组织匀浆器
ELISA组织样本处理方法
ELISA组织样本的处理
1、采集组织：在冰冷的生理盐水中漂洗组织，除去血液，滤纸拭干，称重（100mg左右为
宜），剔除附属的结缔组织，称取组织块。
2、用移液管量取0.1M PBS或者用0.86％冷生理盐水，组织：匀浆介质=1:10（或所用生理
盐水的体积总量为组织块重量的9倍），尽量保证样本间所取组织重量和加入匀浆介质（PBS或生理盐水）的比例一样。
然后用眼科小剪尽快剪碎组织块（操作要在冰水浴中进行）。
3、组织匀浆：
a) 玻璃匀浆器：将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中，再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水
冲洗残留在烧杯中的碎组织块，一起倒入匀浆管中进行匀浆，左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手上下抽动或转动研磨杆数十次（6～8分钟），充分研碎，使组织匀浆化。
b) 组织匀浆/破碎机：用组织破碎机10000～15000r/min上下研磨制成10％组织匀浆，
也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在
冰水中进行），皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
4、将制备好的10％匀浆用离心机4℃，5000g离心5～10min，收集各匀浆样本上清。
5、BCA法测定各组织匀浆样本总蛋白量，便于后续统计分析数据。
6、将收集的上清分装成适量小份，按需保存备用：
4℃下，可保存不超过72小时；
-20℃下，可保存不超过1个月；
-80℃下，可保存不超过2～6个月；
7、根据实验需要，取适量上清液进行各种ELISA测定。
注意事项：
1、离心后的样本应清澈透明，无沉淀；
2、冻存的匀浆样本应避免反复冻融；
2、对于冷冻保存的样本，使用前在冰上融化，避免加热融化。
[机械法]细胞破碎的方法、原理和优缺点
![[机械法]细胞破碎的方法、原理和优缺点](https://img.taocdn.com/s3/m/d2010ee859eef8c75ebfb353.png)
[机械法]细胞破碎的方法、原理和优缺点
1、高速组织捣碎机
捣碎机转速可达10,000r/min，具高速转动的锋利的刀片，宜用于动物内脏组织的
破碎。
操作：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至
最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。
特点：由于旋转刀片的机械切力很大，制备一些较大分子如核酸则很少使用。
2、组织匀浆器
制作匀浆器的材料通常用玻璃，还可以用硬质塑料、不锈钢、人造荧光树脂等。
操作：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎。
特点：匀浆器的研钵磨球和玻璃管内壁之间间隙保持在十分之几毫米距离。
此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。
但是，这种方法也较易造成堵塞；团状或丝状真菌、较小的革兰氏阳性菌以及某些亚细胞器，质地坚硬，易损伤匀浆阀，也不适合用该法处理。
3、研钵
多用于细菌或其他坚硬植物材料，研磨时常加入少量石英砂，玻璃粉或其他研磨剂，以提高研磨效果。
值得注意的是：在研磨过程中局部往往生热导致变性或pH值变化，尤其是研磨玻璃粉和氧化铝时；而且磨细剂的吸附也可导致损失。
4、细菌磨
是一种改良了的研磨器，比研钵具有更大的研磨面积，而且低部有出口。
操作时先把细菌和研磨粉调成糊状，每次加入一小勺，研磨20-30秒即可将细菌细胞完全磨碎。
细胞破碎方法
之袁州冬雪创作机械法主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法，常常使用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等.1. 组织捣碎机将资料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度.一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等，转速可高达10000rpm/M以上.由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用.2. 匀浆器先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆往返研磨，上下移动，即可将细胞研碎.匀浆器的研钵磨球和玻璃管内壁之间间隙坚持在十分之几毫米间隔.