分子生态学期末重点(哈师大)
分子生物学期末复习(整理版)
1）分子生物学从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。
研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系，如遗传信息的传递，基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能，以及细胞信号的转导等。
2）移动基因：又称转座子。
由于它可以从染色体基因组上的一个位置转移到另一个位置，是指在不同染色体之间跃迁，因此也称跳跃基因。
3）假基因：有些基因核苷酸序列与相应的正常功能基因基本相同，但却不能合成出功能蛋白质，这些失活的基因称为假基因。
4）重叠基因：所谓重叠基因是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列，或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。
5）基因家族：是真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因。
6）基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位.7）基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和.8）端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒.该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在.9）操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子.10）顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等.11）反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子.12）启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列.13）增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列. 它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远.14）转录因子：直接结合或间接作用于基因启动子、形成具有RNA聚合酶活性的动态转录复合体的蛋白质因子。
分子生物学期末考试重点
分子生物学期末考试重点1. 定义重组DNA 技术将不同的DNA 片段按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。
2. 说出分子生物学的主要研究内容1. DNA 重组技术2. 基因表达研究调控3. 生物大分子的结构功能研究4. 基因组、功能基因组与生物信息学研究3. 简述DNA 的一、二、三级结构一级： 4 种核苷酸的连接及排列顺序，表示了该DNA 分子的化学成分二级： 2 条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构三级：DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间结构4. 原核生物DNA 具有哪些不同于真核生物DNA 的特征？①DNA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成，多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定，一条是5---3，另一条是3---5②DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧构成基本骨架，碱基排在内侧③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对5. DNA 双螺旋结构模型是由谁提出的？沃森和克里克6. DNA 以何种方式进行复制，如何保证DNA 复制的准确性？线性DNA 的双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子，在DNA 末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。
环状DNA 复制：B型、滚环型、D 型①以亲代DNA 分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则②DNA聚合酶I非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性③DNA修复系统：错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统7. 简述原核生物DNA复制特点只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，变现为虽只有一个复制单元，但可以有多个复制叉8. 真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控？细胞生活周期水平调控；染色体水平调控；复制子水平调控9. 细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变的碱基和核苷酸片段；重组修复，复制后的修复；DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA的修复，导致变异10?什么是转座子？分为哪些种类？是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。
分子生物学期末考试重点
1、定义重组ＤNA技术将不同得DＮA片段按照人们得设计定向连接起来,然后在特定得受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞得新得遗传性状。
