色谱技术的研究进展
气相色谱技术的研究进展及其应用
气相色谱技术的研究进展及其应用一、概述气相色谱技术(Gas Chromatography,GC)是一种广泛应用于化学分析领域的分离和分析技术,其基本原理是利用物质在气态状态下,对固定相和移动相之间的分配平衡进行分离。
自20世纪50年代初诞生以来,气相色谱技术经历了从简单的定性分析到复杂的定量分析,再到现代的多维、多模式联用技术的演变,展现出越来越高的分析精度和广泛的应用范围。
随着科学技术的不断发展,气相色谱技术在仪器设计、色谱柱材料、检测器灵敏度以及数据处理方法等方面取得了显著的进步。
特别是在新型固定相材料、高效分离技术、高灵敏度检测器以及计算机化数据处理等方面的研究,使得气相色谱技术在分析化学、环境监测、食品安全、石油化工、生物医药等众多领域发挥了重要作用。
当前,气相色谱技术正朝着更高灵敏度、更高分辨率、更快分析速度以及更低检测限的方向发展。
同时,随着多维色谱、联用技术(如GCMS、GCFTIR等)的普及和应用,气相色谱技术在复杂样品分析中的优势愈发明显。
未来,气相色谱技术有望在更多领域实现突破,为科学研究和工业生产提供更为精准、高效的分析手段。
1. 气相色谱技术的定义和基本原理气相色谱技术(Gas Chromatography, GC)是一种在化学分析领域广泛应用的分离和分析技术。
它基于试样中各组分在两相间分配系数的差异,当两相作相对运动时,这些组分在两相间进行反复多次的分配,使原来只有微小的性质差异产生很大的效果,而使不同组分得到很好的分离,以检测器对待测组分进行测定,实现试样中各组分的定性和定量分析。
气相色谱法具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度高、应用范围广、样品用量少、选择性好、操作简便、自动化程度高、载气易得、应用广泛等优点。
气相色谱技术的基本原理是利用试样中各组分在气相和固定液液相间的分配系数不同,当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时,组分就在其中的两相间进行反复多次分配,由于固定相对各组分的吸附或溶解能力不同,因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的柱长后,便彼此分离,按顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流讯号经放大后,在记录器上描绘出各组分的色谱峰。
高效液相色谱技术的研究进展
高效液相色谱技术的研究进展高效液相色谱技术(High performance liquid chromatography, HPLC)是一种现代化的、高效的分离技术。
它利用分离样品中的化学成分的物理或化学属性,通过在流动相和固定相之间相互传递的过程中实现化学成分的分离。
近年来,高效液相色谱技术不断在技术细节、数据分析、纯化和检测灵敏度等方面得到了进一步的发展。
本文将从以下四个方面探讨高效液相色谱技术的研究进展:一、液相色谱柱的发展液相色谱柱是HPLC技术的核心部分,HPLC的分离效果和方法的可靠性很大程度上取决于色谱柱的品质。
因为使样品在流动相和固定相之间相互传递所需的时间取决于柱内的分离效果。
近年来,新技术和新材料的涌现使得液相色谱柱质量得到了显著的提高。
例如,阴离子交换柱有了更好的抗污染性,表面经处理的柱材料也能够更好地避免有机污染物的吸附。
二、柱外引道注射技术柱外引道注射技术是提高色谱分析速度、提高灵敏度以及降低流动相损耗的最重要的技术之一。
此技术是基于待分析物质的性质选择可以产生极高的浓度梯度的引道。
现在,多种柱外引道注射技术已被广泛的使用,如微量分析技术(MEMS)和尖峰式带型变形的色谱方法(systmic-sieve effect chromatograph),这两个技术都在注射控制的同步性方面做出了大量的工作。
最近,由微型气泡引导的无毒注射技术也被用于蛋白和DNA的定性分析。
三、离线(离线联机)联用技术联用有助于更有效、安全、高分辨率的分析。
离线联用就是离线上分离了化学组分,然后用在线方法来定性或定量分析化合物(当需要在线定量分析液相中的某些组分时则是在线联用)。
在离线联用的模型中,分离过的化合物必须被固定在收集器中,只有当样品收集完成时才可重新溶解。
虽然离线联用总体上是一种昂贵的技术,但是它在处理复杂的样品时可极大地提高精度,它还可在一定程度上避免流量下降或光度漂移等还是有很多缺陷的在线方法所出现的问题。
薄层色谱技术在中药检验中应用的研究进展
0引言薄层色谱法自《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)1985年版后的历版药典均有收载。
《中国药典》2020年版一部收载品种2711个,其中超过50%的品种应用了薄层色谱鉴别方法,薄层色谱分析是各级药品检验机构、药品生产经营部门质检人员检验中药的强制性检验项目[1]。
薄层色谱技术是一种经典的中药分析技术,其受测试样品种类限制很小,适用范围广[2-3]。
多年来,薄层色谱技术在中药上的应用开发研究趋于多元化,尤其在中药成分的鉴别和定量分析方面,涌现出许多高质量的学术研究成果[4-5]。
目前,对薄层色谱技术在中药检验应用方面的研究主要集中在以下3个方面:一是对现有的中药薄层色谱鉴别方法的优化,如改进样品制备方法、优化展开剂和显色剂等;二是建立新的中药成分薄层色谱鉴别方法,例如建立药典中未曾规定的中药薄层色谱系统;三是联合其他技术手段进行更全面的中药检验分析。
本文介绍、分析薄层色谱技术在中药检验方面的应用研究情况,尤其是中药定性鉴别和定量分析方面的研究进展,以期为相关学者提供研究方向和思路。
1薄层色谱在中药快速鉴别中的应用随着色谱技术的发展及检验质量的提高,目前《中国药典》中的绝大部分中药是利用薄层色谱法进行检验的,利用薄层色谱法可对一些强挥发性、无紫外线吸收的药物组分进行定性及定量检测,还可以对中药进行分离和分析鉴定。
薄层色谱技术可用于快速鉴别中药材的产地及真伪,以及鉴别药材中的非法添加。
不同产地的中药材所含的化学成分存在微小差别,可用薄层色谱技术方便地鉴别出不同产地的中药。
巢颖欣等[6]应用薄层色谱技术反映广陈皮药材的鉴别信息,通过分析广陈皮特有的2-甲氨基-苯甲酸甲酯斑点作为快速鉴别广陈皮与其他产地陈皮的有效手段。
薄层色谱除了用于不同产地中药的鉴别,也可用于伪中药的鉴别。
孔娟等[7]发现,在相同的色谱条件下,不同产地何首乌及其伪品的薄层色谱图均有明显差异,可凭此快速、高效地鉴别何首乌的真伪。
色谱分离技术的研究进展
色谱分离技术的研究进展随着科学技术的不断发展,越来越多的新技术被不断推出,其中包括色谱分离技术。
色谱分离技术是一种用于分离、检测样品成分的技术。
随着对样品分析要求的不断提高,对色谱分离技术的研究也不断加强。
本文将为您介绍色谱分离技术的研究进展。
