消化道平滑肌-liuyh

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实验一 消化道平滑肌生理特性观察
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
药物量-效关系 实验二 药物量 效关系
一. 恒温平滑肌灌流装置 1.豚鼠处死、取一段 豚鼠处死、 回肠, 豚鼠处死 取一段2cm回肠,台氏液冲洗, 回肠 台氏液冲洗, 2.固定,38℃,台氏液 固定, ℃ 台氏液15ml,通气。 固定 ,通气。 3. BL-420E系统: 系统: 系统
实验项目/消化实验 消化道平滑肌生理特性 实验项目 消化实验/消化道平滑肌生理特性。 消化实验 消化道平滑肌生理特性。
4.平稳灌流 平稳灌流5-10分钟, 分钟, 平稳灌流 分钟 效曲线: 二. ACh量-效曲线: 量 效曲线 5. 按表 顺序加 按表3顺序加 顺序加ACh 。 6.记录每次 记录每次ACh浓度,对应张力。 浓度, 记录每次 浓度 对应张力。
讨论分析
1. 温度改变对小肠平滑肌的影响?为什么? 温度改变对小肠平滑肌的影响?为什么? 2. ACh 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 3. Adr 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 4. HCl 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 5. 无Ca2+台氏液的作用? 台氏液的作用? 6. ACh作用的量 效关系特点? 作用的量-效关系特点 作用的量 效关系特点? 7. 阿托品对 阿托品对ACh的拮抗效应有什么特点? 的拮抗效应有什么特点? 的拮抗效应有什么特点
药物量-效关系 实验二 药物量 效关系
阿托品对ACh的拮抗效应: 的拮抗效应: 三. 阿托品对 的拮抗效应 6. 加入 -4M 阿托品 0.05ml,作用 加入10 ,作用2min。 。 7. 重复步骤 、6。 重复步骤5、 。
实验二 药物量-效关系 药物量 效关系
表3. ACh的给药剂量和累积浓度 的给药剂量和累积浓度
实验一 消化道平滑肌生理特性观察 表1. 影响小肠平滑肌活动的因素
观察项目 温度改变 ACh Adr HCl 无钙液 无钙液+ 无钙液+ACh 台氏液(复钙) 台氏液(复钙) 台氏液+ 台氏液+ACh 收缩频率 收缩幅度
实验一 消化道平滑肌生理特性观察 表2. 预期实验结果
观察项目 38℃台氏液 ℃ 室温台氏液 乙酰胆碱 肾上腺素 无钙台氏液 无钙液+ 无钙液+ACh 台氏液(复钙) 台氏液(复钙) 台氏液+ 台氏液+ACh 收缩频率 正常 减少 增加 减少 消失 无/很弱 很弱 恢复 增加 收缩幅度 正常 降低 增加 降低 消失 无/很弱 很弱 恢复 增加
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
二. 实验项目 1. 温度作用
正常平滑肌收缩曲线(38℃) 。 正常平滑肌收缩曲线( ℃ 换15ml室温台氏液 室温台氏液 38℃台氏液 ℃
实验一 消化道平滑肌生理特性观察 2. 1:100,000 Ach 2滴,观察记录,冲洗 次。 滴 观察记录,冲洗3次 3. 1:10,000 Adr 2滴,观察记录,冲洗 次。 滴 观察记录,冲洗3次 4. 1N HCl 2滴,观察记录,冲洗 次。 滴 观察记录,冲洗3次 5. 无钙液冲洗3次,无钙液,观察记录,不冲。 无钙液冲洗 次 无钙液,观察记录,不冲。 6. 1:100,000 Ach 2滴,观察 滴 观察1min后,含钙台氏 后 液冲洗3次 液冲洗 次。 7. 1:100,000 Ach 2滴,观察对 滴 观察对Ach的恢复。 的恢复。 的恢复