2、说出分子生物学得主要研究内容1、ＤNA重组技术2、基因表达研究调控3、生物大分子得结构功能研究4、基因组、功能基因组与生物信息学研究３、简述DNA得一、二、三级结构一级：4种核苷酸得连接及排列顺序，表示了该DＮA分子得化学成分二级：２条多核苷酸连反向平行盘绕所形成得双螺旋结构三级：DNＡ双螺旋进一步扭曲盘绕所形成得特定得空间结构4、原核生物DＮA具有哪些不同于真核生物ＤNＡ得特征?①DＮA双螺旋就是由2条互相平行得脱氧核苷酸长链盘绕而成,多核苷酸得方向由核苷酸间得磷酸二酯键得走向决定,一条就是５--—３，另一条就是3---5②ＤＮA双螺旋中脱氧核糖与磷酸交替连接，排在外侧构成基本骨架,碱基排在内侧③两条链上得碱基通过氢键相结合，形成碱基对5、ＤNA双螺旋结构模型就是由谁提出得？沃森与克里克6、DNＡ以何种方式进行复制，如何保证DＮＡ复制得准确性？线性DＮA得双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子,在DNA末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质得介入下在真正得末端上启动复制.环状ＤＮA复制：θ型、滚环型、D型①以亲代DNA分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则②DＮA聚合酶Ｉ非主要聚合酶，可确保DNＡ合成得准确性③DＮA修复系统:错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SＯS系统7、简述原核生物DＮA复制特点只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新得DNA复制，变现为虽只有一个复制单元,但可以有多个复制叉８、真核生物DNＡ得复制在哪些水平上受到调控？细胞生活周期水平调控;染色体水平调控；复制子水平调控9、细胞通过哪几种修复系统对ＤNＡ损伤进行修复？错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变得碱基与核苷酸片段;重组修复，复制后得修复;DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA得修复,导致变异10、什么就是转座子？分为哪些种类?就是存在于染色体DNA上可自主复制与移动得基本单位。
分子生态学复习资料汇总
分子生态学名词解释等位酶：（Allozyme）同一基因位点的不同等位基因所编码的一种酶的不同形式。
突变：Genic mutation：基因突交是指基因组DNA分子发生的突然的、可遗传的变异现象。
从分子水平上看，基因突变是指基因在结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变。
替换：即一种核苷酸被另一种核苷酸所取代。
•碱基替换有两种类型：转换是发生在嘌呤之间(A和G)或密啶之间(C和T）的变换;颠换则指嘌呤和嘧啶的变换。
•转换比颠换更频繁。
PCR：（聚合酶链式反应）在生物体外，利用一小段DNA作为模板，在DNA聚合酶的作用下，将材料dNTPs复制成跟模板互补的DNA链。
PCR每个循环可分为三步：DNA变性、引物退火、新合成序列的延伸。
单亲遗传( uniparental inheritance):基因和遗传因子仅遗传自一个亲本。
该术语最常用于描述线粒体和质体基因组的遗传（包括叶绿体基因组cpDNA）,以及有性繁殖生物中一些性染色体的遗传。
双亲遗传( biparental inheritance):基因与遗传因子遗传自两个亲本;仅适用于有性繁殖生物。
共显性标记：( co-dominant markers)可以区分杂合子与纯合子的分子标记。
显性标记:( dominant markers)难以区分纯合与杂合个体的分子标记。
限制性片段长度多态性（RFLP）：一种显性分子标记技术,用一种或多种限制性内切酶,对整个基因组或预选的DNA片段进行消化,从而生成多条DNA 片段。
所获得的带型取决于相应的DNA序列的变异水平,因为每一个体中DNA序列的变异会影响限制性酶切位点的数量。
单核苷酸多态：( single nucleotide polymorphism, SNP )由单核苷酸替换所导致的两条DNA序列间的一个变异。
微卫星(microsatellite)：一种DNA片段，由短的串联序列组成,通常以不超过5个碱基对的单元重复多次，如:在(AG)，代表的微卫星片段中,序列AG重复了10 次。
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分子生物考试范围:第2、4、6、11、19章题型：选择、是非、名解、问答、简答选择题全部要看，名解与问答、简答的重点如下:第二章名解：基因组、卫星DNA、假基因、多顺反子DNA；（三）第一题第四章名解：移码突变、重组修复、颠换与转换；简答：DNA突变的意义、DNA损伤类型、DNA损伤因素第六章名解：顺式作用元件、反式作用因子、操纵子、管家基因；简答：乳糖操纵子正负调控机制、原核与真核基因表达特点的异同第十一章名解：抑癌基因、病毒癌基因、细胞癌基因；（三）1.2.4 ；（四）第十九章名解：基因克隆、cDNA组文库、基因组文库、基因剔除、RNA干扰、southern 印迹、northern印迹；（三）1.2.（四）1.第二章（一）选择题A 型题1．原核生物染色体基因组是A．线性双链DNA分子B．环状双链DNA分子C．线性单链DNA分子D．线性单链RNA分子E．环状单链DNA分子2．真核生物染色体基因组是A．线性双链DNA分子B．环状双链DNA分子C．线性单链DNA分子D．线性单链RNA分子E．环状单链DNA分子3．有关原核生物结构基因的转录，叙述正确的是A．产物多为多顺反子RNAB．产物多为单顺反子RNAC．不连续转录D．对称转录E．逆转录4．原核生物的基因组主要存在于A．质粒B．线粒体C．类核D．核糖体E．高尔基体5．下列有关原核生物的说法正确的是A．原核生物基因组DNA虽然与蛋白结合，但不形成真正的染色体结构B．结构基因中存在大量的内含子C．结构基因在基因组中所占比例较小D．原核生物有真正的细胞核E．基因组中有大量的重复序列6．下列有关原核生物的说法不正确的是A．原核生物的结构基因与调控序列以操纵子的形式存在B．在操纵子中，功能上关联的结构基因串联在一起C．在一个操纵子内，几个结构基因共用一个启动子D．操纵元件也是结构基因E．基因组中只存在一个复制起点7．真核生物染色质中的非组蛋白是A．碱性蛋白质B．序列特异性DNA结合蛋白C．识别特异DNA序列的信息存在于蛋白上D．不能控制基因转录及表达E．不参与DNA分子的折叠和组装8．真核生物染色质的基本结构单位是A．α-螺旋B．核小体C．质粒D．ß-片层E．结构域9．