【新】2019高考生物二轮复习专题十二教材基础实验考点33观察类实验和鉴定提取类实验学案
老高考适用2023版高考生物二轮总复习专题12实验与探究第1讲基础实验课件
核心考点三
核心考点三 调查模拟类实验
1．比较几种调查类实验 实验名称 调查对象 调查方法
种群密度 的调查
活动范围 标志重 大的动物 捕法
统计方法(计算公式)
初次捕个获体并总标数记N个体数n＝
再次捕获个体数M 重捕中的带标记个体数m
实验名称 调查对象
种群密度 的调查
植物或活 动能力弱
的动物
人类遗传病发病 人类某种
2．(2020·全国卷Ⅱ)下列关于生物学实验的叙述，错误的是 ( B ) A．观察活细胞中的线粒体时，可以用健那绿染液进行染色 B．探究人体红细胞因失水而发生的形态变化时，可用肉眼直接观 察 C．观察细胞中RNA和DNA的分布时，可用吡罗红甲基绿染色剂染 色 D．用细胞融合的方法探究细胞膜流动性时，可用荧光染料标记膜 蛋白
【解析】 马铃薯块茎被捣碎后的提取液中含有蛋白质，而双缩脲 试剂可用来检测蛋白质，A正确；健那绿染液是线粒体专一性活体染色 剂，B错误；酵母菌培养过程中是否产生CO2，可用溴麝香草酚蓝水溶 液检测，观察溶液是否出现由蓝变绿再变黄的变化，C正确；叶绿体色 素能溶解在无水乙醇中，无水Na2CO3具有吸水作用，在95%乙醇溶液 中加入无水Na2CO3可提高乙醇的浓度，D正确。
【解析】 健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料，可 以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色，A正确；红细 胞体积微小，观察其因失水而发生的形态变化需要利用显微镜，B错 误；甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使 DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色，利用甲基绿、吡罗红混合染色 剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布，C正确；细胞膜 主要由磷脂和蛋白质组成，用两种荧光染料分别标记两种细胞的膜蛋白 分子，经过细胞融合后，两种颜色的荧光均匀分布，可以证明细胞膜具 有流动性，D正确。
2019版高考生物专题十二教材基础实验考点33观察类实验和鉴定提取类实验课件
低温诱导染色体加倍
叶绿体色素的提取和 分离
100%
溶解、提取色素
5% 盐酸 8%
营造酸性环境
中DNA与蛋白质分离
探究pH对酶活性的影响
的分布 观察细胞的有丝分裂；低 温诱导染色体加倍
观察DNA和 RNA在细胞中 的分布 死细胞
DNA和RNA的
吡罗红甲基绿
DNA、RNA同时存 在时染色剂要混合使 人的口 腔上皮 用且现配现用
分布
染色剂
细胞 观察线粒体 活细胞 线粒体 健那绿染液
用生理盐水配制健那
绿染液，用显微镜观
察
观察细胞的 减数分裂 低温诱导染 色体加倍 观察细胞的 有丝分裂
染色) 紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞
紫色中央液
活细胞 泡的大小和
原生质层的
位置
2.鉴定提取类实验 实验名称 淀粉的鉴定 试剂 碘液 颜色 蓝色 生物材料 脱色的叶片等 备注
若材料有颜色，
需先脱色
还原糖的鉴定 斐林试剂
砖红色沉淀 苹果或梨匀浆等
现配现用、水
浴加热 需用高倍镜观
脂肪的鉴定
苏丹Ⅲ (或Ⅳ)染液
双缩脲试剂的成分
检测蛋白质
6.常见疑难辨析 (1)在观察类实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除观察类实验外， 还有什么实验中也用到了显微镜呢？ 提示 观察类实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍 镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法定”“探
究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。
二轮复习高中生物实验精品PPT课件
紫色 红色
红色 绿色 红色
蓝绿色
细菌氧化使之褪 色，检测污水中 好氧性细菌
鉴定试剂（鉴定化学反应，是否物质存在）
试剂 斐林试剂 苏丹Ⅲ（Ⅳ）试剂 双缩脲试剂 二苯胺试剂
鉴定物质
颜色变化
还原糖（葡、果） 砖红色
脂肪
橘黄色（红色)
蛋白质
紫色
DNA
蓝色
碘液 重铬酸钾溶液（H+）
淀粉 酒精
蓝色 橙色→灰绿色
不宜选择甜菜、甘蔗等，因为这些材料中主要的糖 类为不具还原性的蔗糖；(淀粉、蔗糖、纤维素 都是非还原性糖。)
