淀粉样物质染色液(甲紫法)操作步骤及注意事项
淀粉检验操作规程
淀粉检验操作规程1 目的：建立淀粉检验操作规程。
2 适用范围：适用于淀粉的检验操作。
3 职责：检验人员对本规程的实施负责。
4 规程：4.1 编制依据：《中国药典》2010年版二部P1228。
4.2 质量指标：见《淀粉质量标准》。
4.3 仪器与用具：显微镜、偏光显微镜、p H计、电热恒温干燥箱、高温箱形电阻炉、具塞锥形瓶、具塞离心管、碘量瓶、电子天平。
4.4 试药与试液：碘试液、稀盐酸、过硫酸胺、标准铁溶液、淀粉指示液、碘滴定液（0.005mol/L）、冰醋酸、碘化钾、硫代硫酸钠（0.002/mol/L）、甘油、醋酸。
4.5 操作方法4.5.1 性状：本品为白色粉末；无臭，无味。
本品在冷水或乙醇中均不溶解。
4.5.2 鉴别4.5.2.1 物理反应：取本品约1g，加水15ml，煮沸，放冷，即成类白色半透明的凝胶状物。
4.5.2.2 化学反应：取本品约0.1g，加水20ml混匀，加碘试液数滴，即显蓝色或蓝黑色，加热后逐渐褪色，放冷，蓝色复现。
4.5.2.3 显微鉴别：取本品，用甘油醋酸试液装置，在显微镜下观察。
玉蜀黍淀粉均为单粒，呈多角形或类圆形，直径为5-30µm；脐点中心性，呈圆点状或星状；层纹不明显。
木薯淀粉多为单粒，圆形或椭圆形，直径为5-35µm，旁边有一凹处，脐点中心性，呈圆点状或星状，层纹不明显。
不得有其他品种的淀粉颗粒。
4.5.2.4显微鉴别：取本品，在偏光显微镜下观察。
玉蜀黍淀粉和木薯淀粉均呈现偏光十字，十字交叉位于颗粒脐点处。
4.5.3 检查4.5.3.1 酸度：取本品20.0g，加水100ml，振摇5分钟使混匀，立即按《p H值测定操作规程》检验，pH值应为4.5-7.0。
4.5.3.2 干燥失重：取本品，按《干燥失重测定操作规程》在105℃干燥5小时，减失的重量，玉薯黍淀粉不得过14.0%，木薯淀粉不得过15.0%。
4.5.3.3 灰分：取本品约1g，置炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化后，逐渐升高温度至600-700℃，使完全灰化并恒重，遗留的灰分，玉蜀黍淀粉不得过0.2%，木薯淀粉不得过0.3%。
高中生物课程中常见染色剂染色原理及使用注意事项
高中生物课程中常见染色剂染色原理及使用注意事项朱秋霖，马天兵兰州二中，兰州 730000 摘要：目的：探究高中生物试验中常见染色剂的使用方法及常见问题与注意事项方法：通过一些简单的实验验证与参考文献得出结论。
结果：验证与总结出生物试验中常见染色剂的染色原理及所遇到的染色问题的原因。
关键词：高中生物学实验染色剂显色原理注意事项The common dye staining principle and precautions in the highschool biology curriculumZhu Qiulin，Ma TianbingLanzhou NO.2 middle secondary school class8 grade2，lanzhou 730000Abstract:Objective: To explore the use of high school biology test stains and FAQs Notemethod: through some simple experiments verify references concluded.Results:Validation andsummed up a common biological test stain dyeing principle and coloring problem encountered byreason.Keywords:high school biology experiment stain color rendering principle Precautions1.常见染色剂常见的高中生物染色显色反应，其实质是化学反应或者物理反应，按照其反应本质，可分为下列几类[5]：1.1 氧化还原反应类染色剂通过氧化还原反应生成某些具有特殊颜色的物质，利用其与生物组织中某些具有还原性的物质或代谢产物进行化学反应，宏观上产生颜色变化，通过颜色变化,鉴别某些生物组织中的目标物质。
纤维素染色液(Gram甲紫法)
纤维素染色液(Gram 甲紫法)简介：病理的内源性沉着物是色素沉着物的一部分，组织细胞经过一定的病理变化，形成不同形状特点的沉着物质，这种聚合形成的特殊蛋白，经染色后能够显示纤维素蛋白。
纤维素是存在于血液内的纤维蛋白分子聚合形成的特殊蛋白质，又称为纤维蛋白，这种蛋白以弯曲细丝纤维素的形式存在于组织内，大多数呈网状结构，有时会呈粗大的纤维素网，陈旧的可凝集呈无定型的块状。
