实验二器械的清洗和消毒
清洗、消毒操作规程
清洗、消毒操作规程引言概述：清洗和消毒是保持环境和设备卫生的重要步骤，特别是在医疗、食品加工和实验室等领域。
正确的清洗和消毒操作规程能够有效预防病菌传播和交叉感染，保障人们的健康安全。
本文将详细介绍清洗、消毒操作规程的五个部分。
一、清洗操作规程：1.1 选择合适的清洗剂：根据不同的场所和设备，选择适合的清洗剂。
比如，对于食品加工设备，应选择无香料、无色素的清洗剂，以避免对食品产生污染。
1.2 清洗工具的选择：根据清洗对象的大小和形状，选择合适的清洗工具。
例如，对于较小的设备或器具，可以使用刷子或棉签进行清洗；对于较大的设备，可以使用高压水枪或清洗车进行清洗。
1.3 清洗程序：按照清洗剂的使用说明，制定清洗程序。
一般来说，先用清水将设备表面的污垢冲洗干净，然后使用适量的清洗剂涂抹在表面，用清洁工具进行刷洗，最后用清水冲洗干净。
二、消毒操作规程：2.1 选择合适的消毒剂：根据不同的需求，选择适合的消毒剂。
例如，对于医疗器械，应选择能够有效杀灭细菌、病毒和真菌的消毒剂。
2.2 消毒工具的选择：根据消毒对象的大小和形状，选择合适的消毒工具。
例如，对于小型器械，可以使用消毒液进行浸泡；对于大型设备，可以使用高温蒸汽消毒。
2.3 消毒程序：按照消毒剂的使用说明，制定消毒程序。
一般来说，先将设备或器具清洗干净，然后使用适量的消毒剂涂抹在表面，让其充分接触，最后进行充分冲洗，以去除残留的消毒剂。
三、清洗和消毒频率：3.1 定期清洗：根据设备和环境的使用情况，制定定期清洗的计划。
例如，对于医院的手术室和实验室，应每天进行清洗。
3.2 定期消毒：根据设备和环境的使用情况，制定定期消毒的计划。
例如，对于医疗器械，应每次使用后进行消毒。
3.3 特殊情况下的清洗和消毒：对于特殊情况下的设备和环境，如疫情期间的公共场所，应加强清洗和消毒频率，确保卫生安全。
四、清洗和消毒记录：4.1 清洗记录：对每次清洗进行记录，包括清洗时间、清洗剂的使用量和清洗人员的姓名等信息。
实验二外植体的消毒接种与培养
实验⼆外植体的消毒接种与培养实验⼆外植体的消毒、接种与培养⼀、⽬的要求通过在超净⼯作台上进⾏⽆菌操作训练，掌握外植体消毒和接种的⽆菌操作技术。
⼆、原理灭菌是组织培养中重要的⼯作环节之⼀，是指采⽤理化⼿段杀死物体表⾯及其孔隙内的⼀切微⽣物，包括细菌的芽孢和真菌的孢⼦。
组织培养中要求⽆菌室、超净⼯作台达到⽆菌状态，植物材料也要经过消毒灭菌后再接种，接种⼈员的双⼿同样如此。
⽆菌室和超净⼯作台可采⽤甲醛、⾼锰酸钾混合薰蒸，结合紫外灯照射20～30分钟；外植体可采⽤75%酒精和0.1%的升汞杀菌；双⼿可⽤75%的酒精棉球擦拭；接种⼯具可采⽤75%酒精棉球擦拭，再经⽕焰灼烧灭菌。
三、⽤品⽤具1、实验材料：青蒿嫩叶、菊花嫩茎、胡萝⼘块根、枸杞叶、⽠叶菊叶、芦荟茎尖、康乃馨茎段、⽉季茎段、草莓茎段、马铃薯芽尖等。
2、实验试剂：75％的酒精、95％的酒精、0．1％的升汞（(氯化汞，HgCl2)）、⽆菌⽔、⽆菌滤纸等。
3、实验器具：超净⼯作台、盛有培养基的培养瓶、接种器械（主要指解剖⼑、剪⼑、镊⼦等）、酒精灯。
四、⽅法和步骤1．⽤⽔和肥皂洗净双⼿，穿上灭菌过的专⽤实验服、帽⼦与鞋⼦，进⼊接种室。
2．打开超净⼯作台和⽆菌操作室的紫外灯，照射20～３０min。
3．操作前10～20min使超净⼯作台处于⼯作状态，让过滤室空⽓吹拂⼯作台⾯和四周的台壁。
4．照射20min后，关闭紫外灯。
5．⽤70％～75％的酒精擦拭⼯作台和双⼿。
6．⽤蘸有70％酒精的纱布擦拭装有培养基的培养器⽫，放进⼯作台。
7．把解剖⼑、剪⼑、镊⼦等器械浸泡在95％酒精中，在⽕焰上灭菌后，放在器械架上。
8．材料预处理：剪取康乃馨植株的幼嫩茎段3～5cm，去掉叶⽚，⽤洗⾐粉⽔清洗10分钟，再⽤清⽔冲洗残余的药剂；9、在超净台上，⽤70%酒精浸泡30S，⽤0.1%升汞浸泡5min左右，最后⽤⽆菌⽔清洗3～5次，吸⼲⽔分后备⽤；10、将材料置于⽆菌培养⽫内，切取1cm左右带有⼀个腋芽的茎段，接种到培养基上。
生物实验室实验室消毒和清洁准则
生物实验室实验室消毒和清洁准则在生物实验室中，消毒和清洁是至关重要的环节，它们直接关系到实验室内部的卫生与安全。
本文将介绍生物实验室的消毒和清洁准则，以确保实验室环境的干净整洁，为科研工作提供良好的条件。
一、实验室消毒准则1.使用合适的消毒剂：选择适用于生物实验室的消毒剂，如漂白水、酒精或过氧化氢等。
在选择消毒剂时，应考虑其对微生物的杀灭效果和对实验器皿的腐蚀程度。
2.定期消毒：实验室设备、实验台面、地面等区域应定期进行消毒。
特别是经常接触生物样本的区域，如生物安全柜、实验室台面等，要每天进行消毒处理。
3.注意细节：消毒时，要注意对实验器具、试剂瓶口、实验台面等细节部位进行充分消毒。
这些细节部位往往是细菌交叉感染的重要来源。
4.避免交叉感染：在不同实验项目之间，要做好实验器具的清洗和消毒，以避免交叉感染的发生。
尽量避免同一实验室器皿在不同实验项目之间的频繁使用。
二、实验室清洁准则1.定期进行清洁：实验室的地面、墙面、工作台等区域应定期进行清洁。
清洁工作应按照清洁区域的不同特点，选择合适的清洁工具和清洁剂。
