第十三章_维生素类药物分析
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甾体激素和维生素类药物分析
分类
根据结构和功能的不同，可以将甾体 激素类药物分为肾上腺皮质激素、雄 激素、雌激素等。
作用机制与用途
作用机制
甾体激素类药物通过与靶细胞上的受 体结合，影响基因表达、酶活性等细 胞内过程，从而调节机体的生理功能。
用途
主要用于治疗与内分泌系统相关的疾 病，如肾上腺皮质功能减退、甲状腺 疾病等。
甾体激素类药物的发展历程
质流失。维生素类药物如维生素C、E等具有抗氧化作用，对维持肌肉
和骨质健康有一定帮助。
03
脂肪代谢
甾体激素类药物对脂肪代谢的影响主要表现为促进脂肪合成和分布。而
维生素类药物如维生素B6、B12等有助于降低血脂水平，对心血管健康
有益。
对临床治疗效果的影响
疗效增强
疗效降低
不良反应
合理使用甾体激素和维生素类 药物可以增强治疗效果，提高 治愈率。例如，适量的维生素 D补充可以促进钙的吸收，有 助于骨折愈合。
免疫调节
甾体激素类药物具有免疫抑制作用，可用于自身免疫性疾病的治疗， 维生素类药物也可调节免疫功能。
代谢性疾病
甾体激素类药物可用于治疗糖尿病、肥胖症等代谢性疾病，维生素类 药物也可用于辅助治疗和预防相关并发症。
研究热点和发展趋势
药物作用机制研究
深入探讨甾体激素和维生素类药物的作用机制，为新药研发提供 理论支持。
早期发现
01
20世纪初期，科学家们开始发现内分泌器官分泌的化学物质对
机体的影响。
发展历程
02
随着研究的深入，人们逐渐认识到甾体激素类药物在医学领域
的重要作用，并开始研发人工合成的甾体激素类药物。
现代应用
03
目前，甾体激素类药物已经成为治疗多种内分泌相关疾病的必
根据结构和功能的不同，可以将甾体 激素类药物分为肾上腺皮质激素、雄 激素、雌激素等。
作用机制与用途
作用机制
甾体激素类药物通过与靶细胞上的受 体结合，影响基因表达、酶活性等细 胞内过程，从而调节机体的生理功能。
用途
主要用于治疗与内分泌系统相关的疾 病，如肾上腺皮质功能减退、甲状腺 疾病等。
甾体激素类药物的发展历程
质流失。维生素类药物如维生素C、E等具有抗氧化作用，对维持肌肉
和骨质健康有一定帮助。
03
脂肪代谢
甾体激素类药物对脂肪代谢的影响主要表现为促进脂肪合成和分布。而
维生素类药物如维生素B6、B12等有助于降低血脂水平，对心血管健康
有益。
对临床治疗效果的影响
疗效增强
疗效降低
不良反应
合理使用甾体激素和维生素类 药物可以增强治疗效果，提高 治愈率。例如，适量的维生素 D补充可以促进钙的吸收，有 助于骨折愈合。
免疫调节
甾体激素类药物具有免疫抑制作用，可用于自身免疫性疾病的治疗， 维生素类药物也可调节免疫功能。
代谢性疾病
甾体激素类药物可用于治疗糖尿病、肥胖症等代谢性疾病，维生素类 药物也可用于辅助治疗和预防相关并发症。
研究热点和发展趋势
药物作用机制研究
深入探讨甾体激素和维生素类药物的作用机制，为新药研发提供 理论支持。
早期发现
01
20世纪初期，科学家们开始发现内分泌器官分泌的化学物质对
机体的影响。
发展历程
02
随着研究的深入，人们逐渐认识到甾体激素类药物在医学领域
的重要作用，并开始研发人工合成的甾体激素类药物。
现代应用
03
目前，甾体激素类药物已经成为治疗多种内分泌相关疾病的必
维生素类药物分析(SYSH)
返 回9
第一节 维生素A
维生素A包括有维生素A1（视黄醇）、去 氢维生素A（维生素A2 ）和去水维生素A（ 维生素A3）等，其中维生素A1活性最高，
2020/11/14
10
一、结构和性质
R:
2020/11/14
-H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
11
2020/11/14
25
（2）波长的选择： ① 1
VitA的max（328nm） ② 2 3
分别在1的两侧各选一点
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26
第一法 等波长差法
32 8 31 6 34 0 328
A 3校 2 8 3 . 5 正 2 A 2 3 2 A 3 8 1 A 3 6 4
测定对象 VitA醋酸酯
结构分析
CH3
CH3
CH3 CH3
环己烯
2020/11/14
