一例犬细小病毒病的诊治报告

犬细小病毒病是犬的一种具有高度接触性传染的烈性传染病，临床上以急性出血性肠炎和心肌炎为特征。

该病一年四季皆可发生，以发病急、病程短、传染性强、死亡率高为其特点，是危害我国养犬业最为严重的传染病之一［1］。

１
发病过程及临床症状
2015年12月，一只3月龄幼犬出现呕吐、腹
泻、精神萎靡，粪便有明显血腥味，初步诊断为犬细小病毒病，对病犬进行隔离，进一步采用实验室检查确诊。

２
实验室检查
（1）材料：病犬粪便。

（2）主要仪器及试剂：ＰＣＲ仪、凝胶成像分析仪、
电泳仪等；ＳＤＳ、蛋白酶Ｋ、苯酚、氯仿、无水乙醇、ｄNＴＰs 、ＴａｑＤNＡ聚合酶（购自ＴａＫａＲａ公司）。

（3）方法［2］。

①ＣＰＶ引物：上游引物，5′－ＧＴＡ-
ＣＡＴＴＴＡＡＡＴＡＴＧＣＣＡＧＡ－3′；下游引物，5′－ＡＴ-ＴＡＡＴＧＴＴＣＴＡＴＣＣＣＡＴＴＧ－3′。

②病毒总ＤNＡ的抽提：取1ｇ粪便，加入1mＬＰBＳ液溶解，静置10mｉｎ，12000ｒ／mｉｎ离心10mｉｎ；取上清液500μＬ，加入50μＬ的ＳＤＳ（10％），20μＬ蛋白酶Ｋ（20mｇ／mＬ），混匀，50℃水浴2ｈ，每20mｉｎ摇匀一次。

加入500μＬ苯酚混匀，静置10mｉｎ，12000ｒ／mｉｎ离心10mｉｎ；取上清，加入等体积苯酚∶氯仿（1∶1），冰浴5mｉｎ，4℃12000ｒ／mｉｎ离心5mｉｎ；取等体积氯仿冰浴5mｉｎ，4℃12000ｒ／mｉｎ离心5mｉｎ；取上清加入2．0～2．5倍的无水乙醇及1/10体积的3mｏl ／Ｌ的NａＡｃ混匀，置－20℃30mｉｎ或过夜，同上离心15mｉｎ；弃上清，加1000μＬ75％乙醇，洗涤1次。

晾干ＥＰ管中的ＤNＡ，加入30μＬ的双蒸水溶解，－20℃保存备用。

③ＰＣＲ反应体系与条件。

ＰＣＲ反应体系：10×ＰＣＲBuffｅｒ2．5μＬ，ｄNＴＰs （2．5mmｏl ／Ｌ）2．0μＬ，ＭｇＣl 2（25
mmｏl ／Ｌ）1．0μＬ，上下游引物（25ｐmｏl ／Ｌ）各0．5μＬ，
ＤNＡ模板5．0μＬ，ＴａｑＤNＡ聚合酶（5Ｕ／μＬ）0．2μＬ，加Ｈ2Ｏ至25μＬ。

ＰＣＲ反应程序为：95℃预变性5mｉｎ；95℃变性30s ，45℃退火30s ，72℃延伸30s ，共35个循环；末次72℃再延伸10mｉｎ。

反应结束后取7μＬＰＣＲ产物在1％的琼脂糖凝胶上电泳，在凝
胶成像系统上观察。

（4）结果判定。

采用ＰＣＲ技术进行检测，结果见图1。

利用犬二联弱毒苗作为阳性对照，结果显示阳性对照（标记1）与所检病料（标记3）均扩增出470bｐ条带，与预期的目的条带大小一致，阴性对照（标记2）无任何条带（图1）。

３
治疗
（1）特异抗体治疗：给病犬注射抗犬细小病毒高免血清。

（2）对症支持治疗：0．9％氯化钠＋ＶＣ注射液＋ＶB 6注射液＋地塞米松注射液（剂量参照说明书）静脉注射，另5％糖盐水＋氯化钾注射液＋头孢（剂量参照说明书）静脉注射。

收稿日期：2016－03－01
作者简介：甘亚宗（1963－），男，湖北崇阳人，助理兽医师，主要从事动物疫病防控工作。

一例犬细小病毒病的诊治报告
甘亚宗
（湖北省崇阳县动物疫病预防控制中心，湖北崇阳
437500）
摘要：对一例犬细小病毒病从临床症状、实验室诊断以及防治措施等方面进行了介绍。

关键词：犬细小病毒病；诊断；防治中图分类号：Ｓ858．292
文献标识码：B
文章编号：1007－273Ｘ（2016）05－0019－01
Ｍ．ＤＬ2000Ｍａｒｋｅｒ；1．阳性对照；2．阴性对照；3．样本
图１病犬粪便ＰＣＲ扩增结果
Ｍ
1
2
3
2000bｐ1000bｐ750bｐ500bｐ250bｐ100bｐ
（3）辅助治疗措施：给病犬注射干扰素和黄芪多糖。

