蛙坐骨神经-腓肠肌标本制备实验
生理学实验1 蛙坐骨神经腓肠肌标本的制备
生理学实验1 蛙坐骨神经腓肠肌标本的制备一、目的和原理蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动与温血动物近似，但其离体组织所需的生活条件比较简单，且易于控制，因此在生理学实验中常用其离体组织或器官作为实验标本。
例如：蛙或蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本，可用来观察和研究兴奋性、兴奋过程、刺激引起兴奋的条件、兴奋在神经-肌接头处的传递、肌肉收缩的特点等多种生理现象，所以，制备坐骨神经-腓肠肌标本，是生理学实验的一项基本操作技术。
本实验的目的是：学习并掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的方法，为以后的神经肌肉实验打下基础。
二、实验对象蛙或蟾蜍三、器材和用品蛙板、蛙针、蛙钉、剪刀（2把）、镊子（2把）、玻璃针、锌铜弓、培养皿、滴管、棉线、棉球、尸体盘（以上用品合称蛙类解剖器械一套）及任氏液。
四、方法与步骤1．破坏脑脊髓选一活泼健壮的蛙或蟾蜍，用清水冲洗干净。
左手握蛙，用食指下压吻端，拇指按压背部，使头前俯；右手持蛙针由吻端沿正中线向尾端触划，所触到的凹陷处即是枕骨大孔所在部位。
将蛙针由此垂直刺入皮下，再将针尖折向前方，经枕骨大孔进入颅腔，左右搅动捣毁脑组织（图1-1）。
然后将蛙针退出至刺入点皮下，再将针尖向后插入椎管捣毁脊髓。
图1-12．剪除前部躯干及内脏在骶髂关节以上1厘米处用粗剪刀剪断脊柱，并将前部躯干及所有内脏一并剪去，仅保留一段腰骶部脊柱和后肢。
在所留脊柱的腹侧两旁可看到坐骨神经丛。
剪下的部分置于尸体盘内。
3．剥皮左手捏住脊柱断端，右手捏住断端边缘的皮肤，向下剥掉后肢的全部皮肤，标本置于盛有任氏液的培养皿中待用，皮肤弃去。
洗净双手和器械，以免蛙或蟾蜍皮肤的分泌物损害神经和肌肉。
4．分离两后肢将下肢标本腹侧向上用蛙钉固定于蛙板上，用玻璃针沿脊柱两侧分离两条坐骨神经；在两条坐骨神经下各穿一线，于靠近脊柱处将其分别结扎，并在扎线与脊柱之间剪断神经；左手用结扎线提起坐骨神经，右手持剪刀或玻璃针向下游离，直至坐骨神经出盆腔处；将游离的两条坐骨神经分别置于两侧大腿的肌肉上。
坐骨神经—腓肠肌标本的制备
实验名称：坐骨神经—腓肠肌标本的制备一、实验目的学习坐骨神经—腓肠肌标本的制备方法，掌握基本操作技术。
二、实验原理1、牛蛙作为实验动物的优势容易饲养，产量丰富价格便宜，性价比高。
蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与哺乳动物相似，如神经的生物电活动、肌肉收缩等。
牛蛙是哺乳动物的理想替代品。
牛蛙的离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。
在任氏液的浸润下神经肌肉标本可较长时间保持生理活性。
2、使用锌铜弓检验标本活性的原理锌铜弓是把一根锌棒和一根铜棒一端焊在一起，另一端分开。
锌的金属电势比铜低，形成一定的电势差（就相当于有电压）。
细胞的静息膜电位为外正内负，电刺激可改变可兴奋细胞的膜电位差。
膜电位减小时，细胞去极化。
细胞兴奋，膜电位增大时，细胞超极化，细胞兴奋性被抑制。
当用锌铜弓接触标本时，可产生沿锌片—活组织—铜片流向的电流对细胞产生刺激效应。
引起标本局部去极化，引发动作电位，肌肉收缩。
三、实验器材1、实验动物：牛蛙。
2、实验器材：任氏液，蛙类手术器械一套，大头针，锌铜弓。
四、实验流程和步骤1、实验流程洗干净实验动物→毁髓→剥制后肢→分离两后肢→分离坐骨神经→游离腓肠肌→分离股骨头→标本检验2、实验方法与步骤（1）毁髓：一只手握住牛蛙，使其背部向上。
用拇指压住牛蛙背部，食指压其头部前端，另一只手持毁髓。
用解剖针从蛙的枕骨大孔（把头抬起来时凹陷的部位或者脊柱与头骨的中心点）插入向前搅动后再向后搅动，直至毁髓成功（蛙的四肢自然下垂，瘫软无力）。
（2）剥制后肢标本：轻提双毁髓蛙，自背面耻骨联合上方约 1 公分处用粗剪刀横向剪断脊柱。
轻轻托起后肢，看清坐骨神经位置。
沿脊柱两侧横向切口剪断体壁、去除断口以上肢体和内脏放入污物缸。
剥去后肢皮肤后放入任氏液中备用。
（3）分离两后肢：用粗剪刀纵向剪开脊柱，并剪断两后肢相连的肌肉。
一只用于剥制标本，另一只放入任氏液中保存。
（4）分离坐骨神经、将后肢二标本脊柱端腹面向上、趾端向外侧用蛙钉将标本固定在蛙板上。
蛙的坐骨神经—腓肠肌的标本制作及神经干的性质实验
中央民族大学生命与环境科学学院实验报告生理学实验报告蛙的坐骨神经—腓肠肌的标本制作及神经干的性质实验姓名：唐胜华学号：0941063学院：生环学院班级：09生科指导老师：覃筱燕完成时间：2011.10.17组别：十一、十二组成员：韩旭思关晴月唐胜华一、实验目的1、学习蛙类动物单毁髓和双挥髓的处死办法。
2、学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本以及腓肠肌标本制备的方法。
3、学习电刺激方法及肌肉收缩的记录方法。
