血培养瓶使用注意事项
血培养操作指南
血培养操作指南血培养是一种常见的实验技术,用于检测病原微生物在血液中的生长。
它可以帮助诊断生物样本中的病原微生物感染,并确定其对不同抗生素的敏感性。
本文将介绍血培养的操作指南,包括准备工作、操作步骤和结果解读等内容。
一、准备工作1. 清洁操作区域:确保操作区域干净整洁,避免细菌的交叉污染。
可以使用70%酒精或其他消毒剂对操作台面进行消毒。
2. 准备培养基和试剂:血培养通常使用含有富营养物质的寒天培养基,如血琼脂(Blood agar)或巧克力琼脂(Chocolate agar)。
此外,还需要溶血素试剂用于检测细菌的溶血能力。
3. 样本采集器具:准备血液采集器具,如一次性血管采血器、针头和注射器等,确保采集的血液样本干净无菌。
4. 实验器具消毒:对使用的实验器具进行彻底消毒,如培养皿、注射针、试管等。
二、操作步骤1. 血液样本采集:选择合适的采集部位和采集方法,确保血液样本的质量。
常见的采集部位包括静脉、手指或动脉,具体采集方法请按照医学标准操作。
2. 分配样本:使用无菌的技术将采集的血液样本分配到不同的培养皿中。
常见的分配量为每个培养皿2-5毫升。
3. 涂布培养基:使用无菌的匀涂棒或玻璃棒,将血液均匀涂布在准备好的血琼脂或巧克力琼脂培养基上。
4. 培养条件设置:将涂有血液的培养皿放入恒温培养箱中,设置适当的温度和培养时间。
一般情况下,37℃是最常用的培养温度。
5. 观察培养结果:在培养箱中观察培养皿的生长情况。
如果有细菌或真菌的生长,会在琼脂表面形成菌落。
通常需要培养24小时以上才能获得可靠的结果。
6. 溶血试验:将生长的培养物用溶血素试剂滴于琼脂表面,观察是否有细菌对血细胞进行溶血作用。
7. 结果解读:根据生长的菌落形态和溶血试验的结果,可以初步判断感染的病原菌种类和性质。
进一步的鉴定和确认需要进行进一步的实验和检测。
三、注意事项1. 严格遵守无菌操作:整个实验过程中应遵守严格的无菌操作,防止细菌和真菌的污染。
血培养瓶使用注意事项PPT演示课件
活性炭或树脂吸附剂、 真菌营养添加物等 。
成人中抗厌氧瓶
通用分类标记:FN 瓶盖颜色:橘色; 内置气体:含10%CO2的氮气
(供厌氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含30ml脑心浸液、SPS、
活性炭或树脂吸附剂、 真菌厌氧菌营养添加物等 。
普通血培养瓶 (需氧、厌氧、小儿)
2020/3/13
12
HPY 其他产品
平皿培养基 ~血平板 ~巧克力平板 ~营养琼脂平板 ~其他平板
院感管系列
2020/3/13
13
三、全自动上机瓶 色原法 荧光法
2020/3/13
14
2020/3/13
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所有细菌呼吸产生能量
有氧呼吸
无氧呼吸 发酵
产生不同量CO2 被“3D” 传感膜捕捉
2020/3/13
1
血流感染:
泛指是指病原菌及其毒素侵入血流所引起的一类临床综合征。病程 中常有炎症介质的激活和释放,引起高热、寒战、心动过速 呼吸急促、皮疹和神志改变等一系列临床症状,严重者可引 起休克、DIC和多器官功能衰竭,死亡率较高。
血败血症(septicemia) 菌血症(bacteremia) 脓毒血症(fyemia) 真菌血症(fungemia)
(供厌氧菌生长的气体环境);
培 养 基:含20ml胰酶大豆肉汤或脑心 浸液、SPS、真菌和厌氧菌营养
添加物等。
2020/3/13
23
全自动血培养瓶(BD上机系列)
成人标准需氧瓶
通用分类标记:SA 瓶盖颜色:蓝色; 内置气体:含10%CO2的氧气
(供需氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含40ml胰酶大豆肉汤、SPS、
血培养瓶使用注意事项
血培养的重要性
及早进行微生物培养,并根据培养、鉴定、药敏的检验结果,对患者有针对性地 使用抗生素治疗,是临床必要的重要的措施。
尽早做需氧+厌氧的血培养和正确抗菌治疗是首要和必要的措施。根据培养结果快 速准确地分离及鉴定病原菌,可为诊断和治疗提供极其重要的信息。
“双瓶双侧”原则; 每位患者采血最少2套,3套 更好
我们追求真理崇尚科学,但不崇拜; 我们倡导物质文明,但不迷信; 我们捍卫知识产权,但不谋求高额垄断利润。一切为了人类的生活更 美好。 我们不刻意追求短期利益,而注重企业能走得久远,能为更多的人创 造机会和带来幸福。
成人标准需氧瓶 全自动血培养瓶 (上机) 成人标准厌氧瓶
