PCR实验室新冠核酸检测结果判读及上报流程
核酸实验室操作步骤流程
核酸实验室操作步骤流程
核酸实验室是进行核酸提取、扩增和检测的重要场所，其操作
步骤流程严谨而复杂。
下面将详细介绍核酸实验室的操作步骤流程。
首先，进行核酸提取。
提取核酸是核酸实验室的第一步，通常
使用化学方法或者机械方法进行。
在进行核酸提取时，需要注意保
持实验室的清洁和无菌环境，避免外源DNA的污染。
提取核酸的样
本可以是血液、组织、唾液等。
接着，进行核酸扩增。
核酸扩增是为了增加核酸的数量，以便
进行后续的检测和分析。
常用的核酸扩增方法有PCR、RT-PCR等。
在进行核酸扩增时，需要准备好扩增试剂盒、引物、模板DNA等材料，并按照扩增方案进行操作。
然后，进行核酸检测。
核酸检测是为了确定核酸的序列和浓度，通常使用凝胶电泳、实时荧光PCR等方法进行。
在进行核酸检测时，需要注意实验条件的控制和结果的准确性，避免假阳性或假阴性结
果的出现。
最后，进行数据分析和结果解读。
在核酸实验室中，数据分析
和结果解读是至关重要的环节，需要对实验结果进行统计分析和生
物信息学分析，以确定实验的可靠性和结果的可信度。
同时，还需
要根据实验结果进行结果解读，判断实验是否成功并得出相应的结
论。
总的来说，核酸实验室的操作步骤流程包括核酸提取、核酸扩增、核酸检测、数据分析和结果解读等环节，每个环节都需要严格按照操作规程进行操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。
核酸实验室的操作步骤流程复杂而繁琐，需要实验人员具备扎实的实验技能和严谨的实验态度，以保证实验的成功进行和结果的可靠性。
PCR室检测结果分析的标准操作程序
PCR室检测结果分析的标准操作程序1.目的保证扩增及结果分析的标准化、规范化；保证实验结果的有效性，准确判断实验失控的原因，加强实验的可靠程度。
2.适用范围本规则适用于实验结果判定标准3.制定依据《临床基因扩增检验技术》申子瑜李金明主编人民卫生出版社出版2002年第一版；试剂使用说明书4.职责由经培训合格的临床基因扩增实验室技术人员负责操作。
5.结果分析标准程序5.1对于结果曲线的分析，应按以下步骤进行：全部曲线——阴性对照——阳性室内质控品——阳性标准品——逐个分析（标出阳性标本和可疑标本）——调整参数，获得较好的标准曲线，显示定量结果——登记，发报告。
5.2整体曲线的观察将所有曲线选中进行整体观察①观察是否存在污染情况（包括标本污染和试剂污染），特别应注意大量曲线在同一Ct值出现上涨的情况。
②观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成的异常曲线。
5.3空白对照的分析空白对照：仅含扩增反应混合液的管作用：监测扩增试剂是否发生污染5.4阴性对照的分析阴性对照：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阴性标本。
作用：用以监测实验室和前处理过程中是否存在污染。
5.5阳性对照的分析阳性对照：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阳性标本。
作用：用以监测实验能否正常检出阳性标本，避免假阴性的出现。
5.6阳性室内质控品的分析阳性室内质控品：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知浓度的阳性室内质控血清。
作用：用以监控日常实验的精密度。
5.7阳性标准品的分析5.7.1各梯度曲线的分布是否均匀，若各梯度曲线均未分开，则表明阳模稀释可能存在问题，提示实验中存在较大人为误差。
5.7.2观察各曲线的Ct值是否在平常的正常位置。
有两种情况：①若出现低拷贝标准品做不出，而各曲线Ct 值均后移，则判断是否为试剂扩增效率下降（如试剂过期或保存条件不合格）。
②出现低拷贝标准品做不出，而高拷贝曲线Ct值均正常，则提示可能存在低拷贝阳性标准品的降解情况。
