临床免疫学检验知识点
临床免疫学检验技术-01-第一章 概论
第三节 免疫学技术的发展与临床免疫检验
一、免疫学技术的发展历程
经典免疫学技术
• 免疫凝集试验 • 免疫沉淀试验 • 补体结合试验
现代免疫学技术
• 标记免疫学技 术（特异性及 敏感性提高）
自动化免疫学技术
• 自动化免疫分 析仪（反应进 行加快）
（一）经典免疫学技术
1. 免疫凝集试验 （1）直接凝集试验： 1）肥达试验 2）外斐试验 3）交叉配血凝集试验 （2）间接凝集试验： 1）间接血凝试验 2）胶乳凝集试验 3）自身红细胞凝集试验
总结
免疫器官
中枢免疫器官：骨髓、胸腺 外周免疫器官：淋巴结、脾脏、粘膜伴随淋巴组织
免
淋巴细胞：T细胞、B细胞、NK细胞
疫
系 统
免疫细胞
免疫辅助细胞：单核巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细 胞、肥大细胞等
免疫分子
免疫球蛋白 补体系统 细胞因子 黏附分子 人类白细胞分化抗原
四、免疫与免疫应答
免疫（immunity）是机体识别和排斥抗原性异物的一 种生理功能。
重点提示
1、免疫系统组成及功能 2、免疫学检验技术的的发展
第一节 免疫学基础简介
免疫学（immunology）
免疫学是研究免疫系统的结构与功能，并通过对其在免 疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究，探 讨有效的免疫措施，实现以防病、治病为目的的一门现代医 学学科
免疫系统（immune system）
1960
学者
贡献
J.Bordet
补体与溶菌活性
H.Durham，M.von Gruber
特异凝集反应
G.Widal，A．Sicad
肥达试验
R.Kraus
临床免疫学检验知识点
临床免疫学检验知识点1.免疫系统的基本知识：了解免疫系统的组成、功能和调节机制是理解临床免疫学检验的基础。
免疫系统由免疫器官（如脾脏、淋巴结、骨髓等）和免疫细胞（如淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞等）组成，其功能包括抵御病原体的入侵、清除异常细胞和产生抗体等。
2.免疫细胞的检测方法：常用的免疫细胞检测方法包括流式细胞术、免疫组化和染色技术等。
流式细胞术可用于检测和计数不同类型的免疫细胞，免疫组化和染色技术可用于检测细胞表面标记物和细胞内分子的表达水平。
3.免疫球蛋白的检测方法：免疫球蛋白是免疫系统中的重要成分，其浓度和种类的改变可以指示一些疾病的存在和进展。
测定免疫球蛋白的方法包括免疫电泳、免疫扩散和化学发光等技术。
4.免疫反应的检测方法：免疫反应的检测方法可以用于评估机体对病原体的免疫应答以及检测自身免疫疾病的存在。
常用的免疫反应检测方法包括抗体检测、细胞毒性测定和溶菌试验等。
5.自身抗体的检测方法：自身抗体是机体免疫系统对自身组织产生的免疫反应产物，其异常产生与自身免疫疾病的发生和进展密切相关。
常用的自身抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、间接免疫荧光和免疫印迹等。
6.免疫功能的评估方法：免疫功能的评估可以指导临床医生判断机体的免疫状况和预测疾病的发展趋势。
常用的免疫功能评估方法包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子水平检测和细胞增殖测定等。
7.临床应用：临床免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要意义。
例如，检测艾滋病病毒抗体可用于艾滋病的早期诊断和监测；自身抗体的检测可用于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎的诊断；细胞因子水平的检测可以评估炎症反应和肿瘤的进展等。
综上所述，临床免疫学检验涵盖了多个方面的知识点，包括免疫系统的基本知识、免疫细胞和免疫球蛋白的检测方法、免疫反应和自身抗体的检测方法、免疫功能的评估方法以及临床应用等。
这些知识点对于临床医生正确使用和解读免疫学检验结果具有重要的指导意义。
免疫检验知识点总结
免疫检验知识点总结一、免疫检验的基本原理① 抗体与抗原的相互作用免疫检验的基本原理是利用抗体与抗原的特异性相互作用。
抗体是一种由机体产生的特异性蛋白质，可以识别并结合与之对应的抗原，形成抗原-抗体复合物。
这种特异性相互作用是免疫检验能够有效识别某些疾病的基础。
② 免疫检验的灵敏度和特异性免疫检验的灵敏度是指测试方法能够准确检测到低浓度抗原或抗体的能力，而特异性是指方法能够区分目标抗原或抗体与其他非特异性成分的能力。
通常情况下，免疫检验需要具有较高的灵敏度和特异性，才能准确诊断疾病。
二、常见的免疫检验方法1. ELISA（酶联免疫吸附实验）ELISA是一种广泛应用于医学诊断的免疫检验方法。
它利用酶标记的抗体或抗原与待检测的抗原或抗体结合，通过酶底物的显色反应来检测特定物质的存在和浓度。
ELISA方法可以用于检测各种疾病的标志物，包括感染病原体、肿瘤标志物、药物残留等。
2. 免疫荧光分析免疫荧光分析是利用荧光标记的抗体识别和检测待检测的抗原或抗体。
通过荧光显微镜或荧光光度计来观察或定量分析荧光信号，以确定特定物质的存在和浓度。
免疫荧光分析广泛用于细胞学、免疫学、微生物学等领域的研究和诊断。