成人中抗需氧瓶
提高检出率
优质血培养瓶要素
优质的血培养瓶除能提高检出率外,还能给采血、运 送、实验室人员提供足够的安全防护! 至少包括以下要素:
1 2 3 4 5 6
“真正”的3D传感膜,全面捕捉CO2 ,避免漏检; “全封闭”式采血、运送及培养设计,保护医护人员自 身安全; 优质富含生长因子的培养基; 精确配比的瓶内气体环境; 临床使用便捷,保存方便、材质优良、轻便不碎、便于 开盖操作的瓶体设计; 全面中和抗生素等影响细菌生长的毒素,提高检出率;
成人标准厌氧瓶
通用分类标记:SN 瓶盖颜色:紫色; 内置气体:含10%CO2的氮气 (供厌氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含40ml胰酶大豆肉汤或脑心浸液、 SPS、真菌和厌氧菌营养添加物等。
全自动血培养瓶(梅里埃上机系列)
成人中抗需氧瓶
通用分类标记:FA 瓶盖颜色:绿色; 内置气体:含10%CO2的氧气 (供需氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含30ml脑心浸液、SPS、 活性炭或树脂吸附剂、 真菌营养添加物等 。
血培养注意事项
2001年Khanna数据
7072份血培养,640份阳性,阳性率为9%
组别 需氧瓶厌氧瓶均报阳 仅需氧瓶报阳 仅厌氧瓶报阳 阳性率 55% 26% 19%
Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217-219
储从家数据(2000年)
591份血培养,81份阳性,阳性率为13.17%
特别注意
血培养的关键是防止皮肤寄生菌或环境引起的污染。
感染性心内膜炎,可能由皮肤寄生的微生物引起(例
如:表皮葡萄球菌或棒杆菌属)。
不同部位采集血样可选择左、右手臂或颈部,避免通
过静脉置管直接采集血样。
切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
标本采集量少,儿童少于1ml,成人少于3ml,血
血培养标本采集及处理 的规范化操作
上海医学院附属中山医院检验科 李 龙
感染形势严峻
感染性疾病并没有像人类曾经预料的那样随着抗感染化疗 时代的到来而销声匿迹。多种原因造成的易感人群增加; 多重耐药菌如甲氧西林耐药的金葡菌(MRSA)、产ESBL的 肺炎克雷伯菌和大肠杆菌、泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼 不动杆菌等不断涌现并持续蔓延,曲霉菌、念珠菌等深部 真菌越来越常见; 新发感染病原如SARS、禽流感、手足口病、甲型H1N1流感 等也此起彼伏,感染性疾病仍然是人类关注的热点。
◇建议常规的血培养应包括一个需氧血培养瓶和一个厌氧血培
养瓶。 ◇对间歇性菌血症,用于培养的血液应在估计寒战或体温高峰 到来之前0.51h采集,或于寒战或发烧后1h进行。
儿童血培养
不同于成人血培养,由于厌氧菌感染极少发生
在儿童病人,因此建议只采用需氧瓶。厌氧培
养只考虑针对特殊的高危群体。
血液培养标准操作规程
1目的规范血液及骨髓标本细菌学标准超作规程,确保检验结果准确可靠2适用范围血液及骨髓3标本3.1标本类型血液及骨髓3.2标本采集3.2.3 采血量以无菌方法从患者肘静脉或股动脉采血。
采血量以培养基的1/10为宜,成人一次采血10-20mL,儿童为3-5mL.血液抽出后立即以无菌操作注入血培养瓶,充分混匀后送检。
3.2.4 骨髓标本用骨髓穿刺针从髂前采集1-2mL,立即以无菌操作注入血培养瓶,由于骨髓标本量少可选择小儿需氧及厌氧瓶。
3.3标本拒收3.4 标本保存采集标本后立即送检,不能及时送检的可室温放置,切勿放冰箱。
冬季血培养瓶在送检过程应采取一定的保暖措施。
4试剂、仪器4.1革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、沙保罗平板及相关生化试剂等。
4.2恒星BC-60血液细菌培养仪、恒星HX-21细菌鉴定药敏分析仪,成人血培养瓶,厌氧血培养瓶、儿童血培养瓶、恒星细菌鉴定药敏分析试剂板。
恒温培养箱、生物4.3接种针、接种环、红外灭菌器、显微镜、电热恒温箱、CO2安全柜等。
4.4试剂有效期和使用参照试剂说明书。
5细菌鉴定及药敏质控参见《微生物组内质量的控制程序》。
6检验步骤接收标本后,立即对标本进行编号登记。
门诊病人登记联系方式6.1自动化培养培养箱培养18-24h。
若涂片为酵母样真菌时转接沙保罗培养基。