2.保持整洁：实验室的工作环境要保持整洁。
各自负责的实验人员应及时清理自己的工作台面、实验器具等，保持实验室的整洁和有序。
3.防止污染：在实验过程中，避免食品和饮料进入实验室，以免引起交叉污染。
实验器皿等工具应专门使用，避免混用引起污染。
4.定期检查：实验室主管应定期检查实验室的清洁情况，对于发现的问题应及时处理。
对于有污垢或细菌残留的区域，要及时清洁和消毒。
通过遵循以上生物实验室的消毒和清洁准则，可以有效保障实验室环境的卫生与安全，提高实验工作的效率和质量。
希望广大实验人员和实验室管理者能够重视实验室的清洁和消毒工作，共同营造一个清洁整洁的实验环境，为科研工作创造良好条件。
医疗器械的清洁消毒和灭菌处理方法
医疗器械的清洁消毒和灭菌处理方法随着现代医学水平的不断提高，医疗器械在各个医院起到了越来越重要的作用。
对于医疗器械的清洁消毒和灭菌处理非常关键，它直接关系到医护人员和患者的生命安全。
本文将详细介绍医疗器械的清洁消毒和灭菌处理方法。
一、清洁消毒清洁消毒是医护人员管理医疗器械的基本要求，也是常见的清洗方式，可有效去除表面附着的有机质、油污、灰尘和细菌。
1.手动清洁消毒手动清洁消毒是常见的清洁方式，通常先将器械表面沾湿，加入去污剂，搓洗以去除摆脱的污物，之后使用肥皂水或中性清洁剂洗净，最后使用清水冲洗表面，继续用洁净干净的纱布擦拭，以消除残留物，完成后再用飘散碘或十氧化二大到2%浓度（适用于硬质表面）进行消毒。
2.机器清洁消毒医院通常采用的高压蒸汽清洗消毒机、工业洗消机等可以非常有效地对医疗器械进行清洁消毒。
这种方式具有清洁消毒速度快、效率高、消毒程序精确可控、自动化程度高等特点，但对于医疗器械的切割力、镀层、或遇水易生锈的器械不适宜使用机器清洁消毒。
二、灭菌处理方法1.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法是医院中最常见有效的灭菌方法之一，其原理是将器械放入高压蒸汽锅内，在高温高压下进行灭菌。
该方式能够达到良好的灭菌效果，但也有一定的局限性，比如一些塑胶制品容易开裂或者脆化，某些手术手套、防护服等材料不能使用高压蒸汽灭菌。
2.低温等离子灭菌法低温等离子灭菌法是一种相对新型的灭菌方式，它克服了高压蒸汽灭菌方式的局限性，可以对复杂型、高切割力的器械和敏感性较强的高粱器械进行灭菌。
使用这种方法灭菌可以减少器械损坏的风险，免去握器械的人使用高压蒸汽灭菌时被高温伤害的风险，同时也减少了在灭菌过程中污染环境的可能性。
3.臭氧灭菌法臭氧灭菌法是对部分敏感器械的灭菌效果较好，例如呼吸机、呼吸管、呼吸过滤器、人工肺等，臭氧灭菌做每次需要40分钟左右，常温下使用。
由于臭氧具有强氧化性能和灭菌效果好等特点，因此臭氧灭菌被广泛应用于医疗器械灭菌。
取样器具清洁操作规程
取样器具清洁操作规程取样器具是化验室中常用的实验工具，而取样器具的清洁操作非常重要，它直接关系到实验结果的准确性和可靠性。
下面是一份取样器具清洁操作规程，供参考。
一、原则和要求1.定期对取样器具进行清洁和消毒，保持其干净、卫生，防止交叉污染。
2.使用完毕的取样器具应立即清洗，不得长时间放置，防止样品残留污染器具。
3.根据不同的实验需要，选择适当的清洁方法和清洁剂，确保清洁效果。
4.清洁取样器具过程中，要严格按照操作规程进行，避免对器具造成损坏。
二、清洁方法1.清洗(1)使用温水和中性洗涤剂将器具表面的污垢清洗干净。
(2)对于有顽固性污垢的器具，可以使用刷子或软布进行擦洗。
2.消毒(1)将清洗干净的器具放入消毒槽中，加入适量的消毒剂，按照说明书要求的时间进行消毒。
(2)消毒后，将器具取出，用流动的清水彻底冲洗干净，防止残留消毒剂。
3.烘干(1)将清洗和消毒后的器具晾干或用纸巾擦干。
(2)对于需要高温干燥的器具，可以使用高温干燥箱或干燥器进行烘干。
三、清洁剂的选择1.一般情况下，中性洗涤剂即可满足清洁要求。
2.对于顽固性污垢，如油脂、蛋白质沉积等，可以选择具有脱脂和去污能力的洗涤剂。
3.消毒剂应选择具有广谱杀菌能力、低毒性和无残留的消毒剂。
四、注意事项1.在清洗取样器具时，要保持手部清洁，并佩戴手套和护目镜，防止污染和伤害。
2.对于有刺激性和有毒性的清洁剂和消毒剂，应戴好口罩和防护手套，并在通风良好的环境下操作。
3.对于容易损坏的取样器具，应尽量避免使用刷子等具有划伤性的清洁工具，以免影响器具的使用效果和寿命。
4.清洁后的器具应放置在干燥、清洁的地方，防止再次受到污染。
五、清洁记录1.对于重要的取样器具，应建立清洁和消毒记录，记录清洗和消毒的日期、操作人员和方法等信息。
2.定期审查清洁记录，及时追溯和处理发现的问题，以确保取样器具的清洁和消毒有效进行。
六、附：常用的清洁剂和消毒剂：1.清洁剂：中性洗涤剂、去污剂、去垢剂等。
实验二培养材料消毒和接种
• 二、实验原理
• 用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外 植体。在组织培养中，外植体如果是带菌的， 在接种前都必须进行表面消毒，这是取得培养 成功的最基本的和重要的前提。常用消毒剂对 外植体进行消毒。从室外取的材料，一般先用 自来水冲洗数分钟.
