TLC展开剂选择及显色剂的总结
TLC技术原理与经验分享
TLC（硅胶板薄层色谱）被广泛的称为“化学家的眼睛”，当“眼睛”看不清楚的时候，才会借助放大镜或者近视镜（HPLC，GC等等）。
熟练准确快速的使用TLC技术对提高化学工作的效率至关重要新药研发合成部分，在平时工作中，很多时候是靠TLC进行快速检测，如果仅靠紫外灯这种手段，会忽略掉很多有用的信息，导致重复劳动，或者武断放弃一种合成思路。
一下为常用显色原理，均为个人理解整理，进攻参考。
TLC展开剂的显色原理介绍与讨论一、显色原理硫酸乙醇溶液喷洒10%硫酸乙醇溶液而显色，是利用硫酸的碳化效果。
一般用来薄层层析分离的都是有机化合物，展开，溶媒挥发干以后，有机物就留在板上。
浓硫酸理论上可以对任何有机物碳化。
喷洒10%硫酸乙醇溶液，待烘干之后并继续加热，有机物就因为碳化而现实偏黑色。
乙醇挥发很快，留下硫酸使得有机物脱水，看到的颜色可能是褐色、灰色、偏蓝色，所以我前面写了偏黑色，实际可能要淡一点的，有些扩散的样子。
任何有机物都用可以用10%硫酸乙醇溶液。
溴甲酚绿（pKa≤5.0，与pH区别）方法一：溴甲酚绿指示液：取溴甲酚绿0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液2.8ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。
变色范围pH3.6～5.2（黄→蓝）方法二：溴甲酚绿指示液(1 g／L) ：称取0．1 g溴甲酚绿，溶于乙醇(95％)，用乙醇(95％)稀释至100 mL。
The acid dissociation constant (p K a) of this reaction is 4.82,4-二硝基苯肼碘碘为广谱可逆显色试剂，尤其对具有不饱和键，共轭体系（芳烃），含有孤电子对的杂原子官能团（羟基、氨基、巯基等等）有明显效果。
原理解释（仅供参考）为碘吸附作用，放置一段时间解吸附消失。
可以理解为碘的较高极化性，是的带形式正电荷的碘正离子生成，对具有孤电子对、可极化的π电子产生亲电性吸附作用。
茚三酮对α-氨基酸的显色机理：对氨基（伯胺和仲胺）的显色机理：三氯化铁络合物为紫色化合物高锰酸钾：含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛。
展开剂与显色剂的选择
展开剂的选择：一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用单一溶剂，往往不能达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用，常用的溶剂组合有：Petroleumether/Ethylacetate,petroleumether/Acetone,Petroleumether/Ether, Petroleumether/CH2Cl2, ethylacetate/MeOH,CHCl3/ethylacetate展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。
展开剂的选择条件：①对的所需成分有良好的溶解性；②可使成分间分开；③待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；④不与待测组分或吸附剂发生化学反应；⑤沸点适中，黏度较小；⑥展开后组分斑点圆且集中；⑦混合溶剂最好用新鲜配制。
一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离；中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。
一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例（或者加入第三种溶剂）,达到最佳效果；如果没有分开的迹象（斑点较“拖”），最好是换溶剂。
经验分享柱层析TLC以及展开剂的选择
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TLC遇到拖尾现象？
1、首先考虑的是样品浓度过大，薄层板过载导致。 这种情况直接降低样品浓度或者是上样量就可以 验证了。
2、样品对硅胶的吸附能力过强导致的拖尾。 对不同体系加入不同的调节剂，酸体系加冰醋酸， 碱体系加氨水。
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TLC遇到拖尾现象？
3、展开剂的极性与样品极性不附，不能做到有 效展开导致。 可以通过调节展开剂极性解决。 4、如果是长带状，那最可能的原因是展开剂对 样品的溶解度不够所导致。 可以根据极性表换极性相近的对样品溶解度 更好的溶剂做展开剂。
TLC中展开剂的选择
浅谈TLC中展开剂的选择摘要：展开剂是平面色谱法中作流动相的液体。
展开剂的主要任务是溶解被分离物质在吸附薄层转移分离物质，使各组分的Rf值在0.2～0.8之间，并对被分离物质要有适当的选择性。
文章综述了薄层色谱的展开剂根据样品本身的性质以及吸附剂的类型而选择的各种理论以及对相关分析介绍的描述，以便快速、简便地选择展开剂。
关键词：薄层色谱；展开剂；TLC；样品极性中图分类号：TQ646文献标识码：A文章编号：1009-2374（2009）07-0044-02由于薄层色谱具有设备简单，操作简易；展开速度快；分离能力强，斑点集中；灵敏度高；样品用量少等特点而被广泛地应用到化学合成、天然药物的定性鉴别和纯度检验中，其在化学分析中的重要性突显，其主要表现在分离效果上，而分离效果则主要有样品、吸附剂及展开剂等三个因素决定的。
三者中样品的性质（如溶解度、酸碱性及极性）是固定的。
吸附剂的活性和非活性，在吸附薄层色谱中通常以硅胶为主，故种类也是有限的。
而展开剂种类则千变万化，并且受制约的因素比较多，主要的还是样品的性质和吸附剂。
因此可以这样说能找到与样品及吸附剂相匹配的展开剂就能对样品的分离起决定性作用。
以下就对展开剂的选择作一探讨：一、作为展开剂用的溶剂应满足的条件1．合适的纯度。
至少要用AR试剂，展开剂如有杂质，则会直接影响分离效果。
如三氯甲烷、乙酸乙酯和乙醚中含有少量的醇和水会使其极性增大；芳香烃中含有杂环化合物和酚类物质，卤化烃中含有游离酸也会使极性增大；三氯甲烷中的光气、乙醚中的过氧化物有可能氧化或破坏被分离组分等。
2．适当的稳定性。
一般不用三氯甲烷，因其中的乙醇量不够则易生成光气。
3．低黏度。
能使其迅速展开。
4．沸点和挥发性集中。
展开后能快速地在薄层上挥发样品，不影响显色和定量；挥发性过弱，饱和时间过长，不利于展开，过强则在展开过程中易冲盖而导致系统不饱和致使实验失败。
5．要尽可能的低毒性。
要充分考虑实验者自身的身体健康。
TLC展开剂选择及显色剂的总结
TLC展开剂选择及显色剂的总结(转自中国色谱网)★huyuchem(金币+1):谢谢选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用单一溶剂，往往不能达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用，常用的溶剂组合有：Petroleumether/Ethylacetate,petroleumether/Acetone,Petroleumether/Ether,Petroleumether/CH2Cl2, ethylacetate/MeOH,CHCl3/ethylacetate展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。
展开剂的选择条件：①对的所需成分有良好的溶解性；②可使成分间分开；③待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；④不与待测组分或吸附剂发生化学反应；⑤沸点适中，黏度较小；⑥展开后组分斑点圆且集中；⑦混合溶剂最好用新鲜配制。
一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离；中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。
我们在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有效分离，曾经尝试了很多种的溶剂组合，最后才找到石油醚—EtOAc—HCOOH（5.5：3.5：0.1）混合溶剂。
TLC常用展开剂及应用
1、生物碱(1 )沉淀反应一一碘化汞钾试剂T白色或浅黄色沉淀碘化铋钾试剂T橘红色沉淀碘一碘化钾试剂T浅棕或暗棕色沉淀硅钨酸试剂T浅黄或黄棕色沉淀磷钨酸试剂T浅黄色沉淀磷钼酸试剂T白色或淡黄色沉淀苦味酸试剂T黄色结晶或非结晶形沉淀鞣酸试剂T棕黄色沉淀氯化金试剂T黄色结晶氯化铂试剂T白色结晶雷氏铵盐T红色无定形沉淀(2 )薄层层析检查：吸附剂一一碱性氧化铝(川级，干法铺板)硅胶G (稀碱湿法铺板)展开剂一一氯仿：甲醇显色一一UV;碘化铋钾2、氨基酸、多肽、蛋白质(1)加热沉淀试验：加热煮沸T混浊或沉淀(蛋白质)+5%H2SO4 (不加热)T混浊或沉淀(2)双缩脲反应：+40%NaOH , 1%CuSO4 T紫色、红色或紫红色(多肽、蛋白质)(3)茚三酮反应：+0.2%茚三酮试液T蓝或蓝紫色(氨基酸、多肽、蛋白质)(4)吲哚醌反应：+吲哚醌试液T各种颜色(氨基酸)(5)Millon反应：+Hg , H2NO2 T红色(蛋白质分子中有酪氨酸组成)(6)Hopkins-Cole反应：+乙醛酸，浓硫酸T各色(蛋白质分子中有色氨酸组成)(7)氨基酸的薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G展开剂——n-BuOH , n-BuOH : HAc: H2O显色剂一一0.25%茚三酮试液T紫红色斑点3、有机酸(1)PH试纸检查(2)溴酚兰试液：喷洒T蓝色背景黄色斑点(3 )薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G或酸性氧化铝展开剂——C6H6 : EtOH显色剂一一0.1%溴酚兰试液T黄色4、酚类和鞣质(1)FeCI3试剂：+1%FeCI3试液T蓝、暗绿或蓝紫色(2 )三氯化铁-铁氰化钾试剂：喷洒T蓝色斑点(3)香草醛-盐酸试剂：喷洒T红色(间苯二酚、间苯三酚)(4)重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠T红色(5 )薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G或纤维素展开剂——n-BuOH : HAc: H2O; 15%HAc显色剂一一1% FeCl3试液1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液T蓝、绿或黑色鞣质与酚类的区别：+明胶一一沉淀上清液+1%FeCI3试液T蓝、暗绿或蓝紫色5、糖和苷(1)斐林试剂：+硫酸铜、酒石酸钾钠砖红色沉淀(还原糖)(—)+1%HCI +NaOH 沉淀(苷元)△ 30min 上清液(+ )(多糖、苷)(2)Molish反应：+ a-萘酚-浓硫酸T紫红色环(3)银镜反应：+0.1N硝酸银、5N氨水T银褐色(还原糖)(4 )薄层层析检查：：吸附剂一一硅胶G或纤维素展开剂——n-BuOH : Pd : H2O ; 15%HAc显色剂---- 苯胺-邻苯二甲酸6、皂苷(1 )泡末试验：振摇T大量持续性泡末+0.1M HCl 二管泡末高度相同(三萜皂苷)+0.1M NaOH 碱管高于酸管(甾体皂苷)(2)溶血试验：+2%红血球悬浮液T溶血(3) ---------------------------------------------------------------------- Lieberman —Burchard反应：+醋酐-浓硫酸紫红色(三萜皂苷)黄-红-紫-污绿(甾体皂苷)7、甾体(1)Lieberman —Burchard反应：+醋酐-浓硫酸T黄-红-紫-污绿(2)氯仿-浓硫酸反应：+氯仿-浓硫酸氯仿层T红或青色硫酸层T绿色荧光(3)五氯化锑或三氯化锑反应：+SbCI3或SbCI5 T红色(4 )薄层层析检查：吸附剂一一中性氧化铝或硅胶G展开剂——C6H6-MeOH ; CHCl3-MeOH显色剂一一10%磷钼酸T蓝-蓝紫色5%三氯化锑试液T红、棕红或绿色8、黄酮(1)盐酸-镁粉反应：+HCl-Mg T红色(2 )三氯化铝反应：+AlCl3 T黄色(3)浓氨水反应：+NH3 T亮黄或橙色(4 )薄层层析检查：吸附剂一一聚酰胺或硅胶G展开剂——MeOH-H2O ; EtOH-H2O显色剂一一UV T亮黄或黄绿色荧光1%三氯化铝试液T亮黄色9、香豆素、内酯(1)开闭环反应：+1%NaOH T澄清+2%HCl T混浊(2)异羟污酸铁反应：+7%盐酸羟胺、10%KOH △ +稀HCl、1%FeCl3 T红色(3)重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠T红色(4 )薄层层析检查：吸附剂一一酸性硅胶G或硅胶G或酸性氧化铝展开剂——甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5 : 4 : 1)显色剂——UV T蓝色荧光异羟污酸铁试液T红色10、强心苷(1)Kedde试剂：+3 , 5-二硝基苯甲酸试液T紫红色(2)Baljet试剂：+碱性苦味酸试液T橙或橙红色(3)Legal试剂：+亚硝酰铁氰化钠试液T紫红色(4)K-K反应：+FeC⑶冰HAc、浓H2SO4 T 上层绿~蓝色(2-去氧糖)界面红棕色(5)薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G或中性氧化铝展开剂——n-BuOH : HAc: H2O (4 : 1 : 5)显色剂一一碱性3 , 5-二硝基苯甲酸试液T紫红色碱性苦味酸试液T橙红色11、蒽醌(1)碱液反应：+10%NaOH T红色+H2O2 T红色不褪+H+ T红色褪去(2)醋酸镁反应：+1%MgAc2 