②观察叶绿体和细胞质流动时，选择菠菜叶下表皮 稍带叶肉（叶表皮细胞没有叶绿体，而靠近下表 皮的叶肉细胞中含少而较大的叶绿体）或用藓类 （叶片薄、叶绿体大），观察时应选择靠近叶脉 部位细胞（叶脉附近细胞中水含量丰富，细胞质 流动明显）；
控制 得出结论
（消除或平衡掉）
假设——预期——现象——结论
结论分析：结论与预期是否符合？
结论
符合---得到肯定的答案 定性分析 （往往是题目中要证明的）
不符合---得到否定的答案 （与题目中要证明的相反）
定量分析---肯定答案程度,找出变化的规律
（11）结论：2胚芽鞘具有3向光生长特4性
（2）几组对照实验？
低倍镜到高倍
观察细胞质流动
取材、直接制片
镜的转换、熟 正确选择观察 练使用高倍镜、的参照
有丝分裂观察
取材→解离→漂 洗→染色→制片
熟练进行对光、 对焦、调节视 寻找、识别观 野光线的强弱 察目标
观察质壁分离和 复原
取材、制片
等一系列操作 观察、对比
物质的鉴定（实验步骤及其顺序）
2019届高考生物二轮复习实验与探究教案(适用全国)
1.纵观近五年的全国卷高考试题，侧重考查教材基础实验的材料、原理、规律、方法、步骤及相关操作要领等。
对一些生物学问题的初步探究能力也有所考查。
2．多以选择题形式考查教材试剂选用、显色反应、基础实验的共性归纳等。
也会以非选择题形式设计新的背景材料，并结合代谢、遗传、调节等有关知识考查变量的确认及结果结论的预测分析等。
3．备考时，着重从以下两个方面进行复习：(1)针对不同类型的基础实验如物质鉴定、显微观察、模拟调查的相似实验进行比较分析。
(2)通过变量分析掌握实验设计的原理，总结实验步骤设计表述的一般思路及实验评价的方法等。
【知识网络】一、实验设计的基本原则1.科学性原则所谓科学性原则，是指实验的原理要符合科学原理，实验结果的预期有科学依据，实验的各个环节不能偏离生物学基本知识和基本原理，以及其他科学领域的基本原则。
科学性原则具有两个方面的含义：首先，必须保证实验的设计不出现科学性错误；其次，实验设计要具有科学思想和科学方法的因素。
具体地说，科学性原则体现在以下几个方面：实验原理的科学性、实验方法的科学性、实验材料选择的科学性、实验结果处理的科学性及实验结果分析的科学性等。
2．平行重复原则平行重复原则要求控制某种因素的变化强度，观察其对实验结果的影响程度。
任何实验都必须能够重复，在同样条件下重复，实验结果应该一致或相近，实验设计时，可以通过在一组实验中同时处理多个材料体现重复性原则。
3．单一变量原则单一变量原则可使实验中的复杂关系简单化，使结果更准确。
其含义包括：①不论一个实验有几个实验变量，都应做到一个变量对应一个需要观测反应变量；②实验中要尽可能避免无关变量及额外变量的干扰。
这一原则强调实验组和对照组只有一个量是不同的，实验组和对照组的结果差异只能是由这个单一变量导致的，从而证明实验组变量的作用。
因此，在进行实验设计时，要首先确定实验变量并正确设置。
4．对照原则对照原则是中学实验中最常用的原则。
[高考总复习资料]生物二轮复习 考前三个月 专题11 教材基础实验 考点33 观察类实验和鉴定提取类实验
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专题11 教材基础实验考点33 观察类实验和鉴定提取类实验[直击考纲] 能独立完成“知识内容与要求表”所列的实验与探究，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。
考点33 观察类实验和鉴定提取类实验(1)在上述实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除上述实验外，还有什么实验中也用到了显微镜呢？提示上述实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法鉴定”、“探究培养液中酵母菌数量的动态变化”也用到了显微镜。
(2)在哪些实验中用到了盐酸？各起什么作用？提示①“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，质量分数为8%的盐酸的作用：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；同时使染色质中的DNA与蛋白质分离。
②在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”、“低温诱导植物染色体数目变化”的实验中，质量分数为15%的盐酸与体积分数为95%的酒精混合制成解离液，使组织细胞相互分散开来。
③在“探究酶在不同pH下的活性”实验中，盐酸提供酸性环境。
④研究通过激素的调节过程中，斯他林和贝利斯的实验，在盐酸的作用下，小肠黏膜可能产生一种化学物质。
(3)分析下列相关实验中的取材问题。