从琼脂平板挑去2菌落进行涂片染色及触酶和氧化酶实验。
根据初步分出的菌属选不同的鉴定及药敏卡片上机进行细菌鉴定和药敏试验。
7操作流程8结果报告若为革兰氏阳性球菌成对排列选择葡萄球菌常用抗生素纸片。
然后置于发最终报告。
注:最终结果如与初步报告不符,应及时与临床沟通,并在书面最终报告注明变更内容。
8.2 阴性结果报告血培养72h未见细菌生长,应通知临床医生,以便作相应处理,但培养瓶要继续培养至第5日,方可发出阴性报告。
如发现细菌生长,可补发报告。
8.3对已发出的报告进行销号,并做好菌名或无菌报告日期登记。
血培养标本采集、运送与报告标准操作规程
血培养标本采集、运送与报告标准操作规程一、血培养指征患者出现寒战,体温超过38℃或低体温,怀疑血流感染时,尤其存在以下情况时,应抽血做细菌和真菌培养:医院内肺炎;留置中心静脉导管超过72h;感染性心内膜炎;骨髓炎;有严重基础疾病、免疫缺陷伴全身感染症状;临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况。
二、采血时机一旦怀疑有血流感染可能,应立即采血做培养,最好在抗菌治疗前或停用抗菌药物24h后,以寒战、发热时采集为宜。
三、采血流程(一)消毒1、培养瓶消毒程序:用消毒液消毒培养瓶橡皮塞,待干燥后使用。
2、皮肤消毒程序:用消毒液从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达5cm以上,待消毒液挥发干燥后(常需30s以上)穿刺采血。
(二)静脉穿刺和培养瓶接种成人用注射器无菌穿刺取血后,排尽针头内的空气,直接注入血培养瓶,勿换针头(如果行第二次穿刺或用头皮针取血时,应换针头),先注入厌氧培养瓶,避免注入空气,然后注入需氧培养瓶,轻轻混匀以防血液凝固。
近年来,临床普遍采用负压血培养瓶,将血从患者静脉直接吸入血培养瓶,减少污染环节。
(三)注意事项1、检验单需要注明抗菌药物使用的情况、血液采集时间和部位、临床诊断等患者信息。
2、采血部位通常为肘静脉,疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜,切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。
除非怀疑有导管相关的血流感染,否则不应从留置静脉或动脉导管取血,因为导管易被皮肤正常菌群污染。
3、采血次数:对于成年患者,应该同时分别在两个部位采集血标本,在两个不同部位分离到同样菌种才能确定是病原菌。
4、细菌性心内膜炎:在24h内取血3次,每次间隔不少于30min;必要时次日再做血培养2次。
5、采血量:以培养基与血液之比10:1为宜,以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。
采血量过少会明显降低阳性率。
成人每次每培养瓶采血8~10ml,婴幼儿每次每培养瓶采血2ml。
四、运送要求1、所有标本采集后都应立即送往实验室,最好在2h内。
Bact ALERT SA 血培养瓶使用的局限性
Bact/ALERT SA血培养瓶使用的局限性许多不同因素将影响血液和其他通常无菌体液培养试验,现实中无法进行实际的控制,使人们能够充分相信,进行的任何培养及或监测系统是绝对正确的或不正确的。
1 Bact/ALERT报告阳性的标本,可能包含:涂片染色显示为阳性,但在常规的接种培养基中,不能生长的细菌。
当怀疑有这种微生物存在时,应在特殊的培养基中对这些样本进行传代培养。
同时Bact/ALERT阳性的样本可能包含用常规涂片难以看到的生物体,可能需要特殊染色法和接种培养基。
2 也有可能某种稀少的,需要复杂营养的微生物在Bact/ALERT SA培养瓶生长培养基中难以生长。
如果怀疑是需要特殊培养基和条件的,稀少的,需要复杂营养的微生物时,应考虑采取另一种培养方法。
3 另外有可能出现的罕见现象,就是在Bact/ALERT SA培养瓶生长培养基中生长,但不能产生足够的能够检测为阳性的CO2。
如样本中含有抗生素时,亦可能会引起这种现象。
4 如果培养瓶中接种的血标本不足,某些菌株如流感嗜血杆菌、脑膜炎奶色氏菌、淋球菌等可能对抗凝剂(据茴香脑磺酸钠)敏感,如果同时加入血标本不足,其结果可能够导致难以生长或产生的CO2过低。
5 Bact/ALERT SA培养瓶用于培养非血标本(通常无菌体液),可能需要加入血液或其他补充物质,以加强其生长过程,特别是对于那些需要特殊营养的细菌,例如:嗜血杆菌、淋球菌、肺炎链球菌等。
