2022新高考 一轮复习 人教版 微生物的培养与应用 作业 湖南专用

2022届新高考一轮复习人教版微生物的培养与应用作业湖南专用
(时间：40分钟)
1.(2021·河北张家口质量监测)配制培养基时可根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求，加入某些物质或除去某些物质以抑制其他微生物的生长，也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性，设置特殊培养条件或在培养基中加入某种化学物质，从而筛选出特定的微生物，这种培养基叫做选择培养基。

根据有关内容回答以下问题：
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、________、________。

(2)某同学在做微生物实验时，不小心把大肠杆菌和酵母菌混合在了一起。

请回答有关分离得到纯度较高的大肠杆菌和酵母菌的实验的问题：
主要步骤：
①制备两种培养基：一种________的培养基，一种加青霉素的培养基。

两种培养基分别分成两份，依次标上A、A′、B、B′备用。

培养基应采用________法灭菌。

②分别向A、B培养基中接种________。

③接种后，放在恒温箱中培养3～4天。

试说明观察到的培养结果：。

④从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的两种目的菌种，分别接种到A′、B′培养基中。

⑤接种后，把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3～4天。

第④⑤两个步骤的目的是。

答案(1)灭菌倒平板(2)①加伊红美蓝高压蒸汽灭菌②混合菌③加伊红美蓝的培养基上有黑色大肠杆菌菌落，加青霉素的培养基上只有酵母菌菌落⑤获得纯度较高的大肠杆菌和酵母菌
解析(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

(2)青霉素不影响酵母菌的生长繁殖，但会抑制大肠杆菌的生长繁殖，大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝发生特定的颜色反应，使菌落呈黑色，所以应一种培养基中加入伊红美蓝，一种培养基中加入青霉素。

培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌。

分别向A、B培养基中接种混合菌，培养后加伊红美蓝的培养基上的黑
色菌落是大肠杆菌菌落，加青霉素的培养基上生长的菌落是酵母菌菌落。

从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的两种目的菌种，分别接种到A′、B′培养基中培养，目的是获得纯度较高的大肠杆菌和酵母菌。

2.(2021·江西南昌十中期末)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。

回答下列问题：
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。

在涂布接种前，随机取若干空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在4个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为29、39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为________。

(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。

操作时，接种环通过________灭菌。

(3)图A和B中，________表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果。

能够得到单菌落的是图示________。

(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。

结果发现振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。

分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。

(5)得到图B所示结果所用的接种工具是________。

测定土壤中细菌的数量时，一般稀释倍数为________倍。

答案(1)检测培养基灭菌是否合格 3.8×107(2)灼烧(3)A AB(4)溶解氧(5)涂布器104、105、106
解析(1)在微生物培养过程中应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将未接种的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底、合格；由题意知1 mL水样中的活菌数是(39＋38＋37)÷3÷0.1×100＝3.8×104(个)，每升水样中的活菌数是3.8×104×103＝3.8×107(个)。

(2)对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌。

(3)分析题图可知，图A表示用平板划线法接种培养后得到的结果，图B表示用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果，二者都能得到单菌落。

(4)振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，其原因是振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量，同时使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率。

(5)图B表示用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果，接种工具是涂布器。

测定土壤中细菌的数量时，为了保证培养基平板上菌落的数目为30～300，一般稀释倍数为104、105、106倍。

3.(2021·福建毕业班质检)硒是一种生命必需的微量元素。

亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用，土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒。

如图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。

回答下列问题。

(1)若②中出现________的现象，则说明培养基中的亚硒酸钠被细菌还原。

(2)梯度稀释的目的是________________________。

将细菌从④接种至⑤应采用________法。

(3)研究人员筛选出一种富硒菌株，现欲通过观察菌落来判断菌株对亚硒酸钠的耐受值，请将下列实验补充完整：
①配制系列浓度梯度的亚硒酸钠________(填“液体”或“固体”)培养基；
②向培养基中分别接种________的该菌株菌液，在适宜条件下培养一段时间；
③观察菌落的生长情况，________的培养基对应的最高亚硒酸钠浓度即为该菌株对亚硒酸钠的最高耐受值。

答案(1)培养基变红(2)使聚集在一起的细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落平板划线(3)①固体②等量③有菌落生长
解析(1)据题意可知，土壤中的一些富硒细菌可将亚硒酸钠还原为红色单质硒，因此若②中培养基变红，则说明培养基中的亚硒酸钠被细菌还原。

(2)梯度稀释的目的是使聚集在一起的细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落；从④中挑取菌种接种至⑤应采用平板划线法。