①“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中能否选用哺乳动物的成熟红细胞？为什么？提示不能。
因为哺乳动物的成熟红细胞无细胞核和细胞器，几乎不含有DNA和RNA。
②能否用观察叶绿体的材料来观察线粒体？为什么？提示不能。
因为叶绿体中的色素的颜色会掩盖线粒体被健那绿染色后的颜色变化。
③在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞？提示呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。
④在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢和植物的雌蕊？提示因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。
高三生物二轮复习实验
专题十二教材实验（1）以上实验除了“观察植物细胞的质壁分离与复原”使用低倍镜即可外，其余均需使用高倍镜。
（2）鉴定类实验中的“脂肪的切片法鉴定”、探究性实验中的“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”都需用显微镜观察。
3．注意取材问题。
如观察有丝分裂应选取根尖分生区细胞；观察质壁分离与复原应选取成熟的植物细胞等。
4.注意问题：（1）观察细胞的有丝分裂或低温诱导染色体加倍时，应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞（长方形的细胞可能是根尖的伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力）；（2）观察细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢和植物的雄蕊，而不宜选用动物的卵巢和植物的雌蕊（雄配子的产生数量远远多于雌配子，更容易观察到减数分裂的细胞）；（3）观察植物细胞的质壁分离与复原应选取成熟的植物细胞（含有大的液泡）。
例1高中生物很多实验需要用到普通光学显微镜，下列现象用高倍显微镜能观察到的是() A．人口腔上皮细胞中的线粒体被甲基绿染成绿色B．小麦种子细胞中的脂肪被苏丹Ⅳ染液染成橘黄色C．紫色洋葱表皮细胞的液泡在质壁分离过程中颜色越来越深D．洋葱根尖分生区细胞的染色体在有丝分裂后期缓慢移向细胞两极例2 下列与实验有关的叙述，正确的是()A．人的口腔上皮细胞经处理后被甲基绿染色，其细胞核呈绿色B．剪取大蒜根尖分生区，经染色在光镜下可见有丝分裂各时期C．叶绿体色素在层析液中的溶解度越高，在滤纸上扩散就越慢D．在光镜的高倍镜下观察新鲜菠菜叶装片，可见叶绿体的结构例3生物实验中常用盐酸处理实验材料，下列说法正确的是()A．盐酸解离根尖的同时也为龙胆紫染色创造酸性环境B．盐酸处理染色质能促进DNA与派洛宁(吡罗红)结合C．盐酸浓度过高会破坏过氧化氢酶的空间结构导致其失活D．盐酸处理细胞有利于健那绿(詹纳斯绿)对线粒体染色A．有丝分裂观察：解离根尖→漂洗→染色→制片→观察B．脂肪鉴定：切取花生子叶薄片→染色→去浮色→制片→观察C．蛋白质鉴定：将双缩脲试剂A液和B液混合→滴加到豆浆样液中→观察D．细胞失水实验：撕取洋葱鳞片叶外表皮→制片→观察→滴加蔗糖溶液→观察例5下列有关实验操作的描述，正确的是()A．鉴定待测样液中的蛋白质时，先加NaOH溶液，振荡后再加CuSO4溶液B．制作细胞的有丝分裂装片时，洋葱根尖解离后直接用龙胆紫溶液染色C．低温诱导染色体加倍实验中，将大蒜根尖制成装片后再进行低温处理D．探究温度对酶活性的影响时，将酶与底物溶液在室温下混合后于不同温度下保温例7(2014•南京模拟)下列科学实验研究中的有关分析正确的是()A．田鼠在被捕捉过一次后更难捕捉，统计的种群密度比实际低B．对培养液中酵母菌进行计数可采用抽样检测法C．某同学决定以校园内池塘为对象进行物种丰富度调查，应在同一水层中取样D．对土壤小动物的物种丰富度进行调查时，可采用标志重捕法例8下列有关调查活动或实验的表述，正确的是()①用甲基绿对线粒体进行染色，可观察到蓝绿色颗粒状的线粒体②纸层析法分离叶绿体中色素实验中，橙黄色带在滤纸条最上边，判断胡萝卜素在层析液中溶解度最大③“观察DNA和RNA在细胞中的分布”和“观察花生子叶细胞中的脂肪颗粒”两个实验都需要显微镜④调查人类色盲遗传病的发病率时，常在患者家系调查并计算发病率⑤CO2可使溴麝香草酚蓝水溶液由黄变绿再变蓝，而酒精可使酸性条件下的重铬酸钾变成灰绿色⑥标志重捕法调查野兔种群密度时，若个别标志物脱落，则计算的种群密度偏高⑦探究温度对淀粉酶活性影响的实验，不能用斐林试剂代替碘液⑧用于观察质壁分离与复原的紫色洋葱表皮细胞同样可用来观察植物细胞有丝分裂A．①⑤⑥⑧B．②③⑥⑦C．②④⑤⑥D．①②⑦⑧注意问题：（1）探究温度（pH）对酶活性的影响时，必须在达到预设的温度（pH）的条件下，再让反应底物与酶接触，避免在未达到预设的温度（pH）时反应底物已与酶接触发生反应，影响实验结果。