共轭多 烯侧链
CH3 CH2OR
多异构体 UV 易被氧化
12
1、为一个具有共轭多烯侧链的环己烯 ❖ （1）具有UV吸收
❖ （2）存在多种立体异构化合物 ❖ （3）易发生脱氢、脱水、聚合反应
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2、不稳定性
VitA紫 外 线 、 O2 、 氧 化 剂 环氧化物 [ O]VViittAA酸 醛
2020/11/14
31
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32
中国药典收载方法
第一法（维生素A醋酸酯的测定） 将维生素A溶于环己烷，在规定波长测定吸
收度，计算吸收度比值（A/A328 ）
2020/11/14
33
数据处理
如果λmax在326-329nm之间，且A/A328比值未 超过规定值的±0.02，可直接按下式计算含 量：
药物分析维生素类药物的分析
在方法验证的基础上，可构建维生素类药物分析的评价指 标体系，包括定量限、检测限、回收率、重复性、稳定性 等指标，以全面评价分析方法的性能。
持续改进方向和目标设定
持续改进方向
针对维生素类药物分析过程中存在的问题和 不足，可进一步改进样品前处理方法、优化 分析条件、提高检测灵敏度等，以不断提高 分析结果的准确性和可靠性。
数据处理和结果表达技巧分享
数据处理
对HPLC和UV-Vis法得到的数据进行整理、归纳和统计 分析，包括峰面积、保留时间、浓度等参数的计算和 处理。
结果表达
将分析结果以图表形式呈现，如色谱图、标准曲线图、 含量分布图等，使结果更加直观、易于理解。同时，对 分析结果进行解释和说明，提出改进意见和建议。
在选择维生素类药物的标准品时，应确保其 纯度高、稳定性好，且具有代表性。同时， 应关注标准品的来源和溯源性。
使用注意事项
在使用标准品时，需按照规定的条件进行保 存和使用，避免污染和降解。此外，应定期 对标准品进行复验和更新。
检测方法验证及评价指标体系构建
要点一
检测方法验证
要点二
评价指标体系构建
为确保维生素类药物分析方法的准确性和可靠性，需进行 方法学验证，包括专属性、线性、范围、准确度、精密度 等指标的考察。
质量控制体系建立及实施情况介绍
质量控制体系
为确保维生素类药物分析结果的准确性和可靠性，需建立全面的质量控制体系，包括样 品采集、前处理、分析测试、数据处理等各个环节。
实施情况
目前，质量控制体系已在多个实验室得到广泛应用，有效提高了维生素类药物分析的准 确性和一致性。
标准品选择与使用注意事项
标准品选择
通过对该维生素类药物的定性、定量分析，评估其质量 稳定性和一致性，为药物研发、生产和监管提供科学依 据。
维生素类药物的分析方法
（3）维生素A在光照下产生的无活性的聚合物：鲸醇。 （4）维生素A的异构体等： 以上这些杂质在 310nm~340nm 的波长范围内有吸收， 所以干扰维生素A的测定。
12
5. 合成的维生素A和天然鱼肝油中的维生素A均为酯式
维生素A，如供试品中干扰测定的杂质较少，能符合下 列第一法测定的规定时，可用溶剂溶解供试品后直接 进行测定，否则应按第二法，经皂化提取除去干扰后 测定。
pH不同的溶液，在247nm处分别测定差示吸收值
（ΔA）。以浓度C为横坐标，以差示吸收值ΔA为纵坐 标绘制标准曲线。
30
样品的测定 取本品20片，精密称定，研细。精密称取适量粉末，
（2）反应介质需无水 （3）温度对呈色强度的影响很大 （ 4）本反应并非维生素 A专属，在相同条件下，某些有关物质均与
三氯化锑显蓝色，干扰测定，常使测定结果偏高。
（ 5 ）三氯化锑试剂有强的腐蚀性，易损坏皮肤和仪器，使用时应 严加注意。
15
（三）高效液相色谱法
采用RP-HPLC法同时测定人血清中维生素 A和维生素E的含量。 根据不同病理生理状态下人血清中维生素A、E的浓度，寻求弄清 与某些疾病的关系，为临床治疗学、营养学等研究提供参考。 1. 仪器与色谱条件 色 谱 柱 为 C18 ； 流 动 相 为 甲 醇 - 水 （ 96:4 ） ； 流 速 为 1.2ml/min。内标物为维生素A醋酸酯。 2. 分析用样品液 对照品：维生素A，维生素E，维生素A醋酸酯
维生素类药物的分析方法：
生物法 微生物法 化学法 物理化学法
2
第一节
维生素A的分析
维生素A 包括
维生素类药物分析医学课件
