第二章 植物组织培养室的设施
植物组织培养实验室设计方案
植物组织培养实验室设计方案一、引言植物组织培养实验室是进行植物细胞、组织和器官培养的重要场所，为了满足实验需求，提高实验效率和准确性，本设计方案旨在设计一个符合实验要求、安全可靠的植物组织培养实验室。
二、实验室布局设计1. 实验室总体布局根据实验室的功能需求，将实验室分为几个功能区域，包括无菌操作区、培养室、洗涤区、储存区等。
合理规划各区域的位置和面积，确保实验操作的顺利进行。
2. 无菌操作区无菌操作区是进行细胞和组织培养的核心区域，应设立在实验室的中央位置。
该区域应配备无菌工作台、显微镜、培养箱等设备。
无菌工作台应具备紫外线杀菌功能，确保操作的无菌性。
3. 培养室培养室是用于植物培养和生长的区域，应保持适宜的温度、湿度和光照条件。
设备方面，应配置恒温恒湿培养箱、培养槽、培养箱等设备，以满足不同植物的生长需求。
4. 洗涤区洗涤区是用于清洗实验器材和培养物的区域，应设立在实验室的边缘位置，避免与其他区域交叉污染。
该区域应配备洗涤槽、超声波清洗器等设备，保证器材的洁净度。
5. 储存区储存区是用于存放实验所需试剂、培养基和仪器设备的区域，应设立在实验室的一侧，便于管理和取用。
该区域应配备试剂柜、培养基冰箱、冷冻柜等设备，确保试剂和培养基的保存质量。
三、实验室设备和器材1. 无菌工作台无菌工作台是进行无菌操作的核心设备，应具备紫外线杀菌和高效过滤功能，确保操作的无菌性。
同时，还应配备显微镜、移液器、无菌培养皿等器材，以满足实验需求。
2. 培养箱和培养槽培养箱和培养槽是用于植物的生长和培养的设备，应具备恒温恒湿和光照控制功能，以模拟植物生长的自然环境。
同时，还应配备合适的培养基、植物激素等试剂，以促进植物生长和发育。
3. 洗涤设备洗涤设备包括洗涤槽、超声波清洗器等，用于清洗实验器材和培养物。
洗涤槽应具备温控功能，以提高清洗效果。
超声波清洗器能够通过超声波振动，快速清洗器材表面的污垢。
4. 储存设备储存设备包括试剂柜、培养基冰箱、冷冻柜等，用于存放试剂、培养基和其他实验所需物品。
植物组织培养实验室的组成仪器设备及基本操作
植物组织培养实验室的组成仪器设备及基本操作1. 引言植物组织培养实验室是进行植物细胞培养、植物组织培养和植物遗传转化等研究工作的重要场所。
该实验室的组成仪器设备和基本操作对于顺利进行植物组织培养实验至关重要。
本文将详细介绍一个典型的植物组织培养实验室的组成仪器设备及其基本操作。
2. 仪器设备2.1. 无菌操作台无菌操作台是植物组织培养实验室中最关键的设备之一，用于保持操作区域的无菌条件。
它通常由一个工作台和一个无菌工作区组成。
无菌操作台配备了紫外线灯和高效过滤器，可以杀灭空气中的微生物，并防止外界空气中的微生物进入无菌工作区。
2.2. 培养箱培养箱是用于培养和生长植物组织的设备。
它可以提供恒温、恒湿和光照条件，从而满足不同植物组织培养实验的要求。
培养箱通常配备了温度控制器和湿度控制器，可以精确地控制环境参数。
2.3. 培养基配制设备在植物组织培养实验中，需要制备不同种类的培养基用于培养和生长植物组织。
培养基配制设备包括天平、培养基配制器和pH计。
天平用于精确称量各种培养基成分的质量，培养基配制器用于自动配制培养基，pH计用于测量培养基的酸碱度。
2.4. 高压灭菌器高压灭菌器用于对实验室的培养器具、培养基和试剂进行高温高压的灭菌处理。
灭菌是植物组织培养实验的基本操作之一，可以有效杀灭培养器具和培养基中的微生物，保证实验的无菌性。
2.5. 显微镜显微镜是用于观察和分析植物组织培养过程中的细胞和组织结构的设备。
它可以放大样本，使研究人员能够观察细胞中的微小结构。
显微镜通常配备了不同倍数的物镜和目镜，以满足不同观察需求。
2.6. 高速离心机高速离心机用于分离植物组织培养中的混合物。
在植物组织培养实验中，常常需要将悬浮细胞和培养基分离以获得纯净的细胞。
高速离心机通过离心力将混合物中的悬浮细胞沉降到管底，从而实现分离的目的。
3. 基本操作3.1. 灭菌操作在进行植物组织培养实验之前，必须对实验室的培养器具、培养基和试剂进行灭菌处理，以确保实验的无菌性。
植物组织培养设备及条件
光照设备：提供植物生 长所需的光照
温度控制系统：控制培 养箱内的温度，保持恒
定
培养基制备设备：制备 培养基，包括培养基的
配制、灭菌等
灭菌设备
高压灭菌 锅：用于 培养基、 器皿、工 具等灭菌
紫外灯： 用于培养 室、操作 台等空间 灭菌
酒精灯： 用于培养 基、器皿、 工具等灭 菌
