摇瓶培养
摇瓶和发酵罐培养
1
体积氧传递系数（ 体积氧传递系数（KLa）和溶解氧的差 异
2
CO2浓度的差异 菌丝受机械损伤的差异
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1
体积氧传递系数（ 体积氧传递系数（KLa）和溶解氧的差异
通气状况：
摇瓶培养：瓶塞对氧传递的阻力、表面通气状况 与周围环境有关 发酵罐培养：鼓泡通气
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四、消除差异的方法
消除摇瓶与发酵 罐培养这两种规 模结果的差异， 模结果的差异， 使摇瓶发酵结果 能反映罐上的结 果，是一个很重 要的问题。 要的问题。
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从下面四个方面模拟罐上发酵的条件
1 增加摇瓶机的 转速，提高摇 转速， 瓶的Kd值和 瓶的 值和 溶氧水平
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搅拌增加菌体受损伤的程度
菌体内核酸类物质的漏出率与搅拌转速、 菌体内核酸类物质的漏出率与搅拌转速、搅拌持续 时间、搅拌叶的叶尖线速度、 时间、搅拌叶的叶尖线速度、培养液单位体积吸收的功 率以及体积氧传递系数(KLa)等成正比关系，也就是说， 等成正比关系， 率以及体积氧传递系数 等成正比关系 也就是说， 这些发酵参数的数量增加，其漏出率也增加， 这些发酵参数的数量增加，其漏出率也增加，菌体受损 伤的程度也增加。 伤的程度也增加。 虽然摇瓶发酵也有低分子核酸类物质漏出， 虽然摇瓶发酵也有低分子核酸类物质漏出，其漏出 量远远低于罐的。 量远远低于罐的。
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2 减少培养基的 装量，要注意 装量， 水分蒸发所引 起的误差
3 直接向摇瓶中 通入无菌空气 或氧气等措施
4 可在摇瓶中加 入玻璃珠来模 拟发酵罐的机 械搅拌来研究 因搅拌引起的 差异
摇瓶机在菌种培养中的使用方法
根据所培养的细菌选择适宜的培养基大部分细菌在lb培养基中在超净工作台先用1毫升左右的适宜的培养基溶解冷冻菌然后转移到10毫升中试管放入4毫升液体培养基中一般在37摄氏度摇床静止或低转速培养12小时或者过夜温度取决于所培养的细菌适宜生长的温度
摇瓶机在菌种培养中的使用方法及注意事项
在进行摇瓶机试验前，首先检查摇瓶机各部件，检查气源、电源、管 路、压力表、密封等是否正常，特别强调的是摇瓶机做为精度，高科 技的仪器，摇瓶机每个过程都由精准的程序控制，所以要求实验人员 在操作前必须对摇瓶机的各个按钮，流程熟练掌握，详细阅读摇瓶机 说明书，及实验室仪器安全操作规程。掌握了摇瓶机的基本操作要领 后，逐步按以下步骤进行摇瓶机细菌培养试验： 第一步：摇瓶机复苏：根据所培养的细菌选择适宜的培养基，大 部分细菌在 LB 培养基中在超净工作台先用 1 毫升左右的适宜的培养 基溶解冷冻菌， 然后转移到 10 毫升中试管 （放入 4 毫升液体培养基） 中，一般在 37 摄氏度摇床静止或低转速培养 12 小时或者过夜（温度 取决于所培养的细菌适宜生长的温度）。 第二步：摇瓶机平板划线培养：在平板（琼脂+液体培养基）划 线，放 37 摄氏度培养箱培养箱中倒置培养 6 小时~12 小时，在平板 上观察是否形成了单菌落. 第三步：摇瓶机挑单菌落：在超净台中挑选典型单菌落，置入 10 毫升中试管（内有 5 毫升液体培养基）中，在 37 摄氏度摇床，转 速 200 转培养 12 小时或者过夜，肉眼能看到试管浑浊。 第四步：摇瓶机按照 1：20 的比例将中试管中的菌液移到 250 毫 升三角瓶（放入 100 毫升液体培养基），，培养条件同前。注意：所 有的接种操作均需要在层流罩中，培养基应无菌。
耐思细胞培养摇瓶安全操作及保养规程
耐思细胞培养摇瓶安全操作及保养规程细胞培养摇瓶是细胞培养中不可或缺的装置，其不仅提供供氧和营养物质的传输，还可促进细胞增殖和分化。
在细胞培养实验中，正确的操作和维护细胞培养摇瓶是保证实验结果准确性和细胞健康的重要环节。
本文将介绍耐思细胞培养摇瓶的安全操作及保养规程，以便为从事细胞培养实验的科研人员提供参考。
1. 药物及试剂储存•药物和试剂应当分类存储，密封、干燥、避光、防潮、防腐，避免与致癌、致畸、致敏等物质混存。
•储存在细菌、病毒等微生物生长的试剂应立即彻底湿消杀后存放，严格控制入库和容器消毒。
•管理人员应当每日检查药品试剂保存状态并登记记录，过期物品应及时清理销毁。
2. 操作规程2.1 准备工作•检查细胞培养摇瓶配件是否齐全，清洗并消毒。
•准备所需培养基、培养原料和工具，并进行严格消毒。
•操作前应先洗手，并戴好实验手套，避免交叉污染。
2.2 细胞接种•在细胞培养摇瓶中加入适量的培养基和相关培养原料，按照实验需要将细胞接种到细胞培养摇瓶中。
