PCR实验室日常检测记录

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实用pcr流程表

实用pcr流程表

临床PCR检验流程记录表检验日期:检验项目: HBV-DNA 扩增仪中保存文件名使用说明:①严格按单一流向进行实验,即试剂准备区→标本制备区→扩增区,严禁逆向移动。

本记录表的流向亦遵循此流程;②各项工作执行后在相应项目前的方框内打“√”;③本记录表最后归档保存在PCR实验室扩增区的专用文件夹中,以备查找。

1. 操作步骤:1.2.1取n个1.5ml的灭菌离心管,作好标记。

(n=样本数+1管HCV阴性对照+1管HCV强阳性对照+1管HCV临界阳性对照)1.2.2向上述离心管中分别加入25ul蛋白酶溶液。

1.2.3分别加入待测样本、HCV阴性对照、HCV临界阳性对照和HCV强阳性对照各200ul.1.2.4加入200ul新鲜配制的裂解液工作液,盖上盖子,振荡15秒,充分混匀。

(注意:不要把蛋白酶溶液直接加入裂解液工作液中)。

1.2.556摄氏度温浴15分钟。

瞬时离心,以去除管盖上的滴液。

1.2.6加入250ul无水乙醇,盖上盖子,彻底混匀(振荡15秒)。

在室温下静置5分钟(15-25摄氏度)。

注意:如果环境温度超过25摄氏度,无水乙醇需预冷。

瞬时离心,以去除管盖上的滴液。

1.2.7将n个核酸提取柱放入收集管中,小心地将步骤1.2.6中的液体移入核酸提取柱中。

盖上盖子,6000*g离心1分钟。

倒掉收集管中的废液,将提取柱重新放入收集管中。

(如果离心后核酸提取柱中仍有部分液体,以更高的速度再次离心,确保提取柱中无残余的液体)1.2.8小心的打开核酸提取柱的盖子,加入500ul洗液1,盖上盖子,6000*g离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将提取柱重新放入收集管中。

1.2.9小心的打开核酸提取柱的盖子,加入500ul洗液2,盖上盖子,6000*g离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将提取柱重新放入收集管中。

1.2.10小心的打开核酸提取柱的盖子,加入500ul无水乙醇,盖上盖子,6000*g离心1分钟,丢弃收集管,将提取柱放入新的收集管中。

附表9:PCR实验室工作日志

附表9:PCR实验室工作日志

文件编号:XXXX-PCR-FB009 版本序号: A 修订序号: 1编写:XXXXXX 审核:XXXXX 批准:XXXX制定日期:2020-6-21 修订日期:2020-8-20 执行日期:2020-8-20新型冠状病毒核酸检验流程记录表检验日期 _________________ 检验项目 ___2019-nCoV核酸检测______实验前准备√试剂在有效期内√扩增仪、加样器和温度计在校准的有效期内√生物安全柜的滤膜在使用有效期内√消毒溶液在有效期内√冲眼器正常运行√离心管、带滤芯吸头已经过质检合格试剂准备区(1区)操作者___________ 实验前:√打开通风设备√实验台面清洁(水或70%酒精擦拭)√冰箱温度:冰箱冷藏室(2~8℃)℃;冷冻室℃√实验室温度:℃(允许范围:10~30℃);相对湿度:(允许范围:30%~70%)PCR试剂来源:品牌批号:___________。

检验项目:2019-nCoV核酸本次实验用量___________人份。

仪器设备使用:离心机:√正常□不正常;振荡器:√正常□不正常;超净工作台:√正常□不正常;√超净工作台使用按相应SOP。

实验后:√清洁实验室台面、地面、加样器和离心机(75%酒精擦拭),并进行移动紫外线照射60分钟以上。

紫外线累计照射__ _小时,□每周一擦拭紫外灯。

√处理实验废弃物。

√执行微量加样器、旋涡振荡器和紫外线消毒车保养√检查水、电(电脑、空调和仪器)和工作台面整洁。

样品制备区(2区)操作者___________实验前:√按sop穿防护用品:1.戴帽子2.戴口罩3.穿一次性塑料鞋套4.穿防护服5.穿一次性靴套6.戴双层乳胶手套7.戴防护眼睛√按照sop进行标本喷洒消毒√打开通风设备√实验台面清洁(75%酒精擦拭)√冰箱(柜)温度:冰箱冷藏室(2~8℃)℃;冷冻室℃;金属浴温度℃√实验室温度:℃(允许范围:10~30℃);相对湿度:(允许范围:30%~70%)所处理的样品(对应样品接收的唯一编号)及拟扩增位置见反面核酸提取及加样过程:按 SOP进行;仪器设备使用:生物安全柜:√正常□不正常;核酸提取仪:√正常□不正常;低速离心机:√正常□不正常;振荡器:√正常□不正常;√生物安全柜使用按相应SOP;√核酸提取仪使用按相应SOP;实验后:√清洁实验室台面、地面及仪器设备(75%酒精擦拭)。

