实验-石蜡组织切片的制作

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石蜡切片制作实验报告(二)

石蜡切片制作实验报告(二)

石蜡切片制作实验报告(二)石蜡切片制作实验报告实验目的掌握石蜡切片的制作方法,了解其在生物学研究中的应用。

实验原理通过将样品置于石蜡中,使其固定后切割成薄片,然后染色观察样品中的细胞和组织结构。

实验材料•组织样品•石蜡•石蜡切片机•切片染色盒•水、乙醇、甲醇等试剂实验步骤1.取适量的组织样品,放入石蜡中固定。

2.用石蜡切片机将固化后的石蜡和组织样品切割成薄片。

3.用甲醇或乙醇脱除石蜡。

4.进行染色处理,如使用伊红染色。

5.将染好色的切片放入切片染色盒中,加入水并覆盖。

实验结果通过显微镜观察切片中的细胞和组织结构,可窥见其微观世界。

依据样品的不同,可看到各种细胞器、细胞分裂、组织的形态、结构和功能等信息。

实验注意事项1.操作时应戴手套和护目镜以保护手部和眼睛。

2.切片机的切割速度应适中,避免快过头造成样品损伤。

3.染色剂应均匀覆盖于切片表面,以免造成不必要的误差。

实验结论石蜡切片技术是生物学科研中必不可少的一种技术手段,能够突显样品中的微观结构,帮助科研工作者更好地了解和研究生物体的各种组织和器官。

实验应用石蜡切片技术在生命科学与医学领域得到了广泛的应用,如: - 组织学研究:观测组织中各种细胞器、细胞分裂、细胞凋亡等现象。

- 免疫学研究:确定免疫组织化学定位,如免疫组织化学染色等。

- 病理学研究:观测肿瘤等病理组织的构造特征。

- 分子生物学研究:观测基因的表达、蛋白质的结构等。

- 药理学研究:观察药物对细胞和组织的影响。

实验可能出现的问题及解决方法1.样品切面出现粗糙、污染现象:可能是切割速度太快,应适当降低切割速度。

2.切片中出现气泡或破损:可能是样品固定不够完整或者太多切片被叠加在一起,应减少切割深度或重新采集样品。

3.切片上未能完全染色:可能是涂抹染色剂时没有均匀涂抹,应均匀涂抹液体染色剂或更换染色试剂。

4.显微镜观察时出现模糊影响:可能是显微镜镜头或平台不够清洁,应及时清理。

结语石蜡切片技术是生物学研究中不可或缺的重要手段,在多个领域都得到了广泛应用。

石蜡切片的制作

石蜡切片的制作

石蜡切片的制作石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。

石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法,它有很多优点,例如,比较省时间,容易操作,可切成极薄的切片,能制作连续切片,组织块可包埋在石蜡中永久保存等。

缺点是只能用于较小的组织块,较大的组织块不易切好容易破碎,组织在脱水透明过程中产生收缩并易变脆,制片时间太长。

一、石蜡切片的制作过程石蜡切片的制作过程主要是:取材→水洗→固定→水洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→染色。

(一)取材及水洗根据实验要求选取材料来源及部位,取要求部位的小块组织成为组织块,组织块的大小以不超过0.5立方厘米为宜。

切去组织块时动作要轻,切忌用力牵引或挟持,以免组织内部发生变化。

由动物身上切取的组织必须是新鲜的,材料越新鲜越好,一般不应超过死后24小时,因此一般情况下,将动物处死后立即取需要的材料。

组织块取下后,先用相应的生理盐水漂洗以洗去血液、污渍以及粘液等。

如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净,可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次,使其管腔冲洗干净,切忌不可用刀或其他器具刮之。

(二)固定材料由动物体取下后应当迅速固定,固定的目的是尽快使固定液渗入组织内部,将组织固定以保持其原有的结构。

不同的组织应选用适当的固定液。

固定液的用量与组织块体积之比一般在20:1,不应使组织块贴于容器壁上。

材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,应记录固定液的名称,材料的种类,动物品种及开始固定的时间。

固定的时间长短依据材料大小而定。

固定液有许多种,在固定的过程中应该根据需要选取合适的固定液,一般固定液都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化而失去固定作用。

有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早固定时就没有作用了。

(三)水洗固定后的组织块在进行脱水前必须用流水洗去固定液。

,主要目的是洗去固定液的颜色以便后续的染色。

石蜡切片制备基本步骤(附HE染色步骤)

石蜡切片制备基本步骤(附HE染色步骤)

石蜡切片制备基本步骤一、准备工作(一)洗涤实验所需器皿:(玻璃器皿的清洗)1、用洗衣粉将玻璃器皿表里擦洗干净反复洗刷2、将器皿在自来水下冲洗干净3、将器皿倒扣在铺有吸水纸或纱布的桌子上控干注:一般情况下,经以上步骤后,用蒸馏水洗过1~3次即可烘干备用,如果做特殊染色还需浸泡在酸性清洁液内12~24小时,再经自来水彻底冲洗,再用蒸馏水过洗1~3次烘干备用。

(二)配制:硫酸洗液的配制清洁液(洗液)的配制:成分强酸液次强酸液弱酸液浓硫酸(ml)1000 200 100重铬酸钾(mg)63 120 100蒸馏水(ml)200 200 1000重铬酸钾1200g蒸馏水2000ml将2000ml浓硫酸缓缓倒入上述溶液中,边倒边用木棒轻轻搅拌(三)载玻片与盖玻片的处理1. 将所需载玻片与盖玻片清洗后,放入硫酸重铬酸钾溶液中浸泡24小时2. 流水冲洗,再用蒸馏水冲洗3遍3. 95%~100%酒精浸泡24小时,用绸布擦干备用注:在将载玻片与盖玻片放入清洁液中时,要一片片地投入,使其不致重叠。

