关于实验室移液器吸头相关知识点您可知？

关于实验室移液器吸头相关知识点您可知？

标签：移液器吸头滤芯吸头移液器

关于实验室移液器吸头工作原理、特性、用途应用范围，您知道吗?

移液器枪头盒的作用是什么?盒子是用来保护吸头，减少污染，有的吸头盒盖还可以客串样品槽.

1. 使用合适的吸头：

为确保更好的准确性和精度，建议移液量在吸头的35%-100%量程范围内。

2. 吸头的安装：

对于大多数品牌的移液器，特别是多道移液器，安装吸头并非易事：为追求良好的密封性，需要将移液套柄插入吸头后，左右转动或前后摇动用力上紧。也有人会用移液器反复撞击吸头来上紧，但这样操作会导致吸头变形而影响精度，严重的则会损坏移液器，所以应当避免出现这样的操作。RAININ(瑞宁)的多道移液器没有O型环，配合有前挡点的吸头，只需轻压一下即可达致理想密封，实在是多道移液器使用者的福音。

3. 吸头浸入角度和深度：

吸头浸入角度控制在倾斜20度之内，保持竖直为佳;吸头浸入深度建议如下所示：

移液器规格吸头浸入深度

2L和10 L 1 mm

20L和100 L 2-3 mm

200L和1000 L 3-6 mm

5000 L和10 mL 6-10 mm

4. 吸头润洗：

对常温样品，吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品，吸头润洗反而降低操作准确性，请使用者特别注意。

5. 吸液速度：

移液操作应保持平顺、合适的吸液速度;过快的吸液速度容易造成样品进入套柄，带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。

【专家建议】：

1、移液时保持正确的姿势;不要时刻紧握移液器，使用带指钩的移液器帮助缓解手部疲劳;有可能的话经常换手操作。

2、定期检查移液器的密封状况，一旦发现密封老化或出现漏液，须及时更换密封圈。

3、每年对移液器进行1-2次校正(视使用频率而定)。

4、绝大多数移液器，在使用前和使用一段时间后，要给活塞涂上一层润滑油以保持密封性;对于RAININ常规量程的移液器，不涂润滑油也同样拥有理想的密封性。

自动微量移液器再配以带滤芯的吸头是PCR实验的必备工具：

自动DNA合成仪合成的寡核苷酸引物无需进一步纯化即可用于标准PCR。如果引物经过市售树脂柱色谱(如NENSORB; NEN Life Science公司产品)或变性聚bxxa凝胶纯化，从哺乳动物基因组模板扩增单拷贝序列的效率会更高(在第2章，方案3中)。

●模板DNA。模板可以是DNA的片段、制备的基因组DNA、重组质粒，或者是任何其他含有DNA的样本。模板DNA溶解于含有低浓度EDTA (0.1mmol/L) 的10mmol/L Tris-Cl(pH7.6)。

●耐热的DNA聚合酶。Taq DNA聚合酶是适用于大多数形式的PCR扩增阶段的标准的、合适的酶。但是，当3'端错配引物延伸可疑时，可优先考虑具有3'→5'校正活性的热稳定DNA聚合酶(Chianget al.1993) (参见前页“热稳定DNA聚合酶部分和信息栏“Taq DNA聚合酶)。

Taq DNA聚合酶储存于含有50%甘油的储存缓冲液中。该溶液相当黏稠，难以用移液器进行准确吸加。办法是用离心机将盛有酶的离心管在4'C高速离心10s，然后用正排量移液器吸取所需酶量。

●自动移液器。自动微量移液器再配以带滤芯的吸头是PCR实验的必备工具。带有隔水屏障的一次性带滤芯的吸头可防止样品液体不小心流入微量移液器，同时减少PCR与DNA样品在实验过程中存在交叉污染的可能性。

一：移液枪使用诀窍

1. 影响移液枪精度因素

(1)温度：室温低时，手温较高，使得空气膨胀，吸入冷溶液时往往发生误差

(2)气密性：tip和枪体的结合部，以及枪内柱体之间的长期磨损，造成误差

(3)吸速：容易造成tip内气泡产生，而且会污染枪头