【CN110452982A】乳腺癌循环肿瘤细胞miRNA和EMT标志物联合检测试剂盒及其应用【专利】

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循环miRNA：一种新的癌症诊断和预后的潜在生物标记物

循环miRNA：一种新的癌症诊断和预后的潜在生物标记物miRNA的正常表达调控对于维持细胞机能处于一种稳定状态至关重要。

最近，科学家们发现尽管人体血液中存在大量核糖核酸酶（RNA酶），但在健康人和患者的细胞外血液中均存在着游离的miRNA。

大多数这些循环miRNA被包含于与脂质或脂蛋白复合物之中，如凋亡小体（apoptotic bodies）、微泡（microvesicles）、外来体（exosomes）等，因此在血液中能耐RNA酶，具有良好的稳定性。

癌症患者血液中的循环miRNA有可能成为一种新的潜在生物标志物，用于癌症的诊断和预后。

本篇文章总结了一些在癌症患者中具有诊断、预后及治疗意义的miRNAs，同时期待更多关于循环miRNA分泌和纳入机制的研究Abstract：In the past several years，the importance of microRNA（miRNA）in can-cer cells has been recognized.Proper control of miRNA expression is essential for maintaining a steady state of the cellular machinery.Recently，it was discovered that extracellular miRNAs circulate in the blood of both healthy and diseased patients，although ribonuclease is present in both plasma and serum.Most of the circulating miRNAs are included in lipid or lipoprotein complexes，such as apoptotic bodies，microvesicles，or exosomes，and are highly stable.The existence of circulating mi-RNAs in the blood of cancer patients has raised the possibility that miRNAs may as a novel diagnostic marker.However，the secretory mechanism and biological function，as well as the meaning of the existence of extracellular miRNAs，remain largely unc-ear.In this review，the usefulness of circulating miRNA for cancer diagnosis，progno-sis，and therapeutics were summarized.Furthermore，a mechanism for the secretion and incorporation of miRNA into the cells are expected.Key words：miRNA；Biomarker；Cancer1933年，Ambros[1]等在秀丽隐杆线虫中发现了一种定时调控胚胎后期发育的基因lin-4，它的转录产物是一种非蛋白编码RNA，称为microRNA（miRNA）。

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展循环肿瘤细胞（CTC）检测是指在患者体内检测到的未形成全身转移的单个肿瘤细胞，是肿瘤学在非手术健康筛查中的一种新方法。

目前该技术已被广泛应用于乳腺癌患者的预后评估和治疗监测中。

本文将详细阐述循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展。

一、循环肿瘤细胞检测的方法ICC法是一种通过与CTC表面检测蛋白发生特异反应的免疫染色技术，如使用细胞表面经典肿瘤标志物如上皮细胞抗原（EpCAM），进行免疫染色，来捕获和鉴别CTC。

PCR法是基于甲基化表现芯片组合控制的微流控芯片技术，通过肿瘤细胞分离、分子生物学处理并通过聚合酶链式反应的方法增加敏感性。

1、预后评估一项元分析显示，患者的循环肿瘤细胞阳性率与乳腺癌复发率和生存率密切相关。

另外也发现，治疗初期检测到的循环肿瘤细胞数量多寡与预后有直接相关性。

2、治疗监测一项2019年发表的研究显示，循环肿瘤细胞的检测在治疗监测中有较高的敏感性，该研究以某地区208例乳腺癌患者为研究对象，对分别接受化疗、内分泌治疗和靶向治疗的患者进行了细胞学检测，并分析了循环肿瘤细胞阳性率和客观疗效关系，结果显示在不同治疗阶段循环肿瘤细胞阳性率和治疗效果均存着显著相关性。

3、转移病灶检测循环肿瘤细胞检测也可以作为乳腺癌全身转移病灶的检测工具。

通过选择性的优良表型，如细胞表面上皮细胞抗原，CTC的基本性质和生物学特性订制活动，对于早期乳腺癌患者来说，循环肿瘤细胞检测早期的转移病灶是非常有意义的。

1、特异性问题上皮细胞标记EpCAM在非上皮性肿瘤中表达可能过低，从而影响实验结果。

同时，各种CTC技术所筛选出的CTC互不一致，有些没有想象中的感知强度，也有些CTC另一种或几种检测技术检测不到。

2、药物干扰部分细胞死亡或化疗药物等因素可能导致CTC数量欠缺，从而影响研究的准确性。

因而，对药物本身是否会对CTC的作用、药物的使用时间等因素都需要进行深入的研究。

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展
循环肿瘤细胞是从原发肿瘤中脱落的癌细胞，进入血液循环并迁移到远离原发灶的其他器官。