二、常用液体的配制(一)缓冲溶液:1.磷酸盐缓冲液A液:0.1mol/L磷酸二氢钠B液:0.1mol/L磷酸氢二钠A液与B液按比例混合调整到所需的PH值(3:7≈PH7.0)2.枸椽酸缓冲溶液A液:0.1mol/L枸椽酸B液:0.1mol/L枸椽酸钠A液与B液按比例混合调整到所需的PH值(6.2:42.8≈PH6.2)(二)固定剂:1.甲醛:10%甲醛福尔马林100ml蒸馏水900ml注:实际甲醛含量只有3.6~4.0%但习惯上都将其视为10%。

2.10%中性福尔马林钙固定液甲醛液10ml蒸馏水90ml加碳酸钙至过饱和(以容器底部碳酸钙沉淀1~2cm厚为适度)充分振荡混合后,放置24小时取上清液使用。

3.4%多聚甲醛:8%多聚甲醛多聚甲醛8g蒸馏水100ml加温至60℃左右,不时搅拌,成为乳白色溶液。

滴加1N NaOH,并不停搅动至液体清明。

石蜡切片制作和HE染色实验报告

石蜡切片制作和HE染色实验报告

石蜡切片制作和HE染色实验报告实验目的:
本实验旨在掌握石蜡切片制作和HE染色的方法,以便观察组织结构和细胞形态。

实验步骤:
1. 用福尔马林固定组织标本。

2. 将组织标本脱水处理,然后浸泡于熔化的石蜡中。

3. 将石蜡浸渍的组织标本置于模具中,待石蜡凝固后,用切片机切割成薄片。

4. 将切片置于载玻片上,进行HE染色。

5. 用显微镜观察切片的组织结构和细胞形态。

实验结果:
通过石蜡切片制作和HE染色,成功获得了组织切片,并且染色
效果良好。

在显微镜下观察,可以清晰地看到组织细胞的形态和结构,染色也使细胞核和细胞质染色成不同的颜色,便于观察和分析。

实验分析:
石蜡切片制作和HE染色是常用的组织学实验方法,可以有效地
观察和研究组织结构和细胞形态。

本次实验结果表明,我们掌握了
石蜡切片制作和HE染色的技术要点,能够准确地进行实验操作并获
得良好的实验结果。

实验总结:
通过本次实验,我们深入了解了石蜡切片制作和HE染色的方法
和原理,掌握了实验操作的技巧,并且获得了明确的实验结果。


将为我们今后的组织学研究和临床诊断提供重要的技术支持。

同时,我们也意识到在实验操作中需要严格控制每个步骤,以确保实验结
果的准确性和可靠性。

自查结论:
本次实验取得了成功的实验结果,但在实验过程中仍需注意细节操作,确保实验的准确性和可靠性。

同时,还需要进一步加强对石蜡切片制作和HE染色的理论知识和实验技术的掌握,以提高实验操作的熟练度和实验结果的稳定性。

石蜡切片制作和HE染色实验报告

石蜡切片制作和HE染色实验报告

石蜡切片制作和HE染色实验报告英文回答:Introduction:Paraffin sectioning and H&E staining are essential techniques in histopathology for examining tissue samples under a microscope. Paraffin sectioning involves embedding tissues in paraffin wax, cutting thin sections, and mounting them on glass slides. H&E staining is a common staining method that uses hematoxylin and eosin to differentiate cell components.Materials and Methods:Tissue samples。

Paraffin wax。

Microtome。

Glass slides。

Hematoxylin。

Eosin。

Ethanol。

Xylene。

Procedure:Paraffin Sectioning:1. Fix the tissue samples in formalin and process them through a series of graded ethanol solutions.2. Embed the tissues in paraffin wax and allow them to solidify.3. Use a microtome to cut thin sections (5-10 microns)from the paraffin block.4. Mount the sections on glass slides and allow them to dry.H&E Staining:1. Deparaffinize the sections by passing them through xylene and ethanol solutions.2. Stain the sections with hematoxylin and rinse with water.3. Differentiate the hematoxylin staining with hydrochloric acid and rinse with water.4. Counterstain the sections with eosin and rinse with water.5. Dehydrate the sections by passing them through graded ethanol solutions and clear them in xylene.6. Mount the sections with a coverslip and examine them under a microscope.Interpretation of Results:Hematoxylin stains the nuclei blue, while eosin stains the cytoplasm pink.The stained sections allow for the examination of tissue morphology, identification of cell types, and detection of pathological changes.Conclusion:Paraffin sectioning and H&E staining are fundamental techniques in histopathology that provide valuable information for the diagnosis and study of diseases.中文回答:石蜡切片制作和HE染色实验报告。

石蜡切片的实验报告

石蜡切片的实验报告

一、实验目的1. 掌握石蜡切片的制作过程,包括组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和染色等步骤。

