聚合物胶束

(2)逆相蒸发法 系将磷脂等脂溶性成分溶于有机 溶剂，如氯仿、二氯甲烷中，再按一定比例与含 药的缓冲液混合、乳化，然后减压蒸去有机溶剂 即可形成脂质体。该法适合于水溶性药物、大分 子活性物质，如胰岛素等的脂质体制备，可提高 包封率。
(3)注入法 有乙醚注入法和乙醇注入法。“乙醇 注入法”是将磷脂等膜材料溶于乙醇中，在搅拌 下慢慢注入于 55-65℃含药或不含药的水性介质中， 蒸去乙醇，继续搅拌 1—2h，即可形成脂质体。
(4)超声波分散法 将水溶性药物在磷酸盐缓冲液 中溶解，加至磷脂、胆固醇与脂溶性药物的有机 溶液中，搅拌蒸发除去有机溶剂，残液经超声波 处理，然后分离出脂质体，再混悬于磷酸盐缓冲 液中，即得。
(5)钙融合法 磷脂酰丝氨酸等带负电荷的磷脂中， 加入 Ca 2+，使之相互融合成蜗牛壳圆桶状，加 入络合剂 EDTA ，除去 Ca 2+，即产生单层脂质体 （LUV ），此种方法的特点是形成脂质体的条 件非常温和，可用于包封 DNA、RNA 和酶等生 物大分子。
对于脂溶性的、与磷脂膜亲和力高的药物， “被动载药”法较为适用。而对于两亲性 药物，其油水分配系数受介质的 pH 值和
离子强度的影响较大，包封条件的较小变 化，就有可能使包封率有较大的变化，首 选“主动载药” 方法。
5. 脂质体的修饰
长循环脂质体 免疫脂质体 糖基脂质体 温度敏感脂质体 pH 敏感脂质体 磁性脂质体 声波敏感脂质体
稳定的聚合物胶束， PEG 段分子量通常要求 在1000-15000 之间，疏水段与此相当或稍小
二、常用载体材料
纳米乳和亚微乳的制备材料：
乳化剂 助乳化剂
选用乳化剂的原则： （1）要考虑乳化剂使纳米乳稳定的乳化性能， （2）要考虑毒性、对微生物的稳定性和价格等。
1.天然乳化剂
? 如多糖类的阿拉伯胶、西黄蓍胶及明胶、白蛋 白和酪蛋白、大豆磷脂、卵磷脂及胆固醇等。
第五节 聚合物胶束、纳米乳、 亚纳米乳的制备技术
一、定义
? 聚合物胶束 (polymeric micelles)是由合成的 两亲性嵌段共聚物在水中自组装形成的一种 热力学稳定的胶体溶液。
一、定义
?纳米乳 (nanoemulsion) 是粒径为 10~100nm 的 乳滴分散在另一种液体中形成的胶体分散系 统，其乳滴多为球形，大小比较均匀，透明 或半透明，经热压灭菌或离心也不能使之分 层，通常属热力学稳定系统。
三、聚合物胶束的制备
（一）形成机理
1.与表面活性剂分子缔合形成胶束的机理相似， 但是由于聚合物在水中形成胶束的临界浓度小， 且其疏水核心更稳定，故聚合物胶束可以经稀 释而不易解聚合。
2.因而可以用作药物载体。
三、聚合物胶束的制备
（二）Baidu Nhomakorabea备方法
1.自组装溶剂蒸发法 2.透析法 3.乳化 -溶剂挥发法 4.化学结合法
LUV 100-500nm
MLV 0.1-5 ?m
2. 脂质体的作用特点
1) 制备工艺简单，一般药物都较容易包封在脂 质体中；
2) 水溶性及脂溶性药物都可包裹在同一脂质体 中，药物的包封率主要与药物本身的油水分 配系数及膜材的性质有关；
3) 脂质体本身对人体毒性小，并且脂质体对人 体无免疫抑制作用；
(6)其它 复乳法、冷冻干燥法、 pH 梯度法、前 体脂质体法等。
4. 脂质体的载药
“主动载药 ”，即通过脂质体内外水相的不同 离子或化合物梯度进行载药，主要有 K+-Na+ 梯度和H+梯度(即pH 梯度)等。
传统上，人们采用最多的方法是“ 被动载药 ” 法。所谓“被动载药”，即首先将药物溶于水 相或有机相 (脂溶性药物 )中，然后按所选择的 脂质体制备方法制备含药脂质体。
五、亚纳米乳的制备
? 亚纳米乳常作为胃肠道给药的载体，其 特点包括：提高药物稳定性、降低毒副 作用、提高体内及经皮吸收、使药物缓 释、控释或具有靶向性。
（一）亚纳米乳的制备与影响因素
? 一般亚纳米乳要使用 两步高压乳匀机 将粗乳捣 碎，并滤去粗乳滴与碎片，使纳米乳的粒径控 制在比微血管（内径 4μm左右）小的程度。
?优点是无毒、廉价， 缺点是一般都存在批间差 异，对大量生产很不利。其产品的差异可能在生 产的当时不显著，但几个月之后就明显了，有许 多都可能受微生物的污染（包括致病菌和非致病 菌）。
2.合成乳化剂
离子型 非离子型
? 纳米乳常用非离子型乳化剂，如脂肪酸山梨坦 （亲油性）、聚山梨酯 (亲水性）、聚氧乙烯脂 肪酸酯（亲水性）、聚氧乙烯脂肪醇醚类、聚 氧乙烯聚氧丙烯共聚物类、蔗糖脂肪酸酯类和 单硬脂酸甘油酯等。非离子型的乳化剂口服一 般没有毒性，静脉给药有一定毒性。