Leagene 纤维素染色液(Gram 甲紫法)主要由Gram 伊红染色液、甲紫染色液、Gram 碘液组成，是一种简便、廉价的纤维素染色液，染色后纤维素呈蓝色。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 常规石蜡切片，常规脱蜡至水。
2、 入Gram 伊红染色液，染色，稍水洗。
3、 入甲紫染色液，染色，稍水洗。
4、 入Gram 碘液，染色。
5、 倾去Gram ，用吸水纸吸干。
6、 取苯胺和二甲苯等量混合作为分化液，分化。
7、 更换新的二甲苯清洗组织。
中性树胶封固。
染色结果：纤维素 蓝色 背景红色注意事项：1、 Gram 伊红染色液染色后，经过水洗时务必使组织上有足够的红色。
2、 苯胺和二甲苯等量混合分化时，注意轻轻摇动，以使组织脱色均匀。
编号 名称DG0078 3×50mlStorage试剂(A): Gram 伊红染色液 50ml RT 避光 试剂(B): 甲紫染色液 50ml RT 避光 试剂(C): Gram 碘液 50mlRT 避光 使用说明书1份3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：3个月有效。
相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DF0111 中性福尔马林固定液(10%)DH0006 苏木素伊红(HE)染色液IH0305 柠檬酸钠抗原修复液(50×)NR0001 DEPC处理水(0.1%)PW0040 Western blot一抗稀释液TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)。
淀粉样物质染色液(Bennhold刚果红法)
染色结果：
淀粉样物质
红色
细胞核
蓝色
注: 在偏光显微镜下，淀粉样物质呈黄绿色的双折光。
北京雷根生物技术有限公司
注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。 2、 酸性乙醇 分化液应密闭保存，一旦开启尽快用完。 3、 刚果红染色液染色时尽量采用浸染，如果滴染，应置于湿盒防止溶液挥发。。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
50ml RT
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、常规固定，常采用 10%的中性福尔马林，常规脱水包埋。 2、切片厚度 4μm，常规脱蜡至水。 3、入 Bennhold 苏木素浸染。 4、酸性乙醇分化，立即入水终止分化，水洗 2 次后镜下控制至恰当程度。 5、自来水冲洗。 6、入 Scott 蓝化液返蓝。自来水冲洗。 8、入刚果红染色液浸染。 9、Bennhold 分化液迅速分化。 11、自来水冲洗 1～2min。 12、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。
组成：
编号 名称 试剂(A): Bennhold 苏木素染色液 试剂(B): 酸性乙醇分化液 试剂(C): Scott 蓝化液 试剂(D): 刚果红染色液 试剂(E): Bennhold 分化液 使用说明 书
DG002 1 5×50ml
Storage
50ml RT 避光
50ml RT
50ml RT
50ml RT 避光
北京雷根生物技术有限公司
淀粉样物质染色液(Bennhold 刚果红法)
简介：
淀粉样物质是一种无固 定形状的细胞外 嗜酸性物质， 可存在于不同的 组织、器官，导 致的疾病称为淀粉样变 。目前研究发现传 统的甲紫染色法 灵敏度低、特异 性差，经典的而 且有效的方法是刚果红染色，1922 年 Bennhold 发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质 的鉴别，并应用到组织切片。淀粉样物质染色液(Bennhold 刚果红法)主要由刚果红染色液、 苏木素染色液等组成。该染色法性能稳定，是非常经典的淀粉样物质染色的方法。
辅802-2淀粉检验标准操作程序
目的：规范原辅料的检验方法和操作程序。
范围：淀粉。
责任：质检员。
程序：1性状1.1 外观检验：取样品约5g，放于洁净的白磁盘中，检查其颜色、状态、嗅、味。
1.2 依法检查（凡例），检查本品在水和乙醇中的溶解情况。
2鉴别2.1取本品1.0g，加水15ml，煮沸，放冷，观察现象。
2.2取样品0.10g，加水20ml混匀，加碘试液３滴，观察现象；加热，观察现象；放冷，观察现象。
2.3取本品少量，置于载玻片上，滴1滴甘油醋酸试液，放上盖玻片，在显微镜下观察。
取同样装置的载玻片，在偏光显微镜下观察。
3检查3.1酸度取本品20.0g，加水100ml振摇5分钟使混匀，按“PH检验标准操作程序”测定，记录PH值。
3.2干燥失重取本品1g精密称定，在105℃干燥5小时，按“干燥失重测定标准操作程序”检查。