超净工作 台：用于 培养基、 器皿、工 具等灭菌
培养环境控制
温度：植物组织 培养的最佳温度 为25-30℃
光照：植物组织 培养的光照强度 为2000-3000勒 克斯
湿度：植物组织 培养的湿度为7080%
气体：植物组织 培养的气体成分 为氧气和二氧
恒温培养箱：提供稳定的温度条件，保证 植物组织的正常生长
显微镜：观察植物组织的生长和发育情 况，进行细胞学研究
培养设备
培养箱：提供稳定的温度、 湿度和光照条件
气体交换设备：提供植物 生长所需的氧气和二氧化
碳
湿度控制系统：控制培养 箱内的湿度，保持恒定
培养瓶：用于培养植物 组织，包括培养基、培
养液等
植物组织培养设备及条件
汇报人：
植物组织培养设备 植物组织培养条件
植物组织培养设备
实验室设备
培养箱：用于培养植物组织，提供适宜的 温度、湿度和光照条件
超净工作台：提供无菌环境，防止植物 组织受到污染和感染
光照培养箱：提供光照条件，促进植物 组织的生长和发育
离心机：用于分离植物组织中的细胞和 细胞器，提高培养效率
培养条件
温度：植物组织培养的温度一般在20-30℃之间，不同植物种类和培养阶段对温度的要求不同。
光照：植物组织培养的光照强度和光照时间对植物生长和分化有重要影响，一般采用人工光源 进行光照。
植物组织培养实验室组成仪器设备及基本操作
显微镜的使用方法包括样品 制备、观察和拍照等。
显微镜的维护和保养包括清 洁、校准和更换灯泡等。
摇床
作用：用于培 养植物组织， 促进细胞分裂
和生长
结构：主要由 底座、摇杆、 摇板、夹具等
组成
操作方法：将 植物组织放入 摇板，调整摇 杆高度，设定 转速和时间，
开始摇动
注意事项：摇 动过程中避免 剧烈震动，以 免影响植物组
结构：主要由箱体、加热器、制冷器、加湿器、光照系统等组成
操作：设置温度、湿度、光照等参数，将植物组织培养材料放入培养箱，定期观察并记录生 长情况
注意事项：保持培养箱清洁，定期更换培养基，避免污染和交叉污染。
灭菌锅
作用：对培养基、 器皿等进行灭菌 处理
原理：利用高温 蒸汽对培养基、 器皿等进行灭菌 处理
细胞培养与观察
培养基的制备：选择合适的培养基，按照配方进行配制
细胞接种：将细胞接种到培养基中，进行培养
细胞观察：使用显微镜观察细胞生长情况，记录细胞形态和生长速度
细胞分离与纯化：使用细胞分离技术，如差速离心法、流式细胞术等， 将细胞进行分离和纯化
细胞培养条件的优化：调整培养条件，如温度、pH值、气体环境等， 以获得最佳的细胞生长效果
恒温水浴锅：用于加热 和冷却培养基
03
基本操作流程实验准备准备培养基： 选择合适的培 养基，如MS培 养基、B5培养
基等
准备培养皿： 选择合适的培 养皿，如玻璃 培养皿、塑料
培养皿等
准备无菌操作 台：确保操作 台无菌，避免
污染
准备培养室： 确保培养室温 度、湿度、光 照等条件适宜，
避免污染
组织取材与消毒
止污染和感染
试剂：如激素、抗生素 等，用于调节植物组织
植物组织培养实验室组成仪器设备及基本操作精要
大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、 Mg、S 分别占植物干重的百分数为18％、 10％、70％、0.3%、0.07％、0.3%、0.3 ％、0.07%、0.05％。
微量元素：Fe、B、Mn、Zn、Mo、Cu、 Co、Cl等。
微量元素中，铁的用量较大，它对叶绿 素的合成起重要作用，由于在较高pH下， FeCl3极易形成Fe（OH）3沉淀，难以被 吸收，所以多用乙二胺四乙酸二钠盐与 硫酸亚铁形成的螯合物，并且单独配制。
（二）有机成分：
主要包括各种维生素和氨基酸
常用的维生素：硫胺素（VB1）、吡哆醇（VB6）、烟酸 （VB3）、泛酸钙（VB5）、生物素、钴胺素（VB12）、叶 酸等。
c.不少培养基颜色加深。
d.体积和浓度有所变化。
e.营养成分有时受到破坏。
3、不耐高温材料的灭菌：
采用过滤灭菌，如IAA、ZT、天然有机 添加物等。
4、外植体的表面灭菌：
采用70－75％乙醇（10-30秒）、有效 氯1％的次氯酸钠（5-30分钟）、0.1－ 0.2%的氯化汞（2-15分钟）等杀菌剂中加 入几滴吐温－20或80（Tween－20或80） 效果较好。
37.3
组成成分
FeSO4·7H2O CuSO4·5H2O
蔗糖
pH 肌醇 烟酸 盐酸吡哆醇 激动素 2,4－D 盐酸硫铵
数量(mg/l) 27.8 0.025 40 5.5 100 1.0 1.0 0.1