一、什么是色谱分离技术?色谱分离技术是一种分离和检测样品中成分的方法,适用于大多数液体和气体分离。
该技术通过将样品混合物注入色谱柱中,然后利用柱中的填料将样品分离。
样品中的成分通过填料的不同属性在柱中移动,进而实现分离。
该技术可以应用于医学、生物学、化学、环境和制药等领域,广泛应用于研究和生产中。
二、色谱分离技术的分类色谱分离技术可以分为几类。
其中一种常见的分类方式是根据柱的种类,将色谱分离技术分为气相色谱和液相色谱。
气相色谱主要用于分离气体混合物中的成分,它是一种基于气相的色谱技术。
样品被注入色谱柱,然后由于柱子中的填料和柱床的气相互作用,样品中的成分被分离出来。
气相色谱被广泛应用于天然气、石油、食品和科学研究等领域。
液相色谱是一种基于溶液相互作用的色谱技术,经常适用于样品为溶液的分析。
液相色谱在医学、生物学、制药等领域中广泛应用。
三、色谱分离技术的常见应用色谱分离技术的应用十分广泛,下面列举几个常见的应用:1.气相色谱被广泛用于空气、水和土壤中的污染物分析,以及各种设备中燃气成分和控制质量的分离。
2.液相色谱有许多应用,如分离和鉴定生物大分子如蛋白质、核酸的成分和含量;药物代谢产物的轻松分离和检测等。
3.色谱分离技术还在医学、制药领域得到广泛应用,如临床血液分析、毒理学等方面的研究和检测。
四、色谱分离技术的研究进展随着科学技术的不断发展,色谱分离技术也不断更新变化。
以下是近期的研究进展:1.新型柱:科学家们研发了多种新型柱,包括芯片柱、碳纳米管柱等。
这些新型柱大幅提高了分离效率,使得色谱柱列的分离能力更加优异和出类拔萃。
2.新型填料:以高速液相色谱柱为代表的新型填料,非常有生产应用价值。
色谱联用技术的研究进展
色谱 质谱 联 用模 式 , 使该 项 联用 技 术 日益 成熟 并 得 到越来 越 多 的应 用 。 相色 谱一 质谱 联用 技术 是 2 液 0 世纪 7 0年代 发展 起 来 的 ,将 液 相 色谱 分 离 技术 与
颗 粒作 为 固定 相 的 毛细 管 柱 ,并 采 用 C C E I E — SMS
联用 均得 到 较大 发展 . 中最 引人 注 目的是 色谱 与 其
色 谱与 质谱 的联 用 应 用范 围很广 , 以有 效解 可 决众 多 领域 的问题 。 发现 和分 析新 型有 机污染 物 在
方 面色 谱一 质谱 联 用技 术 发挥 着 至关 重 要 的作 用 。 近来 L — (MS技 术 的成熟 和发 展 , 传统 G — C MS/ ) 使 C
靶标 分 析技 术 向基 于高 分 辨色 谱 、 谱 联用 以及 色 质
谱一 串联质 谱联 用 的高 通量 、 高灵 敏 、 选择 、 高 高甄 别 的非 靶标 分析方 向发展 。液质 联用 技术 在乌 头类 生 物碱 的裂解 、 分鉴 别 、 制配 伍前 后 成 分变 化 、 成 炮
质谱 联用 (E MS等 。色谱 联用 技术 在 生物 样 品分 C— )
纪8 0年代 已成 功地 与 质谱 联 用 ,并 且 随着 小 型 台 式 四极 质谱 的发展 , 谱 已成 为气 相 色谱 的一种 重 质 要 的专 用 检测 器 , 同时进 行 上 百种 不 同成 分 的分 可 离并 进 行质 谱 检测 。除 以上联 用外 , 四极 杆质 谱 将 与 飞行 时 间质谱 组 成 串联 质谱 , 合 最新 发 展 的 毛 结 细 管液 相 色谱 技 术 组 成 的(a L — — O — — 1 C p C Q T F MS MS 将 集 成 高 效 毛细 管 、 相 色谱 、 液 四极 杆 质谱 与 飞 行 时 问 质 谱 等 的 优点 而 成 为 当前 解 决 复 杂样 品分 离
高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新
高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新概述高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)是一种重要的分离与检测技术,已经在广泛的科学领域中得到了广泛的应用。
本文将对高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新进行综述,并探讨其在不同领域中的应用。
一、高效液相色谱的基本原理高效液相色谱是以液相作为固定相的分离技术。
其基本原理是将样品溶解在流动相中,通过与固定相之间的相互作用来实现样品的分离。
高效液相色谱的固定相种类繁多,不同种类的固定相可以实现对不同性质样品的选择性分离。
二、高效液相色谱的发展与创新1. 色谱柱技术的发展:随着材料科学与合成化学的不断进步,新型的色谱柱材料如亲水性、疏水性、离子交换、手性等材料相继出现。
这些材料可以提供更高的分离效率和选择性。
2. 检测器技术的创新:传统的高效液相色谱检测器主要有紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。
随着科学技术的发展,新型的检测器如质量分析检测器(Mass Spectrometry, MS)和电喷雾检测器(Electrospray Ionization, ESI)等被引入到高效液相色谱中,提高了检测灵敏度和选择性。
3. 色谱分离模式的创新:除了传统的反相色谱分离模式,还出现了离子交换色谱、手性色谱、亲水色谱等新的分离模式。
这些分离模式可以对特定问题提供更好的解决方案。
三、高效液相色谱在不同领域中的应用1. 制药工业:高效液相色谱在制药工业中起着至关重要的作用。
它可以用于药物分析、药物代谢物分析和质量控制,以确保药物的质量和安全性。
2. 环境监测:高效液相色谱在环境监测领域中广泛应用,例如水质监测、土壤污染分析和空气污染物检测等。
它可以快速、准确地测定各种环境污染物。
3. 农业食品安全:高效液相色谱在农业食品安全领域中也发挥着重要作用。
它可以用于农药残留分析、食品添加剂检测和农产品质量控制等方面。
高效液相色谱研究进展
高效液相色谱研究进展一、本文概述随着科学技术的快速发展,高效液相色谱(HPLC)作为一种重要的分析技术,在化学、生物、医药、环境科学等领域中得到了广泛应用。
本文旨在对高效液相色谱技术的研究进展进行全面的概述和深入的探讨。
我们将从高效液相色谱的基本原理出发,介绍其发展历程,分析其在不同领域的应用现状,并探讨其未来的发展趋势和挑战。
本文还将重点关注近年来高效液相色谱在新技术、新方法、新应用等方面的创新成果,以期为相关领域的研究者和实践者提供有价值的参考和启示。
二、HPLC的基本原理和技术高效液相色谱(HPLC)是一种广泛应用于化学、生物、制药和食品科学等领域的分离和分析技术。
其基本原理和技术涵盖了多个方面,包括色谱理论、流动相和固定相的选择、色谱柱的设计以及检测器的应用等。
HPLC的分离原理基于不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡。
