层析柱的一些总结
过柱子的知识总结
过柱子的知识总结王宇通常有机反应得到的产物中会混有一定量的副产物和杂质，所以需要对产物进行纯化以得到我们需要的目标产物。
纯化的方法有多种，比如减压蒸馏、萃取、重结晶、色谱分离等等。
它们有各自不同的适用范围，本文就总结一下柱层析分离（即过柱子）的基本知识。
由于柱层析分离是色谱分离技术中的一种，所以首先介绍色谱法的一些基本概况。
1．色谱法的基本概况1.1 色谱法简介色谱法是利用不同的物质在不同相态的选择性分配，以固定相对流动相中的混合物来进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。
常用的色谱分离技术有柱色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法以及气相色谱法等。
1.2 色谱法的分类首先，按照“相”来分类，色谱法可分为气相色谱和液相色谱。
气相色谱包括气固色谱和气液色谱，液相色谱包括液-固色谱和液-液色谱。
按照固定相的形式来分类，色谱法可分为纸色谱、柱色谱和薄层色谱。
按照分离原理来分类，色谱法可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、排阻色谱法和亲和色谱法等。
1.3 色谱法的简要发展历史色谱法的发展起源于十九世纪末的俄国，最先由植物学家Tswett研究时发现，他提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法，同时也被尊称为“色谱学之父”。
1941年Martin和Synge首先介绍了分配色谱法，并将蒸馏塔板理论应用于色谱分离中，使色谱方法在理论上向前推进了一步。
他们二人也因为对柱层析应用的贡献而获得了1952年的诺贝尔化学奖。
1952年Martin和Games开创了气—液色谱的新领域。
20世纪60年代末，法国的G·Aubouin和美国的Scott等人同时各自创立了高压液相色谱法，它与分光光度、库仑、电导、荧光等方法联用，可使分离和检测实现自动化。
到目前为止，各种色谱还在不断发展，色谱设备日益完善、操作技术不断突破，色谱分析法已成为近代化学中最重要的分离分析手段之一。
有关色谱法的整体概况这里不做重点介绍，接下来重点总结吸附柱层析分离技术的相关知识。
柱层析的一些心得
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分离的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。
１．吸附剂常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等：吸附剂一般要经过纯化和活性处理，颗粒大小应当均匀。
对吸附剂来说粒子小、表面积大，吸附能力就高，但是颗粒小时，溶剂的流速就太慢，因此应根据实际分离需要而定。
供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性和碱性3种。
酸性氧化铝是用1％盐酸浸泡后，用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4，用于分离酸性物质；中性氧化铝的pH约为7．5，用于分离中性物质；碱性氧化铝的pH约为10，用于胺或其它碱性化合物的分离。
因硅胶略带酸性，只能用于对酸不敏感的化合物的分离。
常用300-400目的柱硅胶或H 硅胶。
若化合物的R f值相差较大，则可考虑使用２00-３00目硅胶以加快层析速度。
另：因吸附剂的比表面较大，天气潮湿时或长期放置中吸附的水分会对分离效果产生极大的影响（相当于大大增加了固定相的极性导致样品分不开），因此应将吸附剂放入９０～１００度烘箱内烘２小时后，取出在干燥器中冷却后再使用。
使用的硅胶，不用时一定要密封，防止吸潮。
TLC所用的硅胶板一定要保存在干燥器里面，或使用前在红外烘箱里干燥一段时间。
2．溶质的结构与吸附能力的关系化合物的吸附性与它们的极性成正比，化合物分子中含有极性较大的基团时，吸附性也较强，氧化铝对各种化合物的吸附性按以下次序递减：酸和碱>醇、胺、硫醇>酯、醛、酮>芳香族化合物>卤代物、醚>烯>饱和烃３．柱子可以分为：加压，常压，减压。
压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。
加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
层析柱装填要点和要求
层析柱装填要点和要求
1. 嘿，一定要注意啊，装填层析柱的时候，颗粒大小可不能马虎呀！就像建房子，砖的大小得合适吧。
比如说用硅胶装填，颗粒太大或太小，效果能好吗？
2. 别忘了均匀装填呀！你想想，要是填得乱七八糟的，那不就像走在坑坑洼洼的路上，能顺顺畅畅吗？比如说填的时候东一块西一块的，那怎么行！
3. 要把气泡赶跑啊！气泡在里面就像个捣蛋鬼，会坏事的呀！就好比你吃饭的时候有颗沙子，多难受啊。
比如装的时候不小心混进了气泡，得想办法弄出去呀。
4. 压实也很关键呀！松松垮垮的可不行，这就好像搭积木不压实会倒一样。
比如说随便弄弄，那后续分离还能靠谱吗？
5. 速度不能太快也不能太慢啊！快了容易出问题，慢了又耽误时间。
就像开车，太快危险，太慢也急人。
比如填充的时候没把握好速度，那不就糟糕了。
6. 注意柱子的垂直哦！歪歪扭扭的可不像话，就跟站没站相一样。
比如说没放垂直，那后续操作能顺利吗？
7. 清洗干净也超级重要！脏兮兮的怎么用啊，就像你穿脏衣服出门一样。
比如装填前不认真清洗，那不是给自己找麻烦嘛。
8. 还有啊，多检查几遍呀！不检查怎么能放心呢，就像考试不检查会丢分一样。
比如说填完了就不管了，万一有问题呢！总之啊，装填层析柱这些要点和要求一定得认真对待，这样才能得到好的结果呀！。
柱层析方法经验归纳汇总
1、选柱子：有玻璃柱和不锈钢柱两种，实验室常用玻璃柱。
径高比一般在1:5-10。
根据吸附剂用量（体积)确定柱子大小，一般吸附剂应填充到柱子体积的1/4～1/5。
柱子可以分为：加压，常压，减压。
压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。
其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结)，以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长)。
