血型交叉配血 ppt课件
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血型ppt课件
血型鉴定和交叉配血试验
同济医院输血科 魏晴
血型基本知识
一、基本概念
血型： 血液遗传性状,多态性物质 血型系统：由数个相互关联的抗原抗体组
成
二、输血医学中最重要的血型系统
ABO血型系统 、 Rh血型系统
三、分子生物学基础
基因控制，基因的间接或直接产物
ABO血型系统
• 人类最早认识的血型系统 （1900年 Landsteiner 发现）
ABO、 Rh(D)血型鉴定
ABO血型鉴定 • 正反定型两者决定 • 正定型检测红细胞抗原 • 反定型检测血清中抗体 • 正反定型同时检测，才能正确判断ABO血
型 Rh(D)血型鉴定 • 正定型决定 • 正定型检测红细胞膜的D抗原
抗体筛选
• 目的：发现有临床意义的不规则抗体， 保障输血安全。
抗体筛选
• 输血医学中最重要血型系统
ABO血型系统
• 分类 分为A、B、O、AB四种血型 （1）红细胞上是否存在A、B抗原 （2）血清中是否存在抗A或抗B抗体 • 分布
红细胞、组织细胞、体液、分泌液
ABO血型系统分型
红细胞上存在的 血清中存在的 血型ຫໍສະໝຸດ 抗原抗体A抗原
抗B抗体
A
B抗原
抗A抗体
B
A、B抗原
无
AB
卫生部《临床输血技术规范》
筛选细胞
交叉配血
• 目的：检查受血者与供血者是否存在血型 抗原与抗体不合的情况
• 方法 主侧：受血者血清 + 供血者红细胞 次侧：受血者红细胞 + 供血者血清
ABO、Rh血型系统的临床意义
• 输血安全 • 新生儿溶血病 • 器官移植 • 其他
小结
• ABO血型分类 A型、 B型、 O型、AB型
同济医院输血科 魏晴
血型基本知识
一、基本概念
血型： 血液遗传性状,多态性物质 血型系统：由数个相互关联的抗原抗体组
成
二、输血医学中最重要的血型系统
ABO血型系统 、 Rh血型系统
三、分子生物学基础
基因控制，基因的间接或直接产物
ABO血型系统
• 人类最早认识的血型系统 （1900年 Landsteiner 发现）
ABO、 Rh(D)血型鉴定
ABO血型鉴定 • 正反定型两者决定 • 正定型检测红细胞抗原 • 反定型检测血清中抗体 • 正反定型同时检测，才能正确判断ABO血
型 Rh(D)血型鉴定 • 正定型决定 • 正定型检测红细胞膜的D抗原
抗体筛选
• 目的：发现有临床意义的不规则抗体， 保障输血安全。
抗体筛选
• 输血医学中最重要血型系统
ABO血型系统
• 分类 分为A、B、O、AB四种血型 （1）红细胞上是否存在A、B抗原 （2）血清中是否存在抗A或抗B抗体 • 分布
红细胞、组织细胞、体液、分泌液
ABO血型系统分型
红细胞上存在的 血清中存在的 血型ຫໍສະໝຸດ 抗原抗体A抗原
抗B抗体
A
B抗原
抗A抗体
B
A、B抗原
无
AB
卫生部《临床输血技术规范》
筛选细胞
交叉配血
• 目的：检查受血者与供血者是否存在血型 抗原与抗体不合的情况
• 方法 主侧：受血者血清 + 供血者红细胞 次侧：受血者红细胞 + 供血者血清
ABO、Rh血型系统的临床意义
• 输血安全 • 新生儿溶血病 • 器官移植 • 其他
小结
• ABO血型分类 A型、 B型、 O型、AB型
血型鉴定及交叉配血 ppt课件
1min
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
血型和输血原则PPT课件
输血 鉴定血型 血型相符 交叉配血
红细胞 供 血 者
红细胞 受 血 者
血清
血清
主侧 不凝
不凝
凝集
.
