组培

一、名词解释

1.植物组织培养：指在无菌和人工控制的环境条件下，利用值当的培养基，对离体的植物

器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。

2.胚胎培养：对植物体的成熟和未成熟胚以及具胚器官进行离体培养的方法。

3.愈伤组织：指外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分化的细胞进行活跃

的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。

4.植物细胞的全能性：指植物的体细胞在适当条件下，具有不断分裂、繁殖和发育成完整

植株的能力。

5.人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的

人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒体。

6.细胞分化：是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在的发育方式改变的过程。

7.原生质体培养：对分离出的原生质体进行培养，使其分裂分化直至形成完整植株的技术。

8.植物分生组织培养：是指对植物的分生组织进行离体培养的技术，包括植物根尖、茎尖

等顶端分生组织和形成层组织的培养。

9.初代培养：

10.植物细胞培养：对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞或小细胞团进行培养，形成单

细胞无性系或再生植株的技术。

11.外植体：

12.脱分化：是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去

原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。

13.再分化：离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几

种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株的过程。

二、简答题

1、简述无菌操作的具体步骤？

1)实验前20min将超净工作台的紫外灯打开，进行灭菌。试验时关闭紫外灯，避免人员被

紫外线照射。

2)用酒精喷壶或酒精棉将超净工作台消毒，然后实验操作者的手和小臂也用70％酒精消毒。

实验器具用酒精喷壶消毒之后，放入装有95％酒精的广口瓶中。

3)点燃超净工作台上的酒精灯，将广口瓶中的镊子和剪刀等器械取出，在酒精灯上灼烧，

放置在灭菌支架上冷却后使用；镊子和剪刀等器械也可以用灭菌器灭菌，由于灭菌器温度为300℃，故器械在灭菌器中灭菌1-2min，然后放在灭菌支架上冷却后使用。

4)需要接转的培养瓶或新培养瓶均应在酒精灯下方处打开瓶盖，且培养瓶的瓶口须在酒精

灯上灼烧，然后用冷却的无菌器械将材料切割后，植入新培养基上，快速将瓶盖等封口材料在酒精灯上燎烧，盖上瓶盖等封口材料。记录材料类型和接种日期，放置培养架上

2、简述茎尖作为外植体进行初代培养的培养基配方和培养环境特点？

3、简述胚胎培养的应用领域？

(一)克服远缘杂交不亲和性

远缘杂交中由于胚乳发育不正常或杂种胚与胚乳之间生理上的不协调，造成杂种胚早期夭折。将早期幼胚进行离体培养进行胚挽救，可克服这种受精后障碍，产生远缘杂种。，

(二)打破种子休眠。缩短育种周期

许多植物的种子发育不完全或有抑制物存在而影响种胚发芽。通过幼胚培养，可促使这些植物的幼胚达到生理和形态上的成熟而提早萌发形成植株。

(三)提高种子萌发率

长期营养繁殖的植物，虽具有形成种子的能力，但其生活力较低，萌发成苗率低下，胚培养可促进这类种子萌发和形成幼苗。

4、简述生长素的种类及其在组培中的主要生理作用？

吲哚乙酸、萘乙酸、2,4-氯苯氧乙酸。

作用：植物组织培养中，生长素在诱导愈伤组织形成和生根方面起着重要的作用。2,4-D在某些植物的组织培养中，还会诱导不定根的形成。生长素与细胞分裂素的配合使用，对于器官形成和植株再生可以起到调控作用。高浓度的生长素对芽的形成往往有抑制作用。

5、简述细胞分裂素的种类及其在组培中的主要生理作用？

激动素（KT）、玉米素、6-苄基腺嘌呤（TDZ）、2-异戊烯腺嘌呤。

作用：促进细胞分裂，诱导愈伤组织、不定芽、不定胚的产生。高浓度的细胞分裂素会抑制根的产生。

6、以植物茎尖为外植体，简述外植体灭菌的一般过程？

1)材料处理：从田间取回的材料，用自来水冲洗10分钟，洗去泥土等污垢，剪去残伤部分，

再用自来水冲洗数次。剪成小段放入烧杯中。

2)灭菌剂配置：开启超净工作台，用70％酒精彻底消毒。将次氯酸钠或氯化汞等灭菌剂从

冰箱内取出，在超净工作台上配置成所需浓度。为了使灭菌剂湿润整个组织，还需要在药液中加入数滴表面活性剂。

3)材料灭菌：把经过前处理的材料放入70％酒精中，进行表面消毒。取出后立即放入次氯

酸钠中灭菌。数分钟后取出，放入无菌水中冲洗3-5次。然后将材料放入装有湿滤纸的无菌培养基中进行适当切割分离，接入装有培养基的培养瓶中。操作过程中，镊子、剪子等器具要随时灭菌。

7、简述植物组织培养与田间植株常规繁殖技术相比，具有哪些优越性表现？

1)外植体遗传背景一致性高。再生植株的外植体可以来自细胞、组织、器官等，个体微小，

可来源于同一植物体，遗传性状一致性高，试验精度得到提高。

2)经济方便。外植体培养和繁殖为微型化和精密化，来源广泛，易管理，成本低。

3)培养材料生长条件可控制。培养材料生长所需的条件，即培养基和环境条件均可处于人

人工控制下，植株生长发育所需条件一致性高，试验误差低。

4)生长周期短。外植体生长处于优化条件下，其生长和繁殖速度快。

5)周年生长且规模化生产。不受季节影响，可周年进行工厂化大规模生产，保障了产品的

质量和数量。

8、简述铁皮石斛（或马铃薯）试管苗的移栽驯化操作技术程序？

移栽前，打开瓶盖炼苗2-3天。当试管苗高约3㎝并有3-4条1㎝左右的新根时，即可进行移栽。移栽前，洗净组培苗根上的培养基，用0.1％灭菌灵消毒，以防止栽培后的石斛苗根腐烂。基质可采用经过灭菌处理的蛭石。移栽后最初几天，要将空气湿度保持在85％-95％，先进行遮阴，遮光率为60％，逐渐增加光照强度。环境温度控制在18-22℃。经1-2月的管理，即可定植于由泥炭、碎砖屑以体积3:2所配成的混合基质中。石斛喜湿润的土壤环境，在管理期间应多喷水。基质无需追肥。当小苗完全适应外界环境后，可每隔1-2周在其叶面