T红色(3 )薄层层析检查：吸附剂一一硅胶G展开剂—— Pet: EtOAc显色剂一一UV T黄色荧光5%NaOH T红色12、挥发油、油脂(1 )油斑检查：油斑挥发T挥发油；油斑不消失T油脂或类脂(2)磷钼酸反应：喷洒5%磷钼酸试液T蓝色(油脂、三萜、甾醇)TLC Visualizatio n Reage ntsThis is a brief selectio n of the many available TLC visualizati on reage nts. Below each title is the type of compo unds or structure which can be detected with the specific reage nt. When begi nning work with these reage nts, acquired any MSDS (material safety data sheets) to see if there are any extra precauti ons n eeded in safely using them.Before spraying, plates should be well dried in the hood of residual solvents and comp onen ts. Ami nes and orga nic acids used in the mobile phases may adversely affect the visualizati on react ion being attempted. If heat ing to remove these comp onents is done, con siderati on should be give n so that loss of comp onents or their decompositi on is avoided (by loweri ng the temperature or using a shorter t ime in the ove n).Always spray any of these reage nts onto plates in a well ven tilated hood while weari ng safety glasses. Also apply moderate amounts to the plate so it always appears dull and flat (if it looks wet, you have sprayed too much). You can alway s overspray to enhance thedetect ion.When in formati on about the results of using the visualizati on reage nts was available, this was put un dereach reage nt as ‘ Results If not. give, the user will have to do a few experime nts to see what the results might be.Always remember to look un der no rmal light and also short and long wavele ngth UV light so as not to miss any possibilities.Many of the reage nts for these visualizers can be found in the EMD Chemicals catalog or on the website ( ).Alumi nium chlorideFor flav ono idsSpray plate with a 1% etha nolic soluti on of alumi num chloride.Results: Yellow fluoresce nee in long wavele ngth UV light (36 Onm)4-Ami noan tipyri ne/potassium hexacya nferrate (III) (Emers on reacti on)(Emers on reage nt) for the detect ion of phe nols and arylam inesSoluti on I: 1g aminoan tipyri ne (4-am in ophe nazone) in 100ml 80% etha nolSoluti on II: 4g potassium hexacya no ferrate (III) in 20ml water , fill to 100ml with etha no I Procedure:Spray with soluti on IDry 5 minu tes with warm airPlace chromatogram in a chamber with vapor from 25% ammonium soluti on, making surethat the layer doesnot con tact the liquid.Results: Red-ora nge to salm on pink spots2-Am ino ethyl diphe ny Iborate, see Etha no lam ine diphe ny IborateAmmonium metava nadate, ammonium monovan adate, see Van adium(V) / sulfuric acidAmmon ium molydbateFor detect ion of phosphoric acid derivativesSoluti on I: 1M perchloric acid in water/acet one (1:1)Solution II: ammon ium molybdate sol n: 5g (NH4)6Mo7O24.4 H2O in 35ml semi-co nc.Nitric acid and 65ml water .Solution III: Ti n (II) chloride sol n: 0.5g Sn Cl2.2 H2O in 100ml 0.5M hydrochloric acid:Dry developed chromatogram and heat to 60 CHydrolyse di- and triphosphates by spra ying perchloric acid (soluti on I) onto the warmplate. After spra ying 2times, dry plate slowly at 50 C. Amidophosphates might not be decomposed.In any case, spray the still warm plate with ammon ium molybdate soluti on (soluti on II)Then spray the still wet plate with tin (II) chloride soluti on (soluti on III)Results: Phosphates appear as blue to blue-green spots. Polyphosphates can also be detected by dipp ing theplates in a soluti on of ammon ium molybdate (1g) dissolved in water (8ml) and perchloricacid （3ml, ca. 70%）,filled up to 100ml with acet one. Then phosphates appear as yellow-gree n spots on a blue backgro und. Also seeMolybde num blue reactio n accord ing to Dittmer and Lester .Ani li ne phthalate （邻苯二甲酸胺）For the detect ion of reduci ng sugarsDry the developed chromatogramSpray with 0.93g an ili ne and 1.66g o-phthalic acid dissolved in 100ml n-buta nol saturated with water.Briefly dry with hot air , then heat to 105 C for 10 min utesResults: Substa nee spots show differe nt colors on an almost colorless backgro und. Some spots give fluoresce nee at 365nm.p-Anisaldehyde -sulfuric acid （对甲氧基苯甲醛-硫酸）For detect ion of phe no Is, sugars, steroids, and terpe nesSpray with a soluti on of freshly prepared 0.5ml p-a ni saldehyde in 50ml glacial acetic acidand 1ml 97% sulfuric acid. and heat to 105 ° C until maximum visualization of spots. The backgro und might be brighte ned by water vapor .Results: Liche n con stitue nts, phe no Is, terpe nes, sugars, and steroids turn violet, blue, red,grey or gree n.For detect ion of sugarsSpray with a soluti on of freshly prepared 1ml p-a ni saldehyde, 1ml 97% sulfuric acid in18ml ethanol and heat at110 ° C.Results: Sugar phe ny Ihydraz ones produce gree n-yellow spots in 3 min. Sugars will produce blue, gree n, violetspots in 10min. Also detects d igitalis glycosides.p-A nisidi ne HydrochlorideFor detect ion of carbohydrates / sugarsMix a solutio n of 3% p-a ni sid ine hydrochloride in n-buta nolSpray and heat at 100 ° C for 2-10min.Results: Aldohexoses are seen as green-brown spots, ketohexoses as yellow spots,aldope ntoses as gree nspots, and uronic acids as red spots.Ani sidi ne phthalateFor detect ion of carbohydrates and reduci ng sugarsSpray with a solution of 1.23 g p-a nisidi ne and 1.66g phthalic acid in 100ml 95% etha nol.Results: Hexoses, green; pentoses, red-violet - sensitiv ity 0.5ug; methylpentoses,yellow-gree n; uronic acids, brow n -se nsitivity 0.1-0.2ug.An timo ny (III) chloride (三氯化锑)For detect ion of flav ono idsSpray with a 10% solution of antimony (III) chloride in chloroform Results: Fluoresci ng spots in long wavele ngth light (36 Onm).Antimony (III) chlorideFor detect ion of vitam ins A & D, carote no ids, steroids, sapoge nins, steroid glycosides, terpenes Spray with a solution of 25g antimony (III) chloride in 75ml chloroform (generally asaturated soluti on ofan tio mony (III) chloride in chloroform or carb on tetrachloride is used).Heat 10min at 100C, view under long wavelength light (360nm).Bromi ne / Carbon tetrachloride (四氯化碳)For detect ion of orga no thiophosphorous pesticidesPlace chromatogram in a chamber with a 10% bromine