关于真核生物结构基因的转录，正确的说法是A．产物多为多顺反子RNAB．产物多为单顺反子RNAC．不连续转录D．对称转录E．新生链延伸方向为3'→5'10．外显子的特点通常是A．不编码蛋白质B．编码蛋白质C．只被转录但不翻译D．不被转录也不被翻译E．调节基因表达11．下列有关卫星DNA说法错误的是A．是一种高度重复序列B．重复单位一般为2~10 bpC．重复频率可达106D．能作为遗传标记E．在人细胞基因组中占5%~6%以上12．下列有关真核生物结构基因的说法不正确的是A．结构基因大都为断裂基因B．结构基因的转录是不连续的C．含有大量的重复序列D．结构基因在基因组中所占比例较小E．产物多为单顺反子RNA13．染色体中遗传物质的主要化学成分是A．组蛋白B．非组蛋白C．DNAD．RNAE．mRNA14．真核生物染色质中的组蛋白是A．酸性蛋白质B．碱性蛋白质C．一种转录因子D．带负电荷E．不带电荷15．指导合成真核生物蛋白质的序列主要是A．高度重复序列B．中度重复序列C．单拷贝序列D．卫星DNAE．反向重复序列16．真核生物的基因组一般比较庞大，但所含基因总数却很少，究其原因下列说法不正确的是A．产物多为单顺反子RNAB．存在大量的重复序列C．非编码区所占比例较大D．存在大量的内含子E．编码区所占比例很小17．在DNA重组技术中，最常用到的并存在于原核生物中的载体是A．BACB．人工染色体C．噬菌体D．质粒E．YAC18．与原核细胞基因组相比，真核细胞基因组的编码方式与其不同，主要体现在A．以单顺反子的形式进行转录B．以多顺反子的形式转录C．存在大量的重复序列D．基因组较大E．结构基因所占比例较小19．用非特异性核酸酶酶切真核细胞的染色质DNA时，大多数情况下可得到约200 bp的片段，其主要原因是A．DNA片段较短B．每个核小体单位包含约200 bp的DNAC．核酸酶没有特异性D．基因组结构简单E．DNA是线性的B型题A．不连续的B．连续的C．瞬时的D．无规律的E．不需要启动子20．原核生物结构基因中编码信息是21．真核生物结构基因中编码信息是A．质粒B．线粒体DNAC．核糖体中的核酸D．核小体E．重复序列22．原核生物的基因组除染色体DNA外还包括23．真核生物的基因组除染色体DNA外还包括A．线性分子B．环状分子C．单链分子D．RNAE．cDNA24．线粒体基因组是25．质粒基因组是X型题26．原核生物基因组位于哪种结构中A．质粒B．线粒体C．类核D．内质网E．核糖体27．真核生物基因组位于哪种结构中A．核糖体B．线粒体C．染色体D．质粒E．高尔基复合体28．真核生物染色体中的核心组蛋白包括A．H1B．H2AC．H2BD．H3E．H429．线粒体DNAA．能独立编码线粒体中的一些蛋白质B．是核外遗传物质C．是环状分子D．是线性分子E．编码的蛋白质不能进入细胞核30．病毒基因组可以是A．DNAB．RNAC．线性分子D．环状分子E．可以形成多顺反子mRNA选择题答案：答案考察的知识点题号答案考察的知识点题号1B原核生物基因组的结构2A真核生物基因组的结构3A原核生物结构基因的转录4C原核生物的基因组5A原核生物中类核的概念6D操纵元件的概念7B非组蛋白的特性8B染色质的基本组成单位9B真核生物结构基因的转录10B外显子的特点11D卫星DNA的特性12B真核生物结构基因特点13C染色体的化学成分14B组蛋白的特性15C单拷贝序列的功能16A真核生物基因量少的原因17D质粒在实验中的应用18A真核细胞编码特点19B真核生物染色质结构特征20B原核生物结构基因的转录21A真核生物结构基因的转录22A质粒23B线粒体24B线粒体DNA的结构25B质粒DNA的结构26AC原核生物基因组27BC真核生物基因组28BCDE核心组蛋白的组成29ABC线粒体DNA的结构与功能30ABCDE病毒基因组的结构特点（二）名词解释1.基因组（genome）：细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和。
分子生物学期末考试重点
分子生物学期末考试重点内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）1.定义重组DNA技术将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。
2.说出分子生物学的主要研究内容重组技术 2.基因表达研究调控 3.生物大分子的结构功能研究 4.基因组、功能基因组与生物信息学研究3.简述DNA的一、二、三级结构一级：4种核苷酸的连接及排列顺序，表示了该DNA分子的化学成分二级：2条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构三级：DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间结构4.原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征①DNA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成，多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定，一条是5---3，另一条是3---5②DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧构成基本骨架，碱基排在内侧③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对双螺旋结构模型是由谁提出的沃森和克里克以何种方式进行复制，如何保证DNA复制的准确性线性DNA的双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子，在DNA末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。