2. 了解石蜡切片技术在生物学研究中的应用。

3. 学会使用显微镜观察石蜡切片,识别不同组织结构。

二、实验原理石蜡切片技术是一种重要的生物学制片方法,用于观察组织、细胞等微观结构。

其基本原理是将组织固定后,通过一系列的脱水、透明、浸蜡等步骤,使组织在石蜡中充分浸渍,然后用切片机切成薄片,最后进行染色和观察。

三、实验材料1. 实验动物:小鼠2. 组织:肝脏、肾脏、心肌、骨骼肌等3. 试剂:卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液、甘油蛋白粘片剂、郝普特氏粘片剂、中性树胶、1%番红、1%固绿、1%过碘酸、Schiff 试剂、0.5%偏重亚硫酸钠溶液、醋酸酐-吡啶混合液、0.5%~1%淀粉糖化酶溶液等4. 器材:切片刀、切片机、恒温箱、温台、熔蜡炉、蜡杯、酒精灯、蜡铲、展片台、解剖刀、解剖针、解剖剪、解剖盘、培养皿、吸管、镊子、单面刀片、台木、毛笔、洒精灯、包埋纸盒、染色缸、盖玻片、载玻片、玻片盘、树胶、树胶瓶、显微镜、温度计、脸盆、水浴锅等四、实验步骤1. 取材:取新鲜组织,固定于4%多聚甲醛24小时以上。

2. 脱水:将固定后的组织依次放入75%、85%、90%、95%酒精中浸泡1小时,然后放入无水乙醇I、无水乙醇II中浸泡30分钟,最后放入醇苯中浸泡5-10分钟。

3. 透明:将组织放入二甲苯I、二甲苯II中浸泡5-10分钟。

4. 浸蜡:将组织放入熔化的石蜡中浸泡1小时。

5. 包埋:将浸好蜡的组织放入包埋机内进行包埋,待石蜡凝固后取出并修整蜡块。

6. 切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚约4微米。

7. 展片:将切片漂浮于摊片机40℃温水上,将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烤箱内烤片。

8. 染色:将烤干的切片进行染色,如苏木精-伊红染色。

石蜡切片(苏木精-伊红对染法)

石蜡切片(苏木精-伊红对染法)

石蜡切片制作(苏木精-伊红对染法)实验原理:石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。

苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。

这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。

经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。

一、器材及试剂:1. 器材:切片刀,切片机,恒温箱,蜡杯,酒精灯,解剖刀,解剖剪,解剖盘,培养皿,镊子,单面刀片,毛笔,包埋盒,染色缸,盖玻片,载玻片,玻片盘,树胶,树胶瓶,显微镜,温度计,脸盆,水浴锅。

切片机,切片刀,温台,恒温箱,解剖刀,镊子,剪刀,解剖针,单面刀片,小台木,洒精灯,包埋纸盒,染色缸,烧杯,水盆,熔蜡炉,蜡杯。

2.试剂:中性福尔马林固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液, 1%伊红酒精溶液,1%盐酸酒精溶液,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。

卡诺(Carnoy)固定液,埃利希苏木精染液,1%伊红酒精溶液,1%盐酸乙醇液,各级酒精(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%),二甲苯,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。

3. 材料:鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。

二、实验原理:石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。

苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。

这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。

经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。

三、试剂配法:1.中性甲醛固定液:甲醛(37%-40%,市售,本所购买即为此浓度) 100mL磷酸氢二钠 6.5磷酸二氢钾(钠) 4g双蒸水 900mL 2.苏木精、伊红染色液为碧云天产品3.1%盐酸乙醇液盐酸 1份70%酒精 100份4.甘油蛋白贴片剂:蛋白 50 ml甘油 50 ml水杨酸钠(防腐剂) 1g配制时将鸡蛋一个打破入碗或杯中,去蛋黄留下蛋白,用玻棒调打成雪花状泡沫,然后用粗纸或双层纱布过滤到量筒中,经数小时或一夜,即可滤出透明蛋白液。

石蜡包埋组织切片制作过程

石蜡包埋组织切片制作过程

石蜡包埋组织切片制作过程石蜡包埋组织切片制作是组织学研究中常用的一种技术,它可以将组织样本固定、包埋、切片、染色等一系列步骤完成,以便于观察和分析组织结构和功能。

