荧光显微镜拍照操作规程
基础医学实验教学中心荧光显微镜操作规程
基础医学实验教学中心
荧光显微镜操作规程
一、操作步骤
1.打开电源。
2.放入载玻片,10×下调清后再高倍观察。
A:明视场观察
C:荧光观察
DF:暗视场观察
相差观察:PH1:10×或20×;PH2:40×;PH3:100×
3.明视场校正:把视场光阑调到最小,调节聚光器螺纽,有正六边
形出现时固定不动,调节视场光阑和小螺纽使正六边形在正中间,然后把视场光阑调到最大,调节完毕。
4.相差校正:先换上对中望远镜,调节2个相差环在正中间,用黄
色滤光片观看。
5.看荧光时,打开POWER,过1分钟后打开IGNITION,把荧光
光闸打到O,调3或4选择BLUE或GREEN。
如同时观察明视场可把荧光光闸打到C即可。
6.照相:拉开照相杆,关闭闪光灯,按快门。
二、注意事项
1.调视野时应先调粗准焦螺旋,后调细准焦螺旋。
2.操作时手不要碰到镜头,如果镜头脏了,用镜头纸轻轻擦拭。
2.荧光显微镜的使用方法与注意事项
荧光显微镜的使用方法与注意事项1、打开显微镜电源。
2、需要使用荧光才开启荧光光源,开启汞灯需要记录打开和关闭的时间。
提示:两次开启汞灯的时间必须间隔半小时以上,打开汞灯后,必须半小时后方可关闭。
3、擦拭镜头:擦拭目镜和物镜。
在长纤维脱脂棉签顶端蘸上无水乙醇,从中央部分开始,采用螺旋渐进的方式轻轻逐步擦到边缘。
提示:①无需经常将物镜/目镜拆下来清理擦拭,日常使用时仅需用脱脂棉签及擦镜纸配合无水乙醇擦去油污即可,只有遇到顽固污渍时才应将物镜拆卸清理。
擦拭镜头时,动作应轻柔,不能过于用力,以避免损坏镀膜层。
②留意擦镜纸的两个面,纹路是不同的:其中一面是粗糙的,另一面更光滑些,要使用更光滑的那一面来清洁。
一般不建议用干的擦镜纸直接擦拭,同样可能划伤镜头。
4、放置样本,正置显微镜将样本放至物镜下方,倒置显微镜将样本放至物镜上方。
提示:显微镜样本一定要保持干净,如有盖片样本,一定要干净干燥,以免样本上的试剂污染物镜。
免疫荧光染色用抗荧光淬灭剂封片。
HE染色、免疫组织化学染色、高尔基染色等用中性树脂封片。
5、选择适合于自己实验的物镜放大倍数,由低到高进行观察。
6、选取实验相应方案,如光强,shutter,明场/DIC等。
切换滤光片,将荧光染色标本所需的激发滤光片组转入光路。
提示:选择与荧光染色标本相应滤色块。
如UV——DAPI,hochest等(镜下观察为蓝色);蓝光——FITC,Alex488等(镜下观察为绿色);绿光——Alex555,Cy3等(镜下观察为红色)。
7、实验结束,关闭电源。
提示:①显微镜使用过程中,镜体、灯箱及电源等位置应无遮挡或覆盖,以免影响散热从而损耗显微镜寿命。
显微镜使用完后,等灯箱部分冷却后,再盖上防尘罩。
②显微镜包含很多光学部件,避免显微镜碰撞,以保护光学系统。
显微镜属精密仪器,如需搬动,拆修,请联系专业人员。
荧光显微镜操作规程
文件制修订记录1.0开机:1.1打开房间总电源开关1.2打开电脑电源开关1.3打开数码相机电源开关1.4打开显微镜电源开关(打开汞灯电源开关)2.0调试显微镜光路:2.1把载玻片放到载物台上。
调节聚焦。
2.2根据物镜指数乘0.8确定聚光镜光圈值,调整到位。
2.3将视场光阑缩小,然后调节聚光镜高度,直到从目镜中观察到视场光阑的清晰成像。
2.4放大视场光阑,使其在目镜中的黑框扩展到视野以外。
3.0调试数码相机拍摄照片:3.1在显微镜取景器中对好视野及焦距。
3.2打开photoshop程序。
3.3点击“文件 -- 自动– Kodak mds290 acquine…。
”调出相机控制窗口。
3.4ZOOM定为77。
拍摄图片格式为640*480不要改变。
3.5在相机控制窗口上点preview,观察预览图象的亮度。
选择适当的曝光时间使预览图片的亮度合适。
3.6点拍摄按纽拍摄,等待几秒钟后图片传回电脑并在photoshop窗口里显示。
3.7继续拍摄下一张照片。
3.8拍摄十来张照片后要及时保存照片。
3.9先关闭相机控制按纽。