环状DNA复制：θ型、滚环型、D型①以亲代DNA分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则②DNA聚合酶I 非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性③DNA修复系统：错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统7.简述原核生物DNA复制特点只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，变现为虽只有一个复制单元，但可以有多个复制叉8.真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控细胞生活周期水平调控；染色体水平调控；复制子水平调控9.细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变的碱基和核苷酸片段；重组修复，复制后的修复；DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA的修复，导致变异10.什么是转座子分为哪些种类是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。
【分子生物学重点归纳】生物化学与分子生物学重点知识归纳
【分子生物学重点归纳】生物化学与分子生物学重点知识归纳分子生物学重点归纳1. 奠定了分子生物学的几大重大发现1）细胞学说证明了动植物都是有细胞组成的2）孟德尔的遗传学规律最先使人们对形状产生认识3）摩尔根的基因学说进一步将性状与基因相偶联，成为现代遗传学的4）Watson和Crick提出了脱氧核糖核苷酸的双螺旋模型，为充分揭示遗传信息的传递规律铺平了道路5）在蛋白质方面，Sumner证实了酶是蛋白质，Sanger利用纸电泳及色谱技术开创了蛋白质序列分析的先河 2. 染色体和染色质之间的区别？什么是染色体？什么是染色质？染色质与染色体有共同的组成成分，是同一物质在细胞周期不同功能阶段中所呈现的不同构象。
染色质是指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构，是间期细胞遗传物质存在的形式。
染色体是指细胞在有丝分裂或减数分裂的特定阶段，染色质细丝高度螺旋化形成较粗的柱状和杆状等不同的形状,即染色体 3.在生物的进化过程中，我们所谈到的所谓的C值矛盾？是怎么形成的？为什么会有C值矛盾？以及C 值矛盾我们可以怎么解答？C值：一种生物单倍体基因组DNA的总量称为C值。
C值矛盾：指C值往往与种系进化的复杂程度不一样，某些低等生物却具有较大的C值。
C值矛盾的形成：真核生物基因组最大的特点就是它含有大量重复的序列，许多DNA序列可能不编码蛋白质，没有生理功能，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开，这样就容易造成C值矛盾。
4.DNA和RNA的全名？DNA的组成单位是什么？核苷酸又是什么呢？再往下分，一层一层的了解。
DNA，又称脱氧核糖核酸，英文全称：deoxyribonucleic acid。
RNA，又称核糖核酸，英文全称：Ribonucleic Acid DNA的组成单位：一种高分子化合物，基本单位是脱氧核苷酸，脱氧核苷酸又由磷酸基团，脱氧核糖，含氮碱基组成，其中含氮碱基包括腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（Ｇ）、胞嘧啶（Ｃ）和胸腺嘧啶（Ｔ）。
分子生态学期末重点（哈师大）
分子生态学期末重点（哈师大）分子生态学期末复习重点总结一、名词解释1.分子生态学：应用分子生物学的方法来解决生态学问题的学科。
2.中性进化：一个选择中性（即选择等价）的等位基因在不断的突变压力作用下，通过随机漂变的相互取代过程。
3.操纵子：编码功能上相关的蛋白质或酶的基因与一个共同的调控顺序相串联，形成基因表达和调控的功能单位。
4.负性调节：负调节蛋白（阻遏物）将基因关闭，使其不能转录的调节方式。
5.转座子：基因组中存在的能够自发地在基因组内移动，从染色体的一个区段转移到另一区段或从一条染色体转入另一条染色体的DNA片段。
6.基因突变：是指基因的核苷酸序列发生改变，造成基因表达产物的变化，从而引起表型的改变。
7.移码突变：某些化合物与DNA结合后，可使DNA分子插入或缺失一个或几个碱基对，使该碱基对以下的读码顺序发生移动，从而改变其遗传信息。
8.PCR技术：聚合酶链式反应，又称体外DNA扩增技术。
9.蛋白质组：是指由一个基因组，或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。
10.物种（BSC）：同种生物个体间相互进行杂交并可以产生可育的后代。
11.渐渗杂交：指两物种的杂交后代与亲本反复回交，把某一亲本的性状带至另一亲本。
12.隐存种：是指一组物种，他们符合生物学对物种的定义，也就是说彼此相互隔离，但是它们在形态学是非常相似的，甚至有些时候完全一致。
13.行为生态学：主要是研究生态学中的行为机制和动物行为的生态学意义和进化意义，即研究动物的行为功能、存活值、适合度和进化过程。
14.异双亲：（很多食肉动物、啮齿动物和大约300种鸟类中）参与抚育幼小动物的非双亲成年动物叫异双亲或帮手。
15.种群（population）：居住在某特定区域单个物种的一群个体。
16.基因频率（gene frequecy）：指基因组中某特定位点的等位基因数量占种群中该位点全部等位基因总数的比率，也就是该等位基因在种群中出现的概率。
17.基因型频率（genotype frequency）：指某基因位点特定基因型占种群中该位点全部基因型的比率，也就是该位点特定基因型在种群中出现的概率。
分子生物学期末复习重点
友情提示：1、一般出判断题2、一般出填空3、-------- 一般出名词解释4、******** 一般出简答题5、阴影部分也是重点（一）第一章蛋白质的结构与功能一级结构：指多肽链中氨基酸的排列顺序，即它的化学结构。
二级结构：指借助主链(不包括侧链)的氢键形成的具有周期性的构象。
三级结构：指1条肽链(包括主链和侧链)完整折叠而形成的构象。
四级结构：指含有多条肽链的寡聚蛋白质分子中各亚基间相互作用，形成的构象。
超二级结构和结构域是在蛋白质二级和三级结构之间的两个层次。
超二级结构：指相邻的二级结构单元，在侧链基团次级键的作用下彼此靠近而形成的规则的聚集结构。
结构域：指在1条肽链内折叠成的局部结构紧密的区域。
组成四级结构的多肽链称为蛋白质的亚基，多个亚基组成的蛋白质为寡聚蛋白质1 维持蛋白质分子构象的作用力，主要包括氢键、疏水性相互作用、范德华引力、离子键和二硫键。
2 二级结构主要包括下面几种基本类型(一) α—螺旋(二)β折叠(三)转角(四) β突起(五)卷曲(六)无序结构3 β折叠有两种类型，1种是平行式，1种是反平行式。
反平行折叠在能量上更稳定。
4 转角主要分两类：β转角和γ转角。
转角结构通常负责各种二级结构单元之间的连接作用。
5 常见的3种超二级结构单元为：αα ββ，βαβ。