and tetrachloride without con tact with the liquid.3Bromocresol gree nFor detect ion of orga nic acidsDip chromatogram in a soluti on of 0.1g bromocresol gree n in 500ml etha nol and 5ml 0.1M NaOHResults: Acids yield yellow spots on a blue backgro und.Bromthymol blueFor detecti on of lipids and phospholipidsReage nt: 0.1% bromthymol blue in 10% aqueous etha nol made just alkali ne with NH4OH Spray dried plate.Results: Compounds above produce blue-green colors; sensitiv ity 0.1- 1 卩g.Chlora nil reage nt For detecti on of phe nolsSpray with a soluti on of 1% tetrachloro-p-be nzoq uinone in tolue neChlori ne / o-tolidi neFor detecti on of of compo unds formi ng chloroam in es, e.g., urea derivatives, carbamated, an tibiotics Solution I: 160mg o-tolidine in 30ml glacial acetic acid, filled to 500ml with distilled water,plus 1g KI soluti onSolution II: saturated solution of o-tolidine in 2% acetic acid/0.85% KI solution (1:1, v/v) Procedure APlace chromatogram 15-20 min in a chlori ne atmosphere (e.g., Potassium perma ngan ate +10% Hydrochloricacid)Leave 5 minu tes at ambie nt temperature un til the chlori ne is evaporated completely(spray corner of plate to in sure no blue color is see n, show ing complete abse nee ofchlori ne).Spray with soluti on IProcedure BSpray with 2% potassium hypochlorite soluti on in waterLeave 1-1.5hr at ambie nt temperatureSpray with soluti on IICopper sulfate / phosphoric acid (硫酸铜-磷酸)Used as a charri ng reage nt for polymer bound TLC plates (the n ewer hard layer plates)Spray with a soluti on of 10% copper (II) sulfate in 10% phosphoric acidHeat 5-30min at 110 ° CResults: View freque ntly (every 5-10 min) to see if colored or fluoresce nt spots (at 254 and 360nm) can be seen.Charring can be continued until spots are brown, grey or black.Chromosulfuric acidSee un der Potassium dichromate / sulfuric acidDDQ Reage nt (Dichlorodicya noben zoq uinone)For detecti on of phe nolsSpray with a soluti on of 2% 2,3-dichloro-5,6-dicya no-1,4-be nzoq uinone in tolue neDichlorofluoresce in (二氯荧光黄)For the detect ion of sweete ners sacchari ne & cyclamateSpray with a 0.2% soluti on of dichlorofluoresce in in 96% etha nolDry with warm air; if n ecessary, spray with waterView under 360nm UV lightDichlorofluoresce in / fluoresce in sodium salt (荧光钠)For detect ion of N-substituted barbituratesSpray with a 0.1% etha no lie soluti on of dichlorofluoresce inThen spray with a 0.1% etha nolic soluti on of fluoresce in sodium salt2,6-Dichloro quinone -4- chloroimideFor detecti on of an tioxida nts, phe no Is, primary and sec on dary aliphatic amin es,sec on dary and tertiary aromaticamin es, aromatic hydrocarb ons, pharmaceuticals, phe no xyacetic acid herbicides, etcSpray with a freshly prepared 0.5-2% soluti on of 2,6-dichloro quinon e-4-chloroimide inetha nol (reage nt stablefor 3 weeks if refrigerated).Heat 10min at 110 C; treat with ammo nia vaporp-Dimethylam inoben zaldehydeFor detect ion of sulfo namidesSpray with a soluti on of 1% p-dimethylami noben zaldehyde in 5% hydrochloric acid; add 5% etha nolDetects sulfo namidesp- Dimethylam inoben zaldehyde / hydrochloric acid reage nt (Ehrlich For detect ion of amin es, in dolederivativesSpray with a soluti on of 1% p-dimethylami noben zaldehyde in cone, hydrochloricacid/metha nol (2:2)Heat plates for 20min at 50 C2,4-Di nitrophe nylhydraz ineFor detect ion of aldehydes and ket ones Spray plate with solution of 0.4 g 2,4-DNPH in100ml 2N hydrochloric acid, add 1ml etha nolResults: Yellow-red spots will be see n,Diphe ny lam ine (二苯胺)For detect ion of glycosides, glycolipidsReage nt: 10ml 10% diphe nylami ne in etha nol, 100ml HCl and 80ml glacial acetic acid Spray lightly, cover plate with ano ther glass plate, heat 30-40min at 110areas appearResults: Glycolipids produce blue spots,s-Diphe ny Icarbaz oneFor detect ion of barbituratesSpary with a solution of 0,1% s-diphenyIcarbazone in 95% ethanolResults: Barbiturates will produce purple spots2,2 -'iphenylpicrylhydrazylFor detect ion of aldehydes and ket onesReage nt: dissolve 15mg of 2,2 -DPPH in '25ml chloroformSpray, heat 5-10min at 110 ° C;Results: Yellow spots on a purple backgro und will be see n,Dithizone (双硫腙)For detect ion of heavy metal ionsDissolve 20mg dithiz one in 100ml acet one, store in a brow n bottle in a refrigeratorProcedure: s reage nt)C untilSpray with dithiz one soluti onSpray with 25% ammonia soluti onDittmer and LesterSee Molybde num blueDrage ndorff reage ntFor detect ion of n itroge n compo un ds, alkaloids, an tiarrhythmic drugs, surfacta ntsSolution 1) 1.7g basic bismuth nitrate and 20g tartaric acid in 80ml waterSolution 2) 16 g potassium iodide in 40ml waterStock soluti on (stable for several weeks in a refrigerator):Mix equal volumes of solutio ns 1 and 2Procedure:Spray with a solution of 10g tartaric acid, 50ml water and 5ml stock solutionEtha no lam ine diphe ny Iborate (flav one reage nt accord ing to Neu)For detect ion of flav ono idsSpray with a 1% soluti on of etha no lam ine diphe ny Iborate in metha nolSpray with a 5% ethanolic solution of polyyethylene glycol for fluorescence stabilization Irradiate 2 minutes with intense 365nm UV lightView under 365nm UV lightErhlich ' s reage ntSee p-Dimethylam inoben zaldehydeEmers on reage ntSee 4-am inoan tipyri ne/potassium hexa-cya no ferrate (III)Fast Blue B reage ntFor detect ion of cannabino ids, phe no Is, tanning age nts, amines with can be coupled Spray with a soluti on of 0.5g Fast Blue B (tetraazotized di-o-a ni sidi ne) in acet on e/water (9:1, v/v), always prepared freshThe n overspray with 0.1M sodium hydroxide soluti onResults: Cannabino ids tur n dark red/purple in colorFerric Chloride / sulfuric acidUsed as a charri ng reage nt for polymer bound TLC plates (the n ewer hard layer plates) Spray with a solution of 2g FeCl3 in 83ml n-butanol and 15ml cone, sulfuric acid.Heat 5-30min at 110 ° CResults: View freque ntly (every 5-10 min) to see if colored or fluoresce nt spots (at 254 and 360nm) can be see n.Charri ng can be con ti nued un til spots are brow n, grey or black.Flav one reage nt