0.1－1.0 10
表3 N6培养基的组成和配方
组成成分
KNO3 CaCl2·2H2O MgSO4·7H2O KH2PO4 (NH4)2SO4 KI
植物组织培养所用器具
组织培养过程中所用到的用具在植物组织培养过程中，使用的用具类型多样，如培养基配置用具、培养用具、接种用具等。
在使用这些用具时，必须了解它的基本用途并学会它们的基本用法。
1、培养基配置用具（1）烧杯用于盛放、溶解化学药剂等，常用的规格有50ml、100ml、200ml、250ml、500ml、1000ml等。
（2）容量瓶用于配制标准溶液，常用的规格有50ml、100ml、500ml、1000ml 等。
（3）量筒用于量取一定体积的液体，常用的规格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml等。
（4）刻度移液管用于量取一定体积的液体，常用的规格有1ml、5ml、10ml、20ml等。
（5）吸管用于吸取液体，调节培养基的pH值及溶液定容时使用。
（6）玻璃棒用于溶解化学药剂时搅拌时用。
2、培养用具（1）试管植物组织培养中常用的一种玻璃器皿，适合少量培养基及实验不同配方用。
选用1.0cm*15cm和3.0cm*20cm规格的试管。
（2）三角瓶植物组织培养中常用的培养容器，适合各种培养，如固体培养或液体培养，大规模或一般的少量培养。
规格有50ml、100ml、150ml、200ml、500ml等，其口径均为25mm。
三角瓶的好处是采光好，瓶口较小不易失水。
3、接种用具（1）酒精灯用于金属接种工具的灭菌。
（2）手持喷雾器盛装70%的酒精，用于接种器材、外植体和操作人员手部等的表面灭菌。
（3）镊子使用于转移外植体和培养物，接种操作及继代培养时移取织物材料用。
（4）剪刀用于剪取外植体材料及接种时用。
3、小型器具移液枪用于配制培养基时添加各种母液及吸取定量植物生长调节物质溶液。
有固定式和可变式两种，规格有25、100、500、1ml、5ml、10ml。
微波炉、电炉等加热器具用于加热生化试剂时，溶解琼脂。
4、仪器（1）酸度计植物组织培养基的pH值的调整十分重要。
因此，配制培养基时，需要用酸度计来测定和调整pH值。
第2章植物组织培养的设备与培养条件
试管——特别适合于用少量培养基及试验各种不同配方 时选用，在茎尖培养及花药和单子叶植物分化长苗培 养时更显方便。有圆底的和平底的两种。 三角瓶——是植物组织培养中最常用的培养器皿，适合 于各种培养，固体或液体、大规模或小规模都行。 其优点是：采光好、瓶口较小不易失水和污染。 L形管和T形管——为专用的旋转式液体培养试管。 培养皿——适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培 养和无菌发芽。 角形培养瓶和圆形培养瓶——适于液体培养用。 果酱瓶或罐头瓶——常用于试管苗大量繁殖，200ml500ml规格 太空玻璃杯——可机械化洗瓶，适于工厂化生产
（3）磨口瓶 用于存装试剂、分装母液。 （4）滴瓶 盛装酸液（1N盐酸和1N氢氧化钠） （5）锅具：配置和熬制培养基
2.2.1.3计量容器 （1）容量瓶：培养基配置时定容 （2）移液管和移液枪 （3）量筒、量杯
2.2.2器械用具 组织培养所需要的器械用具，可选 用医疗器械和微生物实验所用的 器具。常用的器械用具如图： （1）镊子：可用于接种和转移植 物材料 （2）剪刀：一般在转移植株时用。 （3）解剖刀： （4）显微接种工具：包括接种针、 接种钩及接种铲，用来接种花药 或转移植物组织。
（1）功能：植物材料的灭菌、接种以及培养 物的继代转接等。 （2）仪器设备及用品： 超净工作台，紫外灯、小推车、搁架、接种 工具（各种镊子、解剖刀、手术剪、普通 剪刀接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌 过滤器等），紫外灯，换气扇，空调。
超净工作台
接种工具
无菌操作室消毒的方法： 照射灭菌： 紫外灯， 15—20分钟（接种前） 熏蒸灭菌 ：甲醛加高锰酸钾（定期）（一般 每立方米用甲醛2mL、高锰酸钾1g。 ） 超净工作台的消毒方法： 每次接种前，用70%酒精药棉擦拭台面。
第二章——植物组织培养实验室
D、金属用品洗涤
金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤（新的可以用热洗衣粉水 洗净），需要清洗时，一般用酒精擦洗，然后火焰干燥。
E、除菌过滤器