2019版高考生物二轮复习 专题十二 教材基础实验 考点34 探究类实验和调查类实验
6
模拟探究细胞表
物质运输的效率(NaOH扩 琼脂块的一致性、NaOH
细胞体积的大小(琼
面积与体积的关
散的体积/整个琼脂块的体 溶液的量、浸泡的时间、
脂块的大小)
系
积)
测量的准确性等
探索生长素类似 不同浓度的生长素
物促进插条生根 类似物
的最适浓度
实验材料的一致性、生长 扦插枝条的生根数量或长
素类似物浓度的准确性、 度
密度
K12课件 12345
解析 20答案
半透膜两侧溶 液的浓度差
漏斗玻璃管液面的 上升高度
半透膜的种类、开 始时的液面高度、 温度等条件
pH、底物量、酶
探究温度对淀粉 不同温度 酶的活性(加碘液后 量、试管的洁净程
酶活性的影响
(至少三种) 溶液颜色的变化) 度、反应时间、操
K12课件
作程序等
5
温度、底物量、酶
探究pH对过
酶的活性(气泡的数量
第一篇 专题十二 教材基础实验
考点34 探究类实验和调查类实验
K12课件
1
栏目 索引
静悟提纲 核心点拨 题组特训
K12课件
2
静悟提纲
1.探究设计类实验操作流程模板
K12课件
3
2.调查类实验一般操作流程模板
Hale Waihona Puke K12课件41.探究类实验
核心点拨
实验名称
自变量
因变量
无关变量
通过模拟实验探 究膜的透性
农田生态系统
汇总法
能量传递效率＝第n＋1 营养级同化的总能量/ 第n营养级同化的总能 量
土壤中小动物类群丰 富度的研究
土壤中小动物
高考生物二轮复习 考前三个月 专题12 常考实验技能 考点35 准确理解应用实验基本原则
讨论：为尽量减少实验的偶然误差，对实验材料的处理应注意： a ． _____________________________________________________ ______________________________________________________； b．_____________________________________________________ ________________________________________________________。
答案 ①透明且密闭 ③充入相同体积的21%O2 ④相同且适宜 (的光照、温度等) 讨论：a.幼苗应生长良好且长势一致 b．进 行平行重复实验(或每组需用多株玉米幼苗进行实验)
3．对照原则 即实验中设立对照组，使实验结果具有说服力。通常，一个实验 分为实验组和对照组。实验组是接受自变量处理的对象组；对照 组是不接受自变量处理的对象组。常见对照类型分为空白对照、 自身对照、条件对照和相互对照。 (1)空白对照：指不做任何实验处理的对象组，其能明白地对比和 衬托出实验组的变化和结果，增强了说服力。
解析 本题中实测光合作用CO2吸收量等于植物光合作用实际 CO2消耗量减去细胞呼吸CO2释放量，测定光合作用强度既可通 过测定CO2吸收量，也可通过测定O2释放量进行计算。
2．平行重复原则 控制某种因素的变化幅度，在同样情况下重复实验，观察其对实 验结果的影响程度，从而揭示事物的本质特征。其目的是使实验 结果或数据更接近真实情况，避免偶然因素对实验的影响。
考点35 准确理解应用实验基本原则
1．科学性原则 包括实验原理、实验材料的选择、实验方法、实验结果处理的科 学性，要有科学的思想和方法作指导。
2019高考生物二轮复习 专题十二 教材基础实验 考点33 观察类实验和鉴定提取类实验学案
考点33 观察类实验和鉴定提取类实验[直击考纲] 1.能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能等进行综合运用。
2.具备验证简单生物学事实的能力，能对实验现象和结果进行分析、解释，并能对收集到的数据进行处理。
3.具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说—演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。
1．观察类实验操作流程模板2．鉴定类实验的操作流程模板1．观察类实验2.鉴定提取类实验3．关注洋葱在实验中的“一材多用”4.辨析有关颜色反应类实验的五种颜色5.常用试剂的种类及作用6.常见疑难辨析(1)在观察类实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除观察类实验外，还有什么实验中也用到了显微镜呢？提示观察类实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法鉴定”“探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。