加压柱是种比较好的方法，与常压柱类似，只是外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气，双连球或小气泵。
特别在容易分解的样品的分离中适用。
压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
柱子的尺寸为粗长的最好。
柱子越长，相应的塔板数就越高。
柱子越，上样后样品的原点就越小（反映在柱子上就是样品层比较薄)，这样相对的减小了分离的难度。
无水无氧柱适用于对氧、水敏感，易分解的产品。
可以湿柱，也可以干柱。
不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分解，毕竟要分离的是敏感的物质，小心不为过。
因为分离的物质比较敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。
至于是加压、常压、减压，随需而定。
因为是schlenk操作，所以点板是个问题，如果样品是显色的，恭喜了，不用点板，直接看柱子上的色带就行了。
如果样品无色，只好准备几十个schlenk瓶，一瓶一瓶的点，不过几次之后就知道样品在哪，也就可以省些了。
无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。
因为硅胶中有大量的羟基裸露在外，很容易是样品分解，特别是金属有机化合物和含磷化合物。
而氧化铝有碱性、中性和酸性的，选择余地比较大，但比硅胶要贵些。
层析柱的原理
层析柱的原理
层析柱是一种常用的色谱技术，它利用物质在固定相和流动相之间的分配行为
进行分离和分析。
层析柱的原理主要包括样品的吸附、分配和解吸过程。
首先，样品在固定相上发生吸附作用。
固定相是层析柱中的固体填充物质，它
能够吸附不同化合物的分子。
当样品混合物通过固定相时，不同成分的分子将以不同的速率被固定相吸附，从而实现分离。
其次，样品在固定相和流动相之间发生分配作用。
流动相是层析柱中的移动相，它可以是液体或气体。
当样品混合物通过固定相时，固定相吸附的成分会根据其在固定相和流动相之间的分配系数，以不同速率被分配到流动相中，从而实现进一步的分离。
最后，样品在流动相中发生解吸作用。
在流动相的作用下，被分配到流动相中
的成分将逐渐被释放出来，从而完成分离过程。
层析柱的原理可以用来解释各种类型的色谱技术，包括气相色谱、液相色谱和
超临界流体色谱等。
不同类型的色谱技术在固定相和流动相的选择上有所不同，但它们都遵循着样品的吸附、分配和解吸过程，以实现对样品混合物的分离和分析。
总的来说，层析柱的原理是基于样品在固定相和流动相之间的不同亲和性和分
配行为，利用固定相对样品混合物进行吸附和分配，最终实现对样品的分离和分析。
这种原理不仅在实验室中被广泛应用，也在工业生产和环境监测等领域发挥着重要作用。
通过深入理解层析柱的原理，可以更好地掌握色谱技术的应用和优化方法，为科研工作和实际应用提供有力的支持。
层析柱的一些总结
多数微生物碱性蛋白酶不耐热，碱土金属，特别是钙对碱性蛋白酶有明显的热稳定作用碱性蛋白酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一，在丝绸、制革工业中也有广泛用途热稳定性将酶液分别置于不同的温度条件下（30℃，40℃，50℃，60℃，70℃）保温10min 后，立即在0℃冰浴中冷却，然后在40℃下测碱性蛋白酶活力，以剩余的酶活性作为评价酶的热稳定性的指标。
测量三个重复求平均值，将最高的酶活力定义为100%，分别计算不同温度条件下蛋白酶的剩余酶活性与最高酶活性的比值。
以ph7的缓冲液为例,如果你的目标蛋白等电点小于7,呢就带负电荷,用阴离子交换的柱子,如果是大于7,那选择阳离子交换的柱子,如果等电点是7,那上样的缓冲液pH大于它的等电点用阴离子,小于7的用阳离子,如此类推就可以缓冲液的PH＝pI值＋1，上阴离子柱，＝pI值－1，上阳离子柱，一般缓冲液ph范围在6.5～8.5之间，与PI值相差1个PH是比较理想的。
如果不清楚PI值，可以将蛋白溶到PH梯度的缓冲液里，然后分别试阳离子和阴离子填料（50ul左右得体积就够了），看那个PH下挂得好。
强离子交换剂: 在宽pH范围内载量稳定，所以他的优点是不同pH下载量恒定，可控性好，平衡过程快速、简单。
弱离子交换介质的缺点：适用的pH范围比较小，随着pH不同载量发生变化。
但是大部分蛋白等电点在5.5 ~ 7.5 。
因此强/弱离子交换介质都可以使用弱离子交换介质（DEAE、ANX、CM)优点在于：和强离子交换介质的选择性不同，因此我们一般先使用强离子交换，如果优化条件还是达不到理想的分离效果，可以尝试弱离子交换，用选择性不同的介质尝试一下。
因此弱离子交换与强离子交换由于选择性不同，可以说是对不同蛋白的结合力有差异。
S技术规格离子交换剂类型Q Sepharose FF 季氨基，强阴离子DEAE Sepharose FF 二乙基氨基乙基，弱阴离子ANX Sepharose 4FF 二乙基氨基丙基，弱阴离子SP Sepharose FF 磺丙基，强阳离子CM Sepharose FF 羟甲基，弱阳离子离子容量Q Sepharose FF 0.18-0.25mmol（Cl-）/mlDEAE Sepharose FF 0.11-0.16mmol（Cl-）/mlANX Sepharose 4 FF 0.13-0.18mmol（Cl-）/mlSP Sepharose FF 0.18-0.25mmol（H+）/mlCM Sepharose FF 0.09-0.13mmol（H+）/ml动态载量Q Sepharose FF 120mg HSA/ml 填料DEAE Sepharose FF 110mg HSA/ml 填料ANX Sepharose 4 FF 5mg 甲状腺球蛋白/ml 填料SP Sepharose FF 70mg RNAase/ml 填料CM Sepharose FF 50mg RNAase/ml 填料压力/流速Q Sepharose FF 400-700cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cmDEAE Sepharose FF 300-600cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cmANX