PCR实验室基因扩增检测实验及结果分析

PCR实验室基因扩增检测实验及结果分析

PCR实验室基因扩增检测实验及结果分析1、目的:保证扩增及结果分析的标准化、规范化。

2.适用范围:适用于本室使用的普通离心机。

3.负责人:操作人:4、标准程序:4.1基因扩增检测标准程序:扩增反应前须先在样本输入模板上按照事先排好的标本位置进行设置。

每次实验除待检标本,还需包括:阴性对照、阳性对照、室内质控品各一份,一组阳性标准品(4个梯度108、106、105、104)。

4.1.1打开电脑电源开关,进入Windows XP界面。

4.1.2 接着打开PCR仪电源开关,预热5分钟。

4.1.3双击电脑桌面的SLAN-96P图标进入程序设置界面。

4.1.4单击“文件”菜单中的“新建”命令,(或单击工具栏中的“新建”按扭)。

在测定、容器和模板中做相应的选择,点击OK。

4.1.5应用检测管理程序,并将其添加到样品板文档中。

4.1.6检测反应管,4.1.7 根据当次实验所需条件编辑时间和温度。

运行样品板文档。

4.2 结果分析标准程序:应按以下步骤进行:全部曲线——阴性对照——阳性对照——阳性室内质控品——阳性标准品——逐个分析(标出阳性标本和可疑标本)——调整参数,获得较好的标准曲线,显示定量结果——登记,发报告。

4.2.1 整体曲线的观察:将所有曲线选中进行整体观察1)观察是否存在污染情况(包括标本污染和试剂污染),特别应注意大量曲线在同一Ct值出现上涨的情况。

2)观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成的异常曲线。

4.2.2 阴性对照的分析阴性对照:试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阴性标本。

作用:用以监测实验室和前处理过程中是否存在污染。

4.2.3 阳性对照的分析阳性对照:试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阳性标本。

作用:用以监测实验能否正常检出阳性标本,避免假阴性的出现。

4.2.4 室内质控品的分析室内质控品:试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知浓度室内质控品。

作用:用以监控日常实验的精密度。

核酸实验室的各种记录表

核酸实验室的各种记录表

核酸实验室的各种记录表1. 实验记录表实验记录是实验室工作的核心部分之一,记录实验的详细过程和结果对于后续的数据分析和科研发展至关重要。

实验记录表应包含以下内容:样品编号实验日期实验步骤实验结果备注012020/1/1DNA提取提取得到100μg DNA022020/1/2PCR扩增成功扩增目标片段使用了新批次试剂032020/1/3凝胶电泳测定DNA片段大小约为200bp,符合预期042020/1/4序列测定获得目标序列2. 样品管理表样品管理是实验室工作中的重要环节,需要记录每个样品的详细信息,以便后续实验的追溯和数据的分析。

样品管理表应包含以下内容:样品编号样品名称样品来源样品类型保存位置保存日期备注01DNA样品细菌培养物DNA-20°C冰箱1号架2020/1/102RNA样品植物组织提取RNA-80°C冰箱2号架2020/1/203细胞样品动物细胞培养细胞液液氮罐2020/1/3冻存液中添加甘油04组织样品人体组织组织切片石蜡块2020/1/4装在组织瓶中3. 购买记录表实验室需要不断购买试剂和耗材,购买记录是管理实验室资源和预算的重要依据。

购买记录表应包含以下内容:购买日期产品名称供应商数量单价(元)总价(元)备注2020/1/1DNA提取试剂公司A15005002020/1/2PCR扩增试剂公司B52001000从新批次试剂中购买2020/1/3琼脂糖公司C2501002020/1/4序列测定服务公司D110001000提供测序报告4. 仪器设备维护记录表实验室中常用的仪器设备需要定期维护和保养,以确保正常工作和准确的实验结果。

仪器设备维护记录表应包含以下内容:设备名称维护日期维护内容维护人员备注PCR仪2020/1/1清洁PCR仪外壳和热盖,检查温控系统张三离心机2020/1/2清洁转子和离心管,校准转速和计时功能李四紫外可见分光光度计2020/1/3校正波长和光程,清洁样品舱和光源王五更换紫外灯泡电泳仪2020/1/4检查电泳槽和电源是否正常,更换电极缓冲液赵六5. 废弃物处理记录表核酸实验室产生的废弃物需要按照规定进行安全处理,以保护环境和实验室的安全。