(2)在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞？提示呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。
(3)在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢或植物的雌蕊？提示因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。
(4)为什么应选取成熟的植物细胞观察质壁分离与复原实验？提示因其含有中央大液泡，易于发生质壁分离与复原的实验现象。
(5)斐林试剂能否用于蛋白质的鉴定？为什么？提示不能，因为用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂B液是0.01 g/mL的CuSO4溶液，两种试剂的本质不同。
斐林试剂的本质是新制的Cu(OH)2，故应将甲液和乙液等量混匀后使用，而双缩脲试剂的本质是碱性条件下的Cu2＋，故应先加A液1 mL造成碱性环境，再加B液4滴摇匀使用。
(6)脂肪的鉴定是否一定要借助显微镜？提示不一定，因为脂肪的鉴定有两个方案，可磨碎后在试管内鉴定，肉眼观察即可，也可做切片借助显微镜观察。
高考生物考前3个月专题复习 专题12 教材基础实验 考点35 观察类实验和鉴定提取类实验课件
(6)制作细胞的有丝分裂装片时，洋葱根尖解离后直接用龙胆紫溶液染色 (2014·山东，4B)( × )
(7)低温诱导染色体加倍实验中，将大蒜根尖制成装片后再进行低温处理 (2014·山东，4C)( × )
答案
(2014·山东，4A)( √ )
(2)还原糖的鉴定实验中隔水加热时，试管中液体的液面应低于烧杯中水
的液面
(2014·江苏，22B)( √ )
(3)还原糖的鉴定实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以便长期保
存备用
(2014·江苏，22D)( × )
答案
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 2 3 45 6 7
(4)在叶绿体色素提取实验中，在95%乙醇中加入无水Na2CO3后可提高
死细胞
染色
改良苯 酚
品红染
洋葱
用显微
镜观察 活或死
多种多 细胞
样的细
细胞
胞
酵母菌细胞、水 绵细胞、叶的保 卫细胞、鱼的红 细胞等
观察叶
无(无 藓类的叶(或菠菜
活细胞 叶绿体
绿体
需染 叶、黑藻叶)
(1)在上述实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除上述实验外，还 有什么实验中也用到了显微镜呢？ 提示 上述实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍 镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法鉴定”、 “探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。
解析
1 2 3 45 6 7
3.(2014·新课标全国Ⅰ，29节选)在观察大蒜根尖细胞有丝分裂的实验 中，常用盐酸酒精混合液处理根尖，用龙胆紫溶液染色，实验中，盐 酸 酒 精 混 合 液 的 作 用 是杀__死__细__胞__，__并__使__细__胞__分__散__开_ ， 龙 胆 紫 溶 液 属 于 _碱__性染料，能够使细胞中的_染__色__体__着色。
2019版高考生物二轮复习课件： 专题十三 实验与探究
尖分生区细胞,不应选择长方形的细胞,因为长方形的细胞是根尖的伸长区或成
熟区的细胞,这些细胞没有分裂能力。
(4)观察细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢或植物的雄蕊,而不宜选
用动物的卵巢或植物的雌蕊,原因是 雄配子产生数量远远多于雌配子的数量 。
(5)观察叶绿体时,若选用菠菜叶,则取稍带些叶肉的下表皮,原因是靠近下表皮的叶肉细 胞中的叶绿体较 大 而且数目较 少 。 (6)观察植物细胞的质壁分离与复原应选用成熟的植物细胞,原因是含有大的 液泡 。 4.掌握物质鉴定类实验应注意的问题 (1)在显色实验(如物质鉴定)中,材料最好不带颜色或颜色较浅,或实验时对有色材料进 行脱色处理。 (2)物质鉴定实验一般不设立对照实验,若需设立对照实验,对照组应加入成分已知的物 质,如验证唾液淀粉酶是蛋白质,对照组可加入稀释的鸡蛋清。鸡蛋清作为鉴定蛋白质的 材料时,因其较黏稠,故使用时需稀释。 (3)可溶性还原糖鉴定中不宜选择甜菜、甘蔗等作为实验材料,因它们主要含蔗糖,蔗糖 为非还原糖。 (4)颜色深浅与所鉴定的物质的含量有关,含量越多,颜色越明显。