次侧 不凝 凝集 不凝
结果 可以输血
可少量缓慢输血
不可以输血
19
供血者RBC不被受血者血浆20所凝集为原则
① 主侧与次侧都无 凝集，为配血相合， 可输血。
② 主侧不凝集，而 次侧有凝集，只能 紧急情况下输血， 若发生输血反应， 立刻停止。
判断亲子关系时，只能作出否 定的判断，而不能作出肯定的 判断。
.
10
5、ABO血型的鉴定
11
.
11
(二)Rh血型系统 1、Rh血型系统的发现和分布
Rhesus Monkey RBC
抗Rhesus Monkey 红细胞抗体
抗体血清+人红细胞
凝集—Rh阳性
不凝集 — Rh阴性
分型：国人多数为Rh阳性血型；少数人为Rh阴性血型。
抗A + 抗B
2、ABO血型系统的抗原 3、ABO血型系统的抗体
A抗原，B抗原，H抗原 天然抗体 IgM 免疫性抗体 IgG
.
9
4、ABO血型的遗传 由染色体9q130 4.1-q34.2上的A、B、
O三个等位基因控制
基因型 OO
AA、AO BB、BO
AB
表现型 O A B AB
注意：法医学上根据血型来
② 抗体 IgG类，可通过胎盘
③国人多数为Rh阳性血型；少数人为Rh阴性血型。
Rh阳性(Rh +) Rh阴性(Rh －)
红细胞膜 D抗原
无D抗原
血浆 无抗体 无抗体
.
14
3、Rh血型的特点及其临床意义 15 ① 特点 Ⅰ. 无天然抗D抗体； Ⅱ. 抗D抗体为不完全抗体IgG，可通过 胎盘。
红细胞 供 血 者
红细胞 受 血 者
血清
血清
主侧 不凝
不凝
凝集
.
次侧 不凝 凝集 不凝
结果 可以输血
可少量缓慢输血
不可以输血
19
供血者RBC不被受血者血浆20所凝集为原则
① 主侧与次侧都无 凝集，为配血相合， 可输血。
② 主侧不凝集，而 次侧有凝集，只能 紧急情况下输血， 若发生输血反应， 立刻停止。
判断亲子关系时，只能作出否 定的判断，而不能作出肯定的 判断。
.
10
5、ABO血型的鉴定
11
.
11
(二)Rh血型系统 1、Rh血型系统的发现和分布
Rhesus Monkey RBC
抗Rhesus Monkey 红细胞抗体
抗体血清+人红细胞
凝集—Rh阳性
不凝集 — Rh阴性
分型：国人多数为Rh阳性血型；少数人为Rh阴性血型。
抗A + 抗B
2、ABO血型系统的抗原 3、ABO血型系统的抗体
A抗原，B抗原，H抗原 天然抗体 IgM 免疫性抗体 IgG
.
9
4、ABO血型的遗传 由染色体9q130 4.1-q34.2上的A、B、
O三个等位基因控制
基因型 OO
AA、AO BB、BO
AB
表现型 O A B AB
注意：法医学上根据血型来
② 抗体 IgG类，可通过胎盘
③国人多数为Rh阳性血型；少数人为Rh阴性血型。
Rh阳性(Rh +) Rh阴性(Rh －)
红细胞膜 D抗原
无D抗原
血浆 无抗体 无抗体
.