(3)由题意可知，研究人员筛选出了一种富硒菌株，若要通过观察菌落来判断菌株对亚硒酸钠的耐受值，步骤如下：①配制系列浓度梯度的亚硒酸钠固体培养基；②向培养基中分别接种等量的该菌株菌液，在适宜条件下培养一段时间；③观察菌落生长情况，有菌落生长的
培养基对应的最高亚硒酸钠浓度即为该菌株对亚硒酸钠的最高耐受值。

4.(2021·云南昆明三中测试)某些菌可将尿素分解成CO2和NH3。

欲从土壤中分离能分解尿素的细菌，某研究小组利用成分为KH2PO4、Na2HPO4、葡萄糖、琼脂、尿素的培养基进行了相关实验。

请回答：
(1)在土壤微生物的培养过程中，培养基中的KH2PO4与Na2HPO4除了可以作为________被细菌利用外，它们还具有的功能为________________________。

(2)该培养基对土壤中的微生物具有选择作用，理由是_____________________。

微生物能分解尿素的原因是其能合成________。

(3)为获得目的菌的单菌落，常对土壤样液做________处理。

为便于确认目的菌，可在培养基中加入________指示剂，接种并培养菌种后，可根据菌落周围________判断出该菌能分解尿素。

答案(1)无机盐维持培养基的pH相对稳定(2)尿素为该培养基中的唯一氮源，只有能以尿素为氮源的微生物才能在此培养基上生长、增殖脲酶(3)稀释酚红出现红色
解析(1)培养基中的KH2PO4与Na2HPO4除可作为无机盐被细菌利用外，还可构成缓冲液，维持培养基的pH相对稳定，利于微生物的生长与增殖。

(2)该培养基中的尿素为唯一氮源，只有能以尿素为氮源的微生物才能在此培养基上生长、增殖，所以该培养基对土壤中的微生物具有选择作用。

微生物能分解尿素的原因是其能合成脲酶，脲酶可将尿素分解为氨。

(3)为获得目的菌的单一菌落，常用无菌水对土壤样液做稀释处理。

尿素分解菌合成的脲酶可将尿素分解成氨，氨可使培养基的pH升高，进而使酚红指示剂变红，所以为便于确认目的菌，可在培养基中加入酚红指示剂，接种并培养菌种后，可根据菌落周围出现红色判断出该菌能分解尿素。

5.(2021·江苏无锡期末)土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收和利用的可溶性磷的优良解磷菌株Q。

如图1表示制备固体培养基过程中的某操作，图2是科研人员从土壤中分离出菌株Q的部分过程示意图。

请回答下列问题：
(1)图1所示操作称为________，待平板冷凝后需________，以防止________________________。

(2)图2所示接种方法是________________。

在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是38、42、40，则1 g土壤中的活菌数约为________。

(3)图3是某同学利用不同于图2的方法分离菌株Q的示意图。

下列对其操作及结果的叙述错误的有________。

图3
a.操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在⑤区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
(4)固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈(图4)，透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小。

下表是初步筛选出的三种优良解磷菌株。

图4
根据实验结果分析溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是________。

该菌种分离纯化后，常用________法进行长期保存。

答案 (1)倒平板 倒置 皿盖上的冷凝水落入培养基 (2)稀释涂布平板法 4×107 (3)a 、b 、c (4)B3－5－6 甘油管藏
解析 (1)图1所示操作称为倒平板，待平板冷凝后倒置，以防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染。

(2)图2所示接种方法是稀释涂布平板法。

称取1 g 土壤，按如图所示方法溶解和稀释后，在三个平板上分别接入0.1 mL 稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别是38、42、40，据此可计算出每克土样中的活
菌数为38＋42＋403
×103×100÷0.1 ＝4.0×107。

(3)图3是平板划线的接种操作。

操作前应用70%的乙醇溶液对接种人员的双手进行消毒处理，a 错误；划线操作时将菌种涂抹在培养基表面，b 错误；在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养都可获得所需菌落，c 错误；在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，整个过程需要对接种环进行6次灼烧，d 正确。

故选a 、b 、c 。

(4)根据实验原理中“透明圈直径(D )与菌落直径(d )的比值(D /d )代表微生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小”，结合表格中数据可以确定解磷能力最强的菌株是B3－5—6。