并保存拍摄条件到默认值。
3.10在photoshop中保存刚拍摄的照片到指定文件夹中,保存后要关闭照片。
3.11保存并关闭全部照片后重新打开相机控制窗口继续拍摄。
3.12拍摄全部完成后保存所拍摄的照片。
需要时将照片通过网络上传到校园网服务器上,不能使用U盘或软盘转移文件。
或者将照片文件刻录到光盘上。
4.0关机:4.1关闭显微镜电源。
4.2关闭汞灯电源。
4.3关闭数码相机电源。
4.4关闭电脑时点“重新启动电脑”,待电脑进入关闭状态并重新启动时按电脑电源开关强制关机。
注意不能直接点击“关闭电脑”。
4.5关闭房间电源总开关。
超高分辨率荧光显微镜操作及注意事项
超高分辨率荧光显微镜操作指南及注意事项
1、开机:由于设备需要保持稳定,因此机器是一直保持开
机状态,网上预约刷卡后即可使用。
2、上样:在上样品之前,请在软件上将载物台向上移动
3000,将镜头与样品分开,以防镜头碰坏。
3、滴油:本显微镜只有油镜,请对应需要观察的染料来使
用适合折射系数的镜油。
4、寻样:将样品安装好后,在软件上选择样品对应的Z轴
位置,再进行微调,以10为步进进行调整。
5、拍照:首先拍照宽场模式,寻找合适的样品。
找到合适
的样品后,再开启需要的激光器,并打开安全锁。
在软件上将拍照模式改为SI,并设定好Z轴上下端和通道。
设定好保存目录,按下RUN进行拍照。
6、下样:将载物台升高3000,然后取下样品,用擦镜纸
将镜油吸掉,换一张擦镜纸沾取少量无水乙醇,将镜油擦干净。
7、关机:将激光安全锁关掉后,关闭打开的激光器。
收拾
好台面即可。
负责人:高丁
分析测试中心。
Nikon 80i显微镜操作流程(荧光)
7、荧光在激发光照射下时间不宜过长,否则易淬灭。
8、未照完的荧光切片可在4度避光条件下短暂保存,不超过24h。
9、数据如何拷贝?是否需要预约?
主要仪器信息
设备名称
正置荧光显微镜
厂家型号
Nikon 80i存放Leabharlann 点A103暗室负责人
联系电话
主要功能
病理切片(HE染色、免疫组化及免疫荧光)的图像采集
使用流程
(荧光)
1、开机:从左往右,荧光显微镜稳压器→图像采集系统→显微镜→电脑。双击桌面的拍摄软件,将其打开。
2、按需要转动荧光挡板。1:蓝色,2:绿色,3:红色。拍照时将SHUTTEER调节至O位置。
7、关闭软件。
8、关机:从右往左,电脑→显微镜→图像采集系统→荧光显微镜稳压器。
注意事项
(荧光)
1、荧光显微镜稳压器开启后15min内不得关闭,关闭后3min内不得开启。
2、不要转动粗准焦螺旋内侧的粗调焦扭力矩调节手轮。
3、采集荧光图像时,不得调节白平衡。
4、图像如需后期分析,曝光时间需一致。
5、修改默认目录:File→options。
3、把载玻片放在载物台上,调节聚焦。在镜下用肉眼观察确定拍摄位置,拉出活动杆将视野切换到电脑。
4、在控制窗口点Exposure,观察预览图像的亮度。选择适当的曝光时间预览图片的亮度合适。
5、点Capture按钮拍摄,等待几秒后保存图片,格式为.JPEG或tiff。
6、点Live按钮,继续拍摄下一张照片。
Leica荧光显微镜操作指南
Leica 荧光显微镜操作指南荧光显微镜型号:Leica DMR生产商:德国Leica公司Leica 荧光显微镜操作指南有关显微镜的的结构:荧光显微镜荧光汞灯:荧光汞灯价格昂贵,样品应集中观察,荧光光源关闭后距离下次开机时间须在30分钟以上,否则会大大降低你观察的效果及灯泡的寿命。
更换新的灯泡后第一次使用必须持续15,30分钟后方可关闭荧光电源。
光圈:孔径光阑挡板,荧光转换光路倾斜器:照明视场光阑:一般调至最大不动变倍器:1.0× ,Bose 一般不用只有在相差时选用。
照相机拍照转换档:不拉出为不能拍照只能观察,拉出一半即能观察又可拍照,全部拉出只能拍照目镜观察不到。
筒: 双目镜HC荧光滤光片 1为普通光2为蓝光3为绿光4为紫外光物镜转盘:100倍为油镜,40倍与100倍之间应有空挡便于加油取片。
(注意: 转换镜头时应转动物镜转盘齿轮,不应转动物镜,否则会导致物镜过紧或过松,易使物镜损坏。