6 结构域不仅仅是折叠单位和有一定功能的结构单位，还是一个遗传单位7结构域可以分为4种类型：反平行α，平行α/β，反平行β，不规则的小结构1、多肽链的折叠过程天然蛋白质是多肽链合成后经折叠而形成的热力学上稳定的构象。
多肽链的折叠是一自发过程..人们现已提出了一些多肽链的折叠模型,大致可以分为二类。
一种模型认为多肽链的折叠是逐步进行的，先形成一种稳定的二级结构作为核心，然后二级结构的氨基酸侧链进一步发生交互作用，扩大成天然三维结构；另一种模型提出，多肽链可能由于其疏水侧链的疏水交互作用而突然自发折叠，形成一种含二级结构的紧密状态，最后调整成天然结构。
《分子生物学》期末复习思考题(大学期末复习资料).doc
2015级附三院分子生物学复习题1、人类基因组计划的精髓是什么？2、如何应用人类基因组基础研究辅助临床医学？3、什么是基因表达？试述基因表达变化的特点及其调控对生物体的重要性。
4、真核生物中，基因的表达受不同水平的调控，请举其中三种。
5、为什么说转录起始的调控是基因表达调控的中心环节？6、举例说明DNA甲基化与肿瘤的关系。
7、如何通过动物建模的方式来评价创伤愈合新药的作用效果？8、对于新型促愈合药物可能的作用机制的研究思路9、试述外源基因在原核体系中的表达需要具备的条件，及影响外源基因表达的因素。
10、蛋白质的分离纯化技术依据蛋白质的性质分为哪几大类，请列举其中的一类，谈谈它的原理及应用。
11、以人GM-CSF为例，写出获得该基因工程重组蛋白纯品的流程。
12、干细胞应具备哪些生物学特点。
13、干细胞的不对称分裂。
14、什么是细胞分化？为什么说细胞分化是基因选择性表达的结果？15、何为细胞的全能性？如何证明分化成熟体细胞的全能性？16、如何看待基因治疗（诊断）的安全性和社会伦理问题17、什么是表观遗传学？它主要研究什么内容？18、什么是甲基化，在调控基因表达过程中起什么作用？19、什么是基因印记？他的主要特征是什么？20、请叙述肝细胞对胰高血糖素或肾上腺素的反应过程？21、细胞膜在信号转导过程中怎样起作用？22、简述CRISPR/Cas-9的基本原理及优点（与传统的机遇同源重组的胚胎干细胞基因敲除相比较）23、为何在筛选出靶基因敲除的胚胎干细胞时还需要阴性筛选？简述更昔洛韦在胚胎干细胞阴性筛选中的作用机制。
24、siRNA、miRNA、Dicer protein、RISC、PTGS概念25、RNAi的作用机制26、分析解释Su Guo的实验结果27、真题：siRNA的在哪个层次抑制基因表达？为什么？28、真题：真核细胞中Non-coding RNA的种类和特点，以及其对基因表达调控的作用与顺式作用元件有何不同？29、什么是细胞凋亡？30、细胞凋亡有哪些主要途径？31、Bcl-2家族的分类和结构特征（了解）32、P53基因在细胞DNA损伤中的作用（了解）33、转录组及蛋白组的概念分别是什么？其研究内容分别包括哪些方面？34、如何利用转录组学及蛋白组学的方法筛选疾病相关基因？（写出主要的检测指标及其实验方法的名称）35、真题：比较基因组学、转录组学和蛋白质组学的研究内容及其常规技术？36、结合你的专业，论述线粒体与医学的关系。
分子生物学知识点归纳
分子生物学1．DNA的一级结构：指DNA分子中核苷酸的排列顺序。
2．DNA的二级结构：指两条DNA单链形成的双螺旋结构、三股螺旋结构以及四股螺旋结构。
3．DNA的三级结构：双链DNA进一步扭曲盘旋形成的超螺旋结构。
4．DNA的甲基化:DNA的一级结构中，有一些碱基可以通过加上一个甲基而被修饰，称为DNA 的甲基化。
甲基化修饰在原核生物DNA中多为对一些酶切位点的修饰，其作用是对自身DNA产生保护作用。
真核生物中的DNA甲基化则在基因表达调控中有重要作用。
真核生物DNA中，几乎所有的甲基化都发生于二核苷酸序列5'—CG-3’的C上，即5’—mCG —3’。
5．CG岛：基因组DNA中大部分CG二核苷酸是高度甲基化的,但有些成簇的、稳定的非甲基化的CG小片段,称为CG岛,存在于整个基因组中。
“CG”岛特点是G+C含量高以及大部分CG二核苷酸缺乏甲基化。
6．DNA双螺旋结构模型要点：（1）DNA是反向平行的互补双链结构.（2）DNA双链是右手螺旋结构。
螺旋每旋转一周包含了10对碱基,螺距为3.4nm。
DNA 双链说形成的螺旋直径为2 nm.每个碱基旋转角度为36度。
DNA双螺旋分子表面存在一个大沟和一个小沟，目前认为这些沟状结构与蛋白质和DNA间的识别有关。
（3）疏水力和氢键维系DNA双螺旋结构的稳定。
DNA双链结构的稳定横向依靠两条链互补碱基间的氢键维系,纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维持。
7．核小体的组成：染色质的基本组成单位被称为核小体，由DNA和5种组蛋白H1，H2A，H2B，H3和H4共同构成。
各两分子的H2A，H2B，H3和H4共同构成八聚体的核心组蛋白，DNA双螺旋缠绕在这一核心上形成核小体的核心颗粒.核小体的核心颗粒之间再由DNA和组蛋白H1构成的连接区连接起来形成串珠样结构.8．顺反子（Cistron)：由结构基因转录生成的RNA序列亦称为顺反子.9．单顺反子（monocistron）：真核生物的一个结构基因与相应的调控区组成一个完整的基因，即一个表达单位，转录物为一个单顺反子。
分子生物学期末考试考点详解
分子生物学期末考试重点第一讲绪论一、分子生物学的含义（概念）从广义上讲，即从分子水平阐明生命现象和生物学规律的学科。
如：蛋白质的结构、运动和功能，酶的作用机理和动力学，膜蛋白结构与功能及跨膜运输。
从狭义上讲，分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学，也涉及到与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。
二、发展简史2.1 里程碑事件（说明理由！！！）（1）50年代，Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型理由：为分子生物学的发展奠定了坚实的基础，获诺奖；（2）60年代，法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型理由：把基因细分，首次从基因水平解释自然现象，获诺奖历时最短；（3）70年代，Kornberg首先发现了DNA连接酶，并构建了世界上第一个重组DNA分子理由：推动了DNA重组技术（基因工程）的发展；（4）80年代，Mullis发明了聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术理由：极大地推动了分子生物学的发展；（5）90年代，开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序，进入“基因组时代”目前，分子生物学进入了“后基因组时代”或“蛋白质组时代”。