Sepharose 4 FF 至少200cm/h，100kpa，XK50/60层析柱，柱床高25cmSP Sepharose FF 400-700cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cmCM Sepharose FF 300-600cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm平均颗粒大小 90um（45-165um）基质Sepharose FF 高度交联琼脂糖，6%Sepharose 4 FF 高度交联琼脂糖，4%PH稳定性Q Sepharose FF 1-14（短期），2-12（长期）DEAE Sepharose FF 1-14（短期），2-13（长期）ANX Sepharose 4 FF 2-14（短期），3-13（长期）SP Sepharose FF 3-14（短期），4-13（长期）CM Sepharose FF 2-14（短期），4-13（长期）化学稳定性在所有常用的水溶液缓冲液中稳定：8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH和1M醋酸20%乙醇（Q , DEAE,ANX,CM ）,含0.2M醋酸钠的20%乙醇（SP）保存保存温度4℃-30℃l 1M NaOH和醋酸仅在清洗时使用Phenyl-Sepharose HP产品名称：苯基-琼脂糖凝胶6FF性状：白色微球凝胶类型：疏水层析介质粒径：45-165µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，快流速，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：苯基-琼脂糖凝胶H.P.性状：白色微球凝胶类型：疏水层析填料粒径：24-44µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，高分辨率，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：苯基-琼脂糖凝胶CL-4B性状：白色微球凝胶类型：疏水层析填料粒径：45-165µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等。
有关柱层析的一些心得
有关柱层析的一些心得柱层析是一种常见的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
我最近在研究中也运用了柱层析技术，并且收获了一些心得体会。
以下是我对柱层析的一些心得，进行了详细的总结。
首先，柱层析技术在样品分离和纯化方面具有很高的分离效率和选择性。
通过选择合适的固定相材料、流动相和操作条件，可以有效地分离复杂样品中的组分。
特别是使用高效液相色谱仪（HPLC）进行柱层析，不仅分离效果好，而且分析速度快，能够提高实验效率。
其次，柱层析技术在药物分析和毒理学研究中具有重要的应用价值。
通过柱层析技术可以准确测定药物的含量和纯度，为药物制剂的质量控制提供了可靠的方法。
另外，柱层析技术还可以用于检测和分析药物在人体内的代谢产物，了解其代谢途径和体内药代动力学特征。
在毒理学研究中，柱层析技术可以用于分析毒物在体内的分布和代谢情况，为毒物学评价提供可靠的数据支持。
再次，柱层析技术需要在操作中注意一些关键的因素。
首先是选择合适的柱层析柱和固定相材料。
不同的固定相材料对不同组分具有不同的亲疏水性和分离效果，选择适合样品特性的柱层析柱可以提高分离效率和选择性。
其次是合理选择流动相和操作条件。
流动相中添加适量的有机溶剂可以改变溶剂极性，调节柱层析的分离能力。
根据样品的特性选择合适的操作条件，比如流速、温度和检测波长等。
此外，保持仪器设备的良好状态，定期进行维护和校准，以保证柱层析的准确性和可重复性。
最后，柱层析技术需要进行数据处理和结果分析。
柱层析仪器通常配备有数据采集和数据处理软件，可以自动记录和处理实验数据。
在柱层析数据处理过程中，需要对峰形和峰面积进行分析，并对结果进行定量和定性的解释。
此外，还需要进行样品的质量控制和方法验证，以保证分析结果的准确性和可靠性。
在我的研究中，我运用柱层析技术成功实现了对样品中多个组分的分离和分析。
通过合理选择固定相、流动相和操作条件，我能够达到较好的分离效果和选择性，并获得准确的分析结果。
硅胶柱层析注意事项
硅胶柱层析注意事项
1. 在操作硅胶柱层析之前，应当充分了解并熟悉相关实验室操作规程和安全操作要求，并戴好实验手套和口罩等个人防护装备。
2. 在使用硅胶柱层析进行分离纯化时，应选取合适的溶剂体系和流速，以保证分离效果和纯度。
3. 在装填硅胶柱层析柱时，应先将硅胶柱层析剂固定在柱内，并严密密封，以防止溶剂流失和杂质的进入。
4. 在进行样品的吸附和洗脱过程中，应控制好溶剂的流速和温度，以避免硅胶柱层析柱破裂和溶剂挥发带走干燥样品。
5. 硅胶柱层析柱的操作过程中，应避免剧烈振荡和撞击，以免柱内填充物移位或破碎。
6. 在层析过程中应注意观察样品和洗脱液的颜色和透明度变化，及时调整溶剂类型和浓度，以确保分离效果。
7. 在分离纯化后，应及时冻干或浓缩洗脱液，避免其再次污染或挥发。
8. 操作硅胶柱层析时，要注意保持实验室环境的清洁和卫生，以防止杂质的污
染和误差的产生。
9. 在操作过程中，要随时关注实验仪器和设备的运行状态，确保实验安全和数据准确。
10. 在结束实验后，要对硅胶柱层析柱进行彻底的清洗和维护，以保证下次使用时的质量和效果。
柱层析使用技巧汇总
柱层析使用技巧汇总柱层析就是通常所说的过柱子，又叫柱色谱，属于色谱法中使用最广泛的一种方法。
对于含有多种有机物的混合样品，用重结晶无法提纯时，柱层析法可以说是有机实验中最有效的分离手段。
实验室中常用的是以硅胶和氧化铝做固定相的吸附柱。
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
1、硅胶的使用初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了，有时还会有大量的硅胶剩余，浪费硅胶，这主要是对硅胶等固定相的使用的量没有掌握。
柱层析用的硅胶一般是100-200目，100毫升硅胶的质量在47克左右，如果装一个直径是2.8 厘米的柱子，可以装18厘米高。