下面将详细介绍石蜡包埋组织切片制作的过程。

1. 组织固定需要将待研究的组织样本进行固定,以保持其形态和结构。

常用的固定剂有福尔马林、乙醛、甲醛等。

固定时间和温度根据不同的组织类型和固定剂而异,一般需要固定4-24小时。

2. 组织脱水固定后的组织需要进行脱水处理,以去除其中的水分,使其能够与石蜡相容。

脱水一般采用乙醇逐渐升级浓度的方法,如70%、80%、95%、100%乙醇,每个浓度的时间一般为1-2小时。

3. 组织清洁脱水后的组织需要进行清洁处理,以去除其中的脂肪和其他杂质。

清洁一般采用苯、甲苯、氯仿等有机溶剂,每个溶剂的时间一般为1-2小时。

4. 组织浸渍清洁后的组织需要进行浸渍处理,以使其与石蜡相容。

浸渍一般采用苯、甲苯、氯仿等有机溶剂,每个溶剂的时间一般为1-2小时。

5. 组织包埋浸渍后的组织需要进行包埋处理,以使其能够被切片机切割。

包埋一般采用石蜡,将组织样本浸泡在石蜡中,然后在石蜡中进行固化。

固化时间和温度根据不同的组织类型和石蜡而异,一般需要固化4-24小时。

6. 组织切片包埋后的组织需要进行切片处理,以便于观察和分析组织结构和功能。

切片一般采用微型切片机,将石蜡包埋的组织样本切成薄片,厚度一般为4-6微米。

7. 组织染色切片后的组织需要进行染色处理,以便于观察和分析组织结构和功能。

常用的染色剂有血液学染色剂、组织学染色剂等。

染色时间和方法根据不同的染色剂而异,一般需要染色5-30分钟。

石蜡包埋组织切片制作过程是一个复杂的过程,需要进行多个步骤的处理,以保证组织样本的完整性和可观察性。

这种技术在组织学研究中具有重要的应用价值,可以为疾病的诊断和治疗提供重要的参考依据。

山西中学组织学石蜡切片制作过程

山西中学组织学石蜡切片制作过程

山西中学组织学石蜡切片制作过程一、前期准备工作1.2保存组织标本:取得组织标本后,应及时将其放入含有固定剂(如福尔马林)的容器中。

目的是阻止组织中的生物活动,保持组织的完整性,并且避免其腐烂。

1.3固定组织标本:将标本浸泡在福尔马林等固定剂中,时间根据组织的大小和性质而定,一般为24-48小时。

固定后,将固定剂倒掉,并用80%乙醇代替,以除去固定剂残留。

二、石蜡包埋2.1脱水处理:为了去除组织中的水分,使其逐渐转变为可以被石蜡所取代的有机物质,需要使用一系列递增浓度的酒精溶液浸泡标本。

一般步骤为70%酒精浸泡2小时,85%酒精浸泡2小时,95%酒精浸泡1小时,绝对酒精浸泡1小时,每次浸泡30分钟。

2.2渗透处理:将标本放入石蜡浸泡器中,利用负压吸取空气,将石蜡通过负压使其渗透到组织内部。

首先使用浓度为70%的石蜡浸泡1小时,然后逐渐转移到90%、100%的石蜡浸泡器中,每次浸泡时间为30分钟。

2.3包埋处理:取出石蜡浸泡器中的标本,将其放入石蜡中央的切底模具中。

使用石蜡将标本完全覆盖,并且与切底模具紧密贴合。

然后将模具放入冷却器中,待石蜡冷却凝固。

三、切片制作3.1准备切片机:将切片机的刀刃和刀脊擦拭干净,然后固定标本架在切片机上。

调整刀刃角度和切片厚度,一般切片厚度为3-5微米。

3.2开始切片:启动切片机,使刀刃快速向下移动,与固定的石蜡标本接触。

切割完毕后,将得到的石蜡切片放入温水中,使其浮起来。

3.3过片处理:使用刷子将切片从水中捞出,并悬挂在热面层上。

用热力将切片展平,然后放入烘箱中进行烘干。

四、切片染色4.1染料溶液准备:准备需要的染色溶液,常用的染色剂有伊红、苏木精、淡甲酸溶液等。

根据实验需求和组织特性选择合适的染料。

4.2开始染色:将石蜡切片依次放入每种染料溶液中,染色时间根据组织特性和染料浓度来确定。

一般染色时间不宜过长,以免影响染色质量。

4.3染色过程控制:对于希望获得不同颜色的组织结构,可以通过控制染色时间来实现。

石蜡切片的实验报告

石蜡切片的实验报告

石蜡切片的实验报告石蜡切片的实验报告石蜡切片是生物学和医学领域中常用的技术手段,它可以将组织样本固定在切片上,以便于观察和分析。

本次实验旨在探究石蜡切片技术的原理、步骤和应用。

一、石蜡切片技术的原理石蜡切片技术是一种常用的组织学研究方法,它的原理基于石蜡的透明性和稳定性。

石蜡是一种具有较高熔点的蜡状物质,具有良好的剪切性和切片稳定性。

在进行石蜡切片前,需要将组织样本进行固定、脱水和浸渍处理,使其具备适合切片的性质。

然后,将固定好的组织样本浸入石蜡中,石蜡渗透进入组织细胞中,将其包裹在石蜡中形成固定的切片。

最后,使用显微镜对切片进行观察和分析。

二、石蜡切片的步骤1. 组织样本的固定:将组织样本取出后,迅速进行固定处理。

常用的固定剂有福尔马林、乙醛等,可以使组织样本保持原有的形态结构。

2. 脱水处理:将固定好的组织样本进行脱水处理,以去除组织中的水分。

脱水过程中,需要逐渐使用浓度递增的酒精进行浸泡,使组织逐渐脱水至无水状态。

3. 浸渍处理:将脱水后的组织样本浸泡在石蜡溶液中,使其充分浸渍。

浸渍时间根据组织样本的大小和类型而定,一般需要数小时至数天。

4. 石蜡包埋:将浸渍好的组织样本放入石蜡模具中,加热使石蜡融化,将组织样本包裹在石蜡中。

包埋过程中需要控制温度和时间,以确保石蜡充分渗透到组织中。

5. 石蜡切片:使用石蜡切片机将包埋好的组织样本切割成薄片。

切片时需要调整切片机的切割速度和刀片的角度,以获得理想的切片质量。

6. 切片染色:将切好的石蜡切片进行染色处理,以增强组织结构的对比度和可见性。

常用的染色方法有血液学染色、组织学染色等。

7. 显微镜观察:将染色好的石蜡切片放置在显微镜下进行观察和分析。

通过显微镜的放大功能,可以清晰地观察到组织样本的细胞结构和组织构成。

三、石蜡切片技术的应用石蜡切片技术在生物学和医学领域中有广泛的应用。

首先,它可以用于病理学研究,帮助医生诊断和治疗疾病。

通过观察石蜡切片下的组织结构,医生可以了解病变的类型、程度和分布情况,从而制定相应的治疗方案。

石蜡切片实验报告(一)

石蜡切片实验报告(一)

