Q_SZKJK0019-2019氟苯尼考胶体金检测卡

Q/SZ KJK苏州快捷康生物技术有限公司企业标准Q/AZ KJK0020-2019氟苯尼考胶体金检测卡2019-7-15发布2019-8-15实施苏州快捷康生物技术有限公司发布前言本标准编写依据GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》。

本标准由苏州快捷康生物技术有限公司提出及起草。

本标准主要起草人：盛相国。

氟苯尼考胶体金检测卡1范围本标准规定了氟苯尼考胶体金检测卡的原理、组成及规格、要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输、贮存。

本标准适用于应用胶体金免疫层析反应原理，并采用包括氟苯尼考抗原、氟苯尼考抗体、硝酸纤维素膜、胶体金垫、样品垫、吸水纸、卡壳等相关组件组装而成的氟苯尼考快速检测卡的质量检定。

本产品适用于奶样、禽蛋及水产品（鱼虾蟹、畜禽肉）、家畜、家禽的尿样、组织（肝、肉）饲料中氟苯尼考含量的现场快速检测。

2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T191包装储运图示标志GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备DB34/T1376-2011鸡蛋中氟苯尼考的残留测定高效液相色谱法DB43/T1202-2016饲料中氟苯尼考的测定高效液相色谱法农业部2483号公告-8-2016饲料中氟苯尼考的测定高效液相色谱串联质谱法总局办公厅关于印发食品快速检测方法评价技术规范的通知（食药监办科[2017]43号）GB/T9969-2008工业产品使用说明书总则3原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。

样品中氟苯尼考与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。

通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中氟苯尼考进行定性判定。

4组成及规格试剂盒组成包括外包装盒、铝箔袋（内装胶体金卡、金标微孔、小滴管）、说明书，规格为20或10测试/盒。

5要求5.1原材料本标准所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

以下为胶体金免疫层析快速检测装置的组成部件：5.1.1.氟苯尼考全抗原：偶联比为1:10-1:20（BSA:CL）。

5.1.2.氟苯尼考抗体：有效抗体含量>0.5mg/mL。

5.1.3.样品垫：玻璃纤维素或纸质薄片。

5.1.4.胶体金垫：玻璃纤维素，免疫释放时间<5min，释放效率>80%。

5.1.5.硝酸纤维素膜：孔径为0.45µm，4cm毛细管作用时间≥140s。

5.1.6.吸水纸。

5.1.7.底板。

5.1.8.塑料盒。

5.1.9.塑料滴管。

5.1.9.金标微孔。

5.1.10.提取剂。

5.1.11.稀释液。

5.2外观指标应符合表1规定。

表1外观指标项目指标检测卡外观检测卡组装正确，各组件结合紧密度恰当，层析膜洁净平整。

铝箔袋包装外观袋身印字清晰，袋口熔封严密；项目名称标识明晰并正确；生产批次标识明晰。

试剂盒包装外观标签、批号和生产日期准确无误，内容物应和标签所示数量一致。

5.3性能指标5.3.1.检测限：检出限为0.2µg/kg。

5.3.2.准确度：空白试样测定结果应为阴性，加标质控样品测定结果应为阳性。

5.3.3.灵敏度：≥95%。

5.3.4.特异性：≥85%。

5.3.5.假阴性率：≤5%。

5.3.6.假阳性率：≤15%。

6试验方法6.1外观确认试剂盒是否在有效期内，外观是否符合表1的规定，并与说明书比对各组分是否齐全。

6.2检测6.2.1.样品前处理禽蛋样品：1）将禽蛋中的蛋清取出待测，称取约2g蛋清样本加入到配套的15ml离心管中；2）向离心管中准确加入提取剂(乙酸乙酯)2mL，将瓶塞盖紧密封，用手上下颠倒混匀10-12次（切勿剧烈振荡），静置3分钟；3）用吸管取分层后的上清液1mL到配套5ml离心管中，用氮吹或吹风机吹干，向吹干的5ml离心管中加入0.3ml（配套滴管约10滴）配套稀释液，充分复溶离心管底部及内壁固体残留物，此溶解液即为待检液。

（备注：待检液尽量在30分钟内进行测试）。

组织样品：1）鱼虾蟹、畜禽肉、内脏等去皮、脂肪，用均质器均质样本，取2g去脂肪组织样本，加入到配套的15ml离心管中；2）向离心管中准确加入纯净水和提取剂(乙酸乙酯)各2mL，将瓶塞盖紧密封，用力振荡3分钟，4000rpm离心3分钟（备注：若无离心机设备，将离心管静置30min以上使样本溶液分层）；3）用吸管取分层后的上清液1mL到配套5ml离心管中，用氮吹或吹风机吹干，向吹干的5ml离心管中加入0.3ml（配套滴管约10滴）配套稀释液，充分复溶离心管底部及内壁固体残留物，此溶解液即为待检液。

