血清总胆固醇浓度测定

合集下载

血清总胆固醇测定实验报告

血清总胆固醇测定实验报告

血清总胆固醇测定实验报告血清总胆固醇测定实验报告胆固醇是一种脂类物质,它在人体中起着重要的生理作用。

然而,当胆固醇水平过高时,就会增加心血管疾病的风险。

因此,了解自己的胆固醇水平对于保持健康至关重要。

本实验旨在测定血清中的总胆固醇水平,并通过结果分析对参与者的健康状况进行评估。

实验材料和方法:1. 实验材料:- 血清样本- 高精度血清胆固醇测定试剂盒- 试剂盒使用说明书- 分光光度计- 定量移液器和移液枪- 试管和离心管2. 实验步骤:a. 收集参与者的血液样本,并将其离心分离血清。

b. 根据试剂盒使用说明书,准备所需试剂和标准品。

c. 将标准品和血清样本分别加入试管中,并按照说明书中的步骤进行试剂添加和混合。

d. 使用分光光度计测量各试管中的吸光度,并记录结果。

e. 根据标准曲线计算出各样本中的总胆固醇浓度。

实验结果:通过实验测定,我们得到了参与者血清中的总胆固醇浓度。

根据标准曲线和试剂盒提供的计算公式,我们可以将各样本的吸光度值转换为胆固醇浓度。

根据实验数据,我们将参与者的胆固醇水平分为以下几个等级:1. 理想范围:参与者的胆固醇水平在正常范围内,表明其心血管健康状况良好。

他们应继续保持健康的生活方式,包括均衡的饮食、适当的运动和定期体检。

2. 边缘范围:参与者的胆固醇水平略高于正常范围,但尚未达到危险水平。

他们应该注意饮食结构,减少高胆固醇食物的摄入,并增加运动量。

此外,定期监测胆固醇水平也是必要的。

3. 高风险范围:参与者的胆固醇水平明显升高,表明他们存在心血管疾病的风险。

他们应立即采取行动,改变生活方式,如低脂饮食、戒烟、减少酒精摄入等。

此外,医生可能会建议他们接受进一步的检查和治疗。

实验讨论:通过本实验,我们不仅可以测定参与者血清中的总胆固醇水平,还可以根据结果评估其心血管健康状况。

然而,需要注意的是,本实验只是初步评估,并不能替代专业医生的诊断和建议。

对于高风险范围的参与者,他们应该咨询医生,制定个性化的治疗方案。

血清总胆固醇TC测定操作规程

血清总胆固醇TC测定操作规程

血清总胆固醇TC测定操作规程.docx血清总胆固醇(TC)测定操作规程1. 目的本操作规程旨在规范血清总胆固醇(TC)的测定过程,确保检测结果的准确性和重复性。

2. 原理血清总胆固醇(TC)测定通常采用酶法,通过胆固醇酯酶将胆固醇酯水解为游离胆固醇,然后利用胆固醇氧化酶将游离胆固醇氧化为胆甾酮和H2O2,最后利用过氧化物酶将H2O2分解为2H2O和O2,同时产生颜色变化。

颜色的深浅与血清中胆固醇含量成正比,可通过比色法测定。

3. 试剂和材料酶试剂盒(含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶等)校准品和质控品血清样本蒸馏水移液枪及吸头比色杯恒温水浴箱自动生化分析仪或分光光度计4. 操作步骤4.1 准备工作确保所有试剂和样本均已在室温下平衡至25°C。

校准生化分析仪或分光光度计至适当的波长(通常为500-550nm)。

4.2 试剂准备根据试剂盒说明书,将酶试剂混合均匀,并预热至25°C。

4.3 样本处理取适量的血清样本,避免溶血和脂血样本。

如有必要,对样本进行离心,去除沉淀物。

4.4 加样使用移液枪准确取样,将血清样本加入比色杯中。

按照试剂盒说明书,加入等量的酶试剂至每个比色杯中。

4.5 反应将比色杯放入恒温水浴箱中,保持37°C反应一定时间(通常为5-10分钟)。

4.6 比色测定将反应后的比色杯放入自动生化分析仪或分光光度计中。

读取吸光度值,并根据标准曲线计算血清总胆固醇浓度。

5. 质量控制每次测定前,使用校准品进行仪器校准。

定期使用质控品进行质量控制,确保结果的准确性和稳定性。

6. 结果记录与报告记录所有测定结果,包括吸光度值、胆固醇浓度等。

根据医院或实验室的标准操作程序,编写并发布检测报告。

7. 安全注意事项操作时应穿戴适当的个人防护装备,如手套和实验服。

避免接触试剂和样本,尤其是避免吸入和摄入。

按照当地法规处理废弃物。

8. 维护和校准定期对生化分析仪或分光光度计进行维护和校准,确保仪器的准确性。

实验六 血清总胆固醇的测定(邻苯二甲醛法)

实验六 血清总胆固醇的测定(邻苯二甲醛法)

实验六血清总胆固醇的测定(邻苯二甲醛法)实验六血清总胆固醇的测定(邻苯二甲醛法)一、实验目的掌握邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇的原理和方法二、实验原理胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物,它不仅参与血浆蛋白的组成,而且也是细胞的必要结构成分,还可以转化成胆汁酸盐、肾上腺皮质激素和维生素D等。

胆固醇在体内以游离胆固醇及胆固醇酯两种形式存在,统称总胆固醇。

总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。

本实验采用前一种方法。

胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质,此物质在550nm 波长处有最大吸收,可用比色法作总胆固醇的定量测定。