4、观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系。
5、观察肌肉收缩的总和以及强直收缩现象。
6、观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的原理。
7学习蛙和蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。
二、实验原理腓肠肌由许多的纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应，。
当刺激强度过小时，不应期肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。
而能引起肌肉发生收缩的最小刺激强度，为域刺激，但全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。
这时，即使再加大刺激强度，肌肉的收缩强度也不会随之而增大。
可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激。
肌肉组织对于一个域上强度的刺激，发生一次迅速地收缩反应，即单收缩。
单收缩的过程分为三个时期，潜伏期、收缩期、舒张期。
两个同等强度的域上刺激，相继作用与神经-腓肠肌标本，如果刺激间隔大于单个收缩的时程，肌肉则出现两个单独的单收缩；如果刺激间隔小于单收缩的过程而大于不应期，则出现两个收缩反应的重叠，及收缩的总和。
如果第二次刺激在第一个收缩反映的不应期内，则第二次刺激不产生收缩反应。
但同等强度的连续域上刺激作用于标本时，则出现多个反应的叠加，及强直收缩。
但第一手所发生在第一收缩的舒张期，即发生不完全强直收；后一收缩发生在第一次收缩的收缩期时，各自的收缩完全融合，肌肉出现持续的收缩状态，即发生完全的强直收缩。
神经干在收到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。
生理学实验报告-《坐骨神经-腓肠肌标本的制备》
实验二-坐骨神经标本—腓肠肌标本的制备一、实验目的：1.学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。
2.学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本及腓肠肌的制备方法。
3.了解电刺激的极性法则。
二、实验原理：1、牛蛙作为实验动物的优势：离体实验是动物生理学主要的实验方法之一。
两栖动物是冷血动物，其基本生理机能与温血动物近似，而其离体组织器官维持活性所需要的条件比较简单，因此它常被选为生理学实验提供离体组织或器官的实验动物。
蟾蜍或青蛙坐骨神经—腓肠肌在任氏液中可维持生理活性数小时，在其基础上还可进一步制作神经干标本、腓肠肌标本，可用于研究肌肉收缩的特性，神经和肌肉的兴奋性、传导性，刺激与反应的关系，神经肌肉接头活动等生理活动及相关机制，甚至还可以用于药物筛选如抗疲劳药物的模型。
其中牛蛙人工养殖成本低产出率高，相对蟾蜍要更安全。
因此，本次实验选择牛蛙作为实验对象。
2、锌铜弓刺激检测标本活性的原理：锌铜弓在溶液中沾湿以后，锌的表面电离出正离子，里面形成负离子；而铜的表面电离出负离子,里面形成正离子。
当用锌铜弓接触活组织时，电流便沿着锌一活组织→铜的方向流动而产生刺激效应。
所以锌相当于正极,面铜相当于负极发挥刺激作用；当断开时，则发生相反的效应。
锌的金属电势比铜低，形成一定的电势差（就相当于有电压），锌铜弓是把一根锌棒和一根铜棒一端焊在一起，另一段分开，则接触样本（例如神经干）时，会引起样本局部去极化，引发动作电位。
三、实验器材：牛蛙，常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针)，蜡盘，蛙板（木质或硬泡沫塑料），玻璃板，固定针，锌铜弓，培养皿或不锈钢盘，污物缸，滴管，纱布，粗棉线，任氏液。
四、实验流程和步骤：1.牛蛙的双毁髓一手握住牛蛙，背部向上。
用拇指压住牛蛙的背部，食指按压其头部前端，使头端向下低垂；另一手持毁髓针，由两眼之间沿中线向后触划，当触及两耳中间的凹陷处（此处与两眼的连线成等边三角形）时，持针手即感觉针尖下陷，此处即是枕骨大孔的位置。
蛙的生理实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习蛙的解剖结构，掌握青蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 了解神经和肌肉的兴奋、兴奋性，刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。
3. 掌握蛙心灌流实验方法，观察心脏活动的影响因素。
二、实验原理1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备：蛙的坐骨神经和腓肠肌在生理条件下具有兴奋性和传导性，通过制备坐骨神经-腓肠肌标本，可以观察神经和肌肉的兴奋、兴奋性，刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。