6 由于血样中含有大量的白细胞,有可能引起Bact/ALERT阳性,这种情况较少发生,但这会导致涂片和次代培养阴性标本。
7 血液中微生物数量较少,而且间断出现。
因此,每一位患者应进行连续血液采样。
8 当Bact/ALERT信号显示时,需要快速取出阳性瓶,以避免由于自我分解或其它原因引起的无活性培养。
某些肺炎链球菌在阳性报警后,如果没有及时传代容易发生自溶现象。
9 使用健康成人血在≤100CFU/瓶和≤10CFU/瓶中进行细菌接种评估实验。
血培养采集的注意事项
血培养采集的注意事项血培养是一项常见的临床检查方法,它可以帮助医生检测潜在的血液感染。
在进行血培养采集时,有一些注意事项需要遵守,以确保样本的准确性和安全性。
首先,术前准备是非常重要的。
实施血培养采集的人员应该对采集过程有充分的了解,并熟悉采样设备的使用方法。
采样室的环境应该干净整洁,有足够的光线和空气流通。
采样器具应该提前消毒,并在采集前进行检查,确保其完整无损。
其次,术中操作需要遵循严格的无菌操作流程。
在采集血液之前,采样者必须十分重视手卫生,先用肥皂和水洗手,并正确地进行手部消毒。
消毒后,应尽量避免手与任何不干净的表面接触。
此外,采样者应穿着干净的手术衣,佩戴口罩和手套,以保护自己和患者。
在采集血液时,选择适当的部位也是至关重要的。
常见的采血部位有外周静脉、中心静脉和动脉。
血培养一般采集外周静脉血液,因为外周静脉更容易取得且较安全。
在选择采血部位时,应考虑到血管的大小、位置和可见性。
此外,应尽量避免扎破皮下动脉或静脉,以免引起血肿或出血。
在采集血液时,还需要注意采样量和采血顺序。
通常情况下,每次采血的量应为10 ml左右,以保证培养的有效性。
如果需要多个血培养瓶,则需要按照特定的顺序进行采集,以避免交叉污染。
最后,采样后的处理也非常重要。
血液样本应尽快送至实验室进行处理,以避免样本变质。
在运送过程中,应尽量保持样本的温度稳定,并防止震动和外界污染。
总之,血培养采集是一项非常重要的临床检查,在进行血培养采集时需要注意术前准备、术中操作和采样后的处理。
只有在严格遵循操作规范的情况下,才能确保采样的准确性和安全性。
血培养瓶使用注意事项
公司系列产品
HPY 血培养瓶
全自动血培养瓶 (上机)
手工血培养瓶
成人标准需氧瓶 成人标准厌氧瓶
成人中抗需氧瓶 成人中抗厌氧瓶
小儿标准/中抗需氧瓶 小儿标准/中抗厌氧瓶
目测变色法培养瓶 (需氧、厌氧、小儿)
普通血培养瓶 (需氧、厌氧、小儿)
公司系列产品
HPY 其他产品
平皿培养基 ~血平板 ~巧克力平板 ~营养琼脂平板 ~其他平板
血培养的重要性
及早进行微生物培养,并根据培养、鉴定、药敏的检验结果,对患者有针对性地 使用抗生素治疗,是临床必要的重要的措施。
尽早做需氧+厌氧的血培养和正确抗菌治疗是首要和必要的措施。根据培养结果快 速准确地分离及鉴定病原菌,可为诊断和治疗提供极其重要的信息。
血液 腹腔液 腹膜透析液 滑液 ……
全自动血培养瓶(梅里埃上机系列)
成人标准需氧瓶
通用分类标记:SA 瓶盖颜色:蓝色; 内置气体:含10%CO2的氧气
(供需氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含40ml胰酶大豆肉汤、SPS、
真菌营养添加物等。
成人标准厌氧瓶
通用分类标记:SN 瓶盖颜色:紫色; 内置气体:含10%CO2的氮气
活性炭或树脂吸附剂、 真菌营养添加物等 。
列入我国“863”计划内项目;
“好培养”公司是我国唯一全面掌握色 原法和荧光法技术的公司;
全自动3D血培养瓶系列
色原法
荧光法
全自动血培养瓶
成人标准血培养瓶 • 成人标准需氧瓶
• 成人标准厌氧瓶
成人中抗血培养瓶
• 成人中抗需氧瓶 • 成人中抗厌氧瓶
小儿血培养瓶
• 小儿需氧培养瓶(标准/中抗) • 小儿厌氧培养瓶(标准/中要氧气为需氧菌;
血培养的采集、运送、培养指导原则
连续3d,每天采集2套。 7.采自静脉植入装置如留置导管或留置口的
血培养会伴有高的污染率。
采血频率
血培养在采集后的2至5天内,不需要重复 采集,因为进行治疗后的2至5天内血液中 感染的细菌不会马上消失。
两种例外: 感染性心内膜炎
(1)改变靶蛋白结构 如:RFP耐药菌RNA多聚酶的-亚基 结构改变造成的耐药。 (2)增加靶蛋白数量 如:金葡菌对甲氧西林的耐药 (3)生成耐药靶蛋白 如:金葡菌产生青霉素结合蛋白PBP2A, 与β-内酰胺类抗生素亲和力极低导致耐药
3.降低细胞膜的通透性使药物不易进入菌体内 如:细菌对-内酰胺类、四环素的耐药 4.改变代谢途径 如:耐磺胺药的细菌自身产生PABA /直接利用叶酸转化为二氢叶酸 5.主动流出作用 喹诺酮类
