Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序
Agilent-1200HPLC
仪器名称：Agilent-1200高效液相色谱仪自动主要组成：Agilent1200四元泵+UV检测器+自动进样器简单操作规程(一)、开机：1、启动计算机，进入Windows画面，Bootp Server程序自动运行。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器1（2）联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入工作站画面。
4、把已超声脱气的流动相及水、甲醇等放入溶剂瓶中，打开Purge阀。
5、单击泵图标，出现参数设定菜单，单击设置参数选项，进入泵编辑画面。
6、设流速：5ml/min，单击“确定”。
7、单击泵图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中打开，单击“确定”，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
8、单击泵图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“停泵”，单击“确定”，关闭Purge阀。
9、单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，单击“确定”。
（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“方法编辑” 项，如上图所示选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一画面，依次设置以下参数：泵参数设定、自动进样器参数设定、柱温箱参数设定、VWD检测器参数设定等，单击“确定”进入下一画面。
2、单击“方法”菜单，选中“方法另存为”，输入一方法名单击“确定”。
3、从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，输入操作者名称等信息。
4、单击“方法”菜单，选中“方法调用”，调入一方法，单击“确定”。
5、从“仪器控制”菜单选择“运行”。
6、从“序列”菜单，选中“序列编辑”，编辑完所需序列后，单击“确定”。
7、等仪器Ready，基线平稳，单击“开始”，进样。
(三)、关机:1、关机前，用 90%的水冲洗系统40分钟，然后用甲醇或乙腈冲洗系统40分钟，在冲洗时关闭检测器和柱温箱。
Agilent1200型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent_1200型高效液相色谱仪标准操作规程1 目的建立Agilent 1200高效液相色谱仪的操作规程，保证其正确使用。
2 范围Agilent 1200高效液相色谱仪的操作与维护。
3 职责操作人员和责任人员对本规程的实施负责。
4 内容4.1 组成G1322A脱气机、G1311A四元泵、G1329A自动进样器、G1330B自动进样器恒温器、G1315B可变波长检测器（DAD）、GB16A 柱温箱和一套Agilent 1200 CHEMSTATIONS 软件（软件光盘与说明书原件由工程部保存），打印机。
4.2 在线清洗若实验的流动相中含有的缓冲盐和离子对等试剂干后会留下固体印迹的物质时，必须要进行在线清洗过程。
首先配制好10%异丙醇溶液，经0.45μm有机膜抽滤后，装入已用滤过的10%异丙醇溶液洗过三遍的洁净玻璃瓶内，调整流量为2～3滴/分钟，10%异丙醇溶液必须每周更新。
4.3 开机接通电源，打开计算机，等计算机启动成功后，含四元泵的Agilent 1200高效液相色谱仪系统：从上到下，依次打开脱气机、泵、进样器、进样器恒温器、柱温箱和多波长检测器。
约30秒钟后，各部件自检完毕，进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
双击桌面上的Instrument 1 Online，计算机进入工作站的Method and Run Control操作界面。
画面如下所示。
4.4 色谱条件的设定4.4.1 方法的编辑●在method and run control 状态下，单击“method”选择“edit entire method”，请先在复选框中选择method中需要编辑的项目。
●进入method information 在method comments 中输入方法的名称及相关描述，参数设置完毕后单击OK。
●进入泵参数设置画面，设置泵流速（ml/min），流动相组成，冲洗梯度，停针时间等，参数设置完毕后单击OK。
Agilent1200高效液相色谱仪操作程序
1 目的：建立Agilent1200高效液相色谱仪标准操作程序，规范Agilent1200高效液相色谱仪的使用和操作。
2 范围：Agilent1200高效液相色谱仪。
3 责任者：QC仪器分析人员。
4 程序：4.1 仪器组成本套仪器由脱气机、低压四元梯度泵、柱温箱、可变波长紫外检测器和Agilent 1200色谱工作站组成。
4.2 基本操作4.2.1 准备工作4.2.1.1 按照SOP操作标准配置相应的流动相，用0.45µm的膜过滤并冷却至室温待用，流动相名称和容器序号必须对应，以及在流动过程中检查是否有气泡。
4.2.1.2 色谱柱准备：选择与被测物质匹配的色谱柱，并安装好。
4.2.1.3 预热分析天平5～10分钟，调节水平，确保称量准确。
调节操作环境的温湿度使其达到规定的要求。
4.2.1.4 测试液、对照液的准备：使用品种项下规定的测试液、对照液并按操作规程临用前配置。
4.2.2 接通电源并打开Agilent1200仪器和与之配套的计算机。
4.2.3 双击电脑桌面上的Agilent1200在线工作站（Instrument 1 online）4.2.4 参数设置测试条件和显示条件一致，则无需重新设置。
否则按检测条件设置操作参数。
（如：进样量、柱温箱温度、流量、波长、流动相比例、分析时间等），启动仪器测绘基线并观其状态。
4.2.5 分析操作当以上所有设置参数达到相应的设定值并且基线处于稳定状态时，窗口状态显绿，此时系统显示Ready，放采样瓶于相应位置，按Start键开始采样分析，工作站自动进行数据采集，采样完毕，自动进行数据处理并存盘。
分析前填写被测样品以及工作人员的详细资料，以便查阅。
4.2.6 报告的预览与打印等采样结束直接预览并打印或者双击桌面上的离线工作站（Instrument 1 offline）。