维生素类药物分析医学课件维生素是人体必需的一类有机化合物，对于人体各种生理功能和健康保健都有不可或缺的作用。
维生素类药物是以维生素为主要成分的药物。
本文就维生素类药物进行分析，介绍其药理作用、适应症、副作用等相关知识。
一、维生素A类药物维生素A类药物主要成分是维生素A，具有多种生物学作用，如维持视网膜视力、保护上皮组织、维持正常成长及免疫功能等。
常用维生素A类药物包括维生素A软胶囊、维生素A注射液等。
维生素A类药物适应症包括夜盲症、角膜软化症等。
但长期大量摄入维生素A可引起中毒，表现为头痛、皮肤瘙痒、运动不便等症状。
因此，应注意维生素A类药物的正确用法。
维生素B类药物包括维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12等多种成分。
维生素B类药物在人体内起到辅酶的作用，参与糖、脂肪、蛋白质等物质代谢。
常用维生素B类药物包括维生素B1片、硫胺素注射液、维生素B6注射液、维生素B12注射液等。
维生素B类药物适应症包括神经炎、急慢性肝炎、贫血等。
与其他药物混合使用时，可能会发生过敏、头晕、恶心呕吐等不良反应。
维生素D类药物主要成分是维生素D3，具有增加钙吸收、促进骨骼成长等生物作用。
常用维生素D类药物包括维生素D3溶液、维生素D3软胶囊等。
维生素D类药物适应症包括佝偻病、骨质疏松等。
剂量过大时，可能引起高钙血症、软组织钙化等不良反应。
维生素类药物是一类广泛应用的药物，对于人体健康保健有着不可或缺的作用。
然而，使用维生素类药物时应注意药物的正确用法，避免过度、长期使用，避免不良反应的发生。
同时，不应将维生素类药物作为万能药，采取正确的饮食和生活方式才是维持健康的最佳方式。
药物分析 维生素类药物分析
异构体 相对生物效价
全反式 2-顺 4-顺 2,4-二顺 6-顺 2,6-二顺
100% 75% 24% 15% 21% 24%
去氢维生素A（VitA2） 去水维生素A（VitA3）
鲸醇（无生物活性，有UV） VitA2、 VitA3、鲸醇紫外吸收， 干扰VitA含量测定。
（二）性质
1. 性状 为淡黄色油溶液，在空气中易 氧化，遇光易变质
（二）性质
2. 溶解性 脂溶性,易溶于有机溶剂和植物 油等。
3.不稳定性（易氧化变质）
具有共轭多烯侧链，易被氧化。
加热或有金属离子氧化。
VitA O紫2、 外光氧裂化解剂环氧化物
[O]
[O]
△
有金属离子
氧化↑
VitA醛
VitA酸
O
环氧化物
CH2OH
O C
VitA醛
H
COOH VitA酸
3. 与三氯化锑呈色 不稳定的蓝色
CH2OH
H C OH O
CH2OH
H C OH
O 2H
O
2H
HO H
O OHH-2、OH+
HO
OH
O
O
CH2OH CH C OH C=O C=O COO-
二烯醇
有活性
L-抗坏血酸
二酮基
有活性
L-去氢抗坏血酸
不可逆反应
L-二酮古洛糖酸
无活性
4. 旋光性 药用为L-(+)-抗坏血酸
5. 水解性 强碱中水解为酮酸钠
H+
水解、脱羧、-H2O
糠醛+吡咯
蓝 色
戊糖
三、UV
维生素C在0.01mol/lHCl溶液中， 在243nm波长处有 唯一最大吸 收. BP
维生素类药物的分析-药物分析课件
❖ 具有UV吸收
❖ 存在多种立体异构化合物
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 异维生素Aa
异维生素Ab
m ax
325.5 328 320.5 323
324
相对生物效价
100% 75% 24% 21%
24%
VitA2 VitA3
鲸醇
二、 性质 （一） 共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 紫外线、O2、氧化剂
BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、 含量测定
（一） UV法
立体异构体 氧化产物及光照产物 合成中间体 去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
三点校正法 1. 条件： （1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波 长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