3.3灰分取本品1g，精密称定，按“炽灼残渣检查标准操作程序”检查。
3.4 铁盐取本品0.50g，置50ml三角瓶中，加稀盐酸4ml与水16ml，振摇5分钟，淀粉检验标准操作程序第2页滤过至50ml比色管中，用少量水洗涤，合并滤液与洗液，加过硫酸铵50mg，用水稀释成35ml后，按“铁盐检查标准操作程序”检查，与标准铁溶液1.0ml制成的对照液比较，即得。
3.5 二氧化硫取本品20.0g，置具塞的250ml三角瓶中，加水200ml，充分振摇，滤过,取滤液100ml,加淀粉指示液2ml，用碘滴定液(0.01mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。
计算两者消耗的碘滴丁液（0.01mol/l）的差值△A。
3.6取本品4.0g，置具塞锥形瓶中，加水50.0ml，密塞，振摇5分钟，转入50ml具塞离心管中，离心至澄清，取上清液30.0ml，置碘量瓶中，加冰醋酸1ml 与碘化钾1.0g，密塞，摇匀，置暗处放置30分钟，加淀粉指示液1ml用硫代硫酸钠滴定液（0.002mol/L）滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。
常用染色液的配制
常用染色液的配制一、常用染色液的配制⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。
配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ；碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。
用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。
⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。
配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油（2）先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。
（3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。
⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。
配方：洋红1g ；45％醋酸100ml煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀），放入棕色瓶中备用。
⒋改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsine）核染色剂。
配制步骤：先配成三种原液，再配成染色液。
原液A：3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。
原液B：取原液A10ml加入到90ml 5％石炭酸水溶液中。
原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林（38％的甲醛）。
（原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用）染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1~，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著（若立即用，则着色能力差）。
适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。
山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。
⒌中性红（neutral red）溶液用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法Mallory三色染色法可用于胶原和网状纤维的染色，其中蓝色代表胶原和网状纤维，淡蓝色代表软骨、粘液和淀粉样变物质，红色代表神经胶原纤维、肌纤维和酸性颗粒，橘红色代表髓鞘和红细胞。
图表A1.1展示了Mallory三色染色法的效果，其中A组排列规则。
1.2 Masson三色染色法Masson三色染色法可用于胶原纤维和肌纤维的染色，其中绿色代表胶原纤维，红色代表肌纤维，橘红色代表红细胞。
图表B1.2和C1.2展示了Masson三色染色法在胃癌组织和血管平滑肌中的应用。
1.3 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法三联染色法可用于显示胶原、网状和弹性纤维，其中红色代表胶原纤维，黑色代表网状纤维，绿色代表弹性纤维，淡黄色代表肌肉和红细胞。