2. 蛙心灌流实验：离体心脏灌流实验是研究心脏生理功能的重要方法，通过改变灌流液的成分，可以观察其对心脏活动的影响，了解心脏的正常节律性活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、任氏液、生理盐水、剪刀、手术剪、眼科镊、金属探针、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、套管夹、65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器：蛙类解剖台、显微镜、电生理实验系统、刺激器、数据采集系统、蛙心灌流装置。
四、实验方法与步骤1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备：（1）取青蛙一只，用生理盐水冲洗干净，左手握住蛙，使其背部向上。
（2）用眼科镊和剪刀在青蛙的坐骨神经和腓肠肌处剪开，分离出坐骨神经和腓肠肌。
（3）将坐骨神经和腓肠肌置于任氏液中，用玻璃分针轻轻拨动腓肠肌，观察肌肉收缩情况。
2. 蛙心灌流实验：（1）将青蛙的左心耳和左肺静脉用细线结扎，然后剪断，使心脏与体循环分离。
（2）将心脏置于蛙心灌流装置中，连接计算机采集系统和刺激器。
（3）将灌流液（任氏液）通过灌流装置注入心脏，观察心脏搏动情况。
（4）改变灌流液的成分，如加入肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸等，观察心脏活动的影响。
五、实验结果与分析1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备成功，腓肠肌在刺激下产生明显的收缩反应。
2. 蛙心灌流实验成功，心脏在灌流液的作用下保持节律性搏动。
生理学实验 坐骨神神经腓肠肌标本制备
实验一 坐骨神经腓肠肌标本制备【实验目的】掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备技术，为以后有关实验打下基础。
【实验原理】两栖类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似， 而其离体组织所需的生活条件 比较简单，易于建立、控制和掌握。
因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观 察兴奋与兴奋性的一些规律以及骨骼肌的收缩特点等。
所以坐骨神经腓肠肌标本的制备是生 理实验的一项基本操作技术。
【实验对象】蟾蜍或蛙。
【实验材料】两栖类手术器械 1套(粗剪刀、组织剪、眼科剪、组织镊、眼科镊、金属探针、玻璃 分针、蛙板)、手术线、蛙尸缸、滴管、平皿、锌铜弓、任氏液。
【实验步骤】1． 破坏脑和脊髓取蟾蜍 1 只，用自来水冲洗干净。
左手握住蟾蜍，用拇指按压背部，食指按压头部 前端使其头部前俯，右手持金属探针在头前缘沿正中线向尾端触划，所触划到的头部后 端的凹陷处，即为枕骨大孔所在部位。
在此处将金属探针垂直刺入皮肤，有突破感后再 将金属探针折向前经枕骨大孔刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；然后将金属探针回抽至 枕骨大孔处，转向后刺入脊椎管，反复提插捣毁脊髓。
此时如蟾蜍的四肢松软，呼吸运 动消失，表示脑和脊髓已完全破坏，否则应按上法再行捣毁。
2． 剪除躯干上部及内脏如图 1－1 所示，在骶髂关节位置用左手将蟾蜍提起，在骶髂关节水平以上 0.5～l 厘米处用粗剪刀剪断脊柱，然后将粗剪刀尖向下深入体腔沿躯干两侧剪开皮肤，使蟾蜍 头、上肢与内脏自然下垂，将其一并剪除弃去，仅留后肢、骶骨、脊柱及紧贴于脊柱两 侧的坐骨神经。
在整个剪除过程中注意勿损伤神经。
3． 剥皮左手用组织镊夹紧或用手直接捏住脊柱断端(注意：不要夹住或接触神经)，右手捏，将标本放在盛有任氏液 住其上的皮肤边缘，用力向下剥掉全部后肢皮肤（见图 1－2）的平皿中。
将手及用过的粗剪刀、组织镊等全部手术器械洗净，再进行下述步骤。
4． 分离两腿用镊子从背位夹住脊柱将标本提起，剪去向上突出的骶骨(注意勿损伤坐骨神经)，然后沿正中线用粗剪刀将脊柱分为两半，并从耻骨联合中央剪开两侧大腿，然后将分离的两条腿浸于盛有任氏液的平皿中备用。
蛙坐骨神经腓肠肌标本制备、生物电现象的观察
实验一蛙坐骨神经腓肠肌标本制备[目的] 熟悉蛙(或蟾蜍) 的坐骨神经腓肠肌标本的制备方法，初步掌握几项基本实验操作。
[原理] 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相类似，而其组织在离体状态下，易于控制和掌握，所以蛙类的神经一肌肉标本常用以研究兴奋性、兴奋过程、刺激的一些规律和特性。
[实验动物] 蛙(或蟾蜍)[器材及药品] 解剖器械，锌铜弓，培养皿，烧杯，任氏液，棉花，线。
[方法及步骤]1．破坏脑脊髓：取蛙或蟾蜍一只，用蛙针从枕骨大孔垂直插入，向前伸人颅腔，捣毁脑髓；向后插入椎管，捣毁脊髓。
如果蛙处于瘫痪状态，表示脑和脊髓完全破坏。