通过检测CTCs的存在和数量，可以提供乳腺癌的早期诊断、预测预后、指导治疗和监测疗效的重要信息。

目前，乳腺癌患者中CTCs检测的主要方法包括免疫细胞化学染色、流式细胞术、聚合酶链反应和原位杂交等。

这些方法具有各自的优缺点，但可以在不同的检测阶段识别和分离CTCs，并对其进行进一步的分析和研究。

近年来，许多研究表明，在乳腺癌患者中检测到的CTCs与肿瘤的临床特征和预后密切相关。

CTCs的存在和数量与患者的淋巴结转移、肿瘤大小、分子亚型和基因突变等因素相关。

一些研究发现，在治疗前和治疗后检测CTCs的变化可以作为预测患者治疗效果和预后的生物标志物。

除了CTCs的数量，一些研究还对CTCs进行了进一步的分析，包括CTCs的表型、单个细胞基因分析和表观遗传学分析等。

这些研究不仅可以帮助我们了解CTCs的生物学特性，还有助于发现新的治疗靶点和预测患者的治疗反应。

虽然循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究取得了一些进展，但仍然面临着一些挑战。

由于CTCs的数量很少且易被检出，检测的灵敏度还有待提高。

标准化的CTCs检测方法和操作流程尚未建立，不同研究结果之间的比较和验证存在一定的困难。

长期的随访和大样本的临床研究仍然需要进行，以验证CTCs作为预测患者预后和指导治疗的可行性和准确性。

循环肿瘤细胞作为乳腺癌患者的生物标志物，具有重要的临床应用价值。

随着技术的不断发展和研究的深入，循环肿瘤细胞检测有望成为乳腺癌早期诊断和治疗个体化的重要手段。

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展【摘要】循环肿瘤细胞（CTCs）是在肿瘤组织中脱落出来并进入循环系统的肿瘤细胞，其检测技术的发展为乳腺癌患者提供了一种非侵入性的早期诊断和疾病监测手段。

目前，循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中已经取得了一定进展，并且与患者预后密切相关。

通过循环肿瘤细胞的检测，可以帮助医生及时评估患者的疾病状态，指导治疗方案的调整，提高治疗效果。

未来，循环肿瘤细胞检测技术将继续完善并应用于临床实践中，为乳腺癌患者的个体化治疗提供更可靠的依据。

研究人员还需进一步探索其在乳腺癌治疗中的潜在临床意义，并推动该领域的深入发展。

【关键词】循环肿瘤细胞、乳腺癌、检测、应用、研究进展、预后、治疗、临床意义、前景、未来方向、总结。

1. 引言1.1 背景介绍随着生物技术的不断发展，循环肿瘤细胞检测技术得到了不断改进和完善，包括免疫细胞化学检测、PCR扩增检测、蛋白质芯片技术等。

这些技术的出现极大地提高了循环肿瘤细胞的检测灵敏度和特异性，为乳腺癌患者的个体化治疗和预后评估提供了重要依据。

本文将从循环肿瘤细胞的概念和特点、循环肿瘤细胞检测技术的发展、循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用等方面进行探讨，旨在全面了解循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展。

1.2 研究意义乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，对患者的生存率和生活质量造成了严重影响。

目前临床上常用的诊断和治疗方法存在一定局限性，因此急需寻找新的革命性方法来提高乳腺癌患者的诊断和治疗效果。

循环肿瘤细胞是一种新型的肿瘤标志物，可以从患者的血液或骨髓中检测到，具有较高的特异性和灵敏性。

循环肿瘤细胞检测技术的发展对于乳腺癌患者的诊断和治疗具有重要的意义。

通过检测循环肿瘤细胞，可以帮助医生及时发现患者的病情变化，指导临床决策，及时调整治疗方案，提高患者的治疗效果和生存率。

循环肿瘤细胞检测技术还可以用于评估乳腺癌患者的预后和预测治疗效果，为个体化治疗提供依据，减少不必要的治疗和减轻患者的痛苦。

循环肿瘤细胞在乳腺癌中的临床意义及检测方法

一
些研究得出了相似的结论。进一步研究显示，在治疗中的任
意时刻，只要ＣＴＣ的数量增高，无病进展期和总生存期均缩短ＣＴＣ的预后价值要优于肿瘤负荷、疾病表型和当前的成像方法２．２ＣＴＣ在早期乳腺癌中的意义目前已经有一些关于
ＣＴＣ和早期乳腺癌的研究，应用最新的分子生物学技术检测
期；然而，通过检测循环肿瘤细胞，播撒肿瘤细胞发现，转移在癌症的早期就已经发生，循环肿瘤细胞，播撒肿瘤细胞已经在早期乳腺癌患者中被检测到。２检测乳腺癌患者循环肿瘤细胞的Ｉ临床意义２．１ＣＴＣ在转移性乳腺癌中的临床意义乳腺癌是一种
ｂｒｅｓｔａｃａｎｃｅｒ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｓｅｖｅｒｌａｒｅｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｓｕｇｇｅｓｔｔｈａｔｈｅｔｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆＣＴＣｉｎｅａｒｌｙｂｒｅａｓｔｃｎｃａｅｒｍａｙｌｓａｏｓｕｇｇｅｓｔａｐｏｏｒｅｒｐｒｏｎｏｇｓｉｓ．Ａｔｐｒｅｓｅｎｔ，ｔｈｅｄｅｔｅｃｉｔｏｎｍｅｈｏｔｄｓｆｏｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｔｕｍｏｒｃｅｌｌｗｅｒｅｃｏｍｐｏｓｅｄｆｏｅｎｉｒｃｈｍｅｎｔｓｅｐｒａａｉｔｏｎａｎｄａｎｌｙａｓｉｓｉｄｅｎｔｉｆｙｍｅｈｏｔｄｓ．ＣｈｏｏｓｉｎｇａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅｍｅｈｏｔｄｓｔｏｄｅｔｅｃｔｃｉｒｃｕｌａｉｔｎｇｕｍｏｔｒｃｅＨｓｃｏｕｌｄｉｍｐｒｏｖｅｈｅｔｅｆｉｃｉｅｎｃｙｆｏｄｅｔｅｃｉｔｏｎ．Ｅｘｐｌｏｉｒｎｇｔｈｅｒｅｌａｉｔｏｎｂｅｔｗｅｅｎｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｔｕｍｏｒｃｅｌｌａｎｄｂｒｅｓｔａｃａｎｃｅｒｍａｙａｖａｉｌｔｈｅｅｒｌａｙｄｉａｎｏｇｓｉｓａｎｄｅｆｅｃｔｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ．