石蜡切片实验报告(一)石蜡切片实验报告摘要•石蜡切片实验是一种常用的组织学技术,用于研究生物组织的结构和功能。

•本报告通过对石蜡切片实验的描述和结果分析,总结了该实验的步骤和注意事项。

引言•石蜡切片实验是一种常用的技术,被广泛应用于医学、生物学等领域。

•本报告旨在总结石蜡切片实验的基本原理、步骤和注意事项,并分析实验结果。

实验原理•石蜡切片实验是一种将生物组织固定、浸泡、包埋和切割的方法。

•通过该实验可以获取生物组织的切片,用于观察细胞结构和功能。

实验步骤1.生物组织固定:将待实验组织固定在适当的固定液中,以保持细胞的形态。

2.组织浸泡:将固定后的组织浸泡在逐渐浓度上升的酒精溶液中,以去除水分。

3.组织包埋:将浸泡后的组织置于熔化的石蜡中,使其逐渐渗透和包埋。

4.组织切割:将包埋好的组织用切片机切割成薄片,通常为5-10微米厚。

5.切片染色:将切割好的组织片进行染色,以突显细胞结构和功能。

6.切片封装:将染色好的组织片放置在玻璃载板上,并用封片剂封装,以保护切片。

实验注意事项•实验过程中需注意个人安全,避免与切割仪器和刀片直接接触。

•切片时需控制切片机的速度和厚度,以获得理想的切片质量。

•染色时需掌握适当的染色时间和浓度,避免染色过度或不足。

实验结果与讨论•通过石蜡切片实验,我们成功获取了生物组织的切片。

•切片经过染色后,细胞核、细胞质和细胞器可以清晰地观察到,有助于进一步研究组织的结构和功能。

•实验结果表明,石蜡切片实验是一种可靠、高效的技术,适用于各种生物组织的研究。

结论•本报告总结了石蜡切片实验的步骤和注意事项,并分析了实验结果。

•通过石蜡切片实验,我们可以观察和研究生物组织的结构和功能,为相关领域的研究提供重要数据支持。

石蜡的切片实验报告

石蜡的切片实验报告

一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的制作过程。

2. 掌握石蜡切片的染色技术。

3. 了解石蜡切片在组织学研究和病理诊断中的应用。

二、实验原理石蜡切片技术是一种常用的组织学制片方法,其原理是将组织标本进行脱水、浸渍、浸蜡等处理,使其在石蜡中充分浸渍,然后用微型切片机将其切成薄片,最终制成组织学切片。

石蜡切片具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点,是组织学研究和病理诊断的重要工具。

三、实验材料1. 实验动物:小白鼠2. 实验器材:石蜡切片机、显微镜、载玻片、盖玻片、染色缸、酒精灯、剪刀、镊子等3. 实验试剂:卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液等四、实验步骤1. 取材:取小白鼠肝脏组织,用剪刀剪成小块。

2. 固定:将剪好的组织块放入卡诺氏固定液中固定24小时。

3. 脱水:将固定好的组织块依次放入70%、80%、90%、95%、100%酒精溶液中,每级酒精溶液浸泡1小时,使组织逐渐脱水。

4. 透明:将脱水的组织块依次放入三个二甲苯溶液中,每缸浸泡1小时,使组织逐渐透明。

5. 浸蜡:将透明的组织块依次放入三个石蜡溶液中,每缸浸泡1小时,使组织完全浸渍在石蜡中。

6. 包埋:将浸好蜡的组织块放入熔蜡中,待石蜡凝固后取出,用剪刀修整蜡块。

7. 切片:将修整好的蜡块固定在石蜡切片机上,调整切片厚度为4微米,制成石蜡切片。

8. 展片:将切好的石蜡切片展平在载玻片上。

9. 脱蜡:将展平的石蜡切片依次放入二甲苯、无水乙醇中,使切片脱蜡。

10. 染色:将脱蜡后的切片放入苏木精染液中染色5-10分钟,然后放入1%盐酸酒精溶液中分化,最后放入伊红染液中复染30秒。

11. 封片:将染好的切片放入封片液中封片。

五、实验结果制作完成的石蜡切片在显微镜下观察,可见到肝脏组织的细胞结构,如细胞核、细胞质、血管等。

六、实验讨论1. 石蜡切片技术是组织学研究和病理诊断的重要工具,具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点。