必需的 一种活性物质。 人体不能合成维生素。
脂溶性 VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM
VitPP
一、
维生素A 结构
R : -H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
（一） 为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
f A325(校正) A325 100% A325
A3 2 5校 正
A325
－3%
0
A3 2 5校 正
3%
第一法与第二法的区别
第一法
第二法
测定对象 维生素A醋酸酯 维生素A醇
方法 直接取样，测定 皂化提取，测定
溶剂 环己烷
❖ 存在多种立体异构化合物
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 异维生素Aa
异维生素Ab
m ax
325.5 328 320.5 323
324
相对生物效价
100% 75% 24% 21%
24%
VitA2 VitA3
鲸醇
二、 性质 （一） 共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 紫外线、O2、氧化剂
BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、 含量测定
（一） UV法
立体异构体 氧化产物及光照产物 合成中间体 去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
三点校正法 1. 条件： （1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波 长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
必需的 一种活性物质。 人体不能合成维生素。
脂溶性 VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM
VitPP
一、
维生素A 结构
R : -H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
（一） 为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
f A325(校正) A325 100% A325
A3 2 5校 正
A325
－3%
0
A3 2 5校 正
3%
第一法与第二法的区别
第一法
第二法
测定对象 维生素A醋酸酯 维生素A醇
方法 直接取样，测定 皂化提取，测定
溶剂 环己烷
第十三章维生素类药物
第十三章维生素类药物的分析一选择题（一）单选题相同知识点：维生素A的分析1．在饱和无水三氯化锑的无水三氯甲烷溶液中即显蓝色，渐变成紫红色的药物是（）。
A．维生素A B．维生素B1 C．维生素C D．维生素E E．维生素D答案：A2．维生素A分子结构特点是具有（）。
A．六元环(环己烯) B．羟基C．酯基D．甲基E．共轭多烯侧链的环己烯答案:E3．维生素A含量测定的第一法选择3个测定波长的方法为（）。
A．6／7定位法B．等吸收度法C．等波长差法D．代数法E．几何法答案:C4．采用紫外分光光度法测定维生素A的生物效价或含量时。
杂质与共存物干扰测定，为消除干扰，《中国药典》(2005年版)采用（）。
A．双波长紫外分光光度法B．三点校正法C．计算分光光度法D．三波长紫外分光光度法E．HPLC答案:B5. 紫外分光光度法测定维生素A的方法是（）。
A．三点定位校正计算分光光度法B．差示分光光度法C．比色法D．三波长分光光度法E．导数光谱法答案：A6．目前各国药典测定维生素A的含量，大多采用（）。
A．薄层色谱法B．红外分光光度法C．紫外分光光度法D．高效液相色谱法E．非水溶液滴定法答案：C相同知识点：维生素B的分析7．在碱性溶液中，加铁氰化钾，再加正丁醇，醇层显蓝色荧光的药物是（）。
A．维生素E B．维生素B1 C．维生素C D．维生素A E．维生素D 答案：B8．取某一维生素类药物约5mg，加氢氧化钠试液2．5ml溶解后，加铁氰化钾试液0．5ml 与正丁醇5ml，强力振摇2min，放置使分层。