2.2 重要人物（客观题）（1）1944年，Avery在肺炎双球菌转化实验中证实了DNA是遗传的物质基础，标志着分子生物学的诞生；（2）1953年，Watson和Crick在Nature上提出了DNA双螺旋模型；（3）1961年，Kornberg，奠定基因工程的基础；（4）1983年，Mullis发明了PCR（聚合酶链式反应）技术；三、分子生物学与其他学科的关系（论述题）（1）总述：①分子生物学的发展依赖于数理化的发展，20世纪上半叶，数理学进一步渗入生物学，带来了新的理论和思想方法，而且引入了许多新的技术和实验手段，包括X射线衍射等，推动了生物大分子结构与功能的关系的研究，推动了分子生物学的发展；②其研究进展又与发育生物学、神经生物学、生态学、生理学、免疫学等学科的发展息息相关。
分子生态学期末考试试题
分子生态学期末考试试题回顾与展望：分子生态学期末考试试题一、选择题1. 下列哪个是分子生态学的基本假设？A) 多样性的概念B) 能量流动和物质循环C) 生物和环境之间的相互作用D) 生物和环境之间的相互作用的动态变化2. 分子生态学的主要研究内容是：A) 分析物种丰富度和多样性B) 研究生物多样性保护的方法C) 揭示生物之间的相互作用D) 探索生态系统中的能量转化过程3. 在生物分子生态学研究中，新兴的研究工具是：A) 传统统计学方法B) 分子生物学技术C) 实地观测和调查D) 生态模型构建和仿真4. 分子生态学的核心观点是：A) 生物群体的结构和功能取决于环境条件B) 生物群体的结构和功能是由遗传因素和环境因素共同决定C) 基因型和表型之间相互作用决定了生物的适应性D) 生物之间的相互作用决定了群体层级的结构和功能5. 生物间相互作用的类型包括：A) 竞争、捕食和共生关系B) 能量流动和物质循环C) 适应性和进化D) 遗传变异和表型可塑性二、简答题1. 解释分子生态学中的群落多样性指标，并选择一种常用的多样性指标进行计算，并解释结果的含义。
群落多样性指标是用来描述一个群落内物种丰富度和物种相对丰度的度量。
常用的多样性指标包括物种丰富度、基于丰富度的指数（如Shannon-Wiener指数）和基于丰富度和物种相对丰度的指数（如Simpson指数）等。
以Shannon-Wiener指数为例，计算公式为：H' = -Σ(Pi * ln(Pi))，其中Pi为第i个物种的相对丰度。
该指数反映了群落内物种丰富度和物种相对丰度的变化情况。
当H'值越大，表示物种丰富度和相对丰度更为均衡，群落的多样性越高。
相反，H'值越小，表示物种丰富度和相对丰度更为不均衡，群落的多样性越低。
2. 分子生态学研究中常用的技术手段有哪些？请简要介绍其中一种技术手段的原理及应用场景。
常用的技术手段包括DNA条形码技术、PCR技术、高通量测序技术和基于分子标记的群落分析技术等。
分子生物学考试重点考前必备
分子生物学第一章1分子生物学的定义：从分子水平上研究生命现象的物质基础的学科。
研究细胞的成分的物理，化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系，如遗传信息的传递，基因的结构，复制转录，翻译，表达调控和表达产物的生理功能，以及细胞信号的转导。
2分子生物学研究的三条原理：a构成生物体各类有机大分子的单体在不同的生物体中是相同的b生物体一切有机大分子的构成都遵循共同的规则c某一特定生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性。
3分子生物学研究的主要内容：a DNA重组技术；b基因表达调控的研究；c生物大分子的结构功能研究——结构分子生物学；d基因组，功能基因组与生物信息学研究；4 DNA的英文全称：Deoxyribonucleic acid RNA的英文全称：ribonucleic acid 5染色体的定义：由脱氧核糖核酸、蛋白质和少量核糖核酸组成的线状或棒状物，是生物主要遗传物质的载体6生物大分子无论是核酸，蛋白质或者多糖，在发挥生物学功能时的两个前提是：a 拥有特定的空间结构；b 在发挥生物学功能的工程中必定存在结构和构象的变化；第二章1 染色体的结构：染色体位于真核生物细胞核仁内，是遗传信息的载体，真核细胞染色体中，NDA, 和非组蛋白及部分RNA组成了染色体；2染色体的特征：a分子结构相对稳定；b能够自我复制，使亲代之间保持连续性；c能够指导蛋白质的合成，进而控制整个生命过程；d能够产生可遗传的变异；3蛋白质分为组蛋白和分组蛋白，组蛋白是染色体的结构蛋白，它与DNA组成核小体（H H2A H2B H3及H4）组蛋白包括RNA聚合酶；4组蛋白的特性：a 进化上极端保守；b无组织特异性；c肽链上氨基酸分布的不对称性；d 组蛋白的修饰作用；e 富含赖氨酸的组蛋白Ｈ５；５非组蛋白包括：高速泳动蛋白；ＤＮＡ结合蛋白；Ａ２４非组蛋白；收缩蛋白；骨架蛋白；核孔复合蛋白；肌动蛋白；肌球蛋白；微管蛋白；原肌蛋白；６真核细胞的ＤＮＡ序列分：ａ不重复序列；ｂ中度重复序列；ｃ高度重复序列；７ＤＮＡ的一级结构：所谓的DNA的一级结构，就是指4种核苷酸的链接及排列顺序，表示了该DNA分子的化学构成。
分子生物重点
第十章DNA的生物合成本章主要内容：1、中心法则：分子生物学的基本法则，是1958年由克里克(Crick)提出的遗传信息传递的规律，包括由DNA到DNA的复制、由DNA到RNA的转录和由RNA到蛋白质的翻译等过程。
20世纪70年代逆转录酶的发现，表明还有由RNA 逆转录形成DNA的机制，是对中心法则的补充和丰富。
2、半保留复制：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。
子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。
两个子细胞的DNA 都和亲代DNA碱基序列一致。
这种复制方式称为半保留复制。
3、半不连续复制：领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。
4、DNA聚合酶（重点）：依赖DNA的DNA聚合酶，简写为DNA-pol；①、5→'3'的聚合活性；②、核酸外切酶活性。
5、拓扑异构酶（难点）：既能水解、又能连接磷酸二酯键。
