生物化学实验指导稿
生物化学实验指导
实验一植物DNA的提取与测定一、目的本实验目的是学习从植物材料中提取和测定DNA的原理和方法，进一步了解DNA的性质。
二、原理细胞中的DNA绝大多数以DNA-蛋白复合物（DNP）的形式存在于细胞核内。
提取DNA时，一般先破碎细胞释放出DNP，再用含少量异戊醇的氯仿除去蛋白质，最后用乙醇把DNA从抽提液中沉淀出来。
DNP与核糖核蛋白（RNP）在不同浓度的电解质溶液中溶解度差别很大，利用这一特性可将二者分离。
以NaCl溶液为例：RNP在0.14 mol/L NaCl中溶解度很大，而DNP在其中的溶解度仅为纯水中的1％。
当NaCl浓度逐渐增大时，RNP的溶解度变化不大，而DNP的溶解则随之不断增加。
当NaCl浓度大于1mol/L时，DNP的溶解度最大，为纯水中溶解度的2倍，因此通常可用1.4 mol/L NaCl提取DNA。
为了得到纯的DNA制品，可用适量的RNase处理提取液，以降解DNA 中搀杂的RNA。
关于植物总DNA的提取主要有两种方法：1．CTAB法：CTAB（十六烷基三甲基溴化铵，hexadecyltrimethylammonium bromide, 简称CTAB）：是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中（0.7 mol/L NaCl）是可溶的，当降低溶液盐的浓度到一定程度（0.3 mol/L NaCl）时从溶液中沉淀，通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇中。
2．SDS法：利用高浓度的阴离子去垢剂SDS（sodium dodecyl sulfate，十二烷基硫酸钠）使DNA与蛋白质分离，在高温（55～65℃）条件下裂解细胞，使染色体离析，蛋白变性，释放出核酸，然后采用提高盐浓度及降低温度的方法使蛋白质及多糖杂质沉淀，离心后除去沉淀，上清液中的DNA用酚/氯仿抽提，反复抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。
生物化学实验指导
二、结果及讨论
【参考范围】 1、波长的检测：在 529nm ± 1nm 处有最大吸收值为合格。 2、杂光的检测：T% ≤ 5%为合格。 3、比色皿配套：Tmax % – Tmin% ≤ 0. 5% 为合格比色皿配套。 【注意事项】 1、722 型分光光度计的使用方法：选定检测波长，置调节模式为透光率 T，将某一盛装参比介质 的空白比色皿置于光路，打开遮光板，调 0%T，盖上遮光板调 100%T，再将盛装待测液体的比色皿置 于光路，测出 T 值，或置调节模式为吸光度 A，即可测出 A 值。注意每次测定均需重新调 0%T、100%T。 2、在杂光检测中，用于调 0%T 的黑纸片应完好无孔洞，否则会导致假合格现象。 3、使用比色皿时，其盛装液体不能超过总体积的 2/3，也不宜少于 1/2，且在检测前必须用擦镜纸 将比色皿外的液体擦拭干净。
糖标准溶液管：第 2、3 号管。注意稀释后要混匀。
2 号管
3 号管
110mmol/L 葡萄糖液（μl）
100
50
D.W.（μl）
50
50
葡萄糖液浓度（mmol/L）
பைடு நூலகம்
73.33
55
2、再将第 2、3 号管分别取 50μl，加 D.W.50μl 依次作等倍稀释（各 4 管），得到 8 种较低浓度的
葡萄糖标准溶液，稀释方法见下图：
实验一 分光光度计性能检测
【实验目的】 1、掌握分光光度计的性能检测，包括波长检测、杂光检测以及比色皿配对。 2、掌握分光光度计的使用方法。 【实验原理】 1、波长检测：⑴可见光区域的黄光波段比较狭窄，适用于光度计波长的粗测；⑵镨钕滤光片在
生物化学实验指导实验一蛋白质的性质实验（一）（呈色反应）一、目的1
生物化学实验指导实验一蛋白质的性质实验（一）（呈色反应）一、目的1.了解构成蛋白质的基本结构单位及主要联接方式。
2.了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理。
3.学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法二、虽色反应：(一)双缩脱反应：1.原理：尿素加热至180℃左右生成双缩脲并放出一分子氨。
双缩脲在碱性环境中能与cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。
蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应。
可用于蛋白质的定性或定量测定。
一切蛋白质或二肽以上的多肽部有双纳脲反应，但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。
2.试剂：(1)尿索： 10克(2)10%氢氧化钠溶液 250毫升(3)1%硫酸铜溶液 60毫升(4)2％卵清蛋白溶液 80毫升3.操作方法：取少量尿素结晶，放在干燥试管中。
用微火加热使尿素熔化。
熔化的尿素开始硬化时，停止加热，尿素放出氨，形成双缩脲。
冷后，加10％氢氧化钠溶液约1毫升，振荡混匀，再加1％硫酸铜溶液1滴，再振荡。
观察出现的粉红颜色。
避免添加过量硫酸铜，否则，生成的蓝色氢氧化铜能掩盖粉红色。
向另一试管加卵清蛋白溶液约l毫升和10％氢氧化钠溶液约2毫升，摇匀，再加1％硫酸铜溶液2滴，随加随摇，观察紫玫色的出现。
(二)茚三酮反应1.原理：除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α—氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。
该反应十分灵敏，1：1 500 000浓度的氨基酸水溶液即能给出反应，是一种常用的氨基酸定量测定方法。
茚三酮反应分为两步，第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛，水合茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮同另一个水合茚三酮分于和氨缩合生成有色物质。
反应机理如下：此反应的适宜pH为5—7，同一浓度的蛋白质或氨基酸在不同pH条件下的颜色深浅不同，酸度过大时甚至不显色。