循环中的微小RNA与肿瘤

循环中的微小RNA与肿瘤循环中的微小RNA（miRNA）是一类非编码的小分子RNA，长度一般在20~25个核苷酸，可以在细胞内或循环系统中发挥重要的生物学功能。

最近，越来越多的研究表明，循环中的miRNA可以作为肿瘤的生物标志物，具有较高的敏感性和特异性，为肿瘤的早期诊断、治疗和预后评估提供了新的思路和方法。

miRNA在肿瘤发生和发展过程中发挥了重要的调控作用。

一方面，miRNA可以通过靶向转录后水平的调节，抑制肿瘤的相关基因表达，从而发挥肿瘤抑制作用。

例如，miR-34家族是一个重要的肿瘤抑制miRNA家族，它们可以抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡和抑制转移等生物学过程。

另一方面，一些miRNA也可以通过调节肿瘤相关信号通路的激活和抑制，发挥肿瘤促进作用。

例如，miR-21是一个重要的肿瘤促进miRNA，它可以抑制肿瘤细胞凋亡、促进细胞增殖和侵袭、增强肿瘤干细胞特性等，从而促进肿瘤的发生和发展。

循环中的miRNA可以通过多种途径被释放到血液中，例如细胞分泌、脂质体分泌、细胞外泡（exosome）释放等。

由于miRNA具有较高的稳定性和特异性，在血液中能够稳定存在并可以被检测到。

因此，循环中的miRNA已成为一类重要的肿瘤生物标志物。

临床研究表明，不同类型的肿瘤在循环中的miRNA表达模式存在明显差异。

例如，肝癌患者血液中miR-122表达明显降低，而胃癌患者血液中miR-223表达明显升高。

此外，循环中的miRNA也可以反映肿瘤的治疗效果和预后评估。

例如，肺癌治疗后患者血液中miR-21表达水平升高，与复发和预后不良有关。

在肿瘤诊断、治疗和预后评估中，循环中的miRNA具有很大的应用前景。

通过检测循环中的miRNA表达水平，可以实现肿瘤的早期诊断和筛查，以及肿瘤的治疗效果和预后评估。

此外，循环中的miRNA也可以作为新的治疗靶点，通过调节肿瘤的miRNA表达水平，来实现肿瘤治疗和预防的目的。

总之，循环中的miRNA在肿瘤发生和发展过程中发挥着重要的调节作用，并成为一类重要的肿瘤生物标志物。

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展循环肿瘤细胞是指癌症患者体内从原发肿瘤脱落的恶性肿瘤细胞，在体液中存在并能够存活和扩散到其他组织。