选择“打开”项，按进样信息打开需要的谱图，单击“预览”按钮，显示预览报告，有必要时可以对谱图进行修改，确认无误后，单击“打印”按钮，即可进行报告打印并保存图谱。
Agilent1200操作规程
Agilent1200操作规程一、1200/化学工作站开机顺序(LAN卡联接)1 打开计算机；2 打开主机各模块电源（自上而下打开色谱仪组件电源），双击INSTRUMENT 1 ONLINE 图标,进入化学工作站；3 调出一个分析方法，检查各参数的设置；4 旋开泵上的排气阀，将工作站中的泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%；5 在工作站中打开泵，排出管线中的气体数分钟；6 依此切换到B、C、D溶剂分别排气；7 将工作站中的泵流量设到1ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；8 关闭排气阀，检查柱前压力；9 待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况；二、数据采集方法编辑1 由运行控制进入样品信息…设定操作者姓名，样品数据文件名等。
2 泵参数设定：（以二元泵为例）1）在流量处输入流量,如1ml/min，在溶剂B处输入70.0,(A=100-B) ,也可插入一行时间列表,编辑梯度。
在最大压力极限处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
2）单击确定进入下一画面。
3 柱温箱参数设定:1）在柱温下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击更多>>键,选中与左侧一致，使柱温箱的温度左右一致。
2）点击确定进入下一画面。
4 VWD检测器参数设定:1）在波长下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在峰宽(响应时间)下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。
2）在时间列表中可以插入一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。
3）点击确定进入下一画面。
5 单击方法菜单，选中保存方法，输入一方法名，如“test”，单击确定。
6 等仪器就绪，基线平稳，从方法菜单中选择运行方法，进样。
三、数据处理操作步骤1 由主菜单上的视图进入数据分析，到数据处理界面；2 由主菜单上的文件进入调用信号，调出要分析的数据文件色谱图；3 由主菜单上的图形进入信号选项，调整谱图坐标:1)点自定义量程，在时间范围中输入横坐标(时间）(例如0到10)；2)在响应范围:中输入纵坐标(响应值）(例如-50到800)；3)在量程框中，调到全部使用相同量程；4)点击确定退出。
Agilent1200高效液相色谱仪操作规程
Agilent1200高效液相色谱仪操作规程一、Agilent1200化学工作站开机顺序(LAN卡联接)1、将待测样品按要求前处理,准备HPLC 所需流动相,检查线路是否连接完好,废液瓶是否够用等2、打开计算机,进入Bootp;3、打开主机各模块电源(不分先后),等待Bootp接收,等待各模块就绪后, 再双击工作站图标,进入化学工作站;4、调出一个分析方法,检查各参数的设置;5、旋开泵上的排气阀,将工作站中的泵流量设到5ml/min,溶剂A设到100%;6、在工作站中打开泵,排出管线中的气体数分钟;7、依此切换到B、C、D溶剂分别排气;8、将工作站中的泵流量设到1ml/min,多元泵则再设定溶剂配比,如A=80%, B=20%;9、关闭排气阀,检查柱前压力;10、待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况;二、数据采集方法编辑1 由运行控制进入样品信息,设定操作者姓名,样品数据文件名等。
2自动进样器参数设定:1)选择合适的进样方式, “Standard Injection”----只能输入进样体积,此方式无洗针功能。
“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置,“UnRegistered”--此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。
“Use injectorprogram”---可以点击“Edit ”键进行进样程序编辑。
2)单击确定进入下一画面。
3 泵参数设定:(四元泵)1)在流量(Flow)处输入流量,如 1.5ml/min,在溶剂B处输入70.0,(A=100-B-C-D) ,也可插入一行时间列表(Timetable) ,编辑梯度。
在最大压力极限处(Pressure LimitsMax)输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
2)单击确定进入下一画面。
4 柱温箱参数设定:1)在柱温下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击更多键,选中与左侧一致,使柱温箱的温度左右一致。
安捷伦1200液相色谱操作规程
1 目的：建立一个安捷伦1200高效液相色谱仪标准操作程序。
2 范围：本规程适用于安捷伦1200高效液相色谱仪的操作。
3 责任：相关操作人员。
4 程序：4.1 原则与定义4.1.1高效液相色谱法是将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液为流动相，用高压泵将流动相压入装有填充剂的色谱柱，注入供试品，经流动相带入柱内，在填充剂上分离后，各组分先后进入检测器，用记录仪记录色谱图，各供试品谱图与标准或对照品谱图比对，经一定的数据处理进行化合物的定性和定量分析。
4.1.2 除另有规定者外，都应按现行版《中国药典》附录（高效液相色谱法）的要求测定。
4.2 仪器及用具4.2.1 安捷伦1200高效液相色谱仪系统4.2.2 DAD紫外检测器4.2.3 色谱柱4.2.4 色谱工作站4.2.5 溶剂过滤系统4.2.6 样品过滤系统4.2.7 其他用具和试剂应符合现行版《中国药典》规定或仪器说明书上指明的要求。
4.3 准备工作4.3.1流动相临用前过滤并脱气。
4.3.2供试品溶液和标准品(或对照品)溶液应按药品标准中有关规定配制过滤。
4.4 操作方法4.4.1 开机准备好流动相并安装色谱柱。
依次打开仪器各部件电源开关（在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器等），约15min 后，仪器进入待机状态，此时仪器各部件指示灯应无色或呈黄色。