新冠核酸检测标本采集、送检、处理流程(核酸检测)
新冠核酸检测标本采集、送检、处理流程
(核酸检测)
新冠病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程
对于疑似或确诊新冠病毒感染患者，需要进行核酸检测。
下面是标本采集、送检、处理的流程。
1.医生开具医嘱，通知检验科负责人___。
检验科领取专
用采集管和转运箱。
2.采集标本时，采集者需要穿戴三级生物安全防护装备。
上呼吸道标本采集咽拭子和鼻拭子各一根，放入同一根核酸标本管中。
下呼吸道标本采集深咳痰液、呼吸道吸取物或支气管/肺泡灌洗，将标本放入内层小密封袋内，密封后用75%酒精
消毒外侧，再放入外层大密封袋内，同样用75%酒精消毒外
侧（双层密封袋开口均向上）。
标本垂直放置于专用转运箱内。
3.标本转运时，由专人进行核对、交接、登记，并单独转运至检验科双开门通道，交给PCR实验室人员。
4.PCR实验室人员确认转运箱后，在生物安全柜内打开转运箱（开箱瞬间喷洒75%酒精），取出标本并在56℃下灭活30分钟。
采样管降至常温后，在生物安全柜内打开并使用后的标本密封袋封口后，放入双层黄色垃圾袋内（袋内含有效氯含量1000mg/L的消毒剂）。
5.操作完成后，对生物安全柜进行75%酒精喷洒消毒，并开启紫外灯照射30分钟。
所有实验完成后，向科主任报告检测结果，科主任报告医院领导及医务部门。
消毒后的标本转运箱交给专人处理。
核酸检测阳性处置流程
核酸检测阳性处置流程.doc新冠肺炎核酸检测疑似阳性处置流程为了加强医疗安全，根据《国卫办疾控函[2020]152号肺炎实验室检测技术指南》的要求，处置发现疑似阳性结果、可疑结果，结合我院情况制定：一、疑似阳性结果、可疑结果结果判断（依据试剂盒说明书判断）与上报。
1、同一份标本中至少ORFlab靶标加N或E中的任一靶标实时荧光RT-PCR检测结果均为检出。
用同一种试剂与另一种试剂进行复检,若结果仍为检出,则向临床反馈疑似阳性结果,并立即上报院部疫情指挥中心。
2、如仅有一个靶标阳性或检测结果落在灰区的标本需复测或另一种试剂再测,仍然可疑向临床反馈可疑结果,并立即上报院部疫情指挥中心。
二、疑似阳性结果、可疑结果的复检1、疑似阳性结果、可疑结果均需要重新采样（包括不同部位及样本类型）检测,为提高阳性检出率,重新采样可对同一个病人多采集多个部位,每个部位多采几根采样拭子放于同一管采样液中,提高检出率。
含3毫升采样液的采样管最多可放五根采样拭子。
2、疑似阳性结果重新采样标本与原标本均应送月亮县CDC复检,复检阳性的送太阳市CDC复检。
3、可疑结果如果复检阴性,按阴性报告;复检仍为可疑或为疑似阳性结果则按程序重新采样标本与原标本送月亮县CDC复检,复检阳性的送太阳市CDC复检。
4、疑似阳性结果、可疑结果病人均应按阳性病人隔离管控,直致上级部门复检结果反馈阴性方可解除隔离管控。
上级部门复检为疑似阳性结果、可疑结果则病人按阳性病人标准转移至上级指定新冠救治医院。
三。
可疑阳性样本和可疑样本的保存1.使用的设备：生物安全柜、移液管、带螺帽的塑料管、可密封的标本储存罐和转移箱。
注意：疑似阳性样本和可疑样本使用专用标本保存罐。
2.风险点的识别：如果阳性和可疑样本保存不当，容易造成人体或环境污染。
3.风险控制措施：按照三级生物安全防护要求做好个人防护；将样品保存在生物安全柜中，动作要轻柔；咽拭子检测后，放入a类标本储罐，两人两锁管理，送至月亮县疾控中心和太阳市疾控中心。
核酸检验操作规程
核酸检验操作规程核酸检验是一种常见的分子生物学技术，用于检测细胞或体液中的特定基因序列。
在实验室中进行核酸检验时，需要遵守一系列操作规程来确保实验的准确性和安全性。
以下是一个大致的核酸检验操作规程，供参考。
1. 实验室准备- 准备必要的实验器材，如离心机、PCR仪、电泳仪等。
- 检查实验室设备的工作状态和安全性，确保设备正常运转，并符合相关安全标准。