3. 免疫固定电泳免疫固定电泳是通过将抗体和待检测的抗原在电泳条件下结合，然后通过免疫印迹方法检测特定蛋白质或其他生物分子的存在和浓度。
免疫固定电泳在临床诊断和科研领域有广泛的应用。
4. 放射免疫测定放射免疫测定是利用放射性同位素标记的抗体或抗原与待检测的抗原或抗体结合，通过放射性测量仪器来检测特定物质的存在和浓度。
放射免疫测定通常具有较高的灵敏度和特异性，可用于检测一些低浓度的生物分子。
5. 流式细胞术流式细胞术是利用激光技术和荧光标记的抗体来检测和分析细胞表面或内部标志物的存在和表达水平。
流式细胞术可以快速高效地分析大量细胞样本，广泛用于免疫学、细胞生物学、肿瘤学等领域的研究和诊断。
三、免疫检验在疾病诊断中的应用1. 传染病的诊断免疫检验方法可以用于感染病原体的检测，例如HIV、乙肝病毒、丙肝病毒等。
临床免疫学知识点
临床免疫学知识点
免疫学是研究生物体对抗病原体（包括细菌、病毒、真菌等）以及保护机体不受损伤的科学，而临床免疫学则是将免疫学的知识应用到临床实践中，帮助医生诊断和治疗免疫相关疾病。
下面将介绍一些临床免疫学的重要知识点。
1. 免疫系统的组成
免疫系统主要由两大部分组成：先天免疫系统和获得性免疫系统。
先天免疫系统是生物体天生具备的免疫功能，包括皮肤、粘膜、巨噬细胞等；获得性免疫系统是在生物体遇到外界病原体后通过学习和记忆产生的免疫功能，包括淋巴细胞、抗体等。
2. 免疫系统的功能
免疫系统的主要功能包括：识别和清除病原体、识别和清除异常细胞、维持机体内稳态等。
当机体受到感染或异常细胞增殖时，免疫系统会发挥作用，保护机体不受损伤。
3. 免疫系统的失调与疾病
当免疫系统失调时，会导致各种免疫相关疾病的发生。
比如免疫系统功能过低可能导致反复感染、免疫系统功能过高可能导致自身免疫性疾病等。
4. 免疫检测
临床上常用的免疫检测手段包括：免疫荧光、酶联免疫吸附试验、
流式细胞术等。
这些检测手段可以帮助医生了解患者的免疫状态，指
导临床诊断和治疗。
5. 免疫相关疾病的诊断和治疗
根据患者的免疫状态和病因，医生可以选择合适的诊断和治疗方案。
比如对于自身免疫性疾病，可以采用免疫抑制治疗等方式。
通过对临床免疫学知识点的了解，可以帮助医生更好地理解和处理
免疫相关疾病，提高患者的生存率和生活质量。
希望本文对读者有所
帮助。
临床免疫学检验-名词解释考点重要知识点归纳（全面）
免疫学考试重点归纳（全面）1抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强，它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
2亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合强度，取决于两者空间结构的互补程度。
3亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
4抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。
5带现象（zone phenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中，由于抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。
6免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7免疫佐剂（immuno adjustvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
8半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性)，而单独不能诱导抗体产生（无免疫原性）的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
9载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
10载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半抗原的免疫应答，该现象称为~。
11单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。
12多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白，即~13基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
临床免疫学检验
一、名解带现象（前带、后带）：在等价带的前后，由于抗体和抗原过量，形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗原，这种现象称为带现象。
当抗体过量时称为前带，抗原过量时称为后带。
凝集反应：是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。
直接凝集反应：在适当电解质参与下，细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体结合出现肉眼可见的凝集现象，称为直接凝集反应。