制作匀浆器的资料，除玻璃外，还可以用硬质塑料、不锈钢、人造荧光树脂等.此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织. 存在的问题；较易造成堵塞的团状或丝状真菌，较小的革兰氏阳性首以及有些亚细胞器，质地坚硬，易损伤匀浆阀，也不适合用该法处理.3. 研钵多用于细菌或其他坚硬植物资料，研磨时常加入少量石英砂，玻璃粉或其他研磨剂，以提高研磨效果.4. 细菌磨是一种改良了的研磨器，比研钵具有更大的研磨面积，而且低部有出口.操纵时先把细菌和研磨粉调成糊状，每次加入一小勺，研磨20-30秒即可将细菌细胞完全磨碎.物理法主要通过各种物理因素使组织细胞破碎的方法.在生化制备中常常使用的方法有：1. 反复冻溶法原理：因突然冷冻，细胞内冰晶的形成及胞表里溶剂浓度的突然改变而破坏细胞. 方法：将待破碎的细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞布局破碎. 特点：此法适用于组织细胞，多用于动物性资料，对微生物细胞作用较差.2. 急热骤冷法将资料投入沸水中，维持85-90分钟，至水浴中急速冷却，此法可用于细菌及病毒资料.3. 超声波处理用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法多适用于微生物资料，用大肠杆菌制备各种酶，常选用50-100毫克菌体/毫升浓度，频高于15～20KHz的超声波在高强度声能输入下可以停止细胞破碎.其破碎机理：能够与空化现象引起的冲击波和剪切力有关.超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及首种类型等因素有关. 特点：操纵简单，重复性较好，节俭时间；多用于微生物和组织细胞的破碎. 存在问题：超声波破碎在实验室规模应用较普遍，处理少量样品时操纵简便，液量损失少，但是超声波发生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质变性失活.而且大容量装置声能传递，散热均有坚苦，应采纳相应降温措施.对超声波敏感和核酸应慎用.空化作用是细胞破坏的直接原因，同时会发生活性氧，所以要加一些巯基呵护剂.化学及生物化学法 1. 自溶法在一定PH和适当的温度下，操纵组织细胞内自身的酶系统将细胞破碎的方法.此过程需较长时间，常常使用少量防腐剂如甲苯、氯仿等防止细胞的污染.2. 酶溶法操纵各种水解酶，如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶、半纤维素酶、脂酶等，将细胞壁分解，使细胞内含物释放出来.有些细菌对溶菌酶不敏感，加入少量巯基试剂或8摩尔尿素处理后，使之转为对溶菌酶敏感而溶解. 特点：a) 此法适用多种微生物；b) 具有作用条件温和；c) 内含物成分不容易受到破坏；d) 细胞壁损坏的程度可以节制. 存在的问题：易造成产品抑制作用，这能够是导致胞内物质释放率低的一个重要因素.而且溶酶价格高，限制了大规模操纵.若回收溶酶，则又增加百分离纯化溶酶的操纵.别的酶溶法通用性差，分歧菌种需选择分歧的酶.有一定局限性，不适宜大量的蛋白质提取，给进一步纯化带来坚苦.3. 化学渗透法某些有机溶剂（如苯、甲苯）、抗生素、概况活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来.其作用机理；化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的布局与组成. 特点：多用于破碎细菌，且作用比较温和；提取核酸时，常常使用此法破碎细胞. 存在的问题：时间长，效率低；化学试剂毒性较强，同时对产品也有毒害作用，进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂；通用性差：某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞. 小结无论用哪种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺酰氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酶活力，但不是全部，还可通过选择pH、温度或离子强度等，使这些条件都要适合于目标物质的提取. 先容的几种细胞破碎的方法，可谓各有千秋，在实际应用中，应尽能够思索全面，选择最迷信、有效的方法.|||顺便提个问题：关于反复冻融有很多资料，但是都不敷详细，想请教做过这方面的酷友们：1、重悬缓冲液（裂解液？，PBS？）2、冻溶温度（液氮？，-20？，-80？）3、冻结温度（37？，40？）4、反复次数（3次以上？）反复冻融实际上最好与超声波破碎或酶解一起使用，否则冻融后黏度很大，蛋白质容易堆积，通常都是反复冻融后超声波处理，这样效果比较好<br />你问的几个问题其实都没有详细答案，缓冲液，温度等都与详细蛋白质，详细实验要求有关，次数是基本达到你的要求即可。