PCR荧光定量检测记录

PCR荧光定量检测记录

PCR荧光定量检测记录PCR荧光定量检测记录编号:RE-ZL-TY-082 NO: 1、样本信息乙型肝炎病毒(HBV)检测使用仪器PCR仪器:;高速离心机:;恒温金属浴:;5-50μL移液枪:;20-200μL移液枪:;100-1000μL移液枪:;试剂盒来源:中山大学达安基因股份有限公司;批号:;将待测样本与阴性质控品、HBV强阳性质控品、HBV临界阳性质控品、阳性定量参考品进行同步处理。

在1.5ml 的无菌离心管内加入200μl 样品;再加入450μl DNA提取液,盖紧管盖,漩涡振荡 15 秒以充分混匀,瞬时离心数秒,100℃ 10±1 分钟恒温处理。

取出后12000转离心5分钟;离心管内即为病毒核酸溶液,吸取样本及阴性质控品、HBV强阳性质控品、HBV临界阳性质控品、阳性定量参考品核酸溶液各20μl加入到PCR反应管中,盖紧管盖,8,000rpm 离心数秒后转移至扩增区检测,以循环扩增条件:93℃ 2分钟;93℃ 45秒→55℃ 60秒,10个循环;93℃ 30秒→55℃ 45秒(收集荧光),30个循环进行扩增。

检验日期:复核日期:丙型肝炎病毒(HCV)检测使用仪器PCR仪器:;高速离心机:;恒温金属浴:;5-50μL移液枪:;20-200μL移液枪:;100-1000μL移液枪:;试剂盒来源:中山大学达安基因股份有限公司;批号:;将待测样本与阴性质控品、HCV强阳性质控品、HCV临界阳性质控品进行同步处理。

在1.5ml 的无菌离心管内加入50μl 的蛋白酶 K;取样本200 μl 加入离心管中;再加入200 μl 的裂解工作液(即已含 Carrier RNA 的病毒裂解液),盖紧管盖,漩涡振荡 15 秒以充分混匀,高速离心 10 秒(防止温育时产生气泡),72℃ 10 分钟。

同时可将洗脱液置于72℃预热;再加入250μl 无水乙醇,盖紧管盖,振荡 15 秒;将混合液全部吸至离心柱,室温下 12,000rpm 离心 1 分钟,将离心柱装至新的收集管;将500μl 的抑制物去除液加入离心柱,室温下 12,000rpm 离心 1 分钟,将离心柱装至新的收集管;将500μl 的去离子液加入离心柱,室温下 12,000rpm 离心 1 分钟,将离心柱装至新的收集管;再次将500μl 的去离子液加入离心柱,室温下 12,000rpm 离心 1 分钟,将离心柱装至新的收集管;将离心柱-收集管于室温下 14,000rpm 离心 3 分钟以除去残余的乙醇;将离心柱取出,放置于新的 1.5ml 离心管。

26!检验科PCR实验室质量控制记录表

26!检验科PCR实验室质量控制记录表

26!检验科PCR实验室质量控制记录表
1.实验室信息
实验室名称:
实验室地址:
实验室负责人:
实验室联系方式:
2.质量控制记录
日期:[日期]
样本编号 | 实验批次 | 阳性对照 | 阴性对照 | 内部质控样本1 | 内部质控样本2 | 结果 |
3.质控结果评价
阳性对照
目标结果:[目标阳性对照结果]
实际结果:[实际阳性对照结果]
评价:[评价结果]
阴性对照
目标结果:[目标阴性对照结果]
实际结果:[实际阴性对照结果]
评价:[评价结果]
内部质控样本1
目标结果:[目标内部质控样本1结果] 实际结果:[实际内部质控样本1结果] 评价:[评价结果]
内部质控样本2
目标结果:[目标内部质控样本2结果] 实际结果:[实际内部质控样本2结果] 评价:[评价结果]
4.质量控制记录总结
根据以上质控结果,该实验室的PCR实验质量控制情况评价如下:
阳性对照:[阳性对照结果评价]
阴性对照:[阴性对照结果评价]
内部质控样本1:[内部质控样本1结果评价]
内部质控样本2:[内部质控样本2结果评价]
5.质控结果异常处理
如发现异常质控结果,请提供异常情况的详细描述,并提供相应的数据分析和根本原因分析。

