不同化学消毒剂杀伤难辨梭状芽胞杆菌孢子活性的研究

·论　著·

不同化学消毒剂杀伤难辨梭状芽胞杆菌孢子活性的研究

缪珩华

（上海市浦东新区南汇中心医院供应室，上海２０１３００

）摘要：目的　探讨当前常用化学消毒剂杀伤难辨梭状芽胞杆菌孢子活性的效果，为医院消毒供应中心选取化学消毒剂杀灭难辨梭状芽胞杆菌孢子提供参考。方法　制备难辨梭状芽胞杆菌孢子待测样本，使用不同化学消毒剂进行消毒，分为清洁环境（０．３％白蛋白）和污浊环境（３％白蛋白），消毒时间为１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ

，以孢子基数／消毒后存活数＞１０

３

为标准，评价消毒剂是否有效。结果　仅有８种化学消毒剂能在清洁环境和污浊环境中消毒１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ情况下，有效杀灭难辨梭状杆菌孢子，２１种化学消毒剂效果次之，３种化学消毒剂无效。结论　选取有效成分为二氧化氯的消毒剂、保持消毒供应中心整洁、延长消毒时间是杀灭难辨梭状芽胞杆菌孢子的关键。关键词：难辨梭状芽胞杆菌；消毒供应中心；化学消毒剂；孢子活性

中图分类号：Ｒ１８７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００５－４５２９（２０１３）０２－０４０７－

０２Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ　ｏｎ　ｋｉｌｌｉｎｇ

ａｃｔｉｖｉｔｙ　

ｏｆ　Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ　ｓｐｏｒｅｓＭＩＡＯ　Ｈｅｎｇ

－ｈｕａ（Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｎａｎｈｕｉ　Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｐｕｄｏｎｇ　Ｎｅｗ　Ａｒｅａ，Ｓｈａｎｇ

ｈａｉ　２０１３００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｄｉｓｃｕｓｓ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｕｒｒｅｎｔ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ　ｏｎ　ｋｉｌｌｉｎｇ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　

ｏｆ　Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｄｉｆｆｉｃｉｌｅ　ｓｐｏｒｅｓ　ｓｏ　ａｓ　ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ　ｔｏ　ｋｉｌｌ　ｔｈｅ　Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆｆｉｃｉｌｅｓｐｏｒｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｅｎｔｒａｌ　ｓｔｅｒｉｌｅ　ｓｕｐｐｌｙ　ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ　ｓｐｏｒｅ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄａｎｄ　ｗｅｒｅ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ，ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｃｌｅａｎ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ（０．３％ａｌｂｕｍｉｎ）ａｎｄ　ｄｉｒｔｙ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ（３％ａｌｂｕｍｉｎ）．Ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄ　ｆｏｒ　１ｍｉｎｕｔｅ　ａｎｄ　６０ｍｉｎｕｔｅｓ．Ｔｈｅｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ　ｗａｓ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｉｎ　ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｃａｒｄｉｎａｌ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｐｏｒｅｓ／ｓｕｒｖｉｖａｌｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｐｏｒｅｓ　ａｓ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｏｎｌｙ　８ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｐａｂｌｅ　ｏｆ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｋｉｌｌｉｎｇ　Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ　ｓｐｏｒｅｓ　ｕｎｄｅｒ　ｂｏｔｈ　ｃｌｅａｎ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｄｉｒｔｙ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ１ｍｉｎｕｔｅ　ｏｒ　６０ｍｉｎｕｔｅｓ，ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　２１ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ　ｔｈａｔ　ｗｅｒｅ　ｌｅｓｓ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ａｎｄ　３ｋｉｎｄｓ　ｏｆｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔ　ｔｈａｔ　ｗｅｒｅ　ｉｎｖａｌｉｄ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＩｔ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｋｅｙ　ｏｆ　ｋｉｌｌｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ　ｓｐｏｒｅｓ　ｔｏｓｅｌｅｃｔ　ｔｈｅ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃｈｌｏｒｉｎｅ　ｄｉｏｘｉｄｅ　ａｓ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，ｔｏ　ｋｅｅｐ　ｔｈｅ　ＣＳＳＤ　ｃｌｅａｎ　ａｎｄ　ｔｉｄｙ，ａｎｄｔｏ　ｅｘｔｅｎｄ　ｔｈｅ　ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ　