为了避免浪费硅胶和溶剂，最初学习装柱时最好对实验室中各种不同规格的柱子摸摸底。
方法很简单：用量筒量出100毫升干硅胶，直接倒入各种规格的柱子中，敲实，用刻度尺量出硅胶在柱子中的高度，这样就可以做到心中有数了。
一般在装柱的时候可以根据实验所需柱子的高度来调整硅胶的使用量，这样就可以大大地节省硅胶的使用，避免造成没有必要的浪费。
称量硅胶时一般称30~70倍于上样量，如果极难分，也可以用100倍量以上的硅胶。
2、洗脱剂的使用洗脱剂的极性可用薄层层析来确定，一般以待分离样品Rf 值为0.2-0.3为宜。
选择的洗脱剂应该使两相邻物质Rf 值之差最大化。
不要认为在板上爬得高分离的效果就比较好，如果Rf 在0.6，即使相差0.2 也不容易在柱子上分开，因为柱子是一个多次爬板的过程，可以通过公式的比较：0.6/0.8 一次的分离度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。
有时虽然在薄层板上看到分离的效果很好，但过柱层析时还是很难分开。
这主要的原因就是薄层层析用硅胶比柱层析用硅胶要细得多，所以分离效果好。
解决的办法就是降低洗脱剂的极性，一般柱层析用洗脱剂比薄层层析用的展开剂极性要再降低一倍可以达到比较好的分离效果。
柱层析分离注意事项
柱层析分离注意事项柱层析分离是一种常见的分离技术，富有操作简便、分离效果好、适用范围广等优点。
下面将介绍一些在进行柱层析分离过程中需要注意的事项。
1. 选择适当的分离柱：选择合适的分离柱对于柱层析分离的成功非常重要。
要根据待分离物质的性质、目标分离效果和实验目的来选择适合的柱层析柱。
常见的柱层析柱包括液相柱、气相柱、离子交换柱、大小分子层析柱等。
不同柱层析柱具有不同的分离机制和分离效果，在选择时要根据分析需求进行合理选择。
2. 样品制备：柱层析分离前需要对样品进行适当的制备处理。
首先要选择合适的溶剂，使待测物质充分溶解，避免在柱层析过程中出现沉淀或堵塞的情况。
其次要对样品进行预处理，例如滤除悬浮物、去除杂质、浓缩或稀释等。
样品制备过程中需要注意样品的稳定性和溶解度，以避免对分离结果的影响。
3. 选择合适的流动相：流动相是柱层析分离中的重要组成部分，它对分离效果有很大影响。
选择合适的流动相需要考虑待分离物质的性质、分离机制、柱层析柱的稳定性以及操作要求等因素。
通常选择的流动相是溶解样品的溶液，常用的有水、甲醇、乙腈、醋酸等。
还可以根据需求添加缓冲剂、酸碱调节剂、添加剂等来改善分离效果。
4. 控制流速和压力：在柱层析分离过程中，需要控制流速和压力以保证分离效果和柱层析柱的稳定性。
流速太低会延长分离时间，流速太高则容易导致分离不充分、峰形变宽甚至扩散。
压力过高不仅会降低流体的容积，还可能损坏柱层析柱。
因此，需要根据分离柱的压力限制和分离要求，合理选择和调节流速和压力。
5. 监测记录结果：在进行柱层析分离过程中，需要及时监测并记录分离结果。
可以使用便携式检测仪器如紫外可见光谱仪、荧光检测仪等对柱层析过程进行实时监测。
同时，还需要记录柱层析过程中的相关参数，如流速、压力、峰形、保留时间等，以便分析结果和方法的验证与修改。
6. 注意安全操作：在进行柱层析分离过程中，需要注意安全操作，避免接触或吸入有害物质。
有机物分离与纯化的方法柱层析的一些技巧
有机物分离与纯化的方法柱层析的一些技巧柱层析是有机物分离与纯化中常用的一种方法，它适用于各种有机物分离和纯化的需求，具有操作简单、分离效果好、分离范围广等优点。
以下是柱层析的一些技巧和注意事项：1.选择合适的固定相：柱层析的关键是选择合适的固定相。
固定相应根据有机物的性质选择，例如，非极性化合物可选择疏水性固定相，而极性化合物可选择亲水性固定相。
此外，选择固定相时还需考虑其耐酸碱性、耐溶剂性以及稳定性等因素。
2.预处理样品：在进行柱层析之前，需要对样品进行预处理。
通常，样品需要经过一系列的前处理步骤，如提取、结晶、干燥等，以去除杂质和水分，确保柱层析的准确性和精确性。
3.选择合适的洗脱剂：洗脱剂的选择应根据样品的性质和分离要求进行。
通常，洗脱剂应具有良好的溶解度、流动性和洗脱效果。
此外，还应注意洗脱剂对固定相的稳定性和可逆性的影响。
4.控制流量和压力：柱层析时，通过控制流量和压力来控制洗脱速度。
一般情况下，流速应控制在适当的范围内，以避免样品在柱上停留时间过短或过长，同时还应注意防止柱内压力过高导致流动性降低。
5.分馏收集：柱层析过程中，不同组分的洗脱剂和样品溶液需要分馏收集。
对于挥发性较强的组分，可采用低温收集或短时间收集的方法，以减少组分的损失。
6.调整pH值：一些有机物分离和纯化需要在特定pH条件下进行。
在柱层析前，需要对洗脱剂或样品溶液进行调整，以改变pH值，提高分离效果。
7.重复柱层析：柱层析是一个可重复进行的操作，可以根据需要多次进行柱层析。
在重复柱层析过程中，需要逐步提高洗脱剂的极性或采用不同的洗脱剂组合，以实现更好的分离效果。
8.优化条件：在柱层析过程中，需进行条件优化。
通过调整柱层析的参数，如固定相类型、样品负载量、洗脱剂类型和流速等，以达到最佳分离效果。
9.保护柱层析柱：柱层析柱是一种易损耗的设备，应注意保护。
在使用过程中，应避免受到机械碰撞和高温等有害因素的影响，避免使用过量的洗脱剂和样品负载，以延长柱层析柱的使用寿命。
关于柱层析和TLC之我的体会
关于柱层析和TLC之我的体会柱层析（Column Chromatography）和薄层层析（Thin Layer Chromatography）是化学实验室中常用的分离技术。
我在进行实验中使用过这两种技术，并对它们有一些体会。
首先，柱层析是一种基于溶质在移动相和固定相之间的分配系数差异而进行分离的方法。
它通常使用硅胶或十八烷基化硅胶等填充物填充在玻璃柱中，流动相则根据待分离物的特性选择合适的溶剂。
实验操作中，我发现选择合适的填充物和流动相是非常重要的。
填充物的选择应根据待分离物溶解度、与填充物的亲和力以及分离效果进行考虑。
流动相的选择则应根据待分离物在不同溶剂中的溶解度和移动速度等特性进行合理调配。
同时，控制好柱的压力和流速也是实验中需要注意的点。
在使用柱层析的过程中，我发现分离效果非常好。
由于移动相在柱中下降时会与填充物产生相互作用，待分离物会被束缚在柱中，从而逐步实现分离。
通过连续向柱中加入移动相，待分离物在柱中的停留时间会逐渐增加，分离效果也会逐渐提高。
这使得柱层析在实验室中广泛应用于分离和纯化化合物的工作。