胆固醇含量在400mg/100ml内,与OD值呈良好线性关系。

本法不必离心,颜色产物也比较稳定,胆红素及一般溶血对结果影响不大,严重溶血者才使结果偏高。

本法在20~37℃条件下显色,显色后5分钟开始至半小时以上颜色基本稳定。

温度过低,显色剂强度减弱;加混合酸后振摇过激能使产热过高,也可使显色减弱。

三、实验仪器(器材)722可见分光光度计、试管、移液枪等。

四、实验试剂和材料试剂:①邻苯二甲醛试剂:称取邻苯二甲醛50mg,以无水乙醇溶至50ml冷藏,有效期为一个半月。

②醋酸(90%):取冰醋酸90ml加入10ml蒸馏水中。

③混合酸:90%醋酸100ml与浓硫酸100ml混合。

④标准胆固醇贮液(1mg/ml):准确称取胆固醇100mg,以冰乙酸溶至100ml。

⑤标准胆固醇应用液(0.1mg/ml):将上述贮存液以冰乙酸稀释10倍: 即取10ml 用冰乙酸稀释至100ml。

材料:动物血清五、实验步骤1、制作标准曲线取5支试管编号后,按下表顺序加入试剂,加毕,温和混匀,20~37℃下静置10分钟,于550nm下比色测定,以总胆固醇量(mg%)为横坐标,OD值为纵坐标做出标准曲线。

2、样品测定取4支试管编号后,分别加入试剂,加毕,温和混匀,20~37℃下静置10分钟,于550nm下比色测定。

血清总胆固醇的测定实验报告

血清总胆固醇的测定实验报告

血清总胆固醇的测定实验报告实验报告
实验目的:
测定血清总胆固醇的浓度。

实验原理:
血清总胆固醇(total cholesterol, TC)可被酶促反应分析法(enzymatic reaction method)测定。

在反应液中加入胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶,使血清中的TC被水解成自由胆固醇和酯化胆固醇,同时释放出的氢过氧化物(H2O2)与4-氨基安替比林(4-AAP)和3,5-二溴-4-硝基苯磺酸(DHNS)在高温下作用形成紫色化合物,其吸光度与TC的浓度成正比。

实验原料:
1. TC标准品(10.0 mmol/L)
2. 4-AAP(0.5 mmol/L)
3. DHNS(0.65 mmol/L)
4. 胆固醇酯酶
5. 胆固醇氧化酶
6. 磷酸盐缓冲液(pH
7.4)
实验步骤:
1. 取血清标本1.0 mL,并用离心机离心10分钟,除去沉淀后得到澄清的血清。

2. 取1.0 mL澄清的血清加入10 μL胆固醇酯酶,放置于37℃恒温槽中加水浴反应30分钟。

3. 倒入10 μL胆固醇氧化酶,再加入2.0 mL磷酸盐缓冲液(pH 7.4),混匀。

4. 加入15 μL4-AAP和15 μLDHNS,混匀后在37℃恒温槽中加水浴反应10分钟。

5. 记录吸光度(A)值,以TC标准品作为对照,计算出血清中TC的浓度。

实验结果:
本实验测定血清总胆固醇的浓度为X mmol/L。

实验结论:
采用酶促反应分析法测定血清总胆固醇的浓度,结果可靠,该方法操作简便,对临床诊断有参考意义。

血清总胆固醇测定标准操作规程

血清总胆固醇测定标准操作规程

血清总胆固醇测定标准操作规程1.检验原理:(氧化酶法)血清中总胆固醇(TC )包括游离胆固醇(FC )和胆固醇酯(CE )两部分。

血清中胆固醇可被脂蛋白酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA ),胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成胆甾烯酮和过氧化氢,过氧化氢在4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠存在时,晶过氧化物酶(POD )催化,反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物,其颜色深浅与标本中TC 含量成正比。

胆固醇酯+22O H −−−→−胆固醇酯酶胆固醇+脂肪酸 胆固醇+2O −−−−→−胆固醇氧化酶胆甾烯酮+22O H 222O H +4-AA+对羟基苯甲酸钠−−→−POD红色醌类物质+422O H 2.试剂主要组成成分3.样本要求:新鲜无溶血血清。

在22~25℃保存8小时,2~8℃保48小时,-20℃可保存1年。

样本应避免反复冻融!4.检验方法;仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程) 5参考范围:6.检验结果的解释:6.1样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本。

6.2.单位换算:mg/dl=mmol/L×38.77.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊,或以水空白在500nm处吸光度大于0.080时不能使用。

8.试剂性能指标8.1试剂外观:无色透明或淡黄色液体,无悬浮物及沉淀。

8.2装量:不低于标识值。

8.3空白吸光度:在500nm处,光径1cm时,空白吸光度A≤0.0808.4线性区间:试剂的线性区间为[0.5-20.0]mmol/L,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900;b)[2.0-20.0]mmol/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。

8.5准确度:使用具有溯源性的标准品进行测定,实测值与标识值的相对偏差应在±10%内。

8.6分析灵敏度:在500nm处,光径1cm时,测量已知浓度样品换算成1mmol/L 的总胆固醇时,吸光度变化△Ammol/L≥0.0028.7批内精密度:CV≤4.0%8.8批间差:R≤6.0%8.9稳定性:(2-8)℃下,原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试,应满足1-8.7的要求。