检测循环肿瘤细胞可以提供乳腺癌患者的信息，如早期诊断、治疗效果评估、预后判断等。

目前常用的循环肿瘤细胞检测方法主要包括蛋白质标记、荧光原位杂交和多重聚合酶链式反应等。

蛋白质标记法是一种常用的循环肿瘤细胞检测方法，通过将特异性抗体与细胞表面标志物结合，并标记荧光染料或放射性同位素，通过显微镜或流式细胞术观察标记的循环肿瘤细胞。

这种方法可以快速、直观地检测循环肿瘤细胞，但存在特异性较差、操作复杂等问题。

荧光原位杂交（FISH）是一种通过荧光染色法检测循环肿瘤细胞的方法。

它利用特异性探针与靶蛋白的互补碱基序列结合，然后通过荧光检测技术观察结合结果。

FISH可以提高循环肿瘤细胞的检测灵敏度和特异性，但是由于技术复杂和成本高昂的限制，目前在临床应用上还不够普及。

多重聚合酶链式反应（PCR）是一种可复制DNA的技术。

通过PCR方法可以针对特定基因序列进行扩增，并通过分析PCR产物来检测循环肿瘤细胞。

PCR方法在循环肿瘤细胞检测中具有高灵敏度、高特异性的特点，可以检测到极低浓度的循环肿瘤细胞，但PCR方法也存在一些问题，如易受到污染和假阳性干扰。

在乳腺癌患者中，循环肿瘤细胞检测已经取得了一些研究进展。

许多研究表明，循环肿瘤细胞检测可以用于乳腺癌的早期诊断和治疗效果评估。

一项针对94名乳腺癌患者的研究发现，循环肿瘤细胞检测可以预测患者的肿瘤复发和生存率。

还有研究发现，通过对乳腺癌患者的循环肿瘤细胞进行分析，可以帮助医生在治疗过程中调整治疗方案，提高治疗效果。

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中具有很大的应用潜力。

目前的循环肿瘤细胞检测技术在特异性、敏感性、简便性和成本效益等方面仍然存在一些问题，需要进一步的研究和改进。

随着技术的不断发展和进步，相信循环肿瘤细胞检测将在乳腺癌的诊断和治疗中发挥越来越重要的作用。

循环miRNA作为肺癌诊断和预后无创标志物的研究进展

循环miRNA作为肺癌诊断和预后无创标志物的研究进展作者：杜歆玥杨慧龄来源：《中国医药导报》2020年第14期[摘要] 肺癌是全世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，严重影响人类健康。

尽管用于肺癌诊断和靶向治疗的技术取得了进步，但由于缺乏精确有效的早期检测方法，目前肺癌的诊断和预后仍然不理想，生存率较低。

肺癌由多种机制参与调控，其中microRNAs （miRNAs）參与转录后进行基因表达调控并伴随着肿瘤整个发生发展的过程，近期研究发现在血清和血浆的生物体液中检测到的循环miRNA表达异常与肺癌的早期诊断及预后密切相关。

本文对循环miRNA进入循环系统的途径、稳定性及其作为肺癌患者早期诊断和预后的潜在生物标志物进行了综述和讨论。

[关键词] 循环miRNA;非编码小分子miRNA;肺癌;诊断;预后[中图分类号] R734.2; ; ; ; ; [文献标识码] A; ; ; ; ; [文章编号] 1673-7210（2020）05（b）-0031-04Research progress of circulating miRNA as a noninvasive marker for diagnosis and prognosis of lung cancerDU Xinyue1，2; ;YANG Huiling1，21.Sino-American Cancer Institute， Dongguan Research Management Center， Guangdong Medical University， Guangdong Province， Dongguan; ;523808， China;2.School of Pharmacy，Guangdong Medical University， Guangdong Province， Dongguan; ;523808， China[Abstract] Lung cancer is one of the malignant tumor with the highest incidence rate and mortality rate in the world， which seriously affects human health. Despite advances in technology for lung cancer diagnosis and targeted therapy，due to the lack of accurate and effective early detection methods， the current diagnosis and prognosis of lung cancer is still not ideal， with a low survival rate. Lung cancer is regulated by a variety of mechanisms， among which microRNAs （miRNAs） participate in gene expression regulation after transcription and accompany the whole process of tumor development. Recent studies have found that abnormal expression of circulating miRNA detected in serum and plasma biological fluids is closely related to early diagnosis and prognosis of lung cancer. In this paper， the pathway， stability and potential biomarker of early diagnosis and prognosis of lung cancer are reviewed and discussed.[Key words] Circulating miRNA; microRNA; Lung cancer; Diagnosis; Prognosis肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。