与柱层析不同，薄层层析是一种在薄层硅胶板上进行的分离技术。
在薄层层析中，待分离物溶液通过吸引性法均匀地涂敷在薄层硅胶板上，然后将整个薄层板浸泡在适当的流动相中，流动相的选择也应根据待分离物的特性来定。
实验操作中，我发现在选择溶解液和流动相时需要特别注意其亲和力，以免使待分离物无法充分迁移。
此外，控制好流动相的浓度和温度等因素也是确保薄层层析顺利进行的重要环节。
在使用薄层层析的过程中，我发现分离效果快速且直观。
有时，根据化合物在薄层硅胶板上的沉积位置可以直接判断化合物的相对性质和纯度。
因此，薄层层析在分析物质成分和监测反应进展等方面具有独特的优势。
总的来说，柱层析和薄层层析是实验室中常用的分离技术，它们都具有非常好的分离效果和广泛的适用性。
如果合理选择填充物和流动相，并掌握好相关实验操作技巧，这两种技术都能为化学实验提供有效而准确的帮助。
柱层析分离净化的实验方法和经验总结
柱层析分离净化的实验方法和经验总结柱层析技术也称柱色谱技术。
一根柱子里先填充不溶性基质形成固定相，将混合样品加到柱子上后用特别的溶剂洗脱，溶剂组成流动相。
在样品从柱子上洗脱下来的过程中，根据混合物中各组分在固定向和流动相中的分配系数不同经过多次反复分配，将不同组分逐一分离。
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
根据填充基质和样品分配交换原理不同，离子交换层析，凝胶过滤层析和亲和层析是三种分离混合物的经典层析技术。
1、柱层析操作方法的选择目前，柱色谱分离的操作方式，主要包括常压分离、减压分离和加压分离3种模式。
常压分离是最简单的分离模式方便、简单，但是洗脱时间长。
减压分离尽管能节省填料的使用量，但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发，并且有时在柱子外面会有水汽凝结，以及有些易分解的化合物也难以得到，而且还必须同时使用水泵或真空泵抽气。
加压分离可以加快淋洗剂的流动速度，缩短样品的洗脱时间，是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗液更快洗脱。
压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵等。
2、柱子规格的选择市场上有各种规格的柱层析分离柱。
柱子长了，相应的塔板数就高，分离就好。
目前市场上的柱子，其径高比一般在1: 5～10范围，在实际使用时，填料量一般是样品量的30～40倍，具体的选择要根据样品的性质和含量进行具体分析。
如果所需组分和杂质的分离度较大，就可以减少填料量，使用内径相对较小的柱子(如 2 cm × 20 cm的柱子) ；如果Rf相差不到0.1，就要加大柱子，增加填料量，比如用3 cm内径的柱子。
3、装柱柱层析色谱柱的填装主要有湿法和干法两种，湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等，但溶剂越少越好，不然溶剂就成了淋洗剂了。
柱层析实验报告
一、实验目的1. 了解柱层析的基本原理和操作技术。
2. 掌握利用柱层析分离植物叶片中叶绿素的方法。
3. 通过实验，加深对植物叶绿素成分和结构的认识。
二、实验原理柱层析是一种利用固定相和移动相之间的相互作用，将混合物中的组分进行分离的技术。
本实验采用吸附柱层析法，利用叶绿素能溶于有机溶剂的特性，将植物叶片中的叶绿素提取出来，并通过吸附剂（如氧化铝或硅胶）的吸附作用，使不同成分的叶绿素在柱层析柱中分离。
三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜植物叶片、无水乙醇、硅胶、氧化铝、洗脱剂（如乙酸乙酯）、层析缸、毛细管、烧杯、玻璃棒、滤纸、剪刀、镊子等。
2. 仪器：柱层析柱、抽滤瓶、电子天平、移液器、显微镜等。
四、实验步骤1. 提取叶绿素：将新鲜植物叶片剪碎，加入无水乙醇，用玻璃棒充分研磨，使叶绿素充分溶解。
过滤，收集滤液。
2. 准备柱层析柱：将硅胶或氧化铝均匀铺在柱层析柱底部，用玻璃棒轻轻压紧。
3. 加入样品：用移液器将提取的叶绿素滤液加入柱层析柱，待滤液自然流出。
4. 洗脱：在柱层析柱顶部加入适量洗脱剂，待洗脱剂自然流出。
观察并记录不同颜色成分的流出顺序。
5. 收集分离的叶绿素：将收集到的各组分分别倒入烧杯中，用无水乙醇洗涤，过滤，干燥，得到分离的叶绿素。
五、结果与分析1. 通过柱层析实验，成功分离出植物叶片中的叶绿素，观察到四种主要成分：叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素。
2. 根据实验结果，叶绿素a和叶绿素b在柱层析柱中的吸附能力较强，先被洗脱出来；胡萝卜素和叶黄素吸附能力较弱，后被洗脱出来。
3. 通过观察分离得到的叶绿素，可以进一步了解植物叶片中叶绿素的成分和结构。
六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了柱层析的基本原理和操作技术，为今后进行相关实验奠定了基础。
2. 柱层析是一种有效分离混合物中各组分的色谱技术，广泛应用于植物化学、药物分析等领域。
3. 在实验过程中，注意操作规范，确保实验结果的准确性和可靠性。
有关柱层析的一些心得
有关柱层析的一些心得柱层析是一种分离和纯化化合物的重要技术。
它广泛应用在化学、制药、食品和环境保护等领域。
在柱层析过程中，样品溶液通过填充在柱子内部的吸附剂（例如硅胶、氧化铝等）进行分离和纯化。
在柱层析的过程中，需要注意以下几点：1. 吸附剂的选择。
不同的吸附剂对化合物的选择性不同。
例如，硅胶能与大多数有机物相互作用，因此是最常用的吸附剂之一。
氧化铝则对极性化合物有较强的亲和力。
因此，在柱层析时，需要根据样品的特性选择适合的吸附剂。
2. 溶剂的选择。
柱层析的过程中需要使用适合的溶剂。
溶剂的选择应该考虑到样品的性质，吸附剂的性质以及柱层析的目标。
例如，对于不极性样品，可以使用非极性洗脱溶剂，例如石油醚或乙酸乙酯。
对于极性样品，可以使用极性洗脱溶剂，例如水或甲醇。
但需要注意的是，某些溶剂可能会与吸附剂发生反应，导致柱层析效果不佳。
因此，在选择溶剂时需要谨慎。
3. 样品的准备。
样品的准备对柱层析的效果有很大的影响。
首先，需要保证样品的纯度。
其次，样品需要适合柱层析的特性。