（备注：待检液尽量在30分钟内进行测试）。

6.2.2.检测步骤1)测试前请完整阅读使用说明书，并将未开封的检测卡和待测液恢复至常温；2)从铝箔袋中取出检测卡/金标微孔/滴管（共三样耗材），水平放置于观察者正面；3）将检测卡膜面朝上平放，用滴管吸取4-5滴（约120µL）待测液于金标微孔中，用配套滴管轻柔吹打30秒，完全溶解金标微孔底部红色物质，水平静置，等待反应2分钟，吸取金标微孔内红色溶液，轻柔吹打10秒后，全部滴加到检测卡加样孔（S）中，加样后开始计时。

4）结果应在5-8分钟时读取，30分钟后判读结果无效。

6.2.3.结果判定通过对比质控线（C线）和检测线（T线）的颜色深浅进行结果判定。

阳性(+)：质控线（C线）显色，若检测线（T线）不出现或出现但颜色浅于质控线（C线），表示试样中含有待测组分且其含量高于检测限，判为阳性。

当检测结果为阳性时，应对结果进行确证。

阴性(-)：质控线（C线）显色，若检测线（T线）颜色深于或等于质控线（C线），表示试样中不含待测组分或其含量低于检测限，判为阴性。

无效：当质控线（C线）不显色时，无论检测线（T线）是否显色，均表示实验结果无效。

6.3性能指标6.3.1.检出限分别添加氟苯尼考标准品至空白组织、空白饲料、空白养殖水、空白牛奶中，使氟苯尼考在其中的含量均分别为0、0.1µg/kg、0.2µg/kg、0.3µg/kg、0.4µg/kg、0.5µg/kg，按照检测步骤进行检验，每个样品测定5次。

结果均显示，氟苯尼考含量为0、0.1µg/kg时，T线颜色深于或等于C线，判定为阴性；而氟苯尼考含量为0.2µg/kg、0.3µg/kg、0.4µg/kg、0.5µg/kg时，T线不出现或出现但颜色浅于质控线C线，判定为阳性，因此检出限为0.2µg/kg。

6.3.2.准确度取空白组织、空白饲料、空白禽蛋、空白奶样样品，每种样品分成三份进行空白试验和加标质控试验：一份保持不变；一份向其中添加氟苯尼考标准品，使其含量等于检出限；一份向其中添加氟苯尼考标准品，使其含量高出检出限，按照检测步骤进行检验，空白试样测定结果应为阴性，加标质控样品测定结果应为阳性。

6.3.3.灵敏度、特异性、假阴性率、假阳性率灵敏度、特异性、假阴性率、假阳性率四个指标根据食品药品监管总局组织制定的《食品快速检测方法评价技术规范》进行评价，具体计算方法参照：快速检测方法性能指标计算表。

7检验规则检验分为出厂检验和型式检验。

7.1出厂检验产品应逐批经公司质检部门检验合格后，并附合格证或合格签章方能出厂。

7.1.1组批与抽样产品按照同一原料、同一工艺、同一生产班次为一个批次，每批不足100盒时，随机抽样2盒；每批大于或等于100盒时，随机抽样比例为2%，作为质检样品。

7.1.2检验项目外观和准确度。

7.1.3判定规则在出厂检验项目中，外观不符合本标准要求的，该批次产品即判为不合格产品，不得出厂；当产品性能指标中有不符合本标准要求的，允许加倍抽样对不合格项进行复检，复检结果仍不合格，则判定该批产品为不合格，禁止出厂。

7.2型式检验7.2.1检验周期型式检验正常情况为每半年进行一次，有下列情况之一也应进行。

a)新产品试制和定型鉴定时；b)正式生产后，如工艺、材料有较大改变，可能影响产品质量时；c)更换主要生产设备时；d)产品停产半年以上，重新恢复生产时；e)国家质量监督部门提出进行型式检验要求时。

7.2.2抽样型式检验应在出厂检验合格产品中随机抽取3盒。

7.2.3检验项目检验项目为本标准的全部项目。

7.2.4判定规则外观指标、性能指标不符合本标准要求时，允许加倍抽样进行复验，复验仍不合格时，该批产品即判为不合格产品。

7.3仲裁当供需双方对产品质量产生异议时，可协商解决或由法定机构按本标准进行仲裁。

8标志、包装、运输、贮存8.1标志产品包装上应清楚标明：产品名称、批号、规格、包装数量、生产日期、保质期、保存条件、生产厂家基本信息，且应符合《GB/T191包装储运图示标志》的要求。

8.2包装包装材料符合国家相关要求，内包装采用铝箔袋进行密封包装，外包装采用纸盒。

包装盒内附使用说明书，说明书的编制应符合《GB/T9969-2008工业产品使用说明书总则》的要求。

8.3运输在运输过程中应防止日晒、雨淋、抛压。

8.4贮存产品在室温下阴凉避光干燥保存。

有效期为18个月。

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