①、拓扑异构酶Ⅰ：切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA 变为松弛状态。
反应不需ATP。
②、拓扑异构酶Ⅱ：切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。
利用ATP供能，连接断端，DNA分子进入负超螺旋状态。
6、单链DNA结合蛋白（SSB）：在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。
7、DNA连接酶：连接DNA链3'-OH末端和相邻DNA链5'-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。
8、原核生物复制的过程：①、复制起始：DNA解链，形成引发体；②、复制的延长过程：领头链连续复制，随从链不连续复制；③、复制的终止：切除引物、填补空缺、连接切口；9、真核生物复制的特点：①、真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。
复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。
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分子生态学期末复习重点总结一、名词解释1.分子生态学：应用分子生物学的方法来解决生态学问题的学科。
2.中性进化：一个选择中性（即选择等价）的等位基因在不断的突变压力作用下，通过随机漂变的相互取代过程。
3.操纵子：编码功能上相关的蛋白质或酶的基因与一个共同的调控顺序相串联，形成基因表达和调控的功能单位。
4.负性调节：负调节蛋白（阻遏物）将基因关闭，使其不能转录的调节方式。
5.转座子：基因组中存在的能够自发地在基因组内移动，从染色体的一个区段转移到另一区段或从一条染色体转入另一条染色体的DNA片段。
6.基因突变：是指基因的核苷酸序列发生改变，造成基因表达产物的变化，从而引起表型的改变。
7.移码突变：某些化合物与DNA结合后，可使DNA分子插入或缺失一个或几个碱基对，使该碱基对以下的读码顺序发生移动，从而改变其遗传信息。
8.PCR技术：聚合酶链式反应，又称体外DNA扩增技术。
9.蛋白质组：是指由一个基因组，或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。
10.物种（BSC）：同种生物个体间相互进行杂交并可以产生可育的后代。
11.渐渗杂交：指两物种的杂交后代与亲本反复回交，把某一亲本的性状带至另一亲本。
12.隐存种：是指一组物种，他们符合生物学对物种的定义，也就是说彼此相互隔离，但是它们在形态学是非常相似的，甚至有些时候完全一致。
13.行为生态学：主要是研究生态学中的行为机制和动物行为的生态学意义和进化意义，即研究动物的行为功能、存活值、适合度和进化过程。
14.异双亲：（很多食肉动物、啮齿动物和大约300种鸟类中）参与抚育幼小动物的非双亲成年动物叫异双亲或帮手。
15.种群（population）：居住在某特定区域单个物种的一群个体。
16.基因频率（gene frequecy）：指基因组中某特定位点的等位基因数量占种群中该位点全部等位基因总数的比率，也就是该等位基因在种群中出现的概率。
17.基因型频率（genotype frequency）：指某基因位点特定基因型占种群中该位点全部基因型的比率，也就是该位点特定基因型在种群中出现的概率。
18.Hardy Weinberg定律：在一个随机交配的无限大种群中，如果没有选择、突变或迁移等因素的影响，那么基因频率和基因型频率将在世代间保持恒定。
一个种群符合这种状况，即达到了遗传平衡。
反之，如果没有达到这个状态，就是一个遗传不平衡的种群。
19.连锁不平衡（linkage disequilibrium,LD）：或称配子相不平衡（gametic phase disequilibrium），用来描述两个或两个以上位点间关联的一个概念。
20.遗传漂变：当一个种群中生物个体的数量较少时，下一代的个体容易因为有的个体没有产生后代，或是有的等位基因没有传给后代，而和上一代有不同的等位基因频率。
一个等位基因可能因此在这个种群中消失，这种现象就叫“遗传漂变”。
21.选择(selection): 指自然选择。
选择对遗传平衡的作用是增加或减少个体的适合度。
22.适合度(fitness, f): 指个体在一定环境条件下, 生存并传递其基因于下代的能力。
即: 生存和生育率联合效应的最后结果。
23.基因流：基因流实质上是在亚种群间基因通过生物个体或它们的配子体进行的迁移。
24.联种群：当种群再分成占据不同生境板块的亚种群（同类群），并且这些亚种群经受间歇性局部地区的消亡及从其他同类群再度移入重建时会产生联种群。
25.种群瓶颈：如果一个种群在某一时期由于环境灾难或过捕等原因数量急剧下降，就称其经历瓶颈。
26.奠基者效应：以一个或几个个体为基础就可能在空白生境中建立一个新种群。
27.生物修复：是指利用生物特别是微生物催化降解有机污染物，从而去除或者消除环境污染的一个受控制或自发进行的过程。
28.近交衰退：当近交导致适合度下降时，近交会对小种群的生存造成威胁，这种现象称为近交衰退。
29.远交衰退：是指，遗传上不相似的个体间交配，其后代的合适度值比每个亲本都要低的现象。
30.DNA-条形码：一种最近建立的分类学方法，致力于仅根据一组DNA条形码对物种进行鉴别，这种DNA条形码由一个或几个DNA序列组成。
31.显性：即基因位点上有利等位基因通常呈显性，而有害的等位基因则由于呈隐性而在种群中保存下来。
32.超显性：或杂合子优势，即在特定的基因位点上，杂合子比纯合子具有更高的适合度。
33.上位作用：是指多个位点基因的相互作用及其对特定性状的共同影响。
34.遗传多样性：指种内的遗传多样性，即种内个体之间有一个群体内不同个体的遗传变异总和。
二、简答、论述题1.真核生物与原核生物基因表达调控的特征（1）原核生物中是以操纵子为单位的点调控，而真核生物是多级调控（包括转录前调控、转录水平调控、转录后加工调控、转运调控、翻译水平调控以及蛋白质活性调控等）。
（2）原核生物中能够转录出多顺反子mRNA，在真核生物中一般转录单顺反子mRNA，并翻译一种多肽，即一个基因一个酶。
（3）原核生物边转录边翻译，真核生物不能，5’端加帽，3’端加尾。
（4）真核生物中有三种不同的核RNA聚合酶，分别参与不同类型的RNA分子合成：RNA聚合酶Ⅰ转录rRNA与细胞的大部分活动有关。