例如，对于大分子化合物，可以需要特定的裂解剂或者柔软剂来保证样品可以流经填充柱。
4. 流速的控制。
流速的控制对柱层析的分离效果有很大的影响。
流速太快会导致分离效果不佳，流速太慢则会增加分离时间。
在实际操作中，需要根据填充柱的完整度和样品的性质确定合适的流速。
5. 分析和监测。
柱层析过程中需要定期监测分离效果。
可以使用紫外线可见光谱、荧光光谱等技术进行分析和监测。
此外，通过对不同分离峰的质量分析和谱图分析，也可以确定目标化合物的纯度和分离效果。
总之，柱层析是一种重要的分离和纯化技术。
在实际操作中需要充分考虑样品的特性、吸附剂的性质、溶剂的选择、流速的控制和分析监测等因素，才能取得优良的分离和纯化效果。
柱层析知识总结
柱层析知识总结★★★★★★小木虫(金币+1):奖励一下，鼓励发有价值的话题xiazanwen(金币+5):辛苦了2010-08-24 06:34:58枫叶子2006:编辑内容2010-10-24 17:10柱层析利用层析柱将混合物各组分分离开来的操作过程称为柱层析。
柱层析是层析技术中的一类，依据其作用原理又可分为吸附柱层析、分配柱层和离子交换柱层析等。
其中以吸附柱层析应用最广。
以下只介绍吸附柱层析的相关问题，其操作方法也可作为其他类型柱层析的参考。
1.吸附柱层析的器材(1)层析柱实验室中所用的玻璃层析柱有两种形式：一是下部带有活塞的玻璃管，活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作的，这样可以不涂真空油脂，以免污染产品。
如果使用普通的玻璃活塞，则真空油脂要小心地涂薄涂匀。
另一种是将玻璃管下端拉细，套上一段弹性良好的管子。
这段管子必须是不能被淋洗剂溶解的，普通橡皮管一般不可充作此用，因为橡皮易被氯仿、苯、THF等溶剂溶胀，而聚乙烯管子对大多数溶剂是惰性的，所以常常使用。
用一只螺旋夹控制流速，此外，薄膜塑料柱因使用方便、节省淋洗剂、减少蒸发量等优点，应用日趋广泛。
薄膜塑料柱总是以扁平成卷保存的，两侧常有很深的折痕。
使用前需将裁取的一段薄膜管一端扎紧，另一端套在一段玻璃管上并用棉线扎紧。
将这段玻璃管穿过一个单孔塞。
然后将薄膜管放进一根又粗又长，下端拉细了的玻璃管内，使塞子塞紧大玻璃管的口。
用水泵自大玻璃管下端抽气，薄膜柱即因内部压强大于外部而自行展圆。
待装入吸附剂后在其下部扎几个小孔即可使用。
层析柱的尺寸根据被分离物的量来确定，其直径与高度之比则根据被分离混合物的分离难易而定，一般在1∶8到1∶50之间。
柱身细长，分离效果好，但可分离的量小，且分离所需时间长；柱身短粗，分离效果较差，但一次可以分离较多的样品，且所需时间短。
如果待分离物各组分较难分离，宜选用细长的柱子，如果要处理大量的较易分离的或对分离纯度要求较低的混合物，则可选用粗而短的柱子。
柱层析技术要点
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。
不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂"走柱子"，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂"走柱子"，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。
干法装柱较方便，但最大的缺陷在于"走柱子"时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。
虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉，但是，一旦撤去压力，如在上样、加溶剂等操作的时候，气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平整地通过，当然也就谈不上分离了。
解决的办法是：第一、硅胶一定要天结实；第二、一定要用较多的溶剂"走柱子"，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。
也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂，防止添加溶剂的时候，使得样品层不再整齐。
但我的感觉是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个必要。
上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。
如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。
干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。
湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头滴管转移得到的溶液，沿着层析柱内壁均匀加入。
柱层析知识总结
柱层析知识总结★★★★★★小木虫(金币+1):奖励一下，鼓励发有价值的话题xiazanwen(金币+5):辛苦了2010-08-24 06:34:58枫叶子2006:编辑内容2010-10-24 17:10柱层析利用层析柱将混合物各组分分离开来的操作过程称为柱层析。
柱层析是层析技术中的一类，依据其作用原理又可分为吸附柱层析、分配柱层和离子交换柱层析等。
其中以吸附柱层析应用最广。
以下只介绍吸附柱层析的相关问题，其操作方法也可作为其他类型柱层析的参考。
1.吸附柱层析的器材(1)层析柱实验室中所用的玻璃层析柱有两种形式：一是下部带有活塞的玻璃管，活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作的，这样可以不涂真空油脂，以免污染产品。
如果使用普通的玻璃活塞，则真空油脂要小心地涂薄涂匀。
另一种是将玻璃管下端拉细，套上一段弹性良好的管子。
这段管子必须是不能被淋洗剂溶解的，普通橡皮管一般不可充作此用，因为橡皮易被氯仿、苯、THF等溶剂溶胀，而聚乙烯管子对大多数溶剂是惰性的，所以常常使用。
用一只螺旋夹控制流速，此外，薄膜塑料柱因使用方便、节省淋洗剂、减少蒸发量等优点，应用日趋广泛。
薄膜塑料柱总是以扁平成卷保存的，两侧常有很深的折痕。
使用前需将裁取的一段薄膜管一端扎紧，另一端套在一段玻璃管上并用棉线扎紧。
将这段玻璃管穿过一个单孔塞。