各种组织匀浆样本用于ELISA检测的处理方法
各种组织匀浆样本用于ELISA检测的处理方法大鼠肺组织匀浆制备过程：1.WB法：在组织匀浆器中加入大鼠肺和5体积的匀浆缓冲液进行匀浆，4摄氏度下3000转离心20分钟后，收集上清。
用Coomassie Plus Protein Assay 测定总蛋白浓度. 用等量的样本buffer与20微克样本混合(100 mM Tris-HCl, 2% SDS, 0.02%溴酚蓝,和10%甘油煮几分钟之后电泳.EILSA：肺用5体积的buffer进行匀浆，缓冲液由10 mM HEPES, 10 mM KCl, 0.5 M 蔗糖, 1 mM EGTA, 1 mM DTT构成。
匀浆组织在750 xg 下离心10 分钟分理出细胞核. 含有细胞质部分的上清液储存在–70摄氏度冰箱用于MIP-2蛋白质测定.2.BAL液收集后, 收集左肺做TNF-alpha, MIP-2, 和移行蛋白表达评估. 肺用1mL细胞裂解液在匀浆器中进行匀浆。
得到的组织匀浆在10000Xg下离心10分钟. 上清液储存在–80 摄氏度留用于后面的检测。
3.冻存的的组织样本称重加入匀浆缓冲液（4摄氏度，每100毫克组织中加入1毫升缓冲液），样本进行匀浆和一次冻融,超声10分钟后在4摄氏度孵化一个小时。
最终得到的组织匀浆在120,000 x g下离心. 组织上清液用于细胞因子测定，这些数据用每毫克组织表达。
4. 取三分之一冻存的来源于？在4摄氏度细胞裂解液中孵化1小时的肺进行匀浆，组织匀浆之后超声并在4摄氏度12,000 转下离心10 分钟 . ELISA 检测TNF-alpha, MIP-2, and IL-6 的组织匀浆的内容。
组织匀浆总蛋白采取Bradford法.大鼠脾和肺组织匀浆制备过程：TNF-alpha检测脾和肺组织匀浆过程：冰冻组织样本称重后匀浆（每100毫克组织1毫升缓冲液）。
匀浆后的组织进行一轮冻融后，超声10分钟在4摄氏度下孵化一小时。
组织匀浆方法
组织匀浆方法
组织匀浆方法是一种常见的实验技术，它可以将组织样本破碎并均匀分散在缓冲液中，以便进行后续的实验操作。
下面将介绍一些常用的组织匀浆方法。
1. 切片法
这是一种最常见的组织匀浆方法。
首先将组织样本切成小块或薄片，然后用匀浆器或超声波仪器将其破碎。
这种方法适用于较硬的组织样本，如肌肉、骨骼等。
2. 挤压法
这种方法适用于较软的组织样本，如肝脏、脾脏等。
将组织样本放在筛网上，用匀浆器或手动挤压器将其挤压，使其破碎并均匀分散在缓冲液中。
3. 针刺法
这种方法适用于较小的组织样本，如小鼠肝脏、心脏等。
将组织样本放在离心管中，用针头将其刺破，然后用匀浆器或超声波仪器将其破碎。
4. 酶消化法
这种方法适用于含有细胞的组织样本，如肝脏、胰腺等。
将组织样
本用酶消化液消化，使细胞破裂并释放出细胞质，然后用匀浆器或超声波仪器将其破碎。
无论采用哪种方法，组织匀浆前都需要将匀浆器或超声波仪器消毒，并在操作过程中保持无菌。
此外，匀浆时间和速度也需要根据不同的组织样本进行调整，以避免过度破碎或不充分破碎的情况发生。
组织匀浆方法是一种重要的实验技术，它可以为后续的实验操作提供高质量的组织样本。
在实验操作中，我们需要根据不同的组织样本选择合适的匀浆方法，并注意消毒和无菌操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。
组织匀浆器
各类均质器一览——仅用于奥然公司培训1.研磨珠敲打式均质器（珠磨式均质器，珠磨式匀浆机），珠子高速敲打用途：动、植物组织（含甲壳类、单细胞藻类等）及的破碎细菌、真菌类微生物、裂解，以利于DNA/RNA、蛋白质、细胞器甚至是小分子化合物的分离提取；主要品牌：法国Bertin，美国Biospec，美国MP bio，美国SPEX，瑞士Roche，德国Retsh，德国Qiagen2.研磨式均质器（匀浆机），研磨杵、研磨管高速摩擦用途：动、植物组织及细菌、真菌等的破碎、裂解，以利于DNA/RNA、蛋白质的分离提取，小型研磨管/杵适合实验室微量生物样品，大型研磨管/杵适合工业类样品主要品牌：德国Schuett，宁波新芝，德国Retsh，日本Microtec3.探头式均质器（匀浆机），定子、转子高速旋转形成剪切力用途：动、植物组织以利于DNA/RNA、蛋白质的分离提取；大型设备可以用户工业样品的乳剂、霜剂制备主要品牌：美国Biospec，美国Talboys，德国IKA（广州产），瑞士Kinematica 4.超声波均质器（超声波破碎），气穴原理用途：细菌、真菌、单细胞藻类的破碎、裂解，以利于DNA/RNA、蛋白质的分离提取。