以上是26!检验科PCR实验室质量控制记录表,请根据实验情况及时记录质控结果并评价实验室的质量控制情况。

如有问题或需要进一步帮助,请及时联系实验室负责人。

谢谢!。

PCR检验实验室检查要点指南

PCR检验实验室检查要点指南

PCR检验实验室检查要点指南PCR(聚合酶链反应)是一种检测基因序列的实验技术。

PCR技术的应用范围广泛,包括疾病诊断、病原体检测、基因突变分析等。

本文将介绍PCR检验实验室的检查要点指南。

一、实验室环境要求1.实验室应保持干净整洁,避免灰尘和杂质的干扰。

2.实验室设备应经常进行检修和清洁,保证设备正常运行。

3.实验室应有稳定的温度和相对湿度,以适应PCR反应需要。

4.实验室应有充足的通风系统,以防止PCR反应中产生的挥发性化合物对实验结果的影响。

二、核酸提取1.核酸提取前,实验人员应佩戴手套、口罩等防护用品,避免外源性核酸的干扰。

2.核酸提取试剂及工具应进行无菌处理,以确保提取的核酸质量。

3.核酸提取前应核对样本标识与登记信息是否一致,避免样本混淆。

三、PCR反应体系准备1.PCR试剂的储存和使用应符合说明书要求,防止试剂变性或受到污染。

2.PCR反应体系的配制应准确无误,包括引物、模板DNA和酶等成分的比例。

3.PCR反应管等试剂器皿应进行无菌处理,避免外源性DNA干扰实验结果。

四、实验仪器使用1.PCR仪的温度控制和均匀性应进行验证。

2.电泳仪的供电、反应液浓度和电泳条件应进行调试,确保能够得到清晰的条带。

五、质控措施1.引物应经过合成和验证,确保特异性和灵敏度。

2.采用阳性对照和阴性对照,以验证PCR反应体系的准确性和可靠性。

3.反应阴性对照应添加,以检测试剂和实验过程中的污染情况。

4.实验过程中的操作人员应定期参加技能培训和质量控制培训,提高实验操作技术和质量意识。

六、实验记录1.对每个样本和控制试剂的操作过程进行详细记录,包括样本条码、操作时间、反应体系等信息。

2.实验人员应填写实验记录表格,并对异常情况进行说明。

3.实验数据和结果进行保留,并按照实验室规定的期限进行归档。

七、结果解释与报告1.PCR结果的分析应由专业人员进行,确保结果准确可靠。

2.PCR结果应进行解读,并结合临床资料进行分析和判断。

临床PCR检验流程记录表

临床PCR检验流程记录表
口按实验室清洁程序(SOP编号)清洁实验室台面、地面、及仪器设备,并进行紫外线照射30分钟以上;
口按实验室废弃物处理程序(SOP编号)处理实验废弃物。
操作者:____________
扩增区(3区)
实验前:口打开通风设备口实验台面清洁(水或75%酒精擦拭)
口实验室温度:____℃(允许范围:10~30℃);相对湿度____(允许范围:30%~80%)
扩增仪操作:口开机自检及运行正常;
口按扩增仪操作(sop编号)sop进行编程、参数、设定;
室内质控结果:________________ 口填写室内质控记录、描质控图
是否失控:口是 口否
实验结果失控原因与处理:(失控标准参照室内质量控制SOP程序)
实验结果:见所附扩增仪打印结果。
实验后:口填写相关记录表;
口按实验室清洁程序(SOP编号)清洁实验室台面、地面,并进行紫外线照射30分钟以上;
口按实验室废弃物处理程序(SOP编号)处理实验废弃物。
操作者:____________
检测日期:____________
口 正常 口不正常
口实验室温度:____℃(允许范围:10~30℃);相对湿度____(允许范围:30%~80%)
PCR试剂来源:(深圳匹基公司) 批号:____________
检验项目:_________ 本次实际用量:_______人份
具体配置内容______________________________________________________
仪器设备的使用:
离心机:口正常 口不正常 振荡器:口正常 口不正常
实验后:口移动器调至最大量程刻度并复位;
口填写相关记录表;
口按实验室清洁程序(SOP编号)清洁实验室台面、地面、加样器和离心机,并进行紫外线照射30分钟以上;

检验科pcr实验室检验流程

检验科pcr实验室检验流程

检验科pcr实验室检验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!Download Tip: This document has been carefully written by the editor. I hope that after you download, they can help you solve practical problems. After downloading, the document can be customized and modified. Please adjust and use it according to actual needs. Thank you!检验科PCR实验室检验流程:①样本接收与登记:在四区之外接收样本,确保样本标识清晰可追溯,符合检测规定,进行严格登记。