•在接种细胞前，应先观察细胞的质量和健康状况，并确保细胞数目满足实验要求。
•细胞接种后应密封摇瓶盖子，并在细胞培养箱中适当位置上固定细胞培养摇瓶。
2.3 摇瓶操作•摇瓶操作应该在细胞生长平稳的情况下进行，操作前应先关闭细胞培养箱门，开启摇瓶机，并设置正确摇动速度和时间。
•摇瓶时应注意细胞的健康状态，避免破坏细胞结构和摇坏摇瓶。
•摇瓶结束后应立即关闭摇瓶机，检查细胞状态。
2.4 细胞收获•细胞生长到适宜的程度后，应及时收获细胞，先用PBS等缓冲液清洗细胞，然后用相关消化液和补充剂进行细胞消化和酶解，将细胞转摇瓶或称为传代细胞，再用离心机进行离心去除细胞残骸，最后用PBS等缓冲液再次清洗细胞，将细胞分装到相应的实验器具中。
3. 细胞培养摇瓶保养3.1 消毒清洗•在每次使用前，应用70%乙醇消毒细胞培养摇瓶和相关配件。
•使用后，应用酸性过氧化氢或其他适当消毒剂进行彻底消毒，并清洗干净。
如何利用高效摇瓶进行食用菌液体菌种的培养？
如何利用高效摇瓶进行食用菌液体菌种的
培养？
液体菌种的培养方式主要有振荡培养和发酵罐培养两类。
振荡培养又称为高效摇瓶培养，是利用机械振荡，使培养液振动而达到通气的目的，是将斜面试管菌种接种到培养液中，置摇床上振荡培养。
高效摇瓶培养的工艺流程为：制备培养基一分装一灭菌一冷却一接种一摇床培养一一级液体菌种一二级液体菌种。
经高效摇瓶培养的菌丝体一般呈球状、絮状等多种形态，培养液呈黏稠状或清液状，有或无清香味及其他异味。
菌液中因有菌体发酵产生的次生代谢产物，可呈不同的颜色。
采用高效摇瓶培养液体菌种时，可采用往复式摇床或者旋转式摇床。
往复式摇床的往复频率一般在80～140r/min，冲程一般为5～14cm，在频率过快、冲程过大或瓶内液体过多时，振荡使液体容易溅到瓶口纱布上而造成污染。
旋转式摇床的偏心距一般为3～6cm，旋转次数为60～300r/min，它的结构比较复杂，加工安装要求比往复式摇床高，造价也较贵，但是氧的传递好、功率消耗低，培养基一般不会溅到棉塞上。
因此，要根据实际需要选择合适的摇床及振荡速度。
以上是利用高效摇瓶进行食用菌液体菌种培养的要点，高效摇瓶除了用于食用菌液体菌种的培养外，还可用于全时悬浮细胞培养，培养基制备或储存。
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摇瓶培养
一) 摇瓶培养摇瓶培养技术问世于本世纪30年代，由于其简便、实用，很快便被发展成为微生物培养中极重要的技术而普及，并广泛用于工业微生物菌种筛选、实验室大规模发酵试验、种子培养等。
摇瓶培养设备主要有旋转式摇床和往复式摇床两种类型，也有旋转式和往复式的混合类型，其中以旋转式最为常用。
用旋转式摇床进行微生物振荡培养时，固定在摇床上的三角烧瓶随摇床以200～250r/min的速度运动，由此带动培养物围绕着三角烧瓶的内壁平稳地运动。
在用往复式摇床进行振荡培养时，培养物被前后抛掷，引起较为剧烈的搅拌和撞击。
振荡培养中所使用的发酵容器通常为三角烧瓶，也有使用特殊类型的烧瓶或试管。
在振荡培养过程中所采用的烧瓶类型和振荡类型主要取决于所要研究的发酵类型及性质。
振荡培养通常用于有氧过程中，主要是两种类型：(1) 供氧相对较大，以产生大量的细胞，常见于丝状微生物(如食用菌、放线菌)中; (2) 需供氧但所需供氧量较小，常见于细菌。
要获得高氧供应，可在较大的烧瓶(250～500ml三角烧瓶) 中盛装相对较小容积的培养基，由此可获得更高的氧传递速率，便于细胞的迅速生长，要获得较低的氧供，则采用较慢的振荡速度和相对大的培养体积。
经连续振荡培养一段时间后，细菌等单细胞微生物可以呈均一的细胞悬液; 而丝状真菌和放线菌，可得到纤维糊状培养物——纸浆状生长。
如果振荡不足，则会形成许多球状菌团——颗粒状生长。
振荡培养技术通常用于微生物菌种的筛选或生产工艺的改良和工艺参数的优化。
因此，通常使用复合培养基。
用于振荡培养的复合培养基通常由碳水化合物及多种蛋白质性物质(玉米上清、大豆粉、豌豆粉等) 及植物油组成。
这些培养基组分以不同的速率被代谢掉，从而为微生物提供一较长的、最适生长和代谢的条件。
在复合培养基中通常还加入一些固体物质如石膏(CaCO3)，以协助培养基pH的控制并有利于絮凝物的形成，此在啤酒工艺中特别重要。
此外，经过精心设计的化学限定性培养基(避免pH 波动及防止重要培养基组分的突然耗尽)也可用于振荡培养，这类培养基的组成通常是蔗糖加酒石酸盐、铵盐、磷酸盐、金属盐类以及生长因子。
《摇瓶和发酵罐培养》PPT课件
三、摇瓶放大培养的结果
① 溶氧敏感，罐中生产能力可能高于摇瓶 ② 机械损伤敏感，罐中的生产能力低于摇瓶 ③ 溶氧和机械损伤都敏感，其结果随发酵罐 中的特性而定
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四、消除差异的方法
