功效成分及卫生指标检验规范

功效成分及卫生指标检验规范功效成分及卫生指标检验规范1 主题内容和适用范围1.1 本规范规定了保健食品和原料的卫生要求、功效成分和卫生指标的检验项目和方法。

1.2 本规范适用于保健食品的检验受理、项目的确定和方法的选择。

2 差不多要求2.1 凡保健食品，必须符合"保健食品通用卫生要求"，该"要求"所列的各项目必须按规定执行。

附表1所列检测项目是对"保健食品通用卫生要求"补充规定。

2.2 保健食品中使用的添加剂必须符合＂GB2760食品添加剂使用卫生标准＂规定的品种名单。

检测机构依照产品配方检测合成色素、防腐剂、甜味剂及抗氧化剂的含量。

2.3 凡使用有机溶剂提取物为原料的产品，其使用的有机溶剂要符合GB2760附录D食品工业用加工助剂推举名单要求。

2.4 保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成分或特征成分，申报时须检测配方中要紧原料所含的功效成分或特征成分。

附表2所列原料为主的产品须检测表中规定的项目。

2.5 保健食品评审专家委员会可依照产品的具体配方、工艺等相关资料，要求申报单位检测指定的项目。

2.6 功效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应依照其产品适用的方法学范围选择国家标准、卫生部部颁标准、行业标准以及国际上权威分析方法进行测定。

2.7 在没有相应的标准方法之前，其产品中所声称（具有）的功效成分或特征成分的检测方法及检测所需的标准品对比品及专门试剂均由申报单位提供，并讲明其产品中功效成分或特征成分分析方法的来源。

如属自主开发研究的分析方法，需提供方法学研究的相关资料，同时将方法学研究的资料报卫生部保健食品功效成分检测协作组（中国疾病预防操纵中心营养与食品安全所）备案，必要时卫生部将组织方法学验证，其费用由申报单位承担。

