毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定

第26卷第9期2006年9月环　境　科　学　学　报　Acta Scientiae Circu m stantiaeVol .26,No .9Sep.,2006基金项目:国家自然科学基金项目(No .20277001);安徽省优秀青年基金项目(No .04041067)Supported by the Nati onal Natural Science Foundati on of China (No .20771001)and Excellent Youth Foundati on of Anhui Pr ovince (No .04041067)作者简介:吴祥为(1978—),男,讲师(硕士),E 2mail:wx wahau@ahau .edu .cn ;3通讯作者(责任作者),E 2mail:ri m aohua@ahau .edu .cnB i ography:WU Xiang wei (1978—),male,lecturer,E 2mail:wx wahau@ahau .edu .cn;3Correspond i n g author ,E 2mail:ri m aohua@ahau .edu .cn吴祥为,花日茂,操海群,等.2006.毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定[J ].环境科学学报,26(9):1433-1439W u X W ,Hua R M ,Cao H Q,et al .2006.Is olati on,identificati on and degradati on 2efficiency measure ment of chl or pyrifos 2degradaing bacteria [J ].Acta Scientiae Circum stantiae,26(9):1433-1439毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定吴祥为1,花日茂1,3,操海群1,汤　锋1,李学德1,岳永德21.安徽农业大学资源与环境学院,安徽省“农产品安全”重点实验室,合肥2300362.国际竹藤网络中心,北京100102收稿日期:2005208201 修回日期:2006204214 录用日期:2006204229摘要:取毒死蜱废水处理系统出口处的污泥进行驯化培养,分离出能降解毒死蜱的3株高效降解菌株B 、D 1和D 3,对降解效果最好的D 3菌株经中科院微生物研究所鉴定为玫瑰红红球菌(R hodococcus rhodochrous );3株菌株的生长情况及对毒死蜱的降解动力学研究表明,B 菌株在第3天繁殖增量达到最大,D 1、D 3菌株在第4天繁殖增量达到最大,B 、D 1和D 3菌株的最适宜生长温度都是在30℃;采用10mg ・L -1毒死蜱作为唯一碳源时,B 、D 1和D 3菌株对毒死蜱的降解速率分别为0.0543、0.0479和0.0620h -1;对于浓度为10mg ・L -1的毒死蜱,D 3菌投入的初始菌量OD 223为0.4是最适宜的;D 3菌对不同初始浓度的毒死蜱降解表明,初始浓度增大,降解速率降低,半衰期延长.关键词:毒死蜱;分离鉴定;降解;高效液相色谱文章编号:025322468(2006)0921433207 中图分类号:X172 文献标识码:AIsol a ti on,i den ti f i ca ti on and degrada ti on 2eff i c i ency m ea surem en t of chlorpyr i fos 2degrada i n g bacter i aWU Xiang wei 1,HUA R i m ao1,3,CAO Haiqun 1,T ANG Feng 1,L I Xuede 1,Y UE Yongde21.College of Res ources and Envir onment Anhui Agricultural University,The Key Laborat ory of Anhui Agri 2f ood Safety,Hefei 2300362.I nternati onal Centre for Ba mboo &Rattan,Beijing 100102Rece i ved 1August 2005; rece i ved in revised f or m 14Ap ril 2006; accepted 29Ap ril 2006Abstract:Three bacterial strains that had a capability t o utilize chl or pyrif os as the s ole carbon and energy s ourceswere is olated fr om the sludge .Based on the mor phol ogy and physi o -bi ochem