间接凝集反应：将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体（如正常人O型红细胞、细菌、胶乳颗粒等）的表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适当电解质存在条件下，出现特异性凝集现象，称为间接凝集反应或被动凝集反应。
Coombs试验：又称抗球蛋白试验，是抗球蛋白参与的间接血凝试验，用于检测抗红细胞不完全抗体。
不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但因其分子量较小，体积小，不能起到桥联作用，在一般条件下不出现可见反应。
利用抗球蛋白抗体作为第二抗体起桥联作用，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。
沉淀反应：是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。
高剂量钩状效应：抗原过量可引起高剂量钩状效应，即抗原过量致形成的IC分子小，发生再解离，浊度下降，光散射减少。
海德堡曲线理论：当抗体过量时，IC的形成随着抗原递增至抗原、抗体比例最适处达最高峰，沉淀反应最明显，称等价带，高峰区域左侧，抗体浓度过高，沉淀反应不明显，称前带；高峰区域右侧，抗原浓度过高，沉淀反应也不明显，称后带，这就是海德堡曲线理论。
包被：将抗体或抗原结合在固相载体上的过程称为包被。
封闭：由于包被过程中固相载体表面不能被抗体或抗原蛋白质完全覆盖，实验操作过程中加入的血清标本以及酶结合物中的蛋白质也会部分地非特异性吸附于固相载体表面，最终产生非特异性显色导致测定本底偏高，在这种情况下，需用1%-5%的牛血清白蛋白或5%-20%小牛血清再包被一次，消除此干扰，此过程称为封闭。
临床常用免疫学检验
〖临床意义〗 1. IgE增高：见于IgE型多发性骨
髓瘤、特应性哮喘、特应性皮炎、过敏 性鼻炎、寄生虫感染、热带嗜酸细胞增 多症、SLE、RA及某些霉菌病等。
2. IgE减低：一般无意义。可见于 原发性无丙种球蛋白血症、恶性肿瘤及 细胞毒药物治疗后。
〖注意事项〗 年龄、性别均可影响总IgE水平。一
〖参考值〗 依年龄、性别、地区等因素有 差异。
IgG： 6.94－16.18g/ L IgA： 0.68－ 3.78g/ L IgM： 0.60－ 2.63g/ L 〖临床意义〗 1. Ig 含量减低：一种或多种Ig 水 平减少，分原发性和继发性。见于各种先 天性或获得性免疫缺陷病。继发性常与免 疫抑制剂应用、射线、蛋白质丢失、营养 不良等有关。也可见于细胞毒药物治疗后。
一些专家认为，目前应用的实验室检查项 目，在临床应用前并未给予充分的评价。 Jaeshke等认为，判断一项诊断试验是否 有用的最终标准是：试验是否增加了有用 的诊断信息。Burke认为,如果一项试验主 要用于筛检，其敏感性一定要高，但易出 现假阳性。任何新的检验只有在充分评价 其可靠性、准确性后才能用于临床实践。 而现实是，由于制造商的热情提供试剂、 临床医师和检验人员的欣然接受含量因检测方法不同而有差别，各地 区参考值也不相同，在判断结果时应综 合考虑。如有“M 蛋白”，可进一步作 血清或尿液免疫电泳，检测轻链和重链。
二. 血清总IgE测定 IgE为血清中含量极少的一种免疫球蛋白，
与过敏性疾病和寄生虫感染有关。目前检测 方法有多种，包括 ELISA、间接血凝试验 （indirect hemoagglutination assay IHA ）、 RIA、电化学发光法 （electrochemiluminescence immunoassay， ECLIA，）、IFA 等。 〖参考值〗 0.1-150IU/ml
临床免疫学与检验重要知识点汇总
临床免疫学与检验重要知识点汇总免疫应答主要分为哪几个阶段？1)识别阶段 2)活化与增值阶段 3)免疫效应中枢免疫器官与外周免疫器官有哪些器官组成？各有什么功能？1)中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟得场所,如骨髓,胸腺2)外周免疫器官:免疫细胞产生应答得场所。
如脾脏,淋巴结,黏膜,扁桃体等。
T细胞、B细胞与NK细胞得主要功能分别就是什么？1)T细胞: 介导细胞免疫,辅助体液免疫。
2)B细胞: 产生体液免疫3)NK细胞:介导天然免疫,发挥细胞毒作用。
根据作用方式及其特点得不同,机体存在两类免疫简述各自得概念与特征？1)先天性免疫或固有性免疫,就是个体出生就是就具有得天然免疫,可通过遗传获得,就是机体在长期进化过程中逐渐建立起来得主要针对入侵病原体得天然防御功能。
其主要特征就是反应迅速,针对外来异物得范围较广,不针对某个特定异物抗原,也称非特异性免疫。
2)适应性免疫,就是个体出生后,接触到生活环境中得多种异物抗原,并在不断刺激中逐渐建立起来得后天免疫,也称获得性免疫。
其主要特征就是针对某个特定得异物抗原而产生免疫应答,开始得应答过程比较缓慢,一旦建立清除该抗原得效率很高,特异性很强,也称特异性免疫。
简述抗原抗体反应得原理。
答:抗原与抗体能够特异性结合就是基于抗原表位与抗体超变区分子间得结构互补性与亲与性,这种特性就是由抗原、抗体分子空间构型所决定得,它们之间得结合就是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面得结合简述抗原抗体反应得类型。