accord ing to NeuSee etha no lam ine diphe nyl borateFluorescam ineFor detecti on of primary and sec on dary amin es, peptides, sulfo namides, e.g.,n itrosoam ines after photolysisSpray plate with a solution of 0.1mg/ml 4-phe nyl-spiro[fura n-2(3H),1-phthala n]-3,3-dio nein acet one preparedfresh dailyFor stabilizati on of fluoresce nee at 366nm spray with 10g triethylam ine, brought to 100ml with dichlorometha ne.Fluoresce nt In dicatorFor detect ion of compo unds which absorb UV lightSome TLC plates whe n manu factured have an in orga nic fluoresce nt in dicator added to the slurry poured to make the final plates. This type of in dicator will not dissolve or elute off. They are activated at 254nm or 360nm (see recomme ndati ons of the manu facturer for that type of plate).Results: When activated the fluoresce nt in dicator will turn a gree n or white (depe nding on the in dicator added)and the compo unds appear as dark spots or shadows aga inst this backgro un d. If view ing at other tha n the activati on wavele ngth, the compo unds might also have some fluoresce nee of their own, so various colors aga inst a dark backgro und would be see n.Formaldehyde / sulfuric acidFor detect ion of alkaloids, aromatic hydrocarb ons, e.g., an tihyperte nsive drugsSpray with a soluti on of 37% formaldehyde in cone, sulfuric acid (1:10) immediately after taking the plate from the develop ing chamber . Heati ng is not n ecessary.Results: various colored spots.Formaldehyde / phosphoric acidFor detect ion of steroid alkaloids, steroid sapoge nins and phe no thiaz ine derivatives6Spray with a soluti on of 0.03g formaldehyde in 100ml of 85% phosphoric acid with stirri ng at room temperature.The reage nt is stable for several weeks.Furfural / sulfuric acidFor detect ion of carbamate estersSpray soluti on I: 1% soluti on of furfural in acet oneSpray soluti on II: 10% soluti on of sulfuric acid in acet oneSpray plate with I, the n II.Gen tia n Violet -Bro mineFor detect ion of lipidsSpray 0.1% gentian violet (crystal violet) in methanol onto plate and place in a tankcontaining bromine vapor .Results: lipids produce blue spots on a yellow backgro und.Gibb ' s reage ntFor detect ion of phe no Is. For further applicati ons see 2,6-dichloro quinon e-4-chloroimideSpray with a solution of 3% 2,6-dibromo-N-chloro-p-benzoquinone imine in toluene ormetha nol.Hydroxylam ine / ir on (III) chlorideFor detect ion of amides, lact on es, carboxylic acid esters and an hydridesSoluti on 1) Mix 1 vol part of 7g hydroxylam monium chloride in 100ml metha nol w 1 vol partof a soluti on of 7.2 gpotassium hydroxide in 100ml metha nol. Filter from precipitated potassium chloride.Soluti on 2) 2% soluti on of iron (HI) chloride in 1% aqueous hydrochloride acidSpray air dried plate first with soluti on 1, the n with soluti on 2Iodi ne containing compo undsDetect ion by decompositi on un der UVDry plates at 100 CAfter cooli ng spray with a small amount of 50% acetic acidIrradiate some minu tes with un filtered UV light.Results: Iodi ne compo unds show weakly violet to brow n spots. The color can be enhanced by spray ing with 10% acetic acid and irradiatio n with UV light (sudde n appeara nee of blue spots).Iodi ne vaporRelatively un specific uni versal reage nt for many orga nic compo undsCharge chamber with some crystals of iodi nePlace developed, dried chromatogram in iodi ne vaporResults: spots tur n tan-brow n in colorIodoplati nateFor detect ion of orga nic n itroge n compo un ds, alkaloids, e.g., coca ine metabolitesSpray with a freshly prepared mixture of 3ml hexachloroplati nic (IV) acid soluti on (10%) in97ml/m in water and100ml aqueous potassium iodide soluti on.Note - use 5% ethanol or methanol in water to prepare these solutions for the new polymer bound TLC plates.Iron (HI) chloride / potassium hexacya no ferrate / sodium arse nate (accord ing to Patters on& Cleme nts)For detect ion of iodi ne compo un ds, e..g., thyroid gla nd horm onesSolution I: 2.7% iron (HI) chloride hexahydrate in 2N hydrochloric acidSoluti on II: 3.5% potassium hexacya no ferrate in waterSoluti on III: dissolve 3.8g arse nic trioxide in 25ml 2N sodium hydroxide soluti on heat ingslightly, cool to 5 C, andadd 50ml 2N sulfuric acid, fill to 200ml with waterImmediately before use mix 5ml soluti on I, 5ml soluti on II and 1ml soluti on III.Spray onto the dry layer and dry carefully (temp below 50 C)Cover with glass plate and leave 15min in the darkResults: Iodi ne containing compo und show light blue spots on a yellowish backgro und.Lead tetraacetate / 2,7-dichlorofluoresce inFor detect ion of vicinal diols, glycosides and phe no Is, e.g., sugar acidsSoluti on I: 2% (w/v) lead tetraacetate in glacial acetic acidSolution II: 1% (w/v) 2,7-dichlorofluorescein in etha nolMix 5ml of each soluti on 1 and 2, fill to 200ml with dry tolue ne. This reage nt soluti on is stable for only about 2 hours.Mangan ese / salicylaldehydeFor detect ion of orga no thiophosphorus pesticidesSolution I: dissolve 100mg manganese chloride (Mn CI2.4H2O) in 100ml 80% alcoholSolution II: dissolve 1.3g 2-hydrozine quinoline in the lowest possible volume of hot etha nol. Dissolve 1 g salicyaldehyde in 5ml etha nol and add 1-2 drops glacial acetic acid. Comb ine both soluti onsand reflux 30minu tes. The crystals of salicyl-2-aldehyde -2-quin oli nehydraz one precipitated duri ng thecooli ng arerecrystallized from etha nol. For soluti on dissolve 50mg of the salicylate derivative in 100mletha nolSpray with a mixture of equal volumes of soluti ons 1 and 2.Man deli n s 'age ntSee Van adium(V) / sulfuric acidMercury (II) chloride / diphe ny Icarbaz oneFor detect ion of barbituratesSoluti on I: 2% etha nolic mercury (II) chlorideSoluti on II: 0.2% etha nolic diphe nl ycarbaz oneMix freshly before use in equal partsResults: Pink spots on a violet backgro undMercury (II) chloride / dithiz oneFor detect ion of barbituratesSpray with a freshly prepared 1:1 mixture of 1-2% mercury (II) chloride in etha nol and0.1-0.2% dithizo ne inetha nol.View under 360nm UV light4-Methoxybe nzaldehyde / sulfuric acid / etha nolFor detect ion erythromyci n and metabolitesSpray with 4-methocybe nzaldehyde/sulfuric acid/etha no I (1:1:9)Heat 1 mi nute at 100 CMethyl yellowFor detect ion of chlori nated in secticides and an timicrobial compo undsSpray dried plate with a soluti on of 0.1g methyl yellow (N,N-dimethyl-4-phe ny lazoa nili ne) in 70ml etha nol, add25ml water and fill to 100ml with etha nol.Dry at ambie nt temperatureIrradiate 5 min with UV light without a filterResults: Red spots on a yellow backgro undMolybdatophosphoric acidSee un der Phosphomolybdic acidMolybde num blue reactio n accord ing to Dittmer and LesterFor detect ion of phospholipids and phosphoric acid derivativesSolution I: Boil 40.11g MoO3 in 1 liter 25N sulfuric acid for 3-4 hours until the molybde num oxide is completely dissolved. Let the light yellow soluti on slowly cool to ambie nt temperature overni ght. The soluti on will tur n light blue.Soluti on II: Boil 1.78 g molybde num powder and 500ml of soluti on I for 15m in, cool and deca nt from the rema ining residue.8For preparati on of the spray reage nt, add equal volumes of solutio ns I and II to 4.5 volume parts water. A darkgree n soluti on is formed.Soluti ons I and II are stable for several mon ths whe n stored in the dark. The spray reage nthas to be prepared weekly.Nin hydri nFor detect ion of amino acids, amin es, amino sugars.Spray with a soluti on of 0.2g nin hydri n in 100ml etha nol and heat to 110 C un til spots appear.Results: reddish spots appearNin hydri n / cadmium acetateFor detect ion of amino acids and heterocyclic aminesDissolve 1g ninhydrin and 2.5g cadmium acetate in 10ml glacial acetic acid and fill to500ml with etha nol.Spray and heat 20min at 120 CResults: Red, pink, or purple spots are see n.Nin hydri n / pyrid ine / glacial acetic acidFor detect ion of peptidesSpray with a 1% nin hydri n in pyrid in e/glacial acetic acid (5:1, v/v)Heat 5 min at 100 CNitric acid / etha nolFor detect ion of amines and alkaloidsSpray with a solution of 50 drops 65% nitric acid in 100ml ethanol (higher acidconcen trati ons are also possible).If n ecessary, heat to 120 C for some time.Orcino I (Bials reage nt)For detect ion of glycosides, glycolipidsReage nt: dissolve 0.1g orci nol in 40.7ml c one. HCl, add 1ml 1% ferric (111) chloride, and dilute to 10ml Spray and heat at 80 ° C for 90 minutes.Results: Glycolipids produce violet spots.Patters on and Cleme ntsSee un der Iron (III) chloride/potassium hexacya no ferrate/sodium arse nateParaffi n oilFor enhan ceme nt of fluoresce nee spots —more stable and greater in te nsity1% paraffi n oil in hexa neSpray eve nly over the TLC plateResults: spots should be more stable (no fadi ng with time) for sca nning and are of greater inten sitym-Phe nylen ediam ineFor detect ion of reduci ng sugarsSpray with a soluti on of 3.6g m-phe nylen ediam ine dihydrochloride in 100ml 70% etha nol and heat briefly at 105 ° CResults: Inten sely fluoresce nee colors in UV light (wavele ngth not specified, so check 254and 366nm).o-Phe nylen ediam ine -trichloroacetic acidFor detect ion of alpha-keto acidsSpray with a soluti on of 0.05g 1,2-phe nylen ediam ine in 100ml 10% aqueous trichloroacticacid and heat plate at100C for no more tha n 2 minu tes.Results: Gree n fluoresce nee spots in long wavele ngth UV light.p-Phe nylen ediam ine -phthalic acidFor detect ion of conjugated 3-ketosteroids9Spray with a soluti on of 0.9 p-phe nylen ediam ine and 1.6g phthalic acid in 100ml 1-buta nol saturated with waterand heat plate at 100-110 ° CResults: Yellow to orange spotsPheny Ihydraz ine sulfo nateFor detect ion of some an timicrobial compo undsSoluti on I: dissolve 3.5g phe ny Ihydraz ine 4-sulfo nic acid hemihydrate in 10ml water and20ml 1N NaOH solutionSoluti on II: mix 30ml 1N sodium hydroxide soluti on with 40ml acet oneThe spray reage nts have to be prepared fresh each time.Procedure:Wet chromatogram eve nly with spray soluti on 1After air drying the plate, shake spray soluti on 2 and spray plate.Phosphoric acidFor detect ion of sterols, steroids, and bile acidsSpray heavily un til the layer appears tran spare nt with a solutio n of 85% phosphoric acidwith water (1:1, v/v)Then heat 10-15minutes at 120 ° CResults: Sterols, steroids and bile acids and bile acids produce various colors un der visible and UV light. Phosphoric acid - bromineFor detect ion of digitalis glycosidesSpray soluti on I: 10% aqueous phosphoric acid soluti onSpray soluti on II: Mix 2ml saturated aqueous potassium bromide, 2ml saturated soluti on aqueous potassium bromate and 2ml 25% hydrochloric acid.Procedure: Spray plate with I and heat 12 min at 120 ° C.Results: Digitalis glycosides of the series B, D, and E show blue fluoresce nee in long wavele ngth UV light Procedure continued: Heat the plate again at 120 ° C and spray lightly with II Results: Glycosides of the series A show orange, of the series C show grey-green to grey-blue fluoresce nee in UV light.Phosphomolydbic acidFor detect ion of reduci ng substa nces, e.g, alcohols, bile acids, lipids, fatty acids, steroidsAlso used as a charri ng reage nt for polymer bound TLC plates (the n ewer hard layer plates)Spray with a soluti on of 250mg molybdatophosphoric acid in 50ml etha nolHeat to 120 C un til spots appear (ove n or heat gun)If n ecessary, treat with ammonia vapors to remove some backgro und colorati on.The reage nt soluti on is stable for only 10 days even in the dark.Results whe n using as a charri ng reage nt: View freque ntly (every 5-10 min) to see if colored or fluoresce nt spots(at 254 and 360nm) can be see n. Charri ng can be con ti nued un til spots are brow n, grey or black. Phosphot un gstic acidFor detection of cholesterol and its esters, reducing compounds, lipids, sterols, and steroidsSpray with 20% phosphotungstic acid in ethanol, heat at 110 ° Cfor 5-15min or until maximum visualizati on of thespots occursResults: Cholesterol, esters will produce red spots.Pin acryptol yellowFor detect ion of sweet ners, surfacta nts, alkyl- and ary lsulfo nic acidsDissolve 100mg pin acryptol yellow in 100ml hot water or etha nol (or some comb in ati on forpolymer boundplates)Spray with reage nt soluti onResults: Yellow to orange fluoresce nee spots un der long wavele ngth UV light (366nm)Potassium dichromate / sulfuric acid (chromosulfuric acid) - see below10Potassium perma ngan ate / sulfuric acid -see belowRhodam ine BFor detect ion of a wide variety of compo undsDry the developed chromatogram and spray with 0.025-0.25% etha nolic rhodam ine B reage nt.。