• 接种材料使用消毒剂后，要用无菌水洗涤3～5 遍，最后用无菌纸擦干净。使用消毒剂的原则 是既要达到消毒目的，又不能损伤植物组织和 细胞，还要符合就地取材的原则。对一些容易 污染、较难灭菌的外植体进行表面消毒时，用 单一消毒剂不能收到好的效果，所以常选用两 种消毒剂交替浸泡法。
• （2）湿热灭菌 适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞、 纸等。121℃ 维持20~30min
• （3）过滤灭菌
• 培养基中某些成分遇到高温分解（如某些生长 调节剂GA3、玉米素等），就需要过滤灭菌。
• 灭菌方法：将生长调节剂或酶配成一定浓度， 用注射器注入微孔滤膜虑。制培养基时，现将 培养基高压灭菌，待降至50℃左右时，加入适 量的激素。
• A、新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物 质，可先用0.5％的去污剂洗刷，再用自来水洗净， 然后浸泡在1％～2％盐酸溶液中过夜（不可少于 四小时），再用自来水冲洗，最后用无离子水冲
洗两次，在100℃～120℃烘箱内烘干备用。
• B、使用过的玻璃仪器的清洗 先用自来水洗刷至无污物，再用合适的毛刷
• 一般，首先用75％乙醇浸泡外植体数秒钟至 30s，然后置于0.1％氯化汞溶液5～10min 或 含有2％活性氧的次氯酸钠溶液5～30min，然 后用无菌水洗涤。有时在氯化汞或次氯酸钠灭 菌后，用无菌水洗，进一步剥去几层组织或器 官如叶片后，再用次氯酸钠灭菌3～5min，无 菌水漂洗3 次后，切割、用于接种。 消毒溶液对外植体消毒是在超净工作台上进行。 完成表面消毒的接种材料要尽快放置于培养基 中。
仪器设备的清洁与消毒规程
仪器设备的清洁与消毒规程仪器设备在科研、医疗等领域中扮演着重要的角色，其运行的准确性和可靠性直接影响着实验结果或治疗效果。
为了确保仪器设备的正常运行和使用者的安全，制定并遵守一套适合的清洁与消毒规程是非常重要的。
本文将介绍仪器设备清洁与消毒的基本原则和具体步骤，以确保仪器设备的性能和可靠性。
一、清洁与消毒的基本原则1. 安全性：在进行清洁与消毒时，必须确保操作人员的安全，避免接触到有害物质或受到伤害。
佩戴适当的防护装备，如手套、护目镜等是必要的。
2. 可靠性：清洁与消毒的目的是彻底清除细菌、病毒和其他有害微生物，保证仪器设备的卫生状态。
因此，在选择清洁剂和消毒剂时要确保其能够有效杀灭或去除目标细菌，并且不对仪器设备造成损害。
3. 全面性：清洁与消毒的工作应该覆盖到仪器设备的各个部分和表面，确保每个细节都得到彻底清洁和消毒。
二、清洁与消毒的具体步骤1. 准备工作：在进行清洁与消毒前，需要对仪器设备进行必要的准备工作。
首先，断开电源并等待仪器设备完全冷却。
其次，移除可拆卸的部件，并在清洁前进行标记，以方便后续的组装。
最后，参考仪器设备的操作手册，了解制造商对于清洁和消毒的建议。
2. 清洁：清洁是保证仪器设备卫生的基础步骤。
首先，使用清水清洗表面的大块污物，并用软布或海绵擦拭。
然后，根据仪器设备的材质和使用情况选择合适的清洁剂。
涂抹清洁剂，并用刷子或布擦拭仪器设备的表面、孔洞和线缝，确保清洁剂渗透到各个细节。
最后，用清水彻底冲洗仪器设备，确保所有清洁剂残留物被彻底清除。
3. 消毒：在清洁完成后，对仪器设备进行消毒是必要的。
消毒剂的选择应根据仪器设备的材质和所处环境来决定。
常用的消毒剂有酒精、过氧化氢和次氯酸钠等。
首先，按照消毒剂说明书的指示配制合适的稀释液。
然后，将稀释液均匀喷洒或涂抹在仪器设备的表面，确保每个细节都得到覆盖。
等待一定时间，让消毒剂充分发挥作用。
最后，用清水彻底冲洗仪器设备，确保消毒剂残留物被完全清除。
实验二玻璃器皿的清洗、包扎及灭菌
玻璃器皿的形状和包装方法要求能防止
污染杂菌为准； 洗涤玻璃器皿方法不当会影响实验结果
第三页，编辑于星期六：十二点 五十四分。
1、玻璃器皿的清洗方法
(1)、新购的玻璃器皿 首先浸泡于１～２％的盐酸或洗涤液中数 小时，最后用流水冲净。
第四页，编辑于星期六：十二点 五十四分。
（2）、使用过的玻璃器皿的清洗方法 试管、培养皿、等 可用瓶刷及去污粉刷 洗然后自来水冲洗干净。 若内壁水均匀分布成一薄层而不出现水珠， 为油污完全洗净。否则，再浸泡数小时。
实验二 玻璃器皿的清洗，包扎及灭菌
第一页，编辑于星期六：十二点 五十四分。
一、目的要求
1、学习并掌握玻璃器皿的清洗，包扎方法
2、学习并掌握玻璃器皿灭菌的方法。
第二页，编辑于星期六：十二点 五十四分。
二、实验原理及操作
玻璃器皿一般要求硬质玻璃，才能承受 高温和短暂灼烧而不致破裂； 玻璃器皿的游离碱含量要少，否则会影
此法是将物品放在密闭的高压蒸汽锅内0.1MPa，121℃
保持15～30min进行灭菌。时间长短可根据灭菌物品和数
量的不同而有所不同，以达到彻底灭菌为准。这种方法
适用于工作服﹑橡胶物品﹑培养基的灭菌，也可用于玻璃 器皿的灭菌。
第十八页，编辑于星期六：十二点 五十四分。
高 压
蒸 汽
消 毒
器
第十九页，编辑于星期六：十二点 五十四分。
第十三页，编辑于星期六：十二点 五十四分。
第十四页，编辑于星期六：十二点 五十四分。