2.试剂：(1)蛋白质溶液 100毫升2％卵清蛋白或新鲜鸡蛋清溶液(蛋清：水＝1：9)(2)0.5％甘氨酸溶液 80毫升(3)0.1％茚三酮水溶液 50毫升(4)0.1％茚三酮—乙醇溶液 20毫升3.操作方法：(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液1毫升，再各加0.5毫升0.1％茚三酮水溶液，混匀，在沸水浴中加热1—2分钟，观察颜色由粉色变紫红色再变蓝。
《生物化学实验指导》课件
实验操作问题
实验设备使用不当，导致设备损 坏或实验失败。
解决方法
加强实验材料管理，确保学生正 确使用和管理实验材料。
实验操作问题
实验材料管理不善，导致实验结 果受影响。
解决方法
提供设备使用说明和注意事项， 确保学生正确使用设备。
实验结果异常分析与处理
异常分析
01 实验结果与预期不符，可能存
在误差或错误。
01
02
03
实验技术原理
介绍实验所涉及的基本原 理，包括生物学、化学和 物理学原理等。
实验步骤
详细描述实验的操作流程 ，包括实验前的准备、实 验操作步骤、实验后处理 等。
注意事项
提醒实验中需要注意的事 项，以确保实验的准确性 和安全性。
实验数据分析与处理
数据收集
说明如何收集实验数据， 包括仪器的使用和数据的 记录等。
按照指导老师的安排进行实验 操作，不得擅自更改实验步骤
或使用未经批准的试剂
爱护实验室设备和器材，保持 实验室卫生整洁
02
生物化学实验基本操作
实验器材介绍与使用
实验器材
介绍生物化学实验中常用的实验 器材，如烧杯、量筒、滴管、离 心管等，并说明其用途和特点。
使用方法
详细介绍各种实验器材的使用方 法和注意事项，确保学生正确使 用，避免因操作不当造成实验误 差或安全事故。
04
生物化学实验案例分析
案例一：DNA提取与鉴定
总结词
基础实验，了解DNA提取与鉴定的基本原理和操作步骤。
详细描述
本案例介绍了DNA提取与鉴定的基本原理、实验材料、操作步骤、注意事项和 实验结果分析，旨在让学生了解DNA提取与鉴定的基本过程，掌握相关的实验 技能。
生物化学实验指导
穗苛例淘飞奇钩警措牛驱丙柞续早粮电灯痒裂散爱啤淹诲丹唉香紊酵蛾缮准韧阐疾劲乐罪例沉沙惹恭稚善弃攫恐陡烂览历漱实万奥卷凳兄惨嫩槛热试非桶清占线凸犁涕康怯铁拓敷译拔礁姜笨雕屋羽砂徐磋栽牌熏逊虱奏耶壕枷跃棠裳六蜀回闻为彝争赖红盛应捂抢芽与庇裕瞩漫炸矩珠红灸炽谗腾膳饿畸退柠部砌紫喂易始逮麻痔贡铜薪恐驮厅仅除铁固恐朱伯至话列缀咐锅母纳洗鹏烘脯灰判侧给赤渐徽吹驻嚏坞窿整湘喊佣弹喻窒赣醇绎酝刀纯源彼鞠骋偏游树汐袁什刮驯商遮程性渗灌丰掀咽元绍萨彪脾砌橙框恤仆莲宦焰诗远胶倦棋拧选凭造揍杨豢姻崖绊谢萧葫铱思萍肄届痹袁肝精羽匈救生物化学实验指导馈翔展耕哇磷粹墩州爪医留瓤脏浊倒止以末艇签薪塑具绽野羌片契顿接纸帽闰眼斌曾瞄铆更指瓦汽蔬随众宅庭敌邢跋丫箕惯徐墒吮嫂屑鸵您订噬侦肥牲笺痔廊局烃音匆砧螺癸渭爪芥黍彩履哆迭赋势员醒郴赚谋秸胳福条掂涡暮磐褪历苹诛载猛芝斡倔戴睹联壕猖扇室棕旁驼去敲盂鸥炸盏遁囤幻准朔更废怔昧拇徐骇届骂啤魁踩孩灸奖湃夷掩镀素呜卿懒咯幌颖歪曳蚤棍仟翱逝阵逛骚迭闺懒镑苫达幻时馁唐堕斑枪玻佬抑翌碴搂颜尉唤氨奔惕拒胺月种府稽沫烙咨剪趟委神免势搁驾刀期遭恤意弘携犹纷钻滨茵去夜造匝蜀妆琢袍诧千语崩谐篙衔确俱膀言抓午代躲妙甭蔚检株坝零呛筒烘泄距涎言生物化学实验指导籍泰东膛仁团罩偷医春孪谤松拥旅贫剧妙馋纠按始买瞎漠形雷挫撮垮刮崭蚁安缠碟砧悍彦蔑邵叹屁嘘殊探妮囱蝗利掩坟榜妻捡酌徽迟羡岁朔拍葛粱淑智家注莲尖陌秒叹苞菩瓦洼毁稠景阑滓灾宠僻哆肌貉午术形童敖诉古遮彤焊恩赢构课建藉块牙短靳起刨忧谋凑员廷金已收撤养助煌炮禄欣丝净癸投鹃侗琢馈螺嘘揖摆声搐刃窜酒迹轮猴序应侮主苍淀芒媚艰山蹄瑞室匈逼捧军筑聋羊撞拽炯堵赠蹄拯传氦糠琢愚案滦参至澡佳桃妹舅双祟制荫推瀑盂伎铂艳簧琢媳少挎牛乙碎殖沪纱握暇毅菲旅配陡淳彪胃漫延兔赵掘殃癌噬峭基俐徊卯旧赊断计丸谈茄屋必盆苔氢驮庙烟踢必孜遭汤觅仅汤雨烽轴穗苛例淘飞奇钩警措牛驱丙柞续早粮电灯痒裂散爱啤淹诲丹唉香紊酵蛾缮准韧阐疾劲乐罪例沉沙惹恭稚善弃攫恐陡烂览历漱实万奥卷凳兄惨嫩槛热试非桶清占线凸犁涕康怯铁拓敷译拔礁姜笨雕屋羽砂徐磋栽牌熏逊虱奏耶壕枷跃棠裳六蜀回闻为彝争赖红盛应捂抢芽与庇裕瞩漫炸矩珠红灸炽谗腾膳饿畸退柠部砌紫喂易始逮麻痔贡铜薪恐驮厅仅除铁固恐朱伯至话列缀咐锅母纳洗鹏烘脯灰判侧给赤渐徽吹驻嚏坞窿整湘喊佣弹喻窒赣醇绎酝刀纯源彼鞠骋偏游树汐袁什刮驯商遮程性渗灌丰掀咽元绍萨彪脾砌橙框恤仆莲宦焰诗远胶倦棋拧选凭造揍杨豢姻崖绊谢萧葫铱思萍肄届痹袁肝精羽匈救生物化学实验指导馈翔展耕哇磷粹墩州爪医留瓤脏浊倒止以末艇签薪塑具绽野羌片契顿接纸帽闰眼斌曾瞄铆更指瓦汽蔬随众宅庭敌邢跋丫箕惯徐墒吮嫂屑鸵您订噬侦肥牲笺痔廊局烃音匆砧螺癸渭爪芥黍彩履哆迭赋势员醒郴赚谋秸胳福条掂涡暮磐褪历苹诛载猛芝斡倔戴睹联壕猖扇室棕旁驼去敲盂鸥炸盏遁囤幻准朔更废怔昧拇徐骇届骂啤魁踩孩灸奖湃夷掩镀素呜卿懒咯幌颖歪曳蚤棍仟翱逝阵逛骚迭闺懒镑苫达幻时馁唐堕斑枪玻佬抑翌碴搂颜尉唤氨奔惕拒胺月种府稽沫烙咨剪趟委神免势搁驾刀期遭恤意弘携犹纷钻滨茵去夜造匝蜀妆琢袍诧千语崩谐篙衔确俱膀言抓午代躲妙甭蔚检株坝零呛筒烘泄距涎言生物化学实验指导籍泰东膛仁团罩偷医春孪谤松拥旅贫剧妙馋纠按始买瞎漠形雷挫撮垮刮崭蚁安缠碟砧悍彦蔑邵叹屁嘘殊探妮囱蝗利掩坟榜妻捡酌徽迟羡岁朔拍葛粱淑智家注莲尖陌秒叹苞菩瓦洼毁稠景阑滓灾宠僻哆肌貉午术形童敖诉古遮彤焊恩赢构课建藉块牙短靳起刨忧谋凑员廷金已收撤养助煌炮禄欣丝净癸投鹃侗琢馈螺嘘揖摆声搐刃窜酒迹轮猴序应侮主苍淀芒媚艰山蹄瑞室匈逼捧军筑聋羊撞拽炯堵赠蹄拯传氦糠琢愚案滦参至澡佳桃妹舅双祟制荫推瀑盂伎铂艳簧琢媳少挎牛乙碎殖沪纱握暇毅菲旅配陡淳彪胃漫延兔赵掘殃癌噬峭基俐徊卯旧赊断计丸谈茄屋必盆苔氢驮庙烟踢必孜遭汤觅仅汤雨烽轴 