)载物台:上有压片夹(注意:放取样本时应扳动压片夹小夹不应直接扳动压片夹) XY调节机械装置:将样品前后左右移动聚光镜转盘:10倍以上要用聚光镜相差环:H 明场直接观察亮 1、2、3、相差,观察不染色的样品D 暗场主要用于观察金属材料显微镜臂上有焦距调节,粗的调节钮为粗调调节幅度较大,细的调节钮为细调,调节幅度小慢调节。
基座:A孔径光阑高大低小,相差时最大视场光阑一般最大Gray on 光强减少,off 光强增大DLF( Day Light Filter )一般白光滤片N4灰度滤片减少1/4Green:绿色滤片B 调中操作指南:1(使用显微镜前,请打开空调除湿一小时。
若不除湿观察样品所拍的照片中会留下水渍状斑。
2. 打开总电源,打开电脑,打开电脑桌面上的的Adobe Photoshop软件的下拉菜单Import Leica.3 打开显微镜上的电源。
注意只有进行荧光观察时才能打开荧光电源,否则不要打开,以免影响高压汞灯的寿命。
正置荧光显微镜简明操作规程
正置荧光显微镜简明操作规程
1.打开LASV4.9
2.在采集设置中有mic1和摄像头mic1中荧光设置可以切换,物
镜可随手动转动镜头自动切换,三个圆圈中第一个AP(照明)和第三个Fnt Fine(亮度)可以调节,中间的(光圈)建议不要
调。
3.摄像头中,主要调曝光,伽码最佳值一般在0.6-1.0左右,饱和度
(1.5)和增益(0)一般不建议调动。
可以点击最后的有两个箭头的图标,然后再点击第一个图标,即可恢复默认值。
4.关于白平衡,拉出矩形框右击点击白平衡。
5.选择好合适的荧光、曝光后,物象微调清晰后可点击采集图像,
选择保存文件夹的位置,一般建议保存在E盘。
如果出现20X物镜“不透光”,可以考虑是光的亮度太小。
6.添加比例尺右侧最上的图标中可以添加标尺,点开标尺的设置窗
口后,四个箭头表示标尺的位置,背景中可将透明度改为0,在保存图片时注意将比例尺合并后保存。
7.关于图片刻录,打开桌面上的图标后,可在左下方查找需要刻录
的文件,同时在右下方可出现具体的文件图片等,将右下方的图片或者文件拖到右上方的框中,点击菜单栏中的刻录图标即可。
8.注意该电脑不可以私自插U盘,结果需要用光盘拷贝。
9.注意显微镜中粗细准焦螺旋前上方(载玻台下方)的两个旋钮不
得转动。
使用注意事项
1.汞灯开启半小时内不能关闭,关闭半小时内不能开启。
2.该电脑不可以私自插U盘,拷贝结果联系该仪器负责人。
荧光显微镜操作规程
荧光显微镜操作规程
荧光显微镜操作规程
使用前先检查汞灯的已运行时间,然后开启汞灯电源。
1、标本的放置
(1)把ND挡板向左拔出,停于挡板位置,阻断荧光。
(2)拉出左右两侧的滤光片转换杆(能让可见光通过)。
(3)打开显微镜的光源(不要调太亮),把玻片放置于载物台,所要观察的标本置于视野中心。
2、根据所需的激发波长推进左右两侧的滤光片杆,停于适当的位置。
3、标本对焦
(1)关闭显微镜的光源。
(2)把ND滤片向右侧推进,停于最左边的空孔位置。
(3)把视场光栅控制杆置于“O”(打开)位置。
(4)标本对焦。
4、调节视场光栅
(1)将视场光栅控制杆置于“C”(关闭)位置。
(2)调节视场光栅对中螺旋,使视场光栅的像在视场中居中
(3)逐渐开大视场光栅,并调节对中螺旋使视场光栅像的八边与视场边缘内接。
5、调节亮度
如果荧光太强或者衰减太快,则把ND滤片置于中间位置。
为了防止荧光衰减,请记住不观察的时候总把ND滤片置于最左(挡板)位置。
注意事项:
1、应一次把全部玻片观察完毕,勿中途切断电源,否则须待冷却后(约 30 分钟)才能再开电源。
最少开机 30 分钟才可关机,以免缩短灯泡寿命。
2、荧光色素于普通光线照射下易消失,故未观察之标本宜置不透
光盒内储存于冰箱(4~5℃)。
而在荧光显微镜之紫外线照射下亦易使荧光消失,故照相宜速。
3、每星期将荧光显微镜至少开机一次,以免显微镜发霉损及镜头与滤光镜。
荧光显微镜使用方法
荧光显微镜使用方法
荧光显微镜是一种先进的显微镜,它可以使被观察的样本能够发出荧光,从而看到更细胞更宏观的结构。
