丹参的提取精制工艺的研究
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收稿日期： 2012 － 06 － 23 作者简介： 蔡韡韡（ 1985 － ） ，女，上海人，实验师，学士，研究方向：
中药学。
丹参的活性成分主要分为脂溶性和水溶性两类。其脂 溶性成分主要是丹参酮、隐丹参酮、丹参酮ⅡA 等，其水溶 性成分主要是丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸 A、B、C、D、E、F、G 等［2 － 4］。丹参脂溶性成分以丹参酮类化 合物为代表，具有扩张血管、改善微循环和抗菌作用等基本 作用，同时具有免疫调节作用、激素样作用、抗氧化作用等 多方面的作用。丹参水溶性成分在丹参的作用中占有重要
基，同时具有多种其他作用，这些作用的结合在多种疾病治 疗中取得良好的效果［5 － 9］。
本文以丹参酮 IIA 和丹酚酸 B 为丹参脂溶性有效成分
和丹参水溶性有效成份的指标，兼顾两类有效成份优选丹
参的提取精制工艺，提高药材中有效成分的收率，降低得膏 率，便于制剂成型［10 ～ 12］。
1 丹参酮ⅡA的含量测定 参考《中华人民共和国药典》2005 年版 1 部第 57 页丹
DOI：10.13193/j.archtcm.2012.11.199.caiww.040
第 30 卷 第 11 期 2012 年11 月
中华中医药学刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 30 No． 11 Nov． 2 0 1 2
收率，降低得膏率，便于制剂成型。
关键词： 丹参； 丹参酮 IIA； 丹酚酸 B； 提取； 精制
中图分类号： R284． 1
文献标识码： A 文章编号： 1673 － 7717（ 2012） 11 － 2565 － 06
Research on Extraction Technology of Salvice Miltiorrhizae Radix
丹参的提取精制工艺的研究
蔡韡韡
（ 上海中医药大学，上海 201203）
摘 要： 目的： 分别研究丹参的醇溶性成分和水溶性成份，以得到纯度较高、得膏率较低的浸膏，提高收率，便
于制剂成型。方法： 采用正交试验法分别优选出丹参醇溶性有效成分和水溶性有效成分的最佳提取工艺，同时考
察了提取次数对提取率的影响，并用验证实验证明了该工艺的可行性； 采用大孔树脂层析法精制丹参水溶性成
Key words： Salviae Miltiorrhizae Radix； Tanshinone IIA； Salvianolic Acid B； extract； refine
丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge． 的干燥根及根茎。性味苦，微寒，归心、肺经，具有活血 调经、祛瘀生新、镇静安神、凉血消痈、消肿止痛等功能［1］。
0． 20%
2 上海雷允上药业西区有限公司
0． 2109
3 上海养和堂中药饮片有限公司
0． 2610
中 华 中 医 药
2566
学 刊
TanshinoneⅡA 对照品
丹参药材的样品溶液 图 1 丹参酮ⅡA系统适用性色谱图
1． 3 正交试验
1． 3． 1 因素水平表 根据丹参所含成分的理化性质以及
文献报道，其影响因素主要有醇浓度、加醇量、提取时间等，
因此对以上 3 个因素分别在 3 个水平进行正交优选，按 L9 （ 34 ） 正交表进行实验，因素水平安排见表 2。
表 2 丹参醇提正交实验因素水平表
水平
1 2
醇浓度（ % ） /A 95 90
溶剂用量（ 倍） /B 6 8
提取时间（ h） /C3． 2 正交试验 分别称取丹参 50g 9 份，按正交试验表 选择的条件进行提取，合并提取液，滤过，精密移取滤过液
参项下丹参酮ⅡA 的含量测定方法： 取丹参粉末（ 过 3 号 筛） 约 0． 3g，精 密 称 定，置 具 塞 锥 形 瓶 中，精 密 加 入 甲 醇
50mL，称定重量，加热回流 1h，放冷，再称定重量，用甲醇补
足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。分别精密吸取对照
品溶液与供试品溶液各 5μL，注入液相色谱仪测定。
0． 5mL 置 25mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品 溶液。照 2． 1． 1 项下“丹参中的丹参酮ⅡA 测定”之条件测 定丹参酮ⅡA 的含量，并计算得膏率。醇提后的药渣继续用 10 倍量的水提取 1h，测定水提液中丹酚酸 B 的含量（ 含量 测定方法参见 2． 2． 1 项下） 。
综合考虑丹参酮ⅡA 的提取率、得膏率及醇提后药渣中丹 酚酸 B 的含量，用综合评分法综合评价以上因素对工艺确定 的影响，三者的权重分别为 0． 5、0． 3、0． 2，评分公式如下。
1． 1 对照品溶液的制备
精密称取丹参酮ⅡA 对照品约 16mg，置 50mL 棕色量瓶 中，加甲醇至刻度，摇匀； 精密量取 0． 5mL，至 10mL 棕色量
瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得 （ 每 1mL 中含丹参酮 ⅡA 16μg） 。
1． 2 色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 甲醇 － 水 （ 80 ∶
CAI Wei-wei
（ Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai 201203，China）