然后沿两侧腹部将蛙横断为上下两半。
并将前半段弃去，保留后半段备用。
2．剥离皮肤：先剪去尾椎末端及泄殖腔附近的皮肤，然后从脊柱的断端撕下皮肤，将其全部剥去，直至趾端。
除去内脏，将标本放在滴有任氏液的蛙玻璃板上。
将手及使用过的解剖器械洗净。
3．分离标本为两部分：沿脊柱正中线将标本匀称地剪成左右两半，一半浸入盛有任氏液的烧杯中备用，另一半作进一步剥制。
4．分离坐骨神经：在大腿背侧的半膜肌与股二头肌之间用玻璃分针分离出坐骨神经。
注意：分离时要仔细用剪刀剪断坐骨神经的分支，向上分离至基部，向下分离到腘窝。
保留与坐骨神经相连的一小块脊柱，将分离出来的坐骨神经搭于腓肠肌上；去除膝关节周围以上的全部大腿肌肉，刮净股骨上附着的肌肉，保留的部分就是坐骨神经及股骨。
5．分离腓肠肌：在跟键上扎一线，提起结线，剪断结线后的跟腱，腓肠肌即可分离出来。
此时在膝关节下方将其他所有组织全部剪去，到此为止，带有股骨的坐骨神经腓肠肌标本制备完成。
6.标本的检验：将坐骨神经腓肠肌标本放置在蛙玻璃板上，用锌铜弓刺激坐骨神经，若腓肠肌迅速发生收缩反应，说明标本机能良好，制备成功。
应及时移放入盛有任氏液的培养皿中，供实验之用。
[注意事项]1．剥制标本时，切忌用金属器械牵拉或触碰神经干。
2. 分离肌肉时应按层次剪切。
蛙或蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备
1. 破坏脑脊髓 取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。左手握住蟾蜍，用食指压住头部前端使 头前俯，右手持刺蛙针从枕骨大孔向前刺入颅腔（图 1-1），左右搅动捣毁脑组织，然 后将刺蛙针退到枕骨大孔，不拔出而是将其尖转向后插入脊柱管中捣毁脊髓，插入椎管 时，蟾蜍后肢立即失去紧张性，多数情况出现尿失禁。若脑脊髓破坏完全，可见蟾蜍四 肢松软，呼吸消失。
5. 游离坐骨神经和剪断股骨 认清坐骨神经沟和腓肠肌的部位（图），用剪刀剪断梨状肌 及其周围的结缔组织，左手提着神经上的细线，右手持剪刀或玻璃分针沿坐骨神经沟细 心剥离，直至将坐骨神经剥离到腘窝。将游离干净的坐骨神经放在下腿上，沿膝关节的 周围将大腿的所有肌腱剪断，并用剪刀刮净股骨下段附着的肌肉，在股骨上三分之一处 剪去上段股骨及所附的肌肉，这样制成的称为坐骨神经下腿标本（图 1-4）。
图 1-1 破坏蟾蜍脑脊髓
图 1-2 剪除躯干和内脏
图 1-3 剥除后肢皮肤
4. 分离两腿 用玻璃分针沿脊柱两侧游离出两条坐骨神经，并于近脊柱处各扎一细线，然 后在扎线与脊柱之间剪断神经。提着神经上的细线，将两条坐骨神经分别置于两条大腿 上，左手持脊柱，将骶骨翘起，将下位脊柱全部剪除。捏着两侧骼骨向反方向分离，使 耻骨联合脱臼后，沿耻骨联合正中将两下肢剪开，将一条腿浸于任氏液中备用，另一条 置于浸有任氏液的玻璃板上。
6. 游离腓肠肌 在坐骨神经下腿标本的基础上，用剪刀将跟腱的下端剪断，在跟腱与肌肉 交界处扎一条细线，左手提线，右手用剪刀游离腓肠肌，直到膝关节。最后用粗剪刀在 膝关节下将小腿剪去，留下的即为坐骨神经腓肠肌标本（图 1-5）。做好的标肌立即收缩，表示标本的兴奋性良好，然后将标本 放入任氏液中，待其兴奋性稳定后再进行实验。
实验 1 蛙或蟾蜍坐骨神经－腓肠肌标本的制备
实验二 坐骨神经-腓肠肌标本的制备
实验二坐骨神经－腓肠肌标本的制备一．目的和要求1．学习蛙类动物双毁髓的实验方法2．学习掌握坐骨神经－腓肠肌标本的制备方法3．了解急性离体器官，组织实验二．动物与器材1．动物：蟾蜍2．器材：常用手术器械（手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针）、辣盘、锌铜弓、培养皿、蛙钉、滴管、烧杯、棉线3．试剂：任氏液――提供母液，需按1：10稀释三．原理把蟾蜍的腓肠肌和连同它相连的坐骨神经从体内剥离出来，制成“神经－肌肉”标本；如果在神经的游离端一侧轻轻的触动神经，或者通以适当的电流作为刺激，那么在经过一个极短的时间后，可以看到肌肉出现一次快速的缩收和舒张。
而且，只要刺激不造成组织的损伤，上述反应可以重复出现。
这说明，神经或肌肉表面受到刺激的点，一定产生了某种信号，他们沿着神经纤维或肌细胞传导，最后导致整个肌肉发生受挫。
按该信号的传导速度和可重复性分析，只能是电信号。
用近代精密的电测量设备，即可确定在神经被刺激的点产生了一个微弱的电信号，它以一定的速度传向肌肉，而肌肉的收缩则发生在这种电反应之后。
上述神经－肌肉标本实际是整个体内反射弧的一部分，后者在进行正常活动时，先由感受器细胞对外在环境变化进行跨膜信号传导，随后才发生电信号在传入和传出神经纤维上的传导和细胞间的信息传递。
而肌肉运动主要时由于产生的动作电位。
四．方法与步骤1．双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上，用无名指和小指夹在其后肢，中指抵制前肢，食指按压其头部前端，拇指压住躯干背部，使头向前俯；右手持毁髓针，找到两耳后腺之间的凹陷处即枕骨大孔位置，垂直刺入约1～2mm，然后将针尖向前刺入颅腔，搅动数下，捣毁脑组织（可感觉针触及颅骨）。
