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辅助生殖技术人类辅助生殖技术(as一led irproduclive kchnology,ART)包括体外受铕•肝胎移W(i/i feniUtaiion and embryo iranrfer.IVF-ET)及其衍生技术和人工授 artificial insemination, Al)两大类,第一节人工授精[-I s•术名称槪念】人工授铕是伤IH人t方式将m液注人女性体内以取代性交途径使其虹振的一种方法。

根挞W液朿两不㈣，分为丈夫W液人工授钠和供W人丄授精。

(一)丈夫*液人工授精I适应迪】1.男性w少精、弱m .液化择常、件功能陣碍、生殖器鸸形等不rr:2.咨预因素不育；3.生飱道畸形及心珲闪家导致性交不能等不疗；4.免疫性不育；5.谀因不明不侉。

【禁忌证】1.w女一方患冇生殖泌尿系统之件感染或性代播疾病；2.—方患有严重的遗传体疾病成格神心理疾患；3.—方接触致畸S的射线、骞物、药品并处于作用期；4.一方有吸毐等严重不良峭好。

（二）供精者精液人工授精【适应评】1.不坷逆的无梢子症、严重的少精症、弱精症和畸精症；2.瑜梢管复通失败；3.射精障碍;4.适应证前3项中.除不珂逆的尤梢子沾外，其他莴行供精者精液人工授W 技术的患者，医务人员必琐向其交代淸楚:通过卵胞浆内单精子显微注射技术也可能使其有自己血亲关系的G代，加果患茗本人仍喏持放弃通过卵胞浆内中w+wm注射技术助孕的权益，则必須签署知情同意书后，方珂采用供稍人丄授梢技术助孕；5.男方和（或）家族有不宜生荇的严*遗传性疾病；6.母儿血闱不合不能得到存活新生儿。

【嫔忌i£l1.女方患有生殖泌尿系统急性感染或性传鯈疾病；2.&方患有严轚的遗传、蓼体疾供或W神疾患；3.女方接触致畸M的射线、彥物、药品并处于作用期；4.女方有吸毐芩不良嗜好:【操作方法及过程】1.人工授锖丐以在Q然周期或药物促排卵周期下进行,但严禁以多眙《娠为H的使用促排卵药；2.通过B超和有关激隶水平联合监测卵泡的生长发育；3.掌榔株卵时间，适时实施人r授精；4.用于人工授精的梢子必须经过洗涤分高处理，行宮颈内人工扠其昀向运动M子总数不得低于20x10%行宵腔内人工授两.其前向运动精子总数不得低于10x10%5.患者推空膀晄.穿隔离衣逬人人工抟精事.躺在床上.藏石位，臀郎垫砗；6.打开人工授精包，注射器；7.常蚬铺巾；8.«器打幵阴道；^用纱球應温盐水轻轻擦拭阴进.宮颈；10.用大棉棍釀培#液轻轻掠拭兴颈U和六颈管；11.助f从培养箱中取出处押W的穴蝌子怂液，打开盖子；12.打开人工授衔管，接上注射13.将人T.授精管插入精液焫养竹中，吸取所冇培养液，撂空气泡；14.将人工授栢管的尖端插人它颈，进人内口1cm左右，缓慢往人培养液＞if 30秒神c .缓慢拔出人工授wn:is.如果雄以进人宮領内口，sj用宮颈钳钳夹n殒，探针探宫腔，t复上述步骤》16.结束操作，患拧仍保侍臀部抬高的状态,平卧半小时，【术前准备】1.文施授怙BH.不钤夫(H必飧签署(知情同意书＞及｛多胎妊娠减胎术同意W«2.必須及W做好不角夫妇的病历书写并按(眹疗机构病历管理規定＞严格管琿；3.卵泡数目过多的患其保要考虑穿刺或放弃本洲明，避免出现OHSS。

［术中注窓】1.注意核对患者M:名与精液容器上的姓名；2.严格无菌操作；3.插人人工授W管闲难的患#，可以ftB超引导F操作；4.遘免对内換的刺激.轻丈操作.尽可能不仗用宵玫钳、探针。