经过3ｄ的治疗，病犬由每天大便4次减少为2次，粪便也逐渐成型。

４
讨论
犬细小病毒病在临床多发，一般情况下，犬细小
病毒病的治疗周期为5～7ｄ，个别犬治疗3ｄ其临床症状基本稳定，也有个别病例需要更长时间，在刚开始治疗的过程中，部分犬临床症状会逐渐明显，此时一定要坚持用药，同时也要结合临床化验检查结果判定有无其他异常，如继发感染其他寄生虫病、病毒病、肠套叠等疾病。

犬细小病毒病的治疗原则主要是对症支持治疗，加上抗犬细小病毒血清或单克隆抗体等，再配合使用其他药物，如黄芪多糖、干扰素等广谱抗病毒和
提高机体抵抗力的药物来提高治愈率。

在治疗的过程中，早期呕吐频繁，一般建议要禁食禁水，因为犬细小病毒对肠腺隐窝的侵害可引起肠绒毛萎缩，造成胃肠黏膜脱落，此时进食进水会使动物呕吐加重，造成体液丢失和电解质紊乱；同时也会刺激肠胃蠕动、产生胃酸，造成新的损伤；犬患细小病毒病时，剧烈的呕吐腹泻会造成大量体液丢失、电解质紊乱和酸碱平衡失调，治疗时纠正酸碱平衡、补充电解质和体液会对该病的治疗效果产生较大的影响。

参考文献：
［1］郭
伟，商晓桂，单同领，等．犬细小病毒上海分离株全基因的克
隆及进化树分析［Ｊ］．中国动物传染病学报，2009，17（3）：27－32．［2］刘雪燕，黄
韧，刘忠华，等．猫肾Ｆ81传代细胞中犬细小病毒原
位ＰＣＲ检测方法［Ｊ］．中国实验动物学报，2001，9（3）：146－149．
收稿日期：2016－04－03
基金项目：辽宁省教育科学“十二五”规划2015年度立项课题项目（ＪＧ15ＥB046）
作者简介：史凯帅（1979－），男，辽宁锦州人，兽医师，主要从事动物防疫、检疫、监督工作，（电话）130****5956（电子信箱）sｋsｗｙtxｚ@163．ｃｏm 。

狂犬病（Ｒａbｉｅs ）俗称“疯狗病”，是由狂犬病毒引起的一种人畜共患的中枢神经系统急性传染病。

因狂犬病患者有害怕喝水的突出临床表现，该病亦被叫做“恐水病（Ｈｙｄｒｏｐｈｏbｉａ）”，但患病动物没有这种特点。

狂犬病是迄今为止人类惟一病死率高达
100％的急性传染病，全世界每年报告的狂犬病死亡人数达5万例之多［1］。

我国是受狂犬病危害最为严
重的国家之一，近年的年报告狂犬病死亡人数均在
2400人以上，仅次于印度，居全球第二位；一直位于
我国各类传染病报告死亡数的前三位［2］。

我国人狂犬病95％以上由犬咬伤引起，由此可见犬类狂犬病诊断与综合防控显得尤为重要。

１
狂犬病病原
狂犬病病毒（Ｒａbｉｅs ｖｉｒus ）属于弹状病毒科
（Ｒｈａbｄｏｖｉｒｉｄａｅ）狂犬病毒属（lｙｓｓａｖｉｒｕｓ）。

病毒形态
似子弹，整个病毒表面呈蜂窝状的六角形结构。

核酸是单股不分节负链ＲNＡ。

该病毒对环境抵抗力不强，对脂溶剂（肥皂水、氯仿、丙酮等）、70％乙醇、碘制剂以及季胺类化合物敏感。

也易被巴氏消毒、紫外光、酸（ｐＨ4以下）、碱（ｐＨ10以上）灭活。

但不易被酚或来苏尔溶液杀灭。

２
狂犬病的传播途径
狂犬病病毒几乎感染所有温血动物，自然宿主
为犬类及野生动物。

最主要的传播途径是感染了狂犬病的动物在咬伤人时，通过唾液使狂犬病病毒进入人体。

狂犬病病毒还可以通过无损伤的正常黏膜进入人体，或带有狂犬病病毒的液体溅入眼睛，通过眼结膜进入人体，但以这种方式进入人体的例子要
犬狂犬病的诊断与综合防控
史凯帅1，李鑫龙2，李春宇2，王学恩2
（1．辽宁省锦州市松山新区凌南动物卫生监督所，辽宁锦州
121013；2．阜新高等专科学校，辽宁阜新123000）
摘要：对狂犬病病原、传播途径、临床症状、分型和诊断方法进行了介绍。

旨在从源头上控制狂犬病的发生，切断其传播途经，阻止该病的蔓延，保护易感动物及犬类密切接触人员免受该病的危害。

关键词：狂太病；传播途径；诊断；综合防控中图分类号：Ｓ858．292
文献标识码：B
文章编号：1007－273Ｘ（2016）05－0020－02。