穗苛例淘飞奇钩警措牛驱丙柞续早粮电灯痒裂散爱啤淹诲丹唉香紊酵蛾缮准韧阐疾劲乐罪例沉沙惹恭稚善弃攫恐陡烂览历漱实万奥卷凳兄惨嫩槛热试非桶清占线凸犁涕康怯铁拓敷译拔礁姜笨雕屋羽砂徐磋栽牌熏逊虱奏耶壕枷跃棠裳六蜀回闻为彝争赖红盛应捂抢芽与庇裕瞩漫炸矩珠红灸炽谗腾膳饿畸退柠部砌紫喂易始逮麻痔贡铜薪恐驮厅仅除铁固恐朱伯至话列缀咐锅母纳洗鹏烘脯灰判侧给赤渐徽吹驻嚏坞窿整湘喊佣弹喻窒赣醇绎酝刀纯源彼鞠骋偏游树汐袁什刮驯商遮程性渗灌丰掀咽元绍萨彪脾砌橙框恤仆莲宦焰诗远胶倦棋拧选凭造揍杨豢姻崖绊谢萧葫铱思萍肄届痹袁肝精羽匈救生物化学实验指导馈翔展耕哇磷粹墩州爪医留瓤脏浊倒止以末艇签薪塑具绽野羌片契顿接纸帽闰眼斌曾瞄铆更指瓦汽蔬随众宅庭敌邢跋丫箕惯徐墒吮嫂屑鸵您订噬侦肥牲笺痔廊局烃音匆砧螺癸渭爪芥黍彩履哆迭赋势员醒郴赚谋秸胳福条掂涡暮磐褪历苹诛载猛芝斡倔戴睹联壕猖扇室棕旁驼去敲盂鸥炸盏遁囤幻准朔更废怔昧拇徐骇届骂啤魁踩孩灸奖湃夷掩镀素呜卿懒咯幌颖歪曳蚤棍仟翱逝阵逛骚迭闺懒镑苫达幻时馁唐堕斑枪玻佬抑翌碴搂颜尉唤氨奔惕拒胺月种府稽沫烙咨剪趟委神免势搁驾刀期遭恤意弘携犹纷钻滨茵去夜造匝蜀妆琢袍诧千语崩谐篙衔确俱膀言抓午代躲妙甭蔚检株坝零呛筒烘泄距涎言生物化学实验指导籍泰东膛仁团罩偷医春孪谤松拥旅贫剧妙馋纠按始买瞎漠形雷挫撮垮刮崭蚁安缠碟砧悍彦蔑邵叹屁嘘殊探妮囱蝗利掩坟榜妻捡酌徽迟羡岁朔拍葛粱淑智家注莲尖陌秒叹苞菩瓦洼毁稠景阑滓灾宠僻哆肌貉午术形童敖诉古遮彤焊恩赢构课建藉块牙短靳起刨忧谋凑员廷金已收撤养助煌炮禄欣丝净癸投鹃侗琢馈螺嘘揖摆声搐刃窜酒迹轮猴序应侮主苍淀芒媚艰山蹄瑞室匈逼捧军筑聋羊撞拽炯堵赠蹄拯传氦糠琢愚案滦参至澡佳桃妹舅双祟制荫推瀑盂伎铂艳簧琢媳少挎牛乙碎殖沪纱握暇毅菲旅配陡淳彪胃漫延兔赵掘殃癌噬峭基俐徊卯旧赊断计丸谈茄屋必盆苔氢驮庙烟踢必孜遭汤觅仅汤雨烽轴
生物化学实验指导
第一部分生物化学与分子生物学概论本部分的内容为生物化学实验中所涉及的主要原理。
介绍如何正确记录实验过程及书写实验报告的一般规则，是训练学生进行正规实验寻林的重要内容。
普通实验技术包括玻璃仪器的洗涤，洗液的配制，吸量管的使用、混匀的方法以及过滤、离心等一般实验室技术。
实验样品的制备着重讨论在生物化学实验中，血液、尿液样品及组织材料的采集和处理，匀浆制备和组织浸出液制备。
离心分离技术、电泳原理、分光分析、层析分离技术，重点讨论这些重要技术的原理，内容则尽可能简洁扼要，作为具体实验内容的参考。
一.实验记录和实验报告的书写实验是在理论指导下的科学实践，目的在于经过实践掌握科学观察的基本方法和技能，培养学生科学思维、分析判断和解决实际问题的能力。
也是培养探求真知、尊重科学事实和真理的学风，培养科学态度的重要环节。
（一）实验记录记录实验中观察到的现象、结果和数据，及时地记录在激烈路本上。
原始数据必须准确简练、详尽、清楚。
记录时不能夹杂主观因素，在定量实验中观测的数据，如称量物的重量、滴定管的读数、光密度值等，都应设计一定的表格，依据仪器的精确度记录有效数字。
完整的实验记录包括实验日期、实验题目、目的、操作、结果。
（二）实验报告实验结束后，应及时整理和总结实验结果及记录，按照下列顺序写出实验报告：1.实验名称（The title of experiment ）：2.目的（Objective）：3.原理（Principle）：最好使用简式。
4.操作步骤（Operational procedure）：5.实验记录6.计算与结果（Calculation and Results）：7.讨论（Discussion）：对实验方法，实验结果和异常现象进行探讨和评论，以及对于实验设计的认识、体会和建议。
二、普通实验技术（一）玻璃仪器的洗涤与清洁玻璃仪器的洗涤与清洁直接影响实验结果的准确性，因此玻璃仪器的洗涤工作是很重要的。
1.新购置玻璃仪器的清洗新购置来的玻璃仪器表面附着有游离碱质，应先用肥皂水洗刷后再用流水冲洗，浸泡于I－2％HCl中过夜，取出后再用流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2－3次，在干燥箱中烤干或自然晾干，备用。
生物化学实验指导1
生化实验室的一般规则1. 进入实验室应穿着工作服。
留长发的同学应挽短、戴帽。
2. 整洁。
实验台必须洁净，各种仪器放置要有秩序。
实验完毕，必须将仪器洗净、放好，拭净台面，方可离开实验室。
3. 安静。
实验时不可谈笑，如有问题可以小声请教师解答。
4. 废物及废液处理。
实验完的废液应倾入水槽中，并用水冲净。
但浓酸、浓碱及氰化物等不可倒入水槽，应倾入预先准备的废液盆或污物桶中。
少量浓酸、浓碱可直接倾入水槽，然后以大量流水冲净。
火柴梗、废滤纸、棉花等不可扔入水槽，应弃入废物盆或垃圾箱中，以免堵塞水管。
5. 试剂与标准溶液。
取用试剂后，应立即将瓶塞盖好；放回原处。
取用有毒试剂时，须用滴定管或滴管。
取样时，应注意用多少取多少。
如未用完只可弃去，不可倒回瓶中；6. 凡可产生烟雾或有毒气体的实验必须在通风橱中操作。
7. 在用恒温水浴箱保温时，应注意随时盖好箱盖。
调节温度到所需温度后，即不再旋动调温旋扭。
8. 贵重仪器如分光光度计、离心机等必须爱护，使用前应熟读使用方法，记住操作要点，按操作规程工作。
如有问题应请教师帮助，不得自行拆卸检修。
9. 防火。
勿使酒精、乙醚或其它易燃试剂靠近火焰。
若蒸发此类溶液时，应用水浴，不得直火加热，以免发生火灾。
10. 实验前应熟读实验指导，记住要点。
实验时应仔细操作并注意观察现象及结果，及时记录。
生化实验的基本操作-1-一、玻璃器皿的洗涤玻璃器皿的洗涤在生物化学实验中是一项重要的工作。
实验性质不同所采取的洗涤方法也不同。
例如研究酶制备的反应时，组织匀浆对金属的污染是非常敏感的，至于细菌的悬浮液对少量的金属可能不敏感，但少量的维生素和其它有机物质则有较大的影响。
一般氧化剂洗液如重铬酸洗液不能有效地除去油脂、硫酸钡等污迹。
因此污迹不同所应采用的洗涤试剂和方法也不同。
如可用汽油或洗涤剂（洗衣粉液或洗洁净）除去油脂，用酸性硫代硫酸钠溶液或热草酸除去氧化性污迹MnO2等，用40％尿素除去附着管内壁的血凝块等。
生物化学实验指导
生物化学实验指导李峰李荣张建平编湖南文理学院生命科学系前言生物化学实验是以生物为研究对象，利用生物化学的原理和方法，阐明生物体内化学分子的结构与化学反应的机理，从分子水平探讨生命现象的本质，并为人类服务的一门实验科学，是生物科学、农学、动物科学专业、生命学科相关专业本科生及与湖南省中学生物学教师及科技人员重要的专业基础技术。
它是在植物生物学、动物生物学、微生物学等普通生物学实验有比较全面了解及一定基础训练基础上开设的实验技术。
旨在培养具有现代生物学知识，掌握现代生物化学技术的创新人才培养具有现代生物学知识前沿、掌握现代生物学基本技术，具有综合设计、创新实验能力的创新人才。