计算机进入工作站的操作页面。
色谱条件的设定,当色谱参数设置完成后，单击工作站流程图右下角的【on】，仪器开始运行。
4.4.2 样品测定4.4.3 分析报告的打印4.4.4 关机，分析结束后，按规定程序彻底冲洗色谱柱及所用的仪器流路。
4.4.5 实验结束工作4.4.6 全部分析工作结束后，依次关闭电脑、检测器、电源开关。
4.4.7 泵流量调到零，关闭泵电源。
4.4.8 仪器参数设定及操作方法同药典仪器操作规程安捷伦1100。
4.5.1反相高效液相色谱，如所用流动相含有缓冲溶液，实验前需要用重蒸馏水冲洗管路和色谱柱，实验结束时也要用水冲洗约半小时, 然后再用甲醇平衡柱子约30min后关闭仪器，以保护柱子。
安捷伦1200标准操作规程
Agilent 1200液相色谱仪操作规程设备组成：G1311A（四元泵）、G1329A（标准型自动进样器）、G1316A（柱温箱）、 G1314B（VWD检测器）、G1315D（DAD检测器）。
基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机，进入Windows XP画面。
（IP 地址由Bootp Service 程序写入）2、打开1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器 1 联机”图标，或者（点击屏幕左下角的“开始”，选择“程序”，选择“Agilent Chemstation”，选择“仪器 1 联机”）化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“系统视图”，“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、手动旋开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵”选项，进入泵编辑画面。
8、设流速：3-5ml/min，点击“确定”。
9、点击“泵” 图标，点击“控制”选项，选中“启动”，点击“确定” ，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
若使用缓冲盐，要加入泵头冲洗（seal-wash），点击“泵” 图标，点击“控制”选项，选择“用于泵密封垫清洗的泵”，开启清洗泵前要配制90%水+10%异丙醇，溶剂不能干涸。
10、点击“泵” 图标，点击“控制”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，手动旋紧冲洗阀。
11、点击“泵”图标，点击“设置泵选项”，设流速：1.0ml/min。
12、点击泵下面的瓶图标，选择“溶剂瓶添充量”如下图所示（以四元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积，点击“确定”。
（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，如下图所示选中除“数据分析 ”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。
Agilent 1200 型高效液相色谱仪操作规程
Agilent 1200型高效液相色谱仪操作规程1 开机1.1 从上至下依次打开 1200 LC 各模块电源，打开电脑主机。
1.2 待各模块自检完成后双击桌面上的“仪器1（联机）”图标，化学工作站自动与1200LC工作站连接。
1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 单击“视图”菜单中的“系统视图”、“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
2 脱气2.1 把流动相放入溶剂瓶中2.2 打开冲洗阀2.3 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
2.4 设“流量”为 5mL/min ，单击“确定”。
2.5 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“启动”，单击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止, 切换通道继续冲洗直到所有要用通道无气泡为止。
2.6 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“关闭”，单击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
2.7 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“设置泵”选项，进入参数编辑画面，设流速为1.0mL/min。
2.8 单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，也可输入停泵的体积，单击确定。
3 数据采集方法编辑3.1 从”方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，点击除“数据分析”外的三项，单击“确定”。
3.2 样品信息从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，在对话框中输入“操作者名称”。
“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”（区别: “手动”每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。
“前缀/计数器”在“前缀”框中输入前缀,在“计数器”框中输入计数器的起始位,仪器会自动命名。
3.3 方法信息在方法菜单中选择“方法信息”选项，在“方法注释”中加入方法的信息（如测试方法等），单击“确定”。
3.4 泵参数设定在桌面上点击泵图标，从选项菜单中点击“泵设置”，在对话框中“流速”处输入流量,如1mL/min ，在各通道“溶剂”处输入需要的比例 ,也可“插入”一行“时间表”，编辑梯度,在“压力限”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子 ,单击“确定”。
Agilent 1200液相色谱仪操作规程
Agilent 1200液相色谱仪操作规程一、准备工作：1、开启计算机系统电源进入Windows XP界面。
