ATP检测方法

ATP检测方法

1.电泳法：根据核苷酸分子同时携带酸碱基团，在一定条件下，利用其在电场

中的迁移速度不同而实现分离。

1)纸电泳法：将电场加在浸泡过缓冲液的滤纸上，使ATP与其他杂质分离，

再利用比色法测定ATP的吸收值，计算其含量。此法是卫生部及地方采用的ATP标准检测方法。

2)凝胶电泳法：根据介质不同，可分为聚丙烯酰胺电泳法（PAGE），SDS-PAGE

和琼脂糖凝胶电泳法，前两种方法常用于生物机制的研究。琼脂糖凝胶电泳法是以琼脂糖为介质，柠檬酸为缓冲液，利用电泳将ATP与杂质分离，实现ATP含量检测。

3)毛细管电泳法：以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用各组

分间淌度和分配行为上的差异，实现ATP与杂质的分离。

2.光学分析法：因其操作简单、仪器要求低，常用于科研领域的ATP含量分析。

1)分光光度法：采用ATP试剂盒，因ATP腺嘌呤碱基上存在共轭双键，在紫

外下有吸收峰，可用紫外分光光度法检测ATP含量。

2)生物发光法：利用荧光素在荧光素酶的作用下，与ATP发生反应，生成荧光

素-ATP复合体，该复合体被分子氧氧化后激发荧光素发光，根据发光强弱可检测ATP含量。

3.层析法：利用样品各组分之间亲和力、分配系数等化学性质的差异，实现ATP

与其它杂质的分离。

1)纸层析法：是检测核苷酸含量的常用方法之一。该方法常以异丙醇、浓氨水

和水按7：1：2的混合作为展开剂。

2)薄层层析法：该方法纸层析法原理基本相同，也是检测核苷酸含量的常用方

法之一，其常用的展开剂是正丁醇、丙酮、冰乙酸、氨水、水按7：5：3：3：2的比例混合而成。

3)离子交换色谱法：利用样品各组分离子交换能力或选择系数之间的差异，实

现分离，常用于工业生产中ATP含量检测。

4)高效液相色谱法：此方法具有强大的分离能力，操作简单，分析时间短，灵

敏度高，结果准确，是目前应用最广泛的一种ATP检测方法。迪信泰检测平台依托HPLC和LC-MS技术，提供专业的ATP检测服务，价格合理，欢迎咨询。

注：此为高效液相色谱法(HPLC)检测ATP、ADP、AMP的标准品色谱图