棉塞：加塞时，1／3在试管口外，2／3在试管 口内。如图2-2所示。做棉塞的棉花要选 纤维较长的，一般不用脱脂棉做棉塞
通气塞：几层纱布（一般8层）相互重叠，或两 层纱布间均匀铺一层棉花而成
清洗灭菌的操作流程
清洗灭菌的操作流程清洗灭菌是在医疗、实验室等领域中常见的操作步骤，它的目的是杀灭病原体和其他微生物，确保操作环境的洁净和安全。
下面将介绍清洗灭菌的详细操作流程。
一、准备工作1. 确定清洗灭菌的设备和材料，包括清洗剂、消毒剂、洗涤器具等。
2. 检查设备和材料的完整性和质量，确保其正常工作。
3. 准备好个人防护用具，包括手套、口罩、防护眼镜等。
二、清洗操作1. 将待清洗的器具放入洗涤器具中，加入适量的清洗剂。
2. 按照清洗剂的使用说明，选择合适的清洗程序和参数设置。
3. 启动洗涤器具，开始清洗过程。
4. 清洗结束后，取出器具，用清水充分冲洗至无清洗剂残留。
5. 对于一些难以清洗的器具，可以使用刷子等工具进行辅助清洗。
6. 清洗结束后，对洗涤器具进行清洁和维护，确保其正常工作。
三、灭菌操作1. 将清洗干净的器具放入灭菌器中。
2. 根据器具的特点和要求，选择合适的灭菌方法，包括高温蒸汽灭菌、化学灭菌等。
3. 根据灭菌器的使用说明，设置合适的灭菌参数和时间。
4. 启动灭菌器，开始灭菌过程。
5. 灭菌结束后，等待灭菌器内的压力和温度下降至安全范围，然后打开灭菌器门。
6. 将灭菌好的器具取出，放置在干净、密闭的容器中，以免再次受到污染。
四、清洁操作1. 将用过的清洁剂和消毒剂进行合理排放，避免对环境造成污染。
2. 清洁使用过的洗涤器具，包括清洗器具的外部和内部。
3. 对灭菌器进行清洁和维护，包括清理灭菌器的内部和外部，以及更换灭菌器中的过滤器等。
4. 对工作台面、操作区域等进行清洁，保持整洁和卫生。
五、记录和验证1. 对清洗灭菌过程进行记录，包括清洗和灭菌的时间、温度、压力等参数。
2. 进行灭菌效果验证，可以使用生物指示物或物理指示物进行验证。
通过以上的操作流程，可以确保清洗灭菌过程的安全和有效。
遵循正确的操作方法，严格控制各项参数，可以有效杀灭病原体和其他微生物，保护操作环境的洁净和安全。
同时，及时清洁和维护设备，可以延长其使用寿命，提高工作效率。
实验室细胞培养器皿的洗涤与消毒
实验室器皿的洗涤与消毒第一节洗涤一、玻璃器皿的洗涤在分析工作中，洗涤玻璃仪器不仅是一项必须做的实验前的准备工作，也是一项技术性的工作。
仪器洗涤是否符合要求，对检验结果的准确和精密度均有影响。
不同的分析工作有不同的仪器洗净要求，我们以一般定量化学分析为主介绍仪器的洗涤方法。
（一）洁净剂及使用范围最常用的洁净剂是肥皂，肥皂液（特制商品），洗衣粉，去污粉，洗液，有机溶剂等。
肥皂，肥皂液，洗衣粉，去污粉，用于可以用刷子直接刷洗的仪器，如烧杯，三角瓶，试剂瓶等；洗液多用于不便用于刷子洗刷的仪器，如滴定管，移液管，容量瓶，蒸馏器等特殊形状的仪器，也用于洗涤长久不用的杯皿器具和刷子刷不下的结垢。
用洗液洗涤仪器，是利用洗液本身与污物起化学反应的作用，将污物去除。
因此需要浸泡一定的机会充分作用；有机溶剂是针对污物属于某种类型的油腻性，而借助有机溶剂能溶解油脂的作用洗除之，或借助某些有机溶剂能与水混合而又发挥快的特殊性，冲洗一下带水的仪器将不洗去。
如，甲苯，二甲苯，汽油等可以洗油垢，酒精，乙醚，丙酮可以冲洗刚洗净而带水的仪器。
（二）洗涤液的制备及使用注意事项洗涤液简称洗液，根据不同的要求有各种不同的洗液。
将较常用的几种介绍如下。
1.强酸氧化剂洗液强酸氧化剂洗液是用重铬酸甲（K2Cr2O7）和浓硫酸（H2SO4)配成。
K2Cr2O7在酸性溶液中，有很强的氧化能力，对玻璃仪器又及少有侵蚀作用。
所以这种洗液在实验室内使用最广泛。
配制浓度各有不同，从5~12%的各种浓度都有。
配制方法大致相同：取一定量的K2Cr2O7（工业品即可），先用约1~2倍的水加热溶解，稍冷后，将工业品浓H2SO4所需体积数徐徐加入K2Cr2O7不溶液中（千万不能将水或溶液加入H2SO4中），边倒边用玻璃棒搅拌，并注意不要溅出，混合均匀，俟冷却后，装入洗液瓶备用。
新配制的洗液为红褐色，氧化能力很强。
当洗液用久后变为黑绿色，即说明洗液无氧化洗涤力。
例如,配制12%的洗液500mL。
实验室卫生管理制度保持实验环境的清洁与卫生
实验室卫生管理制度保持实验环境的清洁与卫生实验室的卫生管理对于保持实验环境的清洁与卫生至关重要。
一个干净整洁的实验室不仅可以提高实验的准确性和可靠性，还能保障实验人员的安全。
为了确保实验室卫生管理的有效运行，建立完善的实验室卫生管理制度是必要的。
一、实验室日常清洁工作保持实验室的日常清洁工作是实验室卫生管理制度的基础。
实验室工作人员应定期进行实验室的清洁和卫生工作。
具体措施如下：1. 实验台面的清洁实验台面是实验工作的重要场所，必须保持其清洁和整洁。
工作人员在每日工作前后，应用专门的清洁剂对实验台面进行清洁消毒，清除上面的杂物和污垢。
2. 实验器皿的清洗实验器皿在使用后应立即进行清洗。
工作人员应使用适当的清洁剂和工具，对器皿进行彻底清洗，并进行高温蒸煮消毒，以杀灭潜在的细菌和病原体。
3. 实验室地面和墙壁的清洁实验室地面和墙壁也需要定期清洁。