【实验原理】 实验原理】
1. 消化道平滑肌的特性 兴奋性较低,收缩缓慢; 兴奋性较低,收缩缓慢; 具有一定紧张性; 具有一定紧张性; 自动节律性、较大的伸展性; 自动节律性、较大的伸展性; 对牵张、温度和化学刺激比较敏感。 对牵张、温度和化学刺激比较敏感。 离体灌流:仍保持节律性活动, 离体灌流:仍保持节律性活动, 灌流 经典模型:神经 体液调节 刺激的影响。 体液调节、 经典模型:神经-体液调节、刺激的影响。
平滑肌兴奋-收缩作用 平滑肌兴奋 收缩作用
CM(钙调蛋白) (钙调蛋白) 细胞内Ca 细胞内 2+↑ 激活 4Ca2+-CM MLC-磷酸化 磷酸化 MLCK(肌球蛋白轻链激酶 肌球蛋白轻链激酶) 肌球蛋白轻链激酶 横桥-肌丝滑动 横桥 肌丝滑动 肌肉收缩。 肌肉收缩。
Ca2+内流放
拮抗药对激动药量效曲线的影响
恒温平滑肌灌流装置
麦氏浴槽
家兔十二指肠 (2cm)
实验一
消化道平滑肌生理特性观察
一. 恒温平滑肌灌流装置
1. 恒温、台式液 恒温、台式液15ml 、通空气。 通空气。 2. 十二指肠固定,连接换能器,预张力。 十二指肠固定,连接换能器,预张力。 3. BL-420E系统: 系统: 系统 实验项目/消化实验 消化道平滑肌生理特性 实验项目 消化实验/消化道平滑肌生理特性。 消化实验 消化道平滑肌生理特性。 4. 稳定灌流。 稳定灌流。
次序 1 2 3 4 5 浓度 10-6 10-5 10-4 10-3 10-2 剂量(ml) 剂量 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 终浓度(mol/L) 终浓度 10-8 10-7 10-6 10-5 10-4
注意事项】 【注意事项】
固定时尽量减少小肠平滑肌的损伤 每次实验效果明显后, 每次实验效果明显后 , 立即更换浴槽内 的台氏液,并冲洗2~ 次 的台氏液,并冲洗 ~3次 浴槽内温度应保持在38℃ 浴槽内温度应保持在 ℃ 量效关系中依次递加Ach时必须保证在高 时必须保证在高 量效关系中依次递加 峰下降前
1.0
1.0
Emax (%) Emax (%)

0.5
0.5
0.1
10
[A] 100
0.1
ຫໍສະໝຸດ Baidu10
100
[A]
竞争性拮抗作用
非竞争性拮抗作用
受体占领学说
消化道平滑肌的生理特性 与药物量效关系
机能实验中心 10-425 刘英华 药理教研室
p119/125
【实验目的】 实验目的】
观察哺乳动物胃肠平滑肌的生理特性以及 影响因素。 影响因素。 药物量效关系及拮抗药物特性。 药物量效关系及拮抗药物特性。 学习离体平滑肌基本实验方法。 学习离体平滑肌基本实验方法。
2. 药物对消化道平滑肌的影响: 药物对消化道平滑肌的影响: ACh →M受体 兴奋,收缩; 受体→ 受体 兴奋,收缩; 效关系: 量-效关系:剂量依赖性。 效关系 剂量依赖性。 阿托品阻断M受体 →平滑肌舒张; 阿托品阻断 受体 平滑肌舒张; 解除痉挛,缓解腹痛等。(拮抗效应) 解除痉挛,缓解腹痛等。(拮抗效应) 。(拮抗效应
离体小肠平滑肌的实验条件】 【离体小肠平滑肌的实验条件】
恒温:38℃ ℃ 台式液:适于哺乳类小肠 氧气:气泡单一连续
实验中必须时刻满足这3 实验中必须时刻满足这3个条件
实验动物】 【实验动物】 十二指肠, 豚鼠: 兔 :十二指肠, 豚鼠:回肠
实验器材】 【实验器材】 BL-420E实验系统;离体平滑肌灌流装置; 实验系统;离体平滑肌灌流装置; 实验系统 台氏液、无钙台氏液,HCl, Ach, 肾上腺素 台氏液、无钙台氏液, (Adr)、阿托品 、阿托品(atr) 。
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