ical p r operties,the strain D 3which had the best degradati on capability t o chl or pyrif os was identified as Rhodococcusrhodochrous by I nstitute of M icr obi ol ogy Chinese Academy of Sciences .The bi omass got t o the maxi m um when strain B was cultivated f or 3d,howeverstrains D 3and D 1need 4d .The op ti m al cultivating te mperature of all the strains was 30℃.I n aqueous s oluti on of chl or pyrif os at the concentrati on of 10mg ・L -1,the degradati on rate constants of strains B,D 1and D 3utilizing chl or pyrif os as the s ole carbon s ource were 0.0479,010543and 010620h -1,res pectively .It was op ti m al that the OD 223of strain D 3s oluti on attained 0.4for the degradati on of chl or pyrifos at the concentrati on of 10mg ・L -1.The results als o showed that the degradati on efficiency of the strain D 3t o chl or pyrif os decreased with initial concentrati on of chl or pyrif os increasing .Keywords:chl or pyrif os;is olati on and identificati on;degradati on;HP LC1　引言(I ntr oducti on )化学农药主要是人工合成的生物外源化学物质,许多类型通常不易被生物降解,故称之为顽固性化合物(Recalcitrants )(王保军等,1998).大量研究证实微生物对土壤和水环境中的农药降解和污染消除起着重要作用,且已分离到一些能降解或转化农药的微生物类群.毒死蜱(chl or pyrifos ),化学名称:O,O —二乙基—O —(3,5,62三氯—22吡啶基)硫逐磷酸酯,是美国陶氏化学公司(Dow Che m ical Co .)于1965年开发并研制出来的一种广谱性有机磷酸酯类杀虫剂,被广泛用于农业和城市卫生害虫的防治(刘乾开,1993;吴慧明等,2003).目前,国内外关于毒死蜱的环 境 科 学 学 报26卷研究报道主要集中在毒死蜱用于农业害虫防治时在环境中的行为规律.Racke 等(1994)研究认为毒死蜱在土壤中降解的主要产物是3,5,62三氯—22吡啶醇(T CP ),但T CP 的进一步降解要缓慢得多;L iu 等(2001)研究了Chesapeake Bay 地区4条支流自然水中毒死蜱的水解,水的盐度在0～17‰之间时,水解半衰期从24d 到126d 不等,毒死蜱的水解受pH 、水中的盐度、Cu 2+等成分的影响;光解研究发现土壤质地和土壤湿度对毒死蜱在土壤表面的光解有重要的影响(岳永德等,2002).目前已有一些关于毒死蜱降解菌的报道(王金花等,2005;刘新等,2003).本研究利用农药厂生产废水处理系统出口处的污泥进行驯化培养,拟从中分离出高效降解菌并研究其对毒死蜱在水中的生物降解特性,旨在寻找有价值的毒死蜱降解菌,为农药的环境生物治理提供技术支撑.2　实验部分(Experi m ents )2.1　污泥来源污泥取自江苏宝灵化工股份有限公司毒死蜱的生产废水处理系统出口处.2.2　培养基的制备基础培养基:0.4g MgS O 4・7H 2O,0.002g FeS O 4・7H 2O,0.2g K 2HP O 4,0.2g (NH 4)2S O 4,0.08g CaS O 4,1L 蒸馏水,pH 7.0～7.2.富集培养基:3g 牛肉膏,5g 蛋白胨,5g 氯化钠,1L 蒸馏水,pH 7.0～7.2.牛肉膏蛋白胨培养基:3g 牛肉膏,5g 蛋白胨,5g 氯化钠,15g 琼脂,1L 蒸馏水,pH 7.0～7.2.上述3种培养基均在121℃下高压蒸汽灭菌锅中灭菌30m in .2.3　降解菌的驯化培养参考瓶培养法富集技术(venkales warlu K,1997;[日]土壤微生物研究会,1983).