微生物培养方法优秀课件
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人教版高中生物选修一课件：2.1微生物的实验室培养 (共60张PPT)
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
微生物的培养与应用ppt课件
40
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
微生物的基本培养技术(第四课时)-高二生物精品课件(人教版2019选择性必修3)
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
合作探究一：请同学们自主学习教材P18-19页，观看土壤中分解尿素的细菌的 分离和计数视频，小组合作思考讨论完成问题。
1.结合对照组，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是 否筛选出一些菌落。 2.你是否获得了某一稀释度下菌落数 为30～300的平板在这一稀 释度下，是否至少有2个平板的菌落数接近？ 3.你统计的每克土样中能分解尿素的细菌的菌落数是多少？与其 他同学统计的结果接近吗？如果差异很大，可能是什么原因引起 的？
问题1:怎么通过稀释涂布平板法统计活菌的数目呢？还有哪些统计活菌的方法呢？
一、微生物的数量测定
（一）统计菌体数目：
稀释 103倍
稀释 104倍
1 稀释涂布平板计数法 ——间接计数法
空白 对照
稀释 105 倍
2 显微镜直接计数法 ——直接计数法
血细胞/细菌计数板
一、微生物的数量测定
（一）统计菌体数目：
每个平 板的菌 落数
四、实验流程： 土壤取样
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
制备培养基
样品稀释涂 布平板
当菌落数目稳定时，选取菌落数在30~300的平板进行计数， 同一稀释度下至少计数3个平板，求出平均值，并根据所对 应的稀释度计算出样品中细菌的数目。设计如下表格记录 并计数。
微生物的培 养与观察
不一定，还需要进一步的鉴定
本活动只是初步筛选了能分解尿素的细菌,对分离的菌种进行鉴定还需 要借助生物化学的方法。你可以查阅相关资料,进一步设计实验来鉴定自己
分离的菌种。需要用“鉴别培养基”
一、原理： 脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→ 酚红变红→脲酶阳性 CO(NH2)2 + H2O 脲酶 2NH3 + CO2
《微生物纯培养技术》课件
纯培养技术可用于病原微生物的分离、鉴 定和药物敏感性试验，为临床诊断和治疗 提供依据。
微生物纯培养技术
02
的基本原理
微生物的分离与纯化
微生物的分离
通过选择合适的培养基和培养条件， 将混合的微生物群体分离成单一的微 生物个体。
微生物的纯化
通过反复划线、稀释接种等方法，获 得纯培养的微生物，即同一菌种或纯 种微生物的培养。
微生物的培养基
培养基的组成
培养基是由水、碳源、氮源、无机盐 等组成，根据不同微生物的需求，培 养基的成分和比例会有所不同。
培养基的制备
根据配方和操作步骤，将各种成分混 合在一起，经过灭菌处理后，制成适 合微生物生长的培养基。
微生物的培养条件
温度
不同微生物对温度的需求不同，适宜的 温度可以促进微生物的生长和代谢。
生理生化特性分析
测定微生物的生理生化特性，如氧化酶试验 、糖发酵试验等。
应用前景探讨
探讨微生物纯培养技术在生产、科研等领域 的应用前景和潜在价值。
微生物纯培养技术04Fra bibliotek的应用实例
在医学领域的应用
抗生素生产
01
微生物纯培养技术用于分离和培养具有抗生素产生能力的菌株
，为医学领域提供大量抗生素。
疾病诊断
《微生物纯培养技术》 ppt课件
目 录
• 微生物纯培养技术概述 • 微生物纯培养技术的基本原理 • 微生物纯培养技术的实验操作 • 微生物纯培养技术的应用实例 • 微生物纯培养技术的挑战与展望
微生物纯培养技术
01
概述
微生物纯培养技术的定义
01
微生物纯培养技术是指通过一定 的物理、化学手段，将自然界中 混杂的微生物群体分离出来，获 得纯种微生物的技术。
微生物的纯培养生长曲线及繁殖ppt课件
精选编辑ppt
38
一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
由于采用活菌计数比较麻烦，并要求严格进行操作，否则不易得到
准确的结果，重复性也差，因此在实际工作中多采用分光光度计测
定OD值的方法绘制细菌的生长曲线。
精选编辑ppt
39
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获。
缺点：
不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
精选编辑ppt
13
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 4、显微镜直接计数法
2）其它方法： 过滤计数：
可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将 滤膜染色，再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数；
迅速、代时稳定，所以是研究微生物基本代谢的良好材料。它也常在生产上用作
种子，使微生物发酵的迟缓期缩短，提精高选经编辑济pp效t 益。