清洁工作人员应定期对实验室地面和墙壁进行清扫和擦拭，保持其干净整洁。
二、垃圾处理和废品管理垃圾处理和废品管理是实验室卫生管理的重要环节。
实验室应设立专门的垃圾分类投放区，将垃圾分类投放到相应的垃圾桶中。
废品的处理应遵循环保的原则，如废纸张可以进行回收利用，有害废品和化学废品应按照相关规定进行专门处理。
三、实验室通风与空气清新实验室通风与空气清新是保持实验室环境清洁与卫生的重要方式之一。
实验室应配备良好的通风设施，定期进行通风换气。
特殊情况下，如实验中产生有害气体或化学物质，应采取相应的措施进行排气处理，以确保实验环境的安全和清洁。
四、安全设施与个人卫生实验室卫生管理制度还应包括安全设施与个人卫生的管理。
实验室应配备应急处理设施如紧急洗眼器、紧急喷淋器等，并定期进行检查和维护。
实验人员应做好个人卫生，勤洗手，穿戴符合要求的实验服装和防护用具，以防止交叉感染和实验事故的发生。
综上所述，实验室卫生管理制度是保持实验环境的清洁与卫生的基础，对实验室工作的准确性和人员的安全至关重要。
实验二培养基配制相关器皿的包扎及消毒灭菌
3、物理化学条件适宜的说明
▪ pH值： ▪ 渗透压和水活度（aw）：
在同温同压下，某溶液的蒸气压（P）与纯水蒸气压（P0）之比。 ▪ 氧化还原电位：
针对厌氧菌分离特别需要注意（不常加入半胱氨酸、巯基乙醇酸钠等？）。
4、培养基的分类
▪ ⑴按成分分——对成分种类、量是否清楚 天然培养基 合成培养基（组合培养基） 半合成培养基（也称半组合培养基）
锅内温度（℃） 排除1/2空气 94 110 112 118 124 128
不排除空气 72 90 100 109 115 121
一些细菌芽孢湿热灭菌所需时间
消毒、灭菌的生物指示菌
▪ 嗜热脂肪芽孢杆菌 （Bacillus stearothermophilus） ▪ 结核分枝杆菌——致病菌指示菌 （Mycobacterium tuberculosis ▪ 沙门氏菌——致病菌指示菌（通用检测） （Salmonella spp）
4、包扎 （有一定规范要求）
5、灭菌 （高压蒸汽灭菌：121.3℃,15～30min）
四、培养基配制过程中需注 意的事项
▪ 先加水——易产生沉淀 ▪ 逐一溶解——易产生沉淀 ▪ 调节pH——容易忘记 ▪ 加塞灭菌（或过滤除菌）——及时灭菌 ▪ 煮过或加热过的培养基，注意水的蒸发损失——容量补足
五、培养基配制中的2点说明
蒸汽供 给
温度感应 器
蒸汽 凝汽 瓣
废汽冷凝 器
压力表 蒸汽排气阀
门 卧 式 灭 菌 锅 示 意 图 （ 简 图 ）
温度计阀
消毒室
蒸汽供应阀
蒸汽进口
灭菌时间到 排汽口
夹套（层）
灭菌过程出气口（冷空 气和蒸汽）
立式压力灭菌器
手提式灭菌锅
实验二玻璃器皿的清洗、包扎与灭菌
1、玻璃器皿的清洗方法 (1)、新购的玻璃器皿
首先浸泡于１～２％的盐酸或洗涤液
中数 小时，最后用流水冲净。
（2）、使用过的玻璃器皿的清洗方法
试管、培养皿、等 刷 洗然后自来水冲洗干净。 若内壁水均匀分布成一薄层而不出 现水珠， 为油污完全洗净。否则，再浸泡数 小时。 可用瓶刷及去污粉
装有固体培养基的器皿，应先将其刮去，再洗涤 带菌的先浸在2%煤酚皂溶液或0.25%新洁尔 灭消毒液内24h或煮沸0.5h，再洗涤 带病原菌的先高压蒸汽灭菌，然后将培养
养基的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌
高 压 蒸 汽 消 毒 器
高 压 蒸 汽 消 毒 器
（干热灭菌）
(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥
后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。
(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中， 彼此间留有一定的空隙以便流通空气。
(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。
(4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭 上排气孔，继续加热至一定温度后，调
附：棉塞的制作
棉塞的作用
防止杂菌污染 保证通气良好
棉塞：加塞时，1／3在试管口外，2／3在试管 口内。如图2-2所示。做棉塞的棉花要选 纤维较长的，一般不用脱脂棉做棉塞 通气塞：几层纱布（一般8层）相互重叠，或两 层纱布间均匀铺一层棉花而成
3、消毒与灭菌
消毒：一般是消灭病原菌和有害微生物的
物倒去，再进行洗涤
玻璃吸管 立即浸泡在自来水中，免得干燥后难以冲洗 干净，待实验结束后集中冲洗 若吸管顶部塞有棉花，则先用水将棉花冲 出，再洗涤 吸过微生物培养物的吸管应立即浸泡在盛有 2%的煤酚皂溶液或 0.25%新洁尔灭消毒液 内，24h后方可取出冲洗 吸管内部如有油垢，同样应先在洗涤液中 浸泡数小时，然后冲洗
细胞培养实验
实验一、实验器材的清洗、包装和消毒以及实验室常用的仪器设备的使用和维护一、实验目的1、认识常用实验器材。
2、实验器材的清洗。
3、实验器材的包装和消毒。