石蜡切片流程

石蜡切片流程

石蜡切片流程一、引言石蜡切片是生物学、医学和材料科学等领域中常用的一种实验技术,用于制备样品的薄片,以便进行显微观察和分析。

本文将介绍石蜡切片的流程及其关键步骤。

二、材料准备1. 石蜡:选择适合的石蜡材料,常见的有硬质石蜡和软质石蜡。

2. 样品:根据需要选择合适的样品,可以是生物组织、细胞、材料等。

3. 切片刀:选择切割尖锐且锋利的切片刀,常见的有玻璃刀片和钢刀片。

4. 切片机:使用专业的切片机设备,保证切片的精准度。

三、石蜡切片流程1. 固定样品:将样品进行固定处理,常用的方法有福尔马林固定、乙醛固定、冷冻固定等。

固定的目的是保持样品的形态结构和生物活性。

2. 除去水分:将固定后的样品通过醇溶液逐渐去除水分,一般采用浓度逐渐降低的醇溶液,如75%乙醇、50%乙醇、30%乙醇等。

3. 渗透石蜡:将去水后的样品用石蜡进行渗透处理。

首先将样品置于较低融点的石蜡中,然后逐渐转移到较高融点的石蜡中,这样可以保证样品逐渐与石蜡融合。

4. 包埋:将渗透后的样品放入石蜡模具中,待石蜡凝固后,取出石蜡块。

5. 切片:使用切片机将石蜡块切割成薄片,切片的厚度根据需要进行调整,一般为4-10微米。

6. 切片处理:将切好的薄片浸泡在温水中,使其展平,并将薄片转移到载玻片上。

7. 固定薄片:将载玻片放入烘箱中,以适当的温度和时间使薄片与载玻片充分固定。

四、注意事项1. 操作环境:保持实验室的清洁和安静,避免灰尘和噪音对实验结果的影响。

2. 刀片处理:在使用切片刀前,先将其清洗干净并消毒,以防止样品污染。

3. 温度控制:石蜡切片的各个步骤中,温度的控制非常重要,可以根据不同的样品选择适当的温度。

4. 切片厚度:不同的样品需要不同的切片厚度,要根据实验需要进行调整。

5. 质量控制:在每个步骤结束后,要对样品的质量进行严格检查,确保切片的质量。

6. 保存条件:切好的石蜡切片应妥善保存,防止受潮或受到外界环境的污染。

五、总结石蜡切片是一种常用的实验技术,通过固定、去水、渗透石蜡、切片等步骤,可以制备出精细的样品薄片,用于显微观察和分析。

石蜡切片实验报告

石蜡切片实验报告

石蜡切片实验报告石蜡切片是一种常用的组织学实验技术,已经被广泛应用于医学、生物学等领域。

本实验报告将详细介绍石蜡切片实验的步骤、原理以及实验中可能遇到的问题和解决方案。

第一部分:实验步骤石蜡切片实验的步骤主要包括标本制备、石蜡浸渍、切片和染色几个关键环节。

首先,我们需要收集适当的组织标本,如动物器官或植物组织。

这些标本需要经过固定处理,通常使用福尔马林进行固定,然后进行脱水和透明化处理,最终被浸渍进入石蜡中。

在石蜡浸渍的过程中,我们需要将标本逐渐浸入温度逐渐升高的石蜡中,以使其充分浸渍并软化。

这个过程中需要注意温度的控制,同时还要避免气泡的产生。

一旦标本被完全浸渍在石蜡中,我们可以使用石蜡切片机进行切片。

在切片过程中,我们需要调整切片机的切片厚度,通常为4-6微米。

此外,为了得到较好的切片质量,我们还需要确保刀片的锋利度和切片机的切片速度适当。

切片完成后,我们需要将切片置于载玻片上,并进行染色处理。

染色可以提高组织的对比度,使细胞和组织结构更加清晰可见。

常用的染色方法包括血液学染色、核染色和生物标记染色等。

第二部分:实验原理石蜡切片实验的原理是基于石蜡的高渗透性和易于切割的特点。

通过浸渍和固化过程,标本会充分浸泡在石蜡中,使其变得坚硬而易于切割。

切片机通过旋转刀片来切割标本,形成薄而均匀的切片。

石蜡切片实验的目的是为了观察和研究细胞和组织的结构。

通过切片和染色,我们可以清晰地看到细胞的形态、组织的排列以及细胞内的细胞器结构。

这对于研究疾病的发生机制、药物治疗的效果评估以及生物学基础研究等方面都具有重要意义。

第三部分:实验问题与解决方案在石蜡切片实验中,可能会遇到一些常见的问题,如切片不均匀、切片断裂或组织变形等。

这些问题可能会影响实验的结果和观察效果。

为了解决这些问题,我们可以在实验过程中采取一些措施。

首先,在标本制备过程中,我们可以控制好固定时间,避免过长或过短的固定时间导致的组织变形。

其次,在切片机操作过程中,我们需要确保刀片的锋利度和切片机的切片速度适当,以避免切片不均匀或切片断裂的问题。

山西中学组织学石蜡切片制作过程

山西中学组织学石蜡切片制作过程

山西中学组织学石蜡切片制作过程山西中学组织学石蜡切片制作过程石蜡切片制作是生物学实验中常用的技术手段之一,它可以将生物样品制作成薄片,以便进行显微镜观察和研究。

下面将详细介绍山西中学组织学石蜡切片的制作过程。

一、收集和处理样品1. 样品的选择:在进行石蜡切片制作之前,首先需要选择合适的组织样品。

山西中学通常会选择动植物的组织器官,如根、茎、叶、肌肉等。

2. 样品的固定:在采集到样品后,需要对其进行固定处理,以保持其原有的形态结构和细胞组织。

常用的固定剂有福尔马林、乙醛等。

3. 样品的脱水:固定后的样品需要将其中的水分逐渐去除,以便后续的浸渍和包埋。

脱水过程通常采用乙醇梯度浓度法,逐渐提高乙醇浓度,如70%、80%、90%和100%。

4. 样品的浸渍:脱水后的样品需要进行浸渍处理,以使其充分吸收石蜡。

浸渍一般采用二氯甲烷和石蜡的混合物,常用比例为1:1。

二、制作石蜡块1. 准备模具:将石蜡切片制作时需要的模具准备好,一般为方形或圆形的塑料模具。

2. 熔化石蜡:将石蜡块放入石蜡熔化器中,加热至石蜡完全熔化。

3. 倒入模具:将熔化的石蜡倒入模具中,待石蜡凝固成块后取出。

三、制作切片1. 切片机的准备:将石蜡块固定在切片机的切片台上,并调整切片机的切片厚度。