答:抗原抗体反应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生得凝集反应;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生得沉淀反应;③抗原抗体结合后激活补体所致得细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致得中与反应;⑤免疫标记得抗原抗体反应等。
什么就是带现象?答:在抗原抗体反应等价带前后,由于抗体或抗原过量(形成前带或后带),上清液中可测出游离得抗体或抗原,形成得沉淀物少,不出现可见反应,这种现象在做血清学试验时称为带现象。
临床免疫学检验重点
一：名词解释1免疫学（immunology）：是研究免疫系统的结构与功能，并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究，探讨有效的免疫措施，实现以防病，治病为目的的一门现代医学科学。
2免疫球蛋白（immunoglobulin）：是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等液体中，约占血浆蛋白总量的20%，IgG能与相应抗原特异性结合，执行体液免疫功能。
3补体（complement）：是存在于人和脊椎动物血清与组织液中一组经活代后有酶活性的蛋白质，包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白，故称为补体系统。
4细胞因子（cytokine）：是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的总称。
大多数细胞因子是低分子量的蛋白或糖蛋白。
5临床免疫学（clinical immunology）：是将免疫学基础理论，临床疾病与免疫学技术相结合，用于研究疾病的免疫病理机制，诊断与鉴别诊断，评价治疗效果和判断预后的多个分支学科的总称。
6亲和性（affinity）：是指抗体分子上的一个抗原结合点与一个相应抗原表位之间的结合强度，抗原抗体的亲和性取决于两者空间构型的互补的程度。
7亲和力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，亲和力与亲和性，抗体的结合价，抗原的有效抗原表位数目有关。
8免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
9半抗原（hapten）：是指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
10免疫佐剂（immunoadjuvant）：预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型，简称佐剂。
11凝集反应（agglutination reaction）：是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原的颗粒性载机与相应抗体特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。
免疫学检验知识点
第一章概论1. 免疫学(Immuno logy)是研究免疫系统的结构与功能，并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究，探讨有效的免疫措施，实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。
免疫学技术对推动免疫学的发展及基础与临床免疫学的结合起了重要作用。
学习免疫学的基本概念，了解临床免疫学的理论基础，掌握免疫技术的检测原理是学习和研究临床免疫学与免疫技术的重要保障。
第一节免疫学简介1. 免疫（immuni ty）是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
免疫系统与机体的其他系统相互配合，相互制约，共同维持机体在生命过程中的生理平衡。
一、免疫学概念与免疫应答1. 宿主体内的免疫系统能识别并清除从外环境中侵入的病原生物及其产生的毒素、内环境中因基因突变产生的肿瘤细胞、自身衰老残损的组织细胞或自身变性抗原，实现免疫防御、免疫自稳、免疫监视。
免疫防御——指机体排斥外源性异物的能力。
免疫自稳——指机体识别和清除自身衰变残损的组织细胞的能力，以维持正常内环境稳定。
免疫监视——指机体杀伤和清除异常突变细胞的能力，以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。
2. 免疫应答反应（immune respon se）：是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应，并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
免疫应答的过程主要分为：识别阶段（recogn ition phase）——抗原识别处理传递信息活化阶段（activa tionphase）——免疫细胞活化增殖产生效应细胞、分子效应阶段（respon se phase）——执行效应功能3. 免疫应答效应大多为生理性，是机体对外来抗原或自身变性抗原的清除效应。