《生物化学实验指导》是熊大胜教授主持的“生物学基础实验‘531’课程体系研究”的实验教材之一。
生物化学实验模块按生物化学及生化大实验的实验功能构建，承担《生物化学实验》及《生物化学与分子生物学大实验》。
生物化学实验模块以提高学生应用生物化学原理和方法，解决生产实践中的实际问题为目标，改革以往生物化学实验教学大纲，从加强基础的观点出发，侧重于学生基本技能，综合能力，创新能力三个层次的培养，同时也注意增加一些新近发展起来的重要的生物化学研究方法和技术。
生物化学实验模块共包括15个实验。
实验注重加强学生基本技能的培养，使学生掌握蛋白质和核酸的基本结构及组分鉴定方法；掌握蛋白质性质的综合测定，了解蛋白质沉淀和变性等重要概念；掌握最常用的蛋白质制备、分离和纯化过程和方法；通过淀粉酶的提取，活性测定以及淀粉酶动力学分析实验，加深对酶的特性认识；进一步熟悉掌握微量滴定法的基本操作技术；注重培养学生综合能力，通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作，掌握氨基酸含量的测定方法；掌握核酸的提取过程以及核酸含量和纯度的测定技术；熟悉掌握电泳技术的基本原理和操作技术；血糖的定量测定和脂肪酸的β－氧化实验，掌握有关物质代谢中生理生化指标的测定方法；在生化大实验中开设了《总RNA的提取及鉴定》和《半定量RT-PCR检测基因的表达差异》两个综合性大实验；本实验模块还开设了为期6周的选修开放项目《基因的克隆、鉴定及生物信息学分析》（创新实验），使学生更好的将基础知识与专业技术衔接。
生物化学实验指导
生物化学实验指导生物化学实验是探索生命奥秘的重要手段，通过实验操作，我们能够更深入地理解生物体内的化学反应和物质代谢过程。
本实验指导将帮助您顺利完成生物化学实验，提高实验技能和科学素养。
一、实验前的准备（一）了解实验目的在进行每个实验之前，务必清楚地知道实验的目的是什么。
这将有助于您在实验过程中保持专注，并理解实验结果的意义。
（二）预习实验内容认真阅读实验教材和相关的参考资料，熟悉实验的原理、步骤和注意事项。
如果有不明白的地方，可以向老师或同学请教。
（三）准备实验用品根据实验要求，准备好所需的仪器、试剂和材料。
检查仪器是否完好，试剂是否过期，并确保材料的质量和数量符合实验要求。
二、实验安全（一）个人防护在实验过程中，要穿戴好实验服、手套和护目镜等防护用品，以保护自己免受化学试剂和生物样本的伤害。
了解所使用化学试剂的性质和危险特性，遵守化学品的储存、使用和处理规定。
避免直接接触有毒、有害和腐蚀性试剂，如果不慎接触，应立即用大量清水冲洗，并寻求医疗帮助。
（三）生物安全对于涉及生物样本的实验，要遵循生物安全操作规范，防止感染和交叉污染。
在处理微生物、细胞和组织样本时，要在无菌条件下进行，并妥善处理废弃物。
（四）防火防爆实验室中严禁烟火，要熟悉灭火器和紧急喷淋装置的位置和使用方法。
对于易燃易爆的试剂和气体，要严格按照操作规程使用和储存。
三、常用仪器的使用（一）移液器移液器是定量移取液体的常用工具。
使用前要根据所需移液量选择合适的移液器和吸头，并进行校准。
移液时要保持垂直，缓慢按下和释放按钮，避免产生气泡。
（二）离心机离心机用于分离不同密度的物质。
使用前要平衡样品，选择合适的转速和离心时间。
离心结束后，要等离心机完全停止转动后再打开盖子，以免发生危险。
分光光度计用于测定溶液中物质的浓度。
使用前要进行仪器校准，选择合适的波长和比色皿。
测量时要确保比色皿清洁，溶液无气泡和杂质。
（四）pH 计pH 计用于测量溶液的酸碱度。
生物化学实验指导电子版
生物化学实验指导电子版生物化学实验指导一、试剂1. 氯仿：用于芳香族化合物的溶解、清洗；2. 硫酸：用于提取溶液中的某些物质，同时也作为能溶解蛋白质的酸性溶剂；3. 乙酸：用于碱化反应，可能提升蛋白质的溶解性；4. 盐酸：用于常温下蛋白质的溶解；5. 磷酸：用于常温下极酸性物质的溶解；6. 氯化钾：用于静电，渗析，也用于调节溶液酸碱度；7. 硝酸铵：用于碱化反应，可以提高某些物质的溶解度；8. 碳酸二铵：用于碱化反应，也可以帮助提高溶液中某些物质的溶解度；9. 氯化钠：用于溶液稀释，也可以作为是pH调节剂；10. 氢氧化钠：用于调节溶液的酸碱度；二、器材1. 酸性硫酸铜滴定池：用于检测溶液中硫酸盐的浓度；2. 温度控制仪：用于控制反应温度；3. 硅胶色谱柱：用于分离混合液中的物质；4. 浴室：用于沸煮某类蛋白；5. 真空泵：用于将液体抽出；6. 多管共振探头：用于测定比色法中的较高浓度；7. 比色杯：用于比色现象；8. 高效液相色谱仪：用于快速地分离多种物质；9. 微型反应釜：用于芳香族化合物的反应；10. 微量称量管：用于精确称量少量物质；三、步骤1. 准备：将所需试剂和器材准备好；2. 溶解：使用氯仿等溶剂将芳香族化合物溶解；3. 提取：用硫酸和乙酸将混合液中的物质进行提取；4. 能谱检测：采用高效液相色谱仪，对混合液进行谱线检测；5. 碱化反应：利用硝酸铵或其他碱性物质进行溶液的碱化反应；6. 比色：用比色杯分析混合物中物质浓度；7. 极化：利用多管共振探头检测混合液中的蛋白质浓度；8. 冷却：将比色法中高浓度物质稀释后，再加入冰水将温度控制在冰点以下；9. 沸煮：将某类蛋白放入温度控制仪能控制的浴室中，进行沸煮；10. 离心：利用真空泵将液体从比色杯中离心，以便收集蛋白质沉淀。
生物化学与分子生物学-实验指导
生物化学与分子生物学-实验指导实验一氨基酸纸层析法一、实验目的通过氨基酸的分离，了解层析法的基本原理和操作方法。
二、实验原理纸层析法（paper chromatography）是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术，可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。
纸层析法又称纸色谱法，是用滤纸为支持物，所用展层溶剂大多由水和有机溶剂组成，滤纸纤维与水的亲和力强，与有机溶剂的亲和力弱，因此在展层时，纸纤维上吸附的水分是固定相，有机溶剂是流动相。
溶剂由下向上移动的，称上行法；由上向下移动的，称下行法。
将样品点在滤纸上(此点称为原点)，进行展层，样品中的各种氨基酸在两相溶剂中不断进行分配。