工业上用户样品的破碎、乳化、混匀等主要品牌：美国Misonix，美国Sonics，美国Branson(中国产)5.刀片式均质器（刀片式匀浆机），刀片高速切割用途：样品的进行细碎、匀化、分散、强烈搅拌、溶解有机物等主要品牌：美国Talboys，美国Waring，德国IKA，瑞士Consul，诸多国产品6.拍打式均质器（拍打式匀浆机），样品在无菌袋中被慢速敲打用途：活细菌、寄生虫/卵的提取，及活组织细胞的分离培养。
多用于食品（水果、蔬菜、肉类）的检验检疫，以及土壤、环境行业的研究。
主要品牌：法国Interscience，英国Seward，天津恒奥7.高压均质器（高压匀浆机），高压促使细胞破碎用途：细菌、真菌等的破碎、裂解。
试验室设备技术参数一览表试验室常用设备离心机4台参考
实验室设备技术参数一览表一、实验室常用设备离心机（4台）（一）参考技术参数：小型台式冷冻离心机数量：1台神外1.最高转速 : 21,100 x g / 14,800rpm2.时间设定 : 1 min – 99 min; 1 min 增加.3.配置：主机+ 24 x 1.5/2.2ml角转子+ 0.5ml、0.2ml PCR管适配器各1套4.以上要求原装进口5.冷冻（二）参考技术参数：小型高速离心机数量：1台糖尿病1.最高转速：14500rpm,2.最大相对离心力：14000Xg,3.rpm/rcf转换显示：有4.功率：85W，5.加速至最高转速时间：13秒，6.从最高转速减速的时间：12秒，7.计时器最长设置时间：99分钟（连续离心），8.最大容量：1.2X1.5ml/2ml离心管，9.尺寸（厘米）：22.5X24X12，10.重量（包括转子）：4.3kg11.参考型号：MiniSpin plus (Eppendorf公司)（三）参考技术参数：台式离心机数量：1台风湿1.要求配置：最高转速4000r/min 最大相对离心力2810xg2.三种离心管配套架各2个：3.①标准通用尖底50 ml离心管（直径3 cm，长度11.3 cm）4.②标准通用尖底15 ml离心管（直径1.8 cm，长度11.5 cm）5.③标准通用圆底5 ml 流式管（直径1.3 cm，长度7.2 cm）6.水平转子32×15ml、管架48×7ml7.三种离心管配套架各2个8.50ml离心管（直径3cm,长度11.3cm）9.15ml离心管（直径1.8cm,长度11.5cm）10.5ml离心管（直径1.3cm,长度7.2cm）参考型号：湘仪TDZ5-WS（四）参考技术参数：微型离心机数量：1台风湿要求配置：1）6000rpm/2000g快速离心；2) 标配两种转子：6×1.5/0.5/0.2ml离心管2×0.2ml 8联PCR排管3) 关盖启动4) 开盖即停参考型号：北京百晶BG-Qspin™参考型号仅供参考的参数纯水装置（1套）（一）参考技术参数：超纯水系统数量：1套糖尿病1.电源：220V/50Hz; 50-60W.2.进水水源：一般城市自来水,3.进水水压:0.15-0.4MPa，水温5-40℃。
核酸的生化实验报告
一、实验目的1. 掌握核酸提取的基本原理和方法。
2. 学习使用不同试剂和设备提取动物组织中的DNA和RNA。
3. 了解核酸鉴定和定量分析的方法。
二、实验原理核酸是生物体中携带遗传信息的分子，包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
DNA主要存在于细胞核中，而RNA主要存在于细胞质中。
本实验通过提取动物组织中的DNA和RNA，并进行鉴定和定量分析，以了解核酸在生物体中的作用。
三、实验材料与仪器材料：1. 新鲜动物组织（如鸡肝、鸡血等）2. 10% SDS（十二烷基硫酸钠）3. 1M Tris-HCl（pH 8.0）4. 0.5M EDTA（pH 8.0）5. 95% 乙醇6. 70% 乙醇7. 氯仿8. 异丙醇9. 1.5M NaCl10. 淀粉酶11. 蛋白酶K12. 磷标准溶液13. 钼酸铵试剂仪器：1. 组织匀浆器2. 离心机3. 水浴锅4. 分光光度计5. 电子天平6. 移液器四、实验步骤1. 组织匀浆：将新鲜动物组织放入匀浆器中，加入适量缓冲液（1M Tris-HCl，pH 8.0）和蛋白酶K，进行匀浆处理。
2. 蛋白质变性：向匀浆中加入10% SDS，使蛋白质变性。
3. 离心分离：将匀浆液在4℃、12000 rpm下离心15分钟，分离出上清液和沉淀物。
4. DNA提取：将上清液加入氯仿和异丙醇，充分混匀，静置5分钟，离心分离，收集沉淀物。
5. RNA提取：将沉淀物用1.5M NaCl溶液溶解，加入淀粉酶和蛋白酶K，进行消化处理，加入95% 乙醇和70% 乙醇，静置沉淀，离心分离，收集沉淀物。
6. 核酸鉴定：将DNA和RNA沉淀物加入适量缓冲液，用紫外分光光度计测定其吸光度，判断核酸含量。
7. 核酸定量：使用定磷法测定DNA和RNA的磷含量，计算其浓度。
五、实验结果与分析1. 核酸鉴定：通过紫外分光光度计测定，DNA和RNA的吸光度分别为280 nm和260 nm。