然后将薄膜管放进一根又粗又长，下端拉细了的玻璃管内，使塞子塞紧大玻璃管的口。
用水泵自大玻璃管下端抽气，薄膜柱即因内部压强大于外部而自行展圆。
待装入吸附剂后在其下部扎几个小孔即可使用。
层析柱的尺寸根据被分离物的量来确定，其直径与高度之比则根据被分离混合物的分离难易而定，一般在1∶8到1∶50之间。
柱身细长，分离效果好，但可分离的量小，且分离所需时间长；柱身短粗，分离效果较差，但一次可以分离较多的样品，且所需时间短。
如果待分离物各组分较难分离，宜选用细长的柱子，如果要处理大量的较易分离的或对分离纯度要求较低的混合物，则可选用粗而短的柱子。
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多数微生物碱性蛋白酶不耐热，碱土金属，特别是钙对碱性蛋白酶有明显的热稳定作用碱性蛋白酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一，在丝绸、制革工业中也有广泛用途热稳定性将酶液分别置于不同的温度条件下（30℃，40℃，50℃，60℃，70℃）保温10min 后，立即在0℃冰浴中冷却，然后在40℃下测碱性蛋白酶活力，以剩余的酶活性作为评价酶的热稳定性的指标。
测量三个重复求平均值，将最高的酶活力定义为100%，分别计算不同温度条件下蛋白酶的剩余酶活性与最高酶活性的比值。
以ph7的缓冲液为例,如果你的目标蛋白等电点小于7,呢就带负电荷,用阴离子交换的柱子,如果是大于7,那选择阳离子交换的柱子,如果等电点是7,那上样的缓冲液pH大于它的等电点用阴离子,小于7的用阳离子,如此类推就可以缓冲液的PH＝pI值＋1，上阴离子柱，＝pI值－1，上阳离子柱，一般缓冲液ph范围在6.5～8.5之间，与PI值相差1个PH是比较理想的。
如果不清楚PI值，可以将蛋白溶到PH梯度的缓冲液里，然后分别试阳离子和阴离子填料（50ul左右得体积就够了），看那个PH下挂得好。
强离子交换剂: 在宽pH范围内载量稳定，所以他的优点是不同pH下载量恒定，可控性好，平衡过程快速、简单。
弱离子交换介质的缺点：适用的pH范围比较小，随着pH不同载量发生变化。
但是大部分蛋白等电点在5.5 ~ 7.5 。
因此强/弱离子交换介质都可以使用弱离子交换介质（DEAE、ANX、CM)优点在于：和强离子交换介质的选择性不同，因此我们一般先使用强离子交换，如果优化条件还是达不到理想的分离效果，可以尝试弱离子交换，用选择性不同的介质尝试一下。
因此弱离子交换与强离子交换由于选择性不同，可以说是对不同蛋白的结合力有差异。
S技术规格离子交换剂类型Q Sepharose FF 季氨基，强阴离子DEAE Sepharose FF 二乙基氨基乙基，弱阴离子ANX Sepharose 4FF 二乙基氨基丙基，弱阴离子SP Sepharose FF 磺丙基，强阳离子CM Sepharose FF 羟甲基，弱阳离子离子容量Q Sepharose FF 0.18-0.25mmol（Cl-）/mlDEAE Sepharose FF 0.11-0.16mmol（Cl-）/mlANX Sepharose 4 FF 0.13-0.18mmol（Cl-）/mlSP Sepharose FF 0.18-0.25mmol（H+）/mlCM Sepharose FF 0.09-0.13mmol（H+）/ml动态载量Q Sepharose FF 120mg HSA/ml 填料DEAE Sepharose FF 110mg HSA/ml 填料ANX Sepharose 4 FF 5mg 甲状腺球蛋白/ml 填料SP Sepharose FF 70mg RNAase/ml 填料CM Sepharose FF 50mg RNAase/ml 填料压力/流速Q Sepharose FF 400-700cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cmDEAE Sepharose FF 300-600cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cmANX Sepharose 4 FF 至少200cm/h，100kpa，XK50/60层析柱，柱床高25cmSP Sepharose FF 400-700cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cmCM Sepharose FF 300-600cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm平均颗粒大小 90um（45-165um）基质Sepharose FF 高度交联琼脂糖，6%Sepharose 4 FF 高度交联琼脂糖，4%PH稳定性Q Sepharose FF 1-14（短期），2-12（长期）DEAE Sepharose FF 1-14（短期），2-13（长期）ANX Sepharose 4 FF 2-14（短期），3-13（长期）SP Sepharose FF 3-14（短期），4-13（长期）CM Sepharose FF 2-14（短期），4-13（长期）化学稳定性在所有常用的水溶液缓冲液中稳定：8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH和1M醋酸20%乙醇（Q , DEAE,ANX,CM ）,含0.2M醋酸钠的20%乙醇（SP）保存保存温度4℃-30℃l 1M NaOH和醋酸仅在清洗时使用Phenyl-Sepharose HP产品名称：苯基-琼脂糖凝胶6FF性状：白色微球凝胶类型：疏水层析介质粒径：45-165µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，快流速，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：苯基-琼脂糖凝胶H.P.性状：白色微球凝胶类型：疏水层析填料粒径：24-44µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，高分辨率，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：苯基-琼脂糖凝胶CL-4B性状：白色微球凝胶类型：疏水层析填料粒径：45-165µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等。
