《生物技术制药》

《生物技术制药》复习

一、名词解释

1、人-鼠嵌合抗体：在基因水平上将鼠源单抗的H 和L链可变区基因分离出来，分别与人Ig的H 和L链的稳定区（C）基因连接成人-鼠嵌合抗体的H 和L链基因，再共转染骨髓瘤细胞，就能表达完整人-鼠嵌合抗体

2、生物技术制药：采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物，从而达到预防，治疗和诊断疾病的一种新型生物制药技术。

3、亚单位疫苗：是指不含病原体核酸，选用能诱发宿主产生中和抗体的微生物蛋白（提取或合成细菌、病毒外壳的特殊蛋白结构）或表面抗原，即抗原决定簇制成的疫苗，这类疫苗不是完整的病毒，是病毒的一部分物质，故称亚单位疫苗。

4、蛋白质药物化学修饰：在分子水平上对蛋白质药物进行化学改造，通过对主链的切割、剪接及化学基团的引入，实现对蛋白质药物理化性质和生物活性的改变，属蛋白质改性范畴。

5、固定化酶：是将具有一定生理功能的酶或生物细胞，用物理或者化学方法将其固定，作为固体生物催化剂而加以利用的一种技术。

二、单项选择题

1、现代生物技术的标志是：A

A、DNA互补双螺旋结构模型的提出

B、DNA测序技术的诞生

C、第一只克隆羊“多莉”的诞生

D、人类基因组草图的完成

2、获得目的基因最常用的方法是：B

A、化学合成法

B、PCR技术

C、逆转录法

D、DNA探针技术

3、所谓“第二代基因工程”是指A

A、蛋白质工程

B、细胞工程

C、酶工程

D、抗体工程

4、酶和细胞固定化最常用、最有效的方法是：C

A、载体结合法

B、交联法

C、包埋法

D、选择性热变性法

5、真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式表达，下列错误的是：D

A、基因操作简便

B、只能作抗原用

C、容易实现高效表达

D、易被细菌酶类水解

6、目前应用最广泛的产酶菌是：A

A、大肠杆菌

B、枯草杆菌

C、青霉菌

D、链霉菌

7、大肠杆菌的基因表达系统为A

A、pBV220/pET

B、YEp/YRp

C、pUC/λgt11

D、pBR322/λgt10

8、用于生产α-干扰素的动物细胞是A

A、Namalum

B、Vero

C、WI-38

D、MIRC-5

9、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是A

A、糖基化

B、产量高

C、性质稳定

D、疗效可靠

10、基因表达最常用的宿主菌是A

A、大肠杆菌

B、枯草芽孢杆菌

C、链霉菌

D、酵母

11、筛选杂交瘤细胞（脾-瘤融合细胞）选用的培养基是B

A、HT

B、HAT

C、RMP1640

D、BME

12、采用凝胶过滤法分离单克隆抗体，最高峰属于B

A、IgG

B、IgM

C、IgA

D、IgE

13、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是C

A、降低相对分子量

B、增加组织通透性

C、降低免疫源性

D、延长半衰期

14、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体，常用的是B

A、单域抗体

B、单链抗体

C、Fab片段抗体

D、最小识别单位

15、酶的主要来源是C

A、生物体中分离纯化

B、化学合成

C、微生物生产

D、动/植物细胞与组织培养

三、配对选择题

题 [ 1—4 ]

A、基因工程

B、细胞工程

C、酶工程

D、发酵工程

E、生化工程

1、生物技术的核心与关键是A

2、生物技术的基础是B

3、生物技术的条件是C

4、生物技术获得最终产物的手段是D

题 [ 5—8 ] 菌种选育方式与所得到的菌种类型

A、自然选育

B、定向培育

C、诱变育种

5、抗性菌株B

6、野生型菌株A

7、突变株C

8、营养缺陷型菌株C

四、多项选择题

1、提高基因表达产物稳定性的方法有ABCD

A、组建融合基因产生融合蛋白

B、利用大肠杆菌信号肽将产物转移到胞浆周质中

C、采用位点特异突变方法改变真核蛋白S-S位置

D、采用蛋白酶缺陷型大肠杆菌

E、优化基因工程菌培养条件

2、影响外源基因在大肠杆菌中表达效率的因素有ABCD

A、启动子的强弱

B、核糖体结合位点的有效性

C、SD序列和起始密码的距离

D、密码子的组成

E、外源基因的拷贝数量

3、蛋白质药物化学修饰后的主要特点是：ABCE

A、循环半衰期延长

B、免疫原性降低或消失

C、毒副作用降低

D、理化稳定性降低

E、生物稳定性增强

4、菌种的选育方式包括ABCDE

A、自然选育

B、诱变育种

C、杂交育种

D、原生质体融合

E、基因重组

5、基因载体导入动物细胞常用的方法有BC

A、细胞融合法

B、磷酸钙沉淀法

C、电穿孔法

D、显微注射法

E、重组逆转录病毒介导法

五、问答题

1、简述单克隆抗体的制备过程？

答：①抗原与动物免疫：制备特定抗原的单克隆抗体，首先要制备用于免疫的适当抗原，再用抗原进行动物免疫。

②细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养：细胞融合的方法可以采用聚乙二醇诱导融合，选择性的培养基为HAT培养液（次黄嘌呤（H）氨甲喋呤（A）胸腺嘧啶（T）

③刷选阳性克隆与克隆化：可以用免疫酶技术，免疫荧光技术，放射免疫技术等进行阳性克隆。克隆化是指单个细胞通过无性繁殖而获得细胞集团的整个培养过程。

④杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定（杂色体分析）

⑤单克隆抗体的大量制备：可以进行体外或体内培养得到大量的单克隆抗体。

⑥单克隆抗体的纯化

2、简述疫苗与抗体的关系？

答：当机体通过注射或口服等途径接种疫苗后，疫苗中的抗原分子就会发挥免疫原性作用，刺激机体产生高价特异性的免疫保护物质，如特异性抗体，免疫细胞及细胞因子等，党机体再次接触相同病原抗原时，机体的免疫系统便会依循其免疫记忆，迅速制造更多的保护物质