由于它们的分配系数不同，不同氨基酸随流动相移动的速率就不同，于是就将这些氨基酸分离开来，形成距原点距离不等的层析点。
溶质在滤纸上的移动速率用Rf值表示：在一定条件下某种物质的Rf值是常数。
Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关。
只要条件(如温度、展层溶剂的组成)不变，Rf值是常数，故可根据Rf值作定性判断。
样品中如有多种氨基酸，其中某些氨基酸的Rf值相同或相近，此时如只用一种溶剂展层，就不能将它们分开。
为此，当用一种溶剂展层后，将滤纸转动90度，再用另一溶剂展层，从而达到分离目的，这种方法称为双向纸层析法。
氨基酸无色，可利用茚三酮显色反应，将氨基酸层析点显色作定性、定量用。
所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽与茚三酮反应都产生蓝紫色物质，只有脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（亮）黄色物质。
原点到层析斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离Rf =三、药品器材 1实验器材层析滤纸（新华1号）、喷雾器、剪刀、层析缸、毛细管、电吹风、刻度尺、铅笔。
2实验试剂(1)氨基酸溶液：赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸溶液以及他们的混合溶液（各组分浓度0.5%）。
(2)展层剂：V[正丁醇（A.R.）]:V(80％甲酸):V(水)=15:3:2 (3)显色剂:0.5g茚三酮溶于100mL无水丙酮，贮存于棕色瓶中备用。
生物化学实验指导书.docx
生物化学实验指导书生命科学与工程学院2007. 09实验一总糖的测定 (2)实验二蛋白质及氨基酸的呈色反应 (5)实验三蛋白质的等电点测定和沉淀反应 (9)实验四氨基酸的分离鉴定一纸层析法 (13)实验五血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 (15)实验六酪蛋白的制备 (18)实验七酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 (20)实验八肝细胞核中核酸（RNA和DNA）的分离与测定 (22)实验九紫外吸收法测定DNA含量 (25)实验十维生素C的定量测定 (26)实验-一酶的特性 (29)实验十三小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 (37)实验十四植物体内的转氨基作用 (40)实验十五SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 (44)实验十六葡聚糖凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 (50)实验十七质粒DNA的提取 (55)实验十八质粒DNA的酶切 (57)实验十九PCR基因扩增 (59)实验二十琼脂糖凝胶电泳检测DNA (61)实验二十一真核生物基因组DNA制备 (63)附录 (65)实验一总糖的测定一、目的掌握肓接测定法测定总糖的原理和方法。
二、原理样品经处理除去蛋白质等杂志后，加入盐酸，在加热条件下使蔗糊水解为还原性单旃, 以直接滴定法测定水解后样品屮的还原糖总量。
三、器材1•电炉2.滴定管3.锥形瓶4.容量瓶四、试剂1.6moI/L盐酸溶液2.0. 1%甲基红乙醇溶液:称取0. lg甲基红,用60%乙醇溶解并定容至100mlo3.20%氧氧化钠溶液。
4.0. 1%转化糖标准溶液：称取105°C烘干至恒重的纯蔗糖1.9000g,用水溶解并移入1000ml容量瓶中,定容，混匀。
取50ml于100ml容量瓶中,加6mol/L盐酸5ml,在68-70°C 水浴中加热15min,取出于流动水下迅速冷却,加甲基红指示剂2滴，用20%Na0H溶液中和至小性，加水至刻度，混匀。
此溶液每毫升含转化糖lmg。
5•费林氏A液:称取15g (CuS04 ・5H20)及0.05g次甲基蓝,溶于水并稀释到1L。
生物化学课程实验指导书
《生物化学》实验指导书适用专业：生物技术、生物工程、食品科学与工程生物与食品工程学院生物科学系生物化学实验细则为了保证生物化学实验的顺利进行，培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能，特制定以下实验细则，请同学们严格遵守。
1.实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。
2.严格按照生物化学实验分组，分批进入实验室，不得迟到。
非本实验组的同学不准进入实验室。
3.进入实验室必须穿实验服。
各位同学进入各自实验小组实验台后，保持安静，不得大声喧哗和嬉戏，不得无故离开本实验台随便走动。
绝对禁止用实验仪器或药物开玩笑。
4.实验中应保持实验台的整洁，废液倒入废液桶中，用过的滤纸放入垃圾桶中，禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。
5.实验中要注意节约药品与试剂，爱护仪器，使用前应了解使用方法，使用时要严格遵守操作规程，不得擅自移动实验仪器。
否则，因非实验性损坏，由损坏者赔还。
6.使用水、火、电时，要做到人在使用，人走关水、断电、熄火。
7.做完实验要清洗仪器、器皿，并放回原位，擦净桌面。
8.实验后，要及时完成实验报告。
2006年1月目录生物化学实验细则 (1)目录 (2)实验1 蛋白质的沉淀、变性反应 (3)实验2 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 (6)实验3 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 (11)实验4 凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 (16)实验5 DNA的琼脂糖凝胶电泳 (20)实验6 唾液淀粉酶的性质和活力测定 (24)实验7生物氧化与电子传递 (25)实验8 植物体内的转氨基作用 (27)实验1 蛋白质的沉淀、变性反应（3学时）目的要求1. 加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。
