亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展
天然产物中活性成分遴选方法研究进展
天然产物中活性成分遴选方法研究进展易人行; 戚进【期刊名称】《《广州化工》》【年(卷),期】2019(047)017【总页数】4页(P24-26,39)【关键词】活性成分遴选; 研究进展; 天然产物【作者】易人行; 戚进【作者单位】中国药科大学中药学院江苏南京 211198【正文语种】中文【中图分类】O625.7天然产物中生物活性成分的检测与发现是发现先导化合物的途径之一，也是新药开发中关键的组成部分。
由于传统的遴选方法多耗时耗力，具有较为明显的额弊端，不再满足现代化发展的需求，因此，寻找新的遴选方法具有一定的价值。
为了解决这些的问题，近年来，许多新型的技术应用于天然产物中活性成分的检测与发现。
本文总结了近年来文献报道的已经用于天然产物中活性成分和在未来在该领域具有一定应用潜力新技术，并进行了综述。
希望为天然产物中活性成分的检测与发现提供一定的参考。
1 生物亲和色谱生物色谱是利用固定化技术将一定的生物活性物质(酶，载体蛋白等)或仿生材料(脂质体等)等固定在一定的载体(二氧化硅、硅胶等)上，作为色谱固定相使用，上样后进行洗脱和分离[1]。
生物色谱同时具备色谱分离和生物活性的双重特点，可以在筛选生物活性成分的同时实现生物活性成分的分离和识别。
这减少了复杂体系中非活性成分的干扰[2]。
根据所用的色谱固定相，生物色谱主要细分为分子生物色谱法，细胞(膜)色谱法，仿生生物膜色谱法。
1.1 分子膜色谱分子膜色谱的固定相通常由活性生物大分子，如酶，受体，抗体，传递蛋白和DNA组成[3]。
上样后，提取物中的不同的成分可以在固定相内以不同的结合强度相互作用，从而可以利用不同极性的流动相洗脱，进一步对这些与大分子特异性结合的化合物进行分离和遴选。
并且还可以确定活性化合物和靶标之间的结合变量(例如血浆蛋白结合率、配体-受体亲和力等)或者鉴定新的活性化合物及其靶标，并且更好理解靶标与化合物之间的作用机制[4]。
这项技术已经被广泛应用，如Su 等[5]使用二氧化硅键合特定的DNA片段，用其作为固定相来筛选黄连和掌叶大黄中药提取物中的与该段DNA相互作用的有效成分。
亲和色谱技术及其在药物研发中的应用
色谱分析结课综述亲和色谱技术及其在药物研发中的应用姓名：郭海耀班级: 2011级6班学号：2011110195亲和色谱技术及其在药物研发中的作用郭海耀内蒙古医学院 2011级6班摘要：亲和色谱法是利用化合物和药物作用靶之间的亲和活性，将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来的一种方法，具有色谱分离和活性筛选可同时进行的特点，特别适合于研究复杂体系中的效应物质。
以生物和非生物来源物质为配基的各种亲和色谱在药物活性成分分析中得到了广泛应用，已逐渐成为一种重要的技术手段。
该文归纳了亲和色谱原理在药物研发中的几种应用形式，并对其应用概况和前景进行了讨论，以期更好地利用这一分析工具。
关键词：亲和色谱蛋白纯化分离筛选应用研究现代色谱法是药物研究中应用最为活跃的分离分析技术之一, 在药品质量控制、新药研发、生物医学分析等领域占据举足轻重的地位。
在种类繁多的现代色谱法分支中, 有一种利用生物分子间亲和力进行分离的液相色谱技术, 称之为亲和色谱法(affinity chromatography, AFC)[1]。
目前，新的提取分离技术尤其是各种色谱技术已广泛应用于天然药物的有效成分研究，但很多色谱分离、分析模式都是基于混合物间理化性质的差异，并未包含任何药理功能的信息。
AFC是根据生命现象中生物大分子间高亲和力与高专一性可逆结合而设计的一种独特的色谱分离方法。
在亲和色谱中，将能与潜在药物(配体)特异结合的物质(配基)，如靶蛋白等固定于色谱填料上制备色谱柱，再将待分离混合物与色谱柱固定相一起孵育后，以洗脱液洗脱或不经孵育，使混合物缓慢、连续地通过色谱柱，即可实现混合物间以亲和性为基础的分离[2]。
亲和色谱一般使用生物来源的配基，但随着其应用范围的扩大，一些非生物来源的配基也逐渐被采用。
亲和色谱是利用偶联了亲和配基的亲和吸附介质为固定相来亲和吸附目标产物, 使目标产物得到分离纯化的液相色谱法。
亲和色谱已经广泛应用于生物分子的分离和纯化, 如结合蛋白、酶、抑制剂、抗原、抗体、激素、激素受体、糖蛋白、核酸及多糖类等；也可以用于分离细胞、细胞器、病毒等。
新冠疫苗 亲和色谱 -回复
新冠疫苗亲和色谱-回复新冠疫苗是当今全球关注的焦点话题之一，而亲和色谱则是一种常用的分离和纯化技术。
本文将会详细介绍新冠疫苗的亲和色谱进展，以及亲和色谱在疫苗研发中的应用。
一、新冠疫苗简介新冠病毒是一种由SARS-CoV-2引起的呼吸道传染病，其传播速度极快，严重威胁着全球人民的健康和经济。
为了应对疫情，科学家们积极开展了新冠病毒疫苗的研发工作。
二、亲和色谱的基本原理亲和色谱是一种分离和纯化生物大分子的方法，通过利用生物分子之间相互作用的特异性，使目标分子选择性地与固定相结合。
常见的亲和色谱方法包括亲和层析和亲和吸附。
三、亲和色谱在新冠疫苗研发中的应用新冠疫苗的研发是一个复杂而漫长的过程，其中亲和色谱技术发挥了重要作用。
下面将介绍亲和色谱在新冠疫苗研发中的几个典型应用。
1. 抗原纯化亲和色谱可以用于抗原的纯化，以获得高纯度和高活性的抗原。
研发新冠疫苗时，科学家需要从新冠病毒中提取出目标抗原，并将其纯化，以便后续的疫苗研究和制备工作。
2. 抗体纯化研发新冠疫苗的关键是获得高效的抗体。
亲和色谱可用于抗体的纯化，以去除杂质和其他非特异性成分。
纯化后的抗体可用于体外研究、体内动物试验以及临床试验等。
3. 抗体结构研究亲和色谱还可以用于抗体结构的研究。
通过利用与特定抗体亲和的配体分离，科学家可以更好地了解抗体的结构和功能。
这对于了解抗体的作用机制以及优化疫苗设计具有重要意义。
4. 结合亲和素的载体构建研发新冠疫苗时，科学家还需要将目标抗原与亲和素结合，以获得更好的免疫原性和稳定性。
亲和色谱可以用于合成亲和素与目标抗原结合的载体，为疫苗研发提供有力支持。
四、新冠疫苗研发中的亲和色谱进展近年来，亲和色谱在新冠疫苗研发中得到了广泛应用，并取得了一些重要进展。
1. 抗原纯化的改进传统的亲和色谱方法在抗原纯化中存在一些问题，比如选择性不高、纯化效率低等。
研究人员通过改进亲和色谱的材料和工艺，提高了抗原纯化的效率和纯度。
亲和色谱法在天然药物活性成分筛选中的应用