免疫应答反应过强时，可致机体组织或器官发生病理损伤，出现临床疾病。
临床免疫学检验知识
治疗建议
根据具体疾病和病情严重程度，采用药物 治疗、免疫治疗、对症治疗等综合治疗措 施。同时，患者需保持良好的心态和信心 ，积极配合医生的治疗和建议。
05 移植免疫相关检测指标解 读
移植免疫基本概念及原理
移植免疫是指宿主对外来移植 物产生的特异性免疫应答。
移植免疫的基本原理包括供者 与受者之间的遗传差异、免疫 系统的识别和攻击以及移植物 抗原的释放和呈递。
自然杀伤细胞活性测定
51Cr释放法
利用放射性同位素标记靶细胞， 通过测定自然杀伤细胞对靶细胞 的杀伤作用释放出的放射性物质， 计算杀伤率。
流式细胞术
利用流式细胞仪检测自然杀伤细 胞与靶细胞结合后释放的荧光物 质或酶，以评估其杀伤活性。
MTT比色法
利用四甲基偶氮唑盐作为显色剂， 通过测定自然杀伤细胞对靶细胞 的杀伤作用导致的颜色变化，计 算杀伤率。
提示可能存在自身免疫性疾病，需结合临床表现和其他检查结果 进行综合判断。
检测结果阴性
不能完全排除自身免疫性疾病的可能，需结合其他因素进行考虑。
检测结果的变化趋势
可用于监测疾病的活动性和治疗效果。
预防措施和治疗建议
预防措施
保持健康的生活方式，避免感染、环境 污染等诱发因素，定期进行体检和筛查 。
VS
测定B淋巴细胞分泌细胞因子的水平，如白 介素-4、白介素-6等，以评估B细胞功能。
巨噬细胞功能评价方法
1 2
吞噬功能试验
通过测定巨噬细胞吞噬颗粒物质的能力，评价其 吞噬功能。
杀菌功能试验
检测巨噬细胞对细菌的杀伤能力，反映其抗感染 功能。
3
细胞因子检测
测定巨噬细胞分泌细胞因子的水平，如肿瘤坏死 因子、白介素-1等，以评估其功能。
临床免疫学检验知识点
临床免疫学检验1、免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。
3、中枢免疫器官：骨髓、胸腺；外周免疫器官：淋巴结、脾脏（最大）、黏膜相关淋巴组织4、B细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导体液免疫；B细胞受体=BCR=mIg表面标志：膜免疫球蛋白（SmIg）、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞：CD19、CD20、CD21、CD22 （成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD）同时检测CD5分子，可分为B1细胞和B2细胞。
B细胞功能检测方法：溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。
5、T细胞：介导细胞免疫。
共同表面标志是CD3（多链糖蛋白）；辅助T细胞的标志是CD4；杀伤T细胞的标志是CD8；T细胞受体=TCR。
T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2（绵羊红细胞受体）；CD3＋CD4＋CD8－ = 辅助性T细胞（Th）CD3＋CD4－CD8＋ = 细胞毒性T细胞（Tc或CTL）（T细胞介导的细胞毒试验）CD4＋CD25＋ = 调节性T细胞（Tr或Treg）T细胞功能检测：植物血凝素（PHA）刀豆素（CONA）刺激T细胞增殖。
增殖试验有：形态法、核素法。
T细胞亚群的分离：亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验；6、NK细胞：具有细胞介导的细胞毒作用。
直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞）表面标志：CD16（ADCC）、CD56。
测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株，而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。
7、吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统（MPS，表面标志CD14，包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。
（表达MHCⅡ类分子）8、人成熟树突状细胞（DC）（专职抗原呈递功能）：表面标志为CD1a、CD11c和CD83。
临床免疫学检验
临床免疫学检验一、免疫球蛋白检测•概念：免疫球蛋白（Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称。
由浆细胞产生，存在于机体的血液、体液、外分泌液和某些细胞的膜上。
（一）分类•按重链性质分:IgG、IgA、IgM、IgD 、 IgE、IgG•于出生后三个月开始合成， 3—5岁接近成人水平。
IG是血液中含量最高的Ig，占血清总Ig的75%—80%，是抗感染的主要抗体。
是唯一能通过胎盘的抗体。
IgA：分为分泌型和血清型，分泌型的合成和分泌部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺，血清型占总Ig的10—20%。
IgM：是分子量最大的Ig。
占血清Ig的5-10%。
是个体发育过程中最早出现的抗体，在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM。