物有毒性,因此不能被用于血培养样本采集和培 养
十、皮肤消毒和污染的预防
1. 首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。 2. 然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤(1%-2%碘
酊30秒或10%碘伏消毒60秒),从穿刺点向外以 1.5cm~2cm直径画圈进行消毒。 3. 最后用70%酒精脱碘。 严格执行三步消毒后,可行静脉穿刺采血。
八、培养基
多种商业化的培养基可用于血培养 含不同改良配方的培养基可改善检出率,
因为没有一种单一的培养基可以检出所有 的细菌
九、添加剂
树脂、活性炭:吸附抗生素有助于对已经接受抗 生素治疗病人血培养的检出率 。
抗凝剂 抗凝剂中聚乙烯磺酸钠(SPS):最常用; 能抑
制血清和吞噬细胞的抗细菌反应。 其他抗凝剂如肝素,EDTA和枸橼酸钠则对微生
BC120血培养仪简易操作规程
BC120血培养仪简易操作规程1.信息核对:核对申请单信息与血培养瓶上病人信息是否一致,将培养瓶的“ID号标签”帖在申请单上。
2.放瓶步骤:在主界面下,点击“放入键”,光标一般自动跳在ID号窗体内,扫描输入该培养瓶上的ID号(必输项目),屏幕上显示该瓶信息,选标本类型为血液,打开抽屉(严禁同时打开A、B两个抽屉),将培养瓶放入到抽屉中有指示灯亮起的任何空位内(插到底),会听到提示音,指示灯会闪烁,放瓶界面重新回到空白界面,同时在申请单上写上位置号:“注意是放的A箱还是B箱,例如放在A箱11号位置,则写为“A#11”,可继续放瓶,放完之后点击结束键,关闭抽屉,完成此操作。
3.取瓶步骤:当有阳性瓶或阴性瓶时,依据位置号找到检验申请单,主界面下点击“取阳瓶”/“取阴瓶”健,屏幕会显示每个箱体内阳性瓶/阴性瓶的数量。
打开抽屉,相应阳性/阴性瓶位指示灯的绿灯会亮起,依次取出,然后关闭抽屉,完成此操作。
4.常见问题及处理:(1)问题瓶的处理:放好瓶后,主界面上显示瓶子上标记问号“?”,可能是原因:“未扫描瓶子ID号直接放入,扫描信息不当,放入后又改变位置,仪器原因”。
单击该“问题瓶”的图标,点击右下角,查看/修改信息:①如该瓶放入放入时间不久(<0.2天),则将该瓶的结果由“在检测”改为“阴性”,保存修改并退出,按“取阴瓶”操作取出该瓶,核对申请单,重新执行放瓶操作并记录位置号;②如重新放瓶时提示“ID号重复”,则在单击“查询”,在出现的界面上直接点“查询”,或者在对话框中输入该瓶的ID号,找到该瓶的记录信息,仔细核对无误后删除该瓶信息,返回主界面,重新放瓶。
③如该瓶放入时间过长,则不用处理等待该瓶报告阴性后取出。
(2)不小心退出系统:全自动血培养控制系统V1.0,用户名和密码均为“admin”进入软件主界面,测量孔颜色信息:灰色<空置>,蓝色<在培养>,黄色<阳性>,绿色<阴性>。
血培养操作规范
血培养操作规范一、血标本采集和运送1.采血指征:一般患者出现以下一种体症时可作为采血的重要指征:发热(≥38℃)或低温(≤36℃),寒战,白细胞增多(计数大于10,000×109/L,特别有“核左移”未成熟的或杆状核白细胞),皮肤粘膜出血,昏迷,多器官衰竭,血压降低,CRP升高及呼吸快,特殊患者(如血液病)出现粒细胞减少(成熟的多形核白细胞<1000×109/L),血小板减少等,或同时具备上述几种体症的临床可疑菌血症应采集血培养。
新生儿菌血症,应该增加尿液和脑脊液培养。
对入院危重感染患者在未进行系统性抗菌药物治疗之前,应及时采集血培养。
2.皮肤消毒程序:严格执行以下三步法:1)70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。
2)1%~2%碘酊作用30s或10%碘伏60s,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。
3)70%酒精脱碘。
对碘过敏的患者,用70%酒精消毒60s,待酒精挥发干燥后采血。
3.培养瓶消毒程序1)70%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞,作用60s。
2)用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子表面残余酒精,然后注入血液。
4.静脉穿刺和培养瓶接种程序1)在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手套固定静脉,不可接触穿刺点。