当含有多种组分的样品溶液通过色谱柱时,各组分因在固定相和流动相之间的分配系数不同,而呈现出不同的迁移速度,从而实现组分的分离。
分配系数的大小取决于组分与固定相之间的相互作用力,包括吸附、分配、离子交换等。
流动相和固定相的选择对HPLC的分离效果至关重要。
流动相的选择需考虑其极性、pH值、离子强度和溶剂强度等因素,以实现对不同组分的良好洗脱。
固定相则根据样品的性质和目标组分的分离需求进行选择,常见的固定相类型包括反相、正相、离子交换和尺寸排阻等。
色谱柱是HPLC的核心部件,其设计对分离效果和分析速度具有重要影响。
色谱柱的填料粒径、孔径、柱长、内径等参数的选择需根据样品的特性和分析需求进行优化。
柱温的控制也是影响分离效果的关键因素之一。
HPLC通常配备各种检测器以实现对分离组分的检测和定量分析。
常见的检测器包括紫外-可见光检测器、荧光检测器、质谱检测器等。
检测器的选择应根据组分的性质和分析需求进行匹配,以提高检测的灵敏度和准确性。
随着科技的不断发展,HPLC技术也在不断进步。
现代分析仪器在化学测量中的最新发展与应用
现代分析仪器在化学测量中的最新发展与应用化学测量在科学研究、工业生产、环境监测、医疗诊断等众多领域都发挥着至关重要的作用。
而现代分析仪器的不断发展和创新,为化学测量带来了前所未有的机遇和突破。
这些先进的仪器不仅提高了测量的准确性和灵敏度,还拓展了化学测量的范围和应用场景。
一、色谱技术的新进展色谱技术是化学分析中常用的分离和检测方法之一。
在现代分析仪器的发展中,高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)都取得了显著的进步。
HPLC 系统在硬件方面不断改进,高压输液泵的性能更加稳定,能够提供更高的流速和压力,从而实现更快速和高效的分离。
同时,新型的色谱柱填料,如核壳型填料和整体柱,具有更高的柱效和更好的选择性,大大提高了分离效果。
此外,HPLC 与质谱(MS)的联用技术,如 LCMS/MS,成为了复杂样品分析的有力工具。
它能够同时提供化合物的保留时间、分子量以及结构信息,极大地增强了定性和定量分析的能力。
GC 方面,高分辨率气相色谱(HRGC)的出现提高了对复杂混合物中微量组分的分离能力。
此外,GC 与飞行时间质谱(TOFMS)的结合,使得对未知化合物的快速鉴定成为可能。
通过精确测量化合物的质荷比和飞行时间,TOFMS 能够提供高分辨率和高质量精度的质谱图,为化合物的结构解析提供了丰富的信息。
二、质谱技术的创新发展质谱技术作为一种强大的分析手段,在化学测量中占据着重要地位。
近年来,质谱技术在仪器设计、离子化方法和数据分析等方面都取得了重大突破。
在仪器设计方面,高分辨率质谱仪的分辨率和质量精度不断提高。
例如,轨道阱质谱仪(Orbitrap)和傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FTICRMS)能够实现百万分之一甚至更高的质量分辨率,使得对同分异构体和复杂混合物的分析更加准确和可靠。
离子化方法的创新也为质谱分析带来了新的活力。
传统的电子轰击离子化(EI)和化学离子化(CI)方法在某些情况下存在局限性。
而近年来发展起来的电喷雾离子化(ESI)和基质辅助激光解吸离子化(MALDI)等软电离技术,使得大分子化合物如蛋白质、核酸等的分析成为可能。
高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展
高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展一、概述高效液相色谱(HPLC)是一种广泛应用于药物分析的重要技术,具有快速、高效、灵敏度高和分辨率高等特点。
自20世纪70年代以来,随着色谱理论和仪器技术的不断发展,HPLC已成为药物分析领域中不可或缺的工具。
其利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异,通过高压泵将流动相推动通过装有固定相的色谱柱,实现样品中各组分的分离。
随后,通过检测器对分离后的组分进行检测,从而实现对药物成分的定性和定量分析。
近年来,随着药物分析需求的不断提高,HPLC在药物分析中的应用研究也取得了显著的进展。
在药物质量控制方面,HPLC可用于药物有效成分的含量测定、杂质含量的检测以及药物制剂中各组分的分离分析等。
HPLC还可应用于药物代谢产物的分析,为药物研发提供重要的参考信息。
在药品检验中,HPLC的应用不仅提高了检验的准确性和效率,还有助于实现药品检验的自动化和智能化。
同时,随着HPLC技术的不断发展,其在药物分析中的应用也将不断拓展和完善。
本文旨在综述HPLC在药物分析中的应用研究进展,为相关领域的研究和实践提供参考和借鉴。
1. 高效液相色谱技术简介高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种重要的色谱分析技术,广泛应用于化学、医学、工业、农学、商检和法检等多个学科领域。
作为色谱法的一个重要分支,HPLC以液体为流动相,通过高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱。
在柱内,各成分因与固定相发生作用的大小、强弱不同,而在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出,进入检测器进行检测,实现对试样的分析。
HPLC具有“四高一广”的特点,即高压、高速、高效、高灵敏度和应用范围广。
高压是因为流动相为液体,流经色谱柱时受到的阻力较大,需要高压泵来推动流动相通过色谱柱。
色谱分离技术的新进展及应用研究
色谱分离技术的新进展及应用研究色谱分离技术是一种分离、分析、鉴定和纯化化合物的有效方法,具有分离效率高、分离过程快、分离精度高、可重复性好等优点。
随着科技的不断发展,色谱分离技术也在不断升级和创新,使得其应用范围更加广泛,分离效率和速度也不断提升。
传统的色谱分离技术主要包括气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、毛细管区带电色谱(CE)等。
这些技术主要通过利用物质在不同相之间的分配行为和溶剂的作用,实现对样品成分的分离。
然而,这些传统分离技术在某些情况下仍存在一些局限性,例如在分离极性物质方面不能取得良好的效果。
为了克服这些局限性,近年来出现了许多新的色谱分离技术。
其中,以固相微萃取(SPE)、超高效液相色谱(UHPLC)、超高压毛细管电泳(CZE)、点状电泳(MEKC)等为代表的色谱分离技术已经成为当前热点和发展趋势。
固相微萃取(SPE)是一种新型的萃取、富集、分离样品中有机化合物的技术。
它通过在固相萃取柱或固相萃取盘中填装具有吸附性能的固相吸附材料,将有机化合物从复杂的样品矩阵中分离出来。