在机体受抗原刺激后，是最先产生的抗体。
IgM是血管内抗感染的主要抗体。
IgE:是正常人血清中含量最少的Ig。
约0.1—0.9mg/L。
占总血清Ig的0.02%，为亲细胞抗体。
参与Ⅰ型超敏反应,与变态反应、寄生虫病及皮肤过敏有关。
（四）临床意义⒈免疫球蛋白增高•（1）单克隆免疫球蛋白增高（M蛋白血症）IgG、IgA 、IgD 或IgE增高。
见于：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症.淋巴样异常增生性疾病等。
•（2）多克隆免疫球蛋白增高•①感染：特别是慢性感染如细菌、寄生虫、螺旋体感染，IgG、IgM增高②自身免疫性疾病：SLE以IgG、IgA或IgG、 IgM增高多见，类风关以IgM增高为主③慢性肝病：IgG、 IgA 、IgM可增高，慢活肝IgG、IgM增高明显⑶IgD增高：见于IgD型多发性骨髓瘤、妊娠末期、大量吸烟者•⑷IgE增高：见于IgE型多发性骨髓瘤、变态反应性疾病、寄生虫病及皮肤过敏、急慢肝、肾综⒉免疫球蛋白减少IgG＜6.0g/L，IgM、IgA＜0.4g/L（1）先天性：见于先天性无丙种球蛋白血症、先天无胸腺症•（2）获得性：见于大量蛋白丢失性疾病：肾综、剥脱性皮炎中毒性骨髓病、白血病、淋巴网状系统肿瘤：淋巴瘤、霍奇金病长期使用免疫抑制剂⑶Ig减少易引起反复感染•IgG缺乏：易患化脓性感染•IgM 缺乏：易患革兰氏性阴败血症•IgA缺乏：易患呼吸道感染二、血清M蛋白检测⏹ M蛋白是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的，具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子或其分子片段。
临床免疫学检验(名解及答题)
临床免疫学检验【名词解释】1、enzyme immunoassay（EIA）酶免疫分析技术，是以酶标记的抗体（抗原）作为主要试剂，将酶高效催化反应的专一性和抗原抗体反应的特异性相结合的一种免疫标记检测技术。
2、colloidal gold immunoassay胶体金免疫技术，是以胶体金作为示踪标记物或显色剂，应用于抗原抗体反应的一种标记免疫测定技术。
3、immunoblot test（IBT）免疫印迹试验，是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的技术。
4、precipitation reaction沉淀反应，指可溶性抗原与相应抗体在适当的条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。
5、agglutination reaction凝集反应，指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。
6、immunogen免疫原，指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7、adjuvant （immunoadjuvant）佐剂（免疫佐剂），指预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质。
8、hapten半抗原，指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
如多糖、多肽、类脂和核酸等物质。
9、monoclonal antibody（McAb）单克隆抗体，设法将单个B细胞分离出来加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生出针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，称为单克隆抗体。
10、Polyclonal antibody（PcAb）多克隆抗体，亦称免疫血清，用抗原以不同途径免疫动物，从动物血清中获取抗体，该类含有抗体的血清称为抗血清。
由于免疫动物的抗原往往具有多种抗原表位，可激活体内多个B细胞克隆产生针对抗原多种表位的混合抗体，因而抗血清也称为多克隆抗体。
11、tumor antigen肿瘤抗原，指细胞癌变过程中新出现的或异常表达的抗原物质。
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12、抗体由浆细胞产生。
抗体分子上 VH 和VL （高变区）是抗原结合部位。
临床免疫学检验免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。
中枢免疫器官：骨髓、胸腺； 外周 免疫器官：淋巴结、 脾脏（最大 ）、黏膜相关淋巴组B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导 体液免疫;B 细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（Smig ）、Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B 细胞：CD19 CD20 CD21 CD22 （成熟B 细胞的 mig 主要为mIgM 和mIgD ）同时检 测CD5分子，可分为B1细胞和B2细胞。