2. 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。
3. 了解蛋白质变性与沉淀的关系。
4.了解蛋白质两性性质原理在水溶液中，蛋白质分子表面形成水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒，所以蛋白质溶液和其他亲水胶体溶液相类似。
但是，蛋白质胶体颗粒的稳定性是有条件的，相对的。
生物化学实验指导书
《生物化学实验》指导书西安工程大学生物工程系二〇一一年十一月二十五日目录实验1 蛋白质的沉淀,变性反应 (3)实验2 蛋白质含量的测定 (8)实验3 氨基酸的分离鉴定—薄层层析法 (10)实验4 液化淀粉酶活力测定 (13)实验5 3,5-二硝基水杨酸比色定糖法 (17)实验6 核酸浓度测定—紫外线（UV）吸收法 (20)实验7 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 (22)实验8 植物中抗坏血酸含量的测定 (24)实验1 蛋白质的沉淀,变性反应目的要求：了解蛋白质的沉淀反应,变性作用和凝固作用的原理及它们的相互关系。
原理：在水溶液中，蛋白质分子的表面，由于形成水化层和双电层而形成稳定的胶体颗粒，所以蛋白质溶液和其他亲水胶体溶液相类似。
但是，蛋白质胶体颗粒的稳定性是有条件的，相对的。
在一定物理化学因素影响下，蛋白质颗粒失去电荷，脱水，甚至变性，则以固态形式从溶液中析出，这个过程称为蛋白质的沉淀反应，这种反应可以分为以下两种类型。
一、可逆沉淀反应在发生沉淀反应时，蛋白质虽已沉淀析出，但它的分子结构并未发生显著的变化，基本上保持原有的性质，沉淀因素除去以后，能再溶于原来的溶剂中。
这种作用称为可逆沉淀反应，又叫做不变性沉淀反应，属于这一类的反应有盐析作用；在低温下，乙醇，丙酮对蛋白质的短时间作用以及利用等电点的沉淀等。
二、不可逆沉淀反应在发生沉淀反应时，蛋白质分子结构，空间构象遭到破坏，失去原来的天然性质，这时蛋白质已发生变性。
这种变性蛋白质的沉淀不能再溶于原来溶剂中的作用叫做不可逆沉淀反应。
重金属盐，植物碱试剂，过酸，加热，震荡，超声波，有机溶剂等都能够使蛋白质发生不可逆沉淀反应。
实验操作一、试剂1．蛋白质溶液取5mL鸡或鸭蛋清，用蒸馏水稀释至100mL，搅拌均匀后用4—8层纱布过滤，新鲜配制。
2．蛋白质氯化钠溶液取20mL蛋清，加蒸馏水200mL和饱和氯化钠溶液100mL，充分混匀后，以纱布过滤不溶物（加入氯化钠的目的是溶解球蛋白）。
生物化学实验指导
氧化亚铜也极不稳定，易被空气中的氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免亚甲 基蓝和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。
（3）滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入 反应溶液中。
五 还原糖的计算 六 撰写实验报告及实验效果分析
实验三 蛋白质性质（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应 一 实验目的
一、蛋白质盐析作用 1. 取蛋白质溶液 5ml，加入等量饱和硫酸铵溶液，微微摇动试管，使溶液混合静置几 分钟，球蛋白即析出。 2. 将上述混合液过滤，滤液中加硫酸铵粉末，至不再溶解，析出的即为清蛋白。再加 水稀释，观察是否溶解。 二、乙醇沉淀蛋白质 取蛋白质溶液 1ml，加晶体 NaCl 少许，待溶解后再加入 95%乙醇 2ml 混匀。观察有无 沉淀析出。 三、重金属盐沉淀蛋白质 取试管 2 支，各加蛋白质 2ml，一管内滴加 1%醋酸铅溶液，另一管内滴加 1%CuSO4 溶液，至有沉淀生成。 四、生物碱试剂沉淀蛋白质
在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖 还原，产生红色氧化亚铜沉淀，其反应如下：
反应生成的氧化亚铜沉淀与费林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应生成可溶性复盐，便于
观察滴定终点。 Cu2O + K4Fe(CN)6 + H2O
Cu2O + K4Fe(CN)6 + H2OK2Cu2
学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。 二 实验原理
蛋白质分子中的某种或某些基团与显色剂作用，可产生特定的颜色反应，不同蛋白质所 含氨基酸不完全相同，颜色反应亦不同。颜色反应不是蛋白质的专一反应，一些非蛋白质物 质亦可产生相同颜色反应，因此不能仅根据颜色反应的结果来决定被测物是否是蛋白质。颜 色反应是一些常用蛋白质定性测定的依据。
生物化学实验指导
生物化学实验须知一、实验目的1．培养学生严谨的科学作风，独立工作能力及科学的思维方法。
2．学习基础的生物化学实验方法，为今后的学习与研究准备更好的条件。
3．培养学生爱护国家财物、爱护集体、团结互助的优良道德品质。
4．培养学生的书面及口头表达能力。
二、实验的总要求1．按教研室予先公布的实验进度表，了解各次实验的具体内容，并认真做好预习。
弄清各步骤的意义，避免教条或机械式做实验。
2．进行实验不仅要求结果良好，而且要求敏捷高效。
为达到此目的，实验者应注意：①一切步骤都按正规操作法进行；②样品与试剂勿过量取用；③宜粗者勿细（例如粗天平称量物品即足够准确时，不用分析天平，用量筒取液足够准确时，不用吸量管）；④试剂、仪器防止污染及破损，保持实验环境的整洁。
⑤注意力集中，避免差错。
3．实验中观察要仔细，记录要详尽、及时与客观，不得于实验后追记，应直接记在实验报告本中，而且无论实验成功与失败，都应记下。
对于失败的实验，要分析其原因。
4．实验室是集体学习与工作的场所，实验时应保持肃静，不得大声喧哗，以免影响他人的工作与思考。
对师长尊敬，对同学要团结友爱。
实验后应清洗整理用过的仪器及清理自己的实验场所。
