2021届 一轮复习 人教版 微生物的培养与应用 作业

课时作业37微生物的培养与应用
1．(15分)(临川模拟)牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。

国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个。

以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

分析回答：
(1)图中步骤①称为巴氏消毒法。

步骤②是梯度稀释。

(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源和维生素。

进行步骤③操作时，应选用下列中的哪种工具？B。

为了避免杂菌污染，此步骤应在酒精灯火焰附近进行。

(3)为了判断牛肉膏蛋白胨培养基制作是否合格，应该将一个未接种的培养基与接种后的培养基共同培养。

解析：(1)题图中步骤①对牛奶进行消毒采用了80 ℃、15 min 恒温水浴加热，这种消毒法称为巴氏消毒法。

根据题图提供的信息可知，步骤②是系列稀释或梯度稀释。

(2)微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，有的微生物还需要特殊的营养物质，如生长因子和维生素等，蛋白胨主要为微生物提供碳源、氮源和维生素。

进行步骤③操作后需培养计数，因此该接种操作的方法是稀释涂布平板法，应选用B(涂布器)作为接种工具。

为了避免杂菌污染，步骤③应在酒精灯火焰附近进行。

(3)为了判断牛肉膏蛋白胨培养基制作是否合格，应该将一个未接种的培养基作为对照组，与接种后的培养基共同培养。

2．(15分)(深圳模拟)一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。

为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。

(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。

现有1 L土壤浸出液，用无菌吸管吸取1 mL至盛有9 mL 无菌水的试管中，依次稀释至103倍。

各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液中菌体数为5.6×108。

(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离出目的菌，上述培养基的特点是在无氮培养基中添加了该除草剂。

(3)接种技术的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。

接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是培养基中缺少这些细菌可利用的氮源或有氧条件抑制了这
些细菌的生长。

(4)在培养基上形成的菌落中，无透明圈菌落利用的氮源主要是氮气，有透明圈菌落利用的氮源主要是该除草剂，据此可筛选出目的菌。

实验结果如图显示的A～E五种菌株中，E是最理想菌株。

解析：(1)根据稀释涂布平板法对微生物计数的计算公式：每毫升原土壤浸出液中菌体数＝(C÷V)×M＝56÷0.1×103＝5.6×105，则每升原土壤浸出液中菌体数为5.6×108。

(2)该除草剂是含氮元素的有机物，可以为微生物提供氮源，因此选育能降解该除草剂的细菌应使用以该除草剂为唯一氮源(无氮培养基中添加了该除草剂)的培养基作为选择培养基。

(3)微生物接种技术的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。

平板划线法接种是通过连续划线将微生物稀释分散到培养基的表面，以获得单细胞菌落。

由于培养基以该除草剂为唯一氮源，因此不能降解该除草剂的微生物将不能生长。

(4)有些自生固氮微生物可以利用大气中的氮气作为氮源，因此可以在该培养基上生长，但不能降解该除草剂，因此菌落周围不出现透明圈。

周围有透明圈的菌落能够降解该除草剂，并且降解该除草剂的能力越强，菌落周围出现的透明圈就越大。

3．(15分)大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌，请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题：
(1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时，通常将样品进行一系列的梯度稀释，将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，然后记录菌落数量，这种方法称为稀释涂布平板法。

判断下面所示的4个菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是D。

(2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组？需要(填“需要”或“不需要”)，其原因是需要判断培养基是否被杂菌污染(灭菌是否合格)，对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行灭菌(填“消毒”或“灭菌”)处理；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能破坏它的DNA的结构。

(4)检测大肠杆菌实验结束后，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理才能丢弃，以防止培养物的扩散。

解析：(1)D中菌落的分布情况为平板划线法所得。

(2)为判断培养基灭菌是否合格，本实验需要设置对照。

要判断固体培养基是否被污染，可将未接种的培养基在适宜的温度下放置一段时间，若发现有菌落产生，则说明培养基已被污染。

(3)消毒是指使用较温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。

灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

对培养基和培养器皿进行灭菌处理，操作者的双手需要进行清洗和用酒精消毒。

(4)为防止培养物的扩散，对于使用过的培养基及其培养物必须
经过灭菌处理才能丢弃。

4．(15分)(桂林调研)有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少品种对人、畜的毒性很强，人误食后如不及时医治就会危及生命，某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。

请回答下列问题：
(1)为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及水和无机盐等的选择培养基上添加有机磷农药进行选择培养。

(2)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜)，观察实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物丙(填“甲”“乙”或“丙”)作为菌种进行后续培养，理由是微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强。

(3)制备固体培养基的基本步骤是计算→称量→溶化→分装→加棉塞→包扎→高压蒸汽灭菌→倒平板。

(4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。

解析：(1)微生物生长所需要的营养一般包括水、无机盐、碳源和氮源。

因筛选能降解有机磷农药的微生物，故培养基中需添加适量的有机磷农药。

(2)从观察实验开始到微生物停止生长，丙所用时间最短，说明其对有机磷农药的降解能力较甲、乙强。

(3)制备固体培养基的基本步骤是计算→称量→溶化→分装→加棉塞→包扎→高压蒸汽灭菌→倒平板。

(4)菌体数测定可通过显微镜利用血细胞计数板直接计数，也可以利用稀释涂布平板法统计活菌数量。