F-7000荧光分光光度计使用操作步骤解析
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• (3)选中“□Auto File”, 打√。可以自动保存 原始文件和TXT格式文本文档数据。 • (4)参数设置好后,点击“OK”。
5、扫描测试
(1)打开盖子,放入待测样品后,盖上盖子。(请 勿用力)。
(2)点击扫描界面右侧“Measure” 捷键F4),窗口在线出现扫描谱图。
(或快
6、数据处理
F-7000荧光分光光度计使用操作步骤
1、开机: (1)开启计算机。 (2)开启仪器主机电源。按下仪器主机 左侧面板下方的黑色按钮(POWER)。 同时,观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来,都显示绿色。
2、计算机进入Windows XP视窗后,打开运 行软件(如图1)。 • (1)双击桌面图标 (FL Solution 2.1 for F-7000)。主机自行初 始化,扫描界面自动进入。 • (2)初始化结束后,须预热15-20分钟,按 界面提示选择操作方式。
Fluorescence/Phosphprescence/Luminescence(荧光测 量、磷光测量、化学发光)。
ຫໍສະໝຸດ Baidu
– 设定波长扫描范围。
• 扫描荧光激发光谱(Excitation):需设定激发光的起始/ 终止波长(EX Start/End WL)和荧光发射波长(EM WL); • 扫描荧光发射光谱(Emission):需设定发射光的起始/ 终止波长(EM Start/End WL)和荧光激发波长(EX WL); • 扫描同步荧光(Synchronous):需设定激发光的起 始/终止波长(EX Start/End WL)和荧光发射波长 (EM WL)。
• (1)选中自动弹出的数据窗口,如图5。 • (2)选择“Trace” 操作。 • (3)上传数据。 ,进行读数并寻峰等
图5 扫描谱图窗口
3、关机顺序(逆开机顺序实施操作):
• (1)关闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000, 弹出窗口,如图6。 • (2)选中“○Close the lamp,then close the monitor windows?”,打“⊙”。 • (3)点击“Yes”。窗口自动关闭。同时,观察 主机正面面板右侧的Xe LAMP指示灯暗下来,而 RUN指示灯仍显示绿色。
图6 关闭运行软件
• (2)约十分钟后,关闭仪器主机电源,即按下仪 器主机左侧面板下方的黑色按钮(POWER)。 (目的是仅让风扇工作,使Xe灯室散热)。
•
(3)关闭计算机。
寻找激发波长的方法
测试前,激发波长未知,可以按照以下步骤寻找激发波长。
• 1. 首先在发射光谱设置中输入一个激发光波长数 值,如300 nm,设置发射光谱范围,通常起始值 大于激发波长,小于激发波长的二倍,得到一个 发射光谱,得到一个或几个发射波长的峰值 • 2. 重新在激发光谱中设置,输入步骤一中得到的 发射波长,设置激发光谱范围,通常起始值大于 发射波长的一半,小于发射波长,得到激发波长 的峰值 • 3. 按照步骤二的过程,将几个发射波长都输入, 得到几个激发波长 • 4. 重复步骤一的过程,输入步骤二,三中得到的 激发波长,观察发射光谱的峰形,确定发射光谱。
(3)在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参 数,如图3。
图3 Method--- “Instrument”选项设置界 面
主要参数选项包括:
– 选择扫描模式“Scan Mode”: Emission/Excitation/Synchronous(发射光谱、 激发光谱和同步荧光)。 – 选择数据模式“Data Mode”:
• !!Attention:激发光终止与起始波长差不 小于10nm。
– 选择扫描速度“Scan Speed”(通常选 240nm/min)。 – 选择激发/发射狭缝(EX/EM Slit)。 – 选择光电倍增管负高压“PMT Voltage”(一 般选700V)。 – 选择仪器响应时间“Response”(一般选 Auto)。 – 选择光闸控制“□Shutter Control”打√,以使 仪器在光谱扫描时自动开启,而其他时间关闭。 – 选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集 数据的步长(通常选0.2nm)及输出数据的起 始和终止波长(Data Start/End)。
图1 FL Solution 2.1扫描界面
3、测试模式的选择:波长扫描(wavelength scan)
• (1) 点击扫描界面右侧“Method”
。
• (2) 在“General”选项中的“Measurement”选 择“wavelength scan”测量模式,如图2。
图2 Method--“General”选项的界面
• !!Attention:Data Start/End需与 “Instrument”选项中设置一致,否则所得 到的数据点会逐渐减少,而无法作图。
(4)参数设置好后,点击“确定”。
4、设置文件存储路径
(1)点击扫描界面右侧“Sample”
图4 。
,如
图4 Sample选项的界面
• (2)样品命名“Sample name”。