27
在细菌个体生长里，每个细菌分裂繁殖一代所 需的时间为代时(Generation time);
在群体生长里细菌数量增加一倍所需的时间称 为倍增时间（Doubling time);通常也称为代时， 代时以G表示。
通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌） 1、培养平板计数法
精选编辑ppt
6
第一节 微生物生长的测定
精选编辑ppt
7
采用培养平板计数法要求操作熟练， 否则难以得到正确的结果：
样品充分混匀；
每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液；
同一稀释度三个以上重复,取平均值；
微生物的实验室培养(课件)
详细描述
分批培养是将微生物接种到一定量的培养基中，在一 定时间内完成生长繁殖的过程。该方法可以控制微生 物的生长环境，便于观察和控制。连续培养则是让微 生物在恒定条件下持续生长繁殖的方法，通过不断地 补充新鲜的培养基和排除老的培养基，使微生物在恒 定的条件下快速生长繁殖。该方法适用于大规模工业 生产，可以提高生产效率和产品质量。
微生物培养
在适宜的温度、湿度、 pH等条件下，将纯化 的微生物菌株接种到培 养基中，让其生长繁殖 。根据需要，可以选择 不同的培养方式和培养
基类型。
微生物观察与检测
在培养过程中，定期观 察微生物的生长情况， 记录生长曲线、菌落形 态等数据，并进行相关 的检测和鉴定，如生化 反应、抗原抗体反应等
。
微生物保藏与利用
微生物的生长需求。
培养基的pH值
培养基的pH值对微生物的生长具 有重要影响，不同微生物对pH值 的要求不同，因此需根据实际情况 调整。
培养基的灭菌
灭菌是培养基制备的重要环节，通 过高温或高压灭菌，消除培养基中 的杂菌，保证微生物纯种培养。
实验室设备与器材
显微镜
观察微生物形态和生长情况，是微生物实验 室的基本设备。
实验室安全防护措施
实验室应配备必要的安全设施， 如灭火器、急救箱、洗眼器等，
并定期进行检查和维护。
实验室应保持通风良好，确保空 气流通，以降低感染和污染的风
险。
实验室应定期进行消毒和清洁， 确保实验环境的卫生和安全。
实验废弃物的处理与环保要求
实验废弃物应按照规定进行分类和处 理，避免对环境和人类健康造成危害 。
培养获得的微生物可以 用于后续的研究和应用 ，如生产生物制品、进 行疾病诊断和治疗等。 同时，对于有价值的菌 种可以进行长期保藏，
高中生物 人教版 选择性必修三 微生物的基本培养技术(85张)课件
微生物的纯培养——以酵母菌的纯培养为例
1．培养物、纯培养物和纯培养的概念 微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类 微生物的群体称为__培__养__物____。由__单__一__个__体__繁__殖__所__获__得____的微生物群 体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是___纯__培__养___。 2．微生物的纯培养的步骤 生物纯培养包括__配__制__培__养__基__、__灭__菌__、__接__种__、__分__离__和__培__养__等步骤。
[对点精练]
1．下列有关培养基的叙述，正确的是
()
A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基
C．固体培养基中加入少量水，即可制成液体培养基
D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌
【答案】A
【解析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求而配制出 的供微生物生长繁殖的营养基质，A正确；按物理性质不同，培养基可 分为液体培养基、半固体培养基、固体培养基，按用途不同，培养基又 可分为选择培养基和鉴别培养基，B错误；固体培养基由于添加了凝固 剂琼脂，所以即使加入少量水也不可能制成液体培养基，C错误；单个 细菌用肉眼是看不见的，由同一种细菌的众多菌体构成的菌落是肉眼可 见的，D错误。
氮以外的各种重要 理调节物质、某些化能
无机盐
无机化合物
元素，包括大量元 自养菌的能源、酶的激
素和微量元素
活剂等
3．培养基配制的基本原则 (1)目的要明确：不同的微生物需求不同，根据培养目的进行配制。 (2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。营养物质浓度过低 不能满足微生物营养的需要，过高对微生物的生长有抑制作用。 (3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，为维持pH的相 对稳定，可在培养基中加入缓冲溶剂。
微生物的分离、培养和菌种保藏 PPT课件
實驗程式7
（微生物的分離—平板塗抹法）
實驗程式8
（微生物的分離—平板劃線法）
每組取無菌培養皿2付，在皿底貼上標籤，注明事項。取已熔化 的牛肉膏蛋白腖培養基，倒入平皿，製成平板。
凝固後，用接種環取相應的 菌液一環（10－5或10－6）在平板上 劃線（教師作示範）。 1.連續劃線法：將挑取有樣品的接種環在平板培養基表面作連續 劃線（圖－5）。完畢後，倒置於28～300C溫室培養。 2.分區劃線法：用接種環以無菌操作挑取土壤稀釋液1環，先在 培養基的一邊作第一次平行劃線3—4條，再轉動培養皿約600C 角，並將接種環上剩餘物燒掉，待冷卻後通過第一次劃線部分作 第二次劃線會，同法依次作第三次和第四次劃線（見圖－5）。 劃線完畢，蓋上皿蓋，倒置於28～300C溫室培養。