2)用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养瓶,或严格按厂商推荐的方法采血。
3)血标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。
立即送检,切勿冷藏。
4.采血量成人采血量是8~l0ml,儿童l~5ml。
血液和肉汤之比为1:5~l:10。
5.血培养份数和采血时间采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在24h内采集2~3份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养)。
对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h采血液,或于寒战或发烧后lh进行。
特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议:1)可疑急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎,应在不同部位采集2~3份血标本。
正确留取血培养
一.目的:使临床医务人员正确掌握血培养标本采集、运送的方法,以保证标本检测的准确性,提高阳性率,指导临床正确合理用药,提高治疗效果。
二.采血时机1.尽可能在抗菌药物使用前和采取降温措施之前;2.对已经使用抗菌药物的病人,最好在下次用药前采集;3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率;4.怀疑血流感染时应尽早采血,不要强调体温超过39℃才抽血,而错过时机。
三、采集方法1.手卫生:六部洗手法洗手或手消毒。
2.准备血培养瓶:根据检验申请单,选择合适的血培养瓶,一般是需养和厌养瓶各一瓶为一套。
两个来源的采血时间必须接近(建议≤5分钟),导管和外周,各自做好标记。
3.皮肤消毒:按常规消毒穿刺部位皮肤(用蘸有适量消毒液的安尔碘棉签,以穿刺点为中心向外螺旋式消毒穿刺部位皮肤三遍,同时旋转棉签,消毒范围为8×10cm,每遍擦拭后充分待干。
4.持真空采血针按常规方法刺入静脉,消毒血培养瓶瓶口,并充分待干,另一头刺入相应血培养瓶内,利用瓶内真空抽取血标本,如用注射器无菌穿刺取血后,需换针头注入血培养瓶(注最好先注入厌氧瓶再注入需养瓶,建议采血量在8—10ml。
真空采血针另一头须在接血培养瓶之前再拔掉针帽,以保证针头不被污染。
5.建议每套血培养同时接种至需氧瓶和厌氧瓶,有利于微需氧菌和厌氧菌的检出。
当厌氧菌感染不能除外的病人,如腹部手术合并感染的病人,必须同时做厌氧菌血培养。
如果不能满足推荐的采血量时,应首先满足需氧瓶;婴幼儿血培养一般只抽一瓶需氧瓶进行培养,无需常规做厌氧瓶。
6.血液注入血培养瓶后轻摇瓶子以防血液凝固。
四.标本运送1.已采集的标本应视为潜在性生物危险品,均应置于防漏、防渗、相对密封的容器中收集、存储与转运。
2.血培养采样结束后应由专人立即送至微生物实验室核收,一般不得超过2小时;如因某种原因不能及时送检,应将已采集好的血液培养瓶放在室温,切勿放入冰箱内冷藏或冷冻。
6.关于导管相关血流感染(CR-BSI):(1).希望保留深静脉导管者至少2套血培养,其中至少一套来自外周静脉,另一套从导管采集,两个来源的采血时间必须接近(建议≤5分钟),并各自做好标记。
血液标本采集容器介绍及注意事项
血液标本采集容器介绍及注意事项
注意事项:
1.蓝色、灰色管含有K+、Na+抗凝剂,不能用于测定K+、Na+的标本。
2.EDTA、氟化物、草酸盐等不能用于测定Ca2+的标本,因为Ca2+可与它们形成不溶性
物质。
3.草酸盐、氟化物不能用于测定酶和用酶法测定的标本,因为它们有激活或抑制某些酶活性的作用,如草酸盐抑制AMY、ACP、LDH的活性,氟化物激活尿素酶、AMY作用。
4.氟化钠可防止葡萄糖酵解,适合较长时间放置的葡萄糖标本检测(如糖耐量试验)。
5.肝素:是一种粘多糖体,可抑制凝血酶原转化为凝血酶,使纤维蛋白原不能转化为
纤维蛋白,不可用于血凝项目的检测。
6.使用防凝管要注意采血量与抗凝剂的比例,血凝项目用蓝色纸帽管采集1.8ml;血常规用EDTA抗凝管(紫色)抽1.5ml血。
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1、仪器报告阳性的标本,但常规转种培养基不能生长,则
可能是特殊营养要求细菌,需要特殊培养基;