除菌过滤器用清水冲洗后，用洗液冲洗，再用清水冲洗，最后 用蒸馏水冲洗，晾干备用
（二）灭菌技术
1.灭菌工作是极其重要的。
首先应建立有菌和无菌的概念有菌的范畴： 有菌：凡是暴露在空气中的物体，至少其表面都是有菌的。如植物的表面、 超净工作台的台面，未处理的工具和手等。 无菌：高压高温处理（工具、器皿、培养基等）如：火烤后的物体；
（二）药品贮存和配制仪器设备
1.冰箱 • 作用：低温保存材料，存放药品、
培养基母液、激素、酶制剂。
2.天平
• 陈列于制备室中 • 作用：称取大量元素、微量元素、
酶制剂
3.酸度计
• 陈列于制备室中 • 作用：测定培养基及酶制剂的pH值
PHS-802中文台式酸度计
通用型或经济型酸度计
（三）观察分析仪器设备
5.摇床和旋转床
• 进行液体培养时用以改善气体状况
小型臭氧发生器
不锈钢蒸馏水器（单蒸水）
三、玻璃器皿及用具
（一）玻璃器皿 1.培养器皿 培养用的：试管、三角瓶、培养皿等 2.分注器 类型：注射器式分注器、漏斗式分注器、
量筒漏斗式分注器 3.其他玻璃仪器 烧杯、量筒、移液管、容量瓶、试剂瓶等
植物组织培养设备及条件
第一节 实验室设计及基本技术 第二节 植物组织培养所要求的环境条件
第一节 实验室设计及基本技术
一、实验室组成
二、仪器设备
三、培养器皿及实验用具
四、洗涤技术
五、灭菌技术 六、无菌操作
一、实验室组成
组织培养实验室布局的总体要求
便于隔离 便于操作
便于灭菌
便于观察
准备室
缓冲室
器官建成。
Arnon和Stout（1939）提出的确定植物必需营养元素的3个 标准:
A、缺乏该元素，植物生育发生障碍，不能完成其生活史;
B、缺乏该元素，就表现为专一的病症，且这种缺素症可以用补充
该元素来预防和恢复;
C、该元素在植物营养生理上表现直接的效果，而不是由于土壤的
物理、化学、微生物条件的变化而产生的间接效果。
第二节
植物组织培养所需的环境
条件及营养成分
一、环境条件 与自然条件一样，组织培养中的外植体的生长要受到
温度、光照、湿度等各种物理条件，不同培养基组成、pH
值、渗透压等各种化学条件，以及外植体部位、大小、细胞
密度等各种生物条件等环境条件的影响。如何根据需要来控
制培养条件是组织培养中的一个重要问题。
温度 光照 环 境 条 件
培养基的支持物—琼脂（固体培养时的固化剂，低于40度为凝 胶，6-10g/L），玻璃纤维、滤纸桥、海绵、脱脂棉、卡拉胶等， 总的要求是降低培养材料产生的有害物影响 抗生素----卡那霉素、头孢、青霉素、链霉素、庆大霉素等， 520mg/L，防止菌类污染。 活性炭---吸附培养基中的杂质、酚、醌类、灭菌副产物等， 0.510g/L
硼与蛋白质合成、糖类运输有着密切的关系 铜是某些氧化酶的成分，能够促进离体根的生长 锰参与植物的光合、呼吸代谢 钼参与氮素的代谢 氯是光合作用水光解的活化剂 微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激 活剂参与代谢的调节。
植物组织培养实验室构建
植物组织培养实验室构建概述植物组织培养实验室是进行植物细胞培养、愈伤组织培养、植物遗传转化等实验的重要场所。
建立一个高效的植物组织培养实验室对于开展植物生物技术研究至关重要。
本文将介绍植物组织培养实验室的构建步骤及相关设备和操作流程。
步骤1. 确定实验室位置植物组织培养实验室应设置在通风良好、光线充足的环境中，并且远离其他实验室以避免交叉污染。
实验室的位置选择也应考虑到未来扩建或改造的可能性。
2. 设计实验室布局实验室布局应合理，设备摆放应符合操作流程，同时要考虑实验室的通风、安全和卫生条件。
实验台、培养室、设备间等区域的划分要清晰明了。
3. 购置必要设备植物组织培养实验室需要配备必要的设备，包括无菌工作台、培养箱、显微镜、离心机、恒温培养箱等。
设备的选择应考虑实验需求和预算。
4. 保障实验室安全实验室安全是第一位的，必须确保实验室的电路、水源等设备安全可靠，设备操作人员应接受相关安全培训，并且定期进行检查和维护。
5. 制定实验操作规程建立完善的实验操作规程是保证实验结果准确可靠的关键。
制定实验操作规程时应考虑到每个操作步骤的细节，包括消毒步骤、培养条件控制等。
6. 建立实验室管理制度建立实验室管理制度有利于实验室的日常管理和运行。
管理制度包括实验室卫生、设备维护、实验记录等方面，确保实验室的正常运转。
操作流程1.准备工作–检查实验室设备是否正常运转。
–准备培养基、试剂和实验器具。