- 准备所需试剂和材料的清单，确保一切准备就绪。
2. 样本处理- 根据实验目的选择相应的样本类型，如血液、组织或细胞。
- 确保样本采集的操作无菌，并在采集后及时储存或运送样本到实验室。
- 样本到达实验室后，及时登记记录样本信息，包括样本编号、来源、保存条件等。
3. 样本提取- 根据不同样本类型选择相应的提取方法，如血液基因提取试剂盒、组织DNA提取试剂盒等。
- 严格按照提取试剂盒的使用说明进行操作，确保样本的完整性和提取效果。
- 在提取过程中，注意避免污染，使用一次性试剂和消毒工具，避免交叉污染。
4. PCR扩增- 根据实验要求设计或选择适当的引物，确保扩增目标序列的特异性和灵敏度。
- 准备PCR反应液，按照所用试剂盒的使用说明进行操作，确保试剂能够充分反应。
- 设置PCR仪的反应程序和温度条件，包括预变性、循环数和延伸温度等。
- 将样本DNA加入PCR反应管中，注意避免交叉感染，使用无菌操作和正常的实验室防护措施。
5. PCR产物分析- 完成PCR扩增后，将反应产物进行凝胶电泳或其他分析技术的分析。
- 按照分析的需要，准备相应的试剂和试剂盒，如凝胶电泳试剂盒、DNA分子量标记等。
- 按照试剂盒的使用说明，进行凝胶电泳分析，记录并分析结果，评估实验的准确性和可重复性。
6. 结果解读- 考虑实验的条件和方法的特异性，对实验结果进行解读和判断。
- 将实验结果与对照组、负对照和阳性对照进行比较，确保结果的可靠性和准确性。
- 结合临床病史和其他检测结果，给出综合的结果解释和诊断建议。
核酸检测检验科处理流程(一)
核酸检测检验科处理流程(一)
核酸检测检验科处理流程
检测前准备工作
•检验科技师确认样本的完整性和标签的准确性。
•将样本信息录入检测平台，包括样本编号、患者信息等。
•准备必要的实验室试剂和设备，确保其完好无损。
样本处理
•收到样本后，首先进行样本接收和登记工作，确保所有样本的来源可追溯。
•检验科技师根据标签上的样本编号，将样本放置于相应的试管或试板中。
•液态样本需要经过离心分离得到纯化的核酸提取物。
•采用自动核酸提取设备，根据样本数量选择合适的提取方案，进行核酸提取。
•核酸提取完毕后，将提取得到的核酸溶液进行储存或直接进行下一步的检测。
核酸检测
•核酸提取完毕后，进行感染病原核酸的PCR扩增。
•准备PCR试剂和样本，设置PCR扩增反应体系，包括引物、模板核酸和酶等。
•使用PCR仪进行扩增反应，设置合适的温度和时间参数。
•扩增反应结束后，将反应产物进行电泳分析，观察目标基因特异性条带的出现情况。
•根据扩增反应结果判断样本中是否存在目标基因的相关易反应物质。
结果分析与报告
•根据PCR扩增结果，进行相关的数据分析。
•编辑相应的报告，记录样本信息和检测结果。
•针对阳性样本，进一步进行测序确认，以确定目标基因的序列信息。
•最后，向医疗专业人士提供详细的报告，以协助他们进行临床诊断和判断。
以上即为核酸检测检验科的处理流程。
这一流程确保了样本的准确性和检测结果的可靠性，对于确诊疾病和防控疫情具有重要意义。
通过标准化的操作步骤和专业的设备，核酸检测得以高效、准确地完成，为公众健康保驾护航。
PCR实验室(新冠核酸检测实验室)SOP文件
XXX医院检验科基因扩增实验室标准操作规程适用部门：基因扩增实验室XX医院目录第一部分工作制度及程序 (1)PCR实验室各区工作制度及程序 (1)PCR实验室人员配置及培训程序 (4)PCR实验室清洁程序 (5)PCR实验室废弃物处理程序 (6)PCR实验室生物安全防护程序 (7)抱怨的处理程序 (8)PCR实验室应急处理程序 (9)第二部分标准操作规程 (11)临床标本的采集及处理操作程序 (11)标本接收、拒收及保存程序 (12)实验室化学试剂的管理和配制标准操作程序 (14)标本前处理(核酸纯化)标准操作程序 (16)新型冠状病毒核酸检测标准操作程序 (18)人乳头瘤病毒分型检测（基因芯片法）标准操作规程 (24)核酸扩增及产物分析检测的操作程序 (30)检测结果分析的标准操作程序 (31)检测结果报告程序 (34)实验记录管理程序 (35)第三部分设备SOP文件 (36)AU1001-96全自动核酸提取仪（96 通道）操作流程、校准及维护保养程序 (36)乐普Lepgen-96全自动医用PCR 分析系统操作流程、校准及维护保养程序 (41)净化工作台SW-CJ系列操作流程及维护保养程序 (48)博科生物安全柜操作流程及维护保养程序 (49)多恒DHG-9053BS-III电热恒温鼓风干燥箱操作流程及维护保养程序 (54)多恒HH-100干式恒温器（金属浴）操作流程、校准及维护保养程序 (56)多恒TD4Z低速离心机操作流程及维护保养程序 (60)多恒DH18R台式高速冷冻离心机操作流程及维护保养程序 (66)多恒MINI10K迷你离心机操作流程及维护保养程序 (74)多恒MIX-2500微型旋涡混合/匀器操作流程及维护保养程序 (76)多恒2-96板式离心机操作流程及维护保养程序 (78)威高MSL.NC80高压灭菌器操作流程及维护保养程序 (80)紫外线消毒车操作规程操作流程及维护保养程序 (91)澳柯玛药品冷藏柜操作流程及维护保养程序 (93)澳柯玛普通冰箱操作维护规程 (95)移液器操作流程、校准及维护保养程序 (97)传递窗操作流程、校准及维护保养程序 (101)第四部分实验室质量控制 (102)实验室试剂、耗材购买管理程序 (102)试剂的质检标准操作程序 (104)实验耗材质检的标准操作程序 (105)室内质控标准操作程序 (107)室间质评管理程序 (111)第一部分工作制度及程序PCR实验室各区工作制度及程序1 目的：实现PCR实验室日常专人负责，确保实验室操作的规范性。
实验室核酸检测流程及结果解读
实验室核酸检测流程及结果解读《实验室核酸检测流程及结果解读》1. 引言在当前COVID-19疫情的背景下，核酸检测成为了最主要的诊断手段之一。
本文旨在深入探讨实验室核酸检测的流程及结果解读，让读者对这一过程有更深入的理解。
2. 实验室核酸检测流程2.1 样本采集核酸检测的第一步是样本采集。
通常情况下，鼻咽拭子是最常见的样本采集方式，然而在特定情况下，如深部呼吸道或血液样本也可用于检测。
2.2 样本处理采集到样本后，需要进行样本处理，这一步是为了提取核酸。
方法包括酚-氯仿提取法、离心柱法和磁珠法等。
2.3 PCR反应提取到核酸后，接下来就是PCR（聚合酶链式反应）反应。
此过程将RNA转化为DNA，并通过特定的引物和酶扩增目标序列。
2.4 检测和分析最后一步是检测和分析，通过荧光定量PCR或实时荧光定量PCR等技术，可以定量分析目标核酸的含量，从而判断是否感染病毒。
3. 核酸检测结果解读3.1 阳性结果阳性结果意味着样本中存在病毒的核酸，被检测出感染了病毒。
需要及时进行隔离和治疗，同时加强个人防护，避免传播给他人。
3.2 阴性结果阴性结果指样本中未检测出病毒核酸，但并不排除感染的可能性。
建议在症状出现后再次进行检测，或结合临床症状和其他检测结果进行综合判断。
4. 个人观点和理解实验室核酸检测是一项重要的诊断手段，然而在实际操作中仍存在一定的误差率。
应结合临床症状、流行病学史和其他实验室检测结果进行综合判断，确保诊断结果的准确性。
5. 总结通过本文的详细介绍，相信读者已经对实验室核酸检测的流程及结果解读有了更深入的了解。
在疫情期间，正确理解和使用核酸检测将有助于有效控制疫情的传播，保护自己和他人的健康。
这篇文章旨在全面解释实验室核酸检测流程及结果解读，帮助读者加深对这一诊断方法的理解。
希望本文能够帮助到你，更好地应对疫情。
实验室核酸检测作为目前COVID-19疫情中最主要的诊断手段之一，其流程和结果解读对于疫情防控工作至关重要。
人民医院PCR实验室核酸检测批次及运行报告
