全外显子测序技术原理

全外显子测序技术原理
全外显子测序技术（Whole Exome Sequencing，WES）是一种
用于测序一个个体的所有外显子的方法，它基于高通量测序技术，可高效地捕获并测序外显子组成的DNA序列。

全外显子测序技术的原理如下：
1. 样本准备：从需要测序的个体中提取DNA样本，并将其进
行适当处理，如切割成较小的片段。

2. 捕获外显子：将DNA样本与一组外显子引物（探针）混合，这些引物特异性地结合到外显子的DNA序列。

这一步是为了
捕获并富集外显子序列。

3. 清洗和纯化：对混合物进行洗涤步骤，以去除未结合的
DNA和杂质。

4. 文库构建：将捕获到的DNA片段进行核酸链扩增，并添加
适当的测序适配器，以便于后续的高通量测序。

5. 测序：使用高通量测序技术（如Illumina HiSeq或NovaSeq
平台）对文库中的DNA进行测序。

通过测序仪器发出的激光，可将测序适配器的序列逐个读取出来。

6. 数据分析：将得到的测序数据处理和分析，包括序列比对、重复序列标记、错配位点纠正等步骤。

然后利用生物信息学软件将测序读取的数据转化为DNA序列信息。

7. 变异检测和注释：对测序数据进行比对分析和变异检测，将测出的突变或基因变异与已知的基因数据库进行比对和注释，以确定哪些基因存在突变。

全外显子测序技术通过仅测序外显子而不测序整个基因组，可以大幅减少测序成本和数据存储需求。

同时，它也可以更集中地关注外显子区域，这些区域通常占据了大部分人类基因的功能变异。

因此，全外显子测序技术被广泛应用于基因变异研究、疾病诊断和个体化医学领域。