层析柱的一些总结
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多数微生物碱性蛋白酶不耐热，碱土金属，特别是钙对碱性蛋白酶有明显的热稳定作用
碱性蛋白酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一，在丝绸、制革工业中也有广泛用途
热稳定性将酶液分别置于不同的温度条件下（30℃，40℃，50℃，60℃，70℃）保温10min 后，立即在0℃冰浴中冷却，然后在40℃下测碱性蛋白酶活力，以剩余的酶活性作为评价酶的热稳定性的指标。测量三个重复求平均值，将最高的酶活力定义为100%，分别计算不同温度条件下蛋白酶的剩余酶活性与最高酶活性的比值。
以ph7的缓冲液为例,如果你的目标蛋白等电点小于7,呢就带负电荷,用阴离子交换的柱子,如果是大于7,那选择阳离子交换的柱子,如果等电点是7,那上样的缓冲液pH大于它的等电点用阴离子,小于7的用阳离子,如此类推就可以
缓冲液的PH＝pI值＋1，上阴离子柱，＝pI值－1，上阳离子柱，一般缓冲液ph范围在6.5～8.5之间，与PI值相差1个PH是比较理想的。
如果不清楚PI值，可以将蛋白溶到PH梯度的缓冲液里，然后分别试阳离子和阴离子填料（50ul左右得体积就够了），看那个PH下挂得好。
强离子交换剂: 在宽pH范围内载量稳定，所以他的优点是不同pH下载量恒定，可控性好，平衡过程快速、简单。
弱离子交换介质的缺点：适用的pH范围比较小，随着pH不同载量发生变化。但是大部分蛋白等电点在5.5 ~ 7.5 。因此强/弱离子交换介质都可以使用
弱离子交换介质（DEAE、ANX、CM)优点在于：和强离子交换介质的选择性不同，因此我们一般先使用强离子交换，如果优化条件还是达不到理想的分离效果，可以尝试弱离子交换，用选择性不同的介质尝试一下。
因此弱离子交换与强离子交换由于选择性不同，可以说是对不同蛋白的结合力有差异。S
技术规格
离子交换剂类型
Q Sepharose FF 季氨基，强阴离子
DEAE Sepharose FF 二乙基氨基乙基，弱阴离子
ANX Sepharose 4FF 二乙基氨基丙基，弱阴离子
SP Sepharose FF 磺丙基，强阳离子
CM Sepharose FF 羟甲基，弱阳离子
离子容量
Q Sepharose FF 0.18-0.25mmol（Cl-）/ml
DEAE Sepharose FF 0.11-0.16mmol（Cl-）/ml
ANX Sepharose 4 FF 0.13-0.18mmol（Cl-）/ml
SP Sepharose FF 0.18-0.25mmol（H+）/ml
CM Sepharose FF 0.09-0.13mmol（H+）/ml
动态载量
Q Sepharose FF 120mg HSA/ml 填料
DEAE Sepharose FF 110mg HSA/ml 填料
ANX Sepharose 4 FF 5mg 甲状腺球蛋白/ml 填料
SP Sepharose FF 70mg RNAase/ml 填料
CM Sepharose FF 50mg RNAase/ml 填料
压力/流速
Q Sepharose FF 400-700cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm
DEAE Sepharose FF 300-600cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm
ANX Sepharose 4 FF 至少200cm/h，100kpa，XK50/60层析柱，柱床高25cm
SP Sepharose FF 400-700cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm
CM Sepharose FF 300-600cm/h，100kpa，XK50/30层析柱，柱床高15cm
平均颗粒大小 90um（45-165um）
基质
Sepharose FF 高度交联琼脂糖，6%
Sepharose 4 FF 高度交联琼脂糖，4%
PH稳定性
Q Sepharose FF 1-14（短期），2-12（长期）
DEAE Sepharose FF 1-14（短期），2-13（长期）
ANX Sepharose 4 FF 2-14（短期），3-13（长期）
SP Sepharose FF 3-14（短期），4-13（长期）
CM Sepharose FF 2-14（短期），4-13（长期）
化学稳定性
在所有常用的水溶液缓冲液中稳定：8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH和1M醋酸20%乙醇（Q , DEAE,ANX,CM ）,含0.2M醋酸钠的20%乙醇（SP）
保存
保存温度4℃-30℃
l 1M NaOH和醋酸仅在清洗时使用
Phenyl-Sepharose HP
产品名称：苯基-琼脂糖凝胶6FF
性状：白色微球
凝胶类型：疏水层析介质
粒径：45-165µm
工作PH值：3-13
应用：疏水层析介质，快流速，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等
产品名称：苯基-琼脂糖凝胶H.P.
性状：白色微球
凝胶类型：疏水层析填料
粒径：24-44µm
工作PH值：3-13
应用：疏水层析介质，高分辨率，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等
产品名称：苯基-琼脂糖凝胶CL-4B
性状：白色微球
凝胶类型：疏水层析填料
粒径：45-165µm
工作PH值：3-13
应用：疏水层析介质，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等。
产品名称：丁基-琼脂糖凝胶4FF
性状：白色微球
凝胶类型：疏水层析介质
粒径：45-165µm
工作PH值：3-13
应用：疏水层析介质，快流速，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等
产品名称：丁基-琼脂糖凝胶H.P.
性状：白色微球
凝胶类型：疏水层析介质
粒径：24-44µm
工作PH值：3-13
应用：疏水层析介质，高分辨率，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等
产品名称：丁基-琼脂糖凝胶4B
性状：白色微球
凝胶类型：疏水层析介质
粒径：45-165µm
工作PH值：4-8
应用：疏水层析介质，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等
产品名称：辛基-琼脂糖凝胶4FF
性状：白色微球
凝胶类型：疏水层析介质
粒径：45-165µm
工作PH值：3-13
应用：疏水层析介质，快流速，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等
产品名称：辛基-琼脂糖凝胶H.P.
性状：白色微球
凝胶类型：疏水层析介质
粒径：24-44µm
工作PH值：3-13
应用：疏水层析介质，高分辨率，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等