取污泥1g,加入40mL 含毒死蜱浓度为25mg ・L -1基础培养基,置于30℃、120r ・m in -1的摇床中培养1周;以后每周取出上周的培养混合液4mL 加到40mL 基础培养基中,毒死蜱浓度每周增加25mg ・L -1,且每周添加的新污泥比上周减少0.25g,至毒死蜱添加浓度达到125mg ・L-1,新污泥减少到0g 为止;再经1周后,取出4mL 培养混合液加到40mL 基础培养基中,毒死蜱添加浓度为150mg ・L-1,不再添加污泥,以后每周取出上周的培养混合液4mL 加到40mL基础培养基中,毒死蜱浓度每次增加25mg ・L -1,至毒死蜱的添加浓度达200mg ・L -1,并保持200mg ・L -1持续2周.至此驯化结束.2.4　降解菌的分离、纯化(陈绍铭等,1985;沈萍等,1999)　采用十倍稀释平板法,在含有5mg ・L -1毒死蜱的牛肉膏蛋白胨培养基上进行划线分离,然后根据不同外观形态挑取单菌落反复划线分离,并根据各菌落的外观形态特征和在油镜下观察细胞形态特征合并相同的菌落.2.5　高效降解菌的确定将上述分离纯化后的菌株分别接种于牛肉膏蛋白胨斜面培养基,培养24h 后,加入5mL 的无菌水制成菌悬液,用灭菌的移液枪吸取0.1mL 菌悬液加入到盛有5mL 浓度为25mg ・L -1毒死蜱基础培养基的试管;对照组中加同样量的无菌水,于30℃恒温摇床培养箱(120r ・m in -1,30m in,3次・d -1)培养24h .提取分析:在培养液试管中加入5mL 乙腈,提取后过0.45μm 的细菌过滤器,HP LC 检测毒死蜱的剩余量.比较毒死蜱的残存量以确定高效降解菌株.2.6　高效降解菌的鉴定形态特征和生理生化特征由中科院微生物研究所鉴定.2.7　高效降解菌的温度生长曲线菌悬液制备:将已活化筛选出来的菌株接种于富集培养基中,于30℃恒温摇床培养箱(120r ・m in-1,30m in,3次・d-1)培养24h,5000r ・m in-1离心15m in;弃取上清液,收集菌体,将菌体用磷酸缓冲液(pH =7.2,0.2mol ・L -1磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液)洗涤2次,然后再用该缓冲液制成菌悬母液.将菌悬液接种于含毒死蜱浓度为10mg ・L -1的基础培养基,接种的初始菌量OD =0.05,分别在20、25、30、35、40℃的不同恒温摇床培养箱中(120r ・m in-1,30m in,3次・d-1)培养,3d 后测定吸光度值.2.8　高效降解菌的时间生长曲线菌悬液制备同1.7节.将菌悬液接种于含毒死蜱浓度为10mg ・L -1的基础培养基,接种的初始菌量OD =0.05,于30℃恒温摇床培养箱(120r ・m in-1,30m in,3次・d-1)培养,分别在1、2、3、4、5、43419期吴祥为等:毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定6d 取样,测定其吸光度值.2.9　高效降解菌的降解动力学2.9.1　不同菌株的降解动力学　吸取0.5mL 浓度为100mg ・L -1毒死蜱的丙酮母液到试管中,用氮吹仪吹干,加入不同菌株菌悬母液,再用基础培养液加到5mL,使整个反应溶液体系的OD 值为0.4,毒死蜱的浓度为10mg ・L -1,同时设置不加菌的对照组.然后于30℃恒温摇床培养箱(120r ・m in -1,30m in,3次・d -1)培养,于不同时间点取样分析.2.9.2　初始菌量对毒死蜱的降解作用　同2.9.1方法,使毒死蜱浓度为10mg ・L -1的反应溶液体系初始菌量OD 值分别为0.4、0.6、0.8,同时设置不加菌对照组.然后于2.9.1节条件下培养与分析.2.9.3　D 3菌株对不同浓度的毒死蜱的降解作用　同2.9.1方法,分别使毒死蜱的浓度分别为5、10、20mg ・L -1反应溶液体系OD 值为分别为0.2,同时设置不加菌作为对照.然后于2.9.1节条件下培养与分析.2.10　毒死蜱测定条件和数据处理分析高效液相色谱分析条件:Agilent11002HP LCHypersil ODS 柱(4.6mm ×250mm ,5μm );可变波长紫外检测器,检测波长:230nm;流动相:乙腈∶水的体积比为90∶10;流速:1.0mL ・m in -1;柱温:室温;手动进样,进样量20μL.试验结果运用SPSS11.0软件进行统计分析,用SSR 测验法进行多重比较.3　结果(Results )3.1　高效降解菌的确定驯化结束后,通过稀释平板法,分离得到19株菌株,标记为A 、A 1、A 2、A 3、B 、B 1、B 2、B 3、C 、C 1、C 2、C 3、D 、D 1、D 2、D 3、E 、E 1、E 2.在相同的条件下降解毒死蜱,24h 后提取上述19株菌株降解毒死蜱的溶液,通过高效液相色谱分析,发现有3株菌株降解效果较好,标记为B 、D 1、D 3,降解效果如表1和图1.由图1和表1可知,降解效果最好的是D 3菌株,反应24h 后,25mg ・L -1毒死蜱的去除率为81.8%,其次是B 菌株和D 1菌株.从图谱上可以看出4.2m in 处有毒死蜱降解产物峰.