SPE技术具有选择性强、灵敏度高、操作简单等特点,在食品、环境、医药等领域中得到广泛的应用。
超高效液相色谱(UHPLC)是传统液相色谱的升级版,它采用高压输送样品,流速较快,分离柱粒径较小,能够更好地分离高极性和高分子量化合物。
相比传统HPLC技术,UHPLC具有分离效率高、灵敏度高、分析速度快等优点,被广泛应用于食品、环境、医药等领域。
超高压毛细管电泳(CZE)是毛细管区带电色谱(CE)的升级版,它通过施加更高的电压,提高电泳分离效率和速度。
CZE技术具有分离效率高、分离时间短、分离精度高等优点,被广泛应用于蛋白质、核酸、药物等高分子化合物的分离和鉴定。
点状电泳(MEKC)是CE中的一种变种,它通过向分离液中添加胆汁盐类和有机试剂等胶束形成剂,形成胆汁盐-有机试剂复合胶束。
这些复合胶束可以有效地提高分离液的保湿能力和分离灵敏度,使得MEKC技术具有分离效率高、灵敏度高、选择性好等优点,被广泛应用于天然产物、药物、环境等复杂样品体系的研究。
气相色谱的研究进展及应用
气相色谱的研究进展及应用M090314101摘要:气相色谱技术是现代仪器分析的重要研究领域之一,由于其独特、高效、快速的分离特性,已成为物理、化学分析不可缺少的重要工具。
阐述了气相色谱系统的组成,介绍了全二维气相色谱技术、快速气相色谱技术、便携式色谱仪和气相色谱和质谱联用技术的研究进展及特点,探讨了环境质量监测、污染源监测等领域的应用进行了分析。
提出了气相色谱技术的前景与展望。
为气相色谱技术的发展提供有利价值。
关键词:气相色谱;研究进展;应用气相色谱技术是现代仪器分析的重要研究领域之一,由于其独特、高效、快速的分离特性,已成为物理、化学分析不可缺少的重要工具。
进入2l世纪以来,气相色谱技术的发展已渐趋成熟,灵敏度越来越高,技术越来越先进,联用技术的发展更是推进了气相色谱技术研究,在分析复杂混合物的时候,效果越来越明显,因此气相色谱联用技术在今后的发展中应用会更加广泛且前景广阔。
1 气相色谱技术的原理色谱法又叫层析法,它是一种物理分离技术。
它的分离原理是使混合物中各组分在两相问进行,其中一相是不动的,叫做固定相,另一相则是推动混合物流过此固定相的流体,叫做流动相。
当流动相中所含的混合物经过固定相时,就会与固定相发生相互作用。
由于各组分在性质与结构上的不同,相互作用的大小强弱也有差异。
冈此在同一推动力作用下,不同组分在固定相中的滞留时间有长有短,从而按先后秩序从固定相中流出,这种借在两相分配原理而使混合物中各组分获得分离的技术,称为色谱分离技术或色谱法。
当用液体作为流动相时,称为液相色谱,当用气体作为流动相时,称为气相色谱。
气相色谱的分离原理是利用不同物质在两相问具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,试样的各组分就在两相中经反复多次地分配,使得原来分配系数只有微小差别的各组分产生很大的分离效果,从而将各组分分离开来。
然后再进入检测器对各组分进行鉴定。
2 气相色谱技术的研究进展2.1 全二维气相色谱传统的多维气相色谱发展到今天,无论在理论上还是应用上,均已相当成熟,而全二维气相色谱则是20世纪90年代初出现的新方法。
高效液相色谱的应用研究进展
高效液相色谱的应用研究进展【摘要】从1903年,色谱的开始使用,各种色谱技术应运而生,其中高效液相色谱由于其分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广等优点,作为物质分离的重要工具,在各个方面都取得了很大的发展,并且出现了许多的新型色谱。
本文综述了变性高效液相色谱在生物遗传方面的应用,及高效液相色谱在医学方面的应用。
【关键字】HPLC(高效液相色谱) DHPLC(变性高效液相色谱)1.高效液相色谱概要色谱法是利用混合物中各组分在两相中分配系数不同,当流动相推动样品中的组分通过固定相时,在两相中进行连续反复多次分配,从而形成差速移动,达到分离的方法。
根据流动相的状态可分为气相色谱法和液相色谱法。
在液相色谱中,采用颗粒十分细的高效固定相并采用高压泵输送流动相,全部工作通过仪器来完成。
这种色谱称为高效液相色谱(1iighperformance liquid chromatography,HPLC)。
由于高效液相色谱法有分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广等优点,高效液相色谱成为最为常用的分离和检测手段,在有机化学、生物化学、医学、药物学与检测、化工、食品科学、环境监测、商检和法检等方面都有广泛。
另外,在高效液相色谱法的基础上不断发展,变性高效液相色谱法(DHPLC)随之兴起,广泛用于生物学、遗传学等领域。
2.高效液相色谱在生物学的应用变性高效液相色谱法(DHPLC)是在高效液相色谱法的基础上发展起来的一种新方法。
DHPLC采用高压闭合液相流路,将DNA样品自动注入并在缓冲液携带下流过DNA分离柱,通过缓冲液的不同梯度变化,在不同分离柱温度条件下,由荧光检测被分离的DNA样品,从而实现对DNA不同的分析它因使用的温度不同而有不同的应用价值:①在非变性温度(40℃~5O℃ )条件下对不同长度的双链DNA进行分离,用于定量反相PCR、长度多态性分析以及杂合性缺失(LOH)分析等;②在部分变性温度(51℃~75℃)条件下进行基因突变,单核苷酸多态性和CpG甲基化的检测;③在完全变性温度(70℃~8O℃)条件下对寡核苷[1]酸进行质量控制和纯化,RNA分离及已知位点基因型的分析等。
色谱分离技术的研究进展及应用
色谱分离技术的研究进展及应用色谱分离技术是一种重要的化学分析方法,通过将化合物在不同材料或介质中进行分离和纯化,实现对化学物质的定量和质量分析。
近年来,随着科技的发展和应用需求的增加,色谱分离技术在医学、环保、食品、化工等领域得到了广泛应用。
本文将从理论基础、新型分离材料、应用领域等方面综述色谱分离技术的研究进展及应用。
一、理论基础色谱分离技术基于物质在不同介质中的色谱性质实现。
不同物质具有各自不同的极性和亲疏水性,为了实现物质的分离和纯化,科学家们设计了各种分离介质和方法。
包括薄层色谱、气相色谱、液相色谱、离子色谱等方法。
其中,液相色谱是目前最常用的色谱分离技术。
液相色谱的理论基础是上述的某些物质在相同液相中分布系数不同的性质,从而实现物质的拆分和分离,为后续分析和应用提供基础。
色谱分离的成功并不是简单地将样品混入色谱柱,然后静等分离,依据样品性质与柱内分离实际存在的许多因素有关,如对分离过程的分子与柱材料的匹配性、进样柱前的样品前处理、柱内分离环境的控制、检测器敏感性和精度等。
比如,在液相中溶解度较高的物质或其他高分子材料,需要采用比表面积较大的吸附柱来扩大分离柱的静态表面积,以提高质谱分析的精度和灵敏度。
二、新型分离材料分离柱是液相色谱技术中的核心部件。
分离柱的材料不断更新,新型材料必须具备以下要求:高分离效率、宽的分离范围、良好的稳定性和重复性等。