教材经典实验常见的实验方法和技术手段
教材经典实验 分离各种细胞器 证明DNA进行半保留复制 分离叶绿体中的色素 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 观察线粒体 探究酵母菌的呼吸方式
实验方法 差速离心 法 密度梯度离心 法 纸层析 法 死体染色法 活体染色 法
对比实验法和产物检测法
赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验 调查土壤中小动物类群的丰富度 估算种群密度(运动能力强的生物) 估算种群密度(运动能力弱的生物)
(3)探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度实验中,所设组别除用不同浓 度的生长素类似物处理外,还要增加一组用蒸馏水处理的空白对照组。 (4)探究培养液中的酵母菌种群数量的动态变化:①从试管中吸出培养液进行 计数之前,要轻轻振荡几次,使酵母菌均匀分布,以确保计数准确,减少误差。 ②该实验不需要设置对照,因为随着时间的延续,酵母菌种群数量的变化,在时 间上形成前后自身对照。③对于压在小方格界线上的酵母菌,应只计数相邻两 边及其顶点的酵母菌。
高中生物二轮复习实验专题观察类实验总结
复习班生物二轮复习 专题三 实验与探究 （一） 观察类实验（6个）一．观察DNA 和RNA 在细胞中的分布1．实验原理(1)甲基绿和吡罗红对DNA 和RNA 的亲和力不同 ――→用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色显示DNA 和RNA 在细胞中的分布(2)盐酸：改变细胞膜的通透性―→加速染色剂进入细胞；使染色质中的DNA 与蛋白质分离―→有利于DNA 与染色剂结合。
2．实验流程4个注意问题(1)选材：口腔上皮细胞、无色的洋葱鳞片叶内表皮细胞，不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞，以防止颜色的干扰。
(2)用缓水流的目的：防止载玻片上的细胞被冲走。
(3)几种试剂在实验中的作用①0.9%的NaCl 溶液(生理盐水)：保持口腔上皮细胞正常形态。
②8%的盐酸：a.改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；b.使染色质中DNA 与蛋白质分离，有利于DNA 与染色剂结合。
③蒸馏水：a.配制染色剂；b.冲洗载玻片。
④吡罗红甲基绿染液：混合使用，且现用现配。
(4)DNA 和RNA 在细胞核和细胞质中均有分布，只是量的不同，故结论中强调“主要”而不能说“只”存在于细胞核或细胞质中。
【即时巩固】(2014·长沙市模拟)下图表示观察DNA和RNA在细胞中的分布实验基本实验步骤，对该实验基本步骤的叙述错误的是()A．①表示制片，首先应在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液B．②表示解离，需要用质量分数8%的盐酸处理烘干后的装片C．③表示用缓水流冲洗，以免影响染色1.实验原理(1)观察叶绿体应选用富含叶绿体的藓类叶片或菠菜叶等。
由于叶绿体本身含有色素，呈绿色，所以不需要染色。
(2)观察线粒体应选用动物或人体细胞，如人口腔上皮细胞。
用健那绿染液染色，健那绿染液是专一性用于线粒体染色的活细胞染料，能将线粒体染成蓝绿色。
2.实验步骤(1)叶绿体的观察：低倍镜观察：在低倍镜下找到叶肉细胞高倍镜观察：在高倍镜下，观察叶绿体的形态和分布情况(2)线粒体观察：制片低倍镜观察：找到口腔上皮细胞高倍镜观察：线粒体呈蓝绿色，细胞质接近无色3.注意点5个(1)观察叶绿体应选用细胞内叶绿体数量较少、体积较大、叶片薄的植物（如苔藓类，黑藻，菠菜下表皮带叶肉细胞）(2)观察线粒体应选择无色细胞如口腔上皮细胞。
(通用版)2019版高考生物二轮复习 专题十二 教材基础实验 考点35 教材中科学史的实验、研究方法及技术学案
考点35 教材中科学史的实验、研究方法及技术1．常见的实验方法2.实验条件的常用控制方法(1)物理方法类(2)化学药剂类灭菌方法：微生物培养的关键在于灭菌，对不同材料灭菌方法不同：培养基用高压蒸汽灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂洗净，擦干后用体积分数为70%的酒精消毒；整个接种过程都在实验室无菌区进行。
3．聚焦“同位素标记法”(1)方法解释也叫同位素示踪法，同位素可用于追踪物质的运行和变化规律。