循环miRNAs在肺癌诊断和治疗中的研究进展

循环miRNAs在肺癌诊断和治疗中的研究进展miRNA是一种短小非编码RNA，其调节作用在肺癌中得到越来越多的重视。

最近的研究表明，循环miRNAs在肺癌的诊断和治疗中正在成为热点。

循环miRNAs在肺癌诊断方面的应用循环miRNAs在肿瘤中的表达具有稳定、可检测性好和很强的启示性。

它们可以通过血液、尿液、唾液等生物液体进入人体外周循环。

最近的一些研究表明，循环miRNAs可以用于非小细胞肺癌（NSCLC）的早期诊断和预测其预后。

例如，miR-21、miR-221、miR-222等miRNAs在NSCLC患者的体液中表达升高，与临床病理学参数的相关性较高，并且与患者的预后相关。

因此，这些循环miRNAs也可以作为非小细胞肺癌的诊断和预后预测的生物标志物。

循环miRNAs在肺癌治疗方面的应用除了作为肺癌诊断的生物标志物外，循环miRNAs也可以作为直接或间接的治疗靶点。

在肺癌治疗中，循环miRNAs通过对癌细胞增殖、凋亡、侵袭、转移等过程的的调节，可以发挥光合作用。

例如，miR-155可以通过抑制Apaf-1和Caspase-3的表达，促进癌细胞的生存。

因此，miR-155抑制剂可以作为肺癌的治疗靶点。

此外，miR-34和miR-126等miRNAs调节与肺癌治疗有关的信号通路。

miR-34a可以通过调节p53信号通路，诱导肺癌细胞凋亡。

miR-126则可以通过抑制KRAS 信号通路，阻止肺癌细胞的侵袭和转移。

综上所述，循环miRNAs在肺癌诊断和治疗中具有重要的潜在作用。

然而，由于循环miRNAs的复杂性和多样性，以及肺癌的异质性和复杂性，仍需要在基础研究和临床应用方面进行更多的发掘和探索。

循环肿瘤细胞的检测及其在乳腺癌患者中的临床应用

ｃｆａｌｒｅｓｈｓｒｖｅｄｒｓｅｅｅｒｈｎｎｅｅｔｎｓｐｎｈｒｅｓｏｉｕａｉｇｔｍｏｅｌｕｅｅｌｅａｉｃｙｍａｋｒ．Ｔｉｅｉｗａｄｅｓｓｔｎｃｍｅｔｄｄｔｃｉｔｓａｄｔｅｍａｋｒｆｒｌｔｉｌｈｉａｏｅｃｃｎｕｒｌｓｄｉｔｔｒ— ｃｓｎｈｉｔｒｕｅ，ａｓｃｕｉｇｉｓｎｂｅｓａｃｒｌｏｉｌｄｎｓｕｅｉｒａｔｎｅ．ｎｔｃ
２１０６，ｉａ５０Ｃｈｎ
Ｃｒｅｐｎｎｕｈｒ：ＴｏｒｓｏｄｉｇａｔｏＡＯｉＭｎ。Ｅ— ｌｍａｉ：ｍｔｏｍｅｍａｌｃｍ．ｎａ＠ｄｉ．ｏｃ
【ｂｔｃ】ＣｒｕａｎｍｒｅｌａｅｈｕｈｔｒｆｃｔｒｇｒｓｉｎｓａｄｍｔｔｓｓｗｏｅｅｃｏａｓｓＯｕｈＡｓｒｔａｉｌｉｔｏｌｒｔｏｇｔｏｅｌｔｕｇｅｓｅｅｓｎｅｓｅ，ｈｓｄｔｔｎｃｕｅｃｃｔｇｕｃｓｅｍｏａｖａａｅｉＳｍ
２５０江苏苏州苏州大学附属第一医院肿瘤科马德亮综述，陶敏审校１０６
【摘要】由于循环肿瘤细胞（ｉｕｔｇｔｍｒｅｌＣＣ能够反映肿瘤侵袭与转移，ｃｃｌｉｏｌ，Ｔ）ｒａｎｕｃ检测ＣＣ也就在成为肿０年１月第１第１期１５卷１
ＣｉｅｅＣｉｃｌｎｏｏ，ｏ．２１，ｏ１，ｏ１ｈｓｌｉｃｌＮｖ００Ｖ１５Ｎ．１ｎｎａＯ￣．

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展一、循环肿瘤细胞检测技术的原理及方法循环肿瘤细胞检测技术是通过对体液中的循环肿瘤细胞进行捕获、分离、鉴定和计数，以实现对肿瘤患者体内肿瘤负荷和生物学特性的评估。

当前，常见的循环肿瘤细胞检测技术包括免疫磁珠分选技术、细胞大小和形态特征分选技术、免疫标记-细胞捕获技术、PCR技术和体外培养技术等。

不同的技术有各自的优缺点，但都能为临床提供可靠的肿瘤诊断和预后监测手段。

1. 乳腺癌患者中循环肿瘤细胞的检测率及其临床意义乳腺癌患者是CTC检测的主要研究对象之一，研究表明，乳腺癌患者的CTC检测率与肿瘤的分期、组织学类型、分子亚型、预后及临床表现等有密切关系。

多项研究结果表明，乳腺癌患者血液中循环肿瘤细胞的检测结果与术前及术后预后密切相关，预后不良的患者CTC检测阳性率较高，CTC检测可作为乳腺癌患者预后评估的重要指标之一。

2. 循环肿瘤细胞检测技术在乳腺癌治疗过程中的应用在乳腺癌治疗过程中，循环肿瘤细胞检测技术的应用对于评估患者对治疗的反应和预后具有重要作用。

研究表明，CTC的动态监测可以帮助指导乳腺癌患者的治疗方案选择，及时调整治疗方案。

通过对CTC的分子生物学特征分析可以帮助预测乳腺癌患者对化疗、内分泌治疗和靶向治疗的敏感性，从而实现个体化治疗。

随着循环肿瘤细胞检测技术的不断进步和完善，其在乳腺癌研究中的应用前景不断拓展。

未来，循环肿瘤细胞检测技术将更加趋向于个体化和精准化，通过分析患者CTC的表观遗传变异、信号通路激活状态、免疫逃逸特征等，实现对乳腺癌的精准治疗和个体化预后监测。