2.植物组织采集–从健康植物中采集需要的组织。
–进行消毒处理。
3.组织培养–将组织放入无菌条件下的培养基中进行培养。
–控制培养条件，如温度、光照等。
4.植物遗传转化–遗传工程操作，将外源基因导入植物组织中。
–过筛、筛选转化株。
5.结果分析–观察转化效果，记录实验数据。
–分析实验结果，撰写实验报告。
结论建立一个高效的植物组织培养实验室需要全面考虑实验室的位置选择、布局设计、设备购置等方面。
制定操作规程、建立管理制度是保证实验室运行的基础。
植物组织培养设备及条件课件PPT
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根据植物体内含量多少，可把这些元素分为 ※大量营养元素：占干物质重量的0.1%以上；C、H、O、N、P、K、 Ca、Mg、S等9种 ※微量营养元素：占干物质重量的0.1%以下，有的只含0.1mg/kg，
Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等7种
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Mg、S、Ca是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂，对核 蛋白体结构具有稳定作用；
S是含S氨基酸的蛋白质的组成成分。
Ca是构成细胞壁的成分，对细胞分裂，稳定质膜结构有显著 作用，此外，Ca及钙调素在细胞信号转导中起重要作用。
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2、微量元素
在微量元素中，铁的使用最大： ◆一些氧化酶的组成成分 ◆叶绿素形成的必要条件 ◆使用乙二胺四乙酸铁（EDTA-Fe）鳌合物防止铁的沉淀
倒置显微镜
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电子天平 （0.0001g， 0.001g）
酸度计
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三、培养器皿及实验用具
1、玻璃器皿
三角瓶 培养皿 培养瓶
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2、金属材质用具
接种针 镊子 解剖刀
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（二）各类器皿
1．器皿的类型 （1）培养器皿
三角瓶、培养瓶、圆形培养瓶、试管、
备用
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常用消毒剂消毒灭菌比较表
消毒剂
使用浓度 （%）
去除难易
消毒时间 （min）
效果
次氯酸钙 次氯酸钠 漂白粉
溴水 过氧化氢
升汞 酒精 抗生素 硝酸银
植物组织培养实验室
植物组织培养实验室植物组织培养实验室是一种通过无菌技术和合成营养培养基培养植物器官或组织的实验室。
它在植物育种、植物生理学和植物生物技术等领域具有广泛的应用。
本文将介绍植物组织培养实验室的基本设备、无菌技术、培养基制备和实验操作等方面的内容。
一、基本设备植物组织培养实验室需要一些基本的设备来保证实验的进行和培养物的生长。
首先是无菌工作台，它是培养物的无菌操作平台，具备良好的过滤和紫外线灭菌功能。
其次是培养箱，用于控制光照、温度和湿度等环境因素，提供合适的生长条件。
此外还需要离心机、显微镜、培养器、试管架等实验室常用的设备。
二、无菌技术无菌技术是植物组织培养实验室的核心技术之一。
在无菌工作台下，实验人员需要进行严格的无菌操作，以避免外部微生物的污染。
手部要用无菌手套保护，并用消毒液彻底清洁工作台。
同时，在培养物的制备过程中要使用经过高压高温灭菌的培养器具和无菌培养基。
三、培养基制备培养基是植物组织培养实验室中必不可少的营养物质。
常用的培养基有植物生长基础培养基、植物生长调节剂培养基和特殊目的培养基等。
制备培养基时，需要按照一定比例将各种无机盐、有机添加剂、糖类和植物生长调节剂等混合，并添加适量的琼脂糖用于凝胶化。
最后通过滤器进行无菌过滤。
四、实验操作实验操作是植物组织培养实验室中具体的实验步骤。
包括材料的准备、组织的获取、培养基的制备、培养物的接种、生长条件的调控等。
在实验操作中，需要注意无菌操作、培养物的观察和记录、培养物的转接和传代等技术细节。