②试剂准备:进入试剂准备区,取出PCR检测试剂盒,核对批号与有效期,准备核酸提取液、反应液及Taq酶等。

③样本处理:在样本处理区,按照生物安全规范对样本进行前处理,包括灭活、裂解,随后进行核酸提取。

④配置反应体系:在模板加入区,根据标准操作程序配置PCR反应体系,包括引物、探针、缓冲液及模板DNA。

⑤PCR扩增:将配置好的反应混合物转移至扩增区,装载至PCR仪,设定合适的温度循环参数,开始扩增过程。

⑥结果分析:扩增结束后,利用软件分析荧光信号,判断样本中目标DNA 是否存在及其初始量。

⑦数据审核:检验人员审核实验数据,确认结果准确性,必要时进行复核实验。

⑧报告发放:将审核无误的检测报告提交至临床医生或相关部门,确保信息传递及时准确。

⑨废物处理:严格按照医疗废弃物处理规定,对实验产生的废弃物进行分类、消毒、封装,安全处置。

⑩实验室消毒与记录:完成每日工作后,对各区域进行清洁消毒,详细记录实验过程与结果,归档保存。

PCR实验记录表

PCR实验记录表

PCR 实验室检验流程表检验日期:检验项目:实验前准备试剂在有效期内扩增仪、加样器和温度计在校准的有效期内 □生物安全柜的滤膜在使用有效期内 消毒溶液在有效期内离心管、带滤芯吸头已经经过质检合格 操作者:试剂准备区(1区)实验前:实验后: 清洁实验室台面、地面、加样器,并进行紫外线照射30分钟以上。

处理实验废弃物。

操作者:打开通风设备实验台面清洁(水或70%酒精擦拭) 冰箱温度:冷藏室(2~8℃): ℃ 冷冻室(-18℃±2℃): ℃实验室温度: ℃(允许范围:10~30℃) 相对湿度: (允许范围:30%~70%) PCR 试剂来源: 批号:检验项目:本次试验用量: 人份剩余量: 人份标本制备区(2区)检验日期:检验项目:实验前:核酸提取及加样过程:按sop 进行仪器设备使用:生物安全柜: 正常 不正常 恒温仪温度校准: 正常 不正常 离心机: 正常 不正常 振荡器: 正常 不正常 试验后: 清洁实验室台面、地面及仪器设备。

处理实验室废弃物。

操作者:打开通风设备 实验台面清洁(水或70%酒精擦拭) 冰箱温度:冷藏室(2~8℃): ℃ 冷冻室(-18℃±2℃): ℃ 实验室温度: ℃(允许范围:10~30℃) 相对湿度: (允许范围:30%~70%) 阳性室内质控物来源: 浓度及批号: 扩增位置:阴性室内质控物来源: 批号 扩憎位置:扩增及产物分析区(3区) 检验日期: 检验项目:扩增仪保存文件名:实验前:失控原因及分析:(失控判断标准及原因分析)实验结果:实验后: 清洁实验室台面、地面及仪器设备。

处理实验废弃物。

操作者:打开通风设备实验台面清洁(水或70%酒精擦拭) 实验室温度: ℃(允许范围:10~30℃) 相对湿度: (允许范围:30%~70%) 扩增仪操作: 开机自检及运行正常 进行编程、参数设定室内质控结果:结果:是否失控: 否 是。

PCR实验室原始记录

PCR实验室原始记录
UNDET.
实验判读结果:
样本结果:
阴性样本编号:
阳性样本(Ct值):
备注:
实验方法:荧光PCR法
样本编号:
实验类型:定量/定性
实验时间:
实验人员
实验室温度:℃
实验室湿度:%
仪器开启时间:
生物安全柜:时分
全自动核酸提取仪:时分
ABI7500:时分
离心机:时分
仪器状态:
故障/良好/其它
故障/良好/其它
故障/良好/其它
故障/良好/其它
阳性对照
Ct值:
UNDET.
阴性对照
Ct值:
PCR实验室原始记录
实验项目:登革热病毒基孔肯雅热病毒诺瓦克病毒季节性流感病毒甲型H1N1流感病毒H7N9流感病毒中东呼吸症病毒甲肝病毒乙肝病毒丙肝病毒人乳头状瘤病毒(HPV)伤寒杆菌霍乱弧菌疟原虫抗原检测甲、乙型流感病毒痢疾杆菌
试剂厂家(批号):上海之江/
核酸类型:DNA/RNA
采咽拭子

PCR检测记录表

PCR检测记录表

基因扩增荧光定量检测记录表
实验日期:检测项目:Linegene保存文件名:
使用说明
1、严格按单一流向进行实验,即试剂准备区(1区)→样本处理区(2区)→扩增分析区(3区),严禁逆向。