目前,新型分离材料涵盖了天然材料、无机合成材料和有机合成材料三大类。
天然材料中,硅胶是经典的色谱分离介质,优点是质量稳定、表面性能好,但在pH、温度、微量杂质和某些化学物质下会出现脱落、分解等现象。
无机合成材料中,亲水性和亲油性介质在分离柱中均有得到应用。
目前,氧化铝、氧化锆、硅酸铝、二氧化钛等均已用于柱材料的合成。
有机合成材料中,尤以新型聚合物和有机硅材料为最。
传统的聚甲基丙烯酸酯和聚苯乙烯已有一定的限制,新型聚合物包括聚丙烯酸酯和有机硅材料,具有分离效率高、催化能力强和不让物质附着等优势,广泛应用于烯烃的气相色谱分离、化合物的分子印迹等领域。
薄层色谱分析法及其进展
薄层色谱分析法及其进展一、本文概述薄层色谱分析法(Thin-Layer Chromatography, TLC)是一种广泛应用于化学、生物、医药、环境科学等领域的重要分离和分析技术。
本文将对薄层色谱分析法的基本原理、操作步骤、应用领域以及近年来的研究进展进行详细的介绍和讨论。
我们将概述薄层色谱分析法的基本原理,包括吸附、溶解、扩散和比移等过程,以及影响色谱分离效果的关键因素,如吸附剂的种类、溶剂的选择和比移值的计算等。
接着,我们将详细介绍薄层色谱分析法的操作步骤,包括样品的制备、点样、展开、显色和结果解读等,以便读者能够正确、规范地进行实验操作。
本文还将对薄层色谱分析法的应用领域进行综述,包括有机化合物的分离和纯化、天然产物的提取和分析、药物质量控制以及环境监测等。
通过这些实例,读者可以深入了解薄层色谱分析法在实际应用中的重要作用。
我们将重点关注近年来薄层色谱分析法的研究进展。
随着科学技术的不断发展,薄层色谱分析法也在不断创新和完善,例如新型吸附剂的开发、自动化和智能化的实现以及与其他分析技术的联用等。
这些进展不仅提高了薄层色谱分析法的分离效率和准确性,也进一步拓宽了其在各个领域的应用范围。
通过本文的阐述,我们希望能够为读者提供一个全面、深入的了解薄层色谱分析法及其进展的平台,为推动该领域的研究和发展做出贡献。
二、薄层色谱分析法的原理与基本步骤薄层色谱分析法(Thin Layer Chromatography, TLC)是一种常用的色谱分析方法,主要用于物质的分离、定性和定量分析。
其原理基于物质在固定相和移动相之间的分配平衡,通过吸附、溶解和扩散等过程,实现物质在薄层板上的分离。
原理:薄层色谱法利用物质在固定相(通常是硅胶、氧化铝等吸附剂)和移动相(有机溶剂)之间的分配系数不同,当移动相沿着薄层板移动时,各组分以不同的速度移动,从而实现物质的分离。
分配系数是物质在固定相和移动相之间分配的基础,它决定了物质在薄层板上的迁移行为。
谈我国色谱法的进展
谈我国色谱法的进展谈我国色谱法的进展:新中国成立之后,色谱技术zui初只应用于石油领域,到了20世纪60年代,才开始应用于国防领域。
新中国的色谱技术在老一辈色谱科学家的带领下,取得了长足的进步:1954年,卢佩章院士首先把气-固色谱法的体积色谱成功的应用于水煤气合成产品的气体组分分析;1956年成功开展气液的体积色谱成功用于石油产品分析;1961年朱葆琳领导丁景群开展了毛细管色谱的研究,并成功地用于石油产品的分析;1964年原子弹爆炸前,最后获得的铀235金属中的痕量气体分析,我国的色谱工作者在1963年1月份就开始本项金属中痕量氩的测定,并与年底完成;1956-1958年发表了用液相色谱分析石油,油页岩和煤焦油组成的结果,建立了用碘和碘仿作为柱內显谱剂的快速测定烷、烯、芳三元组成分析方法样品用量0.5ml,分析误差在1%以内,平均分析时间为1h,并将分配色谱和紫外光谱联合的方法用于分析低沸点酚类的单体组成;20世纪60年代后期,现代液相色谱技术获得飞速发展,引起了国内色谱界的重视,1974年,卢佩章等开始从事液相色谱研究,针对了当时液相色谱的两个主要矛盾:一是仪器设备,二是固定相,开展了微粒型硅胶及其各种化学键合相得研究,并提供了产品供应的国内需求;1968-1974年完成核潜艇用船用色谱仪;连续测定密闭舱中的大量和微量有毒气体的组成,确保了潜艇人员在水下长期作业的生命安全和生活需要,这也是当时世界的船用色谱仪;文化大革命后,随着改革开放的到来,中国色谱技术有了高速的发展,应用领域也在扩大,主要的应用领域如下:•石油和石油化工分析:油气田勘探中的化学分析、原油分析、炼厂气分析、模拟蒸馏、油料分析、单质烃分析、含硫/含氮/含氧化合物分析、汽油添加剂分析、脂肪烃分析、芳烃分析;•环境分析:大气污染物分析、水分析、土壤分析、固体废弃物分析;•食品分析:农药残留分析、香精香料分析、添加剂分析、脂肪酸甲酯分析、食品包装材料分析;•药物和临床分析:雌三醇分析、儿茶酚胺代谢产物分析、尿中孕二醇和孕三醇分析、血浆中睾丸激素分析、血液中乙醇/麻醉剂及氨基酸衍生物分析;•农药残留物分析:有机氯农药残留分析、有机磷农药残留分析、杀虫剂残留分析、除草剂残留分析等;•精细化工分析:添加剂分析、催化剂分析、原材料分析、产品质量控制;•聚合物分析:单体分析、添加剂分析、共聚物组成分析、聚合物结构表征/聚合物中的杂质分析、热稳定性研究;•合成工业:方法研究、质量监控、过程分析;1980年,张宗炳指导研究生,用纸层析及液相色谱(HPLC)方法鉴定出这种芳香胺类为酪胺;20世纪80年代到21世纪初,是色谱技术发展zui快的20年,许多崭新的色谱法方法开始出现,如在气相色谱中的毛细管柱工艺的发展,毛细管超临界流体色谱和超临界流体萃取的兴起,毛细管电泳的发展,电名谱加入色谱的行列,场流分离为生物大分子的分离提供了新的途径等等。
色谱技术的最新发展
色谱技术的最新发展色谱技术作为一种基础分析技术,在化学、生物和环境等领域有着广泛的应用。
随着科学技术的不断进步,色谱技术也在不断地进行创新和发展,为各种领域的分析提供更为高效、灵敏、准确的方法。
一、毛细管电泳色谱技术的新进展毛细管电泳是一种在细直管道中利用电场对分离物的电荷进行分离的技术,是分子分离与分析的一种重要方法。
目前,毛细管电泳色谱技术已经成为分析生物分子的重要手段之一。
近年来,毛细管电泳色谱技术已经得到了一定的发展,在处理高增益的问题上有了极大的提升。
比如,灵敏的荧光检测器的引入,提供了更高的检测灵敏度和分子选择性,从而使得毛细管电泳色谱技术成为越来越适合生物领域的研究方法。
二、气相色谱质谱联用技术的新进展气相色谱质谱联用技术是通过将气相色谱和质谱联合使用,将两种技术的优点紧密结合在一起,以便实现高分辨率分离和分析化学分子。
最近,气相色谱质谱联用技术在分离和分析复杂物质方面得到了进一步的实践和发展。
利用气相色谱质谱联用技术,可以有效地分离和分析生物、化学和环境研究中的复杂混合物。
同时,由于气相色谱分离和分析具有高速分离和分析能力,因此在分析过程中不需要液相介质,也不易污染和重复分析。
三、液相色谱电喷雾质谱联用技术的新进展液相色谱电喷雾质谱联用技术是将高效液相色谱和电喷雾质谱联合使用,结合了二者的优点,使得它具有了很高的分离和分析能力。