下面我们一起来了解一下荧光显微镜的使用方法。
1、准备工作
首先,在使用荧光显微镜之前,需要先将镜头清洗干净,以免影响成像效果。
同时,还需要将待观察的样品取出,进行样品的准备工作,例如培养细胞、切片等等。
2、调节镜头
将样品放入显微镜之后,要调节镜头,以获得最佳的成像效果。
首先要将物镜与样品对焦,然后调节荧光滤光片、激发滤光片和物镜的焦距,直到获得最佳的观察效果。
3、拍摄图像
在调节好镜头后,可以使用荧光显微镜来观察和拍摄图像。
观察荧光发射时要避免光线过强,否则会造成图像发虚。
此时需要适当地调节荧光滤光片的重叠程度来获得最佳的成像效果。
4、对图像进行处理
荧光显微镜所拍摄的图像可以根据需要进行处理。
可以使用图像软件来调整图像的对比度、亮度等参数,以产生更清晰、更鲜艳的图
像效果。
同时,可以通过颜色调整功能根据需要来调整图像颜色,如将荧光标记变成不同颜色的。
荧光显微镜在生命科学研究中有着广泛的应用,通过使用荧光标记技术,可以观察细胞内某些分子的转运、相互作用行为等生物学现象。
但荧光显微镜的使用需要非常谨慎,因为光线过强会对样品造成伤害,影响样品的生长和繁殖。
因此,在使用荧光显微镜之前,必须详细阅读说明书,了解荧光显微镜的使用要点,严格遵守操作规程,以确保实验的成功。
荧光显微镜使用说明
荧光显微镜使用说明奥林巴斯荧光显微镜操作规程该荧光显微镜为奥林巴斯DP72,本荧光显微镜可作为明视场显微镜使用,也可作为荧光显微镜使用,根据需要,开启相应的电源。
禁止乱调设置,以免影响他人正常使用。
1、作为明视场显微镜使用:(1)接通电源后,打开显微镜底座左侧的电源开关,按光亮需要调节底座前侧的滑竿。
(2)根据需要,调节底座光栅和聚光器光栅及其高度,可获得最佳的图像效果。
采集单幅图像1. 切换到“采集”布局。
为此,请使用 (例如)“视图>布局>采集”命令。
2. 在“摄像控制”工具窗口中单击实时观察按钮。
选定物镜3. 在“显微镜控制”工具栏上,单击您想要用于图像采集的物镜所对应的按钮。
打开实时图像4. 转到实时图像中所需的样品位置。
设置图像质量5. 对焦到样品上。
当对焦到样品上时可以使用此处的“聚焦指针”工具栏。
6. 核对色彩再现。
如有必要,请执行白平衡。
7. 核对曝光时间。
您既可以使用自动曝光时间功能,又可以手动输入曝光时间。
8. 选定所需的分辨率。
采集和保存图像9. 在“摄像控制”工具窗口中单击“拍照”按钮。
所采集的图像将会显示在文档组中。
10. 使用“文件>另存为...” 命令保存该图像。
请使用推荐的 TIF 文件格式。
采集录像1. 切换至“采集”布局。
为此,请使用 (例如)“视图>布局>采集”命令。
选定物镜2. 在“显微镜控制”工具栏上,单击您希望用于采集录像的物镜的按钮。
选定存储位置3. 在“摄像控制”工具窗口的工具栏中,单击“采图设置”按钮。
采图设置对话框即会打开。
4. 在树状视图中选定“保存>录像”选项。
5. 确定在采集流程完成后如何保存所录制的录像。
选定“自动保存”目标位置列表中的“文件系统”选项自动存储记录的录像。
位于目录组中的路径字段显示录像自动保存时使用的目录。
6. 单击“路径”字段旁边的 [...] 按钮可更改此目录。
选定压缩方法文件类型列表中预设的是AVI文件格式。
荧光显微镜操作流程
荧光显微镜操作流程荧光显微镜是一种重要的实验设备,常被用于生物学、医学、生物化学等领域的研究。
本文将介绍荧光显微镜的操作流程,帮助读者正确使用这一仪器。
一、准备工作在使用荧光显微镜之前,我们需要进行一些准备工作,以保证实验的顺利进行。
1. 准备显微镜和镜片确保荧光显微镜处于正常工作状态,检查镜片是否清洁无尘。
如有需要,使用镜头纸轻轻擦拭镜片表面,保持其清洁。
2. 准备标本与荧光染料根据实验需要,准备好待观察的标本,并选择适当的荧光染料。
荧光染料的选择应与标本的特性相匹配,以确保在显微镜下能有效产生荧光。
二、调整参数在开始观察之前,我们需要调整荧光显微镜的参数,以获得清晰的图像。