（二）自乳化
? 自乳化药物传递系统（self-emulsifying drug delivery systems,SEDDs) 自身包含 一种乳化液，在胃肠道内与体液相遇， 可自动乳化形成纳米乳(O/W) 。
（三）修饰纳米乳
? 用聚乙二醇（ PEG）修饰的纳米乳可增加表面的 亲水性，减少被巨噬细胞的吞噬，明显延长在血 液循环系统中滞留的时间 ,称为长循环纳米乳。
3. 脂质体的制备
? 用于制备脂质体的 磷脂有天然磷脂 ，如大豆卵 磷脂、蛋黄卵磷脂等； 合成磷脂 ，如二棕榈酰 磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱等。
? 胆固醇也是两亲性物质，与磷脂混合使用，可 制得稳定的脂质体，其作用是调节双分子层的 流动性，降低脂质体膜的通透性。
? 其他附加剂 有十八胺、磷脂酸等，这些附加剂 能改变脂质体表面的电荷性质，从而改变脂质 体的包封率、体内外稳定性、体内分布等其他 相关参数。
2.其他方法：光子相关光谱法和计算机调 控的 激光测定法等。
（二）药物的含量
? 纳米乳和亚纳米乳中药物含量的测定一 般采用溶剂提取法。
? 溶剂的选择原则是：应最大限度地溶解 药物，而最小限度地溶解其他材料，溶 剂本身不应干扰测定。
（三）稳定性
? 纳米乳通常是热力学稳定系统，有些纳米乳在 贮存过程中也会改变，即粒径变大，个别的甚 至也会分层。
摄取， 从而使脂质体清除速率减慢，血液中驻留 时间延长，使药物作用时间延长
（2）温度敏感脂质体，又称热敏脂质体 由Tc稍高于体温的脂质组成的脂质体，其药物 的释放对温度具有敏感性。热敏脂质体的特点 是在受热时，可将包封药物释放至无内吞作用 的靶细胞，这种热释放取决于脂质体的 Tc。
（3）pH 敏感脂质体，又称为酸敏感脂质体 若干动物和人体肿瘤间质液的 pH 比正常组织 低，设想组成的脂质体能在低 pH 范围内释放 药物，因而设计了 pH 敏感脂质体。对 pH 敏感 的类脂有 N-十六酰L-高半胱氨酸 (PHC) 和游离 的高半胱氨酸。
（4）光敏脂质体 光敏脂质体是将光敏物质的药物包裹在脂质体 内用来进行光学治疗。当在一定波长的光照射 时，脂质体膜与囊泡物质间或脂质体之间发生 融合作用而释放药物。制备了含胡萝卜素或全 反视黄醇的光敏脂质体，光照后可发生不可逆 光反应，从而影响膜的流动性，增加其通透性。
（5）免疫脂质体 掺入抗体形成被抗体修饰的具有免疫活性的脂质 体称为免疫脂质体
（1）长循环脂质体或空间稳定脂质体 被神经节苷酯（ GM1 ）、磷脂酰肌醇（ PI ）、聚 乙二醇（ PEG ）、聚丙烯酰胺（ PPA ）、聚乙烯 吡咯烷酮（ PVP ）等在脂质体表面高度修饰，交
错重叠覆盖在脂质体表面，形成致密的构象云。 这种立体保护作用取决于聚合物的柔性，位阻保 护脂质体不被血液中的 调理素 （opsonin ）识别、
四、纳米乳的制备
（一）纳米乳的形成条件与制备步骤
1.纳米乳的形成条件
（1）需要大量乳化剂： 纳米乳中乳化剂的用量一 般为油量的 20%~30% ，而普通乳中乳化剂多低于油 量的 10%。
（2）需要加入助乳化剂： 助乳化剂可插入到乳化 剂界面膜中，形成复合凝聚膜，提高膜的牢固性和 柔韧性，又可增大乳化剂的溶解度，进一步降低界 面张力，有利于纳米乳的稳定。
（6）糖基脂质体，又称多糖被复脂质体 在脂质体双分子层中掺入多糖或糖脂后称之为多 糖被复脂质体。 糖基不同可改变脂质体的组织分 布 ；脂质体稳定化和构造强化；有利于与抗体交 联反应进行 。 糖基物质有：唾液糖蛋白、神经节苷岩藻糖，半 乳糖、甘露 (聚)糖衍生物、右旋糖苷、支链淀糖、 出芽短梗孢糖 (CHP ）等
? 亚纳米乳在热力学上仍是不稳定的，在制备过 程及贮存中乳滴都有增大的趋势。
? 亚纳米乳稳定性考察项目 :是否分层、乳滴粒 径分布，也可对电导、粘度、 ζ电位、pH 值及 化学组成（药物含量及有关物质）进行测定。
1. 稳定性影响因素试验 2. 加速试验 3. 常温留样考察
脂质体与泡囊
1. 定 义
2.合成乳化剂
? 合成乳化剂一般都有轻微的溶血作用，其溶血 作用的顺序为：聚氧乙烯脂肪醇醚类＞聚氧乙 烯脂肪酸酯类＞聚山梨酯类；聚山梨酯类中， 溶血作用的顺序为：聚山梨酯 20 ＞聚山梨酯 60＞聚山梨酯 40＞聚山梨酯 80.