图表D展示了Weigert间苯二酚法的效果。
胶原纤维染色法2.1 天狼星红苦味酸染色法天狼星红苦味酸染色法可用于胶原纤维的染色，其中红色代表胶原纤维，绿色代表细胞核，黄色代表其他物质。
天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察，Ⅰ型呈强双折光性，呈黄色或红色纤维，Ⅱ型呈弱双折光，呈多种色彩疏网状分布，Ⅲ型呈弱双折光，呈绿色的细纤维，Ⅳ型呈弱双折光的基膜，呈淡黄色。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
2.2 Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法可用于胶原纤维的染色，其中鲜红色代表胶原纤维，黄色代表肌纤维、细胞质和红细胞，蓝褐色代表胞核。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
三、网状纤维染色3.1 XXX-Sweets银氨染色法XXX-Sweets银氨染色法可用于网状纤维的染色，其中黑色代表网状纤维，红色代表胞核（核固红复染），黄棕色代表胶原纤维，淡红色代表细胞质（红液复染）。
淀粉检测方法
淀粉检测方法淀粉是一种常见的碳水化合物，广泛存在于植物中，包括谷类、豆类、薯类等。
检测淀粉的方法有很多种，其中常见的有碘液法、酶法和红色亚甲基蓝法等。
下面将分别介绍这几种方法的原理和操作步骤。
碘液法是一种常用的淀粉检测方法。
其原理是淀粉与碘溶液反应生成蓝色复合物。
操作步骤如下：首先取少量待测样品，加入适量的水悬浮均匀；然后加入几滴碘液，观察颜色变化。
如果出现蓝色，即表示样品中含有淀粉。
酶法是利用淀粉酶水解淀粉生成葡萄糖，然后通过葡萄糖检测方法来间接检测淀粉的含量。
操作步骤如下：首先取少量待测样品，加入适量的酶溶液，放置一段时间使样品充分水解；然后加入酶抑制剂停止反应；最后使用葡萄糖检测方法来测定样品中的葡萄糖含量，从而间接得到淀粉的含量。
红色亚甲基蓝法是一种定量检测淀粉的方法。
其原理是淀粉与红色亚甲基蓝在酸性条件下反应生成蓝色复合物，根据复合物的颜色深浅来定量测定淀粉的含量。
操作步骤如下：首先取少量待测样品，加入酸溶液使其酸化；然后加入红色亚甲基蓝溶液，混合均匀；最后使用分光光度计测定样品溶液的吸光度，并根据标准曲线来计算淀粉的含量。
除了以上介绍的几种方法，还有一些其他的淀粉检测方法。
比如用硝酸和亚硝酸盐的混合液进行检测，淀粉会被氧化成胆固醇，然后再用三氟化硼浓溶液滴定，根据滴定的消耗量来确定淀粉的含量。
还有利用红外光谱仪等仪器设备进行淀粉定性定量分析的方法。
总结起来，淀粉的检测方法有碘液法、酶法、红色亚甲基蓝法等，每种方法都有其适用的场合和特点。
在实际应用中，根据需要选择合适的方法来进行淀粉的检测，可以有效地掌握样品中淀粉的含量，为相关研究和应用提供可靠的数据支持。
特殊染色
AAgNOR染色法:1、试剂配制：（1）AgNOR染色液：甲液：明胶2 g 溶于双蒸水至99 ml，在60℃使之完全溶解，再加入纯甲酸1 ml 摇匀待用。
乙液：硝酸银50 g 溶解于双蒸水中至100 ml，4℃冰箱保存。
（2）AgNOR工作液取甲液10 ml，乙液20 ml 临用前混合。
2、步骤：（1）切片脱蜡至水（2）双蒸水洗2次（3）AgNOR 工作液中（25℃）浸染30分钟（暗处进行）（镜下观察）（4）双蒸水洗3次（5）脱水,透明,封固3、结果：油镜观察，细胞核及胞质背景为淡黄色，AgNOR呈棕黑色颗粒状。
B鞭毛染色法:１．试剂配制：甲液：丹宁酸５克氯化铁（ＦｅＣｌ3）１．５克福尔马林（１５％）２．０毫升氢氧化钠（ＮａＯＨ）１％１．０毫升乙液：硝酸银（ＡｇＮＯ3）２克蒸馏水１００毫升制备乙液时，待硝酸银溶解后，取出１０毫升备用，向余下的９０毫升硝酸银液中滴加浓氢氧化铵，先呈很浓厚的沉淀，再继续滴加至刚刚溶解沉淀成澄清液为止。
再将备用的硝酸银溶液慢慢逐滴加入澄清液中，先呈现薄雾，但轻摇则消失，继续边滴加边摇动，待澄清液呈现略有轻微不消散的薄雾状为止。
如雾重，则银盐沉淀，不宜使用。
２．染色方法：（１）将待检菌接种在新制备的肉汤琼脂斜面上，置３７°培养１６—２０小时，备用。
（２）在载玻片的中部相隔一厘米处，用接种环各沾一滴蒸馏水，然后用接种环挑取湿润处的菌苔少许于一端的水滴中，倾斜玻片使培养物流至另一水滴中，两水滴自然相通，菌体从上位自然扩散到下位水滴中，待干燥后染色。
（３）在干燥涂片上加甲液３—５分钟，用蒸馏水冲洗。
将残水沥干或用乙液冲去残水后，加适量乙液保持３０—６０秒钟。
染色时在酒精灯上稍加热，使染液出现蒸汽即可，用蒸馏水冲洗。
（４）镜检：菌体及鞭毛皆染成茶色。
３．注意事项：（１）染液最好随用随配，存放至次日效果则差。
（２）一定要充分洗净甲液后再加乙液，否则背景较脏。
（３）防止水及培养物沾有氯化物。
生物实验染色剂