2.8 检验机构受理保健食品检测时，申报单位应提供该产品的配方、工艺及企业标准等相关资料。

2.9卫生部对保健食品的功效成分的检测机构进行认定，检测机构的名单由卫生部门公布。

保健食品的功效成分检测工作应在卫生部认定的检测机构进行。

违禁成分的检测由卫生部指定的检验机构进行检测。

附表1：下列类型的产品、或下列原料为主的产品指标检测项目表产品类型检测项目1 固体水分、灰分2 口服液可溶性固形物、ｐＨ3 海产品镉4 鱼油类酸价、过氧化值（降血脂类产品需检测胆固醇）5 茶叶有机氯农药残留（六六六、滴滴涕）6 红曲黄曲霉毒素Ｂ1、桔青霉素7 中药材汞、六六六、滴滴涕8 9 苹果、山楂片剂和胶囊展青霉毒素崩解时限10 抗疲劳、减肥和改善生长发育的产品违禁药物附表2：功效成分和特征成分检测项目表1 营养素补充剂产品中标识的营养素(包括维生素和矿物质)2 五加科参类皂甙膳食纤维3 蕈类（灵芝、蘑菇等）腺苷4 冬虫夏草菌丝体5 红景天类红景天甙6 芦荟类芦荟甙7 大蒜类大蒜素8 螺旋藻类蛋白质、胡萝卜素、维生素B1、维生素B29 茶叶类茶多酚10 魔芋类膳食纤维11 纤维素类膳食纤维12 磷脂类丙酮不溶物、乙醚不溶物（原料）13 红曲类洛伐它丁14 植物油类脂肪酸、维生素E15 动物油类脂肪酸16 初乳类免疫球蛋白17 鹿血类蛋白质、氨基酸18 蚂蚁类锰、蛋白质19 蚯蚓类蚓激酶（溶纤酶）、蛋白质20 蛇、蝎等蛋白质、氨基酸21 角鲨烯角鲨烯22 蜂皇浆10-羟基癸烯酸23 蜂花粉、蜂胶总黄酮24 甲壳质产品脱乙酰度，产品如为复方应检测原料的脱乙酰度蛋白质、氨基酸25 蛋白质、氨基酸制品26 褪黑素产品褪黑素产品原料（褪黑素）需提供原料纯度证明并检测3保健食品中功效成分的检验方法见附件1附件1目录1. 保健食品中红景天甙的测定2. 保健食品中大蒜素的测定3. 保健食品中芦荟甙的测定4. 保健食品中脱氢表雄甾酮（DHEA）的测定5. 保健食品中吡啶甲酸铬的测定6. 保健食品中盐酸硫胺、盐酸吡哆醇、烟酸、烟酰胺和咖啡因的测定7. 保健食品中肌醇的测定8. 保健食品中肉碱的测定9. 保健食品中α—亚麻酸、γ—亚麻酸的测定10. 保健食品中免疫球蛋白IgG的测定11. 保健食品中水溶性粗多糖的测定12. 保健食品中人参皂甙的高效液相色谱测定13. 保健食品中原花青素的测定14. 保健食品中核苷酸的测定15. 保健食品中洛伐他丁的测定16. 保健食品中中药功效成分的鉴不方法17. 保健食品中银杏叶总黄酮的高效液相色谱测定18. 保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定19. 保健食品中金雀异黄素的测定20. 保健食品中茶氨酸的高效液相色谱测定21. 五味子类保健食品中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的高效液相色谱测定22. 保健食品中腺苷的测定23. 保健食品中褪黑素的测定附：保健食品功效成分检验方法协作组提供的检验方法1.保健食品中人参总皂甙的测定2.保健食品中总黄酮的测定3.壳聚糖的游离氨基测定及脱乙酰度的计算4.蚓激酶活性的测定5. 乙醚不溶物、丙酮不溶物的测定6.角鲨烯的测定1.保健食品中红景天甙的测定Determination of salidroside in health food第一法高效液相色谱法1 范围本方法规定了保健食品中红景天甙的测定方法。

本方法适用于以红景天为要紧原料的保健食品中红景天甙的测定。

本方法的检出限：0.02μg。

本方法的线性范围：0.01～0.50μg/mL。

2 原理将混匀的试样使用甲醇进行提取，依照高效液相色谱紫外检测器定性定量检测。

3 试剂除非另有讲明，在分析中仅使用双蒸水。

3.1 乙酸钠分析纯。

3.2 甲醇优级纯。

3.3 石油醚分析纯。

3.4 红景天甙标准溶液准确称量红景天甙标准品0.0200g，加入甲醇溶解并定容至10mL。

此溶液每mL含2.0mg红景天甙。

4 仪器4.1 高效液相色谱仪：附紫外检测器（UV）。

4.2 超声波清洗器。

4.3 离心机。

5 分析步骤5.1 试样处理5.1.1 液体试样：准确量取摇匀后的液体试样20mL于50mL容量瓶中，先加入25mL甲醇，超声10min后用甲醇定容至刻度，混匀，经0.45m滤膜过滤后供液相色谱分析用。

5.1.2 固体试样：取20粒以上片剂或胶囊试样进行粉碎混匀，准确称取适量试样（精确至0.001g）于50mL容量瓶中，加入甲醇, 超声提取10min。

取出后加入甲醇定容至刻度，混匀后以3000rpm/min离心3min。

经0.45m滤膜过滤后供液相色谱分析用。

5.2 液相色谱参考条件5.2.1 色谱柱: C18柱 4.6×250mm,5μm。

5.2.2 柱温：室温。

5.2.3 紫外检测器：检测波长 215nm。

5.2.4 流淌相：甲醇:0.02mol/L乙酸钠溶液＝9:91。

5.2.5 流速：1.0mL/min。

5.2.6 进样量：10L。

5.2.7色谱分析：取10μL标准溶液及试样溶液注入色谱仪中，以保留时刻定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。

5.3 标准曲线制备分不配制浓度为0.0、0.01、0.02、0.05、0.20、0.50μg/mL红景天甙标准溶液,在给定的仪器条件下进行液相色谱分析,以峰高或峰面积对浓度作标准曲线。