亲和色谱法在天然药物活性成分筛选中的应用饶澄;黄显【摘要】亲和色谱法是利用化合物和药物作用靶之间的亲和活性,将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来的一种方法,具有色谱分离和活性筛选可同时进行的特点,特别适合于研究复杂体系中的效应物质.以生物和非生物来源物质为配基的各种亲和色谱在天然药物活性成分分析中得到了广泛应用,已逐渐成为一种重要的技术手段.该文归纳了亲和色谱原理在天然药物活性成分分离、筛选中的几种应用形式,并对其应用概况和前景进行了讨论,以期更好地利用这一分析工具.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2010(019)012【总页数】3页(P19-21)【关键词】亲和色谱;天然药物;分离;筛选【作者】饶澄;黄显【作者单位】福建医科大学协和临床医学院药学部,福建,福州,350001;福建医科大学附属协和医院药学部,福建,福州,350001【正文语种】中文【中图分类】R284;R917目前，新的提取分离技术尤其是各种色谱技术已广泛应用于天然药物的有效成分研究，但很多色谱分离、分析模式都是基于混合物间理化性质的差异，并未包含任何药理功能的信息。
亲和色谱法是根据生命现象中生物大分子间高亲和力与高专一性可逆结合而设计的一种独特的色谱分离方法[1]。
在亲和色谱中，将能与潜在药物(配体)特异结合的物质(配基)，如靶蛋白等固定于色谱填料上制备色谱柱，再将待分离混合物与色谱柱固定相一起孵育后，以洗脱液洗脱或不经孵育，使混合物缓慢、连续地通过色谱柱，即可实现混合物间以亲和性为基础的分离。
亲和色谱一般使用生物来源的配基，但随着其应用范围的扩大，一些非生物来源的配基也逐渐被采用[2]。
在此介绍在天然药物活性成分分离、纯化中常用的几种亲和色谱方法及其应用进展。
1 基于固定化靶蛋白的亲和色谱血浆蛋白与药物可逆的结合平衡，直接影响到药物能否透过血管达到作用位点。
汪海林等[3]将以人血清白蛋白为配基的色谱用于药用植物活性成分的粗筛选，方法是在流动相中加入顶替剂使强保留组分快速流出，以少含或不含有机溶剂的缓冲溶液作为流动相冲洗、筛选弱保留组分，结果当归的2个主要活性峰经鉴定为其最重要的两种有效成分阿魏酸和藁本内酯，而用梯度淋洗法分离出了蒙古黄芪的7个活性成分。
亲和超滤质谱技术在中药活性成分筛选中的研究进展
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亲和色谱技术在药物分析中的应用进展
亲和色谱技术在药物分析中的应用进展王嗣岑;贺晓双【摘要】亲和色谱是依靠键合在固定相上的配位体与生物活性目标分子间特异性的识别与可逆的亲和作用,实现生物分子选择性分离的一种液相色谱分析方法.该方法具有高选择性、高回收率等特点,可同时进行色谱分离及活性筛选,广泛应用于活性产物的筛选、分离和纯化.本文简述了生物特效亲和色谱、印迹分子亲和色谱、染料配基亲和色谱等几种常用亲和色谱技术,综述了近年来亲和色谱在手性药物拆分、天然药物中活性组分筛选、活性蛋白分离纯化及药物-蛋白相互作用研究中的应用,并对其应用前景进行了展望.%Affinity chromatography (AC)is a type of liquid chromatography that makes use of biological-like interactions for separation and specific analysis of bioactive components. It has been widely used as a high-throughput screening method for the separation,screening and purification of the target molecules from complex samples with advantages such as high selectivity and high recovery efficiency.This article summarizes the biological effects of affinity chromatography, molecular imprinting chromatography, and dye ligands affinity chromatography.The review also encompasses the application of AC in the separation of chiral drugs,screening of active components,purification of target protein,and mechanism of the drug-protein interaction.Moreover,the prospects of its applications are also discussed.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(038)006【总页数】8页(P777-784)【关键词】亲和色谱;药物分析;手性药物拆分;活性成分筛选;药物蛋白相互作用;生物大分子【作者】王嗣岑;贺晓双【作者单位】西安交通大学药学院,陕西西安 710061;陕西省心血管药物工程技术研究中心,陕西西安 710061;西安交通大学药学院,陕西西安 710061;陕西省心血管药物工程技术研究中心,陕西西安 710061【正文语种】中文【中图分类】R917亲和色谱(affinity chromatography)是利用生物分子与亲和色谱固定相表面配位体之间的特异性亲和吸附作用，进行选择性分离生物分子的一类色谱方法[1]。
亲和色谱技术研究进展
第３２卷第４期２００７年４月上海化工ＳｈａｎｇｈａｉＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙ摘要亲和色谱具有高选择、高活性回收率和高纯度等特点，已成为生物工程中分离纯化最有效的技术之一，是生物化工研究的重要方向。
综述了亲和色谱技术及其发展趋势。
关键词亲和色谱研究进展生物化工中图分类号Ｑ８１４．１第一作者简介：刘望才男１９７８年生博士研究生研究方向为化工技术在生物工程中的应用２７・・上海化工第３２卷［１］［２］［３］［４］液ｐＨ为４．２、０．０２ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（含０．５ｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ），所得ＧＳＨ纯度可达４９．８％，平均提取率为６７．９％。
３拟生物亲和色谱近年来发展起来的以氨基酸（包括多肽）亲和色谱和染料亲和色谱为代表的仿生亲和小分子配基新技术。
对需要纯化的目标蛋白，在组合生物分子库和组合化学分子库中筛选其相应的亲和配基，然后将其固定到支持介质上，这种组合出来的亲和配基比天然生物分子性质更稳定，特异性及重复性更好［１１－１２］。
３．１染料配基亲和色谱染料配基能通过共价链牢固地结合到亲和载体上。
染料配基价格低廉，与蛋白质的结合容量大，并且不易为物理或化学物质所降解，因此是一种较为理想的基团特异性配基。
Ｓ．Ｃ．ＭｅＬｉｓｓｉｓ等［１３］研究了谷胱甘肽结构类似物亲和吸附剂。
所用的染料是二氯三嗪的模拟物，其中活性部分结构与谷胱甘肽类似。
用此种亲和吸附剂分别纯化三种作用于谷胱甘肽的酶ＮＡＤ＋、甲醛脱氢酶和谷胱甘肽－Ｓ－转移酶，效果良好。