上面的醇层显强烈的蓝色荧光。
加酸使成酸性，荧光即消失。
再加碱使成碱性，荧光又显出。
该药物为（）。
A．维生素C B．维生素E C．维生素B D．维生素A E．维生素K答案:C9．中国药典05年版测定维生素B1片剂的含量采用（）。
A．紫外分光光度法B．银量法C．非水溶液滴定法D．薄层色谱法E．高效液相色谱法答案：A10．维生素B与铁氰化钾作用，在正丁醇层呈强烈蓝色荧光的条件（）。
维生素类药物的分析
2019年10月19日
化学与制药工程学院
维生素类药物的分析 维生素
从化学结构上来讲，维生素类均属于 有机化合物，但并非同一类化合物。
醇 酯酸 胺 酚 醛
各具有不同的理化性 质和生理作用
2019年10月19日
化学与制药工程学院
按溶解度分
类别
脂溶性
水溶性
名称
Vit A Vit D Vit E Vit K Vit B1 Vit B2 Vit B6 Vit B12 Vit H Vit C
化学 法
物理化 学法
2019年10月19日
都是依据药物的化学 结构、理化性质与生
物特性来进行分析
化学与制药工程学院
Contents
主要讲解
Vitamins
A B1 C D E
2019年10月19日
化学与制药工程学院
维生素A的分析
维生素A
是一种不饱和脂肪醇，在自然 蜀中主要来源于鲛类海鱼肝脏 中提取的脂肪油（鱼肝油）。
A. 若【(Aλ/A328nm)-规定值】≤ (±0.02) —— A328不校正 B. 若【(Aλ/A328nm)-规定值】 有超过 (±0.02)者
A328(校正)=3.52(2A328-A316-A340)
◊ ◊
A 32 (校 8 )-正 A 328 10 % 03% 3% ,
A 328
H3C
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
CH2
1
2
CH3
去水维生素A （A3 anhydroretinol)
2019年10月19日
化学与制药工程学院
第一节 VitA
第十三章维生素药物的分析
（1）第一法（等波长差法）：使λ3－λl＝λl－λ2。中国药典规定，测定维生素A醋酸酯时，λl＝328nm，λ2=316nm，λ3＝340nm，Δλ=12nm。
（2）第二法（等吸收比法）：使 ＝ ＝6/7 。中国药典规定，测定维生素A醇时，λl＝325nm，λ2＝310nm，λ3＝334nm。
4．测定方法：维生素A测定法有“第一法”和“第二法”两种方法（中国药典2000年版）。
维生素C还可还原碱性酒石酸酮、高锰酸钾等氧化剂，使这些试剂褪色，产生沉淀或显色，从而用于鉴别。
2．紫外吸收光谱法：
三、含量测定
碘量法（重点）。中国药典即用直接碘量法，测定维生素C及其片剂、注射液的含量。
1．原理：维生素C具有还原性，可被不同氧化剂定量氧化，可用氧化还原法测定含量。
2．方法：维生素C原料的含量测定取本品约0.2g→精密称定→加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解→加淀粉指示液1ml→立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定→显蓝色并在30秒钟内不褪。
第三节维生素B1的分析
一、结构和性质
1．结构维生素B1又称盐酸硫胺，是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵化合物的盐酸盐。
2．性质
（1）溶解性（2）杂环上氮原子的性质（3）紫外吸收特性
（4）硫色素反应（5）氯化物的特性
二、鉴别试验
1．硫色素反应（重点）维生素B1在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧化生成硫色素。硫色素溶于正丁醇（或异丁醇等）中，显蓝色荧光。该反应为维生素Bl的特有反应。
2．紫外分光光度法
中国药典（2000年版）收载的维生素B1片和注射液，均采用本法测定含量。
3．硅钨酸重量法
（1）原理：维生素B1在酸性溶液中，能与硅钨酸定量地生成组成恒定的硅钨酸盐沉淀，根据沉淀的重量和供试品的称取量即可计算维生素B1的含量。沉淀的组成为（C12H17ClN4OS）2·SiO2（OH）2·12WO3·4H2O，其分子量为3479.22，维生素B1的分子量为337.27。