2. 核酸定量：定磷法测定结果显示，DNA和RNA的磷含量分别为5.6 μg/ml和2.8 μg/ml，计算其浓度分别为1.6 μg/ml和0.8 μg/ml。
脑组织匀浆
而是将需要匀浆的脑组织取出后，用冰的生理盐水清洗去血块，再用滤纸吸干水分，称重记录。
放入匀浆器口，用冰过的小剪刀稍剪碎，因为这样匀浆会更快一些。
按你需要的配比（我们用1：10）分2-3次加入冰的生理盐水匀浆。
做完一批后迅速去离心，然后取上清液，冷冻保存。
具体的步骤:
1、麻醉：腹腔注射复合麻醉剂，0.2ml/100g；
2、消毒：碘酒酒精消毒，碘酒两遍，酒精一遍；
3、快速断头：注意要用锋利的剪刀。
4、迅速剪开头皮，暴露颅骨，用消毒的咬骨钳迅速掀去颅骨，暴露大脑，用剪刀剪取脑时有几个步骤需要注意：
1---鼠脑不大因此很难把持，可以上来就先断头，然后左手用一止血钳夹住断端骨2---右手持剪，从鼠头背面颈根部一直剪到近鼻尖处，在这些地方不用太讲究，开3---用剪刀从颈根部骨面剪开个小口，就着这个口，用蚊氏钳把一些外周的的组织4---然后把钳子的一只脚伸到剪开的一侧颅骨骨面下，夹的面积尽量大一些，然后5---把鼠头调转过来，这时露出最头侧的神经，将其剪断，按照上面站友介绍的办那我来告诉你方法：
1，已醚麻醉；
2，断头；
3，沿双眼剪开；
4，双眼中点向后剪开至延髓平面，形成T字开口；
5，换成咬骨钳，延T字开口将颅骨翻向两侧，
6，标本浸入冰水（脑脊液）中，以称药勺刮断连接的脑神经，整脑既完成。
熟练者从2-6约需要10秒。
微生物实验室匀浆器操作规程
微生物实验室匀浆器操作规程1 玻璃组织匀浆器品名匀浆器2 规格2ml 5ml 10ml3玻璃匀浆器材质高硼硅玻璃95料4用途玻璃匀浆器的作用：让玻璃管与柱塞之间微小的缝隙和细微的凹凸咬合,将其柱塞转动时,产生碾切作用,使生物细胞和其他较硬的细胞组织被轻易的碾特点：采用优质玻璃原料，纯手工精密烧制而成.5 玻璃组织匀浆器使用方法5.1 冲洗,高压灭菌备用。
5.2选择合适的匀浆缓冲液,左手持玻璃管中部，右手持柱塞顶部，用力研磨。
5.3 在冰上匀浆,匀的次数依实验样品和目的而定5.4 匀浆完毕,倒出样品。
5.5 冲洗，高压灭菌备用。
6 注意事项6.1打开匀浆器以前，匀浆器停止工作至少一分钟以使气溶胶沉淀。
6.2在感染组织或材料用任何开放的装置研成粉的工作最好在生物安全柜内操作。
6.3玻璃研磨器易碎，不适合用于传染性物质的操作。
7目的正确及时地处理临床标本，防止错漏事故的发生。
8标本种类1.血液及骨髓标本分离操作规程2.导管标本分离操作规程3.脑脊液标本分离操作规程4.胸腹水标本分离操作规程5.胆汁标本分离操作规程6.心包炎标本分离操作规程7关节炎标本分离操作规程8.鞘膜积液标本分离操作规程9.下呼吸道标本分离操作规程10.上呼吸道标本分离操作规程11.尿标本分离操作规程12.粪便标本分离操作规程13.伤口分泌物标本分离操作规程14.女性生殖系统标本分离操作规程15.男性生殖系统标本分离操作规程16.组织标本分离操作规程17.真菌培养标本分离操作规程以上操作规程请参考SOP。
tissuelyser lt动物组织匀浆参数
tissuelyser lt动物组织匀浆参数一、引言动物组织匀浆参数是动物实验中非常重要的参数之一，它直接影响到实验结果的准确性和可靠性。
Tissuelyser是一种常用的组织匀浆设备，其参数设置直接影响匀浆的效果。
二、设备原理Tissuelyser是一种用于破碎组织并将其混合均匀的实验室设备。
它采用高速旋转刀片和震动原理，将组织破碎成微小的颗粒，并使组织细胞充分混合，达到实验所需的匀浆效果。
三、操作步骤1. 准备材料：选择合适的动物组织，清洗干净并切成适当大小的块。
准备好所需的试剂和溶液。
2. 安装组织块：将组织块放入Tissuelyser的样品容器中，注意要保持组织的完整性。
3. 设置参数：根据实验要求，设置适当的匀浆参数，包括转速、时间、震幅等。
4. 启动设备：启动Tissuelyser，观察设备的运行状态。
5. 结束设备：停止设备运行，取出样品容器，进行后续实验操作。
四、参数设置匀浆参数的设置直接影响匀浆的效果，因此需要根据实验要求和组织类型选择合适的参数。
一般来说，转速越高、时间越长、震幅越大，匀浆效果越好，但同时也需要注意设备的承受能力和实验的安全性。
以下是一些常见的匀浆参数设置：1. 转速：根据组织的类型和大小，选择适当的转速范围。
但需要注意设备的承受能力。
2. 时间：根据实验要求和组织类型，选择适当的时间范围。
一般来说，时间越长，匀浆效果越好。
但需要注意设备的运行状态和实验的安全性。
3. 震幅：震幅会影响组织的破碎程度和混合效果。
一般来说，震幅越大，组织的破碎和混合效果越好。
但需要注意设备的震动稳定性。
五、注意事项1. 在使用Tissuelyser之前，需要检查设备的运行状态和完好性，确保设备能够正常运行。
2. 在操作过程中，需要保持手部和身体的清洁卫生，避免交叉污染。