1、依次开启在线脱气机、泵、检测器电源开关，等待自检完毕。
2、待网络连接成功后，双击桌面上仪器1（联机） ,启动化学工作站，显示主机各单元图标画面。
3、单击泵图标→Setup Pump（1）设置泵参数：5ml/min（2）打开Purge阀（逆时针2—3圈）排气泡，平时常用此仪器需2—3分钟，不常用时需时间稍长些。
（3）开泵：单击泵图标，在图标上选Control→Pump→On，击OK，观察无气泡止。
（4）降流量=1ml/min（5）关闭Purge阀（顺时针）二、方法编辑：1、在Method and Run Control界面下，单击Method→Edit Entire Method,在该界面下四项都选中，击OK。
（1）在Method Comments下面方框中输入方法描述（如：This Method is for trainning）,击OK。
（2）在泵参数设置（Setup Pump）界面输入泵参数，单击OK。
（3）在检测器参数设置（VWD Signal）界面输入波长及响应时间。
2、在Signal Details: Instrument 1编辑界面击OK。
3、在积分参数设置（Edit Integration Events）界面击OK。
4、在Specify Report界面击OK。
5、在Instrument Curves界面击OK。
6、在Run Time Checklist 编辑界面选Data Acquisition和Standard Data Analysis 击OK。
7、方法保存：击Method→Save Method As 输入存盘方法文件名（扩展名为“ .m”）→确定→OK。
三、运行样品：1、打开Purge阀。
2、运行Instrument菜单下的System On。
3、待废液管中无气泡流出，关闭Purge阀。
液相1200
Agilent1200高效液相色谱仪操作规程1 仪器组成及开机1.1 仪器组成由真空在线脱气机、四元梯度泵、柱温箱、二极管阵列检测器组成。
1.2 开机1.2.1 接通UPS总电源，按下power键，显示为绿灯。
1.2.2 启动电脑（先开显示器，再开主机），进入WINDOWS界面。
1.2.3 依次打开脱气机、四元泵、柱温箱、二极管阵列检测器等主机电源，待全部灯变为黄色；2 实验条件的设定2.1 打开Agilent1200在线工作站，启动1200工作站中四元泵、检测器、控温箱。
2.2 排气泡：逆时针旋转排气阀，把流速调为5ml/min，依次进行各通道的气泡排空，然后关闭排气阀。
2.3 样品信息输入，选择方法控制下拉菜单的样品信息，填写上操作者姓名，样品名。
2.4 调用已设置好方法，在方法选择选择方法，选定文件名，单击确定。
或编辑新方法，在方法下选择新建方法，按提示逐项进行参数设定，完成后，在方法下选择保存方法，保存新方法。
3 仪器的运行3.1 进样：待基线平稳后，单击运行序列，仪器开始记录，采集样品色谱数据。
3.2 停止样品采集：按停止序列可停止采集样品色谱数据，记下样品采集记录号。
3.3 冲洗色谱柱：必需认真冲洗色谱柱。
在工作站上启动泵，调用预设好的冲洗色谱柱的方法“wash”，把检测器的灯关闭，进样阀扳到进样位置，让仪器按预设的程序彻底冲洗柱子。
4 关机4.1 在工作站上单击OFF键，关闭所有工作单元，再关闭在线工作站，然后关闭电脑。
4.2 依次关上真空脱气机、四元泵、检测器等主机的电源，4.3 关闭UPS总电源。
4.4检查并登记使用记录，搞好实验室清洁卫生。
- 1 -。
Agilent 1200高效液相色谱仪(四原泵)操作规程
Agilent 1200高效液相色谱仪（四原泵）操作规程1.目的建立高效液相色谱仪（四原泵）使用维护保养标准操作规程，确保测量结果准确、可靠。
2.适用范围本SOP适用于Agilent 1200高效液相色谱仪（四原泵）的使用。
3.责任者化验员应严格遵照该操作规程，管理方负责监督本规程的实施。
4.定义无5.规程5.1准备在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相、供试品及对照品。
流动相装入溶剂储液瓶，确认吸滤头已置于液面以下，供试品溶液和对照品溶液均用0.45μm的膜过滤。
5.2开机5.2.1打开电脑；5.2.2打开1200各模块电源；5.2.3等待各模块就绪后，双击桌面上的工作站图标，进入化学工作站；5.2.4旋开泵上的purge阀（逆时针转动，旋松即可，不要转动太多。
），将流速设置为5.0ml/min，将准备排气的管道的流量设置为100%（如：流路A比例则是100%-B-C-D），在工作站中打开泵，则开始排除管路中的气泡（时间约为5min）；其他通道同理操作。
5.2.5排气完成后，关闭purge阀（顺时针旋转，旋紧即可，不必旋的太紧。
）。
5.2.6连接色谱柱，用适宜的流动相冲洗色谱柱。
如果使用有盐的流动相，要先用80%的水过渡。
5.2.7更换方法规定的流动相。
冲洗约30分钟。
5.3设置方法5.3.1设置新方法5.3.1.1（自动进样器参数设定：单击工作站中“进样针”图标，选择“设置进样器”（一般选择洗针进样，清洗瓶位置一般为100位），单击“确定”按钮即可；5.3.1.2泵参数设定（四元泵）：单击工作站中“泵”图标，选择“设置泵”。
①在“流速”处输入流速（如1.0ml/min）；②在“停止时间”处设定所需采集时间；③在时间表中插入时间列表，编辑梯度；④在压力限处可设定最大耐高压，以保护色谱柱，单击“确定”按钮即可；5.3.1.3检测器参数的设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如280nm，在“峰宽（响应时间）”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如>0.1min（2s）。
Agilent 1200型自动进样高效液相色谱仪操作规程
Agilent 1200型高效液相色谱仪操作规程1目的规范Agilent 1200型高效液相色谱仪的操作，确保使用本仪器的检验结果准确可靠。
2实验步骤2.1开机2.1.1准备好流动相并安装色谱柱。
2.1.2依次打开仪器各部件电源开关(在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器或荧光检测器等)，约5 min后，仪器进入待机状态，此时仪器各部件指示灯应无色或呈黄色。
2.1.3打开电脑，点击亿【Instrument 1 online】，约30s后，计算机进入工作站2.2色谱条件的设定2.2.1直接设定在操作页面的右下部——色谱工作参数中设定。