３．２多肽亲和色谱与金属和染料相比，多肽具有较高的特异性，且通常是无毒的。
多肽具有与蛋白质相似的结构，因此它们的作用通常是温和的，因此在分离过程中采取温和的洗脱条件，可以避免蛋白质的变性。
Ｈ．Ａｒｏｓｔｏｖａ［１４］等用碘化的Ｌ－酯氨酸与琼脂糖交联制备亲和色谱柱纯化猪胃蛋白酶，效果良好。
Ｊｏｈｎ等［１５］合成的双环八肽类似物，对肠促胰酶肽有很好的特异性吸附。
然而，自然界中存在的与蛋白质等生物大分子有天然亲和性的多肽种类非常有限。
亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展
亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展[摘要]亲和色谱法（affinity chromatography）是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。
利用化合物和固定相表面之间的某种特异性亲和力，将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来。
该方法可同时进行色谱分离和活性筛选，作为一种高通量筛选方法广泛应用于各种活性药物的筛选。
该文主要针对亲和色谱的发展历史、筛选技术类型及其在天然活性成分筛选中的应用进行了综述。
并就其应用前景进行讨论，以期更好地发挥亲和色谱在药物筛选中的应用。
[关键词]亲和色谱;筛选;天然药物;细胞膜色谱;脂筏色谱Progresses in screening active compounds from herbalmedicine by affinity chromatographyFENG Ying-shu<sup>/1</sup>，TONG Shan-shan<sup>/1</sup>，XUXi-ming<sup>/1</sup>，YU Jiang-nan1，2* （1. Department of Pharmaceutical Analysis，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China;2. College of Pharmacy，Jiangsu University，Zhenjiang 212013，China）[Abstract]Affinity chromatography is a chromatographic method for separating molecules using the binding characteristics of the stationary phase with potential drug molecules. This method can be performed as a high throughput screening method and a chromatographic separation method to screen a variety of active drugs. This paper summarizes the history of affinity chromatography，screening technology of affinity chromatography，and application of affinity chromatography in screening bio-active compounds in herbal medicines，and then discusses its application prospects，in order to broaden applications of the affinity chromatography in drug screening.[Key words]affinity chromatography; screening; herbal medicines; cell membrane chromatography; lipid raft stationary phase chromatographydoi：10.4268/cjcmm20150609中药种类众多，配伍复杂，而有效成分是其发挥治疗作用的物质基础，从天然药物中寻找活性成分一直是中药研究的重要方向之一。
亲和色谱法在天然药物活性成分筛选中的应用
离行 为的结果 。 范子琳等 【 ２ 以原位 聚合法制 得烙 印柱 ， 论 了模 ６ 讨
板 分 子 及 其 类 似 物 在 有 机 相 和水 相 中 的色 谱 行 为 及 作 用 机 理 。 这 些 研 究 为 处 于 水 溶 液 状 态 或 极 性 溶 剂 中 的 提 取 物 的 分 离 提 供 了 基础 。ｉ Ｌｕ等 １ 为提 高 ＭＩ 微 量 组 分 的分 离 效 能 ， 备 分 子 印迹 Ｐ对 制
药学 专论
胞膜为 固定相的色谱柱 【 也可稳定保 留白术内酯 Ｉ竞争试验结果 ｌ ３ ， 表 明白术 内酯 Ｉ 可与脂多糖竞争结合于 细胞表 面受体。Ｌ 等 “ ｉ 建
立 了 一 种 白细 胞 膜 色 谱 ， 于 筛 选 白 术 中 可 拮 抗 Ｔ ｌ样 受 体 ４ 用 ｏ ｌ
２１ ０ ０年第 １ 第 ｌ ９卷 ２期
生物分子作 为药物作用靶 ， 亲和色谱则将 进一步发挥 出揭示天然
药 物 内在 物 质 基 础 的 作 用 。 作 者 简 介 ： 澄 ， ， 士 研 究 生 ， 电子 信 箱 ）ａｃｅｇ０ ４ 饶 女 硕 （ ｒｏｈｎ２０ ＠ ｔ ｃｍ； 显 ， ， ｏ ｏ 黄 ｍ． 男 副教 授 ， 士研 究 生 导 师 ， 文 通 讯 作 者 ， 电子 硕 本 （
究也提供 了一种利用 Ｃ ＭＣ研究作用 于特定靶点化合物的方 法。 生 物膜上存在 多种活性蛋 白 ， 合物能 与多种受体或 通道蛋 化 白结合。 构建疾病相关受体高表达 的细胞株 ， 制备受体高表达细胞
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本 身的基础性研究 。 目前 ， 在借 助 Ｍ Ｔ筛 选天然药 物活性成分 的报 Ｉ 道 中 ， 分和聚合物单 体间作用 的情况 ， 组 如基 团间作 用力 、 分子空
色谱在药物分析方面的应用
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------色谱在药物分析方面的应用色谱在药物分析方面的最新研究进展张鹏鹏，王凌云，张斌浩(浙江工业大学化材学院工业催化)摘要：现在药学的迅速发展促进针对药物及其代谢产物在过程的不断深入研究中，建立了许多新的、巧妙、精确而有快速的色谱分析方法。
包括亲水作用色谱固定相在药分离中的应用，薄层色谱法在药物分析中的应用，液相色谱串联质谱法，脂质体电动色谱。
这些方法的诞生使得当代生物医学与中医学理论能够兼容。
本文综述了这些色谱方法的具体应用过程及其特点。
