石榴多酚的提取

石榴多酚的提取

榨汁后的石榴籽——干燥——粉碎——脱脂——浸提——离心——过滤——多酚提取液

原料预处理

将榨汁后的石榴籽用清水清洗干净并晾干，用粉碎机粉碎待用。

2.脱脂

将石榴籽粉末进行脱脂处理。

2.多酚物质的提取

称取一定量脱脂石榴籽粉末于锥形瓶中，加入一定量的乙醇溶剂采用超声波辅助反复浸提，合并提取液，离心，取上清液，即得多酚提取液。

3.多酚含量的测定方法

多酚含量的测定采用反应比色法即取1mL石榴籽多酚提取稀释液于50mL容量瓶内,加10mL蒸馏水,摇匀,再加3mLFolin - Ci ocalteu试剂,摇匀,在放30s后加入12mL10%Na2CO3溶液,450s内完,混匀，加水定容，再混匀然后30℃下避光反应2h,760nm波长处测定吸光值，根据测得的标准曲线方程计算石榴籽提取液中多酚含量(以没食子酸计)，经进一步计算即得多酚提取得率：

提取得率Y =（CV/M）×100式中:Y=提取得率(% )

C: 提取原液中多酚的浓度(mg/mL )

V: 提取多酚液总体积(mL)

M: 石榴量( mg)

石榴皮多酚提取工艺

石榴为石榴属落叶灌木或小乔木植物，原产于中亚一带，至西汉张骞使西域引入我国，我国陕西临潼、山东枣庄、安徽怀远、四川会理、云南蒙自均有种植。石榴皮，为石榴的干燥果皮，其性酸、味涩，具有涩肠、止血、杀虫之功效。石榴皮多酚是石榴皮中羟基化合物的总称，包括鞣花单宁、没食子单宁、鞣花酸、没食子酸、儿茶素、花色素、绿原酸、阿魏酸和栎精等多种化合物，占干重量的10% ～20%，研究表明其具有抗氧化、抗衰老、抗菌、抗突变、降血压和润肤美容的作用，在食品、医药和日用化学品等领域有巨大的应用价值。

1.石榴皮多酚提取方法

多酚物质的提取方法一般有热水提取法、溶剂提取法、碱性稀醇或碱性水提取法、超声波辅助提取法、微波提取法和超临界CO2提取法，在多酚的提取过程中选择适宜的提取方法将有助于提取效率的提高和提取效果的增强，从而得到理想的实验效果，为后续实验创造有利的条件。

1.1溶剂提取法

溶剂提取法是根据植物中各种成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大，对不需要溶出成分的溶解度小的溶剂，将活性成分从植物组织内溶解出来的方法目前，多酚的浸提方法主要是有机溶剂提取法，常用的有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等，这些有机溶

剂对多酚都有良好的溶解能力，不与多酚物质发生化学反应，且浸出杂质少、易于分离。采用体积分数为20%的乙醇做溶剂，料液比1:20，在50℃条件下提取1h，多酚得率达22.86%，取得了很好的效果;采用50%的乙醇作为提取溶剂，在液比25∶1，70℃条件下提取1.5h，石榴皮多酚得率为16.28%;通过预实验采用甲醇、乙醇、乙酸乙酯和水，分别对新疆石榴皮总多酚进行提取，结果多酚得率是甲醇＞乙醇＞水＞乙酸乙酯。由于甲醇和乙醇作溶剂时多酚得率相差不大，并且三种溶剂中乙醇的安全性最高，价格最为低廉，来源广，回收率高，因此选用乙醇作为提取溶剂。由此可见，石榴皮多酚的提取在提取溶剂的选取上，乙醇备受青睐。

1.2微波辅助提取法

物料经微波加热，内部温度升高、压力增大，当压力达到一定程度时，原料物细胞发生破裂，细胞内的欲提取物质溶入提取溶剂中;再者，微波产生的电磁场加速了被萃取成分由物料内部向萃取溶剂界面的扩散速率，从而缩短了萃取时间在最佳实验条件下:乙醇为40%、提取功率为242W、提取时间为60s、料液比为1∶35时，提取3次粗提取物多酚含量为19.548g/100g;采用微波提取法对四川会理石榴皮中的多酚进行提取，通过正交试验确定最佳的提取工艺:30%乙醇溶液，料液比1∶20，提取功率300W，提取温度60℃，提取时间100s，提取3次多酚得率达26.91%。各因素对石榴皮多酚得率的影响由大到小依次为提取功率＞提取温度＞提取时间＞提取次数。微波辅助提

取石榴皮多酚时间短、多酚得率较高，为提取工艺的综合研究找到了一条新途径。

1.3超声波辅助提取法

超声波辅助法是利用超声波使植物组织在溶剂中瞬时产生空穴效应，让其细胞破裂，从而溶剂渗透到植物细胞内部，溶解其活性成分。超声波辅助提取具有提取效率高、不破坏有效成分、可防止提取物在长时间高温或空气暴露条件下发生降解或褪色等变化的特点，目前已广泛用于提取生物碱等生物活性成分，通过响应曲面法优化超声波提取石榴皮多酚，探讨了在该最佳提取条件下石榴皮多酚得率与二次提取时间的关系，还对摇床振荡提取和超声波辅助提取进行了比较，超声波提取不需加热，总提取时间仅为35min，为摇床振荡提取时间的1/7。得到了可供工业化生产参考的最佳提取条件:乙醇体积分数为59%，超声时间(第1次26min，第2次为10min)，超声功率90W(超声强度为0.2W/cm)，提取量达321.26mg/g;在以溶剂为40%乙醇、料液比为1∶30、提取时间为30min、提取温度为60℃的最佳工艺条件下提取3次。按此最佳条件提取石榴皮多酚，其提取率为25.45%。所以，超声波辅助提取能有效地提高总多酚的提取速率，具有时间短、提取量高等优点。

1.4超临界流体萃取法

超临界流体萃取分离是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次

萃取出来。超临界 CO2萃取技术具有安全、卫生、高品质、高效率、可以在常温下运行的特点，特别适合对挥发性和热敏性物质的提取，并能保证提取物的“纯天然性”。于基成等通过单因素条件的选择以及正交试验的优化，采用超临界CO2萃取技术提取绿茶中茶多酚的最优条件为温度60℃、压力25MPa、萃取时间1h，茶多酚的萃取率为43.68%。从实验数据我们可以看出其多酚提取率较为可观。用超临界CO2萃取、超声提取、微波提取及浸渍提取等方法提取石榴皮中的没食子酸并用HPLC法测定其含量。结果表明:4种方法提取所得没食子酸的含量分别是0.396%、0.311%、0.271%和0.498%。可见以超临界CO2萃取法提取石榴皮中的没食子酸是一种提取效率较高的提取方法。