14
3、Rh血型的特点及其临床意义 15 ① 特点 Ⅰ. 无天然抗D抗体； Ⅱ. 抗D抗体为不完全抗体IgG，可通过 胎盘。
《血型与输血》PPT课件
《血型与输血》PPT课件
目录
• 血型概述 • 输血原则与策略 • 血型鉴定与交叉配血 • 临床输血反应与处理 • 特殊情况下输血策略调整 • 总结与展望
01
血型概述
血型定义及分类
血型定义
指血液成分（包括红细胞、白细胞、 血小板）表面的抗原类型。
血型分类
根据红细胞表面的抗原差异，主要 分为ABO血型和Rh血型两大系统， 以及其他罕见血型。
发热反应原因分析及处理措施
01
处理措施
02
03
04
减慢输血速度或停止输血，给 予抗过敏药物和物理降温。
查明原因，对症处理，如抗感 染治疗等。
预防措施包括严格无菌操作、 使用一次性输血器具等。
过敏反应表现及应对措施
轻度反应
皮肤瘙痒、红斑、荨麻疹等。
中度反应
血管神经性水肿、呼吸困难等。
过敏反应表现及应对措施
血液保存不当
如血液过期或保存温度过高，导致红 细胞破坏。
溶血反应机制及紧急处理
• 免疫性溶血：多次输血或妊娠导致红细胞抗体形成，引发 免疫反应。
溶血反应机制及紧急处理
紧急处理 立即停止输血，保留静脉通道。
给予抗休克治疗，如补充血容量、使用升压药物等。
溶血反应机制及紧急处理
保护肾功能，碱化尿液，促进血红蛋 白排出。
提倡自体输血，减少 异体输血带来的风险。
选择合适的血液成分， 减少输血反应。
自体输血技术应用
术前自体储血
适用于择期手术患者，在术前采 集自身血液保存，以备术中或术
后使用。
急性等容血液稀释
在麻醉后、手术主要出血步骤开始 前，抽取患者一定量自身血在室温 下保存备用，同时输入胶体液或等 渗晶体液补充血容量。
目录
• 血型概述 • 输血原则与策略 • 血型鉴定与交叉配血 • 临床输血反应与处理 • 特殊情况下输血策略调整 • 总结与展望
01
血型概述
血型定义及分类
血型定义
指血液成分（包括红细胞、白细胞、 血小板）表面的抗原类型。
血型分类
根据红细胞表面的抗原差异，主要 分为ABO血型和Rh血型两大系统， 以及其他罕见血型。
发热反应原因分析及处理措施
01
处理措施
02
03
04
减慢输血速度或停止输血，给 予抗过敏药物和物理降温。
查明原因，对症处理，如抗感 染治疗等。
预防措施包括严格无菌操作、 使用一次性输血器具等。
过敏反应表现及应对措施
轻度反应
皮肤瘙痒、红斑、荨麻疹等。
中度反应
血管神经性水肿、呼吸困难等。
过敏反应表现及应对措施
血液保存不当
如血液过期或保存温度过高，导致红 细胞破坏。
溶血反应机制及紧急处理
• 免疫性溶血：多次输血或妊娠导致红细胞抗体形成，引发 免疫反应。
溶血反应机制及紧急处理
紧急处理 立即停止输血，保留静脉通道。
给予抗休克治疗，如补充血容量、使用升压药物等。
溶血反应机制及紧急处理
保护肾功能，碱化尿液，促进血红蛋 白排出。
提倡自体输血，减少 异体输血带来的风险。
选择合适的血液成分， 减少输血反应。
自体输血技术应用
术前自体储血
适用于择期手术患者，在术前采 集自身血液保存，以备术中或术
后使用。
急性等容血液稀释
在麻醉后、手术主要出血步骤开始 前，抽取患者一定量自身血在室温 下保存备用，同时输入胶体液或等 渗晶体液补充血容量。
实验三血型鉴定(交叉配血)
交叉配血
盐水介质法
原理及目的
交叉配血试验是指受血者血清加供血者红细胞悬液;供血 者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。前者称 主试验，后者称副试验。其目的是验证供者与受者ABO血 型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。此外，也可 检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外 的其他血型抗体。
3.分别混匀，低速离心约2 分钟，轻轻摇匀，观察结果。 4.结果判定： 同型配血，主测、次测均不凝集，表示无配血禁忌，可以
输血； 异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给 少量。输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新 复查血型或追查其原因。
患 者
献 血 者
交叉配血试验
主侧配血用患者血清与供试剂和器材生理盐水 小试管、尖嘴滴管、离心机、试管架、显微镜等
操作步骤
1.取受血者和供血者血液各2ml，注入一清洁干燥试管内， 按常规方法分离血清。同时留数滴滴加于含少量生理盐水 的小试管内，制成5％的红细胞生理盐水悬液。注意要分 别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管 的姓名。 2.另取清洁试管2支，标明主测和次测。主测：受血者血清 1 滴加供血者红细胞悬液1滴。次测：供血者血清1滴加受 血者红细胞悬液1滴。