（2）第二法（等吸收比法）：使 ＝ ＝6/7 。中国药典规定，测定维生素A醇时，λl＝325nm，λ2＝310nm，λ3＝334nm。
4．测定方法：维生素A测定法有“第一法”和“第二法”两种方法（中国药典2000年版）。
维生素C还可还原碱性酒石酸酮、高锰酸钾等氧化剂，使这些试剂褪色，产生沉淀或显色，从而用于鉴别。
2．紫外吸收光谱法：
三、含量测定
碘量法（重点）。中国药典即用直接碘量法，测定维生素C及其片剂、注射液的含量。
1．原理：维生素C具有还原性，可被不同氧化剂定量氧化，可用氧化还原法测定含量。
2．方法：维生素C原料的含量测定取本品约0.2g→精密称定→加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解→加淀粉指示液1ml→立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定→显蓝色并在30秒钟内不褪。
第三节维生素B1的分析
一、结构和性质
1．结构维生素B1又称盐酸硫胺，是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵化合物的盐酸盐。
2．性质
（1）溶解性（2）杂环上氮原子的性质（3）紫外吸收特性
（4）硫色素反应（5）氯化物的特性
二、鉴别试验
1．硫色素反应（重点）维生素B1在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧化生成硫色素。硫色素溶于正丁醇（或异丁醇等）中，显蓝色荧光。该反应为维生素Bl的特有反应。
2．紫外分光光度法
中国药典（2000年版）收载的维生素B1片和注射液，均采用本法测定含量。
3．硅钨酸重量法
（1）原理：维生素B1在酸性溶液中，能与硅钨酸定量地生成组成恒定的硅钨酸盐沉淀，根据沉淀的重量和供试品的称取量即可计算维生素B1的含量。沉淀的组成为（C12H17ClN4OS）2·SiO2（OH）2·12WO3·4H2O，其分子量为3479.22，维生素B1的分子量为337.27。
药物分析维生素类药物的分析
国际单位IU=0.344微克维生素Ａ醋酸酯； IU＝0.300微克维生素Ａ醇
换算：1g维生素Ａ醋酸酯相当于：
1106 g 2907000IU 0.344 g / IU
1g维生素Ａ醇相当于：
1106 g 3330000IU 0.300 g / IU
VA1:
2
9'
1
3
8'
4
6
5
7'
5'
6'
4'
三、含量测定 高效液相色谱法，药典收录。
§9.5 维生素E（称为生育酚） 一、结构：苯并二氢吡喃醇衍生物，
CH3
H3C
8
O CH3
1
CH3
CH3
CH3
CH3
H3C C O
5
4
O CH3
名称：消旋α-生育酚醋酸酯（ α-异构体生理活性 最强）
母核：苯骈二氢吡喃衍生物，苯环上有一乙酰化的
酚羟基
侧链：脂肪烷烃 性质：不溶于水，油状，微黄色液体。
VB1分子中含有已成盐的伯胺和季铵基团，在非 水溶液中，在醋酸汞存在下，均可被高氯酸滴定。
溶剂：冰醋酸 / 醋酸汞 指示剂：喹哪定红- 亚甲蓝混合指示液 滴定剂：高氯酸（0.1mol/L) 终点：天蓝色 摩尔比：VB1：高氯酸=1：2 VB1摩尔质量=337.27 滴定度T=0.1×(1/2) ×337.27=16.86mg/ml
E11c%m
0.652 0.010232
1
63.72
IU / g E11c%m 1900 63.72 1900 121068(IU / g) 维生素A的标示含量
标示量%
IU / 丸 标示量
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A328(校正) = 3.52 ( 2A328 - A316 - A340 )
=3.52 ( 2×0.663 – 0.592 – 0.553 )
=0.637
A328(校正) – A328(实测) A328(实测)
×100 =
0.637 – 0.663 0.663×100来自= -3.92E
1% 1cm
△ 无水乙醇 HCl
λmax为326nm
λmax为350～390nm
一个吸收峰
三个吸收峰
↓
VitA
CH2
去水VitA（VitA3）
（三） TLC法 BP 对照品法 显色剂 三氯化锑