将鼠标移至要设定的参数，如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击【OK】，即完成。
2.2.2调用已设置好的文件在命令栏【Method】下，选择【Load Method】，或直接单击快捷操作的【Load Method】图标，选定文件名，单击【OK】，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同“4.2.1”项下，在色谱工作参数中做修改；也可以在命令栏【Method】选择【Edit Entire Method】，随后工作站即按顺序出现一系列参数设置页面，在每个页面中键人设定值，单击【OK】，即完成。
2.2.3编辑新文件先在命令栏【Method】下，选择【New Method】，然后再在命令栏【Method】下，选择【Edit Entire Method】，在每个参数设置页面下输入设定值，完成后，在命令栏【Method】下，选择【Save Method】，给新文件命名，单击【OK】，即完成。
2.3 仪器的运行当色谱参数设置完成后，单击工作站流程图右下角的【ON】，仪器开始运行。
此时，画面颜色由灰色转变成黄色或绿色，当各部件都达到所设参数时，画面均变为绿色，左上角红色的Not Ready变为绿色的Ready，表明可以进行分析。
Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序
Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序1.目的使操作人员的操作步骤规范化。
2.适用范围适用于仪器安装、调试、校准后正常状态下进行的操作。
3.责任者质控科仪器分析员对此规程负责。
4.规程4.1清洗液、流动相、封柱液预处理4.1.1所有清洗液、流动相、封柱液在使用前均需过滤、脱气以及混合均匀。
4.1.2甲醇-水（10：90）、乙腈-水（10：90）、超净水、乙腈均需存放在棕色溶剂瓶中。
4.1.3含有乙腈的溶液以及不含乙腈但含有较高比例的其他有机溶剂的溶液在过滤时需使用有机相微孔滤膜，其它溶液在过滤时需使用水相微孔滤膜。
4.1.4存放清洗液、流动相、封柱液的溶剂瓶在每次装入溶液前需用少量过滤好的该溶液清洗数次。
4.2接通电源,开启连机电脑,再接通仪器电源,仪器自检完毕，处于准备进行状态。
双击桌面图标“仪器1联机”，打开Agilent 1200化学工作站，在左上角下拉框中选择“方法与运行控制”界面。
显示如下图标：注意：一定要先双击“仪器1联机”图标，进入联机状态，方可双击“仪器1脱机”图标，同时进入脱机界面。
否则，将无法联机。
4.2泵4.2.1 准备清洗液并装入溶剂瓶中，将吸滤器放入瓶内。
安装所需用柱子。
4.2.3 将吹扫阀（即“Purge”阀）打开，单击泵图标，选择“设置泵”，将“流速”设置为3.00ml/min。
选择清洗液所在通道（建议为A通道），单击“确定”，在“系统视图”中单击“启动”运行泵，泵运行10分钟后，观察压力，应小于10bar，若大于此压力，应更换purge阀滤芯，调节流速1.00ml/min。
4.2.4关闭purge阀，观察柱压是否正常。
4.2.5选择“控制”，在“用于泵密封垫清洗的泵”（Seal Wash）中选择“定期清洗”，“周期”设置为5min，“持续”设置为0.1min，同时观察试剂架中10%异丙醇是否充足，相应的废液瓶是否有充足空间。
4.2.6 根据“柱使用记录中所规定的方法”清洗柱子约30分钟后，在“控制”组中的“泵”选项中选择“待机”，待系统压力降到10bar 以下后，更换流动相，在“控制”组中的“泵”选项中选择“启动”改用流动相平衡柱子，约30分钟后柱子处于平衡状态。
Agilent 1200高效液相色谱仪操作规程(四元泵)
Agilent 1200(四元泵)高效液相色谱仪的标准操作规程（美国安捷伦公司）一、准备工作1．更换纯净水，冲洗色谱柱的纯净水需每天更换，以免长菌。
各溶剂瓶需明确标明瓶内所装液体。
2．打开液相色谱仪柱温箱，按照色谱柱上标示的方向，连接试验所需色谱柱，连接色谱柱时切勿装反。
3．依次打开色谱仪各模块电源，待各模块自检完成后，双击“HPLC联机”图标，化学工作站自动与1200 LC通讯，进入工作站。
4．将要使用的各通道上的滤头放入已经0.45um滤膜过滤、脱气（约10分钟）的水相或流动相中，点击“Methood and Run Control”界面中的“启动”图标，操作界面被激活，由灰色变为绿色；同时调出检测样品所需的方法。
5．打开Purge阀，点击泵图标，在Setup pump选项中设置流速和比例来排气泡。
若使用A、B两通道，则应分别以5ml/min的流速、100%的比例各排液5min。
（脱气机的内腔体积一般为12ml，故排液时间要长，以便能保证各通道管路中充满检测样品所需的水相和有机相）purge结束后，将泵的流速调为0，旋紧purge阀（切勿在5ml/min流速时旋紧purge阀）。
将流速设为1ml/min，以10%的甲醇水（或乙腈水），冲洗色谱柱30min。
6．点击泵的图标，改变所需通道（已purge完）的比例，已达到检测样品所需的流动相条件，平衡色谱柱。
同时按各溶剂瓶中液体的真实体积，设定溶剂瓶体积。
二、数据采集1．点击左上角样品瓶图标，选择样品信息，更改文件保存路径、样品名称、样品位置等信息按要求填写，确认无误后点击确定。
2．点击自动进样器图标，选择设置进样器，设定进样体积。
选择进样方式，一般选择洗针进样方式，洗针瓶位置一般设为样品托盘的第91位，洗针液体一般为50%的甲醇水溶液。
3．点击检测器图标，更改自己所需的检测波长，参比波长（如无需参比波长请关闭），打开紫外灯。
如为DAD检测器时，光谱信息储存请选择全部，以便为图谱处理时提供所需依据。
Agilent 1200高效液相色谱仪使用操作规程
Agilent 1200高效液相色谱仪使用操作规程一、目的：建立高效液相色谱仪的标准操作规程，确保标准操作。
二、范围：适用于Agilent 1200高效液相色谱仪的操作过程。
三、责任者：质保部Agilent 1200高效液相色谱仪检验人员对本标准的实施负责。
四、程序：1、开机前的准备工作：熟悉检验标准操作规程，按要求配制流动相，并以0.45μm的微孔滤膜滤过，并经超声机超声脱气10～15分钟，备用。
2、开机测样：2.1打开计算机，进入“Windows XP”画面，并自动运行“Bootp Server”程序。
2.2打开1200LC液相仪各模块电源。
2.3待各模块自检完成后，双击联机图标，化学工作站自动与1200LC 通讯，进入工作站画面。
