盐酸可乐宁对兔视网膜缺血损伤的保护作用的实验探究

中文摘要盐酸可乐宁对兔视网膜缺血损伤的保护作用的实验研究目的缺血性视网膜损伤是眼科常见的一种临床表现，其病因繁多，如视网膜血管阻塞性疾病一视网膜静脉毛细血管供血不足，糖尿病视网膜病变，不规则动静脉短路，高血压视网膜病变，视网膜新生血管形成，视网膜脱离和玻璃体出血。

此外，玻璃体切割及视网膜脱离手术等可以影响视网膜血流量，因此也可以引起视网膜缺血性损伤。

视网膜组织是属于中枢神经系统的一部分，很多神经系统疾病都伴随有视网膜病变。

近期，有大量研究指出谷氨酸（ｇｌｕｔａｍａｔｅ，Ｇｌｕ）等兴奋性神经递质有很强的兴奋性神经毒性。

兴奋性氨基酸（ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，ＥＡＡｓ）——天门冬氨酸（ａｓｐａｒｔａｔｅ，Ａｓｐ）等在脑缺血过程中的释放，可能参与了低氧脑缺血损伤的机制，而ａ２肾上腺素受体激动剂可以保护在缺血损伤中神经细胞的死亡。

但其保护作用及机制还不是很清楚。

本文通过建立升高眼压致视网膜缺血的动物实验模型，采用兔视网膜缺血前腹腔内注射ｎ２‘肾上腺素受体激动剂——盐酸可乐宁０．５ｍｇ／ｋｇｗｔ，观察了用药组及未用药组的视网膜的结构、功能，及玻璃体的Ｇｌｕ浓度变化，并在缺血后１小时、第１天、第３天的变化并进行比较。

从而探讨了盐酸可乐宁在视网膜缺血损伤的神经保护作用及机制。

方法选取成年健康日本种大耳自家兔２０只４０只眼，将实验动物随机分为Ａ、Ｂ两组，Ａ组为未用药组，Ｂ为用药组即缺血前半小时腹腔内注射盐酸可乐宁０．５ｍｇ／ｋｇｗｔ。

两组兔子均采取右眼为升高眼压视网膜缺血眼，左眼为前房穿刺但无灌注为对照眼，作为对照眼。

缺血前、缺血后进行双眼视网膜电生理检查，缺血后第１天、第３天进行１０×４０倍光镜下视网膜组织病理学检查，并采用高压液相色谱仪进行玻璃体Ｇｌｕ浓度测定。

视网膜电生理ｌ检查采用缺血前、缺血后不同时间段的配对ｔ检验，病理切片及玻璃体Ｇｌｕ浓度的比较采用左右眼阊及Ａ、Ｂ两组闻左右眼的不同的时间段进行组闯比较。

结果１．视网膜电生理检查，ＥＲＧｂ波波幅在Ａ组右眼缺血后与缺血前相比显著下降（Ｐ＜０．０５），虽然在第１、３天略有恢复，但仍显著低于缺血前（Ｐ＜０．０５），而Ｂ组缺血后１小时ＥＲＧｂ波波幅略有下降，与左眼相比有显著统计学差异（Ｐ＜００５），在缺血后第１天，第３天逐渐恢复，且左右眼间无统计学差异（Ｐ＞Ｏ，０５），并且，Ａ、Ｂ两组的右眼的ＥＲｃ南波波幅在缺血后任何时间相比都有显著的的统计学差异（Ｐ＜０．０５）。

３０Ｈｚ闪烁光反应反映的是视锥细胞的功能，即黄斑区的功能。

因本实验视网膜缺血动物模型类似于青光眼，故短暂视网膜缺血（４５分钟）并未明显损害黄斑区的功能，３０Ｈｚ闪烁光反应波幅虽然在两组兔的右眼中在缺血后均略有下降，但与缺血前相比，均无显著的统计学差异（Ｐ＞０．０５）。