液體接種法：包括從斜面菌種接入培養液，或從液體菌 種接入液體培養液，兩種情況都可以用接種環接種。但 在培養量比較大的情況下，液體接種宜採用移液管接種， 同時要求無菌操作。
穿刺接種法：用接種針經火焰滅菌後，沾取少量菌種， 垂直地穿入試管固體培養基中心至底部，然後沿著原接 種線將針拔出，要做到手穩、動作輕巧迅速，最後塞上 棉塞。再將接種針上殘留的菌體在火焰上燒掉。
2. 用無菌的脫脂牛奶將新鮮斜面菌種製成牛奶菌種懸液，無菌 操作裝入安瓿管中（裝量不超過其體積的1/3)。 3. 預凍：將分裝好的安瓿管在－25～－400C之間的乾冰酒精 中進行預凍，1h後即可抽氣進行真空乾燥。 4.真空乾燥：預凍後放入真空乾燥箱中，開啟真空泵進行乾燥。 5.封管前將安瓿管裝入多歧管上，開啟真空泵，當真空度達到 0.01mm汞柱後用火焰熔封。 6.做好的安瓿管放入冰箱中保藏。
實驗程式17
（微生物培養中的氧氣條件－厭氧培養）
第1章第2节 微生物的培养技术及应用—微生物的基本培养技术课件高二生物(人教版2019选择性必修3)
操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每 次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使 下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线 次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束 后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染 操作者。
（三）酵母菌的纯培养
问题讨论： 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你 用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫 手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
消灭微生物数量 部分微生物 全部微生物
芽孢和孢子是否消灭 不能 能
二、无菌技术
4.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法： ①煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min ②巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min ③化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 ④紫外线30min消毒：照射前，可喷石炭酸或煤酚皂等消毒液加强消毒效果 (2)灭菌的方法： ①灼烧灭菌：接种环、接种针、试管口、瓶口
二、无菌技术
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
无菌操作是培养微生物成功的关键！ 1.消毒： 使用较为温和的物理、化学或生物等方法，杀死物体表面或
内部一部分微生物。
2.灭菌： 使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
2.消毒与灭菌的比较
项目 消毒 灭菌
理化因素作用强度 温和 强烈
D.接种环、手、高压锅
（三）酵母菌的纯培养
问题讨论： 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你 用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫 手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
消灭微生物数量 部分微生物 全部微生物
芽孢和孢子是否消灭 不能 能
二、无菌技术
4.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法： ①煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min ②巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min ③化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 ④紫外线30min消毒：照射前，可喷石炭酸或煤酚皂等消毒液加强消毒效果 (2)灭菌的方法： ①灼烧灭菌：接种环、接种针、试管口、瓶口
二、无菌技术
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
无菌操作是培养微生物成功的关键！ 1.消毒： 使用较为温和的物理、化学或生物等方法，杀死物体表面或
内部一部分微生物。
2.灭菌： 使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
2.消毒与灭菌的比较
项目 消毒 灭菌
理化因素作用强度 温和 强烈
D.接种环、手、高压锅
微生物学第二章纯培养ppt课件
2．如果希望从环境中分离得到厌氧固氮菌，你该如 何设计实验？