2、含活性着经验积累则判读变得容易; 3、当样本中含有抗生素时,可能微生物生长受抑制不能产 生足够的能检测的CO2; 4、当培养瓶报阳时,需快速取出阳性瓶,如某些肺炎链球 菌很容易发生自溶现象而引起转种无菌生长。
血培养的重要性
及早进行微生物培养,并根据培养、鉴定、药敏的检验结果,对患者有针对性地 使用抗生素治疗,是临床必要的重要的措施。
尽早做需氧+厌氧的血培养和正确抗菌治疗是首要和必要的措施。根据培养结果快 速准确地分离及鉴定病原菌,可为诊断和治疗提供极其重要的信息。
“双瓶双侧”原则; 每位患者采血最少2套,3套 更好
成人中抗厌氧瓶
通用分类标记:FN 瓶盖颜色:橘色; 内置气体:含10%CO2的氮气 (供厌氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含30ml脑心浸液、SPS、 活性炭或树脂吸附剂、 真菌厌氧菌营养添加物等 。
基础
关键 规范的临床 标本采集 (采集时间、 采 血 量、 组 合)
采用优质的 血培养瓶
假阴性:病人感染了细菌,但血培养未报阳性结果。一般为某些特殊病 原菌生长代谢不能产生足够的co2而导致传感膜改变而被仪器识别。 还有仪器报阳但转种平皿则不能生长。可能是某些链球菌自溶现象。
需氧菌、厌氧菌
根据细菌生长代谢是否需要氧气分类。 需要氧气为需氧菌; 不需要氧气则为厌氧菌; 在需氧环境和厌氧环境都能生长的为兼性厌氧 菌;
成人中抗厌氧瓶
通用分类标记:FN 瓶盖颜色:橘色; 内置气体:含10%CO2的氮气 (供厌氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含30ml脑心浸液、SPS、 活性炭或树脂吸附剂、 真菌厌氧菌营养添加物等 。
全自动血培养瓶(梅里埃上机系列)
小儿标准需氧瓶
通用分类标记:SP或者SA 瓶盖颜色:黄色; 内置气体:含10%CO2的氧气 (供需氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含20ml胰酶大豆肉汤或脑心 浸液、SPS、真菌营养添加物等。
有氧呼吸
无氧呼吸 发 酵
产生不同量CO2
被“3D” 传感膜捕捉
该技术源于欧嘉隆公司,分为色原法和荧光法传感 技术,现分别为梅里埃公司和BD公司所持有;
列入我国“863”计划内项目;
“好培养”公司是我国唯一全面掌握色原法和荧光 法技术的公司;
色原法
荧光法
成人标准血培养瓶
• 成人标准需氧瓶
我们追求真理崇尚科学,但不崇拜; 我们倡导物质文明,但不迷信; 我们捍卫知识产权,但不谋求高额垄断利润。一切为了人类的生活更 美好。 我们不刻意追求短期利益,而注重企业能走得久远,能为更多的人创 造机会和带来幸福。
成人标准需氧瓶 全自动血培养瓶 (上机) 成人标准厌氧瓶
成人中抗需氧瓶
根据“血培养安全防护”要求: 血培养中的病原菌可能通过呼吸道或直接接触污 染操作人员、实验室人员的皮肤、眼或者粘膜引起 感染……有实验室获得感染的风险……
专利 ZL 201320313947.9 安全盖 密封环
取下安全盖 消毒内胶塞 送检 、培养
挥干后采血
盖上安全盖
注意:透明的安全头盖不要扔,采血完后全程盖上!
成人标准厌氧瓶
通用分类标记:SN 瓶盖颜色:紫色; 内置气体:含10%CO2的氮气 (供厌氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含40ml胰酶大豆肉汤或脑心浸液、 SPS、真菌和厌氧菌营养添加物等。
全自动血培养瓶(BD上机系列)
成人中抗需氧瓶
通用分类标记:FA 瓶盖颜色:绿色; 内置气体:含10%CO2的氧气 (供需氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含30ml脑心浸液、SPS、 活性炭或树脂吸附剂、 真菌营养添加物等 。
四川好培养生物工程有限公司是由留学英美等国的中外学子和国内资 深专家共同创建的中外高新技术合作企业。 注册于四川雅安国家农业科技园,专业从事探针、传感新技术与新材 料在微生物领域的应用研究和产品开发。 公司总部和研发中心设在成都高新区生命科技园,技术转化与产品生 产基地设在雅安国家农业科技园。
成人标准厌氧瓶
通用分类标记:SN 瓶盖颜色:紫色; 内置气体:含10%CO2的氮气 (供厌氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含40ml胰酶大豆肉汤或脑心浸液、 SPS、真菌和厌氧菌营养添加物等。