4、了解细胞培养中常用仪器设备的使用方法、注意事项和保养方法。
二、实验用品1仪器压力蒸汽消毒器、电热干燥箱、超净台、自动双重纯水蒸馏器、CO2培养箱、电热恒温培养箱、真空抽气泵或电动吸引器、液氮罐、普通冰箱、超低温冰箱2试剂及耗材（1）试剂：盐酸或硫酸、洗涤用品、消毒剂等（2）耗材：培养瓶、盐水瓶、漏斗、量筒等玻璃器皿、培养皿等塑料品、解剖器械、铝饭盒、酒精灯和记号笔等用品三、实验步骤一）玻璃器械洗消：（一）新的玻璃器皿的洗消：1.自来水刷洗，除去灰尘。
2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。
3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。
4.泡酸、清洗：用清洁液（重铬酸钾120g：浓硫酸200ml：蒸馏水1000ml）浸泡12小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次，最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。
5.烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸（油光纸）包装。
6.高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向15磅时，维持20-30分钟。
7.高压消毒后烘干（二）旧的玻璃器皿的洗消：1.刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液（洗涤剂）的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。
2.泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液（酸液），12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗（避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗），再用蒸馏水冲洗3次。
3.烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸（油光纸）等包装，以便于消毒储存及防止灰尘和再次被污染。
4.高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内，盖好盖子，打开开关和安全阀，随着温度的上升安全阀冒出蒸气，当蒸气成直线冒出3-5分钟后，关闭安全阀，气压表指数随之上升，当指针指向15磅时，调节电开关维持20-30分钟即可。
物理实验技术的仪器清洁与消毒方法
物理实验技术的仪器清洁与消毒方法在物理实验中，仪器的清洁与消毒是非常重要的。
仪器的清洁不仅可以确保实验的准确性和可靠性，还能延长仪器的使用寿命。
而仪器的消毒则是为了减少实验中的交叉污染和细菌感染。
本文将介绍几种常用的物理实验仪器清洁与消毒方法。
一、玻璃仪器的清洁与消毒1. 清洗方法：将使用过的玻璃仪器先用水冲洗，去除表面的污垢。
然后使用洗涤剂或肥皂水彻底清洗，注意要对玻璃表面进行轻柔的擦拭，以免划伤。
最后用清水冲洗干净，并用纸巾或柔软的布擦干。
2. 消毒方法：将清洗干净的玻璃仪器放入煮沸的纯净水中煮沸约15分钟，以确保仪器表面的细菌被灭活。
不建议使用化学消毒剂，因为这可能导致仪器表面腐蚀。
二、金属仪器的清洁与消毒1. 清洗方法：使用温水和洗涤剂清洗金属仪器表面的污垢，然后用刷子或软布轻轻擦拭，注意不要用过于硬的刷子或研磨剂，以免划伤表面。
清洗后用清水冲洗干净，并用纸巾或柔软的布擦干。
2. 消毒方法：将清洗干净的金属仪器浸泡在75％乙醇溶液中约15分钟，然后用清水冲洗干净。
注意，对于一些金属仪器，如不锈钢，可以使用加热和高温消毒。
三、电子仪器的清洁与消毒1. 清洁方法：对于电子仪器，首先确保仪器处于关闭状态并断开电源。
使用专门的电子器械软刷或棉签沾湿清洁液进行表面的轻柔擦拭。
注意不要使用带有酒精或致静电的清洁剂，以免损坏电子元器件。
清洁后用干净的纸巾擦干。
2. 消毒方法：对于需要进行消毒的电子仪器，首先可以使用紫外线灯照射表面，或用专门的消毒喷雾对仪器进行喷洒。
不过，在进行任何消毒操作之前，务必先阅读仪器的说明书，以了解是否可以进行消毒，并遵循设备制造商的建议。
四、塑料仪器的清洁与消毒1. 清洗方法：将使用过的塑料仪器先用温水冲洗，去除表面的污垢。
然后使用洗涤剂或肥皂水彻底清洗，可用刷子轻轻搓洗。
清洗后用清水冲洗干净，并用纸巾或柔软的布擦干。
2. 消毒方法：将清洗干净的塑料仪器放入含10％漂白水的容器中，浸泡30分钟。
器械消毒流程
器械消毒流程器械消毒是医疗保健领域中非常重要的一环，它能有效杀灭细菌、病毒和真菌，保障患者和医护人员的健康安全。
正确的器械消毒流程能够有效预防交叉感染，保障医疗质量。
下面将介绍一般医疗机构常用的器械消毒流程。
1. 分类收集。
首先，将使用过的器械按照不同的种类进行分类收集，比如手术器械、注射器等。