B 细胞功能检测方法： 溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。
5、T 细胞：介导细胞免疫。
共同表面标志是CD3（多链糖蛋白）；辅助T 细胞的标志是CD4; 杀伤T 细胞的标志是 CD8 T 细胞受体=TCRT 细胞和NK 细胞的共同表面标志是 CD2（绵羊红细胞受体）；CD 外CD4+ CD8-=辅助性T 细胞（Th ）CD 外CD4 CD8+ =细胞毒性T 细胞（Tc 或CTL ）（ T 细胞介导的细胞毒试验）CD 知CD25^ =调节性T 细胞（Tr 或Treg ）T 细胞功能检测：植物血凝素（PHA ）刀豆素（CONA 刺激T 细胞增殖。
增殖试验有：形态 法、核素法。
T 细胞亚群的分离： 亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法*E 花环试验是通过检测SRBC 受体而对T 细胞进行计数的一种试验;6、NK 细胞：具有细胞介导的 细胞毒作用。
直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC ）、 CD56。
测定人NK 细胞活性 的靶细胞多用 K562细胞株，而测定小鼠 NK 细胞活性则常采用 YAC-1细 胞株。
7、吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统 （MPS 表面标志CD14包括骨髓内的前单核细胞、 外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。
（表达MH ffi 类分子）8、人成熟树突状细胞 （DC （专职抗原呈递功能）： 表面标志为CD1a CD11C 和CD839、免疫球蛋白可分为分泌型（sig ，主要存在于体液中，具有抗体功能）及膜型（mIg ，作 为抗原受体 表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白）10、免疫球蛋白按 含量多少排序：lgG > IgA > IgM > IgD > IgE 五类（按重链恒定区抗原性（CH 排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。
11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于 恒定区（ CH 、 CL ）1、 免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、3、4、30、抗血清常见保存条件：2-8 C 保存；冷冻保存（最常用）；真空干燥保存（ 5-10 年）。
13、IgG :血清中含量最高的免疫球蛋白（IgG1最高），血液和细胞外液中的主要抗体。
也 是再次免疫应答 的主要抗体，是 唯一能通过胎盘 的抗体，大多数抗菌抗体、抗病毒抗体是 IgG ，某些自身抗体及超敏n 型抗体是 IgG ，免疫学检测中第二抗体也以 IgG 为主。
14、IgA :分血清型（单体存在）及分泌型；分泌型 IgA （sIgA ）为二聚体，性能稳定，主 要存在于胃肠道、支气管分泌液、 初乳、唾液 、泪液中，局部浓度高，是参与 黏膜局部免疫 的主要抗体。
15、IgM ：为五聚体，主要存在于血液中，是 Ig 中分子量最大的（又称巨球蛋白）。
个体发 育最早合成 和分泌的抗体。
抗原刺激后体液免疫应答中 最先产生 的抗体，感染过程中血清 IgM 水平升高，说明 近期感染。
新生儿脐血中若IgM 增高，提示有宫内感染。
16、IgE :为单体结构，正常人血清中 含量最低。
IgE 为亲细胞抗体，介导 I 型超敏反应。
特异性过敏反应和寄生虫早期感染患者血清中可升高。
17、 补体 :具有酶样活性的球蛋白（肝细胞、巨噬细胞产生）；激活途径主要有三种:经典 途径（以结合抗原后的IgG 或IgM 类抗体为主要 激活剂（双链 DNA , C1〜C9全部参与）、 替代途径（病原微生物 细胞壁成分（脂多糖）直接激活补体 C3,然后完成C5〜C9的激活过 程）完全抗原 =反应原性 +免疫原性。
半抗原 =反应原性（ 无免疫原性 ）抗原抗体反应 的四大特点：特异性 、可逆性、 比例性、阶段性 ；受反应条件（如温度、 电解质、抗原抗体比例等）的影响。
抗原抗体反应 可分为两个阶段： 第一阶段 为抗原与抗体发生特异性结合的阶段， 此阶段 反应快， 仅需几秒至几分钟， 但不出现可见反应；第二阶段 为可见反应阶段， 此阶段 反应慢， 往往需要数分钟至数小时。
26、颗粒性抗原出现凝集反应。
可溶性抗原出现沉淀反应。
单价抗原与相应抗体结合不出现 沉淀现象。
27、 木瓜酶 水解 IgG 为 2Fab+Fc ； 胃蛋白酶 水解 IgG 为 F （ab ）2+nFc 。
28、最常用于免疫 动物 的佐剂是 弗氏佐剂 ，弗氏佐剂分为弗氏完全佐剂 （弗氏不完全佐剂加 卡介苗）和弗氏不完全佐剂两种。
29、R （兔子）型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适 较宽 ，适于作 诊断试剂 。
H （马）型抗血清是用马等大动物免疫获得的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较 用作 免疫治疗 。
