第二章 植物组织培养室的设施

植物组织培养室的布局示意图
印度一家组培公司的接种车间
浙江省农科院组培中心无菌接种车间

如果房子紧张，则可以把有些部分（如储藏室、 培养基制备、消毒，甚至接种等工作）放在一个房 间里完成，只要操作时小心、谨慎，同样可以把工 作做得很好。
Prides Corner Farm, CT, USA
育苗、栽培
分选、包装、外运
Propagation
Micropropagation
微型繁殖=微繁=植物组织培养
2-3人，每年培养一些难繁殖的观赏植物，产值在70-80 万美元
Founded as a greenhouse tomato business in 1979, now one of the leading growers of woody ornamental plants in USA, with more than 300 employees.
Baidu NhomakorabeaMark Sellew, Owner
四、培养容器
1. 玻璃容器：如试管、三角瓶、果酱瓶、罐头瓶、 饮料瓶等。玻璃瓶耐高温消毒、透明（便于观 察），且为惰性物质，对植物材料的生长影响小， 是组培中用得最广的容器，但容易破碎。
三角瓶
试管（培养管）
培养瓶
2. 透明塑料容器：轻巧，不易破碎，但不耐 反复高温消毒，而且有些塑料容器在高温 消毒时会释放一些有害的物质，影响材料 的生长。
培养容器中湿度大，有些材料容易 产生玻璃化
透气性好，植株生长正常
五、其它仪器设备与用具
1. 天平：需要1台万分之一的精密分析天平和百 分比之一或十分之一的普通天平。
2. 冰箱：用于储藏一些不 宜在常温下较长时间放 置的药品和试剂，如维 生素、氨基酸、激素、 微量元素等。 3. 蒸馏水器或者去离子水 生产装置
1.培养基的准备:包括试剂的配制、容器的洗涤、 培养基的制备与消毒等; 2. 植物材料的无菌操作(接种）; 3.植物材料的培养、观察与分析。

植物组织培养要求无菌，因此， 在设计植物组织培养实验室时既要考虑 各环节的衔接，又要避免不必要的交叉， 特别是商业化组培苗生产，更要特别注 意防止污染。最好是三部分工作相互独 立（如下图）
无菌操作
三、培养室（Culture room）

植物材料需要在一个可 控温、控光、洁净的地方 进行培养。如规模小，则 有1~2个培养箱即可。 培养箱体积小，不占地方， 控温、控光条件好，很适 合于摸索植物材料的培养 条件和科学研究。缺点是 空间小、价格昂贵（10000 元/台）。

Incubator
如 果 要 培 养 较 多
的植物材料，应建 立专门培养室。
建 一 个 面 积 为 30
平方米的培养室， 只 要 10000 元 左 右 ， 但可以摆放 2000 瓶 材料，可年产 20 万 苗。
Culture room
Culture room
培养室所需要的设备：
1.培养架:培养架的设计既要考虑充 分利用培养室的空间，也要考虑取 放材料方便。 2.加温/降温设备：空调 3.光照和控光设备。分为光培养室 和暗培养室。光培养室常用日光灯 照明，并安置控制光照时间的自动 开关。
4. 酸度计：植物生长需要一定的pH值，因此需
要调节培养基的pH值。酸度计测定pH值精度 高，准确，但较烦琐。如不进行要求很高的 培养（如单细胞培养、原生质体培养），可 以用pH试纸代替。 5. 酒精灯 6. 解剖刀和镊子 7. 摇床
第二节 植物组织培养室的设计

植物组织培养工作按内容不同可以分为3个的过程：
消毒锅
2.超净工作台（laminar air-flow cabinet）
细胞工程中必不可少的一种设备，极端重要， 用于对植物材料进行无菌操作。
超净工作台 =空气过滤器，空气经过 1~2次粗滤 后，最后通过孔径为0.2~0.4μm的滤网。
超净工作台可以分为双人和单人、单面和双面、 水平风和垂直风等类型。
第二章 植物组织培养的设施
植物组织培养=价廉技美
植物组织培养所需要仪器设备和药品 比较少、便宜
第一节 试剂与设备
一、 化学试剂
用于配制培养基。主要化学试剂： 无机试剂：硝酸钾、硝酸铵、硝酸钙、硫 酸钾、硫酸镁、硫酸铵、硫酸铜、硫酸亚 铁、磷酸氢二钾、氯化钙、硼酸、钼酸钠 等。 有机试剂：维生素(B1、 B6、烟酸、生物 素）、氨基酸、糖（碳源）、植物激素、 凝固剂以及其它一些物质。

二、 无菌设备
1. 灭菌锅（ autoclave ）：最常用消毒的工具。 种类多：手提式（如常见的医用消毒锅，体积 小）、立式（体积中等）和卧式（有中型和大 型）之分；有自热式（带有加热装置）和外热 式（无加热装置，需要从外部加热，如煤气、 电炉、蒸气等）之分。使用什么样的灭菌锅， 要根据植物组织培养的目的和规模而定。
塑料培养容器
塑料培养瓶
塑料培养瓶
3. 容器封口：良好的封口用品要求做到 既可以防止污染和容器内水分的过分散 失，又要做到透水、透气。
专用的组培容器有自己的盖子。如果没 有，可用棉塞、封口膜、锡箔纸、耐高 温的塑料纸（如培养食用菌的聚丙烯塑 料袋）封口。 棉塞最好。
瓶盖、瓶塞、或者封口膜的透气性能对材料的培养有 显著影响，透气性能不好的，容器中湿度高（饱和）， 容易导致植物材料出现玻璃化（生理病态，植物材料 呈水渍状，深绿色，刚脆，无继续培养的价值）