全自动血培养瓶(梅里埃上机系列)
成人中抗需氧瓶
通用分类标记:FA 瓶盖颜色:绿色; 内置气体:含10%CO2的氧气 (供需氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含30ml脑心浸液、SPS、 活性炭或树脂吸附剂、 真菌营养添加物等 。
提高检出率
优质血培养瓶要素
优质的血培养瓶除能提高检出率外,还能给采血、运 送、实验室人员提供足够的安全防护! 至少包括以下要素:
1 2 3 4 5 6
“真正”的3D传感膜,全面捕捉CO2 ,避免漏检; “全封闭”式采血、运送及培养设计,保护医护人员自 身安全; 优质富含生长因子的培养基; 精确配比的瓶内气体环境; 临床使用便捷,保存方便、材质优良、轻便不碎、便于 开盖操作的瓶体设计; 全面中和抗生素等影响细菌生长的毒素,提高检出率;
小儿标准厌氧瓶
通用分类标记:SP或者SN 瓶盖颜色:黄色; 内置气体:含10%CO2的氮气 (供厌氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含20ml胰酶大豆肉汤或脑心 浸液、SPS、真菌和厌氧菌营养 添加物等。
全自动血培养瓶(BD上机系列)
成人标准需氧瓶
通用分类标记:SA 瓶盖颜色:蓝色; 内置气体:含10%CO2的氧气 (供需氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含40ml胰酶大豆肉汤、SPS、 真菌营养添加物等。
血流感染:
泛指是指病原菌及其毒素侵入血流所引起的一类临床综合征。病程 中常有炎症介质的激活和释放,引起高热、寒战、心动过速 呼吸急促、皮疹和神志改变等一系列临床症状,严重者可引 起休克、DIC和多器官功能衰竭,死亡率较高。
血败血症(septicemia) 菌血症(bacteremia) 脓毒血症(fyemia) 真菌血症(fungemia)
初发患者,绝不能只采1套标 本,血量不足和只做一瓶的, 很难解释所得结果;
采血量
血培养物每增加一毫升,真性菌血症 成年人微生物的检出率增加3%
阳性、阴性
阳性与阴性:培养瓶内有菌生长,传感膜变化,仪器识别并报警则为阳 性,反之为阴性。
阳性率:一段期间内,所有血培养标本中报阳性的标本比例,一般血培 养阳性率为10%左右,10%还含有因采血等环节污染造成的阳性标本。 假阳性:病人并没有感染细菌,但血培养出现报阳的结果。一般为采血 环节污染及培养瓶与仪器兼容性问题造成。
目测变色法培养瓶:采用国际通用的CO2检测法观察终点,只需要根 据膜的变色即可判断结果。
避免判断误差,减轻工作量,降低成本。
弥补传统手工瓶品种单一的不足,可为基层医院提供需氧、厌氧、小
儿等规格品种,有效提高检出率。
与半自动培养箱配合使用,工作更便捷。
优质培养基 按“细胞培养”要求配制; 无“抗”优质动物原料; 富含需氧菌、厌氧菌、真菌 生长因子;
精确配比的瓶内气体环境
需氧瓶:10%CO2+90%O2 厌氧瓶:10%CO2+90%N2
中抗需氧、厌氧、小儿瓶能全面中和吸附抗 生素、补体等影响细菌生长的毒素……
SPS: 0.35%含量的SPS能中和血液中的补体,提高 检出率; 吸附剂能有效吸附移除血液中及培养基中潜在抗菌 素,如残留抗生素、补体,溶菌酶,转铁蛋白, Gamma-球蛋白,过氧化物及高温高压消毒而产生 的附产物。
四、手工血培养瓶
含目测传感膜 普通手工瓶
• 成人需氧瓶
目测变色法培养瓶
• 成人厌氧瓶
• 小儿培养瓶
• 成人需氧瓶
普通手工培养瓶
• 成人厌氧瓶 • 小儿培养瓶
目测变色法培养瓶
规格:需氧、厌氧、小儿 内置气体:需氧:含10%CO2的氧气; 厌氧:含10%CO2的氮气 ; 小儿:含10%CO2的氧气。 内含传感膜
• 成人标准厌氧瓶
成人中抗血培养瓶
• 成人中抗需氧瓶
• 成人中抗厌氧瓶 • 小儿需氧培养瓶(标准/中抗)
小儿血培养瓶
• 小儿厌氧培养瓶(标准/中抗)
全自动血培养瓶(梅里埃上机系列)
成人标准需氧瓶
通用分类标记:SA 瓶盖颜色:蓝色; 内置气体:含10%CO2的氧气 (供需氧菌生长的气体环境); 培 养 基:含40ml胰酶大豆肉汤、SPS、 真菌营养添加物等。
成人中抗厌氧瓶 小儿标准/中抗需氧瓶
HPY 血培养瓶
手工血培养瓶
小儿标准/中抗厌氧瓶
目测变色法培养瓶 (需氧、厌氧、小儿)
普通血培养瓶 (需氧、厌氧、小儿)
平皿培养基 ~血平板 ~巧克力平板 HPY 其他产品 ~营养琼脂平板 ~其他平板
院感管系列
三、全自动上机瓶 色原法 荧光法
所有细菌呼吸产生能量