总胆固醇实验报告

总胆固醇实验报告

实验名称:血清总胆固醇测定实验目的:通过本实验,掌握血清总胆固醇的测定方法,了解血清总胆固醇在临床诊断和预防治疗中的重要性。

实验原理:血清总胆固醇(Total Cholesterol,TC)是血液中所有胆固醇的总和,包括游离胆固醇和胆固醇酯。

血清总胆固醇的测定方法主要有酶法、比色法、沉淀法等。

本实验采用酶法测定血清总胆固醇,其原理是利用胆固醇酯酶(Cholesterol Esterase)将胆固醇酯水解为游离胆固醇,然后利用胆固醇氧化酶(Cholesterol Oxidase)将游离胆固醇氧化为胆汁酸,最后在碱性条件下与磷钼酸反应生成磷钼蓝,通过比色法测定其吸光度,从而计算出血清总胆固醇的浓度。

实验材料:1. 血清样品:取自健康志愿者,经离心分离后获得。

2. 胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、磷酸盐缓冲液、磷钼酸、抗坏血酸、硫酸铜、邻苯二甲酸氢钾、氯仿、无水乙醇等试剂。

3. 仪器:酶标仪、移液器、恒温水浴锅、离心机等。

实验步骤:1. 样品处理:取血清样品1.0ml,加入氯仿和无水乙醇(1:2,V/V)混合液5.0ml,涡旋混合,离心10分钟,取上清液待测。

2. 标准曲线绘制:将胆固醇标准品配制成一系列浓度梯度的标准溶液,分别加入胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、磷酸盐缓冲液、磷钼酸等试剂,按照实验步骤进行操作,测定吸光度。

以胆固醇浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

3. 样品测定:取处理后的血清样品,按照标准曲线绘制步骤进行操作,测定吸光度。

根据标准曲线,计算样品中血清总胆固醇的浓度。

实验结果:1. 标准曲线绘制:以胆固醇浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

结果显示,胆固醇浓度在0.5-10.0mg/dl范围内,吸光度与胆固醇浓度呈线性关系。

2. 样品测定:根据标准曲线,计算样品中血清总胆固醇的浓度为X mg/dl。

实验讨论:1. 血清总胆固醇是人体内重要的脂质成分,其浓度异常与心血管疾病、动脉粥样硬化等疾病密切相关。

血清总胆固醇测定操作规程

血清总胆固醇测定操作规程

血清总胆固醇测定操作规程《血清总胆固醇测定操作规程》一、目的本规程旨在规范血清总胆固醇测定的操作步骤,确保测定结果准确可靠。

二、适用范围本规程适用于各医疗机构进行血清总胆固醇测定的操作。

三、仪器与试剂1. 仪器:分光光度计2. 试剂:血清总胆固醇测定试剂盒四、操作步骤1. 准备工作a. 开机预热分光光度计,确保仪器处于工作状态。

b. 取出血清总胆固醇测定试剂盒,检查试剂有效期和存储条件。

c. 准备标准品和样本待测血清。

2. 操作流程a. 取出试剂盒中的标准品,按照说明书稀释成不同浓度。

b. 加标准品和待测血清分别加入试剂管中,混匀后置于恒温水浴中反应一定时间。

c. 反应结束后,使用分光光度计在特定波长下测定吸光值。

3. 结果计算a. 使用标准品的吸光值绘制标准曲线。

b. 读取待测血清的吸光值,根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。

五、结果判定根据患者血清总胆固醇的测定值,参照相关标准进行结果判定和医疗建议。

六、注意事项1. 操作人员应熟练掌握仪器和试剂使用方法,严格按照操作规程进行操作。

2. 试剂及仪器的质量控制应在每次实验前进行验证。

3. 操作过程中应注意个人防护,避免污染试剂和样本。

七、记录与保存1. 对每次测定的操作步骤、结果和质控记录进行详细记录,确保测定结果可追溯。

2. 相关记录资料应按规定保存,以备查。

八、附则对于特殊情况的处理和异常结果的分析,应根据实际情况进行相应操作,并记录详细的处理过程。

以上即为《血清总胆固醇测定操作规程》,希望操作人员严格按照规程执行,确保测定结果的准确性和可靠性。

血清总胆固醇测定

血清总胆固醇测定

如癌症晚期等。
【注意事项】
胆固醇:
▪ 标本采集:空腹12h采血,避免溶血。可用下列抗凝 剂,直至所列浓度对结果没有明显影响,EDTA 25mg/ml; 枸橼酸钠50mg/ml;草酸盐50mg/ml;肝素2mg/ml;氟化 物10mg/ml。
▪ 标本保存:血清胆固醇在室温(25℃)或2-8℃冷藏
可稳定7天,在-20℃密集冷冻可稳定数月,血浆中胆固醇 稳定性同血清。
实验五 血清总胆固醇测定
【实验目的】 ▪ 学习血清总胆固醇测定的实验原理。 ▪ 掌握总胆固醇的测定方法和操作技术。
【实验原理】
血清脂类包括甘油三酯、胆固醇、胆固醇 酯、磷脂、糖脂、游离脂肪酸。它们在血液中 以脂蛋白(脂和载脂蛋白的复合体)的形式存 在。用超速离心技术可把血浆脂蛋白分成四大 族:CM、VLDL、LDL、HDL,用电泳技术可 把血浆脂蛋白分成α-脂蛋白、前β-脂蛋白、β脂蛋白、CM。
【思考题】
▪ 一、简述双缩脲法测定蛋白质含量的原理 ▪ 二、简述血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的原理 ▪ 三、简述酶法测定血糖的原理 ▪ 四、Km的意义?
五、简述酶法测定血清总胆固醇的基本原理。
【试剂与器材】
▪ 1.总胆固醇测定试剂盒 ▪ 2.酶标板、板条、微量进样器、微量移液器 ▪ 3.生化培养箱、酶标仪 ▪ 4. 血清
【操作步骤】
1. 配制工作试剂: R1取4.5ml,R2取0.5ml,置于10ml玻璃试管中
2. 取酶标板1块,板条1条,按下表操作:
3.置于37℃生化培养箱10mi源自,492nm波长处在酶标仪上读 取各管的吸光度A。
血清中总胆固醇(TC)包括游离胆固醇 FC和胆固醇酯(CE)两部分。胆固醇酯可 被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪 酸(FFA),胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化 作用下生成Δ4-胆甾烯酮和过氧化氢,H2O2 在4-氨基安替比林和酚存在时,经过氧化物 酶催化,反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌 类化合物,其颜色深浅与标本中TC含量成正 比。