1. 调节照明系统根据所选择的荧光染料的激发波长,选择适当的光源和滤光器。
将滤光器安装在照明系统中,并调节至合适的位置。
2. 调节聚焦与放大通过调节聚焦手轮,将显微镜镜头调整至适当的位置。
使用目镜观察标本,通过微调手轮进行细微的调整,直到获得清晰的图像。
3. 调节曝光时间根据实验需求和标本的亮度,调节显微镜的曝光时间。
适当的曝光时间可以减少噪音,提高图像的质量。
三、观察标本当荧光显微镜的参数调整完成后,我们可以开始观察标本并获取图像了。
1. 将标本放置在载玻片上将准备好的标本放置在载玻片上,并加入适量的显微镜盖玻片。
确保标本均匀分布,避免气泡的产生。
2. 定位标本将载玻片放入荧光显微镜的标本台上,用载物台上的操作手轮将标本移动至兴趣区域。
通过目镜观察标本位置,确保兴趣区域位于视野范围内。
3. 开始观察逐渐调节显微镜的聚焦手轮,观察标本的荧光信号。
通过目镜观察和图像显示屏,可以实时监控并调整显微镜的聚焦和曝光参数,以获得最佳的图像质量。
四、数据记录与分析观察完成后,我们需要对获得的荧光显微镜图像进行数据记录与分析。
1. 数据记录根据实验要求,对荧光显微镜图像进行适当的记录。
可以采用相机拍摄或使用电脑软件进行截图,保存清晰的图像文件。
荧光显微镜操作规程
荧光显微镜操作规程荧光显微镜是一种非常重要的显微镜种类,它能够在光学显微镜的基础上使用荧光染料来标记样本中的特定结构或分子,从而使它们在显微镜下呈现出明亮的荧光信号。
荧光显微镜常用于生物医学、生命科学等领域的研究与应用。
为了正确、安全地操作荧光显微镜,下面就是一份荧光显微镜操作规程供参考。
一、准备工作1. 在操作前,确保荧光显微镜及其附件都处于正常工作状态,如灯泡是否正常照明、荧光滤光片是否正确安装等。
2. 调节荧光显微镜镜头的焦距和对焦清晰,以获得高质量的显微观察效果。
3. 检查并清理镜头和样本台,确保表面干净且无灰尘或杂质。
4. 准备好所需的荧光染料、显微镜载玻片、盖玻片等实验器材。
二、荧光染料的选择与使用1. 根据研究目的选择合适的荧光染料,确保其与样本中的目标结构或分子有良好的亲和性。
2. 注意荧光染料的使用浓度和标记方式,避免过高的浓度或不恰当的标记方法对样本造成伤害。
3. 在染色过程中,应根据荧光染料的特性和样本的需求进行优化,包括染色时间、温度、pH值等。
三、样本的准备与固定1. 样本准备前,确保样本得到适当地取样,并尽量保持其原始形态和活性。
2. 对于生物样本的固定,可以选择适当的固定剂和固定时间,以保持样本形态的稳定且不破坏荧光信号。
四、显微观察与成像1. 将准备好的样本放置在样本台上,并固定好,避免在观察过程中样本的移动或晃动。
2. 打开荧光显微镜的电源开关,调节亮度和荧光光源的功率,使样本得到适当的照明。
3. 通过目镜或光学镜头观察样本,调节对焦以获得清晰的图像。
4. 如需进行图像捕获或记录,可使用相机或计算机连接到荧光显微镜上,进行相应的配置和设置。
五、安全措施与维护1. 操作时需注意眼睛的防护,避免长时间直视荧光光源以及减少对眼睛的疲劳。
2. 使用荧光染料时,应注意防止接触皮肤和吸入气体,如发生意外事故应立即用大量水冲洗,并寻求医疗帮助。
3. 操作完毕后,关闭荧光显微镜的电源开关,并进行仔细的清洁和维护,包括清理镜头、样本台和其他配件,以保持设备的正常工作状态。
荧光显微镜的使用步骤流程
荧光显微镜的使用步骤流程1. 准备工作在进行荧光显微镜观察之前,首先需要做一些准备工作。
•清洁工作台和镜头清除工作台上的灰尘和杂物,并使用干净柔软的纸巾轻轻清洁镜头表面。
•准备样本准备待观察的荧光标记的生物样本,并确保样本处理和标记的质量良好。
•开启荧光源开启荧光灯源,确保荧光显微镜有足够的光源。
2. 调节荧光显微镜•调节亮度和对比度使用亮度和对比度调节器,调节显微镜的亮度和对比度,以获得清晰的图像。
•调节目镜调节目镜的光圈和焦点,以获得清晰的样本图像。
根据需要,使用目镜的放大倍数切换器来放大或缩小图像。
3. 观察样本•放置样本使用载玻片将待观察的样本放置在显微镜的样本台上。