TLC常用试剂配制及显色方法
常用试剂配制及显色方法（一）通用显色剂1．重铬酸钾——硫酸一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。
喷洒剂：5克重铬酸钾溶于100ml，40%硫酸中。
喷洒后加热至150o C斑点出现。
2．碘：检查一般有机物（1）碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提高显色的灵敏度。
（2）0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。
3．碘——碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）。
4．5%——磷钼酸乙醇溶液：喷后120o C烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则背景变为无色。
5．20%磷酸乙醇溶液：喷后120o C，还原性物质显兰色。
6．碱性高锰酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
溶液II：5%碳酸钠溶液。
溶液I和溶液II等量混合使用。
7．中性0.05%高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。
8．硝酸银——氢氧化铵（Tollen’s--zoffaronl）试剂，喷后105o C烤5~10分钟，还原性物质显黑色。
溶液I：0.1N硝酸银溶液。
溶液II：氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和溶液II以1：5混合。
注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银。
9．硝酸银——高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。
溶液I：0.1N硝酸银溶液：2N氢氧化铵溶液：2N氢氧化钠（1：1：2）。
临用前配制。
溶液II：高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。
10．四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。
溶液I：0.5%四唑兰甲醇溶液。
溶液II：6N氢氧化钠溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
11．铁氰化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰色加深。
溶液I：1%铁氰化钾溶液。
溶液II：2%三氯化铁溶液。
薄层层析中展开剂的选择new
（2）根据样品的极性来选择展开剂 ①采用“相似相溶”原则来选择展开剂，极 性强的组分需用极性强的展开剂，极性弱组 分需用极性弱的展开剂。 ②若所选展开剂混合物的点都移到溶剂的前 沿，则说明溶剂的极性过强，如果所选的展 开剂几乎不能使混合物中的组分移动，则说 明溶剂极性过弱。 ③改变多元展开剂的组成和比例，使待测组 分的Rf 值在0.2～0.8 之间，定量测定应在 0.3～0.5 之间，能使各组分之间有效地分离
2 .点样应注意的问题 （1）点样量：一般为0． 5 ～ 10 μl，样品的 浓度通常为0． 5 ～ 2 mg，太浓时展开剂从原 点外围绕行，使斑点脱尾或重叠。点样量太 小，不能检出清晰的斑点影响判断。点样量 太多，展开剂不能全部负载，容易产生脱尾 现象。 （2）样品的溶剂：原则上应选择对被测成分 可以溶解但溶解度不是很大的溶剂。 （3）点样手法: 接触式点样直径通常控制在3 mm 以内，采用边点样边用吹风机吹干溶剂 的方式。多次点样圆心要重合。
（5）加入丙酮等中等极性溶剂可使不相混溶 的溶剂混溶，降低展开剂的黏度，加速展开。 （6）a. 底剂为展开剂比例较大的溶剂其极性 应相对较弱，具有溶解物质和基本分离作用。 b. 展开剂中比例较小的溶剂极性应大， 对被分离的组分有较强的洗脱能力，帮助化 合物在薄层上移动，可增大Rf 值，可称之件
①合适的纯度。至少要用AR 试剂，展开剂如有杂质， 则会直接影响分离效果。 ②适当的稳定性。一般不用三氯甲烷，因其中的乙 醇量不够则易生成光气。 ③低黏度。能使其迅速展开。 ④沸点和挥发性集中。展开后能快速地在薄层上挥 发样品，不影响显色和定量。 ⑤要尽可能的低毒性。 ⑥不与待测组分和吸附剂发生化学反应。
（3）展开剂的配制应严格控制其比例准确度， 如遇到比例很小的溶剂时，应尽量满足其精 确度要求。展开剂配好后如果浑浊不清，待 其静置分层取其上层( 或下层) 液进行展开。 （4）展开剂中加入少量酸或碱等拖尾抑制剂， 一般的酸有乙酸、乙二酸、磷酸、甲酸等， 碱包括三乙胺、二乙胺、吡啶、氨试液等， 这类溶剂可抑制某些酸碱性物质或其盐类解 离而产生斑点拖尾。
TLC中展开剂的选择
浅谈TLC中展开剂的选择摘要：展开剂是平面色谱法中作流动相的液体。
展开剂的主要任务是溶解被分离物质在吸附薄层转移分离物质，使各组分的Rf值在0.2～0.8之间，并对被分离物质要有适当的选择性。
文章综述了薄层色谱的展开剂根据样品本身的性质以及吸附剂的类型而选择的各种理论以及对相关分析介绍的描述，以便快速、简便地选择展开剂。
关键词：薄层色谱；展开剂；TLC；样品极性中图分类号：TQ646文献标识码：A文章编号：1009-2374（2009）07-0044-02由于薄层色谱具有设备简单，操作简易；展开速度快；分离能力强，斑点集中；灵敏度高；样品用量少等特点而被广泛地应用到化学合成、天然药物的定性鉴别和纯度检验中，其在化学分析中的重要性突显，其主要表现在分离效果上，而分离效果则主要有样品、吸附剂及展开剂等三个因素决定的。
三者中样品的性质（如溶解度、酸碱性及极性）是固定的。
吸附剂的活性和非活性，在吸附薄层色谱中通常以硅胶为主，故种类也是有限的。
而展开剂种类则千变万化，并且受制约的因素比较多，主要的还是样品的性质和吸附剂。
因此可以这样说能找到与样品及吸附剂相匹配的展开剂就能对样品的分离起决定性作用。
以下就对展开剂的选择作一探讨：一、作为展开剂用的溶剂应满足的条件1．合适的纯度。
至少要用AR试剂，展开剂如有杂质，则会直接影响分离效果。
如三氯甲烷、乙酸乙酯和乙醚中含有少量的醇和水会使其极性增大；芳香烃中含有杂环化合物和酚类物质，卤化烃中含有游离酸也会使极性增大；三氯甲烷中的光气、乙醚中的过氧化物有可能氧化或破坏被分离组分等。
2．适当的稳定性。
一般不用三氯甲烷，因其中的乙醇量不够则易生成光气。
3．低黏度。
能使其迅速展开。
4．沸点和挥发性集中。
展开后能快速地在薄层上挥发样品，不影响显色和定量；挥发性过弱，饱和时间过长，不利于展开，过强则在展开过程中易冲盖而导致系统不饱和致使实验失败。
5．要尽可能的低毒性。
要充分考虑实验者自身的身体健康。
TLC展开剂选择及显色剂的汇总
选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<T HF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用单一溶剂，往往不能达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用，常用的溶剂组合有：Petr oleum ether/Ethy lacet ate,p etrol eumet her/A ceton e,Pet roleu methe r/Eth er, P etrol eumet h er/C H2Cl2, eth ylace tate/MeOH,CHCl3/ethy lacet ate展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。
展开剂的选择条件：①对的所需成分有良好的溶解性；②可使成分间分开；③待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；④不与待测组分或吸附剂发生化学反应；⑤沸点适中，黏度较小；⑥展开后组分斑点圆且集中；⑦混合溶剂最好用新鲜配制。
一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离；中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
点板过程中,如何选择展开剂
TLC俗称点板，是有机化学工作者必备的实验技术，对于提高实验的效率至关重要。
对于TLC,选择适当的展开剂是首要任务。
那么，如何选择展开剂呢？下面就以下几个方面展开论述一、展开剂的选择条件：1、对所需成分有良好的溶解性；2、可使成分间分开；3、待测组分的R f在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；4、不与待测组分或吸附剂发生化学反应；5、沸点适中，黏度较小；6、展开后组分斑点圆且集中；7、混合溶剂最好新鲜配制（现配现用）。
二、一般常用溶剂的极性大小按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油醚(PE)<环/正己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<醋酸三、常用的溶剂组合要达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂，通常使用高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用。
常用的溶剂组合有：1、石油醚Petroleum ether(PE)/ 乙酸乙酯EtOAc (ethyl acetate)石油醚PE/丙酮Acetone,石油醚PE/乙醚Ether,石油醚PE /CH2Cl2,2、CH2Cl2/ 乙酸乙酯EtOAc,CH2Cl2/甲醇MeOH， 0-1% TEA or NH33、乙酸乙酯 EtOAc /甲醇 MeOH,乙酸乙酯EtOAc/环己烷Hexanes or Cyclohexane乙酸乙酯EtOAc/石油醚PE=1:2乙酸乙酯EtOAc/石油醚PE/乙酸AcOH=15:5:1乙酸乙酯EtOAc/乙酸AcOH/正丁醇n-Butanol/H2O=2:1:1:14、 CHCl3/ 乙酸乙酯EtOAcCHCl3/甲醇5、环已烷/丙酮；6、甲醇/吡啶/水；7、苯/丙酮等四、点板注意事项1、某种样品在某种展开剂中只显示一个点，并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。
因此在寻找展开剂时，多尝试几种比例不同、成分不同的展开剂，非常必要。
TLC展开剂选择及显色剂的汇总
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2
适用于萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)
配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)经常需要利用溶剂的极性大小，对展开剂的极性予以调整。
的NaOH 水溶液，刚好出现蓝色即至。
钼酸ห้องสมุดไป่ตู้
广谱
配制方法：235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL
浓硫酸
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1
广谱
配制方法：135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL
茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀.
在柱层操作时，被分离样品在加样时可采用于法，亦可选一适宜的溶剂将样品溶解后加入。溶解样品的溶剂应选择极性较小的，以便被分离的成分可以被吸附。然后渐增大溶剂的极性。这种极性的增大是一个十分缓慢的过程，称为“梯度洗脱”，使吸附在层析柱上的各个成分逐个被洗脱。如果极性增大过诀（梯度太大），就不能获得满意的分离。溶剂的洗脱能力，有时可以用溶剂的介电常数（ε）来表示。介电常数高，洗脱能力就大。以上的洗脱顺序仅适用于极性吸附剂，如硅胶、氧化铝。对非极性吸附剂，如活性炭，则正好与上述顺序相反，在水或亲水住溶剂中所形成的吸附作用，较在脂溶性溶剂中为强。
实验室有机合成TLC经验总结
实验室有机合成TLC经验总结TLC操作方便、高效，1min就能给出结果，与液相的原理是一样的，可是比液相快多了，做个判断，还是可以的。
作用1.反应情况如何，有没有发生反应，杂质情况怎么样，杂质多吗，，杂质的变化，减少了还是增多了，还是一中减少了另一种增多了，都可以。
TLC虽然给不出精确的数值，可是作为指导。
反应跟踪、确定化合物。