、MBL 途径 （由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素 （MBL 与病原体结合后启动激活）。
18、补体系统中C3含量最多, C2含量最少。
19、灭活：加热 56 C 30分钟, 补体丧失活性 20、补体清除免疫复合物的方式： 吞噬调理；免疫粘附；免疫复合物抑制。
21、 22、 抗原抗体结合力 （分子间引力）：静电吸引、范德华力、氢键、 疏水作用力（最强） 23、 pH 24、 抗体过量——前带；抗原过量——后带（钩状效应）25、 范围窄 ，一般杂交瘤细胞放入液氮（-196 C ）前，需要逐步降温。
复苏细胞时，从液氮罐内取出冻存 立即浸入37 C 水浴。
凝集反应分为两个阶段：①抗原抗体的特异性结合；②出现可见的颗粒凝聚。
直接凝集反应 ：细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的 电解质（ 0.85%氯化钠） 参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
抗原 =凝集原，抗体 =凝集素。
34、玻片凝集试验：主要用于抗原的定性分析， AB0血型的测定。
试管凝集试验 ：肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验；35、正向间接血凝反应（PHA :红细胞包被 抗原，用以检测抗体。
（凝集）反向间接 血凝反应（RPHA ：红细胞包被 抗体，用以检测抗原。
（凝集）36、间接血凝抑制试验： 可用于检测抗体、 自身抗体、 变态反应性抗体， 也可测定抗原。
（ 不 凝集） 37、金黄色葡萄球菌 A 蛋白（SPA --协同凝集反应（反向间接凝集）38、血凝试验（载体为绵羊、家兔、鸡的红细胞及 0型人红细胞）可在微量滴定板或试管中进行，将标本倍比稀释，一般为 1:64，同时设不含标本的稀释液为对照孔。
凡红细胞沉积 于孔底， 集中呈一圆点 的为不凝集 。
如红细胞 凝集，则分布于孔底 周围。
39、 胶乳凝集 试验（间接凝集），所用载体为 聚苯乙烯 胶乳； 明胶凝集 试验（间接）将病毒 抗原或重组抗原吸附于 粉红色明胶颗粒 ： HIV-1 抗体和抗精子抗体检测40、抗球蛋白试验，又称 Coombs 试验，是检测抗红细胞 不完全抗体的一种很有用的方法。
包括直接Coombs 试验（检测红细胞上的不完全抗体） 和间接Coombs 试验（游离在 血清中的 不完全抗体） 41、沉淀反应分两个阶段：第一阶段 为抗原抗体发生特异性结合，几秒到几十秒即可完成， 出现可溶性小的复合物， 肉眼不可见 。
第二阶段 为形成可见的免疫复合物， 约需几十分钟到 数小时才能完成，如沉淀线、沉淀环。
絮状沉淀试验： 抗原抗体溶液在电解质的存在下结合， 形成絮状沉淀物， 这种絮状沉淀受抗 原和抗体比例的直接影响，因此 常用 来作为测定 抗原抗体反应最适比例 的方法。
42、免疫比浊：最适pH 为6.5〜8.5，磷酸盐缓冲液。
（R 型抗体，增浊剂如聚乙二醇（PEG 、 吐温 -20）。
适合于 大批量标本 的检测。
当反应液中 抗体过量 时， IC 的形成随着抗原递增而增加，至抗原、抗体最适比例处达最高 峰，这就是经典的 海德堡曲线理论 。
当抗原过量 时，形成的 IC （免疫复合物）分子小，而且会发生再解离，使 浊度反而下降 ， 光散射亦减少 ，这就是高剂量 钩状效应 。
43、 单向扩散试验 是在琼脂内混入抗体， 测抗原 。
Mancini 曲线适用大分子抗原和长时间扩散（＞48小时）的结果，沉淀环直径的平方与抗原浓度呈线性关系。
Fahey 曲线 适用于小分子抗原和较短时间扩散的结果处理，用半对数值画线，浓度对数与 扩散环直径呈线性关系。
双向扩散试验 是对抗原或抗体进行定性分析。
31、 32、 33、EIA :异相法：先分离，后测定。
固相酶免疫测定（如 ELISA )沉淀线如果 靠近抗原孔 ，则表示 抗体含量较大 沉淀线如果 靠近抗体孔 ，则表示 抗原含量较大 。
不出现沉淀线 则表明 无对应的抗体或抗原 或者抗原 过量 。
* 分子量小者扩散快，反之则较慢。
由于慢者扩散圈小，局部浓度则较大，形成的沉淀线弯向分子量大的一方。
如果两者分子量大致相等，则形成直线。
* 两条沉淀线互相吻合相连 ，表明抗体与两个抗原中的相同表位结合而沉淀，两个 沉淀线呈部分相切，说明两个抗原之间有部分相同。
两条沉淀线交叉而过，说明两个抗原完全不同。
*出现沉淀线最高的抗体稀释度为该抗体的效价。
*出现一条沉淀线说明待测抗原或抗体纯。
出现多条沉淀线说明不纯。
44、对流免疫电泳 （ 双向免疫扩散 与 电泳 相结合的 定向加速 的免疫扩散技术）：抗体流向负 极，抗原流向正极；最适比例出现沉淀线。
火箭免疫电泳 是将单向免疫扩散与电泳相结合的一项定量检测技术， 实质上是加速的单向扩 散试验。
（抗体混合于琼脂 中，样品孔中的抗原置于负极端，电泳时抗体 不移动 ，抗原向正 极泳动 ，随着抗原量的逐渐减少， 抗原泳动的基底区越来越窄， 抗原抗体分子复合物形成的 沉淀线逐渐变窄， 形成一个形状如火箭的不溶性复合物沉淀峰。
）顶部呈不清晰的云雾状或 圆形，则表示未达终点 。
免疫电泳技术：区带电泳 +免疫双向扩散。
用于纯化抗原和抗体成分的分析免疫固定电泳：电泳+沉淀反应技术，可用于各种蛋白质的鉴定 （M 蛋白的鉴定与分型， 也 用予尿液中本-周蛋白的检测及K 、入分型，脑脊液中寡克隆蛋白的检测及分型。