本记录表的流向亦遵循此流程;
2、各项目执行后在相应项目前的方框内打√;
3、实验室内温度为15~30℃为合格范围;
4、实验后对实验室的清洁与消毒方法参见“PCR实验室清洁程序”,实验后次日关闭通风设备和移动紫外灯;
5、实验结束后,将标本的检测结果登记至标本记录本上以备查询。

本记录表保存在归档文件夹中,存放在实验室文件柜中,保存2年;
6、Linegene扩增仪中结果保存于D盘对应实验日期的文件夹中,如2004年4月的结果保存于“D:\2004\04\”中,每月底将当月资料备份于软盘中,保存2年。

PCR实验检测标准操作规范

PCR实验检测标准操作规范

PCR检测实验室操作规范一、PCR 实验室的设置及管理1.目的:建立实验室的合理设置和科学管理,防止实验污染,保证检测结果的可靠性。

2.适用范围:本程序适用于分子诊断室的设置、工作流程和日常管理等。

3.负责人:4.细则:4.1流感实验室为急传所的专业实验室,从事临床标本的基因扩增检测及相关科研工作等。

4.2 本实验室采用实时荧光定量(定性)PCR 技术作为病毒基因诊断的主要手段,实验室分为三个区:试剂准备区(第一区)、标本处理区(第二区)、扩增分析区(第三区)。

每一工作区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服,并有明显的区分标识。

标本的接收则在检验科标本接收处进行。

4.3 各工作区专用的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材和清洁用具等,不可混用。

4.4 各工作区配置、功能和内务管理见各相关SOP 文件。

4.5 严格遵守从“试剂准备区→标本处理区→扩增分析区”的单一流向制度,不得逆向进入前一工作区。

4.6 非本实验室工作人员,未经许可不得入内;进修、实习或其他科室人员因科研活动需要,进入实验区域(试剂准备区、标本处理区、扩增分析区)需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行,在本实验室人员监督指导下进行。

4.7 实验完毕后做好清洁消毒工作。

二、PCR 实验室工作制度1.目的:保持良好的工作环境,以确保检测结果的可靠性,防止交叉污染,防止差错、事故及纠纷的发生。

2.适用范围:所有本实验室人员。

3.负责人:4.细则:4.1 本实验室进行临床基因扩增检测及相关实验工作,不得进行其它实验操作。

4.2 各区的用品不得混用。

4.3 在各区的实验操作过程中,操作者必须戴手套和帽子,严格按照操作规程。

4.4 试剂准备区只能进行试剂的贮存及配制等相关操作(见相关SOP 文件)。

4.5 标本处理区只能进行临床标本的保存,核酸提取、保存及其加入至扩增反应管和测定RNA 时cDNA 的合成(见相关SOP 文件)。

PCR室内质量控制标准操作程序-检验科PCR室作业书

PCR室内质量控制标准操作程序-检验科PCR室作业书

PCR室内质量控制标准操作程序1.目的:随时了解并控制实验室检测的精密度变化。

2.适用范围:核酸扩增荧光定量检测实验室。

3.负责人:操作人:4.程序:4.1血清质量控制品制备及操作4.1.1质控品制备:收集本室检测的临床样本,HBVDNA定量为106copies/ml的样本混匀,并分装于0.5ml的离心管中,每支110µl,编号后(如Qb0201-n),-20℃保存。