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、 含量测定
（一） UV法
维生素A2
立体异构体 氧化降解产物 合成中间体
A300 A316 A328 A340 A360
：0.374 ：0.592 ：0.663 ：0.553 ：0.228
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
：0.564 ：0.893 ：1.000 ：0.834 ：0.344
求本品中维生素A占标示量的百分含量？
维生素A醋酸酯
S 9～15IU / ml 溶液 分别于300、 316、 328、 340、 360nm 处测Ai
环己烷
• 判断 max是否在326～329nm之间
max在326～329nm之间
是 否
• 求算 Ai / A328
改用第二法
并与规定值比较
Ai / A328
物质、检查方法与原理。
三、了解维生素D的性质和分析特点。
概 维生素：
述
是维持人体正常代谢机能所 必需的一类活性物质 。 人体不能合成维生素。
分类
按溶解度分
脂溶性 VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12)
VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。
维生素发展史
公元前3500年-古埃及人发现能防治夜盲症的物质，也就是后来 的维A。 1600年-医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症。 1747年-苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病，也就是后来的维C。 1831年-胡萝卜素被发现。 1905年-甲状腺肿大被碘治愈。 1911年-波兰化学家丰克为维生素命名。 1915年-科学家认为糙皮病是由于缺乏某种维生素而造成的 1916年-维生素B被分离出来。 1917年-英国医生发现鱼肝油可治愈佝偻病，随后断定这种病是 缺乏维D引起的。
A 300 A 316 A 328 A 340 A 360 A 328 A 328 A 328 A 328 A 328
规定值
0.555 0.907
差值
1.000 0 0.811 0.299
• 判断差值是否超过规定值的 0.02 有一个以上 超过 0.02 无超过 0.02
Vit A Vit E
第二节 维生素B1 HCl
H3C N N NH2 CH2 N
+
S
CH2CH2OH CH3
Cl-
氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)
主要的药理作用：
维持糖代谢及神经传导，治疗多发性神经 炎、肠道疾病等
主要来源：
种子外皮及胚芽中，米糠、麦麸、黄豆、 酵母、瘦肉等
一、结构与性质
ChP2010
H 2O 环合
VitB1 硫色素 [O ] 蓝色荧光 荧光消失
OH
K 3 Fe（CN） 6
正丁醇
H
+
N H3C N
CH 2 NH 2 HCl
N S
CH 3 C 2 H 4 OH
制剂中维生素A的含量测定。 Ch.P.（2010）规定维生素AD软胶囊、维生素AD滴 剂用该法测定含量。
RP-HPLC同时测定人血清中Vit A和Vit E含量
色谱条件
色谱柱：C18 流动相：甲醇-水 流速：1.2ml/min 检测波长与AUFS： 0～8min(330nm,0.25AUFS); 8min后(292nm,0.05AUFS) 内标：Vit A 酯
（3）第二法（等吸收比法） [ 皂化法、6/7A法 ]
适用于维生素A醇 第一法无法消除杂质干扰时用此法
脂溶性 VitA 醋酸酯 VitA 醇 KOH / 乙醇 S 皂化液 植物油 甘油和脂肪酸盐 水溶性
除去植物油的干扰 异丙醇
取未皂化样品 采用色谱法纯 化后再测定
A325校正 6.815 A325 2.555 A310 4.260 A33
f
A 325(校正) A 325 A 325
100%
A325校正
－3%
A325
0
A325校正
3%
（二）三氯化锑比色法
标准曲线法 蓝色
VitA + SbCl 3
维生素A3 环氧化物 维生素A醛
维生素A酸
三点校正法（法定方法）
1. 原理：
（1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波