图1　不同菌株对毒死蜱的降解高效液相色谱图Fig .1　HP LC chr omat ogra m s of chl or pyrif os on degradati on of different is olated strains5341环 境 科 学 学 报26卷表1　不同菌株对毒死蜱的降解效果Table1　Degradati on rati o of different is olated strains on degradati on of chl or pyrifos菌株降解率1)菌株降解率1)菌株降解率1)A 2.67ij B324.07f D241.08dA10.28j C36.20e D381.80a A2 3.24ij C10.59j D 5.49iA39.40h C2 1.10j E19.63ghB77.48b C313.2g E20.30jB120.62f D 5.49iB212.26gh D170.46c 注:1)数据之间的显著性差异用Duncan检验,数据上标的字母不同表示处理间差异显著,字母相同表示处理间差异不显著,p< 0105,SE=1.209.(The difference a mong treats tested by One-way AVONA,numbers that on the sa me r ow foll owed by different letters were significantly different at p<0.05).3.2　高效降解菌的鉴定D3菌株在显微镜下观察呈杆状,不运动,侧面有分支菌丝;在完全培养基上,菌落粘质、圆形、全缘、表面湿润、隆起、紫红色、不透明;革兰氏呈阳性,接触酶呈阳性、氧化酶呈阴性,不能利用大多数碳水化合物,脂酶呈阳性.D3菌株经中科院微生物所鉴定为玫瑰红红球菌(R hodococcus rhodochrous),其主要鉴定特征见表2所示.表2　菌株D3的生理生化特征Table2　Physi o2bi oche m ical characteristics of is olated strain D3试验项目Tests 结果Results试验项目Tests结果Results试验项目Tests结果Results试验项目Tests结果Results革兰氏染色阳性接触酶+氧化酶-细胞形状杆状对照-a2D2乳糖-塔格糖-L丙氨酰胺-a2环糊精-Lactul ose-D2海藻糖+w D2丙氨酸-b2环糊精-麦芽糖-松二糖-L2丙氨酸-糊精+麦芽三糖-木糖醇+L2丙氨酰苷氨酸-糖原-D2甘露醇+w D2木糖+w L2天冬酰胺-菊粉-D2甘露糖+乙酸+L2谷氨酸-甘露聚糖-松三糖+w a2羟基丁酸+甘胺酰谷氨酸-T ween40+D2蜜二糖-b2羟基丁酸+焦谷氨酸-T ween80+a2甲基半乳糖苷-g2羟基丁酸-L2丝氨酸-N2乙酰葡萄糖胺-b2甲基半乳糖苷-扁桃酸-腐氨+w N2乙酰甘露糖胺-32甲基—D2葡萄糖-a2氧代戊二酸+2,32丁二醇-苦杏仁苷-a2甲基葡糖苷-a2酮戊酸+甘油-L2阿拉伯糖-b2甲基葡糖苷-乳酰胺+腺苷-D2阿糖醇-a2甲基甘露糖苷-乳酸甲酯+22脱氧腺苷-熊果苷-Palatinose+L2乳酸+肌苷-D2纤维二糖-D2阿洛酮糖+D2苹果酸+w胸苷-D2果糖+D2棉子糖-L2苹果酸+尿苷-岩藻糖-L2鼠李糖+w丙酮酸甲酯+腺苷酸-D2半乳糖-D2核糖+丁二酸一甲酯+胸苷酸-半乳糖醛酸-水杨苷-丙酸-尿苷酸-龙胆二糖-景天庚酮聚糖+w丙酮酸+D2果糖262磷酸+w D2葡萄酸-D2山梨醇-琥珀酰胺酸+w D2葡糖-1-磷酸+w a2D2葡萄糖+水酥糖-丁二酸-D2葡糖262磷酸-m2肌醇-蔗糖-N2乙酰谷胺-D,L2甘油磷酸- 注:+表示90%～100%菌株反应阳性;-表示90%～100%菌株反应阴性;+w表示弱反应.Note:The sign"+","-","+w"mean90%～100%strains negative reacti on,90%～100%strains positive reacti on and weak reacti on, res pectively.63419期吴祥为等:毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定3.3　不同培养温度和不同培养时间下B 、D 1、D 3菌株生长情况不同培养温度和时间下3株菌株的生长变化情况如图2所示.由图2可知,3株菌株都是在30℃下吸光度值达到最大,即30℃是其生长最适宜的温度;B 菌株在培养3d 时繁殖增量达到最大,D 1菌株和D 3菌株都是在培养4d 时繁殖增量达到最大,超过最大量以后都进入衰退期.图2　不同培养温度和时间下B 、D 1、D 3菌株生长曲线(a .温度,b .时间)Fig .2　The gr owth curves of is olated strains at different cultivatingte mperature and ti m e (a .te mperature,b .ti m e )3.4　降解菌的降解动力学3.4.1　不同菌株的降解动力学　在相同条件下,通过B 、D 1、D 3菌株对于10mg ・L -1毒死蜱的降解动力学研究考察了3个菌株对毒死蜱的降解能力,结果见表3.B 、D 1、D 3菌株对毒死蜱的生物降解半衰期分别为12.76、14.47、11.17h .3株菌株降解毒死蜱能力在α=0.05的显著水平上存在明显差异,降解效能大小分别为:D 3菌株>B 菌株>D 1菌株.3.4.2　初始菌量对毒死蜱降解动力学的影响　在毒死蜱浓度为10mg ・L -1,初始菌量OD 223分别为014、0.6、0.8的条件下,D 3菌对毒死蜱的降解率随时间延长而增加,降解的动力学参数见表4.