• 消除摇瓶与发酵 罐培养这两种规 模结果的差异， 使摇瓶发酵结果 能反映罐上的结 果，是一个很重 要的问题。
摇瓶和发酵罐培养的差异
第七组
在发酵工业研究中，广泛采用摇瓶试验进行发酵条件的初步探索，为罐发酵 提供参考数据。但摇瓶或小发酵罐的试验条件转移到大发酵罐时，它们所得 产物的产量往往不完全一致。 所以，如何尽量缩小它们之间结果的差异，保证摇瓶培养为罐发酵提供可靠 的试验数据，就显得十分重要。
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从下面四个方面模拟罐上发酵的条件
1
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4
增加摇瓶机的 减少培养基的
转速，提高摇 装量，要注意
瓶的Kd值和溶 水分蒸发所引
氧水平
起的误差
直接向摇瓶中 通入无菌空气 或氧气等措施
可在摇瓶中加 入玻璃珠来模 拟发酵罐的机 械搅拌来研究 因搅拌引起的 差异
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① 在摇瓶中附加挡板也可模拟罐发酵时菌丝体的损伤。 ② 为减少罐发酵对菌丝的损伤，可采用剪切力较小的螺旋浆式搅拌或园盘箭叶
蜗轮搅拌匡，以及适当减慢搅拌速度、间断搅拌或采用气升式发酵罐。 ③ 在对kd值或溶解氧影响不大的情况下，适当增加发酵液粘度。
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摇瓶试验结果提供了生产菌株的基本信息和发酵工艺数据，经过中试放大后 用于工厂发酵罐生产。 摇瓶和发酵罐培养之间出现差异的原因本质上是由这两种试验规模变化所引 起的。
细胞培养优化瓶摇瓶安全操作及保养规程
细胞培养优化瓶摇瓶安全操作及保养规程1. 引言细胞培养是生物学和医学研究中常用的技术手段之一。
在细胞培养过程中，瓶摇瓶作为常规设备被广泛应用于细胞培养、溶液混合等实验操作。
为了确保实验的准确性和安全性，本文档旨在介绍细胞培养优化瓶摇瓶的安全操作及保养规程。
2. 瓶摇瓶的基本组成和工作原理瓶摇瓶主要由电机、摇床、瓶架、控制面板等组成。
其工作原理是通过电机驱动摇床上下运动，从而实现对瓶内溶液的摇动和混合。
3. 安全操作规程为了确保使用瓶摇瓶的安全性，以下是一些安全操作规程：3.1 使用前的准备工作•确保瓶摇瓶的电源和电线处于正常工作状态，不带有破损和裸露的线路。
•清洁和消毒瓶摇瓶的摇床和瓶架，以防止细菌污染。
•检查瓶摇瓶的控制面板和按钮是否正常工作。
3.2 操作时的注意事项•使用前先将需要摇动的溶液倒入培养瓶中，然后再将培养瓶放入瓶摇瓶的瓶架中，确保瓶盖紧闭。
•避免在摇动过程中打开瓶摇瓶的盖子，以免溶液溅出或引起其他安全问题。
•操作完毕后，先将瓶摇瓶停止运转，再将瓶架中的培养瓶取出。
3.3 废液处理•使用完毕的培养液，应按照相关规定进行废液处理，避免对环境造成污染。
4. 瓶摇瓶的保养规程为了确保瓶摇瓶的正常运行和使用寿命，以下是一些建议的保养规程：4.1 定期清洁•每次使用完毕后，在使用专用溶液或酒精擦拭瓶摇瓶的摇床和瓶架，以保持清洁。
•定期清洁瓶摇瓶的外部表面，避免灰尘和污渍积累。
4.2 定期检查•定期检查瓶摇瓶的电源线和电机连接线是否正常。
•检查瓶摇瓶的控制面板和按钮是否损坏或松动。
•检查瓶摇瓶的瓶架和固定装置是否牢固。
4.3 维护和保养•定期加入润滑油或润滑脂，以保持瓶摇瓶的正常工作。
•定期检查电机的工作状态，如异常声音或震动应及时保养或更换。
5. 总结细胞培养优化瓶摇瓶的安全操作及保养对于确保实验结果的准确性与保证实验人员的安全至关重要。
本文档介绍了瓶摇瓶的基本组成和工作原理，以及使用时的安全操作规程和保养规程。
厌氧培养方法范文
厌氧培养方法范文厌氧培养是一种在缺氧条件下进行的微生物培养方法，对于一些需氧菌或者厌氧菌的研究非常重要。
本文将详细介绍厌氧培养的方法和步骤，并探讨其应用和优缺点。
厌氧培养的方法主要有以下几种：摇瓶培养、拊盘培养、封口瓶培养和深层培养。
摇瓶培养是最常用的厌氧培养方法之一、首先，选择适当的培养基，如液态或半固态培养基，并添加适宜的培养物。
然后，将培养基倒入摇瓶中，尽量避免气泡的产生。
接下来，用柱塞或酸奶盖密封摇瓶，并利用橡皮筋将塞子固定在摇床上。
最后，调节摇床的转速和温度，进行培养。
拊盘培养是一种用于培养需氧菌和厌氧菌的简单而有效的方法。
首先，将适当的培养基倒入培养皿中，然后用柱塞或酸奶盖密封。
接下来，用一个4角钝的扁担将培养皿颠倒置放入密闭的培养箱中。
最后，将培养箱密封并将其置于恒温培养箱中。
封口瓶培养是一种用于培养厌氧菌的方法。
首先，选择适当的培养基并添加适宜的培养物。
然后，将培养基倒入平底培养瓶中，并用瓶塞或金属夹密封瓶口。
接下来，将密封的培养瓶置于温度适宜的培养箱中进行培养。
深层培养是一种用于培养厌氧菌的方法，允许微生物在无氧条件下生长，并通过其代谢产物显示菌落的出现。