血清总胆固醇测定实验报告

血清总胆固醇测定实验报告

血清总胆固醇测定实验报告背景介绍:总胆固醇(TC)是指血浆中所有脂蛋白的胆固醇总和,包括低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)。

总胆固醇水平的高低与心血管疾病的发生密切相关,因此对其进行准确测定具有重要的临床意义。

实验目的:通过本实验,掌握血清总胆固醇的测定方法,了解其在临床诊断中的应用。

实验原理:本实验采用酶法测定血清总胆固醇,其原理为将胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶加入样本中,将胆固醇和脂蛋白水解为游离胆固醇和过氧化物,再由过氧化物与酚类物质发生反应,生成有色产物,最后通过比色计测定其吸光度,从而计算出总胆固醇的含量。

实验步骤:1. 取血清标本,离心分离血清。

2. 用标准吸光度计预热,设置波长为500nm。

3. 取适量样本和对照品,加入试剂A和试剂B,混匀后在37°C恒温水浴中反应15分钟。

4. 加入试剂C混匀,再在37°C恒温水浴中反应5分钟。

5. 用比色计在波长为500nm处对样本和对照品吸光度,计算总胆固醇含量。

实验结果:样本A吸光度为0.6,对照品吸光度为0.3,根据标准曲线计算出样本A的总胆固醇含量为5.0mmol/L。

样本B吸光度为0.7,对照品吸光度为0.4,计算出样本B的总胆固醇含量为6.0mmol/L。

实验结论:根据上述实验结果,样本A的总胆固醇含量正常,而样本B的总胆固醇含量超标,提示可能存在心血管疾病的风险。

因此,血清总胆固醇的测定对于心血管疾病的筛查和诊断具有重要意义,有助于及时采取预防和治疗措施。

总结:通过本次实验,我们掌握了血清总胆固醇的测定方法及其临床意义,了解了其在心血管疾病中的重要性。

在临床实践中,我们应该重视血清总胆固醇的监测,及时发现异常情况并采取相应的干预措施,以保障患者的健康。

血清总胆固醇测定

血清总胆固醇测定

加毕,混匀,静置10分钟后,以对照管校0于550nm测 定吸光值,从标准曲线中查出相应的浓度。
• 吸光度与液层厚度和溶液浓度的乘积成正比,称
为朗伯—比尔定律,简称比尔定律,即光的吸收 定律。
• 吸光系数的大小,取决于物质(溶质、溶剂)的本性和光的波
长。 1. 物质不同,则吸光系数不同,所以吸光系数可作为物质的 特性常数。在分光光度法中,常用摩尔吸光系数ε来衡量显 色反应的灵敏度,ε值越大,灵敏度越高。 2. 溶剂不同,其吸光系数亦不同, 3. 光的波长不同,其吸光系数亦不同。如将不同波长的单色 光依次通过被分析物质,分别测得吸光度,然后绘制吸光 度—波长曲线,称为吸收曲线(absorption curve),吸收曲 线上有极大值 的部分,称为吸收峰。吸收峰所对应的波长, 称为最大吸收波长,以符号λmax表示 ,这是物质定性的依 据之一。 4.单色光的纯度也影响吸光系数。单色光越纯,即经单色器分 光后的波长范围越窄,其吸光系数越大。


பைடு நூலகம்

血清总胆固醇的测定(邻苯二 甲醛法)
一、试验目的
• 学习分光光度计的原理及操作 • 学习用分光光度法测定胆固醇含量及
标准曲线的制作
二.
实验原理
• 根据物质对光的吸收特征和吸收强度,对物质进
行定性和定量的分析方法,称为分光光度法 (spectrophotometry)。该法具有一定的灵敏度和准 确度,分析手续较简便快速,仪器设备也不复杂, 故应用很广。

四、操作步骤 五.实验结果 六.结果讨论
管号
0
1 0.3
2 0.2
3 0.1
4 0
X(样品) 0.3
醋酸 0.4 液(毫 升) 标准胆 0

血清总胆固醇(TC)测定操作规程

血清总胆固醇(TC)测定操作规程

血清总胆固醇(TC)测定操作规程A1.2 原理血清中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇(Chol),后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成△4—胆甾烯酮,并产生过氧化氢,再经过氧化物酶(POD)催化4—氨基安替比林与酚(三者合称PAP),生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。

醌亚胺的最大吸收在500nm 左右,吸光度与标本中总胆固醇呈正比。

反应式如下:胆固醇酯+H2O CEH 胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+02 CHOD △4-胆甾烯酮十H2022H202+4-氨基安替比林+酚POD 昆亚胺+4H2OA1.3.1 受检者(体检对象或病人)的准备:除总胆固醇不一定用空腹血外,测定甘油三酯、脂蛋白与载脂蛋白的病人必须空腹12h,不饮酒24h后采集血样。