3. 助乳化剂
? 助乳化剂可 调节乳化剂的 HLB值，并形成更小 的乳滴。助乳化剂应为药用短链醇或适宜 HLB 值的非离子表面活性剂。常用的有正丁醇、乙 二醇、乙醇、丙二醇、甘油、聚甘油酯等。
? 脂质体(liposomes) 是由磷脂和胆固醇组成， 具有类似生物膜双分子层结构的封闭囊状体。
单室脂质体
(单层磷脂双分子层膜)
大单室脂质体
LUVs (0.1-1μm)
小单室脂质体
SUVs (0.02-0.08μm)
多室脂质体(1-5 μm)
MLVs( 多层磷脂双分子层膜)
SUV 20-100nm
3. 脂质体的制备
脂质体的制备方法有多种，根据药物的性质 或研究需要来进行选择。
(1)薄膜分散法 这是一种经典的制备方法，它 可形成多室脂质体，经超声处理后得到小单室 脂质体。此法优点是操作简便，脂质体结构典 型，但包封率较低。
将磷脂、胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶于 氯仿中，然后将氯仿溶液在烧瓶中旋转蒸发， 使其在内壁上形成一薄膜；将水溶性药物溶于 磷酸盐缓冲溶液中，加入烧瓶中不断搅拌，即 得脂质体。
? 亚 纳 米 乳 (subnanoemulsion) 粒 径 在 100~500nm 之间，外观不透明，呈浑浊或乳 状，稳定性也不如纳米乳，虽可加热灭菌， 但加热时间太长或数次加热，也会分层。
二、常用载体材料
聚合物胶束的载体材料：
（通常用合成的线形两亲性嵌段共聚物）
亲水段材料： PEG,PEO,PVP 疏水段材料：聚丙烯，聚苯乙烯，聚氨 基酸，聚乳酸，精胺或短链磷脂等
2.制备纳米乳的步骤
（1）确定处方： 处方中的必需成分通常是 油、水、 乳化剂 和助乳化剂 。当油、乳化剂和助乳化剂确定 了之后，可通过 三相图找出纳米乳区域，从而确定 它们的用量。
（2）配制纳米乳： 由相图确定处方后，将各成分按 比例混合即可制得纳米乳，且与各成分加入的次序 无关。通常制备 W/O型纳米乳比 O/W型纳米乳容易。
4) 在体内使药物具有定向分布的靶向性特征， 包括：被动靶向、物理和化学靶向、转移靶 向、主动靶向；
2. 脂质体的作用特点
5）药物包裹在脂质体中是非共价键结合，因此 易与载体分离，进入体内可以在指定部位完 全释放出来；
6）药物被包封于脂质体中，能够降低药物毒性， 增强药理作用。
7）脂质体制剂能够降低药物的消除速率，延长 药物作用时间，起到缓释、增加药物的体内 外稳定性的作用。
? 如果药物或其他成分易于氧化，则制备的各步 都在氮气下进行，如有成分对热不稳定，则采 用无菌操作。
影响亚纳米乳形成的因素：
1.稳定剂的影响：
? 稳定剂可增大膜的强度、使药物的溶解度增大、 使亚纳米乳的 ξ电位绝对值升高，有利于亚纳 米乳的稳定。
2.混合乳化剂的影响
? 单独使用一种乳化剂时，不能得到稳定的乳剂， 使用两种或两种以上的乳化剂可在油 -水界面形 成复合凝聚膜，进而提高乳剂的稳定性。
（二）常用的附加剂
? 附加剂用于调节生理所需的pH值和张力。
pH调节剂：盐酸、氢氧化钠 等张调节剂：甘油 稳定剂：油酸及其钠盐、胆酸、脱氧胆酸及其钠盐 抗氧剂及还原剂：维生素 E或抗坏血酸
六、质量评价
（一）乳滴粒径及其分布
1.电镜法：①透射电镜（TEM ）法 ②扫 描电镜（SEM ）法 ③ TEM 冷冻碎裂 法