长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
2. 波长的选择：
（ 1） 1 VitA的max（328nm）
（ 2） 2 3
分别在1的两侧各选一点
• 计算 A328（校正）
• 用A328计算
A328校正 3.522 A328 A316 A340
f
A 328(校正) A 328 A 328
100%
第二法
A 328校正
A 328
第二法
－15%
－3%
0
3%
讨论
1. VA 醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程式法 （即代数法）推导而来；VA醇的吸收度校正公式 是用相似三角形法（几何法或称6/7定位法）推导 而来。 2. 在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸收波 长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的两侧进 行测定。在测定前务必要校正波长。测定的样品 应不得少于两份。
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
：0.564 － ：0.893 － ：1.000 － ：0.834 － ：0.344 －
0.555 0.907 1.000 0.811 0.299
= + 0.01 = －0.01 = 0 = + 0.02 = + 0.04
第十三章
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节
维生素类药物的分析
维生素A的分析 维生素B1的分析 维生素C的分析 维生素D的分析 维生素E的分析 复方制剂中多种维生素的分析
基本要求
一、掌握维生素 A、维生素B1、维生素C、维生素E的化学 结构、理化性质以及分析方法间的关系，专属反应、主要
的含量测定方法与原理。 二、熟悉维生素 A 、维生素 B1 、维生素 C、维生素 E的有关
效价（IU / g） 3330000 换算因数＝ % 1820 E1cm(纯)
6
1830
第四步：求标示量％
IU / 丸 标示量％＝ 100％ 标示量
IU / g 平均丸重 ＝ 100％ 标示量
A 换算因数 平均丸重 C 100％ 标示量
（2） 第一法 • 方法：
第一节 维生素A
主要的药理作用： 干眼病、角膜软化症、皮肤干燥、夜盲等 主要来源：
自然界：鲛类无海鱼肝脏中提取的脂肪油 目前主要采用人工合成。
一、结构与性质
9
8 7 6
5
4 3 2
1
具有共轭多烯侧链的环己烯 R:
-H
-COCH3 -COC15H31
维生素A醇
维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
（一）与CHCl3、乙醚、环己烷等互溶，乙醇
乙醚提取 挥干乙醚
溶解 稀释至9～15IU / ml 于300、 310、 325、 334nm 处测Ai
• 判断max是否在323～327nm之间
是 否
• 计算
A300
A325
取未皂化样品 采用色谱法纯 化后再测定
• 判断 A300 /A325 是否大于0.73
是 否
• 计算A325(校正)
（一）溶解性
1、易溶于水 2、水溶液呈酸性
（二）UV
共轭双键
λmax = 246nm
（三） 硫色素反应
硫色素 蓝色荧光
OH O
正丁醇
（四）嘧啶环 —— 噻唑环 ——
与生物碱↓→↓ 呈氯化物的反应，
（五）氯化物特性 用于鉴别。
二、 鉴别试验
（一） 硫色素反应
NaOH
中微溶。水中不溶。
（二） 为一个具有共轭多烯侧链的环己烯
具有UV吸收
存在多种立体异构化合物
易发生脱氢、脱水、聚合反应
VitA2
VitA3
鲸醇
（二） 共轭多烯侧链 易被氧化
VitA VitA 醛 环氧化物 VitA 酸
[O ] 紫外线、O 2、氧化剂
第一法
等波长差法
328 316 340 328
= 12nm
测定对象 VitA醋酸酯
第二法
等吸收比法
6 A1 A2 A3 7
1=325nm, 2=310nm, 3=334nm
测定对象
VitA醇
3. 测定法
（1）基本步骤: 第一步 A的选择
选择依据：
所选A值中杂质的干扰已基本消除