对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯,近期内体重稳定,无急性病、外伤、手术等意外情况。

妊娠后期各项血脂都会增高,应在产后或终止哺乳后3个月检验才能反映其基本血脂水平。

注意有无应用影响血脂的药物,如降血脂药、避孕药、噻嗪类利尿剂、β受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压剂、降糖药、胰岛素及其他激素制剂等,检验以前应根据所用药物的特性停止用药数天或数周,否则应记录用药情况。

对体检对象及做前瞻性观察者,还应注意采血的季节,因为血脂水平有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24h内不作剧烈运动。

A1.3.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布,因此影响血脂水平。

例如站立5 min 可使血脂浓度提高5%,15 min提高16%,故在采血前至少应***5min。

一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1 min,穿刺成功后立即松开止血带。

静脉阻滞5min可使甘油三酯增高10%~15%。

A1. 3.3 抗凝剂:我国多用血清作血脂检验。

如用血浆,多主张用EDTANa2(1mg/mL)抗凝。

实验四血清总胆固醇的测定(硫磷铁法)

实验四血清总胆固醇的测定(硫磷铁法)

实验四血清总胆固醇的测定(硫磷铁法)[目的要求]掌握血清总胆固醇测定原理、方法及其临床意义。

[临床意义]胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物,主要来自体内合成,一部分直接从食物中摄取。

胆固醇在体内不仅参与血浆脂蛋白的合成,而且可转变为胆汁酸盐、维生素D3及某些类固醇激素(性激素、肾上皮质激素等)。

血液中的胆固醇包括游离胆固醇及其酯两种,二者总称“总胆固醇”,其中胆固醇酯占70~75%。

糖尿病昏迷患者几乎都有血清胆固醇浓度的增加。

胆固醇增加还见于动脉粥样硬化、肾病综合症,总胆管阻塞及粘液性水肿。

粘液性水肿胆固醇增加的主要原因是甲状腺机能减退而垂体前叶有继发性活动过度所致。

其它如肥大性骨关节炎、老年性白内障、牛皮癣等,血清胆固醇浓度间或也有增加。

在恶性贫血、溶血性贫血以及甲状腺机能亢进时,血清胆固醇含量降低。

其它如严重肝病、感染、营养不良等情况,胆固醇总量常见降低。

近年来大量文献报导表明,血胆固醇含量过高与动脉粥样硬化的发病机制有关,更引起了人们的注意。

[实验原理]用无水乙醇提取血清中胆固醇同时沉淀蛋白质,向提取液中加入硫磷铁显色剂,胆固醇与浓硫酸及三价铁作用,生成比较稳定的紫红色化合物,与同样处理的标准液进行比色,求得其含量。

[标本]人或动物血清。

[器材]1.试管及试管架;2.刻度吸量管或移液器;3.离心机;4.721型分光光度计。

[试剂]1.胆固醇标准贮存液(1.0ml≈1.Omg):精确称取干燥重结晶胆固醇lOOmg,溶于无水乙醇内(稍加温助溶),然后移入lOOml容量瓶中,加无水乙醇至刻度,贮于棕色瓶中,密塞瓶口置4℃冰箱内保存。

配制应用液时,应将其预先恢复至室温。

2.胆固醇标准应用液(1ml≈0.05mg):取上述贮存液5ml于100ml容量瓶中,加无水乙醇至刻度,再加蒸馏水2ml,贮于棕色瓶内,置冰箱中保存,用时将其恢复至室温。

3.铁贮存液:称取三氯化铁(Fecl3•6H2O)2.5克溶于87%浓磷酸内,并加至100ml,贮于棕色瓶中.此液在室温可长期保存。

04血清总胆固醇浓度测定

04血清总胆固醇浓度测定

混匀后,37℃水浴5 min,立即用分光光度计比色,于 505 nm波长处以空白管调零,读出各管吸光度
测定管吸光度 ×胆固醇标准液浓度 血清总胆固醇= 标准管吸光度 (200 mg/dl)
【参考范围】 正常人血清总胆固醇:3.1-5.95 mmol/L(120-230 mg/dl)
721分光光度计的使用
[原理]
分光光度计工作原理:物质对不同波长光的吸收具有选择 性,不同的物质都有各自的吸收光带。当光色散后的光谱 通过某一溶液时,其中某些波长的光线就会被溶液吸收。 在一定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度 有一定的比例关系,即符合朗伯-比耳定律 (Lambert-Beer lg(Io/I)=abc
式中,T为透过率,Io为入射光强度,I为透射光强度, A为消光值(吸光度),a为吸收系数,b为溶液的光径长度, c为溶液的浓度。从以上公式可以看出,当入射光、吸收 系数和溶液厚度一定时,透光率是根据溶液的浓度而变化 的。
[步骤] 1、取干燥试管3支,编号,按下表操作: 血清 标准液 蒸馏水 R试剂 空白管 - - 20µl 2ml 标准管 - 20µl - 2ml 测定管 20µl - - 2ml
1.打开电源开关,预热仪器20 min。 2.选定所需波长,灵敏度档调至1档。 3.打开暗盒盖,调0(用0透光率旋钮将指针调节到透光率0处)。 4.关上暗盒盖,调100%(用100%透光率旋钮将指针调节到透光 率100%处)。重复3-4步骤数次,直至指针稳定。 5.将装有空白液、标准液、待测液的比色皿依次放入比色架中, 盖上暗盒盖,此时光路开启,使空白液位于光路部分,用 100%透光率调节旋钮使电表指针指在透光率100%位置(即 A=0.00)。 6.将标准液、待测液分别推入光路,读取吸光度值,读罢将暗 盒盖打开。 注意事项:在使用过程中应注意保护比色皿的透光面,避免其 受损或产生划痕,影响透光率。

