复方酮康唑发用洗剂中酮康唑和丙酸氯倍他索的含量测定

复方酮康唑发用洗剂中酮康唑和丙酸氯倍他索的含量测定庞继梅;梁月钊;黄园;陈晓军;梁霞;廖九明
【摘要】目的建立测定复方酮康唑发用洗剂中酮康唑和丙酸氯倍他索含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法采用Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(用40％氢氧化钠调pH至7.2)(70∶30);流速为1 mL· min-1;检测波长239 nm.结果酮康唑和丙酸氯倍他索分别在3.949 ～19.745μg、0.051 1 ～0.613 2 μg范围内呈良好的线性关系,r分别为0.999 6,0.999 9;加样回收率分别为99.31％,99.24％,RSD分别为0.80％,0.35％(n=6);仪器精密度和样品稳定性良好.结论该方法操作简便,结果准确,可以同时检测复方酮康唑发用洗剂中丙酸氯倍他索和酮康唑的含量,适用于该制剂的质量控制.
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2012(031)010
【总页数】3页(P1358-1360)
【关键词】酮康唑发用洗剂,复方;酮康唑;丙酸氯倍他索;含量测定;色谱法,高效液相【作者】庞继梅;梁月钊;黄园;陈晓军;梁霞;廖九明
【作者单位】广西博科药业有限公司,南宁530007;广西博科药业有限公司,南宁530007;广西博科药业有限公司,南宁530007;广西博科药业有限公司,南宁530007;广西博科药业有限公司,南宁530007;广西博科药业有限公司,南宁530007
【正文语种】中文
【中图分类】R286;R927.2
复方酮康唑发用洗剂主要有效成分是酮康唑、丙酸氯倍他索，属于抗真菌和抗炎止痒药。

为有效控制其制剂质量，采用专属性较强的高效液相色谱(HPLC)法测定制剂中酮康唑和丙酸氯倍他索的含量，方法简便易行，经方法学考察认为本法稳定、可靠，为控制该产品质量提供了依据。

1 仪器与试药
1.1 仪器岛津LC-2010A高效液相色谱仪，梅特勒-托利多AB265-S电子天平;阿修罗AXLC1820超纯水机。

1.2 试药酮康唑对照品(中国食品药品检定研究院，批号:100294-200602，纯度为99.9%);丙酸氯倍他索对照品(中国食品药品检定研究院，批号:10302-0001，纯度为99.8%);复方酮康唑发用洗剂(批准文号:国药准字H20074083，广西博科药业有限公司提供，规格:每瓶50mL，批号:101101，101102，101103);甲醇(色谱醇);水(自制超纯水)，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱:Agilent C18柱(4.6mm×250mm，5 μm);流动相为甲醇-0.01 mol·L－1 磷酸二氢钾溶液(用40%氢氧化钠调pH至7.2)(70∶30);检测波长239 nm;流速1.0mL·min－1;柱温30℃;进样量为10 μL。

2.2 溶液的配制
2.2.1 对照品溶液的制备精密称取丙酸氯倍他索对照品10.22 mg，置25mL量瓶中，加甲醇-水(70∶30)溶解并稀释至刻度，摇匀(0.408 8 mg·mL－1);精密称取酮康唑对照品12.93 mg，置10mL量瓶中，精密加入丙酸氯倍他索对照品溶液0.5mL，加甲醇-水(70∶30)稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液，酮康唑和丙酸氯倍他索的浓度分别为1.293 mg·mL－1、20.44 μg·mL－1。

2.2.2 供试品溶液的制备精密称取复方酮康唑发用洗剂2 g，置25mL量瓶中，加甲醇-水(70∶30)适量溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性样品溶液的制备按处方比例称取除酮康唑和丙酸氯倍他索外其余成分，按制法制成阴性制剂，按供试品溶液的制备方法制备阴性样品溶液。

2.3 专属性实验精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各10 μL，按上述色谱条件，注入高效液相色谱仪，色谱图见图1。

结果表明该色谱条件下酮康唑和丙酸氯倍他索分离良好，且阴性样品无干扰。

2.4 线性关系考察精密称取酮康唑对照品39.49 mg，置10mL 瓶中，加甲醇-水(70∶30)适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀;精密量取 0.5，1.0，1.5，2.0 和
2.5mL，分别置于 5mL 量瓶中，加甲醇-水(70∶30)稀释至刻度，摇匀，即得。

精密称取丙酸氯倍他索对照品10.22 mg，置100mL量瓶中，加甲醇-水(70∶30)适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀;精密量取0.5，1.0，2.0，4.0 和6.0mL，分别置于10mL 量瓶中，加甲醇-水(70∶30)至刻度，摇匀，即得。