2. 切片:将切片刀沿着石蜡块的平面切割,得到薄片。

3. 转移切片:用切片刀将切下的薄片转移到水中,静置片刻,使其展开。

四、薄片处理1. 涂片:将展开的切片用刷子轻轻涂上一层胶水,以固定切片。

2. 干燥:将涂上胶水的切片放置在通风处自然晾干,使胶水完全干燥。

3. 上浆:将干燥的切片放入浆液中,使其充分吸收浆液。

4. 固化:将上浆后的切片放置在烘箱中加热,使浆液固化。

五、染色和封片1. 染色:将固化后的切片放入染色液中浸泡,使其染色。

2. 清洗:将染色后的切片用水冲洗,去除多余染色剂。

3. 脱水:将清洗后的切片依次放入乙醇梯度浓度的溶液中,使其脱水。

4. 封片:将脱水后的切片放入透明胶片中,再用热源加热胶片,使其封住切片。

石蜡切片制作和HE染色实验报告

石蜡切片制作和HE染色实验报告

石蜡切片制作和HE染色实验报告
实验目的,通过石蜡切片制作和HE染色实验,观察组织结构和
细胞形态,学习并掌握组织学技术操作方法。

实验原理,石蜡切片制作是将组织标本固定、脱水、透明化、
浸渍石蜡、包埋、切片、贴片、脱蜡、染色、脱水、透明化、封片
的过程。

HE染色是一种常用的组织学染色方法,用于观察组织结构
和细胞形态的染色技术。

实验步骤:
1. 组织标本固定,取得组织标本后,进行快速固定。

2. 脱水,将固定后的组织标本置于不同浓度的乙醇中逐步脱水。

3. 透明化,将脱水后的组织标本置于透明剂中进行透明化处理。

4. 浸渍石蜡,将透明化后的组织标本浸渍熔化的石蜡中。

5. 包埋,将浸渍石蜡后的组织标本置于包埋模具中,倒入石蜡
进行包埋。

6. 切片,用切片机将包埋后的标本切成薄片。

7. 贴片,将切好的薄片贴在载玻片上。

8. 脱蜡,将贴片后的载玻片置于脱蜡剂中进行脱蜡处理。

9. 染色,将脱蜡后的载玻片进行HE染色处理。

10. 脱水,将染色后的载玻片进行脱水处理。

11. 透明化,将脱水后的载玻片进行透明化处理。

12. 封片,将透明化后的载玻片盖上盖玻片封好。

实验结果,通过实验操作,成功制作了石蜡切片并进行了HE染色。

观察下来,组织结构清晰,细胞形态明显,染色效果良好。

实验结论,通过本次实验,我学习并掌握了石蜡切片制作和HE 染色的操作方法,对组织学技术有了更深入的了解。

同时,我也意
识到实验操作中的细节和步骤对结果的影响,需要在以后的实验中更加细心和认真。

石蜡切片实验报告

石蜡切片实验报告

石蜡切片实验报告石蜡切片实验报告石蜡切片是一种常见的实验技术,广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。

本实验旨在探索石蜡切片的制备方法、切片技术以及应用领域。

一、石蜡切片的制备方法石蜡切片的制备方法主要包括固定、脱水、浸渗和包埋四个步骤。

首先,需要将待切割的样本进行固定处理,常用的方法有福尔马林固定和乙醛固定等。

固定处理的目的是保持样本的形态结构和化学组成,以便后续的处理。

接下来,进行脱水处理,将固定的样本逐渐置于浓度递增的酒精溶液中,以去除样本中的水分。

然后,进行浸渗处理,将脱水后的样本逐渐浸渗于石蜡中,以增加样本的硬度和刚性。

最后,进行包埋处理,将浸渗后的样本置于石蜡中,使其完全包裹。

制备好的石蜡块可以进行切片处理。

二、石蜡切片的切片技术石蜡切片的切片技术主要包括石蜡块修整、切片机操作和切片收集三个步骤。

首先,需要对石蜡块进行修整,将其切割成适当大小的块,以便放置于切片机中。

修整过程需要注意保持切片块的平整和规整,以确保切片的质量。

接下来,进行切片机操作,将石蜡块固定在切片机上,并设置好切片机的切割参数,如切片厚度和切割速度等。

切片机通常使用旋转刀片进行切割,通过旋转刀片与石蜡块的接触,将石蜡块切割成薄片。

最后,进行切片收集,将切割好的石蜡切片收集起来,可以用于后续的染色、观察和分析。

三、石蜡切片的应用领域石蜡切片在生物学、医学和材料科学等领域有着广泛的应用。

在生物学研究中,石蜡切片可以用于组织学研究,通过切割和染色石蜡切片,可以观察和分析生物组织的形态结构和细胞组织的分布情况,从而揭示生物组织的功能和病理变化。

在医学诊断中,石蜡切片可以用于病理学检查,通过切割和染色石蜡切片,可以观察和分析患者组织样本中的异常变化,为医生提供诊断依据。

在材料科学研究中,石蜡切片可以用于材料分析,通过切割和染色石蜡切片,可以观察和分析材料的微观结构和组分分布,从而揭示材料的性质和特性。

总结起来,石蜡切片是一种重要的实验技术,具有广泛的应用领域。

石蜡切片制作实验报告(一)

石蜡切片制作实验报告(一)

石蜡切片制作实验报告(一)石蜡切片制作实验报告概述本次实验是制备组织学切片中使用的石蜡切片。

石蜡切片是组织学研究中常用的一种切片制备方法,通过将组织固定、脱水、浸蜡以及切片等一系列步骤使组织固定在切片上,以供观察。

实验流程本次实验按照以下流程进行:1.取出组织标本,进行固定处理;2.固定后的组织在不断升级的酒精浓度溶液中脱水处理;3.使用排除气泡的炉子将组织浸泡至石蜡中,使其渐渐浸润;4.开始制作切片,将浸润的石蜡切片头制作成适当的角度,再使用切片机器进行切割即可。

具体步骤如下:固定处理1.取出标本,大小适中,保证可以在容器中完全浸润。

2.采用福尔马林-10%缓冲液进行固定,时间不宜过久。

3.在80%乙醇、95%乙醇、100%乙醇各中脱水15min,最后再脱水30min。

石蜡浸渗1.将组织标本放入去离子水中洗涤;2.放入甲醇2小时,2次更换甲醇;3.放入Pure-Lab99嵌入剂:甲醇(2:1、1:1、1:2)中渗透2小时,每次更换的比例变化,最后放在纯浸润剂中浸润15h以上。

