实验一牙菌斑细菌检查 (口腔)

口腔生物学实验
基础医学院病原生物学教研室 杨致邦
2010.1
教材
高等医学院校基础医学实验教学系列教材 ≪病原生物学实验≫
科学出版社，2008年6月 主编
杨致邦 叶彬
实验内容及安排
实验课内容
学时 显微镜 录像 数
1 牙菌斑细菌检查 5
需要
2 ELISA法检测血清 5 HBsAg
需要
3 饮用水氟含量测定 4
[实验报告]
记录牙菌斑刚果红负性染色检查试验结果， 讨论牙菌斑对龋病形成的影响。
请班干部 填写实验运行记录， 安排做好清洁卫生。
谢谢！
2.耐氧试验 观察培养3天后的厌氧血平板,将不同菌落编号
后,同时分别接种两个厌氧血平板,1个置培养箱中 常规培养, 1个置厌氧培养,3天后观察。
3. 厌氧菌鉴定 以厌氧培养生长，而常规培养不生长的细菌
判为厌氧菌。若两者均生长判为兼性厌氧菌， 有条件可作进一步鉴定。
[注意事项]
1.确保厌氧罐不漏气。 2. 产气袋加入水后会很快产生氢气,需迅速盖好厌氧罐。
[实验方法]
1.厌氧菌培养
用牙纤挑取少许牙垢 在塑料离心管中加入0.5 ml硫乙醇酸盐稀释液
震荡1-2分钟 用稀释液对倍稀释为1:10、1：20、1：40 取1：20、1：40稀释液各2-3环接种厌氧血平板
在厌氧罐中放入产气袋，加约10ml水 将接种后的厌氧血平板放入厌氧罐中，迅速盖好
37℃培养3天后观察
有
实验一
牙菌斑细菌检查(P161)
[实验目的]
1.掌握牙菌斑涂片的刚果红负性染色法； 2.熟悉口腔细菌的形态，染色性； 3.了解口腔厌氧菌培养方法。
【实验内容】
1.牙菌斑刚果红负性染色检查法 2.牙菌斑细菌培养
1.牙菌斑刚果红负性染色检查法
[实验材料] 牙纤、牙垢、2%刚果红、37%的浓HCL、 显微镜、载玻片、香柏油、二甲苯。
[注wk.baidu.com事项]
(1) 一定要将菌斑与染液混匀，否则就不能将细菌 分散。 (2) 用HCL蒸汽熏时，皮肤一定不要接触浓HCL， 否则会被烧伤。
2.牙菌斑细菌培养
[实验材料] 1.牙纤、牙垢、硫乙醇酸盐稀释液(分装成1ml)、 厌氧血平板、产气袋、金属钯、厌氧罐。
2.生理盐水、革蓝染色液, 显微镜、载玻片、 接种环、牙纤、香柏油、二甲苯。
【实验方法】
(1) 标本采集 用牙纤挑取牙菌斑(牙缝接近牙龋处)的牙垢。
(2) 刚果红负性染色法
载玻片上滴加2%刚果红溶液2滴 加入标本，用牙鉴将标本与染液混匀
推片
自然干燥
置浓HCL(37%)蒸汽上熏，呈蓝色即可
油镜观察
[实验结果]
油镜下可见背景呈蓝(黄)色、细菌及其它微 生物呈光亮的白色,形态清晰,呈不同的形态： 球状、杆状、螺旋状等。