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶血
凝
现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有 凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血试验结果图例
无溶血 无凝集
盐水介质法
原理及目的
交叉配血试验是指受血者血清加供血者红细胞悬液;供血 者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。前者称 主试验，后者称副试验。其目的是验证供者与受者ABO血 型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。此外，也可 检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外 的其他血型抗体。
3.分别混匀，低速离心约2 分钟，轻轻摇匀，观察结果。 4.结果判定： 同型配血，主测、次测均不凝集，表示无配血禁忌，可以
输血； 异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给 少量。输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新 复查血型或追查其原因。
患 者
献 血 者
交叉配血试验
主侧配血用患者血清与供试剂和器材生理盐水 小试管、尖嘴滴管、离心机、试管架、显微镜等
操作步骤
1.取受血者和供血者血液各2ml，注入一清洁干燥试管内， 按常规方法分离血清。同时留数滴滴加于含少量生理盐水 的小试管内，制成5％的红细胞生理盐水悬液。注意要分 别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管 的姓名。 2.另取清洁试管2支，标明主测和次测。主测：受血者血清 1 滴加供血者红细胞悬液1滴。次测：供血者血清1滴加受 血者红细胞悬液1滴。
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶血
凝
现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有 凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血试验结果图例
无溶血 无凝集
交叉配血试验.ppt
谢谢交叉配血试验.ppt
演讲人
交叉配血实验主要是用于供血前确认供者血型与受者血型是不是配合，尽量的避免 输血反应。输血前必须进行两项输血实验，血型鉴定和交叉匹配。
理论上一旦已知受血者血型便可输注配合的血液，是在实践中供者血和受者血可以 仍然有不相容的情况，主要是因为供血可能包含其他非常规血型抗原，而受血者血 清中如存在针对这些抗原的抗体就可能会造成输血反应，所以交叉配血是非常重要 的。
交叉配血实验是观察主副实验是不是发生凝集决定临床输血的可行性，血型完全配 合，输血是最安全的。血型部分配合，尽在应急的时候少量输血并需要严密观察是 不是有输血反应，血型完全不配合是绝对不要输血的。
总之血型完全配合或者是部分配合是可以输血的指征，血型完全不配合也就是主实验和 副实验均凝集是严禁输血的。
演讲人
交叉配血实验主要是用于供血前确认供者血型与受者血型是不是配合，尽量的避免 输血反应。输血前必须进行两项输血实验，血型鉴定和交叉匹配。
理论上一旦已知受血者血型便可输注配合的血液，是在实践中供者血和受者血可以 仍然有不相容的情况，主要是因为供血可能包含其他非常规血型抗原，而受血者血 清中如存在针对这些抗原的抗体就可能会造成输血反应，所以交叉配血是非常重要 的。
交叉配血实验是观察主副实验是不是发生凝集决定临床输血的可行性，血型完全配 合，输血是最安全的。血型部分配合，尽在应急的时候少量输血并需要严密观察是 不是有输血反应，血型完全不配合是绝对不要输血的。
总之血型完全配合或者是部分配合是可以输血的指征，血型完全不配合也就是主实验和 副实验均凝集是严禁输血的。
血型鉴定和交叉配血专题培训课件
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
血型鉴定和交叉配血
实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
血型鉴定和交叉配血
实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
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定 交叉配血方法 日常工作中问题对策