RNA聚合酶Ⅱ转录mRNA、结构基因，拥有最多的产物。
RNA聚合酶Ⅲ转录tRNA和其他的Small RNA，例5sRNA。
2.突变和进化的关系是什么基因突变是生物进化的根源，而突变修复又是保持物种稳定的关键，基因突变与突变修复，是生物的生命活动在分子水平的基本矛盾。
达尔文在18世纪就提出了生物对环境适应性的理论，即适者生存、不适者淘汰的进化规律。
基因的突变和修复就是生物进化的根本机制，也是进化所依的必然步骤。
3.DNA提取方法的类型及其原理(1)浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同，将二者分离。
核酸包括DNA、RNA两种分子，在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在，用DNP和RNP表示；DNP和RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响而不同。
DNP在低浓度盐溶液中，几乎不溶解，如在0.14 mol/L的氯化钠溶解度最低，仅为在水中溶解度的1%，随着盐浓度的增加溶解度也增加，至1mol/L氯化钠中的溶解度很大，比纯水高2倍。
RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响较小，在0.14mol/L氯化钠中溶解度较大。
因此，在提取时，常用此法分离这两种核蛋白。
（2）阴离子去污剂法用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA。
由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,而阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA。
（3）苯酚抽提法苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNA的降解作用。
用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 连接键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。
蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。
离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA的水相。
利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA。
此法的特点是使提取的DNA保持天然状态。
4.DNA操纵酶的种类及其特征（1）核酸酶：切开、切除或降解核酸分子的酶。
（2）连接酶：将核酸分子连接起来的酶。
（3）聚合酶：复制核酸分子的酶。
DNA聚合酶Ⅰ——双重活性，即具有DNA合成酶活性，也具有DNA水解酶活性。
Klenow片段——DNA聚合酶Ⅰ经过修饰后仍保持活性但不能使DNA水解。
Taq DNA聚合酶——热处理条件下不会发生变性。
逆转录酶——以RNA链为模版合成互补DNA链，在某些病毒中出现。
（4）修饰酶：去除或添加化学基因的酶。
5.基因克隆的基本流程目的DNA片段的获得载体的选择体外重组导入受体细胞重组子的筛选6.Ti质粒都有哪些基本组成成分（1）T-DNA区：转移DNA区。
（2）Vir区：激活T-DNA转移，表现出毒性。
（3）Con区：接合转移编码区，与细菌接合转移有关。
（4）Ori区：复制起始区。
7.转基因植株的检测方法都有哪些（1）报告基因的检测：抗性基因，编码催化人工产物产生颜色变化的酶基因。
（2）PCR检测转化植株。
（3）（不常用） a. DNA水平：点杂交和Southern杂交；b. 转录水平：Northern杂交；c. 蛋白质水平：Western杂交。
8.PCR技术分哪几个基本步骤（1）变性：加热使模板DNA双链间的氢键断裂而形成两条单链。
94℃ 30″（2）退火 (复性)：突然降温后模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合，也存在两条模板链之间的结合，但由于引物的高浓度，结构简单的特点，主要的结合发生在模板与引物之间。
55 ℃ 30 ″（3）延伸：将反应温度调节到酶的最适温度，在DNA聚合酶、4种 dNTPs 及镁离子等存在的条件下，以引物的 3′端开始，结合单核苷酸，形成与模板链互补的新DNA链。
72 ℃ 1′9.影响PCR反应的因素有哪些（1）温度、循环参数： a. 变性温度和时间; b. 复性温度和时间c. 延伸温度和时间;d. 循环数（2）MgCl2浓度：可显著影响PCR的产量及产物特异性（3）引物：提高扩增的效率和特异性10.蛋白质双向凝胶电泳技术的大致流程是什么样品分离、（第一向）等电聚焦、平衡、第二向分离、染色、成像、软件分析、蛋白质鉴定。
11.简述分子标记技术的发展进程随着分子生物学技术发展和研究水平的深入，分子标记的发展经历了三个阶段，也称为三代DNA分子标记。
第一代分子标记：RFLP、RAPD、AFLP、mtDNA分子标记。
第二代分子标记：微卫星（ms）（微卫星DNA）、ISSR。
第三代分子标记：SNP（单核苷酸多态性）、EST。
12.RFLP、AFLP技术的原理是什么（1）RFLP（限制性片段长度多态性）：特定生物类型的基因组DNA经限制性内切酶切后，产生分子量不同的同源等位片段，再通过电泳的方法分离和检测这些片段。
（2）AFLP（扩增片段长度多态性）：基因组DNA用两种限制性内切酶进行消化，连上相应的双链人工接头，根据接头的核苷酸序列和酶切位点设计引物，并在3’端添加1~2个随机碱基对酶切连接后的DNA进行选择性扩增。
此后再进行第二次PCR扩增，所用的引物是在第一次PCR中使用的选择性引物的3’端又附加了1~3个随机碱基。
扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶检测，银染显色。
13.SSR和SNP的原理和应用都有什么（1）SSR ：A.基本原理：微卫星DNA是一种广泛分布于真核生物基因组中的串状简单重复序列，不同数目的核心序列呈串联重复排列，而呈现出长度多态性。
在基因组中，因每个SSR序列的基本单元重复次数在不同基因型间差异很大，从而形成其座位的多态性。
而且每个SSR座位两侧一般是相对保守的单拷贝序列，据此可设计引物，其关键是首先要了解SSR座位的侧翼序列，寻找其中的特异保守区。