近来,液相色谱电喷雾质谱联用技术得到了更为实际的研究和应用。
针对生物玻璃混合物和高分子化合物的分析,液相色谱电喷雾质谱联用技术已经成为现在最先进和最高效的分析方法之一。
四、离子色谱技术的新进展离子色谱是分析离子材料的一种特殊方法,在分析和检测离子性污染物等领域有广泛的应用。
在过去,离子色谱的使用限于离子物学科学的专家和学者使用,但现在它已经广泛应用于生物、环境和食品等领域。
近年来,离子色谱技术得到了很好的发展。
其新一代离子色谱仪器具有定量高、灵敏度高、速度快和准确性好等特点,从而提供了更广泛的应用前景。
凝胶色谱、亲和色谱(研究进展及案例)
食品工业领域
凝胶色谱和亲和色谱在食品 工业中的应用将有助于食品 安全监控、营养成分分析以 及食品添加剂检测等方面的 发展。
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02
03
环境污染物治理
通过凝胶色谱和亲和色谱技术,可以 研究污染物与吸附剂之间的相互作用, 为环境污染治理提供理论支持。
05 挑战与展望
当前面临的主要挑战
选择性挑战
凝胶色谱和亲和色谱在复杂样品分析中,选择性仍是一个重要挑战, 需要进一步提高分离效果和特异性。
灵敏度挑战
对于低丰度目标物,提高检测灵敏度是凝胶色谱和亲和色谱亟待解 决的问题。
样品进入色谱柱后,大分子物质由于体积较大,无法进入凝胶孔道,只能从凝胶颗粒间隙流过,路径 较短,因此较早流出色谱柱;而小分子物质可以进入凝胶孔道,路径较长,因此较晚流出色谱柱。
凝胶类型与特性
凝Байду номын сангаас类型
01
聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等。
特性
02
不同类型的凝胶具有不同的孔径大小和分布范围,适用于分离
02 亲和色谱概述
亲和色谱原理
特异性相互作用
亲和色谱利用生物分子之间的特异性相互作用,如抗原抗体、酶-底物等,实现目标分子的分离和纯化。
固定相与流动相
在亲和色谱中,具有识别功能的配体被固定在固相载体上, 构成固定相;待分离样品溶解在流动相中,通过色谱柱时 与固定相发生相互作用。
分离过程
目标分子与固定相上的配体发生特异性结合,而其他分子 则随流动相流出色谱柱,从而实现目标分子的分离。
蛋白质鉴定
结合质谱技术,凝胶色谱和亲和色谱可用于蛋白质鉴定,揭示蛋白 质的结构和功能。
色谱联用技术的研究进展
术 , 毛 细管 电泳 一核磁 共振 联用 (E N R)毛 细 如 C—M 、
2 色谱与红外光谱联用技术
近年来气相色谱与傅立叶变换红外光谱联用技 术发展较快 , 灵敏度不断提高 , 应用范围 日益扩大。
这是 因为色谱技术 以其高灵敏度和高分离效率成 为 十分理想 的分离和定量分析工具 ,而红外光谱能提
离和分析提供了有效手段。早在 2 世纪 7 年代末 0 0
就 有 L — MR联 用 技术 的报 道 ,由 于 L — MR一 CN CN 体 化联 用技 术能 一次 性完成 从样 品 的分离 纯化 到峰
定成为可能。 o o 等[ N rn 3 t 1 填充了以石胆酸为基质的液 晶颗粒作为 固定 相的毛细管柱, 采用 C C E I 并 E —S M 方法成功地分离了 P H 、 S A s苯乙胺类(E s以及 PA) 多氯联苯( C s化合物。 PB)
析能力为 中等大小分子 的各种复杂有机化合物的分
第3 7卷
度。液相色谱 一 气相色谱 一 红外光谱联用可对复杂
有机 结构 异构 体进 行 鉴别 。液 相色谱 一气 相色 谱 一
药物分析中的超临界流体色谱技术研究
药物分析中的超临界流体色谱技术研究超临界流体色谱技术(Supercritical Fluid Chromatography,简称SFC)是一种在药物分析领域应用广泛的分离与测定方法。
它基于超临界流体的物理特性,通过与样品分子相互作用的方式实现分离和测定。
本文将从SFC的基本原理、应用领域、优势与挑战等方面进行阐述,探讨药物分析中超临界流体色谱技术的研究进展。
一、超临界流体色谱技术的基本原理超临界流体是指在一定的温度和压力下处于液体与气体之间的物质状态,其具有类似于气体的低粘度和高扩散性,同时又拥有类似于液体的溶解度和可控性。
SFC技术主要利用超临界流体作为流动相,并通过在柱中填充固定相来实现分离和测定。
在SFC分离过程中,样品溶解于超临界流体中,与填充在色谱柱中的固定相相互作用,通过相互扩散与分配来实现分离。
根据溶质在超临界流体和固定相之间的相互作用力差异,不同的化合物会在柱中以不同的速率进行迁移,从而实现了分离。
二、超临界流体色谱技术的应用领域1. 药物分析超临界流体色谱技术在药物分析中具有广泛的应用。
其高效分离能力和较低的流动相粘度使得SFC技术在药物分析样品研究中成为一种理想的选择。
SFC可以用于分离和测定药物中的杂质、同系物、对映体等,对药物研究和质量控制具有重要意义。
2. 环境分析超临界流体色谱技术在环境分析领域也有着广泛的应用。
环境样品中的有机物质通常具有复杂的组成和极性差异,传统的分离方法往往存在分离效率低、样品损失大等问题。
而SFC技术可以有效地解决这些问题,提高分离效率和样品回收率。
3. 食品分析食品中的残留农药、食品添加剂等成分的测定是食品安全领域的重要问题。
超临界流体色谱技术因其对极性化合物和非极性化合物的分离能力较好,被广泛应用于食品分析领域。
同时,SFC技术还具有操作简便、环保等特点,对提高食品分析的效率和准确性具有重要作用。
三、超临界流体色谱技术的优势与挑战1. 优势(1)较低的流动相粘度:超临界流体的粘度较低,可以在较高的流速下实现高效分离,缩短分析时间;(2)溶解力强:超临界流体的溶解力较强,可以溶解一些传统液相色谱中难以溶解的化合物,扩大了应用范围;(3)环保可持续:超临界流体色谱技术不需要使用有机溶剂,减少了环境污染,具有良好的可持续性。
制备色谱技术及装备研究进展
表 1 经 典 液 相 色 谱 和 高 效 液相 色谱 的 比较
1料填 装在 色谱 柱 内 ,以液
体流动相 进行洗 脱, 利用 药物 不 同活性成 分与填 料相 互作用力 的差异进 行分离 。在 液相制备 色谱分离 中 ,
摘
要: 概述 了制备色 谱 的研 究进展 , 制备 型高效液 相色谱 、 临 界流体 色谱 、 对 超 高速逆 流色 谱等 重要 的制备色 谱技
术与 装置进 行 了评述 , 总结 了各 自的技术特 点, 并探讨 了制备色 谱存在 的 问题 和发展 前景 。 关键 词 : 制备 色谱 ; 技术 ; 备 ; 究进 展 装 研
1 中国制药装备・0 1 1 第 1 O 2 1 年 月・ 辑
G ge ni e i 程 艺 设 l o cnG gyS b◆ 工 与 备 n hgoyuh e 工
式 主要有 空管柱 、 向压缩 柱和 径 向压缩柱 。 轴
111 空管柱 . .