•调节聚焦使用显微镜的粗焦调节器将样本大致聚焦,然后使用细焦调节器进行微调,直到获得清晰的样本图像。
4. 切换到荧光模式•调整滤光片在荧光显微镜中,使用适当的滤光片来选择激发光和发射光的波长。
根据标记的荧光染料,选择适当的滤光片。
•切换到荧光模式切换显微镜到荧光模式,确保荧光源充分照射样本。
5. 观察荧光图像•调节荧光镜头使用显微镜的放大倍数调节器,调节荧光镜头的放大倍数,以获得所需的图像尺寸。
•观察荧光图像通过目镜观察荧光图像,注意图像的对比度和清晰度。
根据需要,使用涂片夹调节荧光图像的对比度和曝光时间。
6. 影像记录和分析•拍摄荧光图像如果需要记录荧光图像,可以使用相机或荧光显微镜自带的图像记录功能进行拍摄。
•图像分析使用图像处理软件,对荧光图像进行分析和处理,提取所需的数据和信息。
7. 关闭荧光显微镜•关闭荧光源关闭荧光灯源,避免能耗和电器损坏。
•清理工作台和镜头清理工作台上的杂物和样本残留,并使用干净柔软的纸巾轻轻清洁荧光显微镜的镜头。
•关闭显微镜关闭荧光显微镜,注意保存样本和关闭电源。
以上就是荧光显微镜的使用流程,通过以上步骤,您可以顺利地观察和记录荧光标记的生物样本。
请确保注意显微镜的使用规范,以保证观察的准确性和安全性。
操作手册荧光显微镜使用方法说明书
操作手册荧光显微镜使用方法说明书一、概述荧光显微镜是一种高级显微镜,采用荧光技术来增强样本的分辨率和对比度,广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。
本操作手册旨在为用户提供荧光显微镜的正确使用方法和注意事项。
二、准备工作1. 确保荧光显微镜已经连接好电源并打开开关。
2. 检查样本是否准备完毕,确保样本已标记荧光染料。
3. 确认荧光显微镜的荧光滤光片组件已安装并与荧光染料相匹配。
4. 检查其它辅助设备,如计算机和相机连接线是否插入正确。
三、基本操作步骤1. 调节镜筒高度,使样本平面与物镜焦平面相等,获得清晰的图像。
2. 选择适当的目镜和物镜,插入物镜并旋转使其锁定。
3. 调节瞳孔间距,将左眼和右眼的视觉合并为一个图像。
4. 调节荧光照明强度,选择适当的亮度以保证荧光信号的检测。
5. 观察样本,在目镜中寻找荧光信号,调节焦距和聚焦,以获得最佳的视觉质量。
6. 调节荧光滤光片,根据染料的激发光和发射光波长选择相应的滤光片。
四、注意事项1. 使用前请确保已仔细阅读用户手册,并按照操作指南使用设备。
2. 避免荧光照明强度过高,以免损坏样本或减少荧光信号的可见性。
3. 定期清洁荧光显微镜的光学元件,以保持良好的成像质量。
4. 在操作过程中避免触摸镜片和荧光滤光片,以免污染或划伤。
5. 使用后,请关闭荧光显微镜并断开电源,以节约能源并延长设备寿命。
五、故障排除1. 如果荧光信号非常弱,请检查荧光滤光片是否正确安装并且与染料匹配。
2. 如果图像模糊或不清晰,请确保样本调焦正确,并检查物镜是否清洁。
3. 如果荧光显微镜无法打开或没有电源供应,请检查电源线是否连接稳定。
4. 如果设备出现其它问题,请参考用户手册或联系厂商技术支持。
六、安全警示1. 使用荧光显微镜时,请注意避免直接观察强烈的荧光光源,以免对眼睛造成伤害。
2. 在操作荧光显微镜时,请保持仪器的稳定,并避免碰撞或摔落。
七、维护保养1. 定期进行荧光显微镜的清洁和维护,清除灰尘和污垢。
荧光显微镜操作流程
荧光显微镜操作流程
1、打开主机电源(如果需要看荧光,打开荧光电源);
2、选择10X物镜,反射转盘打到1位(或5位),通过聚焦旋
钮聚焦样品,根据需要可换到其它倍数物镜;
3、如需看相差,把相差板(载物台下面)从右侧推入,使PH2
相差环进入光路,20X和40X为相差物镜;
4、100X为油镜,用时需滴镜油到样品上,不用太多,用后及时
擦净(擦镜纸加无水酒精);
5、观察荧光时,用盖板将透射光挡住(最下面),然后将荧光转
盘转到2、3或4(2为紫外激发,3为蓝激发,4为绿激发)。
若样品淬灭,不看时可用挡板将激发光挡住(上面黑色挡板推进去);
6、为延长汞灯寿命,汞灯使用至少30分钟再关掉电源,关掉电