人民医院PCR实验室核酸检测批次及运行报告一、常规检测批次及出结果时间：我院PCR实验室共检测5批，第一批次收样时间8：30分钟，早上9：00分钟开始检测第一批次，第二批次收样时间11：30分钟，12：00分钟开始检测第二批次，第三批次收样时间下午15：30分钟，16：00分钟开始检测第三批次，第四批次收样时间下午17：30分钟，18：00分钟开始检测第四批次，第五批次收样时间晚上21：30分钟，22：00分钟开始检测第五批次；四小时后出核酸检测结果。
二、快速检测人群及及出结果时间：红黄码人员、有流行学病史人员、疑是病例及重点人员等，立即启动快速检测，2小时后出核酸结果。
三、文件中应检尽检及愿检尽检人群检测结果时效性要求：1、应检尽检：发热门诊6小时出核酸结果，门急诊、住院部及住院部陪人12小时出核酸结果；2、愿检尽检人群24小时出核酸结果；3、核酸结果上传省平台力争12小时，不超24小时。
四、核酸检测快速及普通法流程：快速法检测（一步法）的流程：实验室接收到快速检测标本后，由于这类标本保存不含胍灭活，所以收到标本后放56℃灭活箱30分钟进行标本的灭活，灭活完成后再将标本放上振荡器上振荡，时间不少于15分钟，以使核酸充分释放出来，振荡完成后进行排样，将在试剂准备区配好的试剂在传递窗传到标本制备区进行点样、点完样后盖好反应管的盖、离心，将离心好的反应管经过传递窗传到基因扩增区，仪器设置好程序后将反应管放上扩增仪上进行扩增，扩增时间45分钟，扩增完成后观察结果。
在仪器扩增过程中中途不可以添加样本进行扩增，必须当批标本完成扩增后，才可以做下一批标本。
普通法检测（二步法）的流程：实验室接收到常规标本后，由于这类标本保存含胍灭活剂，所以收到标本后在生物安全柜内进行拆样、排样，将预先配制好的提取板放入生物安全柜内加样，完成后再放上提取仪进行提取，提取时间为30分钟，（在未足96人份的标本需要用32孔提取仪进行多次提取时，每提取一次时间上增加30分钟）提取完成后，将在试剂准备区配好的试剂在传递窗传到标本制备区进行点样、点完样后盖好反应管的盖、离心，将离心好的反应管经过传递窗传到基因扩增区，仪器设置好程序后将反应管放上扩增仪上进行扩增，扩增时间1小时15分钟，扩增完成后观察结果。
新冠核酸检测曲线结果判读
新冠核酸检测曲线结果判读全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：新冠病毒肺炎（COVID-19）自去年底爆发以来，已经在全球范围内造成了数以百万计的感染病例和数以十万计的死亡病例。
为了及时发现和隔离患者、阻断病毒传播的途径，新冠核酸检测成为了一种重要的诊断手段。
新冠核酸检测主要是通过检测病毒基因组中的RNA来确定是否感染了新冠病毒。
一般情况下，医院或实验室会使用实时荧光定量PCR 检测技术进行检测。
在实时PCR检测过程中，通过不断复制RNA序列并与荧光染料结合来产生信号，最终通过检测信号的强度来确定样本中是否存在病毒RNA。
在实际操作中，医务人员会将患者采集的咽拭子样本（或其他呼吸道样本）送到实验室进行核酸检测。
检测过程中会同时进行正性对照（已知阳性样本）和负性对照（无病毒RNA样本）来确保检测结果的准确性。
在检测过程中，会生成一条SARS-CoV-2核酸检测曲线，根据曲线的形状和信号强度来判断检测结果。
核酸检测曲线通常分为三部分：指数上升阶段、指数平稳阶段和指数下降阶段。
在指数上升阶段，曲线呈指数增长，信号强度逐渐增加，说明RNA序列正在被复制。
在指数平稳阶段，曲线的斜率平稳，信号强度达到最高值，说明RNA序列已经复制到一定程度，可以确定样本中存在病毒RNA。
在指数下降阶段，曲线的信号强度开始下降，说明PCR反应逐渐结束。
根据核酸检测曲线的结果，可以判断样本中是否存在新冠病毒RNA。
一般情况下，如果曲线在35个PCR循环内出现，且信号强度大于阈值，可以判断为阳性结果；如果曲线在35个PCR循环内没有出现，或者信号强度低于阈值，可以判断为阴性结果。
在一些特殊情况下，可能会出现曲线的形状不规则或者信号强度较低的情况，这时可能需要重新检测或者进行其他检测方法来确认结果。