ｔｉｍｅ．Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ　ｓｐｏｒｅｓ；Ｃｅｎｔｒａｌ　ｓｔｅｒｉｌｅ　ｓｕｐｐｌｙ　ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ；Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔ；Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆｓｐ

ｏｒｅｓ收稿日期：２０１２－０９－２５；　修回日期：２０１２－１１－

３０ 难辨梭状芽胞杆菌属厌氧性细菌，

一般寄生在人的肠道内。过度服用某些抗菌药物，

艰难梭菌的菌群生长速度加快，影响肠道中其他细菌，引发炎症。难辨梭状芽胞杆菌是导致患者腹泻的重要病原菌，主要通过手、医疗器材和染菌杂物等传播。难辨梭状芽胞杆菌高度厌氧，暴露在空气中１５ｍｉｎ即死亡。加热、干燥以及常用消毒剂也能有效杀灭难辨梭状芽胞杆菌。然而其孢子则具有很强的物理、化学环境适应性，难以杀灭。研究表明，难辨梭状芽胞

杆菌孢子可在不良环境中存活数月，且随着时间推移，

医院病房难辨梭状芽胞杆菌孢子存在的可能性越大。本研究以孢子基数／消毒后存活数＞１０３

为标准，评价３２种化学消毒剂对难辨梭状芽胞杆菌孢

子活性的杀伤效果，从而为医院消毒供应中心选取化学消毒剂提供参考。１　材料与方法

１．１　化学消毒剂　纳入研究的３２种化学消毒剂，按照其使用说明推荐的最低剂量对孢子待测样本进行消毒，消毒时间为１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ。按有效成分，

本研究采用化学消毒剂分为如下几类：二氧化氯类１９种；次氯酸钠类５种；三胺类４种；季铵盐混合物类３种；过氧乙酸类１种。

１．２　难辨梭状芽胞杆菌孢子制备　用头孢甲氧噻吩－环丝氨酸－果糖－黄琼（ＣＣＦＡ）干粉配置ＣＣＦＡ培养皿。ＣＣＦＡ培养皿为选择性培养皿，难辨梭状芽胞杆菌能在ＣＣＦＡ培养皿上形成特殊形状的菌落，并且其他厌氧菌的生长受到抑制［１］。培养温度为（３７±２）℃，持续２４ｈ，制备得到难辨梭状芽胞杆菌。将得到的难辨梭状芽胞杆菌培养皿置于４～８℃厌氧环境中，培养３～５ｄ，然后将其置于厌氧环境中以７０℃恒温加热２０ｍｉｎ。

１．３　处理方法　将难辨梭状杆菌孢子配置成两种待测样本，即清洁环境待测样本（含０．３％白蛋白）和污浊环境待测样本（含３％白蛋白）。按照化学消毒剂产品使用说明推荐的最低剂量，分别处理两种待测液，处理时间分别为１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ，处理过程均在厌氧环境，室温１８℃条件下进行。