此时为单毁髓动物。
再将毁髓针退回垂直刺入状态，扔留1～2mm的针尖位于枕骨大孔处，将针尖转向右方，与脊椎平行刺入椎管，捣毁脊髓。
只蟾蜍后肢瘫痪，不再动弹。
2．剥制后肢标本：将双毁髓的蟾蜍背面向上放于蜡盘上，左手拿眼科镊轻提起两前肢间背部的皮肤，右手持眼科剪横向剪开皮肤，暴露耳后腺后缘水平的脊柱。
青蛙腓肠肌神经实验报告
一、实验目的1. 了解青蛙腓肠肌神经系统的基本结构。
2. 观察并记录青蛙腓肠肌在神经刺激下的收缩反应。
3. 掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
二、实验原理青蛙的腓肠肌神经在刺激下会发生兴奋，进而引起肌肉收缩。
通过观察腓肠肌在神经刺激下的收缩反应，可以了解神经肌肉的兴奋传导过程。
三、实验材料1. 实验动物：青蛙2. 实验器材：手术剪、手术刀、眼科镊、金属探针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器、任氏液3. 实验药品：任氏液四、实验步骤1. 准备青蛙：取青蛙一只，用自来水冲洗干净，左手握住青蛙，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯。
2. 解剖青蛙：右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管，然后将探针改向前刺入颅腔内，左右搅动探针，破坏脑和脊髓。
3. 制备腓肠肌标本：用手术剪剪开青蛙的后肢，暴露腓肠肌。
用眼科镊将坐骨神经与腓肠肌分离，并将坐骨神经固定在蛙板上。
4. 刺激坐骨神经：将电子刺激器的电极连接到坐骨神经的两端，调整刺激强度和频率，观察腓肠肌的收缩反应。
5. 记录数据：记录腓肠肌在不同刺激强度和频率下的收缩反应，包括收缩幅度、收缩持续时间等。
6. 实验结束：将青蛙放回水中，观察其生命体征。
五、实验结果与分析1. 观察到青蛙腓肠肌在神经刺激下发生明显的收缩反应，说明神经兴奋可以引起肌肉收缩。
2. 随着刺激强度和频率的增加，腓肠肌的收缩幅度和持续时间也随之增加，说明肌肉收缩与刺激强度和频率有关。
3. 通过实验结果可以得出以下结论：（1）青蛙腓肠肌神经系统的兴奋传导过程为：神经纤维→ 肌纤维→ 肌肉收缩。
（2）肌肉收缩与刺激强度和频率有关。
六、实验总结本次实验成功制备了青蛙腓肠肌标本，并观察到了神经刺激引起的肌肉收缩反应。
通过实验，我们了解了青蛙腓肠肌神经系统的基本结构和兴奋传导过程，掌握了坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
实验过程中，我们学会了如何操作实验器材，如何调整刺激强度和频率，如何观察和记录实验结果。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
第九章实验内容实验1 坐骨神经-腓肠肌标本的制备【实验目的】掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的操作技术，为此后有关的神经肌肉实验打下基础。
【实验原理】蛙或两栖类动物的一些基本生命活动及生理功能与温血动物近似，而且其离体组织需要的生活条件非常简单，易于控制和掌握。
因此在生理学实验中，坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象，经常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。
【实验器材和药品】蛙类手术器械一套（金属探针1根，粗剪刀、眼科剪刀各1把，圆头镊子、眼科镊子各1把，玻璃分针2根），蛙板和玻璃板各1块，培养皿，滴管，废物缸、锌铜弓，丝线，棉花；任氏液。
【实验对象】蟾蜍或蛙。
【实验方法和步骤】1．破坏脑和脊髓（常用的有三种方法）(1) 俯式捣毁法：是最常用的方法。
以左手持蟾蜍，将其腹面朝向手心，前肢夹在食指和中指之间固定，后肢夹在无名指和小指之间固定，并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯30~40度角；然后右手持金属探针沿蟾蜍头部的中线下划，可触及一凹陷处即为枕骨大孔（图9-lA）。
将探针从枕骨大孔垂直刺入1~1.5mm，再向前刺入颅腔，左右搅动（可感觉到探针与颅骨壁的碰击），破坏脑组织；再将探针退回至进针处，但不拔出而是转向后方刺入椎管，破坏脊髓。
(2) 仰式捣毁法：将蟾蜍仰卧于蛙板上，拉开下颌，右手持探针在颅底两眼之间向前下刺入颅腔，用探针在颅腔内向四周捣毁脑组织，然后将探针退至粘膜下，针尖向后平行刺入椎管内以破坏脊髓。
(3) 横断脊柱后捣毁法：左手持蟾蜍，右手持粗剪刀，在两腋窝稍下横断脊柱，然后在脊柱呈白色的脊髓断面处，向上插入探针破坏脑，再向下插入探针破坏脊髓。
以上方法破坏脑和脊髓成功后，蟾蜍出现四肢（尤其是后肢）瘫软，并常有尿失禁现象。