首先，准备含有培养物的试管。
然后，结合震荡和倾倒的方法，将培养液均匀地倒入试管中，使空气尽可能少地进入。
最后，使用胶体溶液或者石蜡密封试管，以便在无氧条件下进行培养。
厌氧培养方法的应用非常广泛，可以用于分离和鉴定厌氧菌，研究厌氧代谢等。
在医学领域，厌氧培养可以用于检测和诊断各种厌氧菌感染，如产气荚膜梭菌感染和肠道厌氧菌感染等。
在环境领域，厌氧培养可以用于研究厌氧微生物的多样性和功能。
厌氧培养方法也有一些局限性和不足之处。
首先，厌氧培养需要特殊设备和技术，对实验环境的要求比较高。
其次，厌氧条件往往会导致培养时间延长，且很多厌氧菌并不容易培养。
此外，厌氧培养也容易受到外界条件的干扰，如温度和氧气浓度等。
总的来说，厌氧培养是一种重要的微生物培养方法，在微生物学研究和应用中起着重要的作用。
糖化酶综合实验
实验四糖化酶综合实验（一）糖化酶摇瓶实验一、实验目的掌握糖化酶摇瓶实验的基本操作。
二、实验原理摇瓶培养是实验室常用的通风培养方法，通过将装有液体培养物的三角瓶放在摇床上振荡培养，以满足生物生长、繁殖及产生许多代谢产物对氧的需求。
三、实验材料1.菌种：黑曲霉（糖化酶生产常用菌种）2.培养基：玉米粉、豆饼粉、麸皮、水3.器材：500ml三角瓶、玻片四、方法步骤1. 配制培养基玉米粉 6%，豆饼粉 2%，麸皮 1%。
补足水分，原料浸入水中。
8层纱布+牛皮纸包扎，0.1MPa下灭菌30min。
500ml三角瓶 1瓶/小组，装液量分别为100ml 2个小组、200ml 2个小组2. 接种成熟斜面，在无菌条件下，注入10ml无菌水，振荡成孢子悬浮液。
待发酵培养基灭菌后冷却到30～32℃时，分别将孢子悬浮液接入三角瓶中，接种量为2ml，做好标记3. 培养将三角瓶固定在摇床上，培养温度为31℃，转速为200rpm，培养时间为96h4. 显微镜观察菌丝形状，测量发酵液pH，测定糖化酶活力五、实验结果1.比较两种不同装液量条件下的菌体形状特征、酶活力，将结果填入分析：由于摇瓶培养的时间未达到96小时。
所以，培养瓶内壁只出现少量黑色菌落。
但相对于100ml培养基中的菌体要多一些。
说明培养基量的多少会影响菌体的生长，培养基量多则营养多更有利于菌体快速旺盛生长，增殖。
因此，观察到的菌丝相对于100ml培养基中的菌丝多而粗。
培养时间一定要遵循菌体的生长曲线时间，不能过早或过晚结束培养。
应按照各种菌体与产物的模式，适时停止培养收集产物酶。
本实验摇瓶培养才72小时，未能使菌体充分生长，即菌数少，产酶量低，或培养时间还未达到菌体大量产酶的时段，这将影响后续酶的分离提取及活力测定。
培养基应适量，在不浪费原料的同时有能使菌体快速生长，并且控制培养基的量，将减轻酶分里提取的工作量。
（二）糖化酶活力测定一、实验目的掌握糖化酶活力测定的原理与方法。
摇瓶和发酵罐培养
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摇瓶——常压状态 发酵罐——正压状态
CO2在水中的溶解度随外界压力的增大而增加。 所以罐中培养液的CO2浓度明显大于摇瓶。
Company Logo CO2在水中的溶解度随外界压力的增大而增加。 2 CO2浓度的差异 在锥形瓶中装入一定量 的培养基配上瓶塞，经灭菌后接种，在摇瓶上进行恒温振荡培养。
Company Logo 在锥形瓶中装入一定量 的培养基配上瓶塞，经灭菌后接种，在摇瓶上进行恒温振荡培养。 ③ 溶氧和机械损伤都敏感，其结果随发酵罐 中的特性而定 虽然摇瓶发酵也有低分子核酸类物质漏出，其漏出量远远低于罐的。 摇瓶和发酵罐培养之间出现差异的原因本质上是由这两种试验规模变化所引起的。
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Company Logo 摇瓶培养：瓶塞对氧传递的阻力、表面通气状况与周围环境有关
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发酵罐的Kd值
发 酵 罐 的 溶 解 氧 都 大 于 摇 瓶
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2 CO2浓度的差异
CO2是微生物的代谢产物，同时它往往也是 合成所需的一种基质，溶解在发酵液中的CO2对 微生物发酵有抑制或刺激作用。
直接向摇瓶中通入无菌空气或氧气等措施 直接向摇瓶中通入无菌空气或氧气等措施 1 体积氧传递系数（KLa）和溶解氧的差异
2 CO2浓度的差异 ② 机械损伤敏感，罐中的生产能力低于摇瓶
在发酵工业研究中，广泛采用摇瓶试验进行发酵条件的初步探索，为罐发酵提供参考数据。
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液体菌种摇瓶振荡培养技术食用菌,栽培技术