生物实验染色剂华越洋生物过碘酸溶液(0.5%) 100ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月又称高碘酸溶液，是一种氧化剂，常与Schiff试剂合用对糖原进行染色过碘酸溶液(1%) 100ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月又称高碘酸溶液，是一种氧化剂，常与Schiff试剂合用对糖原进行染色Schiff试剂50ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月又称雪夫试剂、希夫试剂，主要用于碳水化合物染色：如糖原,粘蛋白,糖蛋白,多糖,透明质酸。
又称无色品红染色液。
为无色液体，一般变黄或粉红应弃用。
Schiff试剂100ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月又称雪夫试剂、希夫试剂，主要用于碳水化合物染色：如糖原,粘蛋白,糖蛋白,多糖,透明质酸。
又称无色品红染色液。
为无色液体，一般变黄或粉红应弃用。
糖原PAS染色液4×50ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月经典的糖原染色法,不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜糖原染色中华越洋生物推荐采用该染色液，是最常用的经典糖原染色法,高碘酸和schiff试剂应低温保存。
染色结果为：PAS反应阳性物质(糖原或多糖)均呈红色或紫红色；细胞核呈蓝色。
糖原PAS染色液4×100ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月经典的糖原染色法,不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜糖原染色中华越洋生物推荐采用该染色液，是最常用的经典糖原染色法,高碘酸和schiff试剂应低温保存。
染色结果为：PAS反应阳性物质(糖原或多糖)均呈红色或紫红色；细胞核呈蓝色。
糖原PAS染色液(细胞专用) 4×20ml碳水染色40% 4℃,避光,6个月经典的糖原染色法,不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,特别适用于细胞、极其薄的切片。
细胞的糖原染色中华越洋生物公司推荐采用该染色液，是经典糖原染色法,高碘酸和schiff 试剂应低温保存。
GMP-淀粉检验操作规程
1 目的确定淀粉检验的操作程序和方法，确保合格的淀粉投入生产。
2 范围适用于本厂质监科化验室对本厂进厂的淀粉(辅料)的检验。
3 责任化验员有责任按照本操作规程对生产过程中所需的淀粉进行检验、判定，并对检验结果负责。
4 内容4.1性状本品为白色粉末；无臭，无味。
本品在冷水或乙醇中均不溶解。
4.2鉴别4.2.1试液及配制碘试液[可用碘滴定液（0.1mol/L）]取碘13.0g，加碘化钾36g，与水50ml溶解后，加盐酸3 滴与水适量，使成1000 ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。
4.2.2操作4.2.2.1取本品约1g，加水15ml，煮沸，放冷，即成半透明类白色的凝胶状物。
4.2.2.2取本品约0.1g，加水20ml，混匀，加碘试液数滴，即显蓝色或蓝黑色，加热后逐渐褪色，放冷，蓝色复现。
4.3检查4.3.1.1仪器酸度计、锥形瓶、烧杯等。
4.3.1.2操作取本品20.0g，加水100ml，振摇5分钟使混匀，立即照酸度计使用操作规程测定，PH值应为4.5～7.0。
4.3.2干燥失重4.3.2.1仪器电热恒温干燥箱、分析天平、扁形称量瓶。
4.3.2.2检验操作取样品1g，精密称定，置预先在105℃干燥至恒重的称量瓶中，于温度105℃干燥5小时，取出，在干燥器中冷却至室温，称重。
4.3.2.3计算M1 —M2X ( % ) = _________________ ×100%M式中M1 ————干燥前样品加称量瓶重量g；M2 ————干燥后样品加称量瓶重量g；M ————样品重量g。
4.3.2.4结果判定干燥失重应≤15.0% 。
4.3.3灰份马弗炉、分析天平、坩埚。
4.3.3.2检验操作取样品约1g，置在600℃~700℃炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化后，逐渐升温至600℃~700℃，使完全灰化并恒重，取出，在干燥器中冷却至室温，称重。
4.3.3.3计算M2—M1X ( % ) = __________________ ×100M式中M1——恒重坩埚的重量g；M2——灰化恒重后的样品加坩埚重量g；M ——样品重量g。
淀粉样物质染色液(甲紫法)使用说明