降解规律符合一级动力学方程,R 2均在0.95以上;菌量OD 223分别为0.4、0.6、0.8时,速率常数分别为010613、0.0655、0.0730h-1,半衰期分别为11.31、10.58、9.49h,经差异显著性分析,在菌量OD 223为0.4和0.6的情况下,半衰期差异不显著;菌量OD 223为0.8的半衰期与菌量OD 223为0.4、0.6的差异显著.从节约菌量角度来考虑投入初始菌量和降解效能的关系,10mg ・L -1的毒死蜱投入的初始菌量OD 223为0.4是适宜的.表3　不同菌株对毒死蜱降解动力学的影响Table 3　Effect of different is olated strains on degradati on kinetics ofchl or pyrif os 菌株Strains一级动力学方程First order kinetic equati on C t =C 0e -ktR 2Decisive coefficient k /h -1Rate constant 半衰期1)/hHalf 2lifeB C t =9.0761e -0.0543t 0.98500.054312.76b D 1C t =9.0138e -0.04793t 0.97200.047914.47c D 3C t =9.0441e -0.0620t0.98760.062011.17a 注:1)数据之间的显著性差异用Duncan 检验,同一列的数据上标的字母不同表示处理间差异显著,p <0.05,SE =0.187.(The difference a mong treatstested by One -way AVONA,nu mbers that on the same r ow f oll owed by different letters were significantly different at p <0.05).表4　D 3菌株不同菌量对毒死蜱的降解动力学的影响Table 4　Effect of different bi omass on bi odegradati on kinetics of chl or pyrifos by strain D 3菌量B i omass 一级动力学方程First order kinetic equati onC t =C 0e -k tR 2Decisive coefficientk /h -1Constant rate 半衰期1)/h Half 2lifeOD 223=0.4C t =8.3801e -0.0613t0.95140.061311.31b OD 223=0.6C t =8.3446e -0.0655t0.95250.065510.58b OD 223=0.8C t =8.5294e -0.0730t0.97650.07309.49a 注:1)数据之间的显著性差异用Duncan 检验,同一列的数据上标的字母不同表示处理间差异显著,字母相同表示处理间差异不显著,p <0.05,SE =0.200.(The difference a mong treats tested by One 2way AVONA,numbers that on the sa me r ow foll owed by different letters were significantly different at p <0.05).7341环 境 科 学 学 报26卷3.4.3　不同初始浓度对毒死蜱降解动力学的影响　在培养温度为30℃,初始菌量OD223=0.2时,不同初始浓度毒死蜱的降解动力学参数和降解动态见表5和图3.由表5可知,初始浓度为5、10、20 mg・L-1毒死蜱的降解速率常数分别为0.0565、010421、0.0378h-1,其半衰期逐渐增大,分别为12127、16.46、18.33h.半衰期经差异显著性分析,在α=0.05显著水平上,D3菌对不同初始浓度毒死蜱的降解能力存在明显差异,也即是从低浓度到高浓度降解效能逐渐下降.表5　D3菌株对不同浓度毒死蜱的降解动力学的影响Table5　Effect of different concentrati on chl or pyrif os on bi odegradati on kinetics by strain D3初始浓度/I nitial concentrati on(mg・L-1)一级动力学方程First order kinetic equati onC t=C0e-k tR2Decisive coefficientk/h-1Constant rate半衰期1)/hHalf2life 5C t=3.3377e-0.0565t0.84460.056512.27a10C t=8.3293e-0.0421t0.88610.042116.46b20C t=20.108e-0.0378t0.94210.037818.33c 注:1)数据之间的显著性差异用Duncan检验,同一列的数据上标的字母不同表示处理间差异显著,p<0.05,SE=0.268.