2．剪去躯干上部及内脏用粗剪刀在两侧腋部稍下（或在骶髂关节以上1.5 ~ 2cm处）剪断脊柱（图9- 1B），用左手握住蟾蜍后肢，拇指按压骶骨，使蟾蜍头部及内脏自然下垂；避开腰骶神经丛后，右手用粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁，在耻骨联合处将躯干上部及内脏剪掉，弃入废物缸内。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
坐骨神经-腓肠肌标本制备
• 8）极性验证：A）干棉线结扎神经干。
•
B) 锌铜弓在结扎验过程中均用任氏液沾湿接触动物组织的手 指，冲洗也用任氏液。
•
2）锌铜弓刺激时神经干要悬空。
•
3）用玻璃分针而不是镊子分离神经干。
实验结束，清理本组使用台面。 第一组留下打扫卫生。 下次实验课前交实验报告。 下次实验：骨骼肌收缩分析
2）剪开体壁肌肉（勿伤脊神经），剥离去除内脏。从胸部剪断脊柱。捏住断 开的脊柱，剥去皮肤。
3）于耻骨中间分离两后肢，一后肢放于任氏液中备用，一后肢继续剥制标本。 4）脊柱腹面朝上，趾端外侧翻转，足底向上，固定后肢。用玻璃分针沿脊神 经向后分离坐骨神经。
5）用手术镊在腓肠肌下穿线扎紧，游离腓肠肌。 6）分离股骨头，捏住股骨，剪去周围肌肉，保留1cm股骨头。并剪断胫腓骨， 也保留1 cm骨头。 7）用锌铜弓刺激神经，提起脊髓片，锌铜弓两极接触神经，观察腓肠肌是否 收缩。
生理学实验
解景田、刘燕强、崔庚寅 编 高等教育出版社 / 2016-08
坐骨神经-腓肠肌标本制备
实验目的：1）学习蛙类单毁髓和双毁髓方法。 2）学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本制备方法。
实验材料：蛙、毁髓针、手术剪、手术镊、金冠剪、玻璃分针、滴管、干棉线、 任氏液、固定针\锌铜弓。 实验步骤：
1）用手指固定蛙体，两耳中间凹陷处下针，向前刺入颅腔，捣毁脑组织，针 尖向后刺入椎管毁脊髓。
实验三 蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备
用蛙针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，再向前伸入颅腔，捣毁脑；
向44、、后有 有插时时入标标椎住本本管兴兴，断奋奋3捣性性、端毁过过脊去边高高髓，，皮。缘可可放放：皮置置先２２肤００剪，mmiinn去向待待其其肛下稳 稳门定定剥后后周掉再再 围全皮部肤后，肢然皮后肤用。左标手本捏放住入脊盛柱有断林端格，液右的手小捏烧 两2、栖剪类除手躯术杯干器上械中部，及，培内养将脏皿：，手在任腋及氏部液用用，铁棉过剪刀的剪断器脊械柱，、将头蛙、板前肢洗和内净脏，一并以弃去免，皮仅保肤存一分段泌脊柱物和后污肢染。 神经-肌肉 标本。 5、游离坐骨神经：用玻璃分针在半膜肌和股二头肌之间分离出坐骨神经。 熟神悉经并 干掌，握又蟾要蜍避4坐免、骨金神属分经器离－械腓对标肠神肌经本标的为本不的必两制要备触部碰分。 ：沿脊柱正中线将标本均匀地分成左右两半， 神肉经，干 防，止又干分要燥避。别免作金属进器械一对步神经剥的不制必。要触碰。 322、、、避 游 游免离离蟾神神神蜍经经皮时时经肤，，5分切切、。泌勿勿游注物用用和玻玻离意血璃璃液分分坐分等针针骨污逆逆离染向向神时标剥剥本离离经要，，，：也以以仔不防防用细能损损用伤伤玻用璃剪分刀针剪在断半坐膜骨肌神和经股的二分头支肌，之勿间伤分神离经出干坐，骨前 4蛙、类有一时些标基面本本兴生分奋命性离活过动至高和，生脊可理放柱功置能２坐与０恒骨m温in神动待物其经相稳似定丛，后基其再离部体组，织向器官下所需分的离生活至条件膝比关较简节单，。并保且易留于控与制坐和掌骨握，神因经此在相生理试
线，玻璃分针，解剖盘，剪刀
2或、把剪铁除剪躯刀干插上入部6口及、裂内，分脏沿：离两在眼腋腓后部缘肠用剪铁肌去剪头刀：，剪再在断以脊跟蛙柱针，腱捣将毁上头脊、扎髓前。肢牢和一内脏线一并，弃提去，起仅保结存线一段，脊柱剪和断后肢结。 扎线外的跟 1、破坏脑腱脊髓，：左游手离持蛙腓，用肠食指肌下至压吻膝端，关拇节指按处压背，部将，使膝蛙头关前节俯；以下小腿其余部分全部剪去。至 此，标本制成。 3、去皮：先剪去肛门周围皮肤，然后用左手捏住脊柱断端，右手捏住断端边缘皮肤，向下剥掉全部后肢皮肤。
蛙坐骨神经-腓肠肌标本制备实验
知识回顾 Knowledge Review
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三、实验步骤： 1.破坏脑脊髓：左手握蟾蜍，食指下压吻端，拇指按压背 部，其余三指紧贴腹部。找到枕骨大孔刺入1-2mm，分别 捣损脑组织和脊髓（脑和脊髓完全破坏的标志是：呼吸停 止，四肢松软并处于对称位置）
2.减除躯干上部及内脏：在骶髂关节水平上2cm 处剪断脊柱，去除头、前肢和内脏，保留部分脊 柱和下肢。用任氏液小心冲洗坐骨神经及其周围 组织上的血液。
腓肠肌向上将标本固定于蛙板上由脊柱仔细将坐骨神经分离至膝关节处并在脊柱旁结扎
设计性试验：
蛙坐骨神经-腓肠肌标本制备
一、实验目的： 1. 学习蛙类动物单毁髓与双毁髓方法，并掌握坐 骨神经-腓肠肌标本的制备方法。 2、学习并掌握蛙的坐骨神经-腓肠肌标本的制备方 法