淀粉样物质染色液(甲紫法)使用说明货号：G1536有效期：6个月有效。
产品内容：2×50mL Storage试剂(A):甲基紫染色液50mL RT避光试剂(B):酸性分化液50mL RT产品说明：淀粉样物质是一种无固定形状的细胞外嗜酸性物质，可存在于不同的组织、器官导致的疾病称为淀粉样变。
淀粉样物质主要是由蛋白质构成，该蛋白大部分排列成反向的β-折叠层结构。
在电子显微镜下，淀粉样物质呈原纤维排列，病例材料中为大量细胞外的、不分支的细丝，大多随机排列。
用于识别淀粉样物质的组织学方法有甲紫染色、刚果红染色、偏振光显微镜观察等。
目前研究发现传统的甲紫染色法灵敏度低、特异性差，经典的而且有效的方法是刚果红染色，1922年Bennhold发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质的鉴别，并应用到组织切片，后来经过Highman改良，染色效果更好。
淀粉样物质染色液(甲紫法)主要由甲紫染色液、酸性分化液组成，是经Jurgens改良的一种异染色液，其染色原理是蛋白样物质中的酸性黏多糖与甲紫起异色反应。
其优点是简便省时，其缺点是染色后的切片难以保存。
自备材料：10%中性福尔马林固定液、甘油明胶操作步骤(仅供参考)：1、常规固定，常采用10%中性福尔马林，常规脱水包埋，切片厚度4μm，常规脱蜡至水。
2、入甲基紫染色液3min，无需水洗，滴加酸性分化液分化，直至无染色液脱出。
3、稍水洗，甘油明胶封固。
染色结果：淀粉样物质红色至紫红色细胞核、细胞质、结缔组织蓝色至深浅不一的紫蓝色注意事项：1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。
2、尽量采用浸染，如果滴染，应置于湿盒防止溶液挥发。
3、酸性分化液应密闭保存，分化步骤很重要。
4、染片不能经乙醇脱水，否则易出现无法上色的问题。
5、粘液物质甲紫染色时也会呈异染颗性红色，应注意鉴别。
6、在镜下观察异染性反应时，应注意把蓝色滤光片移去。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
淀粉样物质染色
淀粉样物质染色一、定义：淀粉样物质是一种无细胞的同质性的嗜伊红性物质，因为在用碘染色时与淀粉的反应相似，固称为淀粉样物。
二、淀粉样物的化学成分：1. 90%淀粉样原纤维蛋白。
①、淀粉样轻链蛋白。
（由浆细胞分泌的免疫球蛋白）②、淀粉样相随蛋白。
（来源于血浆中的免疫球蛋白）2、10%为糖蛋白。
三、淀粉样物的性质超微结构的研究证明它是由具有固定物理性质的蛋白原纤维构成。
每个纤维约为7.5豪微米宽Glenner 等人研究发明，淀粉样物是由排列呈β折叠结构的轻链多肽所构成。
四、HE染色后的形态：用HE染色后，它被染为均匀一致的淡粉红色，与胶原纤维玻璃样变是基本一样，不易鉴别。
五、染色后的电镜观察：1、微丝状构成的原纤维，刚果红染色具有绿色双折光性，2、棒状体没有刚果红染色所具有的双折光性。
结论：两者的超微结构，物理特性及化学成分完全不同。
六、病变最常累及的器官：肝、脾、肾和肾上腺。
七、病变累及器官的大体特征：器官变大，坚实，切面呈灰白色半透明状，严重时组织呈蜡样结构。
八、淀粉样物的种类：1、原发性淀粉样物：见于肌肉，心脏，皮肤和舌头。
2、继发性淀粉样物：见于肝、脾、肾脏和肾上腺。
3、多发性骨髓瘤并发的淀粉样物与免疫系统有关。
4、肿瘤和肿瘤有关的淀粉样物：如骨髓瘤、甲状腺髓样瘤。
九、显示淀粉样物的方法：(一)、甲基紫法：1、切片脱蜡至水，2、1%甲基紫染色5min，3、自来水洗，4、1%醋酸水溶液分化，直至呈现粉红色或红色，胞核呈蓝色，5、自来水洗，摔去多余的水分，6、用Apathy氏或阿拉伯胶封固。
结果：淀粉样物为粉红色至玫瑰红色。
其余组织呈蓝色至紫色。
注意事项：1、这是一种异色反应的方法，所谓异色反应即使用一种颜色的染液，最后形成的结果却为另外一种颜色，故称为异色反应。
2、该法的切片不能用酒精脱水，因酒精可将着染的颜色全部褪掉，也不宜用甘油明胶封固。
3、所用的甲基紫，也可用结晶紫代替效果基本一样。
4、由于切片是带水封固，因此不能做长期保存，如要摄影，应从速进行为好。
淀粉标准操作规程
淀粉检验标准操作规程1。
目的建立淀粉检验标准操作规程，规范操作。
2. 范围适用于淀粉的检验。
3. 依据《中国药典》2010版二部4。
职责4。
1 起草：QC 审核：质量保证部负责人批准人:质量管理负责人.4.2 QC实施本规程。
4.3 QA监督本规程的实施。
5。
内容5.1 性状本品为白色粉末；无臭.本品在冷水或乙醇中均不溶解。
5。
2 鉴别5。
2.1 试液及仪器一般实验仪器。
碘试液：可取用碘滴定液（0。
05mol/L）。
取碘13.0g，加碘化钾36g与水50ml溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。