该菌种分离纯化后，常用甘油管藏法进行长期保存。

6.(2021·山东青岛期末)污水的有效处理是人民群众健康生活的保障。

请回答相关问题：
(1)微生物絮凝剂具有絮凝沉降废水的作用。

科研人员通过生物技术筛选稳定、高效的絮凝剂产生菌。

取少量活性污泥，向其中加入________制成菌液，将菌液接种到培养基中进行富集培养，再接种到________(填物理性质)培养基上，数天后，挑选出生长较好、表面光滑带黏性的________。

(2)初选菌在培养液中扩大培养后，测定其对高岭土悬液的絮凝效果，并与天然有机高分子絮凝剂作比较。

实验组加入含有初选菌的培养液，对照组应该设置两组，它们分别是 。

答案(1)无菌水固体菌落(2)加入天然有机高分子絮凝剂组，加入不含初选菌的培养液组
解析(1)制作菌液需要向活性污泥中加入无菌水，富集培养后为了获得目的菌株，需要将菌液接种到固体培养基中，挑选出目的菌落。

(2)由于需要与天然有机高分子絮凝剂作比较，所以一组对照组选择加入天然有机高分子絮凝剂，另一组加入不含初选菌的培养液作为空白对照。

7.(2021·广东七校联考)测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。

大肠杆菌在含有伊红美蓝的固体培养基(EMB琼脂培养基)上长出的菌落呈黑色。

滤膜法的大致流程如图所示：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB琼脂培养基上培养→统计菌落数目。

据图回答问题：
(1)待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为________________________。

(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB琼脂培养基上，这属于微生物培养中的________操作。

从功能上看，EMB琼脂培养基属于________培养基。

(3)无菌条件下将90 mL无菌水加到10 mL待测水样中，这样就将待测水样稀释了________倍，将稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB琼脂培养基上的菌落数为45，其中呈黑色的菌落数为5，则1 L待测水样中的大肠杆菌数目为________个。

(4)将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养，每隔12 h统计一次菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要________，这是因为。

(5)若要测定待测水样中酵母菌的数目，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径________(填“更大”或“更小”)的滤膜。

答案(1)无菌条件下，用无菌水冲洗滤杯，再次过滤(2)接种鉴别(3)10 500(4)少(或低)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(5)更大
解析(1)要将吸附在滤杯杯壁上的细菌集中到滤膜上，需在无菌条件下，用无菌水冲洗滤杯壁，再进行过滤。

(2)滤膜上有细菌，将滤膜紧贴在培养基上，相当于接种操作。

EMB琼脂培养基中含有伊红美蓝，伊红美蓝能鉴别大肠杆菌，该培养基为鉴别培养基。

(3)在无菌条件下将90 mL无菌水加到10 mL待测水样中，待测水样被稀释了10倍。

1 L待测水样中含有的大肠杆菌数目为5÷10×1 000＝500(个)。

(4)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用该方法测定的细菌数量比实际活菌数量要低。

(5)酵母菌为真核生物，大肠杆菌为原核生物，真核细胞的直径一般比原核细胞的大，因此若要测定酵母菌的数目，应选择孔径较大的滤膜。

8.(2021·安徽江南十校检测)土壤中含有多种微生物，某研究小组欲分离能在被Fe2＋污染的土壤环境下生存的希瓦氏菌，进行了相关研究。

回答下列问题：(1)配制培养基：加入牛肉膏、蛋白胨、琼脂、NaCl、H2O及________________等并灭菌；该培养基按功能划分，属于________培养基。

(2)分离希瓦氏菌并计数：将10 g土样溶于90 mL蒸馏水中，再稀释成多个倍数，取多个稀释倍数的土壤样品液0.1 mL分别接种到若干个上述培养基平板上，这样做的目的是________________________________；培养一段时间后，A、B研究员在稀释倍数为105的平板上得到的计数结果为：A涂布4个平板，统计的菌落数分别是150、178、259、310；B涂布4个平板，统计的菌落数分别是152、165、175、184。

则每克土壤样品中的希瓦氏菌数量最可能为________个。

(3)进一步纯化希瓦氏菌：采用平板划线法接种培养一段时间后，发现第一划线区域上不间断地长满了菌落，第二划线区域上几乎无菌落，分析出现此现象的原因可能是(答出两点)。

(4)研究人员还欲采用测定ATP含量的方法估算希瓦氏菌数，该方法的依据是________________________________________，此方法与显微镜直接计数法相比，得到的希瓦氏菌数目________(填“多”或“少”)，原因是_______________。