用示踪元素标记的化合物，其化学性质不会改变。
借助同位素原子以研究有机反应历程的方法。
科学家通过追踪示踪元素标记的化合物，可以弄清化学反应的详细过程。
(2)典例分析①光合作用的暗反应中碳的转移途径：CO2的固定：CO2＋C5―→ 2C3；C3的还原：2C3―→(CH2O)＋H2O＋ C5。
②研究细胞有丝分裂的细胞周期：原理为在处于连续分裂的细胞的分裂期加入用3H标记的胸腺嘧啶，根据胸腺嘧啶被利用的情况，可以确定DNA合成期的起始点和持续时间。
还可用32P和35S分别标记蚕豆根尖并做放射性自显影，以了解分裂间期DNA复制、蛋白质合成的相关情况。
题组一辨析科学史中的科学方法与技术1．(2018·广西一模)下列有关科学家的探索实验的叙述，错误的是( )A．与黑藻相比，水绵更适合用作探究光合作用的材料B．卡尔文利用小球藻，探明了CO2中的碳在光合作用中转化的途径C．孟德尔在分析、总结豌豆的遗传规律时，运用了假说—演绎法D．沃森和克里克研究DNA分子结构时，运用了建构数学模型的方法答案 D解析与黑藻相比，水绵具有螺旋状的叶绿体，更适宜用作探究光合作用的材料，A正确；卡尔文利用小球藻，探明了CO2中的碳在光合作用中先形成三碳化合物，再形成葡萄糖，B 正确；孟德尔发现遗传定律运用了假说—演绎法，其基本步骤：提出问题→作出假说→演绎推理→实验验证→得出结论，C正确；沃森和克里克研究DNA分子结构时，运用了建构物理模型的方法，D错误。
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考点33 观察类实验和鉴定提取类实验
[直击考纲] 1.能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能等进行综合运用。
2.具备验证简单生物学事实的能力，能对实验现象和结果进行分析、解释，并能对收集到的数据进行处理。
3.具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说—演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。
1．观察类实验操作流程模板
2．鉴定类实验的操作流程模板
1．观察类实验
2.鉴定提取类实验
3．关注洋葱在实验中的“一材多用”
4.辨析有关颜色反应类实验的五种颜色
5.常用试剂的种类及作用
6.常见疑难辨析
(1)在观察类实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除观察类实验外，还有什么实验中也用到了显微镜呢？
提示 观察类实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法鉴定”“探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。
(2)在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞？ 提示 呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。
(3)在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢或植物的雌蕊？ 提示 因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。
(4)为什么应选取成熟的植物细胞观察质壁分离与复原实验？ 提示 因其含有中央大液泡，易于发生质壁分离与复原的实验现象。
(5)斐林试剂能否用于蛋白质的鉴定？为什么？
提示 不能，因为用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂B 液是0.01 g/mL 的CuSO 4溶液，两种试剂的本质不同。
斐林试剂的本质是新制的Cu(OH)2，故应将甲液和乙液等量混匀后使用，而双缩脲试剂的本质是碱性条件下的Cu 2＋
，故应先加A 液1 mL 造成碱性环境，再加B 液4滴摇匀使用。
(6)脂肪的鉴定是否一定要借助显微镜？
提示 不一定，因为脂肪的鉴定有两个方案，可磨碎后在试管内鉴定，肉眼观察即可，也可做切片借助显微镜观察。
(7)绿叶中色素的提取和分离有何区别？
提示 前者用无水乙醇提取法，原理是色素能够溶于有机溶剂无水乙醇中；而后者用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析液在滤纸条上扩散得快，反之扩散得慢。
题组一 观察类实验
1．(2018·南京联考)在“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验中，对紫色洋葱鳞片叶外表皮临时装片进行了三次观察和两次处理。