关键词：亲水作用色谱薄层色谱法串联质谱法脂质体ThelatestchromatographicanalysisresearchindrugresearchPengp engZhang,LingyunWang,BinhaoZahng （ZhejiangUniversityOfTechnology,IndustryCatalysis）Abstract:Nowwiththerapiddevelopmentofpharmaceuticaldrugsand theirmetabolites forthecontinuousin‐depthstudyoftheprocess, scientistshavecreatedmanynew,preciseandrapidchromatographic methods.Includingtheusingofseparatingdrugswithstationarypha seofhydrophilicinteractionchromatography,thinlayerchromatog raphysusingindruganalysis,chromatographytandemmassspectrome1 / 15try,liposomeelectronicchromatography.Allthesemethodsmakethe contemporarybiomedicalandChinesemedicinetheorycanbecompatib le.Thispaperreviewsthesechromatographicmethodsspecificappli cationsandtheircharacteristics.Keywords:hydrophilicinteraction thinlayerchromatography massspectrometrychromatography liposomeelectronicchromatography1 引言色谱工艺歼拓系统从1996年推出至今的十几年中，结合新的反相介质和新型凝胶介质已在天然药物活性成分研究和分离中获得了应用。
亲和膜色谱的研究进展
亲和膜色谱的研究进展摘要：亲和膜色谱又称亲和膜分离，其在生物大分子的分离纯化中作为一种综合性的技术出现在80 年代末。
亲和膜色谱主要优点是克服了颗粒状多孔载体扩散传质阻力大的缺点，代之以对流传质，这样就可以在较低的操作压和较高的流速下对目标物进行快速的分离和纯化，从而缩短操作时间、提高纯化效率。
本文介绍了亲和膜色谱的分离过程，评价了亲和膜基质材料活化、改性方法，给出了配基、间隔臂的选择原则，并简单介绍了亲和膜色谱技术的应用。
关键词：亲和膜色谱、分离过程、膜基质、配基、间隔臂、应用Recent Advances in Affinity Membrane Chromatography Affinity membrane chromatography (AMC) was developed as an integrative technology for the purification of biomacromolecules in the end of 1980s. Affinity membrane are achieved by attaching affinity ligands to the inner suface of the through pores in microfiltration membranes. So the main feature of AMC is the elimination of pore diffusion that exists as themain mass-transfer resistancein conventional column chromatography with porous particles. In an AMC, target products included in a crude mixture can bind to the affinity ligands by passing througe the membrane. Thu，sAMC can be operated at a high flow rate with a low pressure drop, resulting in a large throughput for protein purification. This article reviews the fundamental aspects of affinity membrane chromatography, separating process anidts application. Activating and modifying methods of matrix materials are introduced. The principles of selecting ligands and spacer arms are elucidated.The advances in the theoretical aspect study and trends of AMC are also described.Keywords: Affinity membrane chromatography, membrane matrix, ligand, spacer arm, application1 前言近年来，生命科学和生物工程得到了迅速发展，蛋白、酶、多肽、疫苗等生物制品成本的30%〜60%来自于分离过程。
亲和色谱分离分离的研究进展
亲和⾊谱分离分离的研究进展亲和⾊谱的研究进展学院：制药与⽣物⼯程专业：⽣物化⼯姓名：张妍学号：2012255摘要：亲和⾊谱是利⽤⽣物分⼦，特别是⽣物⼤分⼦与亲和⾊谱固定相表⾯配位体之间，存在的⽣物学与⽣物化学过程的特效性亲和吸附作⽤，来进⾏选择性分离⽣物分⼦的分离⽅法。
亲和⾊谱具有⾼选择、⾼活性回收率和⾼纯度等特点，⾄今已在⽣物化学、分⼦⽣物学、基因组学、蛋⽩质组学、⽣物⼯程、临床医学、新型⾼效药物研究中已成为分离纯化最有效的技术之⼀，是⽣物化⼯研究的重要⽅向。
本⽂通过查阅⽂献综述了亲和⾊谱技术及其发展趋势。