这样有利于后续的清洗和消毒工作。
2. 清洗。
清洗是器械消毒的第一步，它能够去除器械表面的污垢和血渍，减少细菌的数量。
在清洗过程中，应该使用专门的清洗剂和刷子，彻底清洗每一个器械的表面和隐蔽部位。
3. 包装。
清洗干净的器械需要进行包装，包装的目的是保护器械在消毒过程中不受二次污染，并且在存放和运输过程中不受损坏。
包装材料应该选择符合医疗器械消毒要求的专用包装袋或包装盒。
4. 消毒。
消毒是整个器械消毒流程中最关键的一步。
常见的消毒方法包括高温蒸汽消毒、化学消毒和紫外线消毒等。
在进行消毒操作时，应该严格按照消毒剂的使用说明进行，保证消毒的有效性和安全性。
5. 质控。
消毒后的器械需要进行质量控制，确保消毒的有效性。
这包括使用生物指示剂进行消毒效果监测，以及记录消毒过程的相关参数和结果。
6. 储存。
消毒后的器械应该在干燥通风的环境中储存，避免受到潮湿和污染。
储存区域应该定期清洁和消毒，确保器械的存储环境符合卫生要求。
总的来说，器械消毒是医疗保健工作中至关重要的一环，正确的器械消毒流程能够保障医疗质量，预防交叉感染，保障患者和医护人员的健康安全。
医疗机构在进行器械消毒工作时，应该严格按照规范操作流程进行，确保每一个环节都符合要求，从而保证器械的消毒效果和安全性。
玻璃器皿的洗涤、包扎、干燥及灭菌
实验一、玻璃器皿的洗涤、包扎、干燥及灭菌一、目的要求1、掌握实验室常用玻璃器皿的清洗、干燥和包扎方法。
2、了解湿热和干热灭菌的原理,并掌握有关的操作技术。
二、原理为确保实验顺利地进行,要求把实验所用的玻璃器皿清洗干净并干燥，微生物实验还要进行灭菌。
为保持灭菌后和无菌状态，需要对培养皿，吸管等进行包扎，对试管和三角瓶等加塞棉塞。
这些工作看起来很普通简单，但如操作不当或不安操作规定去做，则会影响实验结果，甚至会导致试验的失败。
1、玻璃器皿的清洗①不能用有腐蚀作用的化学试剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦拭玻璃器皿；新的玻璃器皿应用2%的盐酸溶液浸泡数小时，用水充分洗干净。
②用过的器皿应立即洗涤。
③强酸，强碱，琼脂等能腐蚀，阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须到在废物缸内。
一般的器皿都可用去污粉，肥皂或配成5%的热肥皂水来清洗。
油脂很重的器皿应先将油脂擦去。
沾有煤膏，焦油及树脂一类物质，可用浓硫酸或40%氢氧化钠或用洗液浸泡；沾有蜡或油漆物，可加热使之熔融后揩去，或用有机溶剂(苯，二甲苯，汽油，丙酮，松节油等)揩去。
④洗涤后的器皿应达到玻璃壁能被水均匀湿润而无条纹和水珠。
2、器皿包扎为了灭菌后仍保持无菌状态，各种玻璃器皿均需包扎。
3、干燥做实验应经常要用到的仪器应在每次实验完毕后洗净干燥备用。
用于不同实验对干燥有不同的要求，一般定量分析用的烧杯、锥形瓶等仪器细净即可使用，而用于精密分析的仪器很多要求是干燥的，有的要求无水痕，有的要求无水。
应根据不同要求进行干燥仪器。
（1）、烘干洗净的仪器控去水分，放在烘箱内烘干，烘箱温度为105~110℃烘1小时左右。
也可放在红外灯干燥箱中烘干。
此法适用于一般仪器。
称量瓶等在烘干后要放在干燥器中冷却和保存。
带实心玻璃塞的及厚壁仪器烘干时要注意慢慢升温并且温度不可过高，以免破裂。
量器不可放于烘箱中烘。
硬质试管可用酒精灯加热烘干，要从底部烤起，把管口向下，以免水珠倒流把试管炸裂，烘到无水珠后把试管口向上赶净水气。
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实验 2 器械的清洗与消毒
【实验原理】
在组织培养过程中，离体细胞对任何毒性物质都十分敏感。
毒性物质包括解体的微生物及细胞残余物
以及非营养的化学物质，因此对新采用和重新使用的培养皿等培养用品都要严格清洗和消毒。
【实验目的】
学习并掌握细胞培养使用的器皿、器械的洗涤和消毒。
【仪器、材料及试剂】
1．仪器：超净工作台，干燥箱，高压锅，过滤器。
2 •材料：紫外灯，0.22口微孔滤膜。
3．试剂：75%酒精，0 .1%新洁尔灭，高锰酸钾，重铬酸钾，浓硫酸。
【操作步骤】
1 •清洗
（1）玻璃器皿的清洗
步骤：按浸泡T刷洗T浸酸T冲洗等四步程序进行。
①浸泡：新购进的玻璃器皿常带有灰尘，呈弱碱性，或带有铅、碑等有害物质，故先用自来水浸泡过
夜、水洗，然后再用2%~5%盐酸浸泡过夜或煮沸30min，水洗。
要领：培养用后的玻璃器皿要立即泡入清水中，使下道刷洗工作能顺利进行。
用后的玻璃器皿常带有大量的蛋白质附着，干涸后不易刷洗掉，用后要立即用清水浸泡。
②刷洗：用软毛刷、优质洗涤剂，刷去器皿上的杂质，冲洗晾干。
要领：浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾
洗涤剂去器皿上的杂质、刷洗次太多，会损害器皿的表面光洁度，洗涤剂有使pH 上升的趋势，所以易选
用软毛刷和优质洗涤剂。
禁止用去污粉。
因其中含有砂粒。
会严重破坏玻璃器皿的光洁度。
特别注意刷洗瓶角部位。
酸浸之前要把洗涤剂冲干净。
③浸酸：将器皿浸泡于清洁液24h，如急用也不得少于4h。