分别精密吸取上述对照品溶液各10 μL，按上述色谱条件，注入高效液相色谱仪，测定，以峰面积积分值(Y)对进样量(X，μg)进行回归分析，得回归方程。

酮康
唑:Y=1.40×106X+9.01×105，r=0.999 6;丙酸氯倍他索:Y=1.89×106X－
9.45×102，r=0.999 9。

结果表明:酮康唑和丙酸氯倍他索分别在 3.949 ～19.745 μg，0.051 1～0.613 2 μg范围内线性关系良好，并且直线基本通过原点，可用单点外标法进行测定和计算。

图1 3种溶液的HPLC图谱A.阴性样品;B.混合对照品;C.供试品;1.丙酸氯倍他索;2.酮康唑
2.5 精密度实验取酮康唑和丙酸氯倍他索混合对照品溶液，按上述色谱条件重复进样5次，分别计算酮康唑和丙酸氯倍他索的吸收峰面积RSD分别为0.09%和0.07%。

表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性实验取同一供试品溶液，按上述色谱条件，分别在放置0，2，4，6，
8和 24 h后依法操作，测定峰面积，结果酮康唑、丙酸氯倍他索色谱峰积分值的RSD分别为0.41%，1.26%。

说明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.7 重复性实验取复方酮康唑发用洗剂(批号:101101)，按“供试品溶液的制备”
方法制备6份供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，结果酮康唑和丙酸氯倍他
索的平均含量分别为 15.435 mg·g－1(102.9%)、0.252 mg·g－1(100.8%);RSD 分别为0.29%、0.60%。

表明方法重复性良好。

2.8 加样回收率实验取已知含量(酮康唑:15.472 mg·g－1、丙酸氯倍他索:0.254 mg·g－1)的复方酮康唑发用洗剂(批号:101101)1 g，精密称定，再分别精密加入
酮康唑对照品(12，15，18 mg)及一定量(0.5，0.6，0.7mL)的丙酸氯倍他索对照
品溶液(0.408 8 mg·mL－1)，置 25mL 量瓶中，加入甲醇-水(70∶30)适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

按上述色谱条件进行测定，结果酮康唑平均回收率99.31%，RSD=0.80%，丙酸氯倍他索的平均回收率99.24%，RSD=0.35%。

见表1，2，表明方法回收率较好。

表1 酮康唑加样回收率实验结果取样量/g样品量加入量测得量mg回收率
/%1.010 15.63 12.53 28.29 101.04 0.988 15.29 12.43 27.65 99.44 0.999
15.46 12.48 27.93 99.92 1.028 15.91 15.19 31.08 99.87 1.038 16.06 15.17 31.02 99.62 1.033 15.98 15.18 31.09 99.54 1.006 15.56 17.92 33.03 97.49
0.996 15.41 18.07 33.36 99.34 1.001 15.49 18.03 33.26 98.56
表2 丙酸氯倍他索加样回收率实验结果取样量/g样品量加入量测得量mg回收
率/%1.010 0.256 5 0.204 4 0.459 5 99.32 0.988 0.251 0 0.204 4 0.452 5
98.58 0.999 0.253 7 0.204 4 0.455 7 98.83 1.028 0.261 1 0.245 3 0.504 9
99.39 1.038 0.263 7 0.245 3 0.507 1 99.23 1.033 0.262 4 0.245 3 0.506 3 99.43 1.006 0.255 5 0.286 2 0.543 9 100.77 0.996 0.253 0 0.286 2 0.534 6
98.39 1.001 0.254 3 0.286 2 0.538 2 99.20
2.9 样品测定按正文含量测定项下依法测定各批样品，以峰面积按外标一点法计
算样品中酮康唑和丙酸氯倍他索的含量。

结果见表3。

表3 样品含量测定结果批号酮康唑含量/(mg·g－1)标示量/%丙酸氯倍他索含量
/(mg·g－1)标示量/%101102 15.47 103.13 0.254 101.60 101103 15.25 101.67 0.251 100.40 101104 15.42 102.80 0.252 100.80
3 讨论
《中华人民共和国药典》2010年版二部中酮康唑、丙酸氯倍他索含量测定均采用HPLC法［1］，但流动相的配比较复杂，文献［2-3］中所用的流动相较简单，
但不能使复方酮康唑发用洗剂中的酮康唑、丙酸氯倍他索达到基线分离。

笔者采用甲醇-0.01 mol·L－1磷酸二氢钾溶液(用40%氢氧化钠调pH至7.2)(70∶30)作为复方酮康唑发用洗剂中同时测定酮康唑、丙酸氯倍他索的流动相，分离效果好，方法快速有效，结果准确性、可靠性高，为复方酮康唑发用洗剂的质量控制提供可靠的依据。

参考文献
［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［M］.北京:中国医药科技出版社，2010:101，1066.
［2］李亦蕾，钟震邦，郑萍，等.高效液相色谱法测定复方酮氯乳膏中酮康唑和丙酸氯倍他索的含量［J］.医药导报，2010，29(9):1216－1218.
［3］李旭梅，祝永明，涂厉标.HPLC法测定丙酸氯倍他索搽剂的含量［J］.中国
临床药学杂志，2007，16(1):51－52.。