甘油醋酸试液:取甘油、50% 醋酸溶液与水各1份，混合，即得。
5.2。
2 分析步骤5.2。
2.1 取本品约1g，加水15ml，煮沸，放冷，即成类白色半透明的凝胶状物。
5.2。
2.2 取本品约0.1g，加水20ml混匀，加碘试液数滴，即显蓝色或蓝黑色,加热后逐渐褪色,放冷，蓝色复现。
5.2.2。
3 取本品，用甘油醋酸试液装置（一部附录Ⅱ C），在显微镜下观察。
玉蜀黍淀粉均为单粒，呈多角形或类圆形，直径为5～30μm；脐点中心性，呈圆点状或星状；层纹不明显。
木薯淀粉多为单粒，圆形或椭圆形，直径为5～35μm，旁边有一凹处；脐点中心性，呈圆点状或星状，层纹不明显。
不得有其他品种的淀粉颗粒。
5.2.2。
4 取本品,在偏光显微镜下观察。
玉蜀黍淀粉和木薯淀粉均呈现偏光十字，十字交叉位于颗粒脐点处。
5。
3 检查5。
3.1 酸度5.3.1。
1 试液及仪器一般实验仪器。
5.3.1.2 分析步骤取本品20.0g，加水100ml，振摇5分钟使混匀，测定pH值应为4.5～7.0。
5。
3。
2 干燥失重5。
3。
2.1 试液及仪器一般实验仪器。
5。
3.2。
2 分析步骤取本品约1g，置105℃干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定,重量用M1（g)表示，在105℃干燥5小时，密称定,重量用M2（g）表示，恒重的称量瓶用M（g）表示，照下式计算减失重量：供试品减失重量（％)= ………………公式①玉蜀黍淀粉不得过14.0%，木薯淀粉不得过15.0％。
淀粉检验操作规程
GMP管理文件引用标准：《淀粉内控质量标准》一．目的：为规定淀粉的检查方法和操作要求，特制定此标准。
二．适用范围：适用于本公司淀粉的质量检测。
三．责任者：检验员四．正文：检品名称：淀粉技术要求：1．1 物理性状：本品为白色粉末，无臭，无味。
本品在冷水或乙醇中均不溶解。
2．鉴别2．1试剂与溶液:碘试液2．2操作方法2.2.1 取本品约1g，加水15ml，煮沸，放冷，即生成类白色半透明的凝胶状物。
2.2.2 取本品约0.1g，加水20ml混匀，加碘试液数滴，即显蓝色或蓝黑色，加热后逐渐褪色，放冷，蓝色复现。
2.2.3 取本品，用甘油醋酸试验装置，在显微镜下观察。
玉蜀黍淀粉均为单粒，呈多角形或类圆形，直径为5～30µm；脐点中心性，呈圆点或星状；层纹不明显。
木薯淀粉多为单粒，圆形或椭圆形，直径为5～35µm，旁边有一凹处；脐点中心性，呈圆点状或星状，层纹不明显。
取本品在偏光显微镜下观察。
玉蜀黍淀粉和木薯淀粉均呈现偏光十字，十字交叉位于颗粒脐点处。
该产品应符合以下标准：3．检查3．1仪器与用具:电热恒温水浴锅、箱式电炉、纳氏比色管、分析天平、酸度计3．2试剂与溶液：稀盐酸、过硫酸铵、标准铁溶液、淀粉指示液、碘滴定液、冰醋酸、碘化钾、硫代硫酸钠滴定液3．3操作方法酸度取本品20.0g，加水100ml，振摇5分钟使混匀，立即依法测定，PH值应为4.5～7.0。
灰分取本品约l.0g，置炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化后，逐渐升高温度到600～700℃，使完全炭化并至恒重，遗留的灰分，玉蜀黍淀粉不得过0.2%；木薯淀粉不得过0.3%。
铁盐取本品0．5g，加稀盐酸4ml与水16ml，振摇5分钟，滤过，用水少量洗涤，合并滤液与洗液，加过硫酸铵50mg，用水稀释成35 m1后，依法检查，与标准铁溶液1.0ml制成的对照液比较，不得更浓(O.002％)。
二氧化硫取本品20．0g，加水200ml，充分振摇，滤过，取滤液100ml，加淀粉指示液2ml，用碘滴定液（0.005mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。
检验淀粉的方法
检验淀粉的方法一、碘液法。
碘液法是一种常用的检验淀粉的方法。
首先，将碘液滴在待检测的食物样品上，如果食物中含有淀粉，碘液会变成蓝色或黑色。
这是因为淀粉分子内部有许多螯合碘的羟基，形成了碘淀粉蓝色化合物，使得食物呈现出蓝色或黑色。
这种方法简单易行，可以快速检验出食物中是否含有淀粉。
二、碘淀粉蓝色法。
碘淀粉蓝色法是一种定性检验淀粉的方法。
首先，将少量的淀粉加入试管中，然后加入适量的水和碘液，摇匀后观察试管内的颜色变化。
如果试管内的液体呈现出蓝色，则说明淀粉已经溶解并形成了碘淀粉蓝色化合物。
这种方法可以快速确定样品中是否含有淀粉，是一种简便有效的检验方法。
三、加热法。
加热法是一种定性检验淀粉的方法。
首先，将待检测的食物样品加入试管中，然后加入适量的水摇匀。
接着将试管放入热水中加热，观察样品的变化。
如果样品变成了淀粉糊状，说明食物中含有淀粉。
这种方法简单易行，可以快速检验出食物中是否含有淀粉。
四、酶法。
酶法是一种定量检验淀粉的方法。
首先，将待检测的食物样品加入试管中，然后加入适量的酶溶液，摇匀后放置一段时间。
