乙肝核心抗体检测作业指导书
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质控品：
Elecsys 抗HBc质控品1和2 （PreciControl 抗HBc）货号1876325
其他所需材料：
· Elecsys通用稀释液货号1732277
· Elecsys2010分析仪
· Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号1662988
· Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号1662970
· Elecsys 添加剂液（SysWash）货号1930346
· Elecsys 系统清洗液（SysClean）货号1298500
3.仪器和校准
使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准：
每批试剂盒必须用新鲜试剂和抗HBc Cal 1,Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标：
在Calibration—Status菜单中看定标结果，点Calibration Result键看定标结果，点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。
5.2 样本检测程序：
单个样本输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。
· 第4步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。Elecsys自动将标本产生的光电信号与从抗HBc定标液得出的Cutoff值相比较。
1.标本要求
血清：按标准常规方法采集。
血浆：肝素钠、EDTA-K3、枸橼酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝。
5.质量控制
Elecsys抗HBc质控品1和2（PreciControl）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。
6.计算方法
仪器会自动根据Cal 1和Cal 2的测定值计算Cut-off值。每一个标本的结果以有反应性或无反应性以及Cutoff指数（标本信号/ Cutoff）报告。
5.1 校准操作步骤：
在编缉各项目的参数时，已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。3.2进入Calibration—Status菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。
标本在2－8度可稳定5天，-20度可稳定3个月。标本可冻融5次。
注意：冻融过的标本、有沉淀的标本、反复测定过的标本使用前需离心。加热灭活的标本可使用。
2.试剂、校准品、质控品和其他所需材料
采用罗氏原装配套试剂。
试剂：
M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。
批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。
进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。
分析原理
原理：采用竞争法原理，整个过程27分钟完成。
· 第1步：40µl标本用还原试剂预处理。
· 第2步：加入HBc抗原液，标本中的抗- HBc与HBc抗原结合形成复合物。
· 第3步：加入生物素化的和钌标记的抗HBc抗体以及链霉亲和素包被的微粒，HBc抗原上仍然游离的位点被占据。形成的免疫复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
Elecsys2源自文库10：
· 一个月（同一批号试剂）
· 7天（放置仪器上的同一试剂盒）
· 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；
· 根据规定进行多次标定。
定标范围：
（电化学发光信号计数）阴性定标液（Cal 1） 27，000-200，000 阳性定标液（Cal 2） 100-3000
4.操作步骤（以E 170为例）
R0：DTT（白盖），1瓶，5ml：二硫苏糖醇，浓度110mmol/l；枸橼酸缓冲液50mmol/l。
R1：HBcAg（灰盖），1瓶，8ml：HBcAg（E.coli，rDNA）浓度高于25ng/ml，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.4，含防腐剂。
R2：生物素化的抗HBcAg抗体;Ru(bpy)32+标记的抗HBcAg抗体（黑盖），1瓶，
7.参考范围
8.分析性能
9.干扰因素
该方法不受黄疸（胆红素<25mg/dl）、溶血（血红蛋白<1.6g/dl）、脂血（脂质<1000mg/dl）和生物素<50ng/ml等干扰。
接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（676U/ml）。
19种常用药物经试验对本测定无干扰。接受过小鼠单抗治疗或诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体的干扰。Elecsys 抗HBc测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。
8ml：生物素化的抗HBcAg单克隆抗体浓度高于800ng/ml；Ru(bpy)标记的抗HBcAg单克隆抗体浓度高于130ng/ml；磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.4，含防腐剂。
校准品：
Cal 1 阴性定标液（白盖），2瓶，1.0ml/瓶人血清, 含防腐剂
Cal 2 阳性定标液（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶，抗HBc（人）浓度高于8PEIU*/ml,人血清, 抗HCV和抗HIV1+2无反应性。含防腐剂。
Elecsys 抗HBc质控品1和2 （PreciControl 抗HBc）货号1876325
其他所需材料：
· Elecsys通用稀释液货号1732277
· Elecsys2010分析仪
· Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号1662988
· Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号1662970
· Elecsys 添加剂液（SysWash）货号1930346
· Elecsys 系统清洗液（SysClean）货号1298500
3.仪器和校准
使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准：
每批试剂盒必须用新鲜试剂和抗HBc Cal 1,Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标：
在Calibration—Status菜单中看定标结果，点Calibration Result键看定标结果，点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。
5.2 样本检测程序：
单个样本输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。
· 第4步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。Elecsys自动将标本产生的光电信号与从抗HBc定标液得出的Cutoff值相比较。
1.标本要求
血清：按标准常规方法采集。
血浆：肝素钠、EDTA-K3、枸橼酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝。
5.质量控制
Elecsys抗HBc质控品1和2（PreciControl）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。
6.计算方法
仪器会自动根据Cal 1和Cal 2的测定值计算Cut-off值。每一个标本的结果以有反应性或无反应性以及Cutoff指数（标本信号/ Cutoff）报告。
5.1 校准操作步骤：
在编缉各项目的参数时，已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。3.2进入Calibration—Status菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。
标本在2－8度可稳定5天，-20度可稳定3个月。标本可冻融5次。
注意：冻融过的标本、有沉淀的标本、反复测定过的标本使用前需离心。加热灭活的标本可使用。
2.试剂、校准品、质控品和其他所需材料
采用罗氏原装配套试剂。
试剂：
M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。
批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。
进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。
分析原理
原理：采用竞争法原理，整个过程27分钟完成。
· 第1步：40µl标本用还原试剂预处理。
· 第2步：加入HBc抗原液，标本中的抗- HBc与HBc抗原结合形成复合物。
· 第3步：加入生物素化的和钌标记的抗HBc抗体以及链霉亲和素包被的微粒，HBc抗原上仍然游离的位点被占据。形成的免疫复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
Elecsys2源自文库10：
· 一个月（同一批号试剂）
· 7天（放置仪器上的同一试剂盒）
· 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；
· 根据规定进行多次标定。
定标范围：
（电化学发光信号计数）阴性定标液（Cal 1） 27，000-200，000 阳性定标液（Cal 2） 100-3000
4.操作步骤（以E 170为例）
R0：DTT（白盖），1瓶，5ml：二硫苏糖醇，浓度110mmol/l；枸橼酸缓冲液50mmol/l。
R1：HBcAg（灰盖），1瓶，8ml：HBcAg（E.coli，rDNA）浓度高于25ng/ml，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.4，含防腐剂。
R2：生物素化的抗HBcAg抗体;Ru(bpy)32+标记的抗HBcAg抗体（黑盖），1瓶，
7.参考范围
8.分析性能
9.干扰因素
该方法不受黄疸（胆红素<25mg/dl）、溶血（血红蛋白<1.6g/dl）、脂血（脂质<1000mg/dl）和生物素<50ng/ml等干扰。
接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（676U/ml）。
19种常用药物经试验对本测定无干扰。接受过小鼠单抗治疗或诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体的干扰。Elecsys 抗HBc测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。
8ml：生物素化的抗HBcAg单克隆抗体浓度高于800ng/ml；Ru(bpy)标记的抗HBcAg单克隆抗体浓度高于130ng/ml；磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.4，含防腐剂。
校准品：
Cal 1 阴性定标液（白盖），2瓶，1.0ml/瓶人血清, 含防腐剂
Cal 2 阳性定标液（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶，抗HBc（人）浓度高于8PEIU*/ml,人血清, 抗HCV和抗HIV1+2无反应性。含防腐剂。