发酵罐操作

10L-在位灭菌发酵罐操作规程

一、灭菌（在位灭菌）

1、水箱中装入足够的蒸馏水；

2、检查罐线连接是否完好；

3、打开蒸汽发生器、至排气口有蒸汽冒出时关闭排汽口；

4、在蒸汽工作时，把培养基加入到发酵罐中，关紧各阀门；

5、用钟罩罩上发酵罐，并用螺母固定结实；

6、蒸汽发生器达到设定的压力时，打开通气阀门使蒸汽通入发酵罐的下部；

7、然后打开发酵罐上下的连接阀门，使蒸汽通入上部至钟罩顶有蒸汽冒出；

8、关闭钟罩顶的阀门，使温度上升；

9、调整蒸汽通入的速度，使温度以比较快的速度升至95℃；

10、用比较慢的速度升至120℃，并维持15min；

11、关闭通气阀，停止通入蒸汽，待钟罩内温度降至室温时，打开钟罩顶的阀门排汽；

12、汽排净后，拿下钟罩，把各罐线连接好。

二、发酵培养

1、在控制器上设定好发酵的温度pH、搅拌转速等参数；

2、连接好pH电极、温度电极，打开相应控制软件；

3、调整无菌空气的流量；

4、在酒精火焰的保护下，将菌种加入到发酵罐中；

5、打开冷却水，在控制器上按键开始发酵，控制系统自动记录数据。

三、发酵完毕

1、停止发酵，记录数据保存；

2、把发酵液排出进行后续处理，用水洗净发酵罐；

3、在计算机上记录的数据存盘，关闭控制器；

4、在计算机上处理记录的数据。

5L-玻璃发酵罐操作规程

一、发酵准备

1、检查各罐电路及罐体供水；

2、注入培养基，安装好pH电极、DO电极；

3、设定发酵条件；

4、pH电极零点和斜率进行标定，DO电极零点标定；

5、连接好公用罐线，并保证安全可靠；

6、过滤器胶管用弹簧夹夹紧，防止在消毒过程中培养基倒流进入空气过滤器；

7、用闷冒盖紧pH电极上端口，防止因电缆插口受潮导致电极故障；

8、溶氧电极上端口用吕铂纸包裹，防止因电缆插口受潮导致电极故障；

9、盖紧其它罐盖接口，移去排汽冷凝器冷却水进出口的水管；

10、离位实罐灭菌：玻璃罐体及各补料瓶盖好牛皮纸放入灭菌锅，灭菌过程温度升降要缓慢；

11、灭菌结束，尽快将罐体放回原位，并尽快通入空气。

12、培养基温度至发酵温度时，pH电极pH值进行修正，DO电极斜率标定零点。

二、发酵

1、接种：调节空气流量，旋松接种口，在火焰保护下进行接种，旋紧接种盖，移去火焰圈；

2、连接好各补料瓶、酸碱液及消泡剂瓶；

3、按F1设定发酵批号，发酵过程参数及控制模式，按F2开始发酵，发酵数据自动保存；

三、发酵结束

1、停止发酵，记录数据；

2、将发酵液排出罐，进行后续处理，用水清洗发酵罐；

3、将数据保存在计算机，关闭控制器；

4、数据处理。

5L-50L梯度发酵罐操作规程

种子罐操作同10L发酵罐

一、实罐灭菌

1、盖紧罐盖上各种盖冒，旋紧罐盖上压紧螺栓；

2、标定pH、DO电极，锁紧螺母；

3、关紧发酵罐底部阀门，到入培养基，调整pH，旋紧接种口；

4、预先启动蒸汽发生器及空气压缩机，温度控制设为手动，开排汽阀VT1，关闭其它阀门；

5、开夹套冷却水阀VT01排夹套水；

6、启动反应器搅拌马达，调转速100～200rpm；

7、蒸汽进夹套，控制夹套的压力补超过0.2Mpa，将培养基预热至98℃，进入实罐灭菌；

8、停止搅拌，进行实罐灭菌，在100℃时，进行标定溶氧的零点，当达到预定灭菌温度，保温30min；

9、实罐灭菌后，各个阀门按照“先开后关，后开先关”进行，在控制器上将温度设定为“自动”，发酵进入自动降温，按下搅拌开关，设定搅拌转速，并“自动”控制；

10、在降温过程中，始终监视罐压，严禁压力为零，当温度达到工艺要求时，调节搅拌转速、空气流量、罐压、标定溶氧电极斜率及校正pH电极的零点；

二、发酵

1、接种：①摇瓶接种:调节进气量0.2VVM，开排汽阀VT1至罐压接近零时，在火焰的保护下倒入种子；②压差接种：调节压力，使种子罐压力大于发酵罐压力0.05Mpa，进行移种；

2、连接好各补料瓶、酸碱液及消泡剂瓶；

3、发酵初始化：输入发酵批号，设定适宜的控制模式，进行发酵，数据自动保存；

三、发酵结束

1、在控制器的发酵罐状态画面按“正在发酵”并“确认”，如需发酵数据归档，按“可以归档”并确认，发酵数据将自动整理并保存；

2、将发酵液排出罐，进行后续处理，清洗发酵罐；

3、将原始数据保存后，将各个参数控制软件返回使用前状态；

4、关闭控制器及发酵罐的各个阀门；

5、数据处理。