TLC选择是展开剂的选择，原理是相似相容，根据极性的不同，从而得以分开，Kf值不同，在紫外灯下做出判断。
常用的展开剂体系是乙酸乙酯/石油醚、甲醇/二氯甲烷，这两个体系几乎可以分开所以的化合物，另外根据化合物的酸碱性来添加1、2滴冰乙酸和三乙胺。
TLC点点的学问，整个硅胶板长度定位1，点点，一般在0.1-0.2处，爬的高度一般为0.8-0.9，先说为什么0.1-0.2，因为太靠下了，展开剂的液面淹没了点的点，则物质扩散到展开剂中，爬不起来了，大于0.2的话，就浪费了，原则是展开剂的液面不要没过点的点。
再说爬的高度，太矮了，分不开或者有重叠，影响判断，爬到顶了也会出现这种问题。
物质极性大小的判断，TLC中爬得越高的极性越小，越低的极性越大。
如果爬到顶了，可能极性小的都到顶了，重合了，不好判断。
点板子的技巧，一般用0.3mm的点样毛细管，0.5mm的点的点太大了，跑不开。
点板子是手要垂直，好像用毛笔写字的姿势，快、稳、准一，点到后立刻抬起来，否则就成一大摊了。
一般时点一下就好，如果浓度低在紫外下感觉不明显，则可以在原点的基础上，再点2-4次。
放入展开缸中之前要吹干，把溶剂吹跑，为什么。
因为如果刚点了，就放进去，溶剂还没有挥发完，则怕的板子容易拖尾，直接成柱状，分不出点来。
成柱状或者拖尾的几个原因：1.点完之后没有吹干，溶剂影响的2.物质呈酸性或者碱性，也溶剂拖尾，这时候酸性物质，想展开剂中加1滴乙酸，摇晃均匀后，再把板子放进去，如果有改善，还是拖尾，可以适量的增加或者减少乙酸的用量。
最全的TLC经验_薄层层析_显色剂
最全的TLC经验薄层色谱（TLC）是一种非常有用的跟踪反应的手段，还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。
薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶，它们是极性很大（标准）或者是非极性的（反相）。
流动相则是一种极性待选的溶剂。
在中以及大多数实验室实验中，都将使用标准硅胶板。
将溶液中的反应混合物点在薄板上，然后利用毛细作用使溶剂（或混合溶剂）沿板向上移动进行展开。
根据混合物中组分的极性，不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。
极性强的化合物会“粘”在极性的硅胶上，在薄板上移动的距离比较短。
而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保留较长的时间从而在板上移动较大的距离。
化合物移动的距离大小用Rf 值来表达。
这是一个位于0～1之间的数值，它的定义为：化合物距离基线（最先点样时已经确定）的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。
薄层色谱（TLC）实验步骤：1) 切割薄板。
通常，买来的硅胶板都是方形的玻璃板，必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进行切割。
在切割玻璃之前，用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置（注意不要损坏硅胶面）。
借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺，你便可方便地进行玻璃切割。
当整块玻璃被切割后，你就可以进一步将其分成若干独立的小块了。
（开始的时候，也许你会感到有一些难度，但经过一些训练以后，你便会熟练地掌握该项技术。
）2) 选取合适的溶剂体系。
化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。
在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物质不会移动，但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。
相反，极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。
一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线，但并不使所有化合物都到达溶剂前端，Rf值最好在~之间。
虽然这个条件不一定都能满足，但这应该作为薄层色谱分析的目标（在柱色谱中，合适的溶剂应该满足Rf在~之间）。
那么，应该选取哪些溶剂呢？一些标准溶剂和他们的相对极性（从LLP中摘录）列于如下：强极性溶剂：甲醇〉乙醇〉异丙醇中等极性溶剂：乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非极性溶剂：环己烷，石油醚，己烷，戊烷常用混合溶剂：乙酸乙酯/己烷：常用浓度0~30%。
TLC展开剂选择及显色剂的总结
TLC展开剂选择及显色剂的总结选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用单一溶剂，往往不能达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用，常用的溶剂组合有：Petroleumether/Ethylacetate,petroleumether/Acetone,Petroleumether/Ether, Petroleumether/CH2Cl2, ethylacetate/MeOH,CHCl3/ethylacetate展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。
展开剂的选择条件：①对的所需成分有良好的溶解性；②可使成分间分开；③待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；④不与待测组分或吸附剂发生化学反应；⑤沸点适中，黏度较小；⑥展开后组分斑点圆且集中；⑦混合溶剂最好用新鲜配制。
一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离；中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。
我们在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有效分离，曾经尝试了很多种的溶剂组合，最后才找到石油醚—EtOAc—HCOOH（5.5：3.5：0.1）混合溶剂。
TLC中展开剂的选择,经典版
TLC中展开剂的选择检测技术2009-12-02 21:54:56 阅读381 评论0字号：大中小订阅做分离时跑板子是常有的事，展开剂的选择就至关重要了。
选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇.使用单一溶剂往往不能达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用，展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。
展开剂的选择条件：①对的所需成分有良好的溶解性；②可使成分间分开；③待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；④不与待测组分或吸附剂发生化学反应；⑤沸点适中，黏度较小；⑥展开后组分斑点圆且集中；⑦混合溶剂最好用新鲜配制。
一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离；中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。
我们在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有效分离，曾经尝试了很多种的溶剂组合，最后才找到石油醚—EtOAc—HCOOH（5.5：3.5：0.1）混合溶剂。
一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例（或者加入第三种溶剂）,达到最佳效果；如果没有分开的迹象（斑点较“拖”），最好是换溶剂。
最全的TLC经验_薄层层析_显色剂
最全的TLC经验薄层色谱（TLC）是一种非常有用的跟踪反应的手段，还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。
薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶，它们是极性很大（标准）或者是非极性的（反相）。
流动相则是一种极性待选的溶剂。
在5.301中以及大多数实验室实验中，都将使用标准硅胶板。
将溶液中的反应混合物点在薄板上，然后利用毛细作用使溶剂（或混合溶剂）沿板向上移动进行展开。
根据混合物中组分的极性，不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。
极性强的化合物会“粘”在极性的硅胶上，在薄板上移动的距离比较短。
而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保留较长的时间从而在板上移动较大的距离。
化合物移动的距离大小用Rf值来表达。
这是一个位于0～1之间的数值，它的定义为：化合物距离基线（最先点样时已经确定）的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。
薄层色谱（TLC）实验步骤：1) 切割薄板。
通常，买来的硅胶板都是方形的玻璃板，必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进行切割。
在切割玻璃之前，用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置（注意不要损坏硅胶面）。
借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺，你便可方便地进行玻璃切割。
当整块玻璃被切割后，你就可以进一步将其分成若干独立的小块了。
（开始的时候，也许你会感到有一些难度，但经过一些训练以后，你便会熟练地掌握该项技术。
）2) 选取合适的溶剂体系。
化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。
在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物质不会移动，但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。
相反，极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。
一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线，但并不使所有化合物都到达溶剂前端，Rf值最好在0.15~0.85之间。
虽然这个条件不一定都能满足，但这应该作为薄层色谱分析的目标（在柱色谱中，合适的溶剂应该满足Rf在0.2~0.3之间）。
那么，应该选取哪些溶剂呢？一些标准溶剂和他们的相对极性（从LLP中摘录）列于如下：强极性溶剂：甲醇〉乙醇〉异丙醇中等极性溶剂：乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非极性溶剂：环己烷，石油醚，己烷，戊烷常用混合溶剂：乙酸乙酯/己烷：常用浓度0~30%。
最全的TLC经验_薄层层析_显色剂
最全的TLC经验薄层色谱（TLC）是一种非常有用的跟踪反应的手段，还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。
薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶，它们是极性很大（标准）或者是非极性的（反相）。
流动相则是一种极性待选的溶剂。
在5.301中以及大多数实验室实验中，都将使用标准硅胶板。
将溶液中的反应混合物点在薄板上，然后利用毛细作用使溶剂（或混合溶剂）沿板向上移动进行展开。
根据混合物中组分的极性，不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。
极性强的化合物会“粘”在极性的硅胶上，在薄板上移动的距离比较短。
而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保留较长的时间从而在板上移动较大的距离。
化合物移动的距离大小用Rf值来表达。
这是一个位于0～1之间的数值，它的定义为：化合物距离基线（最先点样时已经确定）的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。
薄层色谱（TLC）实验步骤：1) 切割薄板。
通常，买来的硅胶板都是方形的玻璃板，必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进行切割。
在切割玻璃之前，用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置（注意不要损坏硅胶面）。
借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺，你便可方便地进行玻璃切割。
当整块玻璃被切割后，你就可以进一步将其分成若干独立的小块了。
（开始的时候，也许你会感到有一些难度，但经过一些训练以后，你便会熟练地掌握该项技术。
）2) 选取合适的溶剂体系。
化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。
在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物质不会移动，但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。