血清总胆固醇的测定实验报告

血清总胆固醇的测定实验报告

血清总胆固醇的测定实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过测定血清中的总胆固醇水平,了解被检测者的心血管健康状况,为预防和治疗心血管疾病提供参考依据。

二、实验原理。

血清总胆固醇是指血液中所有脂蛋白和游离胆固醇的总和,通常以毫摩尔/升(mmol/L)为单位进行测定。

在实验室中,我们采用酶法测定血清总胆固醇,即通过酶的催化作用将胆固醇氧化成酮醇,然后通过比色法测定产生的色素来确定总胆固醇的浓度。

三、实验步骤。

1. 采集被检测者的静脉血样本,放置于离心管中,离心10分钟后取上清液。

2. 将上清液放入试剂盒中,按照说明书的操作步骤进行样本处理和试剂添加。

3. 使用分光光度计测定样本吸光度,根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。

四、实验结果。

根据实验测定,被检测者的血清总胆固醇水平为X mmol/L。

五、实验分析。

根据血清总胆固醇的测定结果,结合被检测者的年龄、性别、生活方式等因素,可以初步判断其心血管健康状况。

若总胆固醇水平偏高,可能存在心血管疾病的风险,需要进一步进行相关检查和干预措施。

若总胆固醇水平正常,被检测者的心血管健康状况良好。

六、实验注意事项。

1. 在采集血样和进行实验操作时,要严格遵守无菌操作规范,确保实验结果的准确性和可靠性。

2. 实验过程中要注意化学试剂的使用安全,避免接触皮肤和吸入气体,必要时戴上防护手套和口罩。

3. 实验设备的使用和维护要符合相关规定,保证设备的正常运转和数据的准确性。

七、实验结论。

通过本次实验测定,我们成功得出了被检测者的血清总胆固醇水平,并对其心血管健康状况进行了初步分析。

实验结果对于预防和治疗心血管疾病具有一定的参考价值。

八、实验展望。

在今后的实验中,我们将进一步完善实验方法,提高测定精度和准确性,为更多人群的心血管健康提供更多的数据支持和科学依据。

以上就是本次血清总胆固醇的测定实验报告,希望对大家有所帮助。

血清胆固醇测定实验报告

血清胆固醇测定实验报告

血清胆固醇测定实验报告引言胆固醇是一种脂类物质,它在我们的身体中起着重要的生理功能。

然而,高胆固醇水平与心血管疾病等许多健康问题相关联。

因此,准确测定血清中的胆固醇水平对我们的健康至关重要。

本实验旨在介绍一种常用的方法来测定血清中的胆固醇浓度。

实验目的本实验的目的是测定血清中的胆固醇浓度。

通过使用一种简单而又可靠的实验方法,我们将能够获得准确的结果。

实验原理血清中的胆固醇可以通过一种酶法测定。

在这种方法中,我们使用一种叫做胆固醇酸酯酶的酶来催化胆固醇的水解反应。

在反应中,胆固醇酸酯被水解成为胆固醇和脂肪酸。

通过测定产生的脂肪酸的浓度,我们可以间接地确定血清中胆固醇的浓度。

实验步骤1.首先,准备实验所需的材料和试剂,包括血清样本、胆固醇酸酯酶、试剂盒中提供的标准溶液等。

2.将试剂盒中提供的标准溶液分别加入试管中,每个标准溶液加入不同浓度。

3.分别取一定量的血清样本加入试管中。

4.加入一定量的胆固醇酸酯酶。

5.将试管放置在恒温水浴中,在37摄氏度下反应一定时间。

6.反应结束后,用甲醛试剂停止反应,并加入硫酸试剂。

7.将试管摇匀,使反应液混合均匀。

8.使用分光光度计测定吸光度。

根据吸光度和标准曲线,计算出血清样本中胆固醇的浓度。

实验结果通过实验测定,我们得到了血清样本中胆固醇的浓度。

根据不同样本的吸光度和标准曲线,我们可以得出血清样本中胆固醇的浓度范围。

实验讨论本实验使用了一种常用的酶法来测定血清中的胆固醇浓度。

该方法简单而又可靠,可以在临床实验室中广泛应用。

然而,该方法也存在一些局限性。

例如,反应时间和温度对结果的影响可能会导致一定的误差。

此外,该方法对于某些特殊样本可能不适用,需要进一步研究和改进。

结论通过本实验,我们成功地测定了血清样本中胆固醇的浓度。

准确地测定血清中的胆固醇水平对于评估健康状况和预防心血管疾病非常重要。

本实验提供了一种简单而又可靠的方法来测定血清中的胆固醇浓度,为临床实验室提供了有益的参考。

血清总胆固醇测定实验报告

血清总胆固醇测定实验报告

血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过测定血清中的总胆固醇含量,了解被测者的血脂代谢情况,为临床诊断和治疗提供参考依据。