3. 在设置参数时，需要根据实验要求和组织类型选择合适的参数，避免设备承受过载或损坏。
4. 在操作过程中，需要密切关注设备的运行状态，如发现异常情况，需要及时停止设备并检查设备状态。
匀浆仪匀浆器安全操作及保养规程
匀浆仪匀浆器安全操作及保养规程匀浆仪匀浆器是一种常见的实验室设备，广泛应用于物质的混合、匀浆、分散等操作中。
正确的操作和保养能够保证设备的正常运行，延长使用寿命，避免事故的发生。
本文将介绍匀浆仪匀浆器的安全操作和保养规程。
安全操作1.确认试验室内的电源电压是否与设备相符，并进行接地。
2.在使用前进行设备内部的清洁，检查设备的各项功能是否正常。
如果有发现故障，请及时维修。
3.在操作前，应当佩戴适当的防护手套、眼镜等防护装备。
避免发生身体伤害。
4.将待测液体倒入匀浆器内，同时注意不要超过容器的最大容量。
超过容器的容量可能造成设备损坏或者液体溢出。
5.启动设备时应当慢慢加速，避免瞬间启动，以免造成液体喷洒等意外事故。
6.操作时不要轻易打开设备内部的盖子，以免不必要的飞溅和损伤。
7.停止操作后，应将设备内的液体倒入正确的容器内，避免造成环境污染和设备损坏。
保养规程1.清理和维护设备，避免沉积物或其他物质在设备中累积。
可以使用清洁剂清洗设备。
2.定期更换设备内的滤网和秤盘，避免过多的污染物在设备内累积。
3.检查设备的机械部件，包括轴承、电机等。
如果发现任何不正常情况，应找专业人员进行维修。
4.避免设备在潮湿和高温环境下存放，以避免腐蚀和电路老化。
5.对于长时间不使用的设备，应该进行定期检查和保养。
在拆卸设备之前，最好先对设备进行相关的清洁和维护。
通过正确的安全操作和保养规程，可以保证匀浆仪匀浆器设备的安全和稳定性。
如果您有任何疑问或者需要帮助，请及时联系设备的供应商或专业维修机构。
无菌均质器的使用如何 均质器是如何工作的
无菌均质器的使用如何均质器是如何工作的无菌均质器又称拍打式匀浆机，拍打式匀浆器。
紧要用于生物技术领域的组织分散、医药领域的样品准备、食品工业的酶处理以及在制药工业、化妆品工业、油漆工业和石无菌均质器又称拍打式匀浆机，拍打式匀浆器。
紧要用于生物技术领域的组织分散、医药领域的样品准备、食品工业的酶处理以及在制药工业、化妆品工业、油漆工业和石油化工等方面。
该装置设有全开启式玻璃透亮窗口门，易于清洗，玻璃透亮窗口易于察看。
接受大屏幕液晶显示，工作时间和均质速度智能可调，拍击器也可任意调整前后距离。
可有效的分别试验样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品使用一次性无菌均质滤袋隔离操作，保证卫生和安全，不与仪器接触；无样品泄露而不需进行系统清洗，具有便利快速、结果精准、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点，重复性好的要求。
本产品也适合肿瘤组织（如肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌）的匀浆，既可得到大量的单细胞。
必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞实现柔嫩的碎裂。
无菌均质器是使从固体样品中提取细菌的过程变得特别简单，只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中，然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。
有效地分别被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品，确保无菌袋中混合全部的样品。
处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析，没有样品的变化和交叉污染的不安全。
在使用无菌均质器时，有八个需要注意的地方，正确对待这些问题，可以使均质器更好的为您服务。
1）电源插头必需插紧到位，显现松动可能影响电脑掌控器造成死机，如显现死机现象，请关闭后侧电源开关，关机3分钟后重新启动。
2）在锤击板工作时请不要任意打开均质器门，以免样品液溢出。
应按“开/停”建，设备自动停止运行。
当把门关上后，再按“开/停”建，设备自动完成余下工作。
切勿颠倒操作。
3）仪器长期不使用应切断电源，拨去插头。
防止无菌均质器内部电子元器件老化。
原代细胞提取实验报告
一、实验目的本实验旨在学习并掌握原代细胞提取的基本操作流程，了解细胞培养的基本原理，熟悉实验器材的使用方法，以及细胞分离与纯化的技术。
二、实验原理原代细胞提取是指从生物体中获取某种组织或细胞，在体外模拟体内生理条件下，使其生存、生长、繁殖或传代的过程。
通过原代细胞培养，可以研究细胞的生长、分化、转化、毒性测试等方面的生物学特性。