源至少30分钟之后再打开,频繁开关会缩短汞灯使用寿命;
7、如需拍照,打开电脑桌面上的AioVison Rel.4.6,选择Cameras
→AxioCamMR3,点击工具栏上Live实时观察窗口,然后点Exposure测量最佳曝光时间,若满意即可点击下面Snap拍照,若不满意,可通过左侧调节曝光时间,图象可保存在想要的目录里(可选择不同的格式);
8、用完之后,将显微镜电压调至最低,再将电源关掉,盖上防
尘罩(若汞灯长时间使用,待冷却后再将汞灯灯罩盖上)。
水产养殖实验教学中心
二○一五年六月。
荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程
荧光显微镜使用办法和荧光显微镜操纵规程之老阳三宣布时间:2011-06-15荧光显微镜使用办法和荧光显微镜操纵规程荧光显微镜是光学显微镜中的一种.关头字:荧光显微镜使用办法荧光显微镜操纵规程荧光显微镜使用荧光显微镜使用办法和荧光显微镜操纵规程1. 用窗帘遮蔽光线,封闭房间内的灯光,除去显微镜的防尘罩,确保显微镜灯室通风良好、无遮盖.装上汞灯灯箱,并转动灯箱卡圈上的拨杆,将灯箱与镜臂连接.2. 将汞灯灯箱的电源插头拔出荧光电源箱后的插座,再将荧光电源箱的插头拔出220V外接电源.3. 打开电源开关,电压表显示出电源电压,如电源电压动摇不大于额外电压值的±5%,即可按下启动开关点燃汞灯,如因天气太冷或电压不稳定等原因,一次启动未点燃汞灯,可以多揿动几次.待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到最大发光效率,即可开始任务.4. 灯泡的调中:(1)任选一块标本放在载物台上.(2)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路,转动滤色片组转换手轮,将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发滤色片组转入光路,并将10×荧光物镜转入光路.(3)调节粗微调手轮,将标本像调焦清晰.(4)前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆,使视场光栏成像清晰,转动视场光栏拨杆将视场光栏收小,调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中,然后再将视场光栏开至最大.(5)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路,前后调节灯箱上的聚光镜拨杆,使汞灯的弧光在视场内成像清晰.(6)调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使汞灯的弧光居中.(7)调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使光源的反射像与汞灯的弧光分隔.(8)转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路,此时视场照明均匀.5. 荧光不雅察:(1)将荧光染色标本放到载物台上.(2)将10×平场物镜或40×荧光物镜转入光路,调节载物台纵横移动手轮,将标本移入光路.(3)转动滤光片转换拨轮,将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路.激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上.滤光片选择正确与否,是荧光显微镜能否得到正确应用的关头.选用滤光片时,必须遵守斯托克斯定律:激发滤光片的透射波长<双色束别离器的透射波长<阻断滤光片的透射波长.由于激发滤光片、双色束别离器和阻断滤光片,出厂时已按其用途和自己的光学特性进行了严格的组合匹配,在不雅察和摄影时,只需选择滤光片组即可.(4)调节粗调手轮,当看清荧光图像轮廓后,再用微调手轮调焦,直至看到清晰的荧光图像.