通过结合循环肿瘤细胞检测技术和其他肿瘤生物标志物的检测，将有望为乳腺癌的诊断和预后监测提供更全面、可靠的信息。

四种肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断、治疗检测及判断预后的价值

【键词】ＣＡ；ＹＲ２ — ；ＳＣ１５；癌关ＥＣＦＡ１１ＮＥ；Ａ２肺
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ａｎｓｓｏｕｇｃｎｅ．ｅｈｄＴｈｅｕｓｍｐｅｆ６ｐｔｅｔｒｖｕｔｄ：ｉｃｕｉｇ１ｔｅｏａｃｎｍａ２ｔｕｎｏｓｇｏｉｆｌｎａｃｒＭｔｏｓｅｓｒｍａｌｓｏａｉｎｓｗｅｅｅａａｅ４ｌｎｌｄｎ４ｗｉｄｎｃｒｉｏｓ，３ｗｉｓａｌｕｈｈ
Ｐ，Ｕ — ｉｇＸｕＣｈｅｇｅｔｒＨｏｐｉａ，Ｈｕｉ２０ＬＩＡｉｙｎａｎｎＣｎｅｓｔｌＡｎ４２００
【ｂｔｃ】ＯｊｃｖＴｅｒｉｅｌｉｌａｅｆｏｒｕｏｍｒｅ：ｅｍＣＡ，ｙａ１１ＮＥａｄＣ１５ｎｈＡｓａｔｒｂｅｔｅｏｔｍｎｔｉｃｌｕｍｒａｒｓｕＥＣｆ２－，ＳＡ２ｅｉｉｄｅｅｈｃｎａｖｕｏｆｔｋｓｒｒｎｉｔｄ
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乳腺癌多靶点治疗(二)2024

乳腺癌多靶点治疗（二）引言概述:乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤，传统的治疗方法包括手术切除、放疗和化疗。