产品名称：丁基-琼脂糖凝胶4FF性状：白色微球凝胶类型：疏水层析介质粒径：45-165µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，快流速，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：丁基-琼脂糖凝胶H.P.性状：白色微球凝胶类型：疏水层析介质粒径：24-44µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，高分辨率，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：丁基-琼脂糖凝胶4B性状：白色微球凝胶类型：疏水层析介质粒径：45-165µm工作PH值：4-8应用：疏水层析介质，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：辛基-琼脂糖凝胶4FF性状：白色微球凝胶类型：疏水层析介质粒径：45-165µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，快流速，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：辛基-琼脂糖凝胶H.P.性状：白色微球凝胶类型：疏水层析介质粒径：24-44µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，高分辨率，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称：辛基-琼脂糖凝胶CL-4B性状：白色微球凝胶类型：疏水层析介质粒径：45-165µm工作PH值：3-13应用：疏水层析介质，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等HPLC内容：1、反相柱子：一般适用范围比较大。
分离极性比较小的物质。
极性强的物质先出柱。
ODS就是C18柱子。
RP-8和RP-18分别是C18柱子和C8柱子。
C18柱子和C8柱子是柱子的碳链的长度不一样的。
碳链增长了,也增加了键合相的非极性作用的面积,对保留值和选择性都有影响,随烷基碳链的增长对溶质分离的选择性也增强了.但是对单一或简单组分确实看不出太大区别。
2、正相柱子：一般分离光学异构体和反相柱子不能分离的极性比较大的物质。
APS为NH2柱子另外diol 代表的是球形硅胶邻二羟基丙基醇基柱，正相柱，极性强的物质后出。
硅胶柱子的特点是可分离异构体，柱子的载样量大，用于制备分离，不污染收集的流分了，缺点是分析应用不方便，如流动相的含水量应该严格控制，再现性较差，需较长的平衡时间，不适用于梯度洗脱。
碱性化合物在氨基和二醇柱上的保留强，而偶极化合物在腈基柱子上的保留强。
建议您看看色谱分析等专业书籍有帮助的。
ODS-AODS-A液相色谱柱是国际上是销售最好的一种传统色谱柱，同时也是HPLC中应用最广泛的应用。
YMC ODS-A液相色谱采用高度封端的表面结构和具有适当的疏水性，广泛地应用于多种化合物的分离。
在严格质量控制体系下，对50个以上的参数进行严格控制，保证了稳定的质量。
其通常作为液相色谱标准柱。
ODS-AMODS-AM液相色谱柱是一种高碳含量的C18柱，具有和ODS-A液相色谱柱相似的选择性。
二者的主要区别是ODS-AM液相色谱柱采用的是专利的封端技术，采用十分严格的生产技术规范，可提供优良的峰对称性和更高分离效果的重现性，从而改善较难分离组分的峰形。
ODS-AQODS-AQ液相色谱填料具有中等强度的疏水性和氢键键合相色谱填料，由于其具有相对高的疏水性，其与ODS-A相比有不同的保留行为，其主要用于碳水化合物的分离，如寡聚多糖类、葡萄糖苷类、药物和天然化合物的分离。
ODS-ALODS-AL液相色谱柱不仅具有疏水基团的相互作用，而且还具备由硅醇基产生的第二级相互作用，这使其与传统的ODS不同的选择性。
当离子间相互作用被优化后，特别推荐用于流动相中含有缓冲液的色谱分离，可以获得高重现性的色谱图。
YMC-Pack ODS-AL液相色谱柱采用的是没有封端的高碳含量单层C18相，其只能在残存的硅醇基活性有利于色谱分离时使用，由于容易发生拖尾峰，不推荐在分析胺类或含碱性基团的化合物中使用。
ODS H80, M80, L80ODS液相色谱填料是一种以硅胶为载体的三种配基覆盖率不同的ODS填料，不同配基覆盖率将影响馏出物中疏水组分的保留行为，馏出物的官能基团或三级结构将决定分离行为的结果。
J'sphere ODS液相色谱填料几乎不需要考虑疏水性和氢键键合相之间的相互作用，如离子或相互作用，其多用于分离条件的测定。
色谱柱考虑的问题首先是填料的问题，大多数用于HPLC分离的柱填料使用硅胶填料，基于多孔聚合物担体与键和的有机表层（如C18＆C8），应用范围较广，颗粒的大小（粒度）在HPLC中极为重要，约5um 的微粒直径兼顾了分析柱的柱效，反压和寿命。
更小的多孔微粒对快速分离很有用。
小至1.5um的薄壳微粒对极快速地分离蛋白质等大分子较有用。
较窄地粒度分布能保证填充床地稳定、高效和压力降最小。
总的来说，3或5um全多孔微球填充HPLC色谱柱，能满足大多数分离地需要。
色谱柱地性能指标主要考虑：理论塔板数，峰不对称因子（AS），两种不同溶质地选择性，色谱柱地反压，保留值地重现性，键和相浓度，色谱柱地稳定性。
有几点看法:1)本人认为,C18是连接了18烷基碳链的反相固定相的总称.ODS 是以硅胶为基质键合的C18填料,而C18还包括其他基质的填料,比如高聚物小球为基质,氧化铝为基质,氧化锆为基质等键合C18链形成的反相固定相,这些可以称为"C18",但是不是ODS.2)RP- 18也是C18中的一种,不同的公司对C18填料有不同的商业名称,本质应该都是一样的.Merck公司的填料喜欢叫RP-18. 比如Merck 的LiChrospher RP-18, Superspher RP-18,Purospher RP-18. 因此,我认为说"RP-18"是改进型的不妥当.Merck的改进表现在前边的名字上,比如LiCHrospher, Superspher, Purospher表现的是不同的性能.3) "普通ODS分析酸性、中性或弱碱性化合物时均可以获得较佳的峰不对称度。