Abstract： Objective： To study water － soluble and alcohol － soluble components in Salviae Miltiorrhizae Radix so to obtain extracts with high purity and low rate of the solid products，and to enhance the yield and facilitate the preparation molding． Methods： The optimized conditions of alcohol － soluble and water － soluble active ingredients were selected by orthogonal tests，after which the times of extractions were investigated． And the verification experiments were carried out to prove the feasibility of the processes． Macroporous － resin adsorption technology was applied with the selection of the type of resin，the concentration of the extraction liquid and the washing agent to determine the refining conditions of water － soluble components． Results ： The determined preparation process of extracts of Salviae Miltiorrhizae Radix was as the following． The herb was extracted by six － fold ethanol for one hour，after which the extracts were concentrated and dried with vacuum conditions． Then the alcohol － soluble components were obtained． The residue of the alcohol extractions were extracted by eight － fold water for another hour． The water － extracted liquid was concentrated to about 1． 5g herb / mL as the loading sample after centrifugation，which were added to AB － 8 macroporous － resin column to refine until the positive outflow were detected． And then water was applied to wash the column until Molish reaction showed negative． 70% ethanol was used as the washing agent until no positive outflow was detected． The water － soluble extracts were obtained after the washing outflow was concentrated and dried with vacuum． Conclusions： The selected extracting and refining process increased the yield of active ingredients in Salviae Miltiorrhizae Radix，reduced the solid rates，which were favorable to the preparation molding process．
综合评分 M（ 100% ） = （ X / XMAX ） × 0． 5 + （ 1 － Y / YMAX ） × 0． 3 + （ Z / ZMAX ） × 0． 2
X： 丹参酮ⅡA 的提取率； XMAX ： 丹参酮ⅡA 的最高提取率； Y： 丹参醇提得膏率； YMAX： 丹参醇提最高得膏率； Z： 丹酚酸 B 的提取量； ZMAX ： 丹酚酸 B 的最高提取量。结果见表 3。
20） 为流动相； 检测波长为 270nm。理论板数按丹参酮ⅡA 峰计算应不低于 2000。结果见图 1。
丹参中丹参酮ⅡA含量测定结果见表 1。 表 1 丹参中丹参酮ⅡA的含量测定结果
序号
来源
丹参酮ⅡA 药典标准
含量（ % ）
上海 雷 允 上 药 业 西 区 有 限 公 司
不得少于
1
0． 2084
（ 小试）
药 / mL，离心后取上清液作为上样液，通过 AB － 8 大孔树脂至饱和。上样结束后，用去离子水洗脱，至 Molish 反应
呈阴性，停止洗脱。换 70% 乙醇为洗脱液洗脱，至洗脱液的三氯化铁 － 铁氰化钾试液反应呈阴性，合并洗脱液，
减压回收溶剂，减压干燥，粉碎，即得丹参水溶性提取物。结论： 优选的提取精制工艺，可提高药材中有效成分的
表 3 正交试验结果
评分因子
试验号 A
B
C
D X（ % ） Y（ % ） Z（ g）
11111
69． 74
2． 26 1． 33
21222
85． 22
5． 33 1． 23
31333
80． 51
4． 73 0． 95
42123
78． 84
8． 59 0． 99
52231
81． 14 10． 30 1． 08
分，通过树脂型号的选择、上样液浓度的考察、洗脱剂的优选等层析条件的考察确定了丹参精制的工艺条件。结
果： 确定丹参的提取精制工艺： 丹参药材用 6 倍量 95% 乙醇加热回流，提取 1h，减压回收溶剂，得稠浸膏减压干
燥，粉碎，即得丹参醇溶性提取物； 将丹参醇提后药渣用 8 倍量水煎煮 1h，提取液滤过，滤液减压浓缩至约 1． 5g 生
中 华 中 医 药
2565
学 刊
第 30 卷 第 11 期 2012 年11 月
中华中医药学刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 30 No． 11 Nov． 2 0 1 2