本实验采用组织块消化法进行原代细胞提取。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）动物组织（如肝脏、肾脏等）（2）磷酸盐缓冲盐水（PBS）（3）胰蛋白酶（4）胎牛血清（FBS）（5）MEM基础培养基（6）Hepes（7）多聚赖氨酸2. 实验仪器：（1）组织匀浆器（2）CO2培养箱（3）倒置显微镜（4）离心机（5）移液器四、实验步骤1. 取材：将动物组织（如肝脏）置于解剖盘中，用剪刀剪去多余脂肪和血管，保留肝实质。
将肝实质放入含有适量PBS的离心管中，轻轻漂洗，去除血液。
2. 组织块消化：将处理好的肝组织放入含有适量胰蛋白酶的离心管中，37℃水浴消化30分钟。
3. 细胞分离：将消化好的组织块用组织匀浆器充分匀浆，然后加入适量FBS终止消化反应。
4. 离心：将匀浆后的细胞悬液以1000r/min离心5分钟，弃去上清液。
5. 洗涤：用适量PBS洗涤细胞沉淀，重复2次。
6. 重悬：将洗涤后的细胞沉淀用适量MEM培养基重悬，调整细胞浓度为1×10^6 cells/ml。
7. 培养细胞：将重悬后的细胞悬液接种于培养瓶中，放入CO2培养箱培养。
8. 观察与记录：定期观察细胞生长情况，记录细胞形态、密度等。
五、实验结果1. 细胞形态：培养初期，细胞呈圆形或不规则形，细胞核明显，细胞密度逐渐增加。
2. 细胞生长：细胞生长迅速，细胞密度逐渐增加，形成单层细胞。
六、实验讨论1. 原代细胞提取过程中，取材和消化是关键步骤。
取材时应注意组织的新鲜度和完整性，避免机械损伤。
消化过程中，温度和时间对细胞活力有很大影响，应严格控制。
JJ—2组织捣碎匀浆机操作规程
JJ—2组织捣碎匀浆机操作规程
1 开机前的准备
1.1 查看“仪器使用记录”，保证设备正常。
1.2 正确安装捣碎匀浆棒，捣碎匀浆杯。
将样品放入捣碎匀浆杯。
2 开机及操作
2.1 接通220V电源，打开电源开关。
2.2 设定时间，将定时旋钮调至“定时”或“常开”位置。
2.3 缓慢调节调速旋钮，升至所需转速。
2.4 设定时间到或被打碎物达到需要程度时，停止打碎。
3 关机
3.1 工作完毕，将调速旋钮置于最小位置，定时器置“零”，关闭电源开关，切断电源。
3.2 对检测仪器及现场进行清洁。
3.3 填写仪器使用记录。
4 维护保养
4.1 擦拭清洗或烘干匀浆杯和匀浆棒，其上不允许有水滴、污物残留。
4.2 在捣碎匀浆过程，仪器设备若出现异常情况，应立即停止测试，上报单位协调处理。
玻璃手动匀浆器构造
玻璃手动匀浆器构造一、什么是玻璃手动匀浆器玻璃手动匀浆器是一种用于将糊状材料进行均匀混合的装置。
它由玻璃制成，具有透明度高、耐腐蚀性好等优点，常用于实验室、制药工业等领域。
二、构造要点为了确保玻璃手动匀浆器的正常使用，需要考虑以下几个构造要点：1. 材料选择玻璃手动匀浆器的制作材料应选用优质玻璃，以确保其透明度高，能够清晰观察到匀浆的过程。
此外，玻璃材料应具备耐腐蚀性，以保证在浆料中使用时不受损。
2. 设计形状玻璃手动匀浆器通常采用长颈瓶形状，底部呈扁圆锥状，顶部和底部通过一个细长的颈管连接。
这种设计形状可以有效地实现材料的混合与流动。
3. 底部结构玻璃手动匀浆器底部应设计为扁圆锥状，以增加混合时的搅拌效果。
底部还应该设置一个凸起的中央点，用于集中浆料流动，并增加搅拌的强度。
4. 颈管设计玻璃手动匀浆器的顶部和底部通过一个细长的颈管连接。
颈管应设计为适当的长度和直径，以便于搅拌时浆料的流动和混合。
此外，颈管的长度还应考虑到操作者手部的便捷性。
三、制作过程制作玻璃手动匀浆器的过程如下：1. 制备玻璃材料首先，选择适宜的玻璃材料，并将其切割成所需形状和尺寸的玻璃片。
2. 加工玻璃片将玻璃片经过研磨、打磨等工艺，使其表面平整光滑，并去除边缘的棱角。
3. 连接底部将一个扁圆锥形的玻璃底部与玻璃片的底部连接，可以采用玻璃粘合剂或高温焊接等方法。
确保连接处牢固。
4. 加工颈管在玻璃片的顶部加工一个细长的颈管，可以采用玻璃钎焊或高温加工等方法。
注意控制颈管的长度和直径。
5. 光滑处理将玻璃手动匀浆器的表面进行光滑处理，以增加观察效果和操作舒适性。
6. 清洗和消毒制成玻璃手动匀浆器后，需要进行清洗和消毒，以确保无菌状态和使用安全。
四、使用方法使用玻璃手动匀浆器进行均浆操作时，需要按照以下步骤进行：1.将需要均匀混合的浆料倒入玻璃手动匀浆器中。
2.用手握住颈管处，将手动匀浆器托举起来。
3.以适当的频率和力度，将手动匀浆器上下晃动或旋转，使浆料进行均匀混合。
玻璃匀浆器原理
玻璃匀浆器原理1. 引言玻璃匀浆器是一种用于制备玻璃浆料的设备，它的原理是通过机械作用将玻璃粉末和溶剂充分混合，从而得到均匀的玻璃浆料。
本文将深入探讨玻璃匀浆器的原理及其应用。
2. 玻璃匀浆器的结构玻璃匀浆器主要由以下几个部分组成：2.1. 搅拌器搅拌器是玻璃匀浆器的核心组件，它以定速或变速旋转的方式将玻璃粉末和溶剂进行混合。