4.1.2操作:每次检测过程中将此分装的室内质控品与样本同时检测,记录此标本的检测结果;计算前10次检测结果的平均值作为本批质控品的靶值。

4.1.3如果使用商品化的质控品,按4.1.2要求执行。

4.2室内质控图的使用方法4.2.1描点a)图中X线为靶线,X±2s为警告线,X±3s为失控线。

对于同一批号的质控血清不论使用几个月,其空图均不变化。

只要将图纸上方“起止日期”项填入每个月的实际起止日期即可。

b)每天将该批号质控血清按有关规定程序复融随同病人的标本同时检测。

将日期、检测结果和操作者如实记录在图下方的相应位置,并按前面的方法画出图上的对应点,用直线将该点与前一天的点连接。

c)月底计算当月全部质控血清检测结果的X、s和CV,并进行图形分析和小结,将质量控制图存入质控资料档案。

4.2.2图形分析a)如果在X±3s线以外,则为失控,应立即报告有关负责人,迅速查找原因。

必要时复测标本,然后方可发出报告,并将失控情况、查找过程及处理结果等详细记录。

b)如果在X±2s线以外,或出现连续6点以上在一侧等规律变化,均应即使向有关负责人反映,并积极查找原因。

但当天的检验结果一般可以发出。

4.2.3通过观察图形的规律性变化进行误差分析,消除误差来源a)曲线漂移:提示有系统误差,准确度发生了一次性的向上或向下改变。

这种变化往往是由于一个新的情况引起的。

如更换不同批号试剂,启用新批号的质控血清、操作人员的变换等。

PCR实验室记录管理制度

PCR实验室记录管理制度

PCR实验室记录管理制度1、目的:确保检验资料的记录、保存状态在控2、适用范围:实验过程中产生的数据、文本资料的记录3.负责人:操作人:4、工作程序:4.1书面记录文件的管理:4.1.1本实验室的书面记录包括:001浦东新区公利医院检验科基因检测实验室平面图------------编号ABCD/001002实验室主要负责人简历表-----------------------------编号ABCD/002003PCR实验室工作人员一览表----------------------------编号ABCD/003004PCR扩增接收标本记录表------------------------------编号ABCD/004005拒收标本记录本-------------------------------------编号ABCD/005006标本超低温保存记录表-------------------------------编号ABCD/006007PCR试剂购买记录表----------------------------------编号ABCD/007008试剂验收记录表-------------------------------------编号ABCD/008009PCR室特殊耗材验收记录表----------------------------编号ABCD/009010普通耗材验收记录表---------------------------------编号ABCD/010011室间质评记录表-------------------------------------编号ABCD/011012PCR室内质控记录表----------------------------------编号ABCD/012013室内质控图-----------------------------------------编号ABCD/013014PCR实验室环境温湿度记录表-------------------------编号ABCD/014015冰箱温度质控图-------------------------------------编号ABCD/015016仪器使用记录表-------------------------------------编号ABCD/016017仪器设备维护和校准记录表---------------------------编号ABCD/017018紫外消毒车消毒记录表-------------------------------编号ABCD/018019应急处理登记表-------------------------------------编号ABCD/019020PCR废血标本处理交接表-----------------------------编号ABCD/020021垃圾处理记录表-------------------------------------编号ABCD/021022实验室清洁消毒记录表-------------------------------编号ABCD/022023PCR检验报告单-------------------------------------编号ABCD/023024耗材进购记录表-------------------------------------编号ABCD/024025试剂耗材供应商一览表-------------------------------编号ABCD/0254.1.2填写书面记录,需使用黑色墨水或圆珠笔,字迹清晰,如有涂改,在涂改处应有涂改人签名,不得在记录表上进行无关书写,保持记录表清洁、完整。

PCR实习周记

PCR实习周记

PCR实习周记PCR实验室工作流程样本接收1.应在四区之外的地方接收样本。

2.样品的标识应据可追溯性,实验室不应接受缺乏正确标识和不符合检测规定的样品。

3.进行样品登记,根据实验安排,处理或储存样品。

样本接收记录详实可靠,接收人和送样人同时签字方为有效。

4.样本接收记录详实可靠,接收人和送样人同时签字方为有效。

实验操作1.严格按照试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区的顺序单方向进行实验操作。

2.各区域所使用的手套、帽子、实验服等各自独立,不能混穿。

3.严格按照基因检测操作规程进行实验和使用仪器设备,定期检测、校正并作好记录工作。

4.工作结束后必须立即消毒实验室台面,并用紫外灯照射实验室。

做好医废处理。

篇二:实习总结为期一个月的实习,我被分配在浙江省疾病预防控制中心(ZJCDC)的毒理实验室。

这是一个与动物培养息息相关的实验室,在这里,我,第一次见识到了从业人员的生活,尝试到了作为一个上班族的乐趣与辛苦,明白了作为一个药学专业的学生,要学的还有很多。

(一)、实习目的实习是大学学习中很重要的实践环节。

实习作为每一个大学生的必修课,不仅让我们学到很多在课堂上学不到的知识,还使我们开阔视野,增长见识,为我们以后更好把所学的知识运用到实际工作中打下坚实的基础。

从实习中锻炼动手能力,了解自己的优点与劣势,使大三的学习更有目的性。

同时,通过对制度规范与实验室生物安全管理规定的强调,增强自我责任意识,清晰工作态度与意识。

(二)、实习内容一个月的实习中,我观察了大鼠小鼠的培养与解剖,参与了大鼠繁殖实验与小鼠增强免疫力功能实验。

1.大鼠小鼠培养在大鼠繁殖实验的,药品通过饲料进入大鼠体内,因此在给大鼠换饲料时,要严格注意饲料种类与用量,保持纪录。

在小鼠增强免疫力实验中,不同的药品通过灌胃进入小鼠体内,因此我学习了小鼠的抓法:小鼠的抓取固定方法:先用右手抓住鼠尾并提起.置于鼠盒的笼盖或实验台上向后拉,在其向前爬时.用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左掌心,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿。