地位，以丹酚酸 为 代 表，最 基 本 作 用 是 抗 氧 化 和 清 除 自 由
中药学。
丹参的活性成分主要分为脂溶性和水溶性两类。其脂 溶性成分主要是丹参酮、隐丹参酮、丹参酮ⅡA 等，其水溶 性成分主要是丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸 A、B、C、D、E、F、G 等［2 － 4］。丹参脂溶性成分以丹参酮类化 合物为代表，具有扩张血管、改善微循环和抗菌作用等基本 作用，同时具有免疫调节作用、激素样作用、抗氧化作用等 多方面的作用。丹参水溶性成分在丹参的作用中占有重要
基，同时具有多种其他作用，这些作用的结合在多种疾病治 疗中取得良好的效果［5 － 9］。
本文以丹参酮 IIA 和丹酚酸 B 为丹参脂溶性有效成分
和丹参水溶性有效成份的指标，兼顾两类有效成份优选丹
参的提取精制工艺，提高药材中有效成分的收率，降低得膏 率，便于制剂成型［10 ～ 12］。
1 丹参酮ⅡA的含量测定 参考《中华人民共和国药典》2005 年版 1 部第 57 页丹
DOI：10.13193/j.archtcm.2012.11.199.caiww.040
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收率，降低得膏率，便于制剂成型。
关键词： 丹参； 丹参酮 IIA； 丹酚酸 B； 提取； 精制
中图分类号： R284． 1
文献标识码： A 文章编号： 1673 － 7717（ 2012） 11 － 2565 － 06
Research on Extraction Technology of Salvice Miltiorrhizae Radix
丹参的提取精制工艺的研究
蔡韡韡
（ 上海中医药大学，上海 201203）
摘 要： 目的： 分别研究丹参的醇溶性成分和水溶性成份，以得到纯度较高、得膏率较低的浸膏，提高收率，便
于制剂成型。方法： 采用正交试验法分别优选出丹参醇溶性有效成分和水溶性有效成分的最佳提取工艺，同时考
察了提取次数对提取率的影响，并用验证实验证明了该工艺的可行性； 采用大孔树脂层析法精制丹参水溶性成
Key words： Salviae Miltiorrhizae Radix； Tanshinone IIA； Salvianolic Acid B； extract； refine
丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge． 的干燥根及根茎。性味苦，微寒，归心、肺经，具有活血 调经、祛瘀生新、镇静安神、凉血消痈、消肿止痛等功能［1］。
0． 20%
2 上海雷允上药业西区有限公司
0． 2109
3 上海养和堂中药饮片有限公司
0． 2610
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丹参药材的样品溶液 图 1 丹参酮ⅡA系统适用性色谱图
1． 3 正交试验
1． 3． 1 因素水平表 根据丹参所含成分的理化性质以及
文献报道，其影响因素主要有醇浓度、加醇量、提取时间等，
因此对以上 3 个因素分别在 3 个水平进行正交优选，按 L9 （ 34 ） 正交表进行实验，因素水平安排见表 2。
表 2 丹参醇提正交实验因素水平表
水平
1 2
醇浓度（ % ） /A 95 90
溶剂用量（ 倍） /B 6 8
提取时间（ h） /C3． 2 正交试验 分别称取丹参 50g 9 份，按正交试验表 选择的条件进行提取，合并提取液，滤过，精密移取滤过液
参项下丹参酮ⅡA 的含量测定方法： 取丹参粉末（ 过 3 号 筛） 约 0． 3g，精 密 称 定，置 具 塞 锥 形 瓶 中，精 密 加 入 甲 醇
50mL，称定重量，加热回流 1h，放冷，再称定重量，用甲醇补
足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。分别精密吸取对照
品溶液与供试品溶液各 5μL，注入液相色谱仪测定。
0． 5mL 置 25mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品 溶液。照 2． 1． 1 项下“丹参中的丹参酮ⅡA 测定”之条件测 定丹参酮ⅡA 的含量，并计算得膏率。醇提后的药渣继续用 10 倍量的水提取 1h，测定水提液中丹酚酸 B 的含量（ 含量 测定方法参见 2． 2． 1 项下） 。
综合考虑丹参酮ⅡA 的提取率、得膏率及醇提后药渣中丹 酚酸 B 的含量，用综合评分法综合评价以上因素对工艺确定 的影响，三者的权重分别为 0． 5、0． 3、0． 2，评分公式如下。
1． 1 对照品溶液的制备
精密称取丹参酮ⅡA 对照品约 16mg，置 50mL 棕色量瓶 中，加甲醇至刻度，摇匀； 精密量取 0． 5mL，至 10mL 棕色量
瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得 （ 每 1mL 中含丹参酮 ⅡA 16μg） 。
1． 2 色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 甲醇 － 水 （ 80 ∶
CAI Wei-wei
（ Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai 201203，China）