关键词：亲和⾊谱、配基、分离纯化、研究进展The research progress of affinitychromatographyAbstract：Affinity chromatography is a selective separation method which uses the effects of the existence of affinity adsorption in the biological and biochemical processes between biological molecules, particularly biological macromolecules and ligand on the surface of the affinity chromatography stationary phase. Affinity chromatography with high selection, high recovery and high purity etc., it has been used in biochemistry, molecular biology, genomics, proteomics, biological engineering, clinical medicine and new high efficiency in drug research. And it has become one of most effective separation and purification technology. This article introduced affinity chromatography simply and reviewed and its development trend.Keywords:Affinity chromatography, ligand, separation, development trend⼀、概述（⼀）、亲和⾊谱基本概念亲和⾊谱是⼀种利⽤固定相的结合特性来分离分⼦的⾊谱⽅法。
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用随着现代生物技术的发展，色谱技术已经成为一种重要的分离分析技术，广泛应用于药物化学、药物起源以及药物分类中。
从最初的分离分析技术到在各种制药领域的广泛应用，它在现代制药领域起着重要的作用。
因此，色谱技术在天然活性物分离分析中的应用日渐增多，成为制药过程中不可或缺的一部分。
色谱技术能够帮助研究人员获取完整的天然活性物的特征信息，包括分子结构，同位素组成，绝对纯度，构型特征等信息。
由于色谱技术能够以较高的精度快速地测定出天然活性物的特征，显然，它可以极大地提高制药过程中天然活性物分离分析的效率。
色谱技术由层析分离分析技术组成，由于其可在多种不同植物中快速分离天然活性物，因此，它可以帮助改善制药过程中天然活性物的萃取效率。
色谱技术也可以结合其他分离分析技术，如色谱-质谱，色谱-紫外光谱，色谱-核磁共振，以及色谱-电喷雾等，以便进行更详细的检测研究，进而更准确地分离天然活性物。
此外，色谱技术也可以用于检测天然活性物的活性成分，并可以用于天然活性物不同批次或不同植物的比较研究，以评估其绝对纯度和构型特征。
总的来说，色谱技术在天然活性物分离分析中的应用日益增多，为制药过程中提供了一种可靠的技术手段，具有准确的特征测量、快速分离分析、定性和定量测定等特点。
色谱技术可为天然活性物分离分析提供快速准确的测量，从而提高制药效率以及治疗效果，确保药物质量。
随着色谱技术在各种制药领域的广泛应用，对于天然活性物的研究也将得到大量的支持。
届时，将有助于促进制药过程，提高药物的质量，从而有效地改善人们的健康状况。
不可否认，色谱技术在天然活性物分离分析中的应用将会为制药行业带来巨大的发展，从而改善人们的生活品质。
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用摘要：色谱技术是一种用于精确分离和组分识别的有效分析方法，已广泛应用于天然活性物分离分析中。
本文首先就色谱技术的原理做了介绍，随后介绍了色谱技术在植物活性成分分离分析中的应用，主要是液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC）。
最后对色谱技术在天然活性物的提取、分离分析及质量控制方面的应用进行了讨论。
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用1．引言人类依赖自然界中的天然活性物质的存在，其中许多有用的物质具有生物活性，包括营养成分、护肤成分、药物、农药和生物杀虫剂等。
现在，越来越多的人关注天然活性物质的研究和利用，其中色谱技术在天然活性物分离分析中发挥着重要作用。
本文重点介绍色谱技术在天然活性物分离分析中的应用。
2.色谱技术的原理色谱技术是一种有效的分析方法，用于精确分离和组分识别。
它通过将混合物分解成各组分，再通过色谱仪进行测定，测定混合物中各组分的分布范围，从而达到良好的分离分子。
色谱技术包括液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）和离子色谱（IC）等技术。
其原理是利用层析技术，根据分子的性质，在给定的流动梯度条件下，对混合物进行分离，从而检测不同组分所占的比例。
3.色谱技术在植物活性成分分离分析中的应用（1）液相色谱（HPLC）液相色谱（HPLC）是色谱技术中最常用的一种技术，因为它能够快速、精确地实现混合物的分离。
相对于其他分离分析技术，液相色谱（HPLC）能提供更高的效率，因此，它经常被用于植物活性成分的分离分析。
HPLC技术的应用不仅可以快速分离混合物，而且还可以直接分析出特定成分的浓度。
此外，HPLC技术还可以用于确定不同类型的活性成分的数量。
（2）气相色谱（GC）气相色谱（GC）是一种用于分离有机混合物的最有效的方法。
它可以检测各组分的总量，以及它们之间的比例，因此GC技术被广泛用于植物活性成分的分离分析中。
4．色谱技术在天然活性物提取、分离分析及质量控制方面的应用（1）提取色谱技术可用于提取天然活性物，如生物医药材料、药用植物、食品加工原料等。
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用色谱技术是一种分离和分析化学物质的有效手段，是聚合物结构分析和活性分析中最常用的技术方法之一。
随着科学技术的发展，色谱技术得到了广泛的应用，尤其是在天然活性物分离分析方面发挥了重要作用。
二、原理色谱法是在高压气体相流体中，将复杂的有机混合物通过流动相和固定相分离而得到单个成分的方法。
它的基本原理是，在气相和固定相的混合的情况下，利用物质的某种物理或者化学特性，在不同的流动状态下，把一种混合物分离成多种单独的成分，从而获得具有一定纯度的单个成分。
三、应用色谱技术在天然活性物分离分析中有着广泛的应用，因为它可以快速、精确地检测和分离复杂的有机混合物。
色谱技术能够检测和提取多种有机溶剂，可以提取各种非极性物质，以及可以在低浓度条件下提取极性物质，这些有机物质在自然界中有着重要的生物学作用。
色谱技术在天然活性物分离分析方面的应用有很多，它可以检测和提取植物雌激素和药物类农药，可以检测多种天然有机物质，例如天然香料、嗅觉剂和香料，还可以检测和提取食品中的天然活性物质，如氨基酸、维生素等。
四、优缺点色谱技术在天然活性物分离分析中具有许多优点：首先，色谱技术的分离效率高，分离时间短；其次，它可以进行高灵敏度的分离，能够快速提取出微量的有机活性物质；最后，由于色谱技术的范围比较广，可以从非极性和极性物质中进行分离，有效地增加了分离的准确性和效率。