总结植物组织培养实验室是一个重要的植物生物技术研究平台，通过无菌技术和合成营养培养基，可以培养出各种植物的器官和组织，并进行相关的分析研究。
植物组织培养实验室的基本设备包括无菌工作台、培养箱等。
无菌技术是保证实验无菌的重要手段。
制备培养基时需要按照一定配方配制培养基，并进行无菌过滤。
实验操作的质量和操作者的经验直接影响到实验结果。
因此，植物组织培养实验室的工作人员需要具备严谨的态度和细致的操作。
植物组织培养实验室的设计与设备
植物组织培养实验室的设计与设备首先，植物组织培养实验室的设计应该满足以下要求：1.空间：实验室需要足够的空间容纳各种设备和工作区域。
实验室应该根据实验室的规模设计合理的面积大小，通常一个中小型实验室的面积应该在100-200平方米之间。
2.实验台：实验台是进行实验的主要工作区域，应该设计宽敞、舒适，便于操作和清洁。
实验台上应该有足够的空间来放置显微镜、培养皿、试管和其他实验室用具。
3.显微镜室：实验室中应该设有一个专门的显微镜室，用于观察和分析植物细胞和组织。
显微镜室应该有良好的光线和通风条件，以便在观察过程中获得清晰的图像。
4.无菌区：植物组织培养实验室中的细胞和组织培养工作需要在无菌条件下进行。
因此，实验室应该设置一个无菌区，以防止外部菌和霉菌的污染。
无菌区应该具备空气过滤和紫外线消毒等设备。
5.视频监控系统：为了确保实验操作的安全性和监测工作过程，实验室应该配备视频监控系统，能够记录下实验操作的全过程。
其次，植物组织培养实验室还需要配备适当的设备，以支持实验工作。
以下是一些常见的植物组织培养实验室设备：1.培养箱：培养箱用于控制温度、湿度和光照条件，以提供适合植物生长和繁殖的环境。
培养箱通常配备可调节的温度控制装置和光源。
2.植物生长室：植物生长室用于保持恒定的环境条件，包括温度、湿度和光照。
生长室可以根据不同的植物需求设置不同的生长条件。
3.培养皿和试管：培养皿和试管是进行植物细胞和组织培养的主要容器，用于种植和培养植物细胞和组织。
它们通常是无菌的，以防止污染。
4.高压灭菌器：高压灭菌器用于对培养介质、工具和试剂进行高温高压灭菌处理，以消除外部细菌和霉菌的污染。
5.霉菌培养箱：霉菌培养箱用于培养和繁殖霉菌，以供实验室使用。
这些霉菌可以用来制备蘑菇菌种或用于生产其他植物培养基的配方。
6.显微镜：显微镜是观察和分析植物细胞和组织的主要工具。
实验室应该配备高质量的显微镜，以保证观察到正确而清晰的图像。
植物组织培养的设备与培养条件
培养基、植物材料、接种工具、器皿及环境的消毒处理。
（一）常用灭菌方法及其使用范围
湿热
高温
物 理
干热 超声波
物 理
灭
射线 微波
菌
紫外线
灭 菌
滤膜过滤
无菌水反复冲洗
升汞 福尔马林 双氧水
升汞 来苏水 高锰酸钾
漂白粉 次氯酸钠 抗菌素 酒精
第四节 基本操作技术与实验室管理
三 无菌操作及注意事项
（一）常用灭菌方法及其使用范围
二 光照
最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。 常用的光照强度，一般为1000-5000lx。 一般用日光灯进行光照，光谱成分主要是蓝紫光，波长为 419-467nm。针对不同的植物种类，不同的培养阶段，根据 不同的培养目的，选用合适的光质照明。
第三节 植物组织培养所需环境条件
三 湿度
一是培养容器内的湿度条件，容器内主要受培养基水分含 量和封口材料的影响。 一是环境的湿度条件。环境的相对湿度一般要求70～80%。
第三节 植物组织培养所需环境条件
四 气体
氧气是培养中必需的因素，瓶盖封闭时要考虑通气问题， 可用附有滤气膜的封口材料。 液体培养采用振荡培养。 高浓度的乙烯对正常的形态发生是不利的。培养基高压灭 菌时，可能产生乙烯，培养物本身也可能产生乙烯。
第三节 植物组织培养所需环境条件
五 培养基的渗透压
培养基中添加的盐类、蔗糖等化合物影响到渗透压的变化。
实验室设计原则： ① 保证无菌操作，达到工作方便，防止污染。 ② 培养室减少通风。 ③ 具有缓冲室。
第二节 植物组织培养所需要的基本仪器和设备
一 玻璃器皿
培养器皿 盛装容器
三角瓶 培养皿
培养瓶 试管
植物组培实验室配置清单
植物组培实验室配置清单植物组培实验室建设⽬录1、功能简述 (1)1)准备室 (1)2)灭菌室 (1)3)缓冲间 (2)4)⽆菌操作室 (2)5)培养室 (2)6)驯化室 (3)7)温室 (3)8)辅助实验室（⾮必要） (3)①细胞学实验室 (3)②⽣理⽣化分析室 (4)2、设备及耗材清单 (4)1)试验设备清单 (4)2)常备试剂清单 (6)①MS培养基必备试剂 (7)②常备激素及辅助试剂 (7)植物组培实验室建设1、功能简述植物组织培养实验室⼀般应包括准备室、洗涤灭菌室、⽆菌操作室、培养室、缓冲间，这也是组织培养实验所必须具备的基本条件。