液体菌种摇瓶振荡培养技术食用菌,栽培技术培养液配制好后，装入500mL容量的三角烧瓶中，每瓶装量为100mL，并加工0～15粒小玻璃珠，加棉塞后再包扎牛皮纸封口，在1.5kg/cm2压力下灭菌30分钟，取出冷却到30℃以下时，接入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养48小时，再置往复式摇床上振荡培养，振荡频率为80～100次/分，振幅6cm～10cm。
如果用旋转式摇床，振荡频率为200～220转／分。
摇床室温控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是在7天左右。
培养结束的标准是：培养液清澈透明，液中悬浮着大量小菌丝球，并伴有******菇类特有的香味。
一、液体菌种的检验方法对液体菌种进行检验可采用感官检查和取样测验相结合的方法。
1. 感官检查可采用“看、旋、嗅”的步骤进行检查。
看：将样品静置桌上观察。
一看菌液颜色和透明度，正常发酵醪液呈黄色或黄褐色，清澈透明，菌丝颜色因菌种而异，老化后颜色变深；染杂菌的醪液则混浊不透明。
二看菌丝形态和大小，正常的菌丝大小一致，呈球状、片状、絮状或棒状，菌丝粗壮，线条分明；而染杂菌后，菌丝纤细，轮廓不清。
三看上清液与沉淀的比例，菌丝体占比例越大越好，较好的液体菌种，在瓶中所占比例可达80%左右。
四看pH值指标是否变色，在培养液中加入甲基红或复合指标剂，经3～5天颜色改变，说明培养液pH值到达4.0左右，为发酵点；如果在24小时内即变色，说明因杂菌快速生长而使培养液酸度剧变。
五看有无酵母线，如果在培养液与空气交界处的瓶壁上有灰色条状附着物，说明为酵母菌污染所致，此称为酵母线。
旋：手提样品瓶轻轻旋转一下，观其菌丝体的特点。
醪液的粘稠度高，说明菌种性能好；稀薄者表明菌球少，不宜使用。
菌丝的悬浮力好，放置5分钟不沉淀，表明菌种生长力强；反之，如果菌丝极易沉淀，说明菌丝已老化或死亡。
再次观其菌丝状态，大小不一，毛刺明显，表明是供氧不足；如果菌球缩小且光滑，或菌丝纤细并有自溶现象，说明污染了杂菌。
培养系列：细胞培养耗材 三角摇瓶
培养系列：细胞培养耗材三角摇瓶培养系列：细胞培养耗材三角摇瓶产品简介细胞培养耗材三角摇瓶适用于对氧气要求较高的细胞系，也可用在悬浮液中培养细菌、真菌和动植物细胞，或用于培养基的配制、混合及储存，是一款经济实惠的细胞培养工具。
细胞摇瓶主要用于悬浮细胞的培养，也用于各种培养基的制备和储存。
在材质上，这种细胞培养耗材有PETG和PC两种材质。
PETG是一种透明、非结晶型共聚酯，全称为聚对苯二甲酸乙二醇酯-1,4-环己烷二甲醇酯。
它具有突出的韧性和高抗冲击强度，其抗冲击强度是改性聚丙烯酸酯类的3~10倍，并具有很宽的加工范围，高的机械强度和优异的柔性，比起PVC透明度高，光泽好，容易印刷并具有环保优势。
高透明度加上各种优良性能，是细胞摇瓶的良好生产原料。
PC，即聚碳酸酯，又称PC塑料;是分子链中含有碳酸酯基的高分子聚合物，根据酯基的结构可分为脂肪族、芳香族、脂肪族-芳香族等多种类型。
其中由于脂肪族和脂肪族-芳香族聚碳酸酯的机械性能较低，从而限制了其在工程塑料方面的应用。
它具高强度及弹性系数、高冲击强度、耐疲劳性佳、尺寸稳定性良好、蠕变也小(高温条件下也极少有变化)、高度透明性及自由染色性。
使用温度范围广，增强后的UL温度指数达120~140℃(户外长期老化性也很好)。
产品特点►产品材质：符合USP VI级PETG材料►按照cGMP标准生产完成，无人员直接接触，产品一致性好►瓶盖釆用高强度HDPE材料，配合PTFE疏水透气膜设计,与液体接触后不影响透气膜的密封性和透气效果►刻度清晰、准确，便于观察培养基容量►产品规格：125ml、250ml、500ml、l000ml►独立无菌包装，无DNA酶、无RNA酶、无热原，使用方便细胞培养耗材三角摇瓶本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。
公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。
大肠杆菌的摇瓶扩大培养实验报告
大肠杆菌的摇瓶扩大培养实验报告
大肠杆菌是一种常见的细菌,在许多实验室和医院都有应用。
摇瓶扩大培养是一种常见的培养方法,可以在较短时间内扩大细菌数量。
以下是一份大肠杆菌的摇瓶扩大培养实验报告的基本框架：
实验目的：
通过摇瓶扩大培养方法快速扩大大肠杆菌数量,为后续实验提供足够的细菌数量。
实验方法：
1. 准备摇瓶培养基及大肠杆菌培养液。
2. 在无菌条件下,将大肠杆菌培养液转移到摇瓶中,使细菌数量初步增加。
3. 将摇瓶放入恒温摇床中,固定摇动速度为200rpm,温度设定为37℃,并保持连续培养24小时。
4. 培养结束后,取出摇瓶,用一次性塑料吸管或移液器移取所需细菌数量,并进行后续实验。
实验结果：
经过24小时的摇瓶扩大培养后,大肠杆菌数量得到了有效增加,并呈现出均匀的分布状态。