二、实验原理。

总胆固醇是人体内的一种脂质物质,主要存在于血浆中。

在正常情况下,总胆固醇主要由低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)三部分组成。

总胆固醇的测定是通过酶法或化学法测定血清中总胆固醇的含量,以反映被测者的血脂代谢情况。

三、实验步骤。

1. 采集被测者静脉血标本,禁食12小时以上。

2. 将采集的血清标本离心,取上清液用于测定。

3. 使用生化分析仪器,按照厂家提供的试剂盒说明书进行总胆固醇的测定。

4. 记录测定结果,并进行数据分析。

四、实验结果。

经测定,被测者血清中总胆固醇含量为XXX mmol/L(参考范围,2.85-5.69 mmol/L),属于正常范围。

五、实验分析。

根据实验结果,被测者的总胆固醇含量处于正常范围内,说明其血脂代谢情况良好。

但在临床实际操作中,还需结合被测者的其他临床指标进行综合分析,以全面了解其健康状况。

六、实验注意事项。

1. 采集血样时需遵守无菌操作规范,避免污染。

2. 实验过程中需严格按照试剂盒说明书进行操作,避免误差。

3. 实验结束后,及时清洗和消毒实验用具,保持实验环境整洁。

七、实验总结。

本次实验通过测定血清总胆固醇含量,了解了被测者的血脂代谢情况。

实验结果显示,被测者的总胆固醇含量处于正常范围内,说明其血脂代谢情况良好。

实验过程中,我们严格遵守了操作规范,保证了实验结果的准确性和可靠性。

实验结果为临床诊断和治疗提供了重要参考依据。

八、参考文献。

[1] XXX. 血脂代谢异常与心血管疾病的关系[J]. 中国循证心血管医学杂志, 2018, 20(3): 365-368.[2] XXX. 血清总胆固醇测定技术规范与质量控制[J]. 中国检验医学, 2019, 42(5): 689-692.以上为本次血清总胆固醇测定实验的报告内容,如有不足之处,欢迎批评指正。

血清总胆固醇(TC)的测定

血清总胆固醇(TC)的测定

血清总胆固醇(TC)的测定发表时间:2010-07-15T11:30:43.543Z 来源:《中外健康文摘》2010年第10期供稿作者:陈福刚[导读] 胆固醇(cholesterol)是体内主要脂类之一。

人体内胆固醇来源除由食物摄取外,也可体内合成。

陈福刚(黑龙江省克山县第一人民医院黑龙江克山 161600)【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)10-0036-01【关键词】血清胆固醇测定胆固醇(cholesterol)是体内主要脂类之一。

人体内胆固醇来源除由食物摄取外,也可体内合成。

人体除脑组织外,几乎所有组织都合成胆固醇,其中肝脏是合成胆固醇的主要场所。

肝脏不仅是合成胆固醇的主要场所,也是调节血浆胆固醇水平和胆固醇脂与游离胆固醇比例的场所。

血中胆固醇有两种形式,一种是和脂肪酸结合的,称为胆固醇酯,另一种是未和脂肪酸结合的,称为游离胆固醇。

血浆脂蛋白分子中的游离胆固醇,可以通过卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)催化作用而接受卵磷脂β-碳位上脂酰基而生成胆固醇酯。

LCAT是在肝脏中合成,因此,肝细胞损伤时,血浆胆固醇酯化作用减弱,血浆中的胆固醇酯浓度下降。

正常人血浆中胆固醇约1/3以a-脂蛋白的形式转运,2/3以β-脂蛋白形式转运,TC=HDL-C+LDL-C+VLDL-C。

胆固醇是体内某些激素、维生素和胆汁酸等合成的原料。

肝脏中的胆固醇,约80%直接转化为胆酸,胆酸又与甘氨酸或牛磺酸生成胆汁酸,随胆汁进入肠内,对肠内脂类的消化吸收起重要作用。

肾上腺皮质内的胆固醇,经酶催化可转变成肾上腺皮质激素和性激素。

此外,胆固醇在人体皮肤内可以氧化脱氢生成7-脱氢胆固醇,再经紫外线照射生成维生素D3,它能促进钙、磷的吸收,有利于骨骼的生成。

血清中胆固醇的浓度可作为脂类代谢的指标,但脂类代谢又常与糖类和激素的代谢密切相关,故在其他物质代谢异常时也可影响血清胆固醇的浓度。

测定血清胆固醇含量的原理

测定血清胆固醇含量的原理

测定血清胆固醇含量的原理
测定血清胆固醇含量的主要原理是通过测量血液中胆固醇分子的浓度来确定胆固醇水平。

以下是常见的测定方法之一:
1. 酶法(酶法测定血清总胆固醇):这是一种常用的测定方法。

它基于酶的反应,将胆固醇酯水解为游离胆固醇,并与酶反应生成酰胆固醇酶蓝色产物。

通过测量产物的吸光度,可以确定胆固醇的浓度。

2. 毛细管电泳法:这种方法利用胆固醇与胆固醇酯在电场中的迁移速度不同的特性。

通过测量胆固醇和胆固醇酯的迁移时间,可以计算出胆固醇的浓度。

3. 红外光谱法:这种方法利用胆固醇分子在特定波长的红外光下的吸收特性。

通过测量吸收光的强度,可以确定胆固醇的浓度。

需要注意的是,测定胆固醇含量的方法可能因实验室的设备和技术水平而有所不同。

因此,在具体的实验室环境中可能会使用不同的方法来测定血清胆固醇含量。

血清总胆固醇测定实验注意事项

血清总胆固醇测定实验注意事项

血清总胆固醇测定实验注意事项
血清总胆固醇测定实验是一种常见的医学检查项目,用于评估一个人是否患有高胆固醇症。

在进行这项实验之前,需要注意以下几点事项:
1. 检查前禁食。

在进行血清总胆固醇测定实验之前,需要进行至少8小时的禁食。

这是因为食物摄入会影响血液中的胆固醇水平,从而影响检查结果的准确性。

2. 禁用一些药物。

在进行血清总胆固醇测定实验前,需要避免使用一些药物,如胆固醇降低药物、维生素C等。

这些药物会影响血液中的胆固醇水平,从而影响检查结果的准确性。

3. 注意身体状态。

在进行血清总胆固醇测定实验前,需要注意身体状态。

如有感冒、发热等症状,需要等症状消失后再进行检查,否则会影响检查结果的准确性。

4. 遵守医生的指示。

在进行血清总胆固醇测定实验前,需要遵守医生的指示,按照医生的要求进行检查。

总之,在进行血清总胆固醇测定实验前,需要注意以上事项以确保检查结果的准确性。

血清中总胆固醇浓度的氧化酶法

血清中总胆固醇浓度的氧化酶法

血清中总胆固醇浓度的氧化酶法血清中的总胆固醇浓度测定,一听这个名字是不是有点让人摸不着头脑?说实话,咱们日常生活中谁会真的去关注自己的胆固醇水平呢?除非你是那种健康达人,或者医生建议你去做个检查,不然估计没人会刻意去想这些事。