２．视网膜病理切片检查，可见在缺血后第１天时，Ａ组右眼视神经纤维层厚度与左眼相比无统计学差异（Ｐ＞０．０５），这可能与早期的水肿有关，光镜检查可见神经纤维层有空泡和裂隙出现。

而内颗粒层，内网状层厚度则明显变薄（Ｐ＜０．０５），神经节细胞数目减少（Ｐ＜０．０５），神经节细胞及内颗粒层细胞排歹Ｕ紊乱。

至缺血后第３天，视网膜的组织病理学损伤更明显（Ｐ＜０．０５）。

而在Ｂ组右眼则可见视网膜病理切片各项观测指标在左右眼间无显著差别（Ｐ＞０．０５）。

此外，Ａ、Ｂ两组的右眼的各项光镜下检查指标（除缺血后１小时神经纤维层厚度）相比可见均有显著的统计学差异（Ｐ＜０．０５）。

３，玻璃体Ｇｌｕ浓度在缺血后第１天，缺血后第３天测定值在Ａ、Ｂ组左右眼中进行比较，可见在Ａ组的右眼玻璃体Ｇｌｕ浓度与左眼相比显著升高硕士学位论文（Ｐ＜０．０５），且在缺血后第３天时升高更明显，这可能与视网膜神经细胞死亡致Ｇｌｕ漏出澍细胞外间隙所致。

而在Ｂ组虽然在缺血后第３天玻璃体Ｇｌｕ浓度貉有嚣寒，理与左蔽攘毙蒡凭显著蒺鬟（Ｐ＞０。

０５），面Ａ、Ｂ覆缓舱右眼玻璃体Ｇｉｕ浓度相比在缺血后第１，３天时相比，均有显著的统计学差异（Ｐ＜０．０５）。

结论１．ｎ２鬻上腺索受体激动齐ｊ——盐酸冒乐宁可酴在急性缺盘损伤中保护税鼹膜结搀，表现为减轻稷羼膜内层豹撰痿——降低缺盘所致戆内鬏粒层，内丛状层、神经节纤维层厚度的变薄，减少神经节细胞的死亡。