【术后处理】1.人工授精后可用药物支持黄体功能：2.人:I.授精后14-16天沴断生化妊娠,5周B«确认临床妊娠;3.多胎妊娠必须进行选择性减胎术；第二节体外受精-胚胎移植［手术名称概念】体外受精胚駘移植技术是栴从女性体内取出卵子，作器皿内培养后.加人经技术处理的W子.待卵？受楕G•.淋绾培养，到形成早期胚胎时，洱转移到子宮内着床，发_成胎儿直至分娩的技木。

【适应证】1.体外受精•胚胎移核适戍证0)女方各种因*导败的运瑜障碍；(2)排卵降碍：(3)子宮内K诗位症*(4)男方少、弱梢子蛀；(5)不明原W的+育；(6)免疫性不孕《2.卵胞浆内单梢子》微汴射适应证(1)严萆的少、弱、畊稍子症《(2)不町逆的梗阻性无稍子症；(3)生稱功能障碍(排除遗传缺餡疾病所致)；(4)免疫性不角；(5)体外受精失败•，(6)精子顶体异常；(7)笛行柏入肘胚胎遗传学柃杳衣。

【禁忌证】1.男女任何一方患有严t的销沖疾患.泌昧生殖系统急件感染、性传播疾痛;2.患有｛母要保健法＞规定的不rp+rr的、目前无法逬行肝駘梢人前遗传学珍断的遗传性疾病*3.任何一方具有吸#等严重不良嗜好；4.任何一方接鳜致鷗1的射线骞物、药品并处于作用明》5.女方子宮不具备妊娠功能或严t氰体疾病不能承受《籤。

【操作方法及过《】1.术前检査合格；2.月经第二天使用GnRHa进行降调竹：3.降调势满意后开姶注射促性臃激家綢激卵巢；4.适时添加HMG或LH;5.卵泡达到一定大小后注射hCG|6.次日准备该患者的培养液和堉养DL;7.注射KCG 36小时左右取卵；8.患者排空眯晄后穿W离衣逬人手术笮,温盐水冲洗阴ifi:9.将吸引器的n头连接至双腔取砟针；10•在B超引导F穿剌抽吸所有达列一定大小的卵沲，注意左右侧和卵泡».根据情况冲洗卵泡；11.穿剌#用«器检査患者阴道，f解打无出血；12.取卵当天丈夫取稍液；13.对粞液进行洗涤分奥处理；14.取卵后3〜4小时进行受稍；13.须行卵狍浆内单精子注射的患者，取卵后4小时进行申铕子g«注射；16.取卵后24小时现察受梢悄况；17.取卵后72小时观察卵裂期肝胎发育悄況,选择合适的胚胎移植；18.患者憋尿，穿W离衣进入手术宽，截石位；19-温盐水较轻撩拭阴道、宫颈，培粹液擦拭官颈管；20.将移棺管外管插人宮颈管.核对患#名字；302 —第三篇生殖内分泌21.用移植内笤从培养皿中吸取要移植的胚胎，并吸取适当t的培养液和气泡；22.将移植管内管拿到手术宰，再次核对忠者姓名后，插人移棺管外管中；23.将移植管的尖端插人拟移植的位罝，注人胚胎。

等30秒钟后，缓慢地拔出移椬管；24.移植后剩余胚胎培养72小时；25.取卵后120 - 144小时选择发育到囊胚的胚胎冷冻。

【术前准备】1.预先认真查验不育夫妇的身份证、结婚证和符合国家人口和计划生育法规和条例规定的生育证明原件,并保留KS印件备案；涉外婚姻夫妇及外铒人员应出示护照及婚姻证明并保留其复印件备案；2.不育夫妇签署相关技术的（知情同意书》和＜多胎妊娠喊胎术同意书》；3.取卵前2天阴道冲洗。

【术中注意】1.各步骤均需注意核对患者姓名；2.取卵术中注意卵巢附近的重要脏器，如血管、肠管、膀胱等，避免损伤；3.移植胚胎的数M,如为35岁以下，第一次治疗的患者，不多于2个，其他患者不多于3个；4.移桢时避免对内膜的刺激，轻柔操作.尽可能不使用宫颈钳、探针。