不过，色谱技术也存在一定的缺点：首先，色谱技术依赖于复杂的设备，对操作人员的技术要求也比较高；其次，色谱技术需要大量采集数据并进行复杂的数据处理，时间成本相对较高；最后，由于分离效率受流动相和固定相条件的限制，可能会影响分离的准确性和精确度。
五、结论色谱技术在天然活性物分离分析中具有重要的作用，可以节约时间，提高分离的准确性和精确度，并且有效地提取微量的有机活性物质。
色谱技术也有一些缺点，但色谱技术的发展使得它变得更加完善，在天然活性物分离分析领域的应用将会持续扩大。
植物天然活性成分的分离与鉴定研究
植物天然活性成分的分离与鉴定研究自然界中有着大量的植物资源，其中很多植物拥有着丰富的营养和药用价值，这些价值主要来自于植物所含有的许多活性成分。
这些活性成分能够有针对性地提高人体的免疫力，改善人体的代谢环境，促进人体的健康发展。
因此，对植物天然活性成分的分离与鉴定研究是非常有必要的。
1. 植物天然活性成分分离植物天然活性成分的分离是一项非常复杂的工作，需要通过化学和生物技术等多种手段来实现。
其中以化学分离技术应用较为广泛，常用的包括溶剂提取法、分子筛技术、大孔材料分离技术、对流层析等。
其中，溶剂提取法是最为常见和基础的一种分离方法，它通常是将植物样品用提取液浸泡后，使用旋转蒸发、石油醚-乙酸乙酯、硅胶柱层析等方法来提取目标成分。
分子筛技术则是一种基于分子大小、形状、电荷、极性等物理化学性质的分离技术，它适用于分离分子量较大的成分。
大孔材料分离技术则是一种多孔性材料来吸附、分离目标成分的一种方法，该方法适用于提取分子量较小的成分。
对流层析则是分离效率高、对样品的损伤小、可逆的化学分离技术之一，可对极性、常数、分子大小及分子量等结构特征较明显的活性成分进行有效分离。
除了以上化学分离技术，还有利用生物技术分离活性成分的方法。
植物的快速繁殖、易于转化以及良好的遗传稳定性为植物生物技术提供了广阔的空间。
例如利用植物细胞或器官亲和色谱技术，可以有效提纯具有生物活性的物质。
2. 植物天然活性成分鉴定鉴定植物天然活性成分包括两个重要步骤，一个是化学组分的分析，另一个是生物活性的评价。
化学组分分析通常以色谱-质谱-联用技术为主要手段，对活性成分进行定量分离和测定。
色谱-质谱-联用技术是将高效液相色谱和质谱技术联合起来使用，可以高效地分离活性成分，并通过质谱技术确认分离的化合物的分子结构，不仅能确定化合物分子式、质量等信息，还能确定部分化学键、官能团等。
生物活性评价是指对活性成分的生物学功效进行定量评价。
常用的方法有细胞毒性评价、广谱抗菌活性试验、抑菌试验、抗氧化活性测定等。
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用
色谱技术在天然活性物分离分析中的应用近年来，色谱技术在天然活性物分离分析领域占有重要地位。
天然活性物，也称为天然活性成分，在植物体内可以形成许多化学物质，具有显著的生理活性。
它们可以影响植物的生长、发育和根系开发，也可以调节植物的生物活性，如防御机制和抗虫害能力等。
像木犀草、白芍、黄芩等天然活性物已被广泛应用于医药、食品和其他化妆品行业中。
同时，随着抗肿瘤药物的发展，开发新药和研究天然活性物的结构和功能的重要性更加强调。
色谱技术是一种有效的分离分析方法，可以将混合物中的成分分离出来。
目前已广泛应用于有机物分离分析领域，而且应用非常广泛。
它可以被用来分离、鉴定和测定复杂的混合物，而且能够获取较高的分离能力和灵敏度。
其中，硅胶柱色谱技术是最常用的一种色谱技术。
它是一种具有层析分离能力的分离技术，能够通过变化非极性溶剂的流动速率和分散性来分离混合物。
此外，色谱技术也可以用于分离天然活性成分。
由于这些物质的结构、空间结构和极性特性等都有所不同，可以通过改变流动条件来分离。
同时，还可以结合其他分离技术，如红外光谱、核磁共振和质谱等，来提高分离分析效率和准确性。
由于色谱技术具有快速、准确、可重复性高和自动化等优点，它已被广泛用于天然活性物分离分析中来提高检测效率，并有助于更准确地测定活性物的结构和功能。
譬如，硅胶柱色谱技术可以用来测定植物提取物中的有效成分，如：山药片中的苍术苷，山中的苁蓉苷；柿子中的柿素，等等；此外，色谱技术也可以用于鉴定从药用植物中提取的天然活性物的组成，如酸枣中的枣醛，红景天中的乙醇醚酸，贝母中的精油等。
总之，色谱技术在天然活性物分离分析领域具有重要作用。
它可以用来快速准确地分离复杂的混合物，也可以用于鉴定和测定植物提取物中的有效成分。
它可以有效提高检测效率，并有助于更加准确地测定组成成分和功效特性。
此外，色谱技术也可以与其他分离技术结合，以获取更高的分离能力和灵敏度，从而更好地利用天然活性物的功效。
凝胶色谱、亲和色谱研究进展及案例
实验方法
准确称取含有大约相当于10 mg蛋白质的样品，样品溶在盛有流动相溶液的10 mL容量瓶 中，超声处理30 min。从以上样品中转移1.5 mL于10mL离心管中，加入10 μL β-硫基乙 醇，摇动混合约10 s，让样品在室温下放置至少2 h，用0.45μm微孔滤膜过滤至液相色谱 进样瓶中，然后注射进液相色谱。根据标样峰面积和浓度建立标准曲线，从而计算样品 中α-乳白蛋白含量。
分子印迹技术是采用人工合成方法制备对目标分子有特异性识别材料的技术。由于蛋 白质体积大、结构复杂、易于变性，完整蛋白质模板分子难以获得且价格昂贵，因此 限制了蛋白质分子印迹材料的发展。中国科学院大连化学物理研究所张丽华研究员课 题组提出了一种蛋白质抗原决定基分子印迹磁性纳米材料的制备新方法。抗原决定基 印迹是以目标蛋白质上一段特异性多肽为模板分子进行印迹。由于模板肽段与目标蛋 白质间存在极强的特异性，形成的印迹位点对模板肽段及目标蛋白质均具有特异性识 别能力。
1972 年，德国学者Wulff 提出分子印迹色谱方法，进一步扩展了亲和色谱的应用，使 得亲和色谱开始用于药物筛选研究。
1978 年瑞典学者 Ohlson 提出以大孔微粒硅胶作为载体的高效液相亲和色谱方法，使 得亲和色谱的发展跨入了一个新的时代。
亲和色谱法筛选技术 受体为亲和配基的色谱筛选 酶为亲和配基的色谱筛选 血浆蛋白为亲和配基的色谱筛选 以DNA为亲和配基的色谱筛选 细胞膜色谱筛选 脂筏色谱筛选 分子印迹技术 其他亲和配基（如核酸适配体亲和色谱、免疫亲和色谱、金属离子亲和色谱等等。）
选择色谱柱
α-乳白蛋白的相对分子质量为14200 u，而凝胶色谱柱TSK-2000SWXL分离样品的相对分 子质量范围为5000~150000 u，因此选择此色谱柱是比较合适的。组成蛋白质的氨基酸在 210~280 nm范围内都有不同程度的吸收，但只有色氨酸在280 nm有足够高的吸收，而α乳白蛋白含有丰富的色氨酸，因此选择280 nm作为DAD的检测波长，能获得较好的灵敏 度。
色谱技术在检测生物产品中的应用进展
色谱技术在提取生物产品中的应用进展摘要：随着科学技术的发展和完善，色谱作为一种分离检测方法在生物领域同样有着重要的作用和广泛的应用，本文就近年来国内外的一些新型色谱和新型技术在提取蛋白质、多糖等生物产品中的应用做一简要介绍。
关键词：色谱技术新型色谱色谱联用分离提取技术1 引言色谱是一种有效的分离方法，于20世纪初开始用做物质分离的一种方法。