在摇瓶培养基中,大肠杆菌呈现出灰白色的圆形或不规则菌落状,无明显的异味或变色现象。
移取细菌后,可进行进一步的实验操作。
结论：
通过摇瓶扩大培养方法,可以快速扩大大肠杆菌数量,为后续实验提供充足的细菌来源。
要注意无菌操作,保证实验结果的准确性和可靠性。
摇瓶培养流程
摇瓶培养流程
摇瓶培养是一种简单实用的细菌培养方式，它在探究比现代实验室更大范围内的细菌培养方法中非常重要，尤其是在生活中很容易实施。
摇瓶培养的步骤包括种子制备、细菌孵化料的制备和清洗、培养条件的调整、在振荡的瓶子中的观测以及菌落分析。
一般而言，在种子制备阶段，我们需要从植物或动物的细胞内分离出我们想要培养的细菌。
接着，在细菌孵化料的制备阶段，我们需要制备细菌培养基，并将其放入摇瓶中，然后将其加热或凝固消毒，最后洗净，以防止其中细菌夭折。
在培养条件调整阶段，我们需要调节温度、湿度和放射线浓度等，以便获得最佳菌落生长状态，并添加因子来加快植物的生长速度。
在振荡的摇瓶中，我们可以对培养物进行24小时不间断的观察，有助于我们更好地把握细菌繁殖情况。
最后，通过菌落分析与实验，我们可以了解菌落数量、形态和构成。
通过摇瓶培养，我们既简便又节约成本，妥善进行，摇瓶培养也可以提供迅速准确的细菌诊断结果，从而增加更多的实验室研究。
摇瓶培养迄今为止仍然广泛应用于临床和分子生物学研究领域，是实验室的不可或缺的细菌培养工具。
摇瓶培养的步骤
摇瓶培养的步骤咱就说摇瓶培养啊，这可是个挺有意思的事儿呢！你得先准备好你的摇瓶，这就好比是给微生物准备的一个小家。
把摇瓶洗得干干净净的，可不能有啥脏东西藏在里面，要不然微生物住得不舒服，那可不行。
然后呢，就是要配置好适合微生物生长的培养液啦。
这就好像是给它们准备的美食大餐，得营养丰富，它们才能吃得开心，长得壮壮的。
接着，把微生物小心翼翼地接种到摇瓶里。
这一步可得轻点儿，别把它们给弄伤了。
就好像是把小宝贝们轻轻地放到它们的小窝里。
接下来，就是把摇瓶放到摇床上啦。
这摇床就像是微生物的游乐场，它们可以在上面尽情地玩耍，晃来晃去的。
在培养的过程中，你可得时刻关注着它们呀。
就像照顾小朋友一样，看看它们有没有好好长大，有没有啥不舒服的地方。
温度合适不？营养够不够？这可都很重要呢。
有时候你可能会想，哎呀，这么小的微生物，我能照顾好它们吗？别担心，只要你用心，肯定没问题的。
就像你养一盆花，刚开始也会担心养不活，但只要你精心照料，它肯定会给你开出漂亮的花朵来。
而且你想想，看着这些小小的微生物在你的培养下一点点长大，那得多有成就感呀！就像你看着自己种的小树苗慢慢长成了大树，心里那叫一个美呀。
培养的时间也得把握好哦，太短了它们可能还没长大呢，太长了又怕它们累坏了。
这就跟做饭似的，火候得掌握好，不然做出来的饭可就不好吃啦。
等培养好了，就可以收获你的成果啦。
这就像是农民伯伯收获庄稼一样，满心欢喜。
总之呢，摇瓶培养虽然听起来有点复杂，但只要你一步一步认真去做，肯定能做好的。
别害怕，大胆去尝试，你会发现其中的乐趣的。
相信自己，你一定行的！咱可不能小瞧了自己呀！。
摇瓶液体培养时注意事项
摇瓶液体培养时注意事项摇瓶液体培养是一种常见的微生物培养方法，它广泛应用于微生物学研究、生物工程和制药工业等领域。
在进行摇瓶液体培养时，有一些重要的注意事项需要我们在操作过程中严格遵守，以确保实验的准确性和安全性。
首先，选择合适的培养基是摇瓶液体培养的基础。
不同的微生物需要适合其生长的培养基。
常用的培养基有NA培养基、LB培养基、TSB培养基等，根据实验需要进行选择。
在选择培养基的同时，要注意检查培养基的有效期和储存条件，确保培养基质量良好。
其次，摇瓶的选择也很重要。
摇瓶需具有较好的密封性和耐高温特性，避免在摇动过程中溢出培养液或由于温度变化导致瓶内压力增大而导致破裂。
常用的摇瓶材料有玻璃和耐高温塑料，玻璃摇瓶通常耐高温性能更好，但易碎；耐高温塑料摇瓶则较耐用，但需注意选择耐高温特性好的塑料材料。
此外，还需要注意选择合适的瓶口和塞子，确保密封性。
在进行摇瓶液体培养前，需要对培养瓶进行严格的消毒处理，以防止其他微生物或外部杂质污染培养物。
消毒可以使用高压灭菌器或自动消毒柜进行，也可以进行物理消毒，如用酒精喷洒或燃烧。
消毒后，还要确保培养瓶内的消毒液彻底清除。
在进行液体培养前，需要准备好培养液并进行无菌过滤。
培养液的配制一般根据实验需求确定，可以在给定的培养基中添加适量的营养成分。
过滤培养液的目的是去除其中的微生物和微粒，使用0.22μm的无菌滤器过滤可以达到无菌条件。
过滤后的培养液应立即使用，以防止二次污染。
在将培养液倒入摇瓶前，应确保倒液过程的无菌性。
可以在无菌工作台中进行操作，使用经过高温烘烤消毒并灭菌的倒液棒来倒液。
倒液前，还应将培养液充分混匀，以减少液体表面的氧气供给不足而导致微生物生长不良。
摇瓶液体培养中，温度和摇速的控制十分重要。