２　结　果

纳入研究的３２中化学消毒剂产品，仅有８种（序号１～８）化学消毒剂能在清洁环境和污浊环境中，消毒１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ情况下，有效杀灭难辨梭状杆菌孢子（孢子基数／消毒后存活数＞１０３）。消毒产品１～４效果最显著，在两种环境和两种消毒时间下孢子基数／消毒后存活数＞１０３基数。此８种化学消毒剂的有效成分均为二氧化氯。两种产品（９号，有效成分为季铵盐混合物类；１０号，有效成分为二氧化氯）在清洁环境下，消毒１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ均能使孢子基数／消毒后存活数＞１０４，但在污浊环境中则需要消毒＞６０ｍｉｎ才能有效杀灭孢子。６种产品（序号１４～１９，有效成分为次氯酸钠或次氯酸钠混合物、三胺类）仅在消毒６０ｍｉｎ有效杀伤清洁环境和污浊环境中的难辨梭状杆菌孢子。剩余１０种产品（序号２０～２９，其中６种有效成分为二氧化氯、３种为三胺类、１种为过氧乙酸）仅在清洁环境下消毒６０ｍｉｎ有效杀伤孢子活性。除序号３０的化学消毒剂外，有效成分为二氧化氯的化学消毒剂在清洁环境中消毒６０ｍｉｎ均能使孢子基数／消毒后存活数＞１０３。３种产品（序号３０～３２）无效。见表１。

３　讨　论

消毒供应中心是医院无菌物品的处理和供应中心，是保证医疗护理质量及控制医院感染的关键科室［２］。难辨梭状杆菌是常见院内获得性感染重要致

表１　不同化学消毒剂杀伤难辨梭状芽胞杆菌孢子活性Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ　ｏｎ ｋｉｌｌｉｎｇ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ　ｓｐｏｒｅｓ

序　号

有效

成分

孢子基数／消毒后存活数

清洁环境

（０．３％白蛋白）

１ｍｉｎ　６０ｍｉｎ

污浊环境

（３％白蛋白）

１ｍｉｎ　６０ｍｉｎ１二氧化氯＞４＞４＞４＞４

２二氧化氯＞４＞４＞４＞４

３二氧化氯＞４＞４＞４＞４

４二氧化氯＞４＞４＞４＞４

５二氧化氯＞４＞４　３＞４

６二氧化氯＞４＞４　３　４

７二氧化氯＞４＞４　３＞４

８二氧化氯３＞４　３＞４

９季铵盐３＞４＜３＞４

１０二氧化氯３＞４＜３　３

１１二氧化氯３＞４＜３＜３

１２二氧化氯３＞４＜３＜３

１３二氧化氯３＞４＜３＜３

１４三胺类＜３＞４＜３＞４

１５次氯酸钠＜３＞４＜３＞４

１６次氯酸钠＜３＞４＜３＞４

１７次氯酸钠＜３＞４＜３＞４

１８次氯酸钠＜３＞４＜３　３

１９次氯酸钠＜３＞４＜３　３

２０二氧化氯＜３＞４＜３＜３

２１二氧化氯＜３＞４＜３＜３

２２二氧化氯＜３＞４＜３＜３

２３二氧化氯＜３＞４＜３＜３

２４二氧化氯＜３＞４＜３＜３

２５二氧化氯＜３＞４＜３＜３

２６三胺类＜３＞４＜３＜３

２７过氧乙酸＜３　４＜３＜３

２８三胺类＜３　３＜３＜３

２９三胺类＜３　３＜３＜３

３０二氧化氯＜３＜３＜３＜３

３１季铵盐＜３＜３＜３＜３

３２季铵盐＜３＜３＜３＜３

　注：表中同类化学消毒剂为不同厂家提供。

病菌，与ＡＡＤ关系密切。其孢子存活能力较强，是供应室消毒工作中的难题。本研究表明，尽管当前市售的化学消毒剂种类繁多，但有效成分为二氧化氯的化学消毒剂杀灭难辨梭状芽胞杆菌孢子效果较好。清洁环境中的消毒效果好于污浊环境，提示供应室应注重保持消毒设备与消毒用品的清洁。在消毒供应中心条件许可的情况下，延长消毒时间也有助于更好地杀灭难辨梭状杆菌孢子。

参考文献

［１］　刘晶晶，袁耀宗．难辨梭状芽胞杆菌与炎症性肠炎［Ｊ］．国际消化病杂志，２０１０，２（３０）：１１－１３．

［２］　易元平．医院供应室工作中存在的问题与对策［Ｊ］．检验医学与临床，２００９，６（１１）：９２５－９２６．