4.上蜡,10min90℃,2h60℃接着重复2次10min90℃,最后重复最后一次的操作3次。

制作石蜡切片1.根据需要顺序排布组织标本,并将其固定在切片支架上。

2.制作切片头,可用吹软机将石蜡制软。

3.使用切片机器对浸润好的石蜡进行切割,厚度一般为5-8μm。

实验结果经过以上步骤,我们制得的石蜡切片呈现出清晰、平整、稳定的状态,对组织结构的观察达到了预期目的。

总结本次实验是比较基础的组织学实验,对于相关领域的学习和研究有很大的帮助。

在实验过程中,需要注意每一个步骤的顺序和时间,并根据实际情况做出适当的调整。

同时,在实验结束后需要及时清理相关设备和处理化学废品,保持实验室的安全和整洁。

参考文献•Junqueira, L. C., Bignolas, G., & Brentani, R. R. (1979).Picrosirius staining plus polarization microscopy, aspecific method for collagen detection in tissuesections. The Histochemical Journal, 11(4), 447-455. •Kohno, Y., & Ohtani, S. (1996). Aging of the adrenal glands: microarchitectural changes and cellproliferation in the rat adrenal cortex underadrenocorticotropic hormone stimulation. Archives ofHistology and Cytology, 59(4), 411-422.•Stearns, M. E. (1989). Histology and histochemistry of human prostate. The Prostate, 14(4), 303-317.致谢在实验过程中,我们受到了教师和同学们的悉心指导和帮助,在此谨向他们致以最诚挚的感谢。

石蜡切片的操作方法

石蜡切片的操作方法

石蜡切片的操作方法石蜡切片是一种常用的组织切片制备方法,用于细胞学和组织学的研究。

下面是石蜡切片的操作方法:1. 收集样本:选择要制备切片的组织样本或细胞样本。

样本可以是动物组织、植物组织或细胞培养物。

2. 选择合适的浸渍剂:石蜡切片需要将样本浸渍在石蜡之中,以固定和保护样本。

常用的浸渍剂包括甲醇、乙醇和二甲苯。

3. 固定样本:将样本固定在固定剂(如甲醛)中,以保持其形态结构。

固定时间根据样本的类型和大小而定,一般在4C下静置数小时或过夜。

4. 脱水:在一系列浓度逐渐增加的乙醇溶液中,将固定的样本从水中脱水,使其逐渐转移到纯度较高的乙醇中。

5. 渗透:将脱水的样本浸渍在二甲苯或其他有机溶剂中,使其渗透并置换乙醇。

浸渍时间根据样本的大小和组织特性而定,一般在一到数小时之间。

6. 包埋:将渗透后的样本置于石蜡中,使其完全浸润。

石蜡块可以预先加热至液态,然后将样本放入其中,或者将样本以及适量的石蜡放入模具中,然后通过加热使其固化。

7. 切片:将制备好的石蜡块放入石蜡切片机中,使用旋转切片刀将其切成薄片。

切片厚度一般为4-10微米。

8. 取片:用切片刀或镊子将切好的石蜡切片取出,并放置在清洁的显微镜载玻片或切片架上。

9. 脱脂:将石蜡切片置于加热的二甲苯或其他脱蜡剂中,使其脱去石蜡。

10. 染色:根据需要,可对石蜡切片进行染色,例如常用的血液和组织标本染色方法如伊红染色(H&E染色)。

11. 干燥:将染色的切片在室温下晾干或在加热台上加热至干燥。

最后,将切片用显微镜载玻片覆盖,并封口保存。

以上就是石蜡切片的一般操作方法,每个实验室可能会根据具体需求进行微调。

在操作过程中要注意安全,避免接触有毒溶剂和使用锋利的刀片时的切割操作。

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组织石蜡切片制作
实验准备
实验仪器
口罩,手套,记号笔,移液枪,取样瓶,取样工具盒(镊子,剪刀,手术刀,手术刀片,酒精棉球),脱脂棉球或纱布,黑色遮挡物
实验药品
蒸馏水,无水乙醇,福尔马林固定液
溶液剂配置方法
福尔马林溶液(1000m L):
将4g 磷酸二氢钠与13g 无水磷酸氢二钠溶于900m L 蒸馏水中,充分溶解,加入37%甲醛(100m L),充分混匀,用HCL 调节溶液的PH至7。

苏木精染液(1000m L):
将苏木精(2g)溶于无水乙醇(250m L),硫酸铝钾(17g)溶于蒸馏水(750m L)中,随后将两个溶液混合,充分搅拌均匀后,加入碘酸钠(0.3g),苏木精氧化成紫红色(过夜)。

乙酸性伊红液配制(100m L):
将伊红Y(2g)溶于90%酒精(100m L)中,用玻璃棒搅拌使其溶解后,每100m L 加冰醋酸一滴。

盐酸酒精分化液配制(100m L):
将1m L浓盐酸溶于99m L 的75%酒精中,充分混合。

30%硝酸(200m L):
将92.3mL 的65%硝酸缓缓加入到107.7mL 蒸馏水中,充分混匀。

1、石蜡切片的制作
(1)、取材及固定
取动物体上的小块组织成为组织块。

组织块的大小为1.5cm×1.5cm×0.2cm,材料取下后迅速用福尔马林固定;部分柔软的组织可采用重新固定法(取大块组织于固定液内,2~3h后取出分割小块放入新的固定液中重新固定) ,以保持其原有的结构。

福尔马林的用量与组织块体积之比最小为20:1。

注意不能使组织块贴于容器壁上(可在容器底部垫几层纱布或脱脂棉)。

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