答：（1）根据选择分离的原理设计不含氮的培养基，在 这种培养基上生长的细菌，其氮素应来自固氮作用。（2） 将环境样品（例如土样）稀释涂布到选择平板上，放置于 厌氧罐中。对厌氧罐采用物理、化学方法除去氧气，保留 氮气。培养后在平板上生长出来的细菌应是厌氧固氮菌或 兼性厌氧固氮菌。（3）挑取一定数量的菌落，对应点种 到两块缺氮的选择平板上，分别放置于厌氧罐内、外保温 培养。在厌氧罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌，而在 厌氧罐外的平板上不能生长，在厌氧罐内的平板上生长的 即为可能的厌氧固氮菌。
方法名称
主要措施
冰箱保藏法（斜面） 低温
冰箱保藏法（半固体） 低温
石蜡油封藏法*
低温、缺氧
沙土保藏法
干燥、无营养
冷冻干燥法
干燥、无氧、低 温、有保护剂
适宜菌种 保藏期
各大类
3-6月
细菌、酵母菌 6-12月
各大类**
1-2年
产孢子微生物 1-10年
各大类
5-15年
评价
简便 简便 简便 简便 有效 简便 有效
1、微生物培养的常用器具及其灭菌
生物安全超净柜
小型无菌箱
平板（plate）又称 培养平板（culture plate）
接种针
解剖镜
……….. .. …
培养
武汉大学中国典型培养物保藏中心
几种常用菌种保藏方法的比较
3、对细菌的细胞形态进行观察和描述时应注意哪些方面?你是 否能很快地在显微镜下区分同为单细胞的细菌、酵母菌和原生 动物? 答：(1)首先应使用稀释涂布等方法对待检菌株的纯度、群落 形态、生理特性等进行检查、确认。(2)选用正常的新鲜培养 基和新鲜培养物进行培养和观察，避免培养过程中一些物理、 化学条件的改变或培养时间过长等因素对细胞形态的影响。 (3)报告细胞大小时应选用多个细胞检测的平均数，并记录所 用的实验方法，包括培养条件、培养时间、样品制备方法和染 色方法等。(4)可从大小和形态上对细菌、酵母菌和原生动物 进行区分。酵母菌、原生动物个体较大，一般可用低倍镜观察， 酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形，不具运动 性，原生动物细胞形态多变，能够运动。相比较而言，细菌细
微生物的培养技术及应用ppt课件
二、无菌技术 获得纯净的微生物培养物的关键是 防止杂菌污染 ， 主要包括 消毒 和 灭菌 。
无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，
还有什么作用？
还能有效避免操作者被微生物感染。
二、无菌技术 1.消毒 （1）概念
使用较为 温和 的物理、化学或生物等方法杀死物体 表面 或内部 一部分 微生物。 （2）消毒方法
杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污 接种结束后 染环境和感染操作者
接种环共需灼烧 几次？
6次
【问题探究2】在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
避免接种环温度太高，杀死菌种。
【问题探究3】在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次 划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端酵母菌的数目比线条起始处要 少 ，每次从上一次 划线的末端开始，能使酵母菌的数目随着划线次数的增加而逐步 减少 ， 最终能得到由 单个 细胞繁殖而来的 菌落 。
培养、分离出 特定微生物
鉴别不同种类 微生物
【注意】病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能
利用人工培养基来培养。
一、培养基的配制 4.培养基的营养构成：（1）基本成分
一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等。
组分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl
H2O
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
含量
怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物呢？
应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并 控制发酵条件，避免杂菌进入。
研究和应用微生物的前提，发酵工程的重要基础： 防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物。
在实验室培养微生物： ①为微生物提供合适的营养和环境条件 ——培养基
②确保其它微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。 ——无菌技术、微生物的纯培养
高中生物微生物的培养PPT课件
严格控制无菌操作，在培 养过程中要更换培养基， 调节细胞分裂素和生长素 的比例和添加顺序。
严格控制无菌操 作，整个培养过 程无需更换培养 基
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适宜的环境条件，基质 垫底并固定幼苗，不需 要保证无菌条件，注意 溶氧和矿质元素的浓度。
3.下列关于植物组织培养、微生物培养和无土栽培技术的比较的
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拓展深化