(The difference among treats tested by One-way AVONA,numbers that on the sa me r ow foll owed by different letters were significantly different at p<0.05).图3　D3菌对不同浓度毒死蜱降解动态Fig.3　B i odegradati on kinetics of different concentrati onchl or pyrifos by strain D34　讨论(D iscussi on)关于毒死蜱降解菌的降解能力已有相关报道(王金花等,2005;刘新等,2003),其降解能力在快速降解毒死蜱上与本文筛选的菌株有一定的差距,如报道的真菌W Z2Ⅰ、W2Ⅱ、W Z2Ⅲ降解初始浓度为10mg・L-1的毒死蜱,5d后降解率分别为80%、80%、50%左右,而本文筛选的B、D1、D3菌降解同样浓度50%的毒死蜱只要12.76、14.47、11.17h.通过驯化培养,本文分离出3株高效降解菌,对其中降解效果最好的高效降解菌经中科院微生物所鉴定表明,D3菌株为玫瑰红红球菌(R hodococcusrhodochrous).该菌株在基础培养基中对毒死蜱有较强的降解能力,对于加快水中毒死蜱的去除具有重要的意义,但其能否应用于自然水体中加速毒死蜱的降解等问题仍需试验探讨.在生物降解过程中,培养条件对微生物降解速率有很大影响,只有在适宜条件下,微生物才能充分发挥其降解能力.实验研究得出投入菌量OD223为0.4时对于10mg・L-1的毒死蜱是比较适宜的.农药的微生物降解实质是酶促反应,这些酶是微生物固有的,或是由于变异产生的(A shvini et al.,2000).酶代谢的途径包括:(1)广谱性酶的偶然代谢,如水解酶、氧化酶等;(2)基质结构与农药相似的酶进行的共代谢;(3)利用农药作为能源适应酶进行的降解代谢.D3菌株能够降解毒死蜱,可能是因为其体内存在可以分解毒死蜱的酶,有研究表明降解酶往往比微生物本身更具有好的降解效果(Str ong eta l.,2000);因此,D3菌生物量的改变,可能导致降解毒死蜱酶的改变,从而影响毒死蜱的降解效能.不同初始浓度毒死蜱降解结果说明了微生物对一定浓度的毒死蜱保持较强的降解作用,这一结果与前人报道相似(王金花等,2005;刘新等2003).随着毒死蜱浓度的增加,D3菌株对毒死蜱的降解效率下降,即基质浓度满足降解菌的要求后,再增加基质对降解速率没有贡献,对于一定量的菌来说,只能降解一定量的农药.5　结论(Conclusi ons)1)通过污泥驯化培养,分离出3株能够降解毒死蜱的菌株,降解效果最好D3菌株经鉴定为玫瑰红红球菌(R hodococcus rhodochrous).2)3株菌株对毒死蜱在水中的微生物降解遵从一级动力学规律,研究得出玫瑰红红球菌对浓度为10mg・L-1毒死蜱生物降解的最佳初始菌量是OD223为0.4;OD223为0.2的初始菌量只能快速降解5 83419期吴祥为等:毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定mg・L-1的毒死蜱,过多毒死蜱不利于快速降解.责任作者简介:花日茂,男,安徽农业大学资源与环境学院副院长,教授,博导.现主要从事环境污染修复和农药残留研究,主持完成和在研的项目有国家自然科学基金、国家“十五”科技攻关重大专项、国家“863”、安徽省“十一五”科技攻关和安徽省优秀青年基金等,获多项成果奖和专利,主编专著2部,发表论文100余篇.E2mail:ri m aohua@References:A shvini C,A sit K C,Rakesh K J.2000.Plas m id2encoded Degradati onof p2N itr ophenol and42N itr ocatechol by A rthr obacter Pr ot ophor m iae [J].B i ochem.B i ophys Res Commun,270:733—740Chen S M,Zheng F S.1985.Experi m entati on of water m icr oorganis m s (1st volume)[M].Beijing:Ocean Press,43—46(in Chinese) [Japan]Edaphon Se m inar Edited.1983.Experi m entati on of Edaphon 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