PCR实验室检查要点(2016)【范本模板】

PCR实验室检查要点(2016)【范本模板】

聚合酶链反应(PCR)检验实验室检查要点指南(2016版)聚合酶链反应检验实验室是指通过基因扩增的方式检测特定的DNA或RNA的检验实验室.聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是一种在体外特异性扩增靶DNA序列的技术,其基本过程为模板双链DNA的变性、引物与模板DNA的退火和在DNA 聚合酶引导下的链延伸反应三个阶段的多次循环。

每一次循环后的扩增产物均可作为下一轮循环的模板,理论上,扩增产物量呈指数形式上升,即经过n个循环后,产物量增加到2n倍。

PCR试剂操作简单,短时间内在体外可获得数百万个特异靶DNA序列的复制,为临床疾病的诊断、治疗监测和预后评估提供了一种极有帮助的实验室辅助手段.PCR检验实验室是PCR试剂生产企业在产品检验过程中不可缺少的工作环境,其环境控制水平和质量管理水平直接影响着最终产品是否合格,能否放行。

由于该产品本身的特殊性,《医疗器械生产质量管理规范附录体外诊断试剂》、《医疗器械生产质量管理规范体外诊断试剂现场检查指导原则》条款中,明确对PCR试剂的生产和检验环境做出规定。

此外现行卫生行业的法规、标准以及相关文献中对于PCR检验实验室均作出规定,主要涉及《全国临床检验规程》(第三版)、《医疗机构临床基因扩增管理办法》(卫办医政发〔2010〕194号)、《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》及《临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用》(WS/T 230-2002)等行业标准的相关要求。

本检查指南旨在帮助北京市医疗器械监管人员增强对PCR检验相关过程的认知和把握,指导全市医疗器械监管人员对PCR检验实验室设计建设与质量控制的监督检查工作。

同时,为PCR试剂生产企业在PCR检验实验室的设计建造和管理要求提供参考。

当国家相关法规、标准、检查要求发生变化时,应当重新讨论以确保本检查指南持续符合要求。

一、适用范围本检查指南可作为北京市食品药品监督管理局组织、实施的体外诊断试剂产品注册质量管理体系现场核查、《医疗器械生产许可证》现场核查、医疗器械生产监督检查等各项涉及PCR检验实验室检查的参考资料。

QPCR实验记录书写模板

QPCR实验记录书写模板

PCR实验记录书写模板(示例)一、细胞铺板分组及干预处理(1)试剂耗材准备:培养好的巨噬细胞、药物干预(品牌:MCE公司)、脂多糖LPS(品牌:Solarbio)、IFN-γ(品牌:proteintech)、细胞培养板等(2)PIMs分为以下3个实验组:组别处理方式Con组空白对照,等容量DMSOLPS+IFN-γ组IFN-γ (10ng/mL)和LPS(1ug/ml)处理48小时药物干预组药物干预(300nM)处理48小时(3)处理结束后每孔加入1ml PBS洗两次,最后弃PBS,加入1ml Trizol,混匀,室温静置5min。

每孔加入1ml的Trizol裂解液裂解细胞,最后转移至1.5mlEP 管中,继续实验或放低温负80冰箱保存。

二、Trizol法提取RNATrizol是一种新型总RNA抽提试剂,采用变性剂即内含异硫氰酸胍酚和β-巯基乙醇等变性物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。

异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类强力的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质,并使蛋白质二级结构消失,细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸分离。

β-巯基乙醇主要破坏RNase蛋白质中的二硫键。

(1)试剂准备:Trizol试剂、氯仿、异丙醇、75%乙醇(DEPC水配制)、DEPC水、1.5ml EP管等。

(2)操作步骤1.样品处理:从负80冰箱中取出裂解充分的样本,至冰上融化。

2.待融化后加入0.2ml氯仿,振荡15s,静置15min。

3.4℃离心,12000g×15min,取上清。

4.加入0.5ml异丙醇,将管中液体轻轻混匀,室温静置10min。

5.4℃离心,12000g×10min,弃上清。

6.加入1ml 75%乙醇,轻轻洗涤沉淀。

4℃,8000g×5min,弃上清。

7. 晾干,加入适量的DEP水溶解(65℃促溶10-15min)。

的纯度。

若比值较低,说明有残余蛋白质存在;比值太高,则提示RNA有降解。

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