某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体，称为芽 孢。每个细菌细胞仅形成一个芽孢，故它无繁殖功能。芽孢有极强的抗热、抗辐 射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽孢的休眠能力十分惊人，可保持几年到几 十年的生活力。 孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。一般是单细胞，个体微小， 通常是适应于从不利环境条件中存活下来，并在条件改变时产生新的营养体，能 直接发育成新个体。
用途
_工__业___生__产
物理 性质
化学 成分
用 途
半固体培养基 加凝固剂，如
__固__体__培养基
琼脂
观察微生物的运动、分类、鉴定
微保生藏物菌分_种__离_、鉴___定_、活菌计数、
_天___然__培养基
含化学成分不明确的 天然物质
工业生产
_合___成__培养基
培养基成分明确(用化学成分 已知的化学物质配成)
牛肉膏 天然培养基，主要提供C源、磷酸盐和维生素、N源。
玉米粉
主要提供C源与能量
②．大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌等微生物营养类型。
大肠杆菌：异养兼性厌氧型 乳酸菌：异养厌氧型
硝化细菌：自养需氧型
③由①②可以得到什么结论？
根据不同的微生物营养类型不同，选择配制不同的培养基。 ④．微生物培养与植物组织培养的营养成分区别？
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菌种扩增
•摇床震荡培养12h（于LB液体培养基中）
本图来自十一学校
实验用具
• LB固体培养基 • 大肠杆菌菌液（LB液
体培养基） • 培养皿 • 接种环 • 酒精棉 • 酒精灯 • 镊子、火柴、记号笔
接种前准备
• 用肥皂洗手并使用酒精消毒。 • 顺序：
点燃酒精灯→酒精棉擦拭双手→酒精棉擦拭桌面
菌落
• 菌落： 单个细菌用肉眼是看不见的，当单 个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时， 便会形成一个肉眼可见的，具有一定形态 结构的子细胞群落。
• 菌落是菌种鉴定的重要依据。不同种 类的细菌菌落的大小，形状光泽度颜色硬 度透明度都不同。
培养基的种类及应用
按化学组成不同划分：合成培养基/天然培养基
37℃倒置培养
按浓度捆成一摞
恒温37℃培养
10-4 、 10-3,、 10-2
常见接种方法
• 平板划线法：
•
主要用于分离、纯化培养
• 稀释涂布平扳法：
•
主要用于分离菌种并计数
倒平板
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
烧至暗红
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
菌液膜
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
接种、划线
划线分离
①
②
③
为什么通过划线分离可得到单菌落？
划线分离
•倒置后做好标记，写在培养皿侧面
微生物培养方法优秀课件
微生物的种类
• 非细胞：病毒； • 原核细胞：细菌、蓝藻、放线菌、支原体等。 • 真核细胞：真菌、原生生物、藻类等。
• 细菌：大肠杆菌、乳酸菌等 • 真菌：酵母菌、霉菌； • 原生生物：草履虫、变形虫等。
微生物的特点
• 体积小，面积大 • 吸收多，转化快 • 生长旺，繁殖快； • 适应强，易变异; • 分布广，种类多。
观察记录
配制培养基
LB培养基: 蛋白胨： 10g 酵母粉： 5g NaCl： 10g 琼脂： 20g 将上述物质溶解后， 用蒸馏水定容至
1000ml， 分装后及时灭菌。
包器材
灭菌
高压蒸汽灭菌 ：
通过加热使菌体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。
条件：压力100 kPa 温度121 ℃ 时间15-30 min
我们的实验结果
培养
恒温37℃培养
为什么要倒置培养？
配制菌悬液
得10-2,
10-3, 10-4的菌悬液
1g土壤
1个99ml无菌水
2个9ml无菌水
稀释菌悬液 （10-4）
高浓度→低浓度，换枪头
接种
• 取200ul菌悬液(10-4)
涂布分离
低浓度→高浓度，可不用换枪头
涂布分离
涂布前后三角刮刀需要灼烧吗？
微生物的营养
• 培养基：碳源、氮源、水、无机盐等。 • 适宜的环境条件：温度、pH、氧气等。 • 自养型：无机碳源；异养型：有机碳源。
细菌
• (1)结构：单细胞的原核生物，有球形，杆 形，螺旋形。
• 基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、 拟核。
• 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞。 • • (3)繁殖: 二分裂。
按 物 理 状 态 不 同 划
固体培养基 按
用
途
半固体培养基
不 同
划
液体培养基
分
鉴别培养基 选择培养基
分
Байду номын сангаас
无菌技术
• 消毒：不能杀死芽孢和孢子。
•
煮沸、紫外线、化学药剂
• 灭菌：能杀死芽孢和孢子。
•
高压蒸汽灭菌、灼烧、干热、过滤。
实验操作——微生物的培养
配制培养基 包器材
菌种扩增
灭菌
倒平板 接种 培养