然而，近年来研究人员发现，乳腺癌是一种具有多重分子靶点的复杂疾病，单一治疗方法效果有限。

因此，乳腺癌的多靶点治疗成为了当前研究的热点。

本文将从五个大点出发，阐述乳腺癌多靶点治疗的相关内容。

正文:1. 靶向乳腺癌细胞生长和分裂的靶点- 细胞周期调控的靶点：α-循环蛋白依赖性激酶、丝裂原活化蛋白激酶等。

- 乳腺癌细胞增殖信号通路的靶点：HER2/neu、PI3K、mTOR 等。

- 细胞凋亡途径的靶点：Bcl-2、PARP等。

2. 靶向乳腺癌血管生成的靶点- 血管内皮生长因子受体（VEGFR）的靶点：VEGFR1、VEGFR2等。

- 血管生成调节因子的靶点：VEGF、FGF、PDGF等。

3. 靶向乳腺癌转移的靶点- 肿瘤细胞迁移和浸润的靶点：EMT调控因子、c-MET等。

- 肿瘤细胞侵袭血管和淋巴侵袭的靶点：MMPs、integrin等。

- 细胞外基质的靶点：Fibronectin、collagen等。

4. 靶向乳腺癌免疫治疗的靶点- T细胞免疫检查点的靶点：PD-1、PD-L1等。

- 细胞毒性T淋巴细胞的靶点：CTLA-4等。

- 癌症疫苗的靶点：HER2、MUC1等。

5. 靶向乳腺癌耐药机制的靶点- 乳腺癌干细胞的靶点：ALDH1A1等。

- ABC转运蛋白的靶点：ABCB1、ABCG2等。

- DNA损伤修复途径的靶点：PARP等。

总结:乳腺癌是一种复杂的疾病，单一治疗方法难以达到理想的效果。

多靶点治疗成为了乳腺癌研究的热点，针对乳腺癌细胞生长和分裂、血管生成、转移、免疫治疗和耐药机制等方面的靶点进行干预，有望提高治疗效果。

然而，乳腺癌多靶点治疗仍存在许多挑战，例如耐药性和副作用等问题。

因此，进一步研究和探索乳腺癌多靶点治疗的策略和方法势在必行，以提升乳腺癌患者的生存质量和生存期。

探讨乳腺癌细胞中miRNA与化疗耐药关联

探讨乳腺癌细胞中miRNA与化疗耐药关联在过去的几年里，我已经深入研究了乳腺癌细胞中miRNA与化疗耐药的关联。

这项研究涉及了大量数据的收集和分析，以及对miRNA在化疗过程中的作用机制的探讨。

我希望通过这篇文档，与大家分享我的发现和见解。

miRNA是一类长度约为22个核苷酸的非编码RNA分子，它们通过与目标mRNA的互补序列结合，可以抑制mRNA的翻译或促进其降解，从而调控基因的表达。

近年来，研究者们发现miRNA在乳腺癌的发生、发展和化疗耐药中起着重要作用。

化疗是治疗乳腺癌的常用方法，然而，许多患者在化疗过程中会出现耐药现象，导致治疗效果下降。

研究发现，miRNA的异常表达与乳腺癌细胞的化疗耐药密切相关。

例如，miR155、miR181a和miR21等miRNA在乳腺癌细胞中高表达，与化疗耐药相关。

这些miRNA通过调节乳腺癌细胞的相关信号通路，影响化疗药物的敏感性。

具体来说，miR155通过抑制PTEN基因的表达，促进PI3K/AKT信号通路的激活，从而增强乳腺癌细胞的化疗耐药。

miR181a通过调节BIM基因的表达，影响乳腺癌细胞的凋亡途径，降低化疗药物的敏感性。

miR21通过抑制PDCD4基因的表达，促进乳腺癌细胞的增殖和侵袭，从而影响化疗效果。

除了上述miRNA外，还有一些miRNA在乳腺癌细胞中低表达，也与化疗耐药相关。

例如，miR125a和miR145等miRNA通过调节乳腺癌细胞的相关信号通路，降低化疗药物的敏感性。

miR125a通过抑制ABCG2基因的表达，影响乳腺癌细胞的药物外排泵功能，从而降低化疗药物的疗效。

miR145通过调节BCL2基因的表达，促进乳腺癌细胞的凋亡，提高化疗药物的敏感性。

值得注意的是，miRNA与乳腺癌细胞的化疗耐药不仅限于单个miRNA的作用，还可能是多个miRNA相互作用、共同调控的结果。

因此，研究miRNA的组合在乳腺癌化疗耐药中的作用，将有助于更全面地了解乳腺癌的化疗耐药机制。

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌预后评估中的作用及与乳腺癌分子分型的关系

1869年澳大利亚Ashworth [1]首次在因癌症死亡后的患者血液中发现了循环肿瘤细胞（circulating tumorcell ，CTC ）。

目前已在乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、胰腺癌、膀胱癌和肾癌等多种恶性肿瘤患者血液中发现CTC 存在，CTC 被定义为自发或因诊疗操作引起的、由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞[2]。

乳腺癌已成为中国女性发病率最高的恶性肿瘤，占女性新发肿瘤的15%[3]。

对乳腺癌发病机制、治疗、疗效以及预后评估的研究显得尤为重要。

CTC 被称为“液体活检”工具，能够实时、动态地监测疾病的变化，评估疗效；同时由于样本取材方便、可反复性操作、几乎没有创伤等优点而逐渐被关注。

CTC 检测已经被美国国家食品药品监督管理局（FDA ）及中国国家食品药品监督管理总局（SFDA ）批准，用于转移性乳腺癌（metastat -ic breast cancer ，MBC ）预后的评估[4-5]。

本文就CTC 在乳腺癌预后评估中的作用及与乳腺癌分子分型的关系作一综述。

1CTC 的检测大多数的实体肿瘤外周血中均可检测到CTC ，但数量稀少，几乎是每10万~100万个白细胞中只有1个CTC [6]。

CTC 的检测包括富集和分离两个系统：一是以CTC 细胞大小、密度、阳性或者阴性免疫选择为基础的富集，二是以核酸、免疫学为基础的检测及抗原测定。

常用的CTC 富集方法有：免疫磁珠分离法[7]、黏附分离法、膜滤过法、梯度密度离心法、OncoQuick 分离法[8]以及免疫磁珠分离和膜滤过法联合的富集方法。

常用的CTC 检测方法有：免疫细胞化学法、流式细胞术、激光扫描技术、核酸检测技术、差减富集技术与免疫荧光染色-染色体原位杂交的整合技术（SET-iFISH ）、CTC 芯片、CTC-iChip [9]、AdnaTest Cancer 癌细胞检测系统[10]以及上皮细胞免疫斑点法[11]。

循环肿瘤标志物在乳腺癌复发和预后评估中的研究进展

循环肿瘤标志物在乳腺癌复发和预后评估中的研究进展郭远薇;胡政;罗伟濠;贺荣章;李佳;段丽丽;刘小军;罗迪贤【摘要】乳腺癌是女性癌症死亡最主要的原因,居女性恶性肿瘤发病率首位.对乳腺癌患者进行早期诊断以及更精准的疗效评估和复发监测,可为患者制定及时有效的个体化治疗方案提供更多的循证依据.本文就循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)、循环肿瘤DNA(ciculating tumor,ctDNA)、外泌体(Exosomes)、ctDNA甲基化以及循环肿瘤血小板(tumor-educated platelets,TEPs)等循环肿瘤标志物在乳腺癌复发监测和病情评估中的研究进展进行综述.【期刊名称】《中国癌症防治杂志》【年(卷),期】2019(011)002【总页数】5页(P178-182)【关键词】乳腺癌;循环肿瘤细胞;外泌体;循环肿瘤DNA;外沁体;循环肿瘤血小板;肿瘤标志物【作者】郭远薇;胡政;罗伟濠;贺荣章;李佳;段丽丽;刘小军;罗迪贤【作者单位】423000郴州南华大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)检验病理医学中心;南华大学转化医学研究所;423000郴州南华大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)检验病理医学中心;南华大学转化医学研究所;423000郴州南华大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)检验病理医学中心;南华大学转化医学研究所;423000郴州南华大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)检验病理医学中心;南华大学转化医学研究所;423000郴州南华大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)检验病理医学中心;南华大学转化医学研究所;423000郴州南华大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)检验病理医学中心;南华大学转化医学研究所;423000郴州南华大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)检验病理医学中心;南华大学转化医学研究所;423000郴州南华大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)检验病理医学中心;南华大学转化医学研究所【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是来源于乳腺上皮组织的恶性肿瘤，也是我国女性发病率最高的恶性肿瘤。

血清肿瘤标志物联合细胞因子检测在乳腺癌诊断中的应用价值

血清肿瘤标志物联合细胞因子检测在乳腺癌诊断中的应用价值邱立阳【期刊名称】《临床合理用药杂志》【年(卷),期】2021(14)3【摘要】目的探讨血清肿瘤标志物联合细胞因子检测在乳腺癌诊断中的应用价值。