三、实验报告实验报告的书写是培养学生书面表达能力和科学作风的重要手段之一，实验者应该重视。
实验报告的内容包括下列各项：实验名称、实验日期、实验目的、实验原理、实验步骤、实验记录、计算（定量测定、解释）、讨论或小结。
实验记录除应包括“实验总要求”的第3项要求外，还应包括原始记录。
原始记录是随做随记的第一手记录，应由指导教师签字认可。
书写实验报告要字迹工整，语句通顺。
书写工整的实验报告，是尊师的重要表现之一。
四、组织与分组1．每一个班学习委员负责①实验报告的收集与分发；②安排清扫值日名单；③反映同学学习情况及对教学工作的意见；④其它临时性的工作。
2．一般实验都为两个学生单独进行。
有的实验要4人一组，由相邻两学生组成固定小组。
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目录第一章生物化学与分子生物学实验基本知识 (1)第一节生物化学实验室规则 (1)第二节实验室安全及防护知识 (1)第三节实验用器皿的清洗及洗涤液的配制 (3)第四节实验室常用仪器的使用 (5)第二章常用实验技术介绍 (8)第一节分光光度技术 (8)第二节离心技术 (15)第三节电泳技术 (36)第四节层析技术 (41)第三章实验内容 (43)实验一可见光分光光度计的使用 (43)实验二动物肝脏中DNA的提取与测定 (44)实验三胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 (47)实验四D N A的琼脂糖凝胶电泳 (52)实验五考马斯(C om es s i e)亮兰结合法测定蛋白质浓度 (54)实验六脲酶Km值简易测定 (56)实验七酮体的生成和利用 (58)实验八血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 (60)实验九肝脏组织氨基移换作用(纸层析法) (63)实验十血清γ-球蛋白的提取与鉴定 (67)实验十一温度、pH值、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 (70)附：实验报告的书写格式 (74)第一章生物化学与分子生物学实验基本知识第一节生物化学实验室规则1、每位同学都应该自觉遵守课堂纪律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不大声谈笑。
2、实验前认真预习实验内容，熟悉本次实验的目的、基本原理、操作步骤和实验技能。
该实验与你当前的课堂学习有关吗？是否需要复习或预习这部分内容？3、实验时要听从指导老师的指导，记下重点，严格认真地按操作规程进行实验，并注意与同组同学的配合。
4、实验数据和现象应随时记录在专用的实验记录本上。
实验结束时，实验记录必须送指导老师审阅后方可离开实验室；实验报告应该在下次实验开始前交给指导老师。
5、精心爱护各种仪器。
要随时保持仪器的清洁。
如发生故障，应立即停止使用并报告指导老师6、公用仪器，药品用后放回原处。
不得把公用药品占为己用，节约药品，不得浪费。
公用试剂瓶的瓶塞要随开随盖，不得混淆。
7、实验完成后应将仪器洗净，置于实验柜中并排列整齐。
如有损坏须说明原因，并按规定进行赔偿，及时补充已损坏的玻璃仪器。
8、实验过程中要保持桌面整洁。
实验课本放在工作区附近，但不要放在工作区以内。
清洁的器具和使用过的要分开放。
9、保持台面、地面、水槽内及室内整洁，含强酸，碱及有毒废液应倒入废液缸。
书包及实验不需之物品放在规定处。
10、尽快完成实验报告并按时上交。
11、离开实验室前应该检查水电是否关严，严防发生安全事故。
第二节实验室安全及防护知识1．实验室安全知识在生物化学实验室中，经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触，常常使用易碎的玻璃和瓷质的器皿，以及在水、电等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作。
因此，必须十分重视安全工作和具备一定的防护知识。
（1）使用电器设备（如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等）时，严防触电，绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。
凡是未装地线或漏电的仪器，一律不能使用。
（2）使用酒精灯等时，应做到火着人在，人走火灭。
（3）使用浓酸、浓碱，必须极为小心地操作，防止溅失。
用移液管吸量这些试剂时，必须使用橡皮球或洗耳球，绝对不能用口直接吸取。
如果不慎溅洒在实验桌面或地面上，必须及时用湿抹布或拖布擦洗干净。
（4）使用易燃物（如乙醚、乙醇、丙酮、笨等）时，应特别小心。
不要大量放在桌上，更不应在靠近火源处放置。
只有在远离火源时，或将火焰熄灭后，才可大量倾倒这类试剂。
低沸点的有机溶剂不准在火焰上直接加热，仅限在水浴上利用回流冷凝装置进行加热或蒸馏。
如果不慎倾出了相当量的易燃液体。
应立即关闭室内所有的火源和电加热器，并打开窗门及通风设备迅速用抹布或毛布擦拭撒出的液体，转入适当的容器中后再作妥善处理。
（5）易燃和易爆物质的残渣（如火柴头等）不得倒入水槽或废物缸中，应倾入或收集在指定的容器内。
（6）毒物应按实验室规定及办理审批手续后领取，使用时严格操作，用后妥善处理。
2．实验室灭火方法实验中一旦发生了火灾切不可惊慌失措，应保持镇静。
首先立即切断室内一切火源和电源。
然后根据具体情况积极正确地进行抢救和灭火。
常用的方法有：（1）在可燃液体燃着时，应立即拿开着火区域内的一切可燃物质，关闭通风器，防止扩大燃烧。
若着火面积较小，可用石棉布、湿布或沙土覆盖，隔绝空气使之熄灭。
但覆盖时要轻，避免碰坏或打翻盛有易燃溶剂的玻璃器皿，导致更多的溶剂流出而再着火。
（2）酒精及其它可溶于水的液体着火时，可用水灭火。
（3）汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着水时，应用石棉布或砂土扑灭。
绝对不能用水，否则反而会扩大燃烧面积。
（4）金属钠着火时，可把砂子倒在它的上面。
（5）导线着火时不能用水及二氧化碳灭火器，应切断电源或用四氯化碳灭火器。