(5)当需要得到较强的荧光图像时,可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路,可获得较明亮的荧光图像.(6)当需要使用40×或100×荧光物镜不雅察时,应在标本和物镜间加上甘油,油中不克不及有影响不雅察的小泡或杂质.使用时可使甘油慢慢浸润一会儿,然后轻轻左右来回转动物镜转换器以排除气泡.6. 荧光显微摄影——显微镜摄像头由于荧光图像一般均较明场不雅察暗得多,所以进行荧光显微摄影需要较长的曝光时间,在曝光时应注意避免仪器震动.荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分需要,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果.办法与普通显微摄影技术基底细同.因紫外光对荧光猝灭作用大。
荧光显微镜操作规程
荧光显微镜操作规程《荧光显微镜操作规程》一、前言荧光显微镜是一种非常重要的实验设备,广泛应用于生物学、医学、药理学等领域。
正确的操作规程对于保护设备、获得准确的实验结果至关重要。
二、操作流程1. 开机准备a. 打开荧光显微镜主机电源,并等待显微镜系统启动。
b. 打开冷光源电源,并调节冷光源亮度至合适的水平。
2. 样本装载a. 使用无尘布擦拭玻璃载玻片,避免留下灰尘或污渍。
b. 将待观察的样本制备好并滴在载玻片上,然后将载玻片放置在载玻片架上。
c. 用载玻片夹固定好载玻片架,并将载玻片架放入样本台。
3. 调焦与光学设置a. 使用目镜观察载玻片上的样本,并调节物镜至合适的倍数。
b. 根据实验要求,选择合适的荧光染色方法,并设定荧光滤光片组。
c. 调节焦距直至样本清晰可见。
4. 图像采集a. 启动相机软件,并调整图像采集参数,如曝光时间、增益等。
b. 点击图像采集按钮,获得所需图像。
5. 关机步骤a. 先关闭冷光源电源,再关闭荧光显微镜主机电源。
b. 将载玻片架及夹子取下,并清理样本台及载玻片架。
c. 将荧光滤光片组调整至初始状态,并关闭目镜保护罩。
三、注意事项1. 操作前务必确认设备无损坏,并严格按照操作规程进行操作。
2. 使用荧光染色药剂时,需注意其对人体的有害性,并做好防护措施。
3. 在操作过程中,要避免碰撞或摔落设备,保护光学部件。
4. 操作完毕后,需要及时清洁设备并保存好各种配件。
以上就是荧光显微镜操作规程的主要内容,希望能对使用者的实验工作有所帮助。
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奥林巴斯倒置荧光显微镜IX71操作规程
一、普通光源观察
1.接通电源线
打开电源开关,同时按下显微镜前面的按纽
2.用光路选择杆选择"观察"光路(有眼睛图形),选择所需放大倍数的物镜,并将选择环置于相应的位置(1-PHL:4X;2-PHC:10X和20X;3-PH2:40X,4为明场;荧光选择钮置于BF)
使用光调节旋钮和滤光片,调节至适当亮度
3.将标本放在载物台上,转动粗微调调节焦距使视野内图象清晰
4.调节目镜使观察舒适
5.如需拍照,则打开电脑
进入软件,将光路杆调至"旁路光口"(有相机图形),即可拍摄并保存
6.使用完毕后,关闭主开关(至O),取下电源插头等到灯室完全冷却后把防尘罩盖上
二、荧光观察
1.如使用荧光,要接通荧光光源的电源
2.选择所需波段的荧光,并用荧光调节杆调节亮度
3.不观察时,要及时使用光栅切断荧光(●-关,○-开),避免样品荧光衰减
4.如荧光较暗,将周围光亮度减至最低(关灯,拉上窗帘)
5.拍摄步骤同前
注意事项:
1、保持显微镜清洁
及时清理污渍如光学元件上附有灰尘,则应用吹风球吹去
对于有脏污的地方,用7:3的乙醚无水酒精清洁液粘在镜头纸上
从透镜内到外进行圆圈式轻拭,严禁用手指或其它物体直接接触镜头
2、打开荧光光源后,至少要15分钟后才能关闭,关闭后至少要30分钟才能再次开启,不需要使用荧光时禁止打开其电源开关
3、不了解的调节装置要阅读使用说明书或咨询相关老师,弄懂后方可使用。