疟原虫镜检操作规程

疟原虫镜检操作规程

1.标本采集

1.1标本采集前病人的准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20小时左右采血。1.2标本种类：全血或末梢血。

1.3标本要求：厚血片溶血要及时。

2．标本运送：室温运送。

3．标本拒收标准：被细菌污染。

4．操作步骤

4.1 薄血片法：

4.1.1在洁净玻片上，滴血液标本1滴，以常法推制成薄片。

4.1.2 血膜完全干燥后即可用瑞氏法染色，干后用油镜镜检。

4.2厚血片法：

4.2.1在洁净玻片上，滴血液标本2滴。

4.2.2用推片将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。

4.2.3 在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血约5分钟后倾去溶血液。

4.2.4 不必待干，进行瑞氏染色，干后镜检。

5．结果判断

在油镜下观察，薄片须至少100个视野，厚血片至少20个视野，才能报告“未见疟原虫”；发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。

疟原虫胶体金法简易操作步骤

原理

基于双抗体夹心法工作原理，检测时，滴加5μL全血样本于试剂卡加样孔处，随之滴加4滴裂解液，裂解后的样本在毛细管效应下向上层析。如样本中含有恶性疟原虫特异性乳酸脱氢酶（pflDH）和疟原虫乳酸脱氢酶（panLDH），将于胶体金标记物panLDH单克隆抗体反应形成复合物，在层析作用下前移，被预先固定在硝酸纤维膜上检测区的pflDH/panLDH单克隆抗体捕获，在检测区内形成1条/2条红色反应线，此时为阳性结果，如样本中无pflDH/panLDH抗原，在检测区内无红色反应线，此时为阴性反应。

步骤

1.无菌采集患者EDTA-2K抗凝静脉血2ml。

1.沿锡箔袋切口，撕开锡箔纸，取出疟原虫抗原检测卡，用铅笔或水写笔编号

并做好登记。

2.吸取5μL全血样本垂直滴加于加样孔A区，同时滴加4滴裂解液于加样孔B

区。

3.15分钟内观察显示结果，超过30分钟无临床意义。

结果