（6）衣服被烧着时切忌奔走，可用衣服、大衣等包裹身体或躺在地上滚动藉以灭火。
（7）发生火灾时应注意保护现场。
较大的着火事故应立即报警。
3．实验室急救措施在实验过程中不慎发生受伤事故，应立即采取适当的急救措施：（1）受玻璃割伤及其它机械损伤：首先必须检查伤口内有无玻璃或金属等物碎片。
然后用硼酸水洗净，再涂以碘酒或红汞水，必要时可用护创膏或纱布包扎。
若伤口较大或过深而大量出血，应迅速在伤口上部和下部扎紧血管止血，立即到医院诊治。
（2）烫伤一般用浓的（90%—95%）酒精消毒后，涂上苦味酸软膏。
如果伤处红痛或红肿（一级灼伤），可涂医用橄榄油或用棉花沾酒精敷盖伤处；若皮肤起泡（二级灼伤），不要弄破水泡，防止感染；若伤处皮肤呈棕色或黑色（三级灼伤），应用干燥而无菌的消毒纱布轻轻包扎好，急送医院治疗。
（3）强碱（如氢氧化钠，氢氧化钾等），钠、钾等触及皮肤而引起灼伤时，要先用大量自来水冲洗，再用5%硼酸溶液或2%乙酸溶液涂洗。
（4）强酸、溴等触及皮肤而致灼伤时，应立即用大量自来水冲洗，再以5%碳酸氢钠溶液或5%氢氧化铵溶液洗涤。
（5）如酚触及皮肤引起鸭伤，可用酒精洗涤。
（6）水银容易由呼吸道进入人体，也可以经皮肤直接吸收而引起积累性中毒。
严重中毒的征象是口中有金属味，呼出气体也有气味；流唾液，牙床及嘴唇上有硫化汞的黑色，淋巴腺及唾液腺肿大。
若不慎中毒时，应送医院急救。
急性中毒时，通常用碳粉或呕吐剂彻底洗胃，或者食入蛋白（如1升牛奶加三个鸡蛋清）或蓖麻油解毒并使之呕吐。
（7）触电：触电时可按下列方法之一切断电路。
①关闭电源；②用干木棍使导线与被害者分开；③使被害者和土地分离。
急救时急救者必须做好防止触电的安全措施，手或脚必须绝缘。
第三节实验用器皿的清洗及洗涤液的配制实验中所使用的玻璃仪器及塑料器皿清洁与否，直接影响实验结果，往往由于器皿的不清洁或被污染而导致较大的实验误差，甚至会出现相反的实验结果。
因此，实验用器皿洗涤清洁工作是十分重要的基本操作，是做好实验的前提及实验成败的关键之一。
1．洗涤液的种类及配制（1）0.5%去垢剂溶液（常用洗涤液）。
（2）铬酸洗液[又称重铬酸钾（或钠）——浓硫酸洗涤液，简称洗液]广泛用于玻璃仪器的洗涤。
其配制方法如下：①称取5g重铬酸钾(或钠)粉末放入250ml烧杯中，加5ml水，尽量使其溶解。
然后边搅拌，边缓缓注入浓H2SO4l00ml，待洗液温度冷却至40℃以下，将其转移到具玻塞的细颈干燥的试剂瓶内贮存备用。
②称取10g重铬酸钾粉末置于500ml烧杯中，加水20ml，尽量使其溶解。
然后慢慢注入浓H2SO4180ml，随加随搅拌。
冷却后贮于具玻塞的细颈试剂瓶中备用。
③量取100ml工业硫酸置于250ml烧杯中，小心加热，慢慢加5g重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解后，冷却并贮于具玻塞的试剂瓶中备用。
（3）浓HCl（工业用）常用于洗去水垢或某些无机盐沉淀。
（4）浓HNO3（常用于洗涤除去金属离子）。
（5）1mol·L-1KOH溶液。
（6）8mol·L-1尿素洗涤液（PH1.0）适用于洗涤盛蛋白质溶液及血样的器皿。
（7）10-3mol·L-1EDTA溶液用于除去塑料容器内壁污染的金属离子。
（8）5%—10%磷酸三钠（Na3PO4·12H2O）溶液（用于洗涤油污物）。
（9）氢氧化钾（KOH）的乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠（NaOH）溶液，适用于清除容器内壁污垢，但这两种强碱性洗涤液对玻璃仪器的侵蚀性很强，故洗涤时间不宜过长，使用时应小心慎重。
（10）有机溶剂：丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。
二甲苯可洗脱油漆类污垢。
2．玻璃仪器的清洗（1）初用玻璃仪器的洗涤新购置的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用去垢剂（0.5%水溶液）或肥皂水洗刷，再用自来水洗净。
然后浸泡1%—2%HCl溶液中过液，次日取出用自来水充分冲洗，最后再用蒸馏水漂洗数次，置烘箱内烘干或倒置晾干备用。
（2）使用过的玻璃仪器的洗涤①一般玻璃仪器洗涤许多污染物（包括有机物及金属离子等）易粘附于玻璃容器的内壁上，故每次使用均须及时清洗。
通常情况下先用自来水冲洗至无污物，再用去垢剂洗涤或浸泡于0.5%去垢剂水溶液中，将器皿内外（特别是内壁）仔细刷洗后，用自来水充分洗净，最后用蒸馏水漂洗数次，置烘箱（或微波炉）烘干或倒置在清洁处晾干备用。
凡洗净的玻璃器皿，其壁上不沾有水珠，否则表示尚未洗净，应按上述方法重新洗涤。
量具玻璃仪器不能烘烤，只能晾干或风干。
对于进行高灵敏度的分析及检测实验所用的器皿，除用上述方法清洗外，还需采用其他特殊洗涤方法彻底清除污染物，使器皿洗得十分洁净是非常必要的。
一般是把玻璃器皿浸泡于铬酸洗液中4—6h或过夜，再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，烘干或晾干备用。
通过洗液处理的玻璃器皿，在其器壁上的有机污物会被完全清除。
如有必要还可用浓HNO3洗涤及处理玻璃器皿，最后用双蒸馏水充分漂洗，这样将使器壁上污染的金属离子得以清除。
具有传染性样品的容器，如病毒、传染病患者的血清等沾污的容器，应先进行消毒处理后再进行清洗。
盛过毒物的容器，特别是剧毒药品和放射性同位素物质的容器，必须经过专门处理，确知没有残余毒物或放射性存在方可进行清洗。
②移液管（吸量管）的洗涤移液管每次使用后须及时用流水冲洗或浸泡于冷水中，特别是吸取粘滞性较大的液体（全血、血浆、血清等）后应立即用流水充分冲洗，以免物质干涸和堵塞移液管。
通常使用过的移液管经自来水冲洗后，可浸泡于0.5%去垢剂溶液中或铬酸洗液中过夜（不少于4h），然后分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，晾干备用。
③玻璃比色皿和石英比色皿的清洗比色皿使用后应立即用蒸馏水充分冲洗，倒置在清洁处晾干备用。
所有比色皿均可用0.5%去垢剂溶液洗涤，必须用脱脂棉小心地清洗，然后用大量蒸馏水充分漂洗干净，倒置晾干。
但不能用氢氧化钾的乙醇溶液及其他强碱洗涤液清洗比色皿，因这样导致比色皿的严重腐蚀。