Rh血型系统
Du比正常D阳性细胞抗原弱，但一旦输给 Rh阴性的受血者后，自然有免疫产生抗D的 可能。同时Du型人者接受Rh阳性的细胞后， 也有可能产生抗D抗体。
作为供血者，Du型归类为Rh阳性， 作为受血者Du型归类为Rh阴性者。
PEG-IAT
原理：PEG（聚乙二醇）是一种水溶性的中性
多聚体，当含有抗原与相应抗体的溶液中加入 PEG时，由于空间排斥效应作用，使溶液中的 抗体饱和度提高，加速溶液中的抗原-抗体复合 物的形成。
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加4滴
PEG溶液后混匀，37℃孵育15分钟，生理盐水 洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋 白试剂，离心后判读结果。
红细胞抗体(1)
预期抗体：若已知红细胞ABO血型，按 Landsteiner´s法则可预知的ABO血型 抗体，即抗-A和抗-B。 预期抗体也叫做规则抗体
意外抗体：抗-A或抗-B以外的抗体。在ABO亚 型 中，变异的抗-A1或某种抗-B等抗体， 也称为意外抗体。 意外抗体过去也叫做不规则抗体
红细胞抗体(2)
间接抗人球蛋白试验(IAT) 在体外抗体致敏红细胞,用于抗体筛选和鉴定、交 叉配血、血型鉴定
酶试验
原理：蛋白水解酶可将红细胞表面的多肽链打断，使多
肽链带负电荷的唾液酸也一起离开红细胞表面，减少了 红细胞之间的排斥力，缩短了红细胞之间的距离，容易 产生凝集反应
程序：2滴血清、1滴2-5%红细胞，加入2滴酶，37℃
孵育15分钟，离心看结果。
注：酶会破坏一些抗原结构，如M、N、Fya、Fyb 等
影响输血效果的免疫血清学问题
速发型输血后溶血反应 血管内溶血
＞ 主要原因: ABO血型不和
迟发型输血后溶血反应 血管外溶血 主要原因: 针对红细胞抗原的同种抗体
聚凝胺试验
原理：聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，
溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表 面的负电荷，使红细胞之间距离减小，能引起 正常红细胞可逆性的非特异性凝聚。如果是抗 体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集不可逆； 无抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集解 散。
程序：按试剂盒说明书操作。
免疫血液学的传统方法
凝集实验和溶血实验 玻片法/试管法/微孔板法 抗人球实验
在抗原抗体反应中的去离子和低离子
盐水凝集法： 例如，ABO血型鉴定试验
包括玻片法、试管 法和微孔法
但灵敏度相对较低，只在 一些基层医院血库使用 低离子强度盐水法：
通过降低介质溶液离子 强度，减少红细胞膜外围的 离子云，促进红细胞凝集， 因而其灵敏度有所提高。
聚凝胺凝集法： 通过多聚季氨盐溶液提供大量正电荷来中和
红细胞表面负电荷，减少红细胞间的排斥，促 进红细胞凝集，其灵敏度有较大提高。此方 法目前在国内使用较多。（Rh,Duffy）
抗人球试验 - 检测 IgG
抗人球试验： 在盐水凝集法或低离子
强度盐水法的基础上，加 入抗人球蛋白抗体，通过 抗人球蛋白抗体的特异性 桥连作用，促进红细胞的 凝集。可分为直接和间接 抗人球试验。 K, k, Fya,
天然抗体：没有可察觉的抗原刺激，而机体对抗原免
疫应答的产物。天然抗体多为IgM抗体，能与含有相应 抗原的红细胞结合，在盐水介质中出现肉眼可见的凝集 反应，所以也叫盐水抗体。IgM抗体的最适反应温度为 0-25℃。
免疫抗体：抗原刺激机体而产生的。免疫抗体多为
IgG抗体，在盐水介质中只能致敏含有相应抗原的红细 胞，但不产生凝集，需要采用抗球蛋白搭桥、酶处理细 胞或聚凝胺介导等方法，才能产生凝集反应。IgG抗体 的最适反应温度为37℃。
LISS-IAT
原理：通过降低红细胞周围的离子氛，使抗体易于接
近抗原，促进抗体在更短的时间内致敏红细胞，再使用 抗人球蛋白试剂，使被致敏的红细胞产生凝集
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加2-4滴LISS液
后混匀，37℃孵育15分钟，离心观察细胞的凝集情况， 用生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球 蛋白试剂，离心后判读结果。
４＋ ３＋
反应强度
4+ 3+ 2+ 1+
±
— 完全溶血 不完全溶血 混合凝集
２＋ ＋
±－Ｈ
完全
现象及说明
ＨＭ
不完全 混合凝集