［术后处理】1.采用适!5的药物剂M进行黄体支持；2.歌视患荇主诉症状，出现腹胀、尿少、呼吸困难等情况想高度警保是否存在OHSS;3-对体外受桔-胚胎移植出生的婴儿进行随汸.随访率不得低于95% ;4.对于多胎妊娠必须实施减胎术，避免双胎，严禁三胎和三胎以上的妊娠分娩1第三节其他衍生技术衍生技术主要指的是体外受稱•胚胎移梢相关的其他技术。

一、胚胎冷冻【手术名称慨念】对体外受稍•胚胎移棺治疗中，对暂时不具答移植条件，但冇发台潜能的胚胎采用适当技术手段处理后保存于低温条件的操作。

冷冻" 法包括权序冷冻和玻确化冷冻两类,通常保存于液菽内。

【适应证】1.新鲜取卵周期因为各种原因不能移植，包括卵巢过度剌激、子宫内暎异常、发热等；2.移植《余的胚胎，但具备发育潜能；3.捐卵后受梢形成的胚胎，滿冷冻半年以上，ft供者经过感染性疾病的检査后再行移植。

【禁忌证】异常受精卵形成的胚胎或发育异常的胚胎不能进行冷冻。

【操作方法及过程】此处介绍的操作方法为我院主要采用的玻璃化冷冻法。

1.如冷冻的胚胎为囊胚.需做人T皱缩；2.人工皱缩可采用激光或机械的方法，使«胚腔至少缩小一半以上；3.取出含胚胎培养皿，仔细核对姓名；4.胚胎转移至冷冻培养皿中的玻璃化预平衡液中,2分钟；5.多次温柔吹吸，使之与培养液平衡；6-将胚胎转移至玻璃化冷冻液中,反复吹吸混匀，至少10次；7.体视显微镜下将胚胎小心转移至冷冻环上；8.迅速将冷冻环浸人液氮杯的液氣中，小心冷冻环尖端+要触及任何物体；9.记录操作时间。

【术前准备】1.夫妻双方笛签署《胚胎冷冻知情l-j意书＞;2.检査冷冻用培养液，超过配制后2周不应使用；3.将所需冷冻管、冷冻支架均标记h姓名病历号。

【术中注意】1.核对胚胎培养皿姓名、冷冻容器上姓名、病历号.H期；2.注意观察，在转移过程屮避免胚胎丢失：3.玻璃化冷冻时间非常重要，从胚胎进人玻塽化液到进人液氮之间不笪超过30秒，也不宜短于25秒。

【术后处理】1.墒写病历和冷冻登i己本；2-告知患者冷冻胚胎数M。

二、W入前W胎遺传卞诊断＜PGD＞【手术名称槪念】是指住体外受楮及胚胎移植治疗中，在胚胎移植之前完_ 304—第三篇生殖内分泌成的基0或染色沐核型分析.通过这种方法褅选正常胚胎，鏺免选择件流产，减少出生缺陷•珍断的标本包括极体.卵裂期胚胎活检或囊胚活检..逬行POD冶疗需要申午可证，目前我院尚未开展此业务。

［适应证】1.单*w相关遗传病：2.染色体病；3.性连锁遗传病；1-可能牛育沣常患儿的伟风险人群等。

I禁总证】1.同体外受精•胚胎移揸；2.PGD不得用T无医疗指征的性别筛选。

I操作方法及过程】I.进行体外受精；2-受梢方达采用卵胞浆内笮精子昆微注射：3.胚胎坫养全取卵后3大成5天：4.进行胚胎活检（卵裂期活检或《胚活检＞:5.将取m的细胞进行阂定和处理；6.逬行分子生物学诊断（最常见的手段圮HSH）,7.如果能在移植前完成以i•.操作,则选抒"〖移楨的胚胎进行K胎移棺；8.如果移憧前不能完成诊断，则将所有胚胎冷冻保存.每容W—个胚胎.择期复苏移植＞I术前准备】1.大赛）《方浓签署＜PCI＞知惝W意书〉，告知该治疗的意义及不确定性（有o了能无法得到诊断结果或X合格胚胎可以移棺）：2.如果乐要诊断的是申基因遗传病，根据情况亊先收锒先tf #、夫萎《方等相关人员的外阓血DNA标本^I术中注«】细胞固定&主《技术难点.拓耍有经验人员的梢细操作。

I术后处理】1.进行黄体支持；2.本周期未移植的患者.告知2-3个周明后来进行复苏胚胎移植，。