２．ｏ２肾上腺素受体激动剂——盐酸可乐宁可以保护视网膜的功能，表璇为可保存ＥＲＧｂ波波幅。

同时，升离鼹压所致静税网膜缺血动物模型对３０Ｈｚ视网膜焖烁必反应熬渡摄无明显影确，郄对黄褒区的功戆无织显损伤。

３．缺血所致的视网膜结构损伤与兴奋性神经递质ＧＩｕ的释放有关，而８２驽上腺素受体激动帮——盐酸可乐宁可以通过降低ＧＩｕ的释放，阻断这耪兴奋性毒性损伤。

关键词盐酸可乐宁；兔视网膜；缺血：谷氨酸；电生理硕士学位论文ＴｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｆＣｌｏｎｉｄｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ’ＳＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅＲａｂｂｉｔＲｅｔｉｎａｌＩｓｃｈｅｍｉｅＩｎｓｕｌｔｓＡＢＳＴＲＡＣＴＰｕｒｐｏｓｅＲｅｔｉｎａｌｉｓｃｈｅｍｉｃｉｎｓｕｌｔｉｓｏｎｅｏｆｃｏｎ－ｕｎｏｎｏｐｈｔｈａｌｍｉｃｃｌｉｎｉｃｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅｒｅａｒｅｍａｎｙｃａｕｓｅｓ，ｓｕｃｈａｓｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｉｅｓ，ｖｅｎｏｕｓｃａｐｉｌｌａｒｙｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｃｙ，ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ；ａｎｏｍａｌｏｕｓｏｃｃｕｌａｒｓｈｕｎｔｓ，ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ｒｅｔｉｎａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｆｉｏｎ，ｒｅｔｉｎａｌｄｅｔａｔｃｈｍｅｎｔａｎｄｖｉｔｒｅｏｕｓｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ，ａｎｄＳＯｏｎ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｖｉｔｒｅｃｔｏｍｙａｎｄｒｅｔｉｎａｌｄｅｔａｃｈｍｅｎｔｓｕｒｇｅｒｙ，ｗｈｉｃｈＣａｎｒｅｄｕｃｅｒｅｔｉｎａｌｂｌｏｏｄｆｌｏｗ，Ｃａｎｒｅｓｕｌｔｉｎｒｅｔｉｎａｌｉｓｃｈｅｍｉｃｉｎｓｕｌｔ．Ｔｈｅｒｅｔｉｎａｉｓｐａｒｔｏｆｔｈｅｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍ（ＣＮＳ）ａｎｄｍａｎｙｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌｄｉｓｅａｓｅｓａｃｃｏｍｐａｎｙｗｉｔｈｒｅｔｉｎａｌｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，ｅｘｐｒｉｍｅｎｔａｌｄａｔａｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔｅｘｃｉｔａｔｏｒｙａｍｉｎｏａｃｉｄｓ（ＥＡＡｓ）一目ｕｔａｍａｔｅ（Ｇｌｕ）ｃａｌｌ．ｔｒｉｇｇｅｒｅｘｃｉｔｏｔｏｘｉｃｉｎｓｕｌｔ．ＥＡＡｓｒｅｌｅａｓｅｄｄｕｒｉｎｇｂｒａｉｎｉｓｃｈｅｍｉａ，ｗｈｉｃｈｍａｙｂｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｈｙｐｏｘｉｃ—ｉｓｃｈｅｍｉｃｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｓｏｍｅｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓａｌｓｏｆｉｎｄｔｈａｔＥＡＡｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｒｅｔｉｎａｌｉｓｃｈｅｍｉａｉｎｓｕｌｔ，ａｎｄｏ２・ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒａｇｏｎｉｓｔｓａｒｅｎｅｒｕｒｏｐｒｅｔｅｃｔｉｖｅｉｎｉｓｃｈｅｍｉｃｉｎｓｕｌｔ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆ。

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ａｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅｒｅａｌｅｇｒａｄｕａｌｒｅｃｏｖｅｒｙｌｄａｙａｎｄ３ｄａｙａｆｔｅｒｉｓｃｈｅｍｉａ，ｔｈｅａｍｐｌｉｔｕｄｅｉｓｓｔｉｌｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｂｅｆｏｒｅｉｓｃｈｅｍｉａ．Ｔｈｅｒｅｉｓｒｉｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆｂ－ｗａｖｅａｍｐｌｉｔｕｄｅｉｎｒｉｇｈｔｅｙｅｓｅｘｃｅｐｔｔｈｏｕｒａｆｔｅｒｉｓｃｈｅｒｎｉａｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｌｅｆｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅａｍｐｌｉｔｕｄｅｏｆ３０ＨｚｆｌｉｃｋｅｒＥＲＧｓｄｉｄｎ’ｔｅｙｅｓｉｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｉｎｂｏｔｈｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５），ａｌｔｈｏｕ馥ｉｔｈａｓａｍｉｌｄｒｅｄｕｃｔｉｏｎａｆｔｅｒｉｓｃｈｅｍｉａ．２．Ｒｅｔｉｎａｌｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｓｅｃｔｉｏｎｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｓｈｏｗｉｎｎｅｒｎｕｃｌｅａｒｌａｙｅｒ，ｉｎｎｅｒｐｌｅｘｉｆｏｒｍｌａｙｅｒａｎｄｇａｎｇｌｉｏｎｆｉｂｅｒｌａｙｅｒｂｅｃａｍｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｔｈｉｎｎｅｒ１ｄａｙａｎｄ３ｄａｙａｆｔｅｒｉｓｃｈｅｍｉａｔｈａｎｔｈｏｓｅｂｅｆｏｒｅｉｓｃｈｅｍｉａ（Ｐ＜ｏ。