接着加入适量的酚酞指示剂，摇匀后观察试管内的颜色变化。
如果试管内的液体呈现出红色，则说明食物中含有淀粉。
这种方法可以准确测定样品中淀粉的含量，是一种常用的检验方法。
总结：检验淀粉的方法有碘液法、碘淀粉蓝色法、加热法和酶法等。
这些方法各有特点，可以根据实际需要选择合适的方法进行检验。
无论是定性检验还是定量检验，都可以有效地检测出食物中是否含有淀粉。
在食品加工和科研工作中，正确使用这些方法可以保证食品质量和科研成果的准确性，对于保障人们的健康和促进科学研究都具有重要的意义。
淀粉遇碘变蓝的实训报告
一、实训目的1. 了解淀粉的化学性质。
2. 掌握使用碘液检测淀粉的方法。
3. 理解淀粉遇碘变蓝的原理。
4. 提高实验操作技能和观察分析能力。
二、实训时间2023年10月25日三、实训地点化学实验室四、实训器材与试剂1. 器材：试管、试管架、滴管、烧杯、镊子、滤纸等。
2. 试剂：淀粉溶液、碘液、蒸馏水、NaOH溶液等。
五、实训步骤1. 准备工作- 将实验器材和试剂准备好，并检查其质量。
- 了解实验原理，明确实验目的。
2. 淀粉溶液的制备- 将一定量的淀粉加入烧杯中。
- 加入适量的蒸馏水，搅拌均匀。
- 用滤纸过滤，得到澄清的淀粉溶液。
3. 淀粉遇碘变蓝实验- 将淀粉溶液分成两份，分别装入两个试管中。
- 在一个试管中加入几滴碘液，观察溶液颜色变化。
- 在另一个试管中加入几滴NaOH溶液，观察溶液颜色变化。
4. 观察与分析- 观察加入碘液的试管，溶液颜色变为蓝色。
- 观察加入NaOH溶液的试管，溶液颜色变为无色。
- 分析原因：淀粉与碘液发生络合反应，形成淀粉碘络合物，导致溶液颜色变蓝。
NaOH溶液与碘液反应，生成无色的碘化钠，使溶液颜色变为无色。
5. 结论- 淀粉遇碘变蓝的原理是淀粉与碘液发生络合反应，形成淀粉碘络合物。
- NaOH溶液与碘液反应，生成无色的碘化钠。
六、实训结果与分析1. 实验现象- 加入碘液的淀粉溶液颜色变为蓝色。
- 加入NaOH溶液的淀粉溶液颜色变为无色。
2. 实验结果分析- 淀粉与碘液发生络合反应，形成淀粉碘络合物，导致溶液颜色变蓝。
- NaOH溶液与碘液反应，生成无色的碘化钠，使溶液颜色变为无色。
3. 实验误差分析- 实验过程中，可能存在以下误差：- 淀粉溶液浓度过高或过低，导致实验结果不明显。
- 滴加碘液或NaOH溶液时，操作不当，导致溶液颜色变化不明显。
- 实验器材不干净，导致实验结果受到干扰。
七、实训总结1. 本实训成功实现了淀粉遇碘变蓝的实验目的。
2. 通过实验，掌握了淀粉的化学性质和碘液检测淀粉的方法。
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淀粉样物质染色液(甲紫法)操作步骤及注意事项
货号：G1536
有效期：6个月有效。
产品内容：
2×50mL Storage
试剂(A):甲基紫染色液50mL RT避光
试剂(B):酸性分化液50mL RT
产品说明：
淀粉样物质是一种无固定形状的细胞外嗜酸性物质，可存在于不同的组织、器官导致的疾病称为淀粉样变。
淀粉样物质主要是由蛋白质构成，该蛋白大部分排列成反向的β-折叠层结构。
在电子显微镜下，淀粉样物质呈原纤维排列，病例材料中为大量细胞外的、不分支的细丝，大多随机排列。
用于识别淀粉样物质的组织学方法有甲紫染色、刚果红染色、偏振光显微镜观察等。
目前研究发现传统的甲紫染色法灵敏度低、特异性差，经典的而且有效的方法是刚果红染色，1922年Bennhold发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质的鉴别，并应用到组织切片，后来经过Highman改良，染色效果更好。
淀粉样物质染色液(甲紫法)主要由甲紫染色液、酸性分化液组成，是经Jurgens改良的一种异染色液，其染色原理是蛋白样物质中的酸性黏多糖与甲紫起异色反应。
其优点是简便省时，其缺点是染色后的切片难以保存。
自备材料：
10%中性福尔马林固定液、甘油明胶
操作步骤(仅供参考)：
1、常规固定，常采用10%中性福尔马林，常规脱水包埋，切片厚度4μm，常规脱蜡至
水。
2、入甲基紫染色液3min，无需水洗，滴加酸性分化液分化，直至无染色液脱出。
3、稍水洗，甘油明胶封固。
染色结果:
淀粉样物质红色至紫红色
细胞核、细胞质、结缔组织蓝色至深浅不一的紫蓝色
注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。
2、尽量采用浸染，如果滴染，应置于湿盒防止溶液挥发。
3、酸性分化液应密闭保存，分化步骤很重要。
4、染片不能经乙醇脱水，否则易出现无法上色的问题。
5、粘液物质甲紫染色时也会呈异染颗性红色，应注意鉴别。
6、在镜下观察异染性反应时，应注意把蓝色滤光片移去。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。