温度过高或过低都会影响微生物生长速率和产物合成能力，因此需要根据微生物的生长特性来选择适当的培养温度。
同时，摇瓶的摇动速度也需要根据不同微生物的生长特性进行调整，以保证培养液充分氧化和菌落的均匀分散。
模拟土壤微生物摇瓶培养法
模拟土壤微生物摇瓶培养法摇瓶培养法是一种常用的土壤微生物研究方法，可以用来定量评估土壤中微生物的数量和活性。
本文将介绍模拟土壤微生物摇瓶培养法的基本原理、步骤和注意事项。
一、摇瓶培养法的基本原理摇瓶培养法是通过将土壤样品与培养基混合在摇瓶中，培养一定时间后，通过计数培养瓶中微生物的数量来评估土壤微生物的多寡。
在培养过程中，土壤样品中的微生物会通过代谢活动产生可见的变化，如产酸、产气等，从而可以通过观察这些变化来评估微生物的数量和活性。
二、摇瓶培养法的步骤1.准备土壤样品：从研究对象的土壤中采集一定量的样品，避免采集过程中的污染。
样品应随机采集，保证代表性。
2.制备培养基：根据研究需要选择适当的培养基，如常用的液体培养基包括液体肉汤培养基、液体琼脂培养基等。
制备培养基时应严格按照配方和操作要求进行。
3.摇瓶培养：将土壤样品与培养基混合均匀后注入摇瓶中，摇瓶培养一定时间。
培养时间一般为24小时至72小时，根据研究需要进行调整。
4.观察和计数：培养结束后，观察培养瓶中是否有可见的变化，如产酸或产气等。
根据需要，可以进行进一步的计数工作，如使用显微镜计数或进行菌落计数。
5.数据分析：根据观察和计数结果，可以评估土壤微生物的数量和活性，并进行数据统计和分析。
三、摇瓶培养法的注意事项1.样品处理：在采集和处理样品的过程中，要避免污染和氧化，以免影响微生物的生长和代谢活动。
2.培养基选择：根据研究对象和目的选择适当的培养基，以促进微生物的生长和代谢。
3.培养条件控制：在培养过程中，要控制好温度、pH值、湿度等条件，以提供适宜的生长环境。
4.摇瓶方式：在培养过程中，要根据研究需要选择适当的摇瓶方式，如旋转摇瓶、摇床摇瓶等，以促进培养基和微生物的充分接触。
5.观察和计数方法：观察和计数时要仔细、准确，尽量避免主观误差。
可以使用显微镜计数、菌落计数或其他适当的方法进行。
6.数据处理和分析：在数据处理和分析时，要注意统计学方法的选择和正确应用，以得出准确和可靠的结果。
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一) 摇瓶培养
摇瓶培养技术问世于本世纪30年代，由于其简便、实用，很快便被发展成为微生物培养中极重要的技术而普及，并广泛用于工业微生物菌种筛选、实验室大规模发酵试验、种子培养等。
摇瓶培养设备主要有旋转式摇床和往复式摇床两种类型，也有旋转式和往复式的混合类型，其中以旋转式最为常用。
用旋转式摇床进行微生物振荡培养时，固定在摇床上的三角烧瓶随摇床以200～250r/min的速度运动，由此带动培养物围绕着三角烧瓶的内壁平稳地运动。
在用往复式摇床进行振荡培养时，培养物被前后抛掷，引起较为剧烈的搅拌和撞击。
振荡培养中所使用的发酵容器通常为三角烧瓶，也有使用特殊类型的烧瓶或试管。
在振荡培养过程中所采用的烧瓶类型和振荡类型主要取决于所要研究的发酵类型及性质。
振荡培养通常用于有氧过程中，主要是两种类型：(1) 供氧相对较大，以产生大量的细胞，常见于丝状微生物(如食用菌、放线菌)中; (2) 需供氧但所需供氧量较小，常见于细菌。
要获得高氧供应，可在较大的烧瓶(250～500ml三角烧瓶) 中盛装相对较小容积的培养基，由此可获得更高的氧传递速率，便于细胞的迅速生长，要获得较低的氧供，则采用较慢的振荡速度和相对大的培养体积。
经连续振荡培养一段时间后，细菌等单细胞微生物可以呈均一的细胞悬液; 而丝状真菌和放线菌，可得到纤维糊状培养物——纸浆状生长。
如果振荡不足，则会形成许多球状菌团——颗粒状生长。
振荡培养技术通常用于微生物菌种的筛选或生产工艺的改良和工艺参数的优化。
因此，通常使用复合培养基。
用于振荡培养的复合培养基通常由碳水化合物及多种蛋白质性物质(玉米上清、大豆粉、豌豆粉等) 及植物油组成。
这些培养基组分以不同的速率被代谢掉，从而为微生物提供一较长的、最适生长和代谢的条件。
在复合培养基中通常还加入一些固体物质如石膏(CaCO3)，以协助培养基pH的控制并有利于絮凝物的形成，此在啤酒工艺中特别重要。
此外，经过精心设计的化学限定性培养基(避免pH 波动及防止重要培养基组分的突然耗尽)也可用于振荡培养，这类培养基的组成通常是蔗糖加酒石酸盐、铵盐、磷酸盐、金属盐类以及生长因子。
1. 摇瓶培养方法在浸没培养过程中振荡的目的在于改善活细胞的氧气和营养物的供给。
摇瓶培养通常以特定生长条件下的培养物接种，也可用孢子接种。
在绝大多数情况下，摇瓶接种量有一最佳浓度，此在摇瓶开始之前，必须通过预试加以确定。
而在整个摇瓶发酵过程中保持相对无菌是成功地实施这项技术的必要保证。
摇瓶培养的机械装置主要由用于放置和固定烧瓶的平台以及牵引其运转的马达和运转系统组成，摇瓶需安装于有维持恒温和恒湿自动调节能力的隔热室内。