新冠核酸检测曲线结果判读是一项高度专业且复杂的工作，需要有经验丰富的医学实验室技术人员进行操作。
核酸检测只是新冠病毒诊断的一个环节，医务人员还需要结合临床症状、流行病学史等信息来做出最终诊断。
新冠核酸检测标本采集、送检、处理流程(核酸检测)
新冠核酸检测标本采集、送检、处理流程(核酸检测)文章中存在一些格式错误，需要进行修正。
此外，一些段落存在问题，需要删除或改写。
修改后的文章如下：为了检测感染疑似或确诊患者，需要进行核酸检测。
下面是标本采集、送检、处理流程：1.医生开具医嘱并通知检验科XXX（6416）。
2.医生进行标本采集，采集者需要进行三级生物安全防护。
上呼吸道标本包括咽拭子和鼻拭子各1根，一起放至同一根核酸标本保存管中，并旋转。
拧紧标本管盖子后，使用75%酒精消毒标本表面。
下呼吸道标本包括深咳痰液、或呼吸道吸取物、或支气管/肺泡灌洗液（专用大螺旋管），旋转拧紧标本管盖子后，使用75%酒精消毒标本表面。
3.将采集好的标本放入内层小密封袋中，并进行75%酒精消毒。
再将内层小密封袋放入外层大密封袋中，并进行75%酒精消毒。
双层密封袋开口均向上，垂直放于专用转运箱中。
转运箱需要密封良好，并带有XS标识。
放入转运箱中后，使用75%酒精喷雾进行消毒，并进行封箱。
4.采集好的标本需要由专人单独转运至检验科双开门通道，并交给PCR实验室人员。
转运人员需要进行三级生物安全防护，并在转运期间保持平稳，勿震荡，勿开箱。
如果发生意外，PCR人员需要确认转运箱，并在生物安全柜内打开转运箱（开箱瞬间使用75%酒精喷雾进行消毒）。
5.从转运箱中取出标本后，需要进行56℃30分钟的灭活处理。
采样管降至常温后，在生物安全柜内开盖进行检测。
6.使用后的标本密封袋需要进行封口，并放置在双层黄色垃圾袋中。
垃圾袋中含有有效氯含量1000mg/L的消毒剂。
封口后，需要进行75%酒精喷雾消毒。
移出生物安全柜后，使用高压灭菌进行处理。
处理完成后，需要使用75%酒精喷洒生物安全柜进行消毒，并开启紫外灯照射30分钟。
所有房间也需要开启紫外灯照射30分钟。
7.实验完成后，需要向科主任报告检测结果。
科主任需要向医院领导及医务科报告。
8.有效氯含量1000mg/L的消毒剂可以用于擦拭标本转运箱。
新冠肺炎实验室建立文件系列之2 新型冠状病毒核酸检测标准操作程序
02 新型冠状病毒核酸检测标准操作程序1 目的规范PCR方法检测新型冠状病毒核酸的工作程序，保证实验结果的正确可靠。
2 范围适合于检验科发热门诊。
3 职责3.1 检验人员负责按照本检测细则对被检样本进行检测；3.2 复核人员负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核；3.3 专业组负责人负责对专业组综合管理和检测报告的审核。
4 程序、内容和要求任何新型冠状病毒的检测都必须在具备适当条件的实验室由经过相关技术安全培训的人员进行操作。
本程序中的核酸检测方法主要针对新型冠状病毒基因组中开放读码框1a/b （open reading frame 1ab，ORF1ab）和核壳蛋白（nucleocapsid protein，N）。
在实验室要确认一个病例为阳性，满足以下条件：同一份标本中新型冠状病毒2个靶标（ORF1ab、N）特异性PCR检测结果均为阳性。
阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染，需要排除可能产生假阴性的因素，包括：样本质量差，比如口咽等部位的呼吸道样本；样本收集的过早或过晚；没有正确的保存、运输和处理样本；技术本身存在的原因，如病毒变异、PCR抑制等。
4.1 样本采集（推荐鼻/咽拭子）4.1.1 咽拭子（使用透景样本保存液）用2 根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入样本保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖作为样本使用。