要培养成⼤⽥苗还要有相应的驯化室、温室。
1)准备室⽤途：⼜叫化学实验室，进⾏⼀切与实验有关的准备⼯作。
完成所使⽤的各种药品的贮备、称量、溶解、器⽫洗涤、晾置、培养基配制与分装、培养基和培养器⽫的灭菌、培养材料的预处理等。
设备：准备室应具备实验台、药品柜、⽔池、落⽔架、仪器、药品、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平（0.1g、0.0001g 分度各⼀台）、⼲热消毒柜（可省去）、蒸馏⽔器（可省去）、酸度计(⼜称pH计，为节约成本和减少维护可⽤pH试纸代替)、过滤灭菌器、培养⽫、培养瓶、三⾓瓶、试管、电磁炉、⽔浴锅、漏⽃、量筒、刻度移液管（为操作简便起见可购买移液枪1ml、5ml各⼀个代替）、玻璃棒、酒精灯、镊⼦、试管架、琼脂、纱布、棉塞、封⼝膜、⼤量元素、微量元素、蔗糖、有机物和植物激素的母液（详细内容见附表）、NaOH、盐酸、滤纸、脱脂棉、橡⽪筋、⽜⽪纸等。
图1 准备室图2 灭菌室2)灭菌室⽤途：完成各种器具的保存、培养基的灭菌等。
1设备：中央实验台、⾼压灭菌锅、超声波清洗器、⼲燥灭菌器（电烘箱）70%的酒精、2%的次氯酸钠等。
3)缓冲间⽤途：是进⼊⽆菌室前的⼀个缓冲场地，减少⼈体从外界带⼊的尘埃等污染物。
⼯作⼈员在此换上⼯作服、拖鞋，戴上⼝罩，才能进⼊⽆菌室和培养室。
植物组织培养实验室设计方案
植物组织培养实验室设计方案一、引言植物组织培养是一种广泛应用于植物生物技术领域的实验技术，通过在无菌条件下培养植物的细胞、组织和器官，可以实现植物的无性繁殖、基因转化、突变体筛选等目的。
为了保证实验的准确性和可重复性，需要建立一个符合标准的植物组织培养实验室。
本文将详细介绍植物组织培养实验室的设计方案。
二、实验室布局设计1. 实验室面积和布局植物组织培养实验室的面积应根据实验需求和实验设备的数量来确定。
一般来说，实验室面积应不小于100平方米。
实验室的布局应合理，包括无菌操作区、培养室、实验台、设备区等。
2. 无菌操作区无菌操作区是植物组织培养实验室的核心区域，应具备无尘、无菌、恒温恒湿的条件。
该区域应设置无菌工作台，工作台上应配备紫外线灯，以确保操作区域的无菌状态。
同时，还需设置培养箱、培养器具、培养基等设备和材料的存放区域。
3. 培养室培养室用于培养植物细胞、组织和器官，应具备适宜的温度、湿度和光照条件。
培养室内应设置培养箱、培养架、培养瓶等设备和材料的存放区域。
此外，还需设置培养室的进出口，以便实验人员进出。
4. 实验台实验台是进行实验操作的区域，应具备稳定的工作台面、实验用具和实验设备。
实验台上应配备显微镜、离心机、电子天平等常用实验设备。
实验台的高度和宽度应根据实验人员的身高和操作需求来确定。
5. 设备区设备区用于存放实验室所需的设备，包括培养箱、培养器具、显微镜、离心机、电子天平等。
设备区应设有防尘、防潮和防震措施，以保证设备的正常运行和使用寿命。
三、实验室设备选购1. 培养箱培养箱是植物组织培养实验室中必备的设备之一，用于提供适宜的温度和湿度条件。
选购培养箱时，应考虑其温度控制范围、湿度控制精度、内部空间大小等因素。
2. 培养器具培养器具包括培养瓶、培养皿、移液器等，用于培养植物细胞、组织和器官。
选购培养器具时，应选择质量好、无毒、无菌的产品。
3. 显微镜显微镜用于观察植物细胞、组织和器官的形态和结构。
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二、 无菌设备
1. 灭菌锅（ autoclave ）：最常用消毒的工具。 种类多：手提式（如常见的医用消毒锅，体积 小）、立式（体积中等）和卧式（有中型和大 型）之分；有自热式（带有加热装置）和外热 式（无加热装置，需要从外部加热，如煤气、 电炉、蒸气等）之分。使用什么样的灭菌锅， 要根据植物组织培养的目的和规模而定。
消毒锅
2.超净工作台（laminar air-flow cabinet）
细胞工程中必不可少的一种设备，极端重要， 用于对植物材料进行无菌操作。
超净工作台 =空气过滤器，空气经过 1~2次粗滤 后，最后通过孔径为0.2~0.4μm的滤网。