由于其分离精度高、设备简单、操作方便，根据各种原理进行分离的色谱法不仅用于物质成分的定量分析和检测，也广泛应用于生物物质的制备分离和纯化。
随着色谱的进一步发展，色谱技术在21世纪的科学研究、工业生产以及人们的日常生活中必将发挥出更大的作用。
2色谱理论基础色谱法（chromatography）又称“色谱分析”、“色谱分析法”、“层析法”，是根据混合物中的溶质在两相之间分配行为的差别引起的随流动相移动速度不同进行分离的方法。
图1. 柱色谱分离设备Fig.1. Column chromatography equipment色谱分离的主体介质由互不相容的流动相（mobile phase）和固定相（stationary phase）组成，一般的柱色谱分离设备如上图所示。
固定相填充于柱内，形成固定床，在柱的入口处加入一定量的待分离原料后，连续通入流动相，料液中的溶质在流动相和固定相之间发生扩散传质，产生分配平衡。
由于分配系数大的溶质在流动相中移动速度小，因此溶质之间由于移动速度的不同先后从色谱柱出口洗出而得到分离。
色谱根据流动相状态、固定相几何形式和分离原理不同，分为以下几种类型：表1 色谱的分类Table 1 Classification of chromatography序号分类标准主要类型备注1 按流动相状态分类气相色谱法、液相色谱法、超临界流体色谱法生物物质一般存在于水中，生物分离主要采用液相色谱法。
2 按固定相几何形式分类柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法色谱柱易于放大，为色谱分离的主要手段。
亲和色谱仿生配基的筛选和设计
亲和色谱仿生配基的筛选和设计任 军 贾凌云3(大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系,大连116023)摘 要 利用选择性好、稳定性高、价格低廉的仿生配基作为亲和色谱的功能基团,实现对目的蛋白质的亲和分离,可以弥补常规的单克隆抗体和其他天然蛋白质配基在价格、稳定性方面的不足,从而拓展亲和色谱技术的应用范围。
本文综述了亲和色谱仿生配基在筛选和设计方面的研究进展,重点介绍了组合方法和基于结构的仿生配基的设计及其应用。
关键词 亲和色谱,仿生配基,组合化学,合理性配基设计 2004209223收稿;2005201218接受本文系国家自然科学基金资助项目(No .20375006)1 引 言基于分子识别原理的亲和色谱(affinity chr omat ography ,AC ),常被描述为在蛋白质纯化技术中效率和选择性最高的分离方法[1]。
在实验室规模,经常有目标蛋白纯度增加超过1000倍,收率接近100%的报道。
使用亲和色谱,可以大大简化蛋白质纯化过程的操作步骤,提高产品质量和生产强度、降低生产成本。
目前该技术还没有在工业规模得到广泛应用,主要原因在于[2]:(1)生物亲和配基的来源困难、价格昂贵。
亲和色谱主要由载体和配基组成,配基的性质和密度决定了亲和色谱的选择性和吸附容量。
传统的亲和配基多为高纯度的单克隆抗体或其他生物来源的分子(如凝集素,辅酶等),其生产、纯化过程同样需要复杂的生物工程步骤,制备成本很高。
(2)生物亲和配基的理化性质受环境影响较大,容易失去活性,对运输、保存及操作条件的要求苛刻。
亲和纯化的关键在于能否获得合适的配基。
在理想情况下,亲和配基应与目标蛋白可逆结合,并具有足够的亲和力和选择性,易于制备,易于固定到层析介质表面,对操作条件表现出足够的生物和化学稳定性,不易被降解,不易脱落造成产品污染。
生物来源的蛋白质配基虽然具备较强的特异性,但是成本高、不稳定的缺点在很大程度上限制了亲和色谱的应用范围。
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亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展[摘要]亲和色谱法（affinity chromatography）是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。
利用化合物和固定相表面之间的某种特异性亲和力，将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来。
该方法可同时进行色谱分离和活性筛选，作为一种高通量筛选方法广泛应用于各种活性药物的筛选。
该文主要针对亲和色谱的发展历史、筛选技术类型及其在天然活性成分筛选中的应用进行了综述。
并就其应用前景进行讨论，以期更好地发挥亲和色谱在药物筛选中的应用。
[关键词]亲和色谱;筛选;天然药物;细胞膜色谱;脂筏色谱Progresses in screening active compounds from herbalmedicine by affinity chromatographyFENG Ying-shu<sup>/1</sup>，TONG Shan-shan<sup>/1</sup>，XUXi-ming<sup>/1</sup>，YU Jiang-nan1，2* （1. Department of Pharmaceutical Analysis，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China;2. College of Pharmacy，Jiangsu University，Zhenjiang 212013，China）[Abstract]Affinity chromatography is a chromatographic method for separating molecules using the binding characteristics of the stationary phase with potential drug molecules. This method can be performed as a high throughput screening method and a chromatographic separation method to screen a variety of active drugs. This paper summarizes the history of affinity chromatography，screening technology of affinity chromatography，and application of affinity chromatography in screening bio-active compounds in herbal medicines，and then discusses its application prospects，in order to broaden applications of the affinity chromatography in drug screening.[Key words]affinity chromatography; screening; herbal medicines; cell membrane chromatography; lipid raft stationary phase chromatographydoi：10.4268/cjcmm20150609中药种类众多，配伍复杂，而有效成分是其发挥治疗作用的物质基础，从天然药物中寻找活性成分一直是中药研究的重要方向之一。