空管柱 结构 与分 析柱 相 同 ,常用 空管 柱 内径 为 1 - 1 0nr, 用 匀浆 填 充技 术填 装 色谱 填 料 。 随 0 0 Ll采 r 空管柱 直径 的增 大 ,用匀 浆法 填 充色 谱柱 的难 度也 越 来越 大 , 内径 >1 0nl时 , 匀浆 法 填 充 难 以 当 0 ll 用 T 得到理 想 的效果 。
因此 其分辨 率是 有 限的 。
介绍 。
中压制 备色 谱是 利用 恒流 泵抽 送流 动相 ,带 着 11 高效 液相 制备 色谱柱 . 样 品流经色 谱柱 , 实现 对样 品 的分 离 。 中压 制备色 谱
制 备 型H L P C由于 采用 细 的填料 、高 压操 作 , 所
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色谱技术的研究进展吕晓敏摘要简要介绍了色谱技术的历史发展,对几种常见的色谱技术和近期发展起来的一些新型色谱技术的研究进展及应用进行了综述,阐述了不同特性色谱技术的发展方向。
关键词色谱技术,进展,应用引言色谱技术是几十年来分析化学中最富活力的领域之一。
作为一种物理化学分离分析的方法,色谱技术是从混合物中分离组分的重要方法之一,能够分离物化性能差别很小的化合物。
当混合物各组成部分的化学或物理性质十分接近,而其他分离技术很难或根本无法应用时,色谱技术愈加显示出其实际有效的优越性。
色谱技术最初仅仅是作为一种分离手段,直到20世纪50年代,随着生物技术的迅猛发展,人们才开始把这种分离手段与检测系统连接起来,成为在环境、生化药物、精细化工产品分析等生命科学和制备化学领域中广泛应用的物质分离分析的一种重要手段。
目前几乎在所有的领域都涉及到色谱法及其相关技术的应用,色谱技术的应用日益普遍,色谱技术在科学研究和工业生产中发挥着越来越重要的作用。
本文介绍了色谱技术的发展及其应用,并对常见的色谱技术和近期发展起来的几种新型的色谱分离技术及不同特性色谱技术的研究进展进行了综述。
1 色谱技术的历史发展[1]1903年,俄国植物学家M. S. Tswett 发表了题为“一种新型吸附现象及在生化分析上的应用”的研究论文,文中第一次提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法。
1906年,他命名这种方法为色谱法。
这种简易的分离技术,奠定了传统色谱法基础。
但由于当时Tswett色谱技术分离速度慢、效率低,长时间内并没有受到当时科学界的重视。
1931年,德国的Kuhn 采用类似Tswett 色谱技术方法分离了胡萝卜素等60多种色素,在维生素和胡萝卜素的离析与结构分析中取得了重大研究成果,并因此获得了1938年诺贝尔化学奖。
也正因为他的出色工作使色谱法迅速为各国科学家们所关注,色谱方法才被广泛应用。
1940年,Martin 和Synge 提出了液液分配色谱法。
1952年,James和Martin 发明了气相色谱法,并因此获得了1952年的诺贝尔化学奖。
1944年Consden发明的纸色谱和1949 Macllean发明的薄层色谱也一直是用于物质初步分离的简便、快捷的工具。
1957年,Golay开创了毛细管气相色谱法。
20世纪60年代末,高压泵和键合固定相应用于液相色谱,导致高效液相色谱的出现。
20世纪80年代初,毛细管超临界色谱得到发展,20世纪90年代末得到广泛应用。
与此同时,20世纪80年代初由Jorgenson等发展的毛细管电泳,在20世纪90年代得到越来越广泛的应用,在此基础上相继发展了毛细管等电聚焦、毛细管凝胶电泳、毛细管离子电泳及毛细管手性分离等技术。
20世纪90年代出现的电色谱,由于其拥有HPLC和CE优点,成为研究的热点。
目前,气相色谱和液相色谱仍然是从事研究工作和工业生产实际应用较普遍的色谱法。
与此同时,毛细管电泳和电色谱及其他新的色谱技术的应用也日益广泛。
2 气相色谱技术及其应用2.1 气相色谱[2]气相色谱法又称气相层析法,是一种采用冲洗法的色谱分离技术,特别适用于生化产品的分离纯化。
气相色谱以气体作为流动相,用固体吸附剂或液体作固定相,它利用试样中各组分在色谱柱中的气相和固定液液相间的分配系数不同,当气化后的试样被载气带入色谱柱中运行时,组分就在其中的两相间进行反复多次的分配(吸附—解吸附或溶解—放出),由于固定相对各组分的吸附或溶解能力不同,因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的柱长后,试样中被分离的各组分即能达到完全分离。
气相色谱是一种非常好的分离和分析复杂混合物的方法,主要分析在操作温度下能气化而不分解的物质。
气相色谱的流动相和样品都必须处理成气体,为此对高沸点化合物、非挥发性物质、热不稳定物、离子型化合物及高聚物的分离,气相色谱不能分析,定性困难,其应用受到一定程度的限制。
通常情况下,用气相色谱进行分析和分离更快、更灵敏和更方便。
对于气相色谱来说,单纯的气相色谱应用相对要少些,一般是与其他技术联用。
2.2 气相色谱的应用2.2.1 气相色谱在食品分析中的应用色谱技术在食品分析中的应用与色谱法的发展史几乎是同步的[3,4]。
1952年诺贝尔化学奖获得者英国化学家James和生物学家Martin最早发明气液色谱,就是用来分析脂肪酸等混合物。
色谱法的优点是:分离效率高。
可分离性质十分相近的物质,可将含有上百种组分的复杂混合物进行分离。
近20年来,色谱技术以惊人的速度扩展到食品分析研究领域,许多新的色谱技术已进入实用阶段,如毛细管电脉仪技术(CE)、色谱-质谱联用技术(GC-MS、HPLC-MS、CE-MS 等)、固相萃取技术(SPE)和超临界流体色谱技术 (SFC)以及最新出现的全二维气相色等。
这些新技术的综合应用,大大提高了食品中农、兽药残留分析的灵敏度,简化了分析步骤,提高了分析效率,并使分析检测结果的可靠性得到进一步确证。