4.1.2 鼻拭子（使用透景样本保存液）将1 根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。
取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。
上述两根拭子浸入同一样本保存液的采样管中，尾部弃去，旋紧管盖作为样本使用。
4.1.3 鼻咽拭子样本（未使用透景的保存液）：在有鼻咽拭子的收集管中加入1ml生理盐水，振荡混匀后将全部液体倒入1.5ml灭菌离心管中作为样本使用。
4.2 标本保存用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快进行检测，能在24小时内检测的标本可置于4℃保存；24小时内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存（如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。
新冠肺炎实验室建立文件系列之2 新型冠状病毒核酸检测标准操作程序
02 新型冠状病毒核酸检测标准操作程序1 目的规范PCR方法检测新型冠状病毒核酸的工作程序，保证实验结果的正确可靠。
2 范围适合于检验科发热门诊。
3 职责3.1 检验人员负责按照本检测细则对被检样本进行检测；3.2 复核人员负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核；3.3 专业组负责人负责对专业组综合管理和检测报告的审核。
4 程序、内容和要求任何新型冠状病毒的检测都必须在具备适当条件的实验室由经过相关技术安全培训的人员进行操作。
本程序中的核酸检测方法主要针对新型冠状病毒基因组中开放读码框1a/b （open reading frame 1ab，ORF1ab）和核壳蛋白（nucleocapsid protein，N）。
在实验室要确认一个病例为阳性，满足以下条件：同一份标本中新型冠状病毒2个靶标（ORF1ab、N）特异性PCR检测结果均为阳性。
阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染，需要排除可能产生假阴性的因素，包括：样本质量差，比如口咽等部位的呼吸道样本；样本收集的过早或过晚；没有正确的保存、运输和处理样本；技术本身存在的原因，如病毒变异、PCR抑制等。
4.1 样本采集（推荐鼻/咽拭子）4.1.1 咽拭子（使用透景样本保存液）用2 根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入样本保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖作为样本使用。
4.1.2 鼻拭子（使用透景样本保存液）将1 根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。
取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。
上述两根拭子浸入同一样本保存液的采样管中，尾部弃去，旋紧管盖作为样本使用。
4.1.3 鼻咽拭子样本（未使用透景的保存液）：在有鼻咽拭子的收集管中加入1ml生理盐水，振荡混匀后将全部液体倒入1.5ml灭菌离心管中作为样本使用。
4.2 标本保存用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快进行检测，能在24小时内检测的标本可置于4℃保存；24小时内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存（如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。