超净工作台可以分为双人和单人、单面和双面、 水平风和垂直风等类型。
培养容器中湿度大，有些材料容易 产生玻璃化
透气性好，植株生长正常
五、其它仪器设备与用具
1. 天平：需要1台万分之一的精密分析天平和百 分比之一或十分之一的普通天平。
2. 冰箱：用于储藏一些不 宜在常温下较长时间放 置的药品和试剂，如维 生素、氨基酸、激素、 微量元素等。 3. 蒸馏水器或者去离子水 生产装置
无菌操作
三、培养室（Culture room）
植物材料需要在一个可 控温、控光、洁净的地方 进行培养。如规模小，则 有1~2个培养箱即可。 培养箱体积小，不占地方， 控温、控光条件好，很适 合于摸索植物材料的培养 条件和科学研究。缺点是 空间小、价格昂贵（10000 元/台）。
Incubator
四、培养容器
1. 玻璃容器：如试管、三角瓶、果酱瓶、罐头瓶、 饮料瓶等。玻璃瓶耐高温消毒、透明（便于观 察），且为惰性物质，对植物材料的生长影响小， 是组培中用得最广的容器，但容易破碎。
三角瓶
试管（培养管）
培养瓶
2. 透明塑料容器：轻巧，不易破碎，但不耐 反复高温消毒，而且有些塑料容器在高温 消毒时会释放一些有害的物质，影响材料 的生长。
植物组织培养室的布局示意图
印度一家组培公司的接种车间
浙江省农科院组培中心无菌接种车间
如果房子紧张，则可以把有些部分（如储藏室、 培养基制备、消毒，甚至接种等工作）放在一个房 间里完成，只要操作时小心、谨慎，同样可以把工 作做得很好。
Prides Corner Farm, CT, USA
塑料培养容器
塑料培养瓶
塑料培养瓶
3. 容器封口：良好的封口用品要求做到 既可以防止污染和容器内水分的过分散 失，又要做到透水、透气。
专用的组培容器有自己的盖子。如果没 有，可用棉塞、封口膜、锡箔纸、耐高 温的塑料纸（如培养食用菌的聚丙烯塑 料袋）封口。 棉塞最好。
瓶盖、瓶塞、或者封口膜的透气性能对材料的培养有 显著影响，透气性能不好的，容器中湿度高（饱和）， 容易导致植物材料出现玻璃化（生理病态，植物材料 呈水渍状，深绿色，刚脆，无继续培养的价值）
4. 酸度计：植物生长需要一定的pH值，因此需
要调节培养基的pH值。酸度计测定pH值精度 高，准确，但较烦琐。如不进行要求很高的 培养（如单细胞培养、原生质体培养），可 以用pH试纸代替。 5. 酒精灯 6. 解剖刀和镊子 7. 摇床
第二节 植物组织培养室的设计
植物组织培养工作按内容不同可以分为3个的过程：
第二章 植物组织培养的设施
植物组织培养=价廉技美
植物组织培养所需要仪器设备和药品 比较少、便宜
第一Байду номын сангаас 试剂与设备
一、 化学试剂
用于配制培养基。主要化学试剂： 无机试剂：硝酸钾、硝酸铵、硝酸钙、硫 酸钾、硫酸镁、硫酸铵、硫酸铜、硫酸亚 铁、磷酸氢二钾、氯化钙、硼酸、钼酸钠 等。 有机试剂：维生素(B1、 B6、烟酸、生物 素）、氨基酸、糖（碳源）、植物激素、 凝固剂以及其它一些物质。
育苗、栽培
分选、包装、外运
Propagation
Micropropagation
微型繁殖=微繁=植物组织培养
2-3人，每年培养一些难繁殖的观赏植物，产值在70-80 万美元
Founded as a greenhouse tomato business in 1979, now one of the leading growers of woody ornamental plants in USA, with more than 300 employees.
Mark Sellew, Owner
1.培养基的准备:包括试剂的配制、容器的洗涤、 培养基的制备与消毒等; 2. 植物材料的无菌操作(接种）; 3.植物材料的培养、观察与分析。
植物组织培养要求无菌，因此， 在设计植物组织培养实验室时既要考虑 各环节的衔接，又要避免不必要的交叉， 特别是商业化组培苗生产，更要特别注 意防止污染。最好是三部分工作相互独 立（如下图）
如 果 要 培 养 较 多
的植物材料，应建 立专门培养室。
建 一 个 面 积 为 30
平方米的培养室， 只 要 10000 元 左 右 ， 但可以摆放 2000 瓶 材料，可年产 20 万 苗。
Culture room
Culture room
培养室所需要的设备：
1.培养架:培养架的设计既要考虑充 分利用培养室的空间，也要考虑取 放材料方便。 2.加温/降温设备：空调 3.光照和控光设备。分为光培养室 和暗培养室。光培养室常用日光灯 照明，并安置控制光照时间的自动 开关。