搅拌器的旋转速度和搅拌时间对最终的浆料质量有重要影响。
2.2. 容器容器是用于装载玻璃粉末和溶剂的部分，它通常由耐酸碱、耐高温的材料制成，如不锈钢或陶瓷材料。
2.3. 电机和传动装置电机和传动装置用于驱动搅拌器的旋转运动，通常采用电动机和齿轮传动结构。
电机的功率和转速应根据需要进行选择。
2.4. 加料口和排渣口加料口用于将玻璃粉末和溶剂输入到容器中，排渣口用于排除废料和残留物。
3. 玻璃匀浆器的工作原理在制备玻璃浆料的过程中，玻璃粉末和溶剂首先被放入容器中，然后启动搅拌器让玻璃粉末和溶剂充分混合。
通过搅拌器的旋转，玻璃粉末与溶剂之间发生机械作用，使得玻璃粉末逐渐分散于溶剂中，并形成均匀的浆料。
玻璃粉末与溶剂的混合过程中，需要注意以下几点：3.1. 选择合适的搅拌参数搅拌器的旋转速度和搅拌时间是影响玻璃粉末与溶剂混合效果的关键参数。
合理选择搅拌参数可以确保浆料的均匀性和稳定性。
3.2. 控制溶剂的添加速度溶剂的添加速度应适中，过快或过慢都会影响玻璃粉末与溶剂的混合效果。
一般来说，先将一部分溶剂加入容器中，搅拌均匀后再逐渐添加剩余的溶剂。
3.3. 考虑玻璃粉末的特性不同类型的玻璃粉末具有不同的特性，如粒径大小、形状等，这些特性会影响玻璃粉末与溶剂的混合情况。
在制备浆料时，需要针对不同的玻璃粉末选择合适的工艺参数。
4. 玻璃匀浆器的应用玻璃匀浆器广泛应用于玻璃工艺品、玻璃纤维和光纤等行业。
它可以用于制备各种类型的玻璃浆料，满足不同工艺要求。
玻璃匀浆器的应用具有以下几个优点：4.1. 提高生产效率相比传统的制备方法，玻璃匀浆器可以快速、高效地制备玻璃浆料，大大提高生产效率。
玻璃匀浆器的使用方法
玻璃匀浆器的使用方法
玻璃匀浆器是一种用于混合和搅拌液体材料的工具，通常用于制作化妆品、涂料、油漆、胶水等。
以下是玻璃匀浆器的使用方法：
1. 准备工作：将需要混合的材料准备好，将玻璃匀浆器和搅拌棒清洗干净并消毒。
2. 将需要混合的材料倒入玻璃匀浆器中，注意不要超过容器的容积。
3. 将搅拌棒插入玻璃匀浆器中，调整搅拌棒的深度，使其与液体表面保持一定的距离。
4. 打开玻璃匀浆器的电源，开始搅拌。
搅拌的速度可以根据需要进行调整，一般来说，速度越快，混合效果越好。
5. 搅拌过程中，可以适时停止搅拌，用搅拌棒将液体表面上的气泡排除，以保证混合均匀。
6. 混合完成后，关闭电源，将搅拌棒取出，将混合好的材料倒出即可。
7. 使用完毕后，将玻璃匀浆器和搅拌棒清洗干净并消毒，以便下次使用。
需要注意的是，玻璃匀浆器的使用过程中要注意安全，避免触电和烫伤等意外事故的发生。
同时，不同的材料混合时需要注意比例和混合时间，以保证混合效果和质量。
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各类均质器一览
——仅用于奥然公司培训
1.研磨珠敲打式均质器（珠磨式均质器，珠磨式匀浆机），珠子高速敲打
用途：动、植物组织（含甲壳类、单细胞藻类等）及的破碎细菌、真菌类微生物、裂解，以利于DNA/RNA、蛋白质、细胞器甚至是小分子化合物的分离提取；
主要品牌：法国Bertin，美国Biospec，美国MP bio，美国SPEX，瑞士Roche，德国Retsh，德国Qiagen
2.研磨式均质器（匀浆机），研磨杵、研磨管高速摩擦
用途：动、植物组织及细菌、真菌等的破碎、裂解，以利于DNA/RNA、蛋白质的分离提取，小型研磨管/杵适合实验室微量生物样品，大型研磨管/杵适合工业类样品
主要品牌：德国Schuett，宁波新芝，德国Retsh，日本Microtec
3.探头式均质器（匀浆机），定子、转子高速旋转形成剪切力
用途：动、植物组织以利于DNA/RNA、蛋白质的分离提取；大型设备可以用户工业样品的乳剂、霜剂制备
主要品牌：美国Biospec，美国Talboys，德国IKA（广州产），瑞士Kinematica 4.超声波均质器（超声波破碎），气穴原理
用途：细菌、真菌、单细胞藻类的破碎、裂解，以利于DNA/RNA、蛋白质的分离提取。
工业上用户样品的破碎、乳化、混匀等
主要品牌：美国Misonix，美国Sonics，美国Branson(中国产)
5.刀片式均质器（刀片式匀浆机），刀片高速切割
用途：样品的进行细碎、匀化、分散、强烈搅拌、溶解有机物等
主要品牌：美国Talboys，美国Waring，德国IKA，瑞士Consul，诸多国产品
6.拍打式均质器（拍打式匀浆机），样品在无菌袋中被慢速敲打
用途：活细菌、寄生虫/卵的提取，及活组织细胞的分离培养。
多用于食品（水果、蔬菜、肉类）的检验检疫，以及土壤、环境行业的研究。
主要品牌：法国Interscience，英国Seward，天津恒奥
7.高压均质器（高压匀浆机），高压促使细胞破碎
用途：细菌、真菌等的破碎、裂解。
制药行业的乳剂、擦剂/霜剂、脂质制备等。
中试级以上的实验室，更多的直接用于生产
主要品牌：各国品牌种类繁多，不再列举。