胆固醇就像是人体里的“油条”一样,没它不行,但吃多了也会有麻烦。

你想啊,咱们的血液里面如果胆固醇过多,就可能塞住血管,搞得心脏、脑袋这些重要的“器官”供血不畅,最后酿成大祸。

为了弄清楚血液里到底有多少胆固醇,医生就需要用一些方法来测量,而其中一种常见的就是氧化酶法。

这个氧化酶法,听起来是不是有点复杂?其实它的原理并不神秘。

咱们先来想象一个简单的场景:你在厨房里做饭,突然锅里的油多了点,油冒烟了,锅底就会积聚一层黑乎乎的东西,最后要洗掉才能继续用。

这就是氧化过程的一个形象比喻。

血液中的胆固醇,经过一种叫做胆固醇氧化酶的“催化剂”作用,也会发生类似的氧化反应。

氧化酶就像是一个“小帮手”,帮忙把胆固醇转换成一种容易被检测到的物质。

简单说,胆固醇氧化酶法就是通过检测胆固醇被氧化后产生的产物,来估算血清中总胆固醇的浓度。

要知道,这个方法可是非常精妙的。

实验室里的小小试管里,放入了胆固醇氧化酶和其他一堆化学物质,这些东西就像是精心安排的一场舞蹈,大家齐心协力,最后得出的结果就能告诉你血液中到底有多少胆固醇。

这其中,胆固醇氧化酶起到了关键作用,就像是舞台上的主角,没有它,其他一切都无法顺利进行。

因为它的作用是将胆固醇转化为另一种化合物,而这种化合物在反应中产生颜色变化。

我们通过测量颜色的深浅,来判断胆固醇的浓度。

颜色越深,说明胆固醇浓度越高;颜色浅,则说明浓度较低。

说到这里,你是不是有点理解了?这种方法为什么这么受欢迎了吧!它不仅快速,而且准确。

比起那些需要繁琐仪器和复杂操作的传统方法,氧化酶法简单得多,谁都能在实验室里轻松操作,甚至大多数医院的体检中心都会用它来帮大家测量胆固醇。

但话又说回来,任何事情都不是一成不变的,氧化酶法也有它的小小“弱点”。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

注意事项
1. 煮沸显色经冷却后,应及时比色。 2. 注意试管洁净干燥,加量务必准确。 3. 水浴时注意打开水浴箱盖,以免水汽进
入试管。 4. 酸性试剂中酸的含量较浓,要小心使
用。 5. 尿液中尿素也可用此法测定,但因浓度
高,需先用去离子水作50倍以上稀释。
成分中去掉胆固醇酯酶即可。
第3次实验-2 二乙酰一肟法测定血清尿素
实验原理
二乙酰一肟 + H2O H+ 二乙酰+羟胺
二乙酰 + 尿素
H+

4,5-二甲基-2氧咪唑化合物
(红色,520nm波长)
操作步骤
1 按下表加样(试管先做好标记)
加入物(μl) 空白管 标准管
血清


尿素标准液 —
20
蒸馏水
20

试剂1
1000
1000
试剂2
1000
1000
测定管 20 — —
1000 1000
2 混匀,沸水浴15分钟 3 常温冷却5分钟 4 520nm波长比色,空白管调零,读出吸光度 5 计算:
血清尿素(mmol/L)= A测定 ×10 mmol/L A标准
参考范围:兔血清尿素2.86~8.20 mmol/L
第3次实验-1
胆固醇氧化酶法 测定血清总胆固醇
实验原理
游离胆固醇(FC) 血清总胆固醇(TC)
胆固醇酯(CE)
1. 胆固醇酯
胆固醇酯酶
37℃水浴
游离胆固醇 + 游离脂肪酸
胆固醇氧化酶
2. 胆固醇
Δ4-胆甾烯酮+ H2O2
3. 2H2O2+4-氨基安替比林+酚
过氧化物酶
37℃水浴
苯醌亚胺非那腙+4H2O
1000
• 混匀,37oC保温5分钟
• 在试管中加入1ml蒸馏水
• 500nm波长比色,空白管调零,读出吸光度
• 计算:
血清TC(mmol/L)= A测定 ×5.17mmol/L
A标准
2
兔血清TC参考值:0.77~2.00 mmol/L
注意事项
1. 最后加酶试剂,各管反应时间应一致; 2.试管在操作前尽量保持干燥; 3.比色应及时,30min内完成; 4.若需检测游离胆固醇浓度,将酶试剂
(红色,500nm波长)
计算:
测定管浓度 测定管吸光度 =
标准管浓度 标准管吸光度
测定管吸光度
ห้องสมุดไป่ตู้
测定管浓度=
× 标准液浓度
标准管吸光度
(血清TC)
操作步骤
1 按下表加样(试管应做好标记)
加入物(μl) 空白管
血清

胆固醇标准液 —
蒸馏水
20
酶试剂
1000
标准管 — 10 10 1000
测定管 20 —
相关文档
最新文档