清洁液由重铬酸钾、浓硫酸及蒸馏水配制而成，具有很强的氧化作用，去污能力很强。
经清洁液浸泡后，玻璃器皿残留的末刷洗掉的微量杂质可被完全清除。
④冲洗：先用自来水充分冲洗，吸管等冲流10min，瓶皿需每瓶灌满、倒掉，反复10次以上。
然后再
经蒸馏水漂洗3 次,不留死角。
晾干或烘干备用。
对已用过的器皿，凡污染者必先经煮沸30min 或放3%盐
酸中浸泡过夜，未污染者可不需灭菌处理，但仍要刷洗、清洁液浸酸过夜，冲洗等。
【附】清洁液的配制和使用注意事项
1.清洁液（配方见表2-1）
配方成分弱酸次强液强液
重铬酸钾（g）50
10060
清水（ml）10001000200
浓硫酸（ml）90160800
硫酸浓度（v/v）8%14%80%
①选用耐酸塑料桶或不锈钢桶配制为宜。
②先将重铬酸钾溶于水（用玻璃棒搅拌助溶，有时不能完全溶解）。
③缓缓加入浓硫酸，切忌过急，否则将产热而发生危险（绝不可将重错酸饵液倒入浓硫酸中）。
④清洁液配好呈棕红色，待变绿色时表明失效。
由于清洁液的腐蚀性极强，配制与应用时必须小心，并做好防护。
2 •矽酸钠洗液
贮存液（X100）
砂酸纳80克加偏磷酸钠9克加热溶在1000ml水中。
使用时用水稀释100倍，将器皿放入煮沸20min ,
冷却后冲洗，再用2%HCI浸泡2h后，自来水冲洗。
矽酸钠洗液较清洁液安全，但价格较贵。
（2）塑料器皿清洗
自来水充分浸泡T冲洗T 2%Na0H浸泡过夜T自来水冲洗T 2%~5%盐酸浸泡30min宀自来水冲洗宀蒸馏水漂洗3次T 晾干T紫外线照射30min（或先用75%酒精浸泡、擦拭，再用紫外线照射30min）。
凡能耐热的塑料器皿，最好经101.3kPa（121.3 C ）高压灭菌。
（3）胶塞等橡胶类处理
新购置者先经自来水冲洗T 2%NaOH煮沸15min T自来水冲洗T 2%~5%HCl煮沸15min T自来水冲洗5次以上T蒸馏水冲洗5次以上T蒸馏水煮沸10min，倒掉沸水让余热烘干瓶塞等。
或蒸馏水冲洗晾干，整齐摆放于小型金属盒内经
101.3kPa高压灭菌。
（4 ）金属器械的清洗
新购进的金属器械常涂有防锈油，先用沾有汽油的纱布擦去油脂，再用水洗净，最后用酒精棉球擦拭，
晾干。
用过的金属器械应先以清水煮沸消毒，再擦拭干净。
使用前以蒸馏水煮沸10min，或包装好以101.3kPa
高压15min 。
（5）除菌滤器的处理用过的滤器将滤膜去除，用三蒸水充分洗净残余液体，置干燥箱中烘干备用。
2．包装包装的目的是防止消毒灭菌后再次遭受污染，所以经清洗烤干或晾干的器材，应严格包装后再行消毒灭菌处理。
包装材料常用包装纸、牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、玻璃或金属制吸管筒、纸绳等。
包装分为局部包装和全包装两类，前者用于较大瓶皿，一般用硫酸纸和牛皮纸将瓶口包扎好；后者适于较小培养瓶皿、吸管、注射器、金属器械和胶塞等，以下为常用瓶皿、吸管、无菌衣帽等的包装方法，其它物品可参照处理。
①瓶类：硫酸纸罩以瓶口，外罩二层牛皮纸用绳扎紧。
②小瓶皿、胶塞、刀剪等器械可装人饭盒，饭盒再以牛皮纸包好，绳扎好。
③吸管、滴管口用脱脂棉塞上（不要太紧或太松）装人消毒筒内，滤器、滤瓶、橡皮管等都要用牛皮纸包好瓶口等，外罩一层牛皮纸包好，再用包布包好。
④无菌衣、帽、口罩，均以牛皮纸或包布包好，绳扎好。
3．消毒灭菌严格的消毒灭菌对保证细胞培养的成功是极为重要的，其方法分为物理法和化学法两类。
前者包括干热、湿热、滤过、紫外线及射线等，后者主要指使用化学消毒剂等。
①热灭菌：玻璃器皿，160~170C, 90~120min 或180C 45~60min。
②蒸气灭菌：用于玻璃器皿、滤器橡胶塞、解剖用具、耐热塑料器具、受热不变性的溶液等，不同物
品其有效灭菌压力和时间不同，如培养用液、橡胶制品、塑料器皿等用68kPa（115 C ）高压灭菌10min ;布类、玻璃制品、金属器械等用103kPa（121.3C ）高压灭菌15~20min。
③滤过除菌：适于含有不耐热成分的培养基和试剂的除菌，用孔径为0.22 口微孔滤膜可除去细菌和
霉菌等，用此滤膜过滤两次，可使支原体达到某种程度的去除，但不能除去病毒。
④紫外线：紫外线的波长为200~300nm,最强是在254 nm, 6~15平方米最少一只紫外灯，高度要在2.5m 以下，湿度45%~60%，杆菌效果好，球菌次之，霉菌、酵母菌最差，实验前应不低于30 分钟的照射时间。
⑤熏蒸消毒：当遇有细胞培养出现多次污染，或实验室两个月一次的常规消毒，均可用高锰酸钾
5~7.5g，加甲醛（40%）10~15ml，混合放入一开放容器内，立即可见白色甲醛烟雾，消毒房间需封闭24小时,致少4 小时以上。
⑥煮沸消毒：紧密情况时使用，金属器械和胶蹇在水中煮20~30分钟，趁热倾去水分即可使用。
⑦化学消毒：化学药品消毒灭菌法是应用能杀死微生物的化学制进行消毒灭菌的方法。
实验室桌面、
用具及洗手用的溶液均常用化学药品进行消毒杀菌。
常用的有：2%煤酚皂溶液（来苏尔）、0.25%新洁尔灭、1%升汞、3~5%甲醛溶液、75%酒精。
【实验报告】
玻璃器皿的清洗步骤和要领是什么？
思考题】
消毒除菌的方式有哪些？各适用于什么物品或场所的消毒除菌？。