红细胞复合物（凝集）位于凝胶表面 大部分红细胞复合物位于凝胶表面，少部分位于凝胶中部 大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部 红细胞复合物位于凝胶中下部
与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为±
Fyb, JKa, JKb, Kpa, Kpb, S, s, Lua, Lub
间接抗人球蛋白试验(IAT)
经典IAT LISS-IAT:试管法 卡 PEG-IAT 酶－IAT 聚凝胺－IAT
经典IAT
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，
37℃孵育45-60分钟，生理盐水洗涤3 遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋 白试剂，离心后判读结果。用抗体致敏 的红细胞检测试验结果的正确性。
红细胞完全沉积在凝胶管尖底部 凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色 残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色 红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
抗人球蛋白试验(Coombs试验)
直接抗人球蛋白试验(DAT) 检测红细胞是否在体内被抗体或补体致敏,用于检 测自身免疫溶血性贫血、药物引起的溶血、新 生儿溶血病、溶血性输血反应
微柱凝胶技术(卡)
原理：微管内有凝胶颗粒和试剂。凝胶
颗粒具有分子筛作用，离心后，不凝集的 红细胞通过全程进入微管底部，而凝集的 红细胞则悬浮停留在颗粒中。
程序：按厂家说明操作
反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝 试验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）在微柱凝胶 管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下， 该凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的 红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。
Rh血型系统
Du比正常D阳性细胞抗原弱，但一旦输给 Rh阴性的受血者后，自然有免疫产生抗D的 可能。同时Du型人者接受Rh阳性的细胞后， 也有可能产生抗D抗体。
作为供血者，Du型归类为Rh阳性， 作为受血者Du型归类为Rh阴性者。
PEG-IAT
原理：PEG（聚乙二醇）是一种水溶性的中性
多聚体，当含有抗原与相应抗体的溶液中加入 PEG时，由于空间排斥效应作用，使溶液中的 抗体饱和度提高，加速溶液中的抗原-抗体复合 物的形成。
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加4滴
PEG溶液后混匀，37℃孵育15分钟，生理盐水 洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋 白试剂，离心后判读结果。
红细胞抗体(1)
预期抗体：若已知红细胞ABO血型，按 Landsteiner´s法则可预知的ABO血型 抗体，即抗-A和抗-B。 预期抗体也叫做规则抗体
意外抗体：抗-A或抗-B以外的抗体。在ABO亚 型 中，变异的抗-A1或某种抗-B等抗体， 也称为意外抗体。 意外抗体过去也叫做不规则抗体
红细胞抗体(2)
间接抗人球蛋白试验(IAT) 在体外抗体致敏红细胞,用于抗体筛选和鉴定、交 叉配血、血型鉴定
酶试验
原理：蛋白水解酶可将红细胞表面的多肽链打断，使多
肽链带负电荷的唾液酸也一起离开红细胞表面，减少了 红细胞之间的排斥力，缩短了红细胞之间的距离，容易 产生凝集反应
程序：2滴血清、1滴2-5%红细胞，加入2滴酶，37℃
孵育15分钟，离心看结果。
注：酶会破坏一些抗原结构，如M、N、Fya、Fyb 等
影响输血效果的免疫血清学问题
速发型输血后溶血反应 血管内溶血
＞ 主要原因: ABO血型不和
迟发型输血后溶血反应 血管外溶血 主要原因: 针对红细胞抗原的同种抗体
聚凝胺试验
原理：聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，
溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表 面的负电荷，使红细胞之间距离减小，能引起 正常红细胞可逆性的非特异性凝聚。如果是抗 体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集不可逆； 无抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集解 散。