例如Shne,在海产品、肉类和蜂蜜中氯霉素残留的检测方法研究中,在使用简便的酶联免疫法粗筛后,用GC-ECD 和HPLC-UVD 进行了检测,最后用GC-MS-EI-SIM 和GC-MS-NCI-SMI对检测结果进行确证实验。
2.2.2气相色谱在农药残留检测方面的应用[5]当今世界把食品安全作为头等大事的情况下,对食品和药物中污染物和有害物质检测技术的研究受到重视。
在农作物(包括药用植物)中大量使用杀虫剂、除草剂、除真菌剂、灭鼠剂、植物生长调节剂等,在大大提高农作物产量的同时,也致使在农产品、畜产品中农药残留量超标对人类的健康也带来了很大的负面影响,研究开发快速、可靠、灵敏和实用的农药残留分析技术是控制农药残留、保证食品安全、避免国际间贸易争端的当务之急。
农药残留分析是复杂混合物中痕量组分分析技术,农残分析既需要精细的微量操作手段,又需要高灵敏度的痕量检测技术,自20 世纪60 年代以来,气相色谱技术得到飞速的发展,许多灵敏的检测器开始应用,解决了过去许多难以检测的农药残留问题。
2.2.3 气相色谱在药物和临床分析中的应用尽管在药物及临床分析中HPLC 有很多的应用,但从近几年的文献也可以看出[6],气相色谱在药物和临床分析中的应用也有很多,实际上气相色谱方法简单易于操作,如果用气相色谱可以满足分析要求,它应该是首选的方法。
特别是把GC 和MS 结合起来是一种珠联璧合集分离和鉴定、定性与定量于一体的方法,如果把固相微萃取(SPME)和GC 或GC-MS 结合在一起,又把样品处理及定性与定量于一体,在临床分析中很有意义。
3 液相色谱技术及其应用3.1 液相色谱液相色谱是以液体作为流动相的一种色谱分离技术。
它利用流动相液体将被分离混合物带入色谱柱中,根据各组分在固定相及流动相中吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子大小的差异进行分离。
液相色谱并不受样品的挥发度和稳定性的限制,且非常适合于分离生物药品的大分子、离子型化合物、不稳定的天然产物以及其他各种高分子量的或不稳定的化合物。
对于很难分离的样品,用液相色谱常常比用气相色谱容易完成,被广泛应用于石油和化工等领域。
目前研究和使用较多的液相色谱主要有高效液相色谱法(HPLC)[7]。
高效液相色谱法是20世纪60年代出现的一种新方法,它从根本上解决了气相色谱技术的不足之处,使得色谱法的应用领域不断扩大。
从分离科学的现有水平来看,HPLC 已经成为目前分离和纯化生物大分子最重要和最有效的分析和分离方法,它具有分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高和应用范围广的特点,特别适合于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分离分析[8,9]。
按操作方式和目的来分,HPLC 可分为分析型和制备型两类。
分析型HPLC 的目的是为了获得反映样品组成的信息,而制备型HPLC 的目的是为了获得产品。
所以,前者是一种分析工具,后者是一种分离技术。
分析型HPLC 和制备型HPLC 所用的操作条件有显著的不同,前者的进样量愈小愈好,且要避免柱超载,后者为了提高产量,柱必须超载。
制备型HPLC 是最近几年来引人注目的新型高效分离技术,无论在原理上还是在设备上,都与分析型HPLC 显著不同。
目前制备型HPLC 的发展趋势是开发大规模工业过程。
随着生物过程的迅速发展,制备型HPLC 分离技术在生物大分子的分离和纯化领域中,将日益发挥越来越重要的作用。
3.2液相色谱的应用[10,11]3.2.1维生素D含量的测定3仪器和试剂:日本岛津公司Le-10A液相色谱;SPD-10A紫外-可见分光度检测器;色谱柱C18Shim-pack VP-ODS 150×4.6mm,维生素D对照品(含量≧99.9%),3甲醇为色谱纯,磷酸为分析纯,水为二重蒸馏水。
对照品储备液为1.000mg/ml 的维生素D甲醇溶液。
方法和结果:柱温为室温,流速为1ml/min,进样量为10ul,3检测波长254nm,同一批次样品,多次检测(见表1)。
表1 不同流动相配比时,维生素D的含量测定33.2.2叶酸含量的测定仪器和试剂:日本岛津公司Le-10A液相色谱;SPD-10A紫外-可见分光度检测器;色谱柱C18Shim-pack VP-ODS 150×4.6mm,叶酸对照品(含量≧99.9%),甲醇为色谱纯,磷酸为分析纯,水为二重蒸馏水。
方法和结果:柱温为30℃,流速为1ml/min,进样量为10ul,检测波长254nm,同一批次样品,多次检测(见表2)。
表2 不同流动相配比时,叶酸的含量测定4毛细管电泳技术(CE)及其应用4.1 毛细管电泳技术毛细管电泳技术是20世纪80年代发展起来的一种新的电模式分离技术,是一种高效、快速、新型的分离技术,近十年来得到很大发展。
1981年,Jor genson 和Lukacs首先创立了现代毛细管电泳技术。
毛细管电泳主要包括胶束电动毛细管色谱(MECC)和毛细管电色谱(CEC) 等,它借助电场进行分离,具有极高的分离效率。
由于它可以分离从离子到中性分子、从小分子到生物大分子的一系列化合物,尤其符合以生物工程为代表的生命科学领域内多肽、蛋白质、DNA的分离分析及环境实际样品分析的要求,因此近几年来得到了迅猛发展[12]。
4.2毛细管电泳技术的应用[13]4.2.1 毛细管电泳法在DNA、核酸大分子中的应用黎源倩等用聚合酶链反应(PCR)扩增分枝杆菌hsp65基因的长度为439bp的片段,该扩增片段经限制性内切酶BstEⅡ和HaeⅢ酶切后,分别用CE-LIFD装置和常规琼脂糖电泳(AGE)对比检测酶切片段,对PCR 扩增片段的酶切样品的预处理和CE 条件进行了优化,获得了8 种分枝杆菌DNA的限制性内切酶谱图。