目前也有具备恒温装置的小型台式摇床。
考察摇床的设计和使用性能主要从下列几项入手：(1) 所使用的设备，(2) 平衡要求，(3) 摇床的大小、型号，(4) 培养条件及恒温调控，(5) 试管或小型发酵器的振荡培养性能。
通常，摇床的工作温度为25～37℃。
由于电机和机械传动部分的产热、振荡产热和微生物生长代谢释放的热能，使摇瓶中培养基的实际温度要比实际室温高2℃左右，且在强烈振荡时，此温差更为明显。
因此，在实验过程中设计高温点时必须认真注意到这一问题。
另外，由于夏季气温偏高，温控困难随之增大; 培养放线菌和真菌时温控更为主要，因为大部分放线菌和真菌在30℃下培养时，其代谢已被严重干扰，而30℃的温度在摇瓶中是极易形成的。
因此，在摇床室中必须装配一个可靠的致冷系统。
一般台式摇床都有一通过空气循环或水浴来保持恒温的装置，可使所有的摇瓶内培养基温度处于同一水平。
振荡培养所用的发酵容器也可选用试管。
所选用的试管大小可根据需要来定。
将盛有一定体积的培养基的试管倾斜固定在支架上，倾斜角度一般为15～30°，倾斜方向与振荡方向一致。
试管随摇床平台作旋转式或往复式运动。
用试管作发酵容器的优点在于在较小的空间范围内一次可处理较大的试样数。
但其效率远不如三角烧瓶。
因此，在通常情况下更多的是选择25～50ml小烧瓶。
同样，
在用试管进行振荡培养时，可在试管中盛装相对较少的培养基以旋转式振荡培养来提供丝状微生物良好的气体环境，也可以用相对多的培养基，以往复式振荡培养，使细菌迅速生长。
振荡培养中，三角烧瓶用6～8层医用纱布封口，试管塞一般用普通棉塞，也有使用封口胶或其他的塑料或金属盖。
2. 振荡培养中遇见的实际问题振荡培养是建立深层发酵的开始。
就一特定微生物而言，振荡培养时存在一最佳培养基配方和最佳培养基容量。
一般来说，振荡培养丝状微生物时培养基最佳容量为50～100ml/500ml三角烧瓶，或25～50ml/250ml三角烧瓶，即为所使用的发酵容器容积的10～20%。
在这一范围内，所使用培养基量越小，所得试验结果越好。
通过使用带有挡板的烧瓶、使用气体通透性更好的封口胶代替纱布或棉塞，以及增加摇床振荡速率也可获得相同的效应。
但需特别注意的是提高振荡速率时必须注意烧瓶的放置位置与重力平衡，以减少由于角速度增加引起的磨耗和不平衡甚至翻车。
使用棉塞和纱布时应采用普通棉纱而非脱脂棉纱，以防吸水潮湿而妨碍氧的扩散。
将经接种的烧瓶固定到摇床上培养，在培养过程中应特别注意两个问题：一是上文已提及的温度控制，另一个十分重要的问题就是维持连续振荡。
振荡不连续进行那怕只是数分钟的停顿，对结果的影响都是极显著的; 而且由于数分钟的停顿对微生物细胞生长的影响不明显，使影响从表面上不易被发现。
有报道在用黑曲霉素生产柠檬酸的发酵试验中，提高通气率可以刺激柠檬酸的生产，中断通气时柠檬酸的产生直线下降，甚至不可逆转。
在繁殖期中断通气20min不会使菌株的活力下降，但菌株生产和积累柠檬酸的能力受到不可逆的破坏或减慢。
经24～48h培养，可对烧瓶进行检查，以判断生长的程度和类型。
在好氧生长时，消耗1g葡萄糖通常可增加0.25～0.5g的细胞。
单细胞性细菌经培养后会出现一稠密或轻度稠密的培养物; 而丝状菌株如在含5%的糖的培养基中生长可形成密细胞培养物，4～5天后，细胞密度可达20～30g/L，如果培养物产生毒性物质或大量的副产物以及产生抑制细菌生长的产物，则其生长速度相应降低。
振荡培养过程中，必须定期定时分析培养过程中的各种参数。
通过光密度、培养基中细胞沉积或通过过滤、干燥和称重可定量或半定量地估计细胞生长情况。
迅速而粗略地估计细胞生长的方法是将一些培养物放置于一小的测量瓶中，室温静置一段时间后根据细胞沉积粗略估计微生物细胞生长情况。
此外，培养液的pH、残糖、色质、表观和气味的变化也应随时加以记录; 用显微镜检测菌丝末端状态、分枝情况、絮凝体形成及污染情况，对于掌握培养物的培养状况也是重要的。
细胞或孢子接种浓度对试验的成功极为重要，不同的微生物细胞或孢子以及不同的振荡培养过程的接种浓度差异可以是十分显著的，且各自存在一最适浓度。
此必须在预试验中确定。
最适接种浓度的获得和使用可保证良好的生长和高质量的培养物的获得。
使用不同的接种浓度还可获得不同的生产类型。
例如，当使用2×102～1×103/ml青霉孢子接种浓度时，经25℃培养120h后菌丝呈平滑、致密沉积体;而当接种浓度在5×103～5×104/ml时，相同条件下培养后则呈小、纤丝状、絮凝物，直径在0.4mm左右。
振荡培养中最常出现的另一问题是贫脊生长。
这通常是由于接种浓度太低或种子活力较差。
经验而言，种子的培养时间为1～2天，接种后培养基中的孢子浓度在5×104～1×106/ml。
振荡培养时培养物被污染并不常见，但一旦被污染，会带来许多麻烦。
出现污染时，培养物表面为表观改变，气味异常，菌丝体雾浊不清，产品丢失等。
需及时发现并及时处理。