相反，极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。
一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线，但并不使所有化合物都到达溶剂前端，Rf值最好在0.15~0.85之间。
虽然这个条件不一定都能满足，但这应该作为薄层色谱分析的目标（在柱色谱中，合适的溶剂应该满足Rf在0.2~0.3之间）。
那么，应该选取哪些溶剂呢？一些标准溶剂和他们的相对极性（从LLP中摘录）列于如下：强极性溶剂：甲醇〉乙醇〉异丙醇中等极性溶剂：乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非极性溶剂：环己烷，石油醚，己烷，戊烷常用混合溶剂：乙酸乙酯/己烷：常用浓度0~30%。
最全的TLC经验_薄层层析_显色剂
最全的TLC经历薄层色谱〔TLC〕是一种非常有用的跟踪反响的手段，还可以用于柱色谱别离中适宜溶剂的选择。
薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶，它们是极性很大〔标准〕或者是非极性的〔反相〕。
流动相那么是一种极性待选的溶剂。
在5.301中以及大多数实验室实验中，都将使用标准硅胶板。
将溶液中的反响混合物点在薄板上，然后利用毛细作用使溶剂〔或混合溶剂〕沿板向上移动进展展开。
根据混合物中组分的极性，不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。
极性强的化合物会“粘〞在极性的硅胶上，在薄板上移动的距离比拟短。
而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保存较长的时间从而在板上移动较大的距离。
化合物移动的距离大小用Rf值来表达。
这是一个位于0～1之间的数值，它的定义为：化合物距离基线〔最先点样时已经确定〕的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。
薄层色谱〔TLC〕实验步骤：1) 切割薄板。
通常，买来的硅胶板都是方形的玻璃板，必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进展切割。
在切割玻璃之前，用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置〔注意不要损坏硅胶面〕。
借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺，你便可方便地进展玻璃切割。
当整块玻璃被切割后，你就可以进一步将其分成假设干独立的小块了。
〔开场的时候，也许你会感到有一些难度，但经过一些训练以后，你便会熟练地掌握该项技术。
〕2) 选取适宜的溶剂体系。
化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。
在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物质不会移动，但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。
相反，极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。
一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线，但并不使所有化合物都到达溶剂前端，Rf值最好在0.15~0.85之间。
虽然这个条件不一定都能满足，但这应该作为薄层色谱分析的目标〔在柱色谱中，适宜的溶剂应该满足Rf在0.2~0.3之间〕。
那么，应该选取哪些溶剂呢？一些标准溶剂和他们的相对极性〔从LLP中摘录〕列于如下：强极性溶剂：甲醇〉乙醇〉异丙醇中等极性溶剂：乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非极性溶剂：环己烷，石油醚，己烷，戊烷常用混合溶剂：乙酸乙酯/己烷：常用浓度0~30%。
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选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇
Petroleumether/Ethylacetate,petroleumether/Acetone,Petroleumether/Eth er, Petroleumether/CH2Cl2, ethylacetate/MeOH,CHCl3/ethylacetate 展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。
展开剂的选择条件：①对的所需成分有良好的溶解性；②可使成分间分开；③待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；④不与待测组分或吸附剂发生化学反应；⑤沸点适中，黏度较小；⑥展开后组分斑点圆且集中；⑦混合溶剂最好用新鲜配制。
一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离；中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。
很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。
我们在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有效分离，曾经尝试了很多种的溶剂组合，最后才找到石油醚—EtOAc—HCOOH（5.5：3.5：0.1）混合溶剂。
一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例（或者加入第三种溶剂）,达到最佳效果；如果没有分开的迹象（斑点较“拖”），最好是换溶剂。
对于在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质，在展开剂里往往加一点点三乙胺，氨水，吡啶等碱性物质来中和硅胶的酸性。
（选择所添加的碱性物质，还必须考虑容易从产品中除去，氨水无疑是较好的选择。
）分离效果的好坏和所用硅胶和溶剂的质量很有关系：不同厂家生产的硅胶可能含水量以及颗粒的粗细程度，酸性强弱不同，从而导致产品在某个厂家的硅胶中分离效果很好，但在另一个厂家的就不行。
溶剂的含水量和杂质含量对分离效果都有明显的影响。
温度，湿度对分离效果影响也很明显，在实验中我们发现有时同一展开条件，上下午的Rf截然不同
展开剂的选择主要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来考虑
在进行薄层层析时，首先应该知道未知化学成分的类型，其极性的大致归属，从提取液或从色谱柱的流动相极性可知，另外某样品里含多种化学成分先按极性不同大致分，然后细分，对于分离未知的化学物质，展开剂的选择也是一个摸索的过程，不应该仅仅从展开剂考虑，多因素综合衡量！
溶剂：层析过程中溶剂的选择，对组分分离关系极大。
在柱层析时所用的溶剂（单一剂或混合溶剂）习惯上称洗脱剂，用于薄层或纸层析时常称展开剂。
洗脱剂的选择，须根据被分离物质与所选用的吸附剂性质这两者结合起来加以考虑在用极性吸附剂进行层析时，当被分离物质为弱极性物质，一般选用弱极性溶剂为洗脱剂；被分离物质为强极性成分，则须选用极性溶剂为洗脱剂。
如果对某一极性物质用吸附性较弱的吸附剂（如以硅藻土或滑石粉代替硅胶），则洗脱剂的极性亦须相应降低。
在柱层操作时，被分离样品在加样时可采用于法，亦可选一适宜的溶剂将样
品溶解后加入。
溶解样品的溶剂应选择极性较小的，以便被分离的成分可以被吸附。
然后渐增大溶剂的极性。
这种极性的增大是一个十分缓慢的过程，称为“梯度洗脱”，使吸附在层析柱上的各个成分逐个被洗脱。
如果极性增大过诀（梯度太大），就不能获得满意的分离。
溶剂的洗脱能力，有时可以用溶剂的介电常数（ε）来表示。
介电常数高，洗脱能力就大。
以上的洗脱顺序仅适用于极性吸附剂，如硅胶、氧化铝。
对非极性吸附剂，如活性炭，则正好与上述顺序相反，在水或亲水住溶剂中所形成的吸附作用，较在脂溶性溶剂中为强。
3．被分离物质的性质：被分离的物质与吸附剂，洗脱剂共同构成吸附层析中的三个要素，彼此紧密相连。
在指定的吸附剂与洗脱剂的条件下，各个成分的分离情况，直接与被分离物质的结构与性质有关。
对极性吸附剂而言，成分的极性大，吸附住强。
当然，中草药成分的整体分子观是重要的，例如极性基团的数目愈多，被吸附的住能就会更大些，在同系物中碳原子数目少些，被吸附也会强些。
总之，只要两个成分在结构上存在差别，就有可能分离，关键在于条件的选择。
要根据被分离物质的性质，吸附剂的吸附强度，与溶剂的性质这三者的相互关系来考虑。
首先要考虑被分离物质的极性。
如被分离物质极性很小为不含氧的萜烯，或虽含氧但非极性基团，则需选用吸附性较强的吸附剂，并用弱极性溶剂如石油醚或苯进行洗脱。
但多数中药成分的极性较大，则需要选择吸附性能较弱的吸附剂（一般Ⅲ～Ⅳ级）。
采用的洗脱剂极性应由小到大按某一梯度递增，或可应用薄层层析以判断被分离物在某种溶剂系统中的分离情况。
此外，能否获得满意的分离，还与选择的溶剂梯度有很大关系。
现以实例说明吸附层析中吸附剂、洗脱剂与样品极性之间的关系。
如有多组分的混合物，象植物油脂系由烷烃、烯烃、舀醇酯类、甘油三酸醋和脂肪酸等组份。
当以硅胶为吸附剂时，使油脂被吸附后选用一系列混合溶剂进行洗脱，油脂中各单一成分即可按其极性大小的不同依次被洗脱。
又如对于C-27甾体皂甙元类成分，能因其分字中羟基数目的多少而获得分离：将混合皂甙元溶于含有5％氯仿的苯中，加于氧化铝的吸附柱上，采用以下的溶剂进行梯度洗脱。
如改用吸附性较弱的硅酸镁以替代氧化铝，由于硅酸镁的吸附性较弱，洗脱剂的极牲需相应降低，亦即采用苯或含5％氯仿的苯，即可将一元羟基皂甙元从吸附剂上洗脱下来。
这一例子说明，同样的中草药成分在不同的吸附剂中层析时，需用不同的溶剂才能达到相同的分离效果，从而说明吸附剂、溶剂和欲分离成分三者的相互关系。
（二）簿层层析：薄层层析是一种简便、快速、微量的层析方法。
一般将柱层析用的吸附剂撒布到平面如玻璃片上，形成一薄层进行层析时一即称薄层层析。
其原理与柱层析基本相似。
1．薄层层析的特点：薄层层析在应用与操作方面的特点与柱层析的比较。
2．吸附剂的选择：薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同。
主要区别在于薄层层析要求吸附剂（支持剂）的粒度更细，一般应小于250目，并要求粒度均匀。
用于薄层层析的吸附剂或预制薄层一般活度不宜过高，以Ⅱ～Ⅲ级为宜。
而展开距离则随薄层的粒度粗细而定，薄层粒度越细，展开距离相应缩短，一般不超过10厘米，否则可引起色谱扩散影响分离效果。
3．展开剂的选择：薄层层析，当吸附剂活度为一定值时（如Ⅱ或Ⅲ级），对多组分的样品能否获得满意的分离，决定于展开剂的选择。
中草药化学成分在脂溶性成分中，大致可按其极性不同而分为无极性、弱极性、中极性与强极性。
但在实际工作中，
显色剂：
碘：
适用于不饱和或者芳香族化合物
配制方法：在100ml 广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。
或者在瓶中，加入10g 碘粒，30g 硅胶
高锰酸钾
适用于含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛
配制方法：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH +
200mL 水. 使用期3 个月
磷钼酸(PMA)
广谱
配制方法：10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇
紫外灯
适用于含共轭基团的化合物，芳香化合物
硫酸铈：
生物碱
配制方法：10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化铁
苯酚类化合物
配制方法：1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羟基黄酮)
广谱, 有荧光活性
配制方法：0.1% 桑色素+甲醇
茚三酮
适用于氨基酸
配制方法：1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
适用于醛和酮
配制方法：12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL
乙醇
香草醛(香兰素)
广谱
配制方法：15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸
溴甲酚绿
适用于羧酸，pKa<=5.0
配制方法：在100ml 乙醇中，加入0.04g 溴甲酚绿，缓慢滴加0.1M 的NaOH 水溶液，刚好出现蓝色即至。
钼酸铈
广谱
配制方法：235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL
浓硫酸
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1
广谱
配制方法：135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL
茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀.
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2
适用于萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)
配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)经常需要利用溶剂的极性大小，对展开剂的极性予以调整。