二、实验材料： 实验动物：牛蛙 实验器材：常用手术器械，蜡盘，蛙板，固定针， 锌铜弓，培养皿，滴管，粗棉线，任氏液，纱布
3.剥皮：剪去尾骨，剥去余下组织的皮肤，沿脊 柱正中到耻骨联合将标本剪开，标本放到盛有任 氏液的烧杯中。
4.有利坐骨神经：腓肠肌向上将标本固定于 蛙板上，由脊柱仔细将坐骨神经分离至膝关 节处，并在脊柱旁结扎。
5.制作成坐骨神经-腓肠肌标本：剪断膝关节 周围所有大腿肌肉，剪断股骨（保留约1cm）， 在跟腱处结扎并剪断腓肠肌，将膝关节以下 小腿部分全部剪除，剩下即为坐骨神经—腓 肠肌标本。
生物实验报告坐骨神经腓肠肌标本制备
坐骨神经腓肠肌标本得制备与神经干动作电位得观察与传导速度得测定一、实验目得:1.学习蛙类动物双毁髓得实验方法、2。
学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本得制备方法。
3.观察蛙坐骨神经干复合动作电位得基本波形,并了解其产生得原理。
4.学习蛙与蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度得方法与原理、二、实验材料:1.实验对象:蟾蜍2、实验器材:常规手术器械(粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊)蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。
三、实验原理:神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位,标志着神经发生兴奋。
如果在离体神经干得一段施加刺激,从另一端引导传来得神兴奋冲动,可以记录出双相电位,加入在引导得两个电极之间将神经干麻醉或损伤,阻断其兴奋传导能力,这时候记录出得动作电位就成为单相电位、神经细胞得动作电位就是以全或无得方式产生得。
但就是,复合动作电位得幅值在一定刺激强度下就是随刺激强度得增加而增大得。
如果在远离刺激点得不同距离处分别引导离体神经干动作电位,两引导点之间得距离为m,在两引导点分别引导出得动作电位得时相差为ｓ。
即可按照公式ｖ=m/s来计算出兴奋得传导速度、蛙类得坐骨神经干属于混合性神经,其中包含有粗细不等得各种纤维,其直径一般为3-29um,其中直径最粗得有髓纤维为A类纤维,传导速度在正常室温下为35－4０ m/ｓ。
神经每兴奋一次极其在兴奋以后得回复过程中,其兴奋性都要经历一次周期性得变化,其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期与低常期４个时期。
为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生得周期性变化,首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋,然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激,用于检查神经得兴奋阈值与所引起得动作电位得幅度,以判定神经兴奋性得变化。
四、实验方法及步骤:1、坐骨神经干标本制备(1) 破坏脑与脊髓:取蛙一只,用自来水冲洗干净,左手持蛙,用食指下压其吻部,拇指按压在其骶髂关节下方,使其头尽量前俯,右手持探针沿两眼之间中线向后方轻划,至触及头颈部正中得凹陷处,即为枕骨大孔得位置。
实验1 蛙坐骨神经–腓肠肌标本制备、1
实验1 蛙坐骨神经–腓肠肌标本制备、刺激频率对肌肉收缩的影响【目的要求】1.学习坐骨神经–腓肠肌标本的制备方法。
2.分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响。
【原理】刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。
在其他条件不变情况下，不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。
若刺激频率较小，两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩和舒张所持续的时间（即单收缩）时，肌肉收缩表现为一连串的单收缩；若增大刺激频率，使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间，而小于单收缩时，肌肉呈现不完全强直收缩；若继续增加刺激频率，使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间，肌肉则表现出完全强直收缩。
【器材】蟾蜍或蛙；任氏液；二道生理记录仪、双脉冲刺激器、肌槽、常规手术器械、玻璃分针、毁髓针、锌铜弓、解剖盘、烧杯、滴灌、任氏液等。
【步骤】1、双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上。
用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。