程序：按试剂盒说明书操作。
免疫血液学的传统方法
凝集实验和溶血实验 玻片法/试管法/微孔板法 抗人球实验
在抗原抗体反应中的去离子和低离子
盐水凝集法： 例如，ABO血型鉴定试验
包括玻片法、试管 法和微孔法
但灵敏度相对较低，只在 一些基层医院血库使用 低离子强度盐水法：
通过降低介质溶液离子 强度，减少红细胞膜外围的 离子云，促进红细胞凝集， 因而其灵敏度有所提高。
聚凝胺凝集法： 通过多聚季氨盐溶液提供大量正电荷来中和
红细胞表面负电荷，减少红细胞间的排斥，促 进红细胞凝集，其灵敏度有较大提高。此方 法目前在国内使用较多。（Rh,Duffy）
抗人球试验 - 检测 IgG
抗人球试验： 在盐水凝集法或低离子
强度盐水法的基础上，加 入抗人球蛋白抗体，通过 抗人球蛋白抗体的特异性 桥连作用，促进红细胞的 凝集。可分为直接和间接 抗人球试验。 K, k, Fya,
天然抗体：没有可察觉的抗原刺激，而机体对抗原免
疫应答的产物。天然抗体多为IgM抗体，能与含有相应 抗原的红细胞结合，在盐水介质中出现肉眼可见的凝集 反应，所以也叫盐水抗体。IgM抗体的最适反应温度为 0-25℃。
免疫抗体：抗原刺激机体而产生的。免疫抗体多为
IgG抗体，在盐水介质中只能致敏含有相应抗原的红细 胞，但不产生凝集，需要采用抗球蛋白搭桥、酶处理细 胞或聚凝胺介导等方法，才能产生凝集反应。IgG抗体 的最适反应温度为37℃。
LISS-IAT
原理：通过降低红细胞周围的离子氛，使抗体易于接
近抗原，促进抗体在更短的时间内致敏红细胞，再使用 抗人球蛋白试剂，使被致敏的红细胞产生凝集
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加2-4滴LISS液
后混匀，37℃孵育15分钟，离心观察细胞的凝集情况， 用生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球 蛋白试剂，离心后判读结果。
４＋ ３＋
反应强度
4+ 3+ 2+ 1+
±
— 完全溶血 不完全溶血 混合凝集
２＋ ＋
±－Ｈ
完全
现象及说明
ＨＭ
不完全 混合凝集
红细胞复合物（凝集）位于凝胶表面 大部分红细胞复合物位于凝胶表面，少部分位于凝胶中部 大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部 红细胞复合物位于凝胶中下部
与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为±
Fyb, JKa, JKb, Kpa, Kpb, S, s, Lua, Lub
间接抗人球蛋白试验(IAT)
经典IAT LISS-IAT:试管法 卡 PEG-IAT 酶－IAT 聚凝胺－IAT
经典IAT
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，
37℃孵育45-60分钟，生理盐水洗涤3 遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋 白试剂，离心后判读结果。用抗体致敏 的红细胞检测试验结果的正确性。
红细胞完全沉积在凝胶管尖底部 凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色 残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色 红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
抗人球蛋白试验(Coombs试验)
直接抗人球蛋白试验(DAT) 检测红细胞是否在体内被抗体或补体致敏,用于检 测自身免疫溶血性贫血、药物引起的溶血、新 生儿溶血病、溶血性输血反应
微柱凝胶技术(卡)
原理：微管内有凝胶颗粒和试剂。凝胶
颗粒具有分子筛作用，离心后，不凝集的 红细胞通过全程进入微管底部，而凝集的 红细胞则悬浮停留在颗粒中。
程序：按厂家说明操作
反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝 试验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）在微柱凝胶 管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下， 该凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的 红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。