然而，应用传统的天然药物分离提取方法，即先对其成分进行分离，再结合药理药效试验筛选其中特定的有效成分的方法筛选中药活性成分，周期长，且命中率相对较低。
将化合物分离鉴定手段与高通量药物筛选技术相结合，可以直接对天然药物的提取组分进行分离并在线活性检测，不仅可以节约成本，提高天然药物活性筛选速度，同时也在一定程度上阐述作用机制，以保证研究目标的准确性。
亲和色谱法（affinity chromatography）是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法<sup>[1]</sup>。
在亲和色谱中，将能与潜在药物（配体）特异结合的物质（配基）固定于色谱填料上，制备色谱柱，混合物经过色谱柱时，能与固定相产生特异结合的物质将在色谱柱上发生保留行为，从而实现混合物间以亲和性为基础的分离。
中药提取物可不经过分离步骤，直接在相应的亲和色谱上完成筛选工作。
并且药物在亲和色谱模型上的的保留特性（保留时间或容量因子）与药物的活性显著相关。
本文主要针对亲和色谱的发展历史、筛选技术类型及其在天然活性成分筛选中的应用进行了综述。
1亲和色谱的发展历史亲和色谱的发展经历了上百年的历史<sup>[2]</sup>，现已成为一个较为成熟的技术，广泛应用于天然生物活性物质的分离和纯化，以及筛选和鉴定。
早在1910年，德国药理学家Starkenstein将蔗糖酶抗体吸附在高岭土上，研究了抗体和抗原的相互作用，为亲和色谱的萌芽。
1924年，俄罗斯学者Engelhardt提出了“固定化配体原理”，作为分离生物活性物质的方法，为亲和色谱分离方法的根本。
随后的60年间，人们相继使用亲和色谱技术，分离纯化淀粉酶、抗体等，在此期间，纤维素、葡聚糖凝胶、琼脂糖、苯乙烯树脂等基体材料以及各种配基的固定化方法的出现，亲和色谱技术飞速发展。
1968年，美国药理学家Cuatrecases和Wilchek扩展了亲和配位体的范围，包括酶、抗原、抗体、激素、维生素、外源凝集素、糖蛋白、膜蛋白、病毒、细胞等，确立生物特效亲和色谱方法。
1970年，Cuatrecases提出了“空间间隔臂”概念和方法，成功解决了配位体的立体可接受性问题。
1972年，德国学者Wulff提出分子印迹色谱方法，进一步扩展了亲和色谱的应用，使得亲和色谱开始用于药物筛选研究。
随后的30年间，共价色谱方法，染料配位色谱方法，电荷转移色谱方法，定位金属例子亲和色谱方法、包合配合物色谱方法相继提出。
1978年瑞典学者Ohlson提出以大孔微粒硅胶作为载体的高效液相亲和色谱方法，使得亲和色谱的发展跨入了一个新的时代。
上述关于亲和色谱技术的发展虽然并非直接用于天然药物的筛选，但是其对现代药物筛选技术的建立、发展和应用奠定了十分重要的理论基础与技术支撑。
经过几十年亲和色谱相关技术的发展，随着HPLC色谱柱制备技术以及各种在线联用技术的广泛应用，以及更多亲和配基的基础研究的深入，近十多年来逐步衍生出了众多基于不同配基的亲和色谱技术，并在天然药物的筛选领域发挥了越来越重要的作用。
根据配基的种类和筛选模型的不同，常用的亲和色谱筛选技术包括：以受体、酶、蛋白或DNA为配基的亲和色谱筛选技术、细胞膜色谱筛选技术、脂筏色谱筛选技术、分子印迹技术等。
各种亲和色谱技术在药物筛选、模式建立、分离机制等方面的特色不尽相同，其在天然药物发现和鉴定等领域的应用不断拓展，为天然活性成分的发现与临床药物开发提供了极具优势的筛选技术平台。
2亲和色谱法筛选技术亲和色谱法将能与潜在药物（配体）特异结合的物质（配基）固定于色谱填料上制备色谱柱，混合物根据色谱保留行为的不同而实现分离。
同时，亲和色谱与紫外，MS，NMR 等多种检测器联用，实现在线筛选并鉴定中药活性成分。
随着人们对亲和色谱认识的加深以及应用的推广，多种配基的亲和色谱以及不同类型的亲和色谱模型陆续被人们应用于中药活性成分的筛选。
2.1受体为亲和配基的色谱筛选近年来，随着药物作用靶点的逐步揭示，以受体为目标筛选中药中的活性成分为中药筛选的基本思路。
王序等<sup>[3]</sup>在20世纪80年代，以11个受体为指标，筛选了150种常用中药的400余种提取物，得到了5 000余种生物活性测定结果。
为了解中医用药的机制提供了一些实验依据。
然而，传统筛选方法仅根据混合物判断作用结果，无法确定具体作用物质，且工作量巨大，耗费人力物力可观。
将受体作为亲和色谱的固定相，建立亲和色谱筛选模型，天然药物提取物中能与受体发生特异结合的成分在色谱柱中发生保留，与无色谱保留行为的物质分离开来，从而实现活性筛选和色谱分离同时进行，快速、有效的发现天然药物中的活性物质。
目前用于天然药物筛选的受体为配基的亲和色谱模型有肾上腺素受体亲和色谱模型，烟碱受体亲和色谱模型等。
由于受体对配体选择性识别作用较强，以受体为配基的亲和色谱在天然药物活性成分筛选中具有较强的选择性且作用机制明确。
Wang等<sup>[4]</sup>将猪重组β2-肾上腺素受体（β2-AR）通过共价键固定在大孔硅胶表面，制成β2 -AR亲和色谱柱，使用亲和色谱方法与四极飞行时间质谱（Q-TOF-MS）联用，从中药制剂活血胶囊提取物中筛选出有效成分阿魏酸，羟基红花黄色素A（HSYA）和柚皮苷。
提取物中具有舒血管作用的β2-AR拮抗剂能与固定相中上的β2-AR发生特异性结合而产生色谱保留，与Q-TOF-MS联用，实现活性化合物的在线分离和鉴定。
然而，受体的制备及固定化工艺较为复杂，受体的蛋白质特性导致了亲和色谱使用寿命较短。
在受体固定化过程中，受体蛋白覆盖不完全会导致配体与固定相上残留基团发生非特异性结合而导致其保留特性发生变化。
郑晓晖等<sup>[5]</sup>用甘氨酸乙酯对硅胶表面残留的未反应的咪唑基进行封尾而消除非特异性吸附，并在流动相中加入Tris，EDTA和NaCl等试剂，用于消除配体与固定相上残留氨基和硅羟基之间的静电作用。
这样不仅能最大程度地保持受体的活性和选择性，又减小了固定相表面非特异性功能团的影响。
所制备的色谱柱可使用1周的时间。
合适的固定化受体的发现决定着亲和色谱药物筛选模型的应用。
E Calleri等<sup>[6]</sup>研究了固定化γ型过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）的色谱特性。
实验将PPARγ以共价键固定在氨丙基二氧化硅粒子表面，作为色谱固定相，同时，将PPARγ结合在毛细管柱表面建立PPARγ毛细管亲和色谱以研究不同固定化条件下的亲和色谱特性，以已知配体验证固定化后的PPARγ亲和色谱的结合特性。