2.4从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面，单击“系统视图”、“命令行”、使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
2.5把流动相放入溶剂瓶中。
2.6打开Purge阀。
2.7单击“泵”图标，单击“设置泵”选项，进入泵编辑画面。
2.8设置流速:3-5ml/min，单击“确定”。
2.9单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“启动”，单击“确定”，则系统开始清洗，直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止。
2.10单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“关闭”，单击“确定”关泵，关闭Purge Valve阀。
2.11单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“设置泵”选项，设流速:1.5ml/min。
单击“确定”。
2.12单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，也可输入停泵的体积，单击“确定”，泵开始运行。
2.13单击检测器图标，单击“设置VWD”选项，在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm，点击“确定”。
单击检测器图标，单击“控制”选项，在“灯”下方选“开”，点击“确定”。
2.14待仪器就绪，基线平稳，点击“运行控制”，点击“样品信息”选项，在“操作者姓名”后输入操作者姓名，在子目录中输入样品名，在前缀框中输入计数器起始位，仪器会自动命名，如VWD001、VWD002……)。
Agilent1200型高效液相色谱仪标准操作规程
1.目的（Purpose）：规范Agilent1200型高效液相色谱仪的使用和维护，确保仪器正常运转。
2.范围（Scope）：适用于公司QC部Agilent1200型高效液相色谱仪的使用和维护。
3.职责（Responsibility）：QC仪器操作人员对本仪器的使用和维护负责。
4.定义（Definition）4.1高效液相色谱仪：用高效液相色谱法对物质进行定性、定量分析的仪器。
4.2紫外检测器是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器，其工作原理是Lambert-Beer定律，即当一束单色光透过流动池时，若流动性不吸收光，则吸光度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比。
物理上测得物质的透光率，然后取负对数得到吸光度。
4.3示差折光检测器（RID）利用纯流动相和含有组分的洗脱液二者折光率之间的差别进行检验。
由于折光率随温度变化，检测器要求有一恒温小空间，使温度稳定，最好能控制在±0.001℃以内。
依据反射定律，在玻璃-液体界面，反射光的程度与入射角和玻璃与液体的折光率有关。
折光率改变时，反射光的强度也发生变化，在光电管中产生的信号被放大和记录下来。
5.安全注意事项（Safety Precaution）5.1流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。
如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
5.2在流动相配制好后，一定要进行脱气，除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质。
5.3如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存于甲醇/乙腈中。
6.程序（Procedure）：6.1仪器组成及电源6.1.1仪器组成本仪器由四元泵（G1311A）、标准自动进样器（G1329A）、柱温箱（G1316A）、VWD检测器（G1314B）、示差检测器（G1362A）、脱气系统（G1322A），各部件电源插头。
Agilent 1200高效液相色谱仪(四原泵)操作规程
Agilent 1200高效液相色谱仪（四原泵）操作规程1.目的建立高效液相色谱仪（四原泵）使用维护保养标准操作规程，确保测量结果准确、可靠。
2.适用范围本SOP适用于Agilent 1200高效液相色谱仪（四原泵）的使用。
3.责任者化验员应严格遵照该操作规程，管理方负责监督本规程的实施。
4.定义无5.规程5.1准备在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相、供试品及对照品。
流动相装入溶剂储液瓶，确认吸滤头已置于液面以下，供试品溶液和对照品溶液均用0.45μm的膜过滤。
5.2开机5.2.1打开电脑；5.2.2打开1200各模块电源；5.2.3等待各模块就绪后，双击桌面上的工作站图标，进入化学工作站；5.2.4旋开泵上的purge阀（逆时针转动，旋松即可，不要转动太多。
），将流速设置为5.0ml/min，将准备排气的管道的流量设置为100%（如：流路A比例则是100%-B-C-D），在工作站中打开泵，则开始排除管路中的气泡（时间约为5min）；其他通道同理操作。
5.2.5排气完成后，关闭purge阀（顺时针旋转，旋紧即可，不必旋的太紧。
）。
5.2.6连接色谱柱，用适宜的流动相冲洗色谱柱。
如果使用有盐的流动相，要先用80%的水过渡。
5.2.7更换方法规定的流动相。
冲洗约30分钟。
5.3设置方法5.3.1设置新方法5.3.1.1（自动进样器参数设定：单击工作站中“进样针”图标，选择“设置进样器”（一般选择洗针进样，清洗瓶位置一般为100位），单击“确定”按钮即可；5.3.1.2泵参数设定（四元泵）：单击工作站中“泵”图标，选择“设置泵”。
①在“流速”处输入流速（如1.0ml/min）；②在“停止时间”处设定所需采集时间；③在时间表中插入时间列表，编辑梯度；④在压力限处可设定最大耐高压，以保护色谱柱，单击“确定”按钮即可；5.3.1.3检测器参数的设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如280nm，在“峰宽（响应时间）”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如>0.1min（2s）。
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明-2ppt.
