各 级 乙醇 （ ７ ０ ％ 一１ ０ ０ ％） 脱水 ， 每级 ３ ｍ ｉ ｎ 。取 出切 片放入二 甲苯 ５ ｍ ｉ ｎ ， ３次 。用 封 片 胶 封 片 。Ｔ ｉ ｐ ６ ０
感性提高 （ Ｐ均 ＜ ０ ． ０ ５ ） 。结论 结直肠 癌组织 中 Ｔ ｉ ｐ ６ ０表 达下调 ， Ｔ ｉ ｐ ６ ０可作 为预测结 直肠 癌预 后及化 疗 的生物 学指标 。 关键 词 ： 结直肠癌 ； Ｔ ｉ ｐ ６ ０蛋 白； 药敏试验
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ２ － ２ ６ ６ Ｘ． ２ ０ １ ７ ． ２ ５ ． ０ １ ８
两者 计 分相 乘 ≥１判定 为 阳性 。 １ ． ３ 药 液 配制 、 细 胞 培 养及 Ｍ Ｔ Ｉ ＇ 药 敏试 验 药 物
液 配制 参 照文献 ： 按 照公 式 Ｃ ｍ ａ ｘ＝Ｄ（ ｍｇ ） ／ ５ ０ ０ ０
× ２× １ ０ ｍｇ ／ Ｌ （ 血浆） ， 对药 物 一 次 快 速 静 脉注 射后