将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，然后针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以毁脑组织。
再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。
脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。
2、剥制后肢标本：左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。
剪开腹壁肌肉，用手术镊提起内脏，翻向头部，在看清支配后肢的脊神经发出部位后，于其前方剪断脊柱。
3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右手持金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联合，使两后肢完全分离。
4、分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经，股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经，剪断盖在上方的梨状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。
生理学实验1--蛙坐骨神经腓肠肌标本的制备
本制备
2021/6/71来自【实验目的】1.学习生理学实验基本的组织分离技术；
2.学习和掌握制备蛙类坐骨神经---腓肠肌标 本的方法；
2021/6/7
2
【实验原理】
蛙类的一些基本生理活动规律与恒温动
物相似，而维持其离体组织正常活动所需的
理化条件比较简单，易于建立和控制。因此，
2021/6/7
图1-410
（2） 完成坐骨神经小腿标本 将游离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝
关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀 将股骨刮干净，然后在股骨中部剪去上段股 骨（保留足够的股骨断端，用于固定） ，保 留的部分就是坐骨神经小腿标本。
2021/6/7
11
（3） 完成坐骨神经腓肠肌标本 将上述坐骨神经小腿标本在跟腱处穿线结扎
2021/6/7
4
【实验方法】
1.破坏脑和脊髓
取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。左手握住
蟾蜍，用食指按压其头部前端，拇指按压背 部，右手持探针由枕骨大孔垂直刺入椎管。 然后探针改向前刺入颅腔，左右搅动充分捣 毁脑组织。然后将探针抽回至进针处，再向 后刺入脊椎管，反复抽插捣毁脊髓（图1-1）。 此时如蟾蜍四肢松软，呼吸消失，表明脑和 脊髓已完全破坏，否则应按上法反复进行。
在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标
本来观察兴奋与兴奋性、刺激与肌肉收缩等
基本生理现象和过程。故制备坐骨神经腓肠
肌标本是生理实验中必须掌握的一项基本技
能。
2021/6/7
3
【实验对象】
蟾蜍或蛙
【实验器材和药品】
蛙板、普通剪刀、手术剪、镊子、探针、 玻璃分针、蛙钉、滴管、培养皿、锌铜 弓、任氏液。
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知识回顾 Kno刺 激坐骨神经，腓肠肌收缩即表 示标本制备完好。
注意事项
1. 操作过程中，勿污染、压榨、损伤、过 度牵拉神经和肌肉。 2. 剥坐骨神经时要非常小心，避免损坏神 经外的结缔组织鞘。如与其他组织黏附较紧， 不可硬撕，可先跳过这一段，过后再剥。 3.为保持神经细胞的活性，剥坐骨神经动作 不可太慢，还应经常用任氏液湿润，绝对避 免干燥。 4.剥离神经时不得使用任何金属器械接触神 经。
设计性试验：
蛙坐骨神经-腓肠肌标本制备
一、实验目的： 1. 学习蛙类动物单毁髓与双毁髓方法，并掌握坐 骨神经-腓肠肌标本的制备方法。 2、学习并掌握蛙的坐骨神经-腓肠肌标本的制备方 法
二、实验材料： 实验动物：牛蛙 实验器材：常用手术器械，蜡盘，蛙板，固定针， 锌铜弓，培养皿，滴管，粗棉线，任氏液，纱布
三、实验步骤： 1.破坏脑脊髓：左手握蟾蜍，食指下压吻端，拇指按压背 部，其余三指紧贴腹部。找到枕骨大孔刺入1-2mm，分别 捣损脑组织和脊髓（脑和脊髓完全破坏的标志是：呼吸停 止，四肢松软并处于对称位置）
2.减除躯干上部及内脏：在骶髂关节水平上2cm 处剪断脊柱，去除头、前肢和内脏，保留部分脊 柱和下肢。用任氏液小心冲洗坐骨神经及其周围 组织上的血液。
3.剥皮：剪去尾骨，剥去余下组织的皮肤，沿脊 柱正中到耻骨联合将标本剪开，标本放到盛有任 氏液的烧杯中。
4.有利坐骨神经：腓肠肌向上将标本固定于 蛙板上，由脊柱仔细将坐骨神经分离至膝关 节处，并在脊柱旁结扎。
5.制作成坐骨神经-腓肠肌标本：剪断膝关节 周围所有大腿肌肉，剪断股骨（保留约1cm）， 在跟腱处结扎并剪断腓肠肌，将膝关节以下 小腿部分全部剪除，剩下即为坐骨神经—腓 肠肌标本。