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
参数表，右侧为积分结果，在积分参数表中按实际的要求输入修改的 参数，在命令栏“Integration”下，选择“Integrate”或单击快捷操作的 “Integrate Current Chromatogram”图标（左边有∫，右边两个峰），仪 器即按照新设定的积分参数重新积分，完成后，单击积分参数表上方 “Exit and save events to method”的快捷图标（右下角带勾），保存所 作的参数修改并退出。
6 打印报告
在命令栏“Report”下，选择“specify Report”或单击最右侧快捷操作的 “Specify Report Calculation and Print Style” 图标（右下角带叉的报告），根 据实际要求选择报告的格式和输出形式等，单击“OK”，即完成。
*
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.5.1 流动相使用前请必须脱气、过滤。
8.5.2 使用缓冲盐时，要加在线Seal-wash选项。
*
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.5.3 关机前，用 100%的乙腈冲洗系统20分钟，然后关泵，（适于反 相色谱柱，正相色谱柱用适当的溶剂冲洗）。 8.5.4 及时更换Purge Valve内的过滤芯。（当打开Purge Valve时，压 力高于10bar，表明过滤芯已堵）。 8.5.5 使用合适的密封圈。 8.6 使用梯度比例时要注意事项：
*
7. 关机 关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。 退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。 关闭Agilent 1200各模块电源开关。 8 . Agilent 1200 LC维护保养
Agilent 1200型自动进样高效液相色谱仪操作规程
Agilent 1200型高效液相色谱仪操作规程1目的规范Agilent 1200型高效液相色谱仪的操作，确保使用本仪器的检验结果准确可靠。
2实验步骤2.1开机2.1.1准备好流动相并安装色谱柱。
2.1.2依次打开仪器各部件电源开关(在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器或荧光检测器等)，约5 min后，仪器进入待机状态，此时仪器各部件指示灯应无色或呈黄色。
2.1.3打开电脑，点击亿【Instrument 1 online】，约30s后，计算机进入工作站2.2色谱条件的设定2.2.1直接设定在操作页面的右下部——色谱工作参数中设定。
将鼠标移至要设定的参数，如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击【OK】，即完成。
2.2.2调用已设置好的文件在命令栏【Method】下，选择【Load Method】，或直接单击快捷操作的【Load Method】图标，选定文件名，单击【OK】，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同“4.2.1”项下，在色谱工作参数中做修改；也可以在命令栏【Method】选择【Edit Entire Method】，随后工作站即按顺序出现一系列参数设置页面，在每个页面中键人设定值，单击【OK】，即完成。
2.2.3编辑新文件先在命令栏【Method】下，选择【New Method】，然后再在命令栏【Method】下，选择【Edit Entire Method】，在每个参数设置页面下输入设定值，完成后，在命令栏【Method】下，选择【Save Method】，给新文件命名，单击【OK】，即完成。
2.3 仪器的运行当色谱参数设置完成后，单击工作站流程图右下角的【ON】，仪器开始运行。
此时，画面颜色由灰色转变成黄色或绿色，当各部件都达到所设参数时，画面均变为绿色，左上角红色的Not Ready变为绿色的Ready，表明可以进行分析。
Agilent1200型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent_1200型高效液相色谱仪标准操作规程
1 目的
建立Agilent 1200高效液相色谱仪的操作规程，保证其正确使用。
2 范围
Agilent 1200高效液相色谱仪的操作与维护。
3 职责
操作人员和责任人员对本规程的实施负责。
4 内容
4.1 组成
G1322A脱气机、G1311A四元泵、G1329A自动进样器、G1330B自动进样器恒温器、G1315B可变波长检测器（DAD）、GB16A 柱温箱和一套Agilent 1200 CHEMSTATIONS 软件（软件光盘与说明书原件由工程部保存），打印机。
4.2 在线清洗
若实验的流动相中含有的缓冲盐和离子对等试剂干后会留下固体印迹的物质时，必须要进行在线清洗过程。
首先配制好10%异丙醇溶液，经
0.45μm有机膜抽滤后，装入已用滤过的10%异丙醇溶液洗过三遍的洁净玻璃瓶内，调整流量为2～3滴/分钟，10%异丙醇溶液必须每周更新。
4.3 开机
接通电源，打开计算机，等计算机启动成功后，含四元泵的Agilent 1200高效液相色谱仪系统：从上到下，依次打开脱气机、泵、进样器、进样器恒温器、柱温箱和多波长检测器。
约30秒钟后，各部件自检完毕，进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
双击桌面上的Instrument 1 Online，计算机进入工作站的Method and Run Control操作界面。
画面如下所示。
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Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序
1.目的
使操作人员的操作步骤规范化。
2.适用范围
适用于仪器安装、调试、校准后正常状态下进行的操作。
3.责任者
质控科仪器分析员对此规程负责。
4.规程
4.1清洗液、流动相、封柱液预处理
4.1.1所有清洗液、流动相、封柱液在使用前均需过滤、脱气以及混合均匀。