答案(1)含高浓度Fe2＋的溶液选择(2)获得菌落数量合适的平板，排除偶然因素造成的误差 1.69×108(3)第一次划线后接种环灼烧后未冷却就划线；第二次划线时未与第一区域接触(4)活细胞都能产生ATP，ATP含量可用于估算希瓦氏菌的数目少显微镜直接计数法统计的结果包括死细胞和活细胞的数
目
解析(1)本实验的目的是分离能在被Fe2＋污染的土壤环境下生存的希瓦氏菌，所以还应在培养基中添加含高浓度Fe2＋的溶液，按功能划分，该培养基属于选择培养基。

(2)取多个稀释倍数的土壤样品液各0.1 mL分别接种到若干个培养基平板上，这样做的目的是获得菌落数量合适的平板，排除偶然因素造成的误差；对微生物进行计数需要选择菌落数为30～300的平板进行计数，B的结果比较准
确，所以每克土壤样品中希瓦氏菌的数目为152＋165＋175＋184
4×0.1×10
5＝
1.69×108(个)。

(3)第一划线区域上不间断地长满了菌落，第二划线区域上几乎无菌落，可能是因为第一次划线后接种环灼烧后未冷却就划线，也可能是因为第二次划线时未与第一区域接触。

(4)活细胞都能产生ATP，可以采用测定ATP含量的方法估算希瓦氏菌数，死的细菌不能产生ATP，而显微镜直接计数法统计的结果包括死细胞和活细胞的数目，所以与显微镜直接计数法相比采用测定ATP含量的方法得到的希瓦氏菌数目少。

9.(2021·湖南名校联盟联考)黄曲霉毒素是由真菌产生的次级代谢产物，其中黄曲霉毒素B1化学性质稳定，具有很强的致癌性。

在自然界中存在许多种能降解黄曲霉毒素B1的微生物，人类可以从土壤中筛选出能高效降解黄曲霉毒素B1的微生物。

回答下列问题：
(1)黄曲霉毒素B1可引起细胞癌变，其属于________致癌因子。

细胞癌变的根本原因是______________________。

(2)为了筛选能降解黄曲霉毒素B1的微生物，需要配制以黄曲霉毒素B1为唯一碳源的培养基，从功能上讲，该培养基属于________。

接种培养后，在该培养基上形成的菌落不一定为一个种群，其原因是。

(3)用平板划线法纯化某菌株时，在第二次及后面几次划线时，总是从上一次所划线的末端开始划线，这样做的目的是________________________________。

接种操作需要在酒精灯火焰旁进行，其目的是________________________________。

(4)若在一定条件下培养基中的黄曲霉毒素B1能呈现出一定的颜色，能降解黄曲霉毒素B1的微生物将黄曲霉毒素B1降解会使颜色褪去，则可以通过测定__________________来确定不同菌株降解黄曲霉毒素B1能力的大小。

选择出能
高效降解黄曲霉毒素B1的微生物后，若要继续探究该微生物降解黄曲霉毒素B1时的最适温度，请写出实验思路：。

答案(1)化学原癌基因和抑癌基因发生突变(2)选择培养基在以黄曲霉毒素B1为唯一碳源的培养基上生长的微生物可能不止一种(3)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落防止环境中的杂菌污染(4)透明圈的大小(或直径)比较不同温度下等量的该微生物降解黄曲霉毒素B1的速率，速率最大时所对应的温度就是该微生物降解黄曲霉毒素B1的最适温度
解析(1)黄曲霉毒素B1属于微生物产生的化学物质，可引起细胞癌变，其属于化学致癌因子，细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生突变。

(2)为了筛选能降解黄曲霉毒素B1的微生物，需要配制以黄曲霉毒素B1为唯一碳源的培养基，从功能上讲，该培养基属于选择培养基。

接种培养后，由于以黄曲霉毒素B1为唯一碳源的微生物可能不止一种，所以在该培养基上形成的菌落不一定为一个种群。

(3)用平板划线法纯化某菌株时，在第二次及后面几次划线时，总是从上一次所划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐渐分离以便得到单一的菌体。

接种操作需要在酒精灯火焰旁进行，其目的是防止杂菌污染。

(4)由于能降解黄曲霉毒素B1的微生物将黄曲霉毒素B1降解会使培养基中黄曲霉毒素B1所呈现的颜色褪去，故可通过测定透明圈大小来确定不同菌株降解黄曲霉毒素B1能力的大小，透明圈越大，说明降解能力越强。

若要探究该微生物降解黄曲霉毒素B1时的最适温度，可以通过测定不同温度下等量的该微生物降解黄曲霉毒素B1的速率，速率最大时所对应的温度就是该微生物降解黄曲霉毒素B1的最适温度。