方法选取南平市第二医院2019年1月—2020年1月收治的乳腺肿瘤患者88例设为观察组,将良性肿瘤患者设为良性组44例(n=44),将乳腺癌患者设为恶性组(n=44),另选取本院同期体检健康者88例作为对照组。

比较2组血清肿瘤标志物〔包括血清糖类抗原153(CA153)、血清糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)〕、细胞因子〔包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)和人生长分化因子3(GDF3)〕。

结果恶性组CA153、CA125、CEA、CYFRA21-1高于良性组、对照组(P<0.05)。

良性组CA153、CA125、CEA、CYFRA21-1高于对照组(P<0.05)。

恶性组TNF-α、IL-6、IL-8、GDF3高于良性组、对照组(P<0.05)。

良性组TNF-α、IL-6、IL-8、GDF3高于对照组(P<0.05)。

结论血清肿瘤标志物联合细胞因子检测在乳腺癌的诊断中应用价值较高。

【总页数】2页(P167-168)【作者】邱立阳【作者单位】福建省南平市第二医院【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.血清肿瘤标志物联合检测在维吾尔族乳腺癌诊断中的应用价值2.核磁共振结合血清肿瘤标志物及细胞因子检测在乳腺癌诊断中的应用价值研究3.多种血清肿瘤标志物联合检测诊断乳腺癌应用价值4.血清肿瘤标志物水平联合检测在乳腺癌诊断中的临床价值分析5.血脂指标与血清肿瘤标志物联合检测在乳腺癌诊断中的应用价值因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910380243.5
(22)申请日 2019.05.08
(71)申请人中山大学孙逸仙纪念医院
地址 510120 广东省广州市越秀区沿江西
路107号
(72)发明人龚畅　宋尔卫　谭维格　梁格豪　
谢新华　
(74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限
公司 44202
代理人刘孟斌
(51)Int.Cl.
C12Q 1/6886(2018.01)
C12N 15/11(2006.01)
G16H 50/30(2018.01)
(54)发明名称乳腺癌循环肿瘤细胞miRNA和EMT标志物联合检测试剂盒及其应用(57)摘要本发明涉及一种转移性乳腺癌预后风险评估mRNA检测引物组，包括如SEQ ID NO.1～6所示的核苷酸序列、试剂盒、数学模型，及其在转移性乳腺癌风险评估中的应用。

本发明以外周血循环肿瘤细胞内的miR -106b、EMT标志物E -cadherin 和Vimentim作为组合分子标记物，应用于转移性乳腺癌CTC相关标志物分子检测试剂盒的开发，运用实时荧光定量PCR方法，可以实现转移性乳腺癌的预后评估，筛选有复发高风险的患者，指导临床个体化治疗，并提高治疗的精准性。

检测试剂盒，检测快速方便、检测灵敏度、特异度高、成本低、可以满足绝大对数肿瘤病人的检测需要，应用范围极广，
经临床验证预测准确度高。

权利要求书1页说明书8页序列表2页附图2页CN 110452982 A 2019.11.15
C N 110452982
A
1.转移性乳腺癌预后风险评估mRNA检测引物组，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1～6所示的核苷酸序列。

2.如权利要求1所述的转移性乳腺癌预后风险评估mRNA检测引物组，其特征在于，还包括内参引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.7～10所示。

3.一种转移性乳腺癌预后风险评估mRNA检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如SEQ ID NO.1～6所示的引物。

4.如权利要求3所述的转移性乳腺癌预后风险评估mRNA检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括内参引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.7～10所示。

5.如权利要求3或4所述的转移性乳腺癌预后风险评估mRNA检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：用于PCR反应的SYBR Green混合液、正向引物液、反向引物液和无核酸酶纯水。

6.一种利用如权利要求3～5任一项所述的检测试剂盒构建的用于转移性乳腺癌预后风险评估的数学模型，其特征在于，通过检测miRNA、E -cadherin、Vimenti的表达量，获得相关风险系数及cut -off值，
所述相关风险系数通过以下公式计算：
其中，其中，r＝Risk Score；j＝1，2，3，……m；m表示：协变量的数量；i表示：某一个协变量；β表示：模型中偏回归系数；x表示：协变量；
将最终获得的风险系数之和与cut -off值3.214比较判断患者转移性乳腺癌预后风险高低，其评判标准为：低危：Risk Sore＜3.214；高危：Risk Sore≥3.214。

7.一种如权利要求1或2所述的转移性乳腺癌预后风险评估mRNA检测引物组在转移性乳腺癌风险评估中的应用。

8.一种转移性乳腺癌预后风险评估mRNA的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)从乳腺癌患者外周血提取RNA；
(2)逆转录获得cDNA；
(3)荧光定量PCR扩增；
(4)结果分析：判断移性乳腺癌预后风险具体按照如下标准：低危：Risk Sore＜3.214；高危：Risk Sore≥3.214。

权　利　要　求　书1/1页2CN 110452982 A。