4.1.2甲醇-水（10：90）、乙腈-水（10：90）、超净水、乙腈均需存放在棕色溶剂瓶中。
4.1.3含有乙腈的溶液以及不含乙腈但含有较高比例的其他有机溶剂的溶液在过滤时需使用有机相微孔滤膜，其它溶液在过滤时需使用水相微孔滤膜。
4.1.4存放清洗液、流动相、封柱液的溶剂瓶在每次装入溶液前需用少量过滤好的该溶液清洗数次。
4.2接通电源,开启连机电脑,再接通仪器电源,仪器自检完毕，处于准备进行状态。
双击桌面图标“仪器1联机”，打开Agilent 1200化学工作站，在左上角下拉框中选择“方法与运行控制”界面。
显示如下
图标：
注意：一定要先双击“仪器1联机”图标，进入联机状态，方可双击“仪器1脱机”图标，同时进入脱机界面。
否则，将无法联机。
4.2泵
4.2.1 准备清洗液并装入溶剂瓶中，将吸滤器放入瓶内。
安装所需用柱子。
4.2.3 将吹扫阀（即“Purge”阀）打开，单击泵图标，选择“设置泵”，将“流速”设置为3.00ml/min。
选择清洗液所在通道（建议为A通道），单击“确定”，在“系统视图”中单击“启动”运行泵，泵运行10分钟后，观察压力，应小于10bar，若大于此压力，应更换purge阀滤芯，调节流速1.00ml/min。
4.2.4关闭purge阀，观察柱压是否正常。
4.2.5选择“控制”，在“用于泵密封垫清洗的泵”（Seal Wash）中选择“定期清洗”，“周期”设置为5min，“持续”设置为0.1min，同时观察试剂架中10%异丙醇是否充足，相应的废液瓶是否有充足空间。
4.2.6 根据“柱使用记录中所规定的方法”清洗柱子约30分钟后，在“控制”组中的“泵”选项中选择“待机”，待系统压力降到10bar 以下后，更换流动相，在“控制”组中的“泵”选项中选择“启动”改用流动相平衡柱子，约30分钟后柱子处于平衡状态。
设定所需流速，在“停止时间”中设定所需运行时间，在“后运行时间”设定所需后运行时间；选择“溶剂”项，设定各通道比例，单击“确定”。
4.2.6 如进行梯度分析，在“设置泵”组中选择“时间表”，单击“追加”，根据具体方法进行时间和相应的参数设置。
4.3 柱温箱
4.3.1在系统视图中，单击柱温箱图标，并从菜单中选择“设置柱温箱”，设置“温度”选项，单击“确定”。
4.3.2在实验开始时，用清洗液清洗柱子时，应同时开启柱温箱；在实验结束时，用清洗液清洗柱子时，应关闭柱温箱，让柱子随着清洗过程慢慢冷却。
要避免到封柱过程结束后才关闭柱温箱，这会导致柱的寿命减短。
4.4自动进样器
4.4.1在系统视图中，单击自动进样器图标，从菜单“设置
进样器”，在“进样”组中，选择“洗针进样”，清洗瓶通常设为“91”；在最优化中设为“无”。
4.4.2 清洗瓶中的清洗剂通常为滤过的超净水，只需盖瓶盖，无需放置垫片。
4.5可变波长检测器（VWD）
4.5.1在系统视图中，单击检测器图标，并从菜单中选择“设置VWD信号”，在“信号”组中设置波长，在“峰宽（响应时间）”组中，单击下拉列表并选择“>0.1min（2s）”，单击“确定”。
4.5.2在“控制”组中，选择关闭或打开氘灯。
一般情况下，待到系统走流动相时即打开氘灯预热；分析结束时，用清洗液清洗柱子时，即时关闭氘灯。
4.7“自动进样器”、“柱温箱”、“检测器”中的时间表设置均与“泵”一致。
4.8 上述“自动进样器”、“泵”、“柱温箱”、“检测器”的相关参数设置完毕后可在主界面选择“方法”，选择“方法另存为”保存方法，以后使用时可选择“调用方法”。
4.9 序列
4.9.1在“方法和运行控制”视图中，单击主工具栏上的，切换至“序列”面板，点击“仪器控制”。
4.9.2单击选择“序列参数”出现如下对话框：
“操作者姓名”一般填写姓名的首字母集合；“数据文件”选择“自动”；子目录填写“xxyyzz-aaa”，其中xxyyzz为6位数的年月日组合，aaa为品名的首字母集合；“运行部分方法”选择“依据运行时选项表”；“等待时间”设置为0min；“未就绪超时”设置为0min；如该序列要走过夜，在“关闭”选择“序列运行后命令/宏”，如果所用的仪器为单元泵，选择“LAMPALL OFF”,如果所用的仪器为四元泵，选择“macro SHUTDOWN MAC,go”
4.9.3单击“确定”。
4.9.4单击“序列“面板，出现如下对话框，设定序列表。
在“样品瓶“中输入样品瓶位置“1～99”；在样品样品名称中输入相应样品名称，具体参见附件一；在方法名称中输入相应的方法名称，具体参见附件二；在“进样次数/瓶”输入所需进样的次数；使用“插入”、“追加一行”和“剪切”按钮编辑序列行数，单击“确定”。
4.9.5单击主界面上的“序列”，选择“保存序列”，保存所设置的序列。
4.10 数据分析
4.10.1在“视图”中选择“数据分析”将主界面切换到数据分析。
4.10.2单击，切换至积分工作区。
4.10.3选择“调用信号”调用所需的信号。
4.10.4在“积分/报告”工具栏中，单击切换到积分事件表。
其
中，基线校正可以设置为“经典”或“高级”，在进行有关物质分析
时设置为“高级”；斜率灵敏度在有关物质分析时设置为“0.5”，其他分析时设置为“1”；峰宽设置为“0.04”；“最小峰面积”和“最小峰高”在有关物质分析时均设置为“0”，其他分析时可设置适合的数值；“肩峰”选择“关闭”；“信号指定事件”选择“VWD缺省”。
单击保存已修改的积分事件表并关闭积分工作区。
4.10.5单击打开“保存方法”对话框保存方法。
4.10.6单击放大光标查看积分基线，单击缩小至初始大小。
4.11样品分析
待基线走平稳后，在序列“仪器控制”主界面点击“开始”进样。
4.12仪器及柱子清洗
根据“柱使用记录中所规定的方法”清洗柱子及流路，注意一般甲醇-水（10：90）、乙腈-水（10：90）不超过60分钟。
再用10倍柱体积封柱液清洗柱子及流路。
退出工作软件并保存数据，关机。
5.维护
5.1泵
5.1.1主动入口阀滤芯，每6个月清洗一次。
5.1.2溶剂过滤器，每3个月清洗一次。
5.1.3 泵密封垫、柱塞杆每2年清洗一次。
5.2自动进样器
5.2.1针头，每6个月清洗一次。
5.2.2针座，每6个月清洗一次。
5.2.3转子密封垫，每6个月清洗一次。
5.2.4 计量泵，通常不进行维护，除非发现进样量精密度降低或计量设备泄漏。
5.3柱温箱，进行必要的清洁。
5.4 检测器
5.4.1 氘灯，当不能点亮或者漂移超过范围是更换。
5.4.2 流通池，噪声、渗漏、光强度降低时进行清洗。
6附件。