下列有关叙述正确的是( )
A．第一次观察为低倍镜观察，后两次为高倍镜观察
B．第一次处理滴加的液体为清水，第二次滴加的液体为质量浓度为0.3 g/mL的蔗糖溶液C．若将紫色洋葱鳞片叶的外表皮换成内表皮，则不会发生质壁分离
D．紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞中不属于原生质层的有细胞壁、细胞核和细胞液
答案 D
解析“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验中，一般需要进行三次观察，第一次是正常细胞的观察，第二次是质壁分离细胞的观察，第三次是质壁分离复原细胞的观察，三次观察均为低倍镜观察，A错误；第一次处理滴加的液体为质量浓度为0.3 g/mL的蔗糖溶液，观察质壁分离现象，第二次滴加的液体为清水，观察质壁分离复原现象，B错误；紫色洋葱鳞片叶的内表皮细胞也会发生质壁分离，但不含色素，现象不便于观察，C错误。
2．如图表示洋葱根尖细胞有丝分裂装片的制作与观察，下列相关叙述不正确的是( )
A．A过程所用的解离液是以质量分数15%的盐酸和体积分数为95%的酒精配制而成的
B．B过程的主要目的是洗去解离液，防止解离过度
C．在显微镜下可以看到一个细胞连续分裂的过程
D．在低倍镜下找到物像后，可以换用高倍镜继续观察
答案 C
解析解离液是以质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精配制而成的，A正确；B过程为漂洗，其主要目的是洗去解离液，防止解离过度，B正确；在显微镜下看到的每一个细胞都已被杀死，C错误；在低倍镜下找到物像后，可以换用高倍镜进行更大放大倍数的观察，D 正确。
3.下面是用显微镜观察时的几个操作步骤，要把显微镜视野下的标本从下图中的A转为B，其正确的操作步骤是( )
①向右上方移动载玻片②调节反光镜使视野明亮③转动转换器④调节细准焦螺旋⑤调节粗准焦螺旋⑥向左下方移动载玻片
A．①③②④ B．②③④⑥ C．⑥③②④ D．⑥③⑤④
答案 C
解析从题图中可以看出，A图中的细胞比B图中的多而小，说明A图是低倍镜下的图像，B 图是A图左下方的细胞在高倍镜下的图像。
所以应向左下方移动装片，然后转动转换器换成高倍镜，由于高倍镜下视野较暗，可调节反光镜使视野明亮，在高倍镜下调节细准焦螺旋使物像清楚，所以顺序是⑥③②④。
题组二鉴定提取类实验
4．(2018·广东模拟)下列有关组织细胞中化合物鉴定实验的叙述，不正确的是(多选)( ) A．蛋白酶和蛋白质的混合溶液中加入双缩脲试剂后，会产生紫色反应
B．将斐林试剂加入果糖溶液中后，溶液呈现无色，水浴加热后有砖红色沉淀生成
C．脂肪的检测中使用体积分数为50%的酒精是为了溶解组织中的脂肪
D．酵母菌进行有氧呼吸和无氧呼吸的产物都能用酸性重铬酸钾溶液来鉴定
答案BCD
解析蛋白酶本身就是蛋白质，因此用双缩脲试剂鉴定会产生紫色反应，A正确；斐林试剂本身具有蓝色，因此将斐林试剂加入果糖溶液中后，溶液呈现蓝色，B错误；脂肪的检测中滴加50%的酒精溶液是为了洗去浮色，C错误；酸性重铬酸钾溶液只能用于鉴定酒精，酵母菌有氧呼吸不产生酒精，D错误。
5．(2018·扬州模拟)以下关于实验步骤的叙述(试剂、药品的浓度和用量符合要求)，正确的是( )
A．鉴定蛋白质：豆浆→CuSO4溶液→NaOH溶液→观察颜色变化
B．鉴定还原糖：苹果匀浆→CuSO4溶液→NaOH溶液→水浴加热→观察颜色变化
C．提取绿叶中的色素：剪碎绿叶→SiO2＋CaCO3→无水乙醇→研磨→过滤
D．观察植物细胞有丝分裂：制片→解离→漂洗→染色→显微镜观察
答案 C
解析蛋白质的鉴定应先加NaOH溶液，再加CuSO4溶液，A错误；用斐林试剂鉴定还原糖时，应将NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合使用，B错误；提取绿叶中的色素的流程为剪碎绿叶→SiO2＋CaCO3→无水乙醇→研磨→过滤，C正确；观察植物细胞有丝分裂：解离→漂洗→染色→制片→显微镜观察，D错误。
6．(2018·淮安期末)现提供可配制斐林试剂的溶液：甲液(0.1 g·mL－1的NaOH溶液)、乙液(0.05 g·mL－1的CuSO4溶液)以及蒸馏水，如果充分利用上述试剂及必需的实验用具，可灵活性地鉴别出下列哪些物质( )
①葡萄糖②蔗糖③胃蛋白酶④RNA
A．只有① B．①和②
C．①和③ D．②、③和④
答案 C
解析①葡萄糖是还原糖，可以用斐林试剂鉴定，所以用上述试剂可以检测，①正确；②蔗糖是非还原糖，不能用斐林试剂鉴定，②错误；胃蛋白酶是蛋白质，可以用双缩脲试剂鉴定，可以用上述试剂鉴定，但使用时需要将斐林试剂的乙液稀释为质量分数为0.01 g·mL－1，③正确；以上试剂只能鉴定还原糖和蛋白质，而不能鉴定RNA，④错误。