Abstract： Objective： To study water － soluble and alcohol － soluble components in Salviae Miltiorrhizae Radix so to obtain extracts with high purity and low rate of the solid products，and to enhance the yield and facilitate the preparation molding． Methods： The optimized conditions of alcohol － soluble and water － soluble active ingredients were selected by orthogonal tests，after which the times of extractions were investigated． And the verification experiments were carried out to prove the feasibility of the processes． Macroporous － resin adsorption technology was applied with the selection of the type of resin，the concentration of the extraction liquid and the washing agent to determine the refining conditions of water － soluble components． Results ： The determined preparation process of extracts of Salviae Miltiorrhizae Radix was as the following． The herb was extracted by six － fold ethanol for one hour，after which the extracts were concentrated and dried with vacuum conditions． Then the alcohol － soluble components were obtained． The residue of the alcohol extractions were extracted by eight － fold water for another hour． The water － extracted liquid was concentrated to about 1． 5g herb / mL as the loading sample after centrifugation，which were added to AB － 8 macroporous － resin column to refine until the positive outflow were detected． And then water was applied to wash the column until Molish reaction showed negative． 70% ethanol was used as the washing agent until no positive outflow was detected． The water － soluble extracts were obtained after the washing outflow was concentrated and dried with vacuum． Conclusions： The selected extracting and refining process increased the yield of active ingredients in Salviae Miltiorrhizae Radix，reduced the solid rates，which were favorable to the preparation molding process．
综合评分 M（ 100% ） = （ X / XMAX ） × 0． 5 + （ 1 － Y / YMAX ） × 0． 3 + （ Z / ZMAX ） × 0． 2
X： 丹参酮ⅡA 的提取率； XMAX ： 丹参酮ⅡA 的最高提取率； Y： 丹参醇提得膏率； YMAX： 丹参醇提最高得膏率； Z： 丹酚酸 B 的提取量； ZMAX ： 丹酚酸 B 的最高提取量。结果见表 3。
20） 为流动相； 检测波长为 270nm。理论板数按丹参酮ⅡA 峰计算应不低于 2000。结果见图 1。
丹参中丹参酮ⅡA含量测定结果见表 1。 表 1 丹参中丹参酮ⅡA的含量测定结果
序号
来源
丹参酮ⅡA 药典标准
含量（ % ）
上海 雷 允 上 药 业 西 区 有 限 公 司
不得少于
1
0． 2084
（ 小试）
药 / mL，离心后取上清液作为上样液，通过 AB － 8 大孔树脂至饱和。上样结束后，用去离子水洗脱，至 Molish 反应
呈阴性，停止洗脱。换 70% 乙醇为洗脱液洗脱，至洗脱液的三氯化铁 － 铁氰化钾试液反应呈阴性，合并洗脱液，
减压回收溶剂，减压干燥，粉碎，即得丹参水溶性提取物。结论： 优选的提取精制工艺，可提高药材中有效成分的
表 3 正交试验结果
评分因子
试验号 A
B
C
D X（ % ） Y（ % ） Z（ g）
11111
69． 74
2． 26 1． 33
21222
85． 22
5． 33 1． 23
31333
80． 51
4． 73 0． 95
42123
78． 84
8． 59 0． 99
52231
81． 14 10． 30 1． 08
分，通过树脂型号的选择、上样液浓度的考察、洗脱剂的优选等层析条件的考察确定了丹参精制的工艺条件。结
果： 确定丹参的提取精制工艺： 丹参药材用 6 倍量 95% 乙醇加热回流，提取 1h，减压回收溶剂，得稠浸膏减压干
燥，粉碎，即得丹参醇溶性提取物； 将丹参醇提后药渣用 8 倍量水煎煮 1h，提取液滤过，滤液减压浓缩至约 1． 5g 生
中 华 中 医 药
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学 刊
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中华中医药学刊
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地位，以丹酚酸 为 代 表，最 基 本 作 用 是 抗 氧 化 和 清 除 自 由