5.4 分析结果的表示5.4.1 计算h1× C ×VX = ———————————h2×m×1000式中： X －试样中红景天甙的含量，mg/g；h1 －试样峰高或峰面积；C －标准溶液浓度，μg/mL；V －试样定容体积，mL；h2 －标准溶液峰高或峰面积；m －试样质量，g。

计算结果保留三位有效数字。

6技术参数准确度方法的回收率在91.7％～98.6％之间。

同意差在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的±10%。

第二法极谱法1 范围本方法规定了保健食品中红景天甙的测定方法。

本方法适用于以红景天甙为要紧功效成分的保健食品中红景天甙的含量测定。

本方法的最低检出量为0.05μg。

若取1.00mL液体类试样，其最低检出浓度为0.05mg/L；若取0.25g固体类试样、则最低检出浓度为0.2mg/kg。

本方法的最佳线性范围为0.1μg/mL～1.0μg/mL。

2 原理保健食品中红景天甙用甲醇提取，D—101型大孔吸附树脂净化处理，经亚硝基化后，其衍生物在硼砂溶液中具有电活性，在滴汞电极上还原产生极谱波。

用峰电位定性，以试样与标准的峰电流（I"p）比较定量。

3 试剂除注明外，试剂为分析纯，实验用水为重蒸馏水。

3.1 甲醇。

3.2 D—101型大孔吸附树脂。

3.3 饱和硼砂溶液。

3.4 0.2%盐酸溶液。

3.5 2mol/L亚硝酸钠溶液。

3.6 1.0mg/mL红景天甙标准贮备溶液：准确称取0.1000g红景天甙对比品（中国药品生物制品检定所）于烧杯中，加水溶解并定容至100mL容量瓶。

此溶液每毫升含红景天甙1.0mg，冰箱保存。

3.7 10.0μg/mL红景天甙标准使用溶液：准确吸取红景天标准贮备溶液1.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。

此溶液每毫升含红景天甙10.0μg。

4 仪器与设备4.1 极谱分析仪。

4.2 超声波清洗机。

4.3 Φ10mm×150mm玻璃层析柱。

5 分析步骤5.1 试样的制备及予处理5.1.1 液体类试样（如保健酒、口服液、饮料等）准确吸取摇匀的试样液1.00mL于50mL容量瓶中，加水稀释至刻度、摇匀，供测定用。

5.1.2 一般固体类试样（如保健茶、蜜片、胶囊等）准确称取经粉碎并过20目筛的试样0.25g，置50mL三角瓶中，加入10mL甲醇，于超声波清洗机超声提取10min、过滤，滤液收集于50mL容量瓶中。

再加入10mL甲醇于三角瓶中，重复超声提取一次，合并滤液于上述容量瓶中，用水稀释至刻度，供测定用。

5.1.3 个不组分复杂的固体类试样个不组分复杂的固体类试样需经柱层析净化处理。

层析柱制备。

取适量D—101型非极性大孔吸附树脂于烧杯中，加水洗涤数次，缓缓倾入Φ10mm ×150mm玻璃层析柱内，湿法装柱、树脂约高50mm，10mL甲醇注入层析柱上端进行淋洗，弃淋洗液。

净化。

按5.1.2节处理、提取试样，准确吸取10.0mL提取试液，缓缓注入层析柱上端，用玻璃蒸发皿收集流出液。

再吸取10mL甲醇分两次注入层析柱进行淋洗、合并流出液于蒸发皿中，置70℃恒温水浴挥干，用水溶解移入10mL容量瓶中，水稀释至刻度，供测定用。

5.2 极谱分析参考条件单扫描极谱法（SSP法）。

选择起始电位为— 400mV，终止电位— 900mV，扫描速度250mV/S，三电极，二次导数，静置时